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支气管哮喘临床蛋白质组学研究进展
哮喘是一种常见慢性炎症性疾病,其发病率有逐年上升的趋势.由于病因复杂,表型多样,多年来单纯从基因方面研究并没有取得哮喘诊治方面的突破.基因是源头,真正发挥功能的是蛋白质.一般来说,机体在出现病理变化之前,体内的蛋白质在成分和量方面都会发生相应改变,因此,以研究疾病相关蛋白的蛋白质组学应运而生.通过蛋白质组学技术揭示哮喘病理状态下异常表达的蛋白质以及疾病不同时期的蛋白变化水平,可以筛选出与哮喘相关的蛋白标志物,特别是可能发现以往从未被与哮喘相关联的新蛋白,从而有助于哮喘的诊断、病情评估、预后的预测,由此进一步开展针对性的生物治疗.本文将主要就哮喘临床蛋白质组学研究进展进行综述.
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水流动力学注射——一种新型的体内基因转移技术
基因治疗是向靶细胞或靶组织中导入外源基因,以纠正或补偿基因的缺陷,关闭或抑制异常表达的基因,从而达到治疗的目的.其中基因转移技术是基因治疗成败的关键.用于基因转移的载体主要有病毒和非病毒两类.病毒载体转导基因进入目的细胞的效率很高,但是往往要求复杂的实验室制备和纯化过程,而且其引起的免疫反应和副作用也是不容忽视的.
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PD-1及其配体在慢性乙肝免疫中的作用
HBV特异性T淋巴细胞功能低下与HBV逃避免疫是造成HBV慢性持续感染的原因,T淋巴细胞功能状态决定了病毒是被清除,或是持续感染.T淋巴细胞异常表达某些免疫分子与慢性乙肝(CHB)的发生、发展过程有关.PD-1为近年发现的CD28家族新成员,因其独特的生物学功能而备受关注,已发现其在慢性乙肝免疫应答过程中发挥重要作用,但其具体免疫机制尚需进一步研究[1].
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胎衣不下奶牛母体胎盘黏着斑激酶异常表达分析及验证
目的 通过对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)奶牛胎盘组织中差异表达的检测及验证,分析FAK在RFM中的作用.方法 选取无其他疾病影响的胎衣自然排出组和RFM组奶牛,提取两组奶牛胎盘组织中的总蛋白和总RNA,利用Western blot及荧光定量PCR法对其FAK蛋白及mRNA水平进行检测.结果 与胎衣自然排出组相比,RFM组奶牛母体胎盘组织中FAK蛋白及mRNA水平明显降低(P<0.05).结论 发生RFM的奶牛母体胎盘中FAK表达下调,提示FAK可能参与该疾病的发生与发展.
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高糖诱导腹膜间皮细胞发生上皮间质转化中microRNA的异常变化
目的:定腹膜间皮细胞在高糖引起上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中microRNA的表达差异.方法:常规培养PMC细胞,利用高糖培养液刺激诱导腹膜间皮细胞发生EMT,倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,实时定量PCR检测EMT标志基因变化,以此确定高糖诱导EMT的发生.利用特异茎环结构的引物合成microRNA的cDNA,实时定量PCR检测重要microRNA的表达变化.结果:高糖培养液培养腹膜间皮细胞48hr后,细胞形态呈梭形改变,同时EMT标记基因E-cadherin表达明显减低(P<0.01),Vimentin表达显著升高(P<0.01),说明高糖诱导腹膜间皮细胞发生了EMT.利用microRNA特异的茎环结构引物,实时定量PCR检测结果发现高糖刺激后miR-193a的表达明显上调(P<0.01);miR-15a和let-7e的表达明显降低(P<0.01); miR-16和miR-21的表达无明显变化(P>0.05),同时检测发现高糖刺激后miR-193a的表达水平随刺激时间表达升高.结论:异常变化的microRNA可能对高糖诱导的腹膜间皮细胞EMT具有重要调控作用.
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富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)在肿瘤中的研究进展
富亮氨酸α2糖蛋白1(Leucine-rich-alpha-2-glycoprotein1,LRGl)是富亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)家族蛋白成员之一.LRG1在人类多种肿瘤中表达异常,可以作为部分肿瘤早期诊断的潜在生物标记,而且这种异常表达可能提示患者预后不良.LRGl在肿瘤的发生、侵袭转移、上皮间质转化和血管生成中发挥重要作用.这些环节中,协同参与调控的辅助因子众多且有差异,因而经历的信号途径有所不同.本文综合目前的研究进展,旨在阐述LRG1与肿瘤的关系以及其调控肿瘤发生发展的分子机制.LRG1有望成为一种新的肿瘤分子标志物,将为恶性肿瘤的分子诊断及靶向治疗提供新的方向和手段.
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肺炎患儿白细胞介素-6与肿瘤坏死因子的临床研究
白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)均为细胞因子网络中的重要成员,它们不仅在人体的防御机制中起重要作用,其异常表达也参与诸多的病理过程.我们通过测定45例肺炎血清中IL-6、TNF水平,以探讨TNF及IL-6在肺炎发病过程中的作用.
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端粒酶活性在消化道肿瘤组织中的异常表达及其检测
1989年Morin等首先在人宫颈癌细胞系(Hela细胞)发现活化的端粒酶,1994年Kim首创高度敏感特异的PCR-TRAP法检测端粒酶活性,自此,端粒酶与肿瘤关系的研究方兴未艾.越来越多的研究表明,端粒酶与肿瘤的发生发展关系密切.利用端粒酶作为肿瘤的特异性标志物用于诊断和评估预后,是当前肿瘤研究的新热点之一.本文拟介绍端粒酶与消化道肿瘤的新研究进展,并对其在消化道肿瘤的检测及其应用作如下综述.
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EphB 受体与肿瘤发生进展的关系
目前,研究发现EphB受体在调控正常细胞形态、细胞粘附能力、迁移运动能力及血管生成中起重要作用,与正常细胞的多种生物学行为密切相关。还有研究发现,EphB受体的异常表达与多种肿瘤的发生发展有一定关系。但EphB受体的异常表达对肿瘤的具体作用及作用机制尚无明确报道。可见,EphB受体是肿瘤学中重要的研究方向,对EphB受体与肿瘤之间关系的精确把握可以更好的了解肿瘤的进展情况,为肿瘤的治疗与预防提供更多科学依据及手段。
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长链非编码RNAs在口腔鳞癌中的研究进展
口腔鳞癌是口腔常见的恶性肿瘤.它具有浸润性生长,区域或远处淋巴转移和预后差的生物学特征.近年来,越来越多的研究发现长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs,LncRNAs)在口腔鳞癌中异常表达并调节其生物学行为.本文就长链非编码RNAs在口腔鳞癌中的研究进展做一综述.
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透明质酸结合蛋白1及其在肿瘤研究中的作用
透明质酸结合蛋白1(hyaluronan binding pro-tein 1,HABP1)是透明质酸黏素(hyaladherin)家族中的一员,它能够特异性的与透明质酸结合,具有独特的晶体结构和多种生物学特性,在哺乳动物细胞内外均有表达,可以与多种细胞蛋白发生作用,是一种多功能蛋白,涉及介导细胞一细胞及细胞-基质问的黏附、细胞信号的转导、精子的成熟和运动等方面,近年来的研究发现HABP1在一些肿瘤组织中呈现异常表达,并参与某些肿瘤的转移和侵袭过程.
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miR -100能减少乳腺肿瘤干细胞的生成抑制肿瘤生长
相关研究显示,乳腺肿瘤干细胞是乳腺癌对化疗和放疗产生抵抗的根源。 microRNA是一类长度约22个核苷酸的非编码单链核糖核酸小分子,可以调节许多细胞功能。大量研究已证实,这种小分子的异常表达与癌症发生之间存在关联。一些新证据表明,这种小分子通过调控某些关键干细胞调控基因的表达,在干细胞的自我更新和分化中起到重要作用。
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p73、p51基因与大肠癌的研究进展
越来越多的实验证实,肿瘤是一种细胞周期病[1],是由于一种或多种细胞周期因子调节失控所造成.癌基因的激活和抑癌基因的失活是导致实体肿瘤发生的重要的分子生物学基础,p53基因是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性高的抑癌基因,自1997年,在基因同源性的基础上相继发现了p53家族的新成员--p73、p51基因,二者具有和p53相似的结构及诱导凋亡、转录活化、细胞周期调控等活性.然而p73、p51的某些蛋白因为N端和C端的不同结构特点,又具有与p53截然不同的甚至是互相拮抗的生物学功能,深入了解它们彼此的相似性、差异性,可对研究肿瘤的发生机制和对肿瘤的基因治疗提供帮助.近年来有关p73、p51基因在大肠癌中的异常表达已引起国内外学者的广泛关注,本文就p73基因、p51基因的研究现状及其在大肠癌中的表达及意义作一综述.
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TPS在妇科肿瘤中的应用
肿瘤标记物是指肿瘤组织及细胞所产生的有关活性物质或其产物的异常表达.可以此诊断或监测肿瘤的发展.现已发现的肿瘤标记物多数特异性并不高[1],特异性较强的妇科肿瘤标记物更少.组织多肽特异抗原(TPS)为单克隆抗体检测,与病人血清标本中可能存在的其他肿瘤相关抗原无交叉反应,特异性较高.本文对229例妇科住院病人进行血清TPS的检测,结合病理报告.探讨TPS在妇科肿瘤诊断,治疗的监测中的意义.现分析讨论如下.
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抑癌基因p16与人类肿瘤
人类肿瘤的发生发展与细胞内基因组的变化有密切关系,癌基因的激活和抑癌基因的失 活或缺失起了重要作用.近年来,关于肿瘤抑制基因的异常表达与肿瘤发生发展关系的研究 已成为肿瘤分子生物学研究的热点问题之一.其中p16基因是人类发现的第1个直接 参与细胞周期调节的抑癌基因,在多种肿瘤细胞中广泛且高频率变异.下面主要就p16 基因与人类肿瘤的关系研究进展综述如下.
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骨髓单核细胞移植对溃疡性结肠炎炎性因子IL-1和MFG-E8变化的研究
目的:探讨骨髓单核干细胞移植对溃疡性结肠炎的治疗作用.方法:建立溃疡性结肠炎的动物实验,采用骨髓单核干细胞移植技术,移植后在不同的时间段取结肠组织,检测IL-1和MFG-E8的变化.结果:移植后7d,移植组的IL-1表达水平与PBS组、对照组相比,明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);移植后14d,移植组的IL-1表达水平与PBS组、对照组相比,明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),与移植后7d的IL-1表达水平相比,差异也有统计学意义(P<0.05);移植后7d,移植组的MFG-E8表达水平与PBS组、对照组相比,明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);移植后14d,移植组的MFG-E8表达水平与PBS组、对照组相比,明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),与移植后7d的MFG-E8表达水平相比,差异也有统计学意义(P<0.05).结论:骨髓单核细胞移植可降低溃疡性结肠炎炎性因子的水平,对大鼠体内的炎性环境带来一定的缓解作用.
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地高辛标记的cDNA探针检测 IL-6mRNA表达的方法
IL-6(interleukin-6)是一种由多种细胞分泌的细胞因子,在血液病及心、脑疾病时有异常表达.IL-6被认为是目前治疗各种血小板减少症的佳药物,在治疗白细胞减少症及抗白血病、抑制肿瘤转移及骨髓移植方面也有重要作用.迄今,IL-6的检测多采用以细胞培养为基础的生物学活性检测,该方法不仅难以反映IL-6基因转录水平,而且特异性和灵敏度均受到限制.本文采用随机引物法对人IL-6cDNA探针进行地高辛标记,核酸分子原位杂交技术,建立了在转录水平上直观检测IL-6mRNA表达的实验技术,为研究IL-6的基因表达与调控奠定了基础.
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体外神经元培养中Aβ1~40诱导cyclin A的异常表达
阿尔茨海默病(AD)是一种进行性神经退行性疾病,以严重记忆减退和认知障碍为主要临床表现.AD主要病理表现是细胞外的老年斑形成,细胞内的神经纤维缠结的出现,以及神经细胞和突触数量的减少[1,2].近年来在探索AD发病机制和病理改变的过程中,发现AD病人脑内的神经元中出现细胞周期相关蛋白(cyclin A、cyclin B1等)的异常表达,且异常表达的细胞周期相关蛋白可能与AD神经元的病理改变有关联[3~5].为此,我们在体外培养神经细胞时,加入Aβ1~40多肽片段,进行细胞周期相关蛋白和神经细胞损伤的分析[6].
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肿瘤淋巴结转移相关 MicroRNAs 的研究进展
微小RNA(microRNAs ,miRNAs)是一类包含20~24个核苷酸的高度保守的非编码小分子RNA ,可以调节mRNA 的翻译[1]。miRNA结合到多种基因的mRNA的3’‐非编码区,导致靶向mR‐NA 的降解及转录的终止[2]。miRNA 作为信号通路的枢纽,参与多种生理病理过程,如细胞增殖、凋亡及肿瘤转移[3‐4]。越来越多的研究[5‐6]表明,miR‐NAs可以发挥癌基因或者抑癌基因的作用,它们在多种肿瘤中的异常表达对肿瘤的侵袭和转移有着重要的影响。因此,异常表达的 miRN A 有望成分预测肿瘤侵袭及转移的生物标志物。本文综述了肿瘤淋巴结转移相关miRN A s的研究进展。
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DKK蛋白家族在原发性肝癌中的作用
肝脏肿瘤是男性中排名第五位的恶性肿瘤,而其死亡率却位居第二位;相反在女性所患肿瘤中肝癌的恶性程度及其致死率分别排在第七和第八位[1].原发性肝癌是肝脏肿瘤中常见的一种恶性肿瘤,其发病率随着年龄的增长有所增高,近年来呈现出年轻化趋势,因而对原发性肝癌的相关研究也不断地深化.近年来一些研究发现DKK蛋白家族的异常表达与原发性肝癌的发生有一定的关系,其作用机制可能与Wnt/beta-catenin信号传导通路的表达有关.本文针对DKK蛋白家族相关特性及其在Wnt/beta-catenin信号传导通路中的作用做一阐述,以便进一步研究其与原发性肝癌的关系.