复旦学报（医学版）杂志
Fudan University Journal of Medical Sciences 복단학보（의학판）
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邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯对人神经母细胞瘤细胞增殖的影响
目的 探讨环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对人神经母细胞瘤细胞增殖的影响及机制.方法 体外培养人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,分为5组:不加干预药物(对照组)、加17β-雌二醇(17β-estradiol,E_2组)、加DEHP(DEHP组)、同时加E_2和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinases,PI3K)抑制剂LY294002(E_2+LY294002组),同时加DEHP和LY294002(DEHP+LY294002组).检测各组细胞0、2、5 d时光吸收度值(absorbanee value,AV),5 d时DNA增殖指数(proliferation index,PI),凋亡指数(apoptotic index,AI)、Capase-3蛋白、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(protein-serine-threonine kinase,Akt)以及磷酸化Akt(phosphor-AktSer473,p-AktSer473)蛋白表达.结果 E_2和DEHP组2、5 d时AV值及5d时PI值均较对照组明显增高(P<0.01),而E_2+LY294002和DEHP+LY294002组则较E_2和DEHP组明显降低(P<0.01),各组AI及Caspase-3蛋白表达无明显变化.5 d时p-AktSer473蛋白表达,E_2和DEHP组较对照组增加(P<0.01),而E_2+LY294002和DEHP+LY294002组则较E_2和DEHP组明显减少(P<0.01),各组Akt蛋白表达无明显变化.结论 DEHP可促进人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞体外增殖,作用与雌激素相仿.该促增殖效应可能通过PI3K/Akt信号通路起作用,与细胞凋亡途径无关.
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细胞色素氧化酶P450 3A4基因联合环磷酰胺的体外抗肿瘤效应
目的 克隆细胞色素氧化酶P450 3A4(CYP3A4)基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺(CPA)的体外抗肿瘤效应.方法 利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因.构建重组真核表达载体.脂质体法导入K562细胞,RT-PCR和Western blot检测CYP3A4基因在K562细胞中的表达并筛选稳定转染的细胞克隆.MTT法检测CYP3A4联合CPA对肿瘤细胞的抑制作用.结果 成功克隆CYP3A4基因并构建了真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His A(+)-CYP3A4.RT-PCR和Western blot分别显示转基因组的CYP3A4 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于转空载体组和对照组.MTT示转基因组IC_(50)值为1.090 16 mmol/L,明显低于转空载体组和对照组.酶诱导剂和抑制剂分别能够减低和增高转基因组IC_(50).结论 CYP3A4体外具有联合CPA的抗肿瘤作用,这种作用能够被CYP3A4相应的诱导剂和抑制剂增强或减低.
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开放加微创联合手术治疗乳腺多发性肿块
目的 探讨传统开放手术联合Mammotome微创手术治疗乳房多发性肿块的应用价值.方法 将2006年1月至2008年6月在我院乳腺科就诊的444例患者分为3组,分别行传统开放手术、Mammotome微创手术及联合手术,术后常规随访,分别比较3组患者的手术效果.结果 联合手术组较传统开放手术组,手术时间及术中出血无明显差异,局部皮肤凹陷发生率低,切口数量减少、长度缩短、愈合情况好,患者满意率高;较Mammotome手术组,手术时间缩短、旋切次数减少、术中出血减少,皮下瘀斑、残腔血肿、术后疼痛、术后残留发生率明显降低,患者满意率高.结论 联合手术适应症广,手术切除率高,术中术后并发症少,美观效果亦佳,与传统开放手术及Mammotome微创手术相比,有着独到的优势,在临床中值得推广应用.
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慢病毒介导RNAi沉默IL-1 Ⅰ型受体在大鼠骨关节炎MAPK信号转导中的作用
目的 观察慢病毒介导的RNAi沉默IL-1 Ⅰ型受体对实验性大鼠膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)中的丝裂素原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)途径的影响,探讨IL-1和MAPK在OA中的作用.方法 40只SD大鼠随机分为A～D 4组,每组10只.A～C组行单侧前交叉韧带和内侧半月板前1/3切除术,分别于术后第7和9天,A组关节腔中注射慢病毒介导IL-1 Ⅰ型受体有效RNA干扰片段,B组注射慢病毒介导IL-1 Ⅰ型受体无效RNA干扰片段,C组单纯注射生理盐水.D组为正常动物不做处理.术后4周处死动物,对关节软骨的状况进行评分.取膝关节软骨组织.用Western blot方法检测软骨组织中p38、ERK1/2和JNK1/2的蛋白质表达水平.结果 大体观察显示:A组软骨退行性变显著轻于B、C组(P<0.05),但高于D组(P<0.05).Western blot显示,A组p38蛋白质表达水平显著低于B、C组(P<0.05),与D组没有显著性差异(P>0.05).A组ERK1/2和JNK1/2的表达显著低于B、C组(P<0.05),但要显著高于D组(P<0.05).结论 慢病毒介导RNA干扰沉默IL-1 Ⅰ型受体能抑制MAPK的表达,特别是对其中的p38蛋白质抑制更为明显.
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不同分期恶性肿瘤患者的心率变异性分析
目的 探讨心率变异性在恶性肿瘤患者诊疗中的临床意义.方法 回顾性分析187例住院患者动态心率变异性检查资料,分为治疗前组90例,化疗组45例和52例非恶性肿瘤组(对照组),对不同组别和组内不同肿瘤分期患者的每5分钟正常心动周期标准差的平均数(ASDNN5)、每5分钟正常心动周期的标准差(SDANN5)、24 h全部正常心动周期的标准差(SDNN)及正常相邻心动周期差值的均方的平均根(RMSSD)四项心率变异性指标进行组间和组内比较.结果 肿瘤治疗前组不同分期患者的心率变异有差异,两两比较显示治疗前组Ⅲ期及Ⅳ期患者ASDNN5、SDANN5、SDNN均低于同组Ⅰ期患者及对照组(P均<0.05);治疗前组Ⅲ期仅SDNN低于同组Ⅱ期患者(P<0.05);化疗组Ⅳ期患者SDANN5,SDNN低于治疗前组Ⅳ期患者(P<0.05).结论 恶性肿瘤患者分期越晚,心率变异性降低越明显.化疗会影响Ⅳ期肿瘤患者的自主神经功能,降低心率变异性.
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微螺钉种植支抗关闭拔牙间隙后软硬组织的变化
目的 研究以微螺钉为支抗,用直丝弓矫治器滑动法关闭拔牙间隙后的软硬组织变化.方法 20例拔除4个第一前磨牙的正畸患者,使用微螺钉种植支抗结合滑动直丝弓技术关闭拔牙间隙,对矫治前后的x线头颅定位侧位片进行测量,分析软硬组织的变化.结果 上颌切牙切缘平均腭向移动7.15 mm,压低1.63 mm.上颌第一磨牙近中接触点平均远移0.80 mm.压低1.80 mm.下颌切牙切缘平均后移4.65 mm,伸长0.48 mm.下颌磨牙近中接触点平均近中移动0.18 mm,伸长1.18 mm.A点、B点后移.上唇突点、下唇突点后移.结论 微螺钉在关闭拔牙间隙过程中能发挥强大的支抗作用,明显改善侧貌,对上颌骨也有一定的骨改建作用.
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高脂血症apoE基因敲除小鼠心脏中一氧化氮合酶含量及基因表达
目的 探讨高脂饲料对apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠心肌组织中内皮型一氧化氮合酶(endothelialnitric-oxide synthase,eNOS)的含量及基因表达的影响.方法 将13只apoE-/-小鼠随机分为两组,即高脂饲料组(n=7)和普通饲料组(n=6).喂养12周后,测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)含量.采用Real-Time RT-PCR法检测心肌组织中eNOS的mRNA表达水平,以免疫组化方法检测eNOS蛋白的表达.结果 高脂饲料组TC、TG和LDL明显高于普通饲料组.HDL则低于普通饲料组(P<0.01);高脂饲料组心肌组织中eNOS的mRNA和蛋白水平均低于普通饲料组(P<0.01).结论 高脂饲料导致apoE-/-小鼠发生高脂血症,并引起心肌组织中eNOS的mRNA表达的减少和相应蛋白水平的降低.
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激活δ-阿片受体可对抗原代培养神经元氧糖剥夺损伤
目的 研究皮层δ-阿片受体(δ-opioid receptor,DOR)的抗神经元氧糖剥夺损伤作用.方法 采用原代培养胎鼠皮层神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型,分别加入DOR选择性激动剂TAN一67、拮抗剂nahrindole及PKC抑制剂chelerythrine(CHE),检测再灌注后培液中LDH水平、进行死/活细胞染色,并利用Western blot检测再灌注24 h后DOR蛋白表达水平.结果 与单纯OGD组相比,OGD+TAN-67组培液中的LDH水平明显下降,荧光染色显示活细胞增加死细胞减少,且DOR蛋白表达增加;OGD+naltrindole组则细胞受损加重.且DOR蛋白表达减少.PKC抑制剂CHE能抑制DOR激活后培液中LDH水平的下调.结论 DOR激动剂可以抗神经元氧糖剥夺损伤.拮抗DOR则加重该损伤.PKC可能参与了DOR的神经保护作用.
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亲属活体供肾来源对肾移植疗效影响的临床观察
目的 观察亲属活体供肾来源对肾移植临床疗效的影响,并探讨可能的优势供体.方法 回顾分析我院自2004年4月至2008年3月完成的104例亲属活体供肾移植的临床资料,按供肾来源分为夫妻间供肾组(10例)、父母供肾组(59例)、兄弟姐妹间供肾组(25例)和表兄弟姐妹间供肾组(10例),通过观察各组的术后平均住院天数、血肌酐恢复正常时间、各时间点血肌酐水平、主要并发症(感染、排斥、DGF等)发生率及人/肾存活情况等指标,比较分析各组的临床疗效.结果 随访1～48月,兄弟姐妹间供肾组无受者死亡或移植物丢失,而夫妻供肾组、父母供肾组和表兄弟姐妹供肾组受者死亡例数分别为1例、2例和1例,移植物丢失例数分别为1例、3例和1例.兄弟姐妹间供肾组受者术后平均住院天数为(13.72±4.15)d,有较其他组短的趋势,但有较高的感染发生趋势(20%).夫妻间供肾组显示了较低的感染(0%)和排斥(10%)发生趋势.父母供肾组的排斥发生率(18.64%)高于其他组(P<0.05).血肌酐恢复正常时间和各时间点血肌酐水平在各组间无统计学差异.结论 兄弟姐妹间供肾移植疗效相对较佳,无血缘关系的夫妻间供肾移植亦具有较理想的疗效,短期的人/肾存活情况类似于父母和表兄弟姐妹供肾移植.良好的肾移植疗效不能简单地归因于组织配型(血缘关系),供肾质量、手术优势及术后管理可能也是重要因素.
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丙泊酚在产科麻醉中应用的争议和进展
丙泊酚是目前常用的静脉麻醉药,然而它在产科麻醉中的应用一直存在争议,本文从3个方面来客观评价丙泊酚在产科麻醉中的应用,包括:丙泊酚在产科病人的药代动力学;丙泊酚在产科全麻中应用对新生儿及母体子宫平滑肌的影响;丙泊酚辅助椎管内麻醉在清醒镇静、抗恶心呕吐及预防和处理瘙痒等方面的应用.
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炎症与干眼症的研究进展
2007年国际干眼病专题研究会赋予干眼病的新定义中着重强调了干眼病伴有泪膜渗透性增加和眼表炎症,将抗炎治疗也定为干眼病分级治疗中的明确内容.可见炎症在干眼症的发病机制中的作用越来越受到重视.针对炎症环节治疗于眼症已成为近年研究的热点.炎症到底在干眼病的发生发展中如何起作用的?本文主要针对近年炎症与干眼症的研究进展作简要综述.
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~(131)碘肿瘤细胞核人鼠嵌合单抗肺癌内直接注射后体内的生物学分布
目的 研究肺癌瘤内直接注射~(131)Ⅰ-chTNT后患者体内分布状况.方法 经病理组织学确诊的原发性肺癌患者11例.根据CT定位,单次瘤内直接注射~(131)Ⅰ-chTNT 18.5～37 MBq/cm~3后,多时点测量血、尿放射性.应用HPLC法检测~(131)Ⅰ-chTNT在体内的稳定性和代谢情况.采用连续显像法估算全身、各主要脏器和肿瘤的放射性,并转换为注射剂量百分率(%ID),以观察~(131)Ⅰ-chTNT在体内的分布.结果 所有11例患者HPLC榆测结果显示,注射后24、48、72、96 h内血清中~(131)Ⅰ-chTNT均以原形存在,原形含量达100%.经计算机拟合,血清药-时曲线符合静脉外给药二室模型,T_(t/2kα)(0.89±0.17)h,T~(131)(1/2β)(86.88±25.97)h.游离~(131)Ⅰ是尿内~(131)Ⅰ-chTNT的唯一代谢产物.264 h累计尿排泄量为注射量的(58.37±17.45)%.瘤内给药后30 min,瘤内~(131)Ⅰ-chTNT量为(51.05±8.41)%ID,瘤/肺比值(T/N)高达(63.87±25.71).264 h时瘤内~(131)Ⅰ-chTNT残留(3.47±3.27)%ID,T/N为(9.61±11.00).全身主要器官中,放射性主要集中在肺、肝、心、肾、脾和甲状腺中.结论 ~(131)Ⅰ-chTNT瘤内直接注射后在瘤内停留时间较长,有利于肿瘤治疗.
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平扫CT未见异常的肺癌的早期诊断
目的 探讨胸部平扫CT检查无明显异常发现的肺癌的早期诊断.以期引起临床医师对此类病人的重视.方法 通过对3例初诊时胸部平扫CT检查未见异常.终通过纤支镜检查、PET/CT检查诊断为中央型肺癌的患者进行分析,并比较肺癌的各种早期诊断方法.结果 3例患者均为有长期吸烟史的男性,以咳嗽,痰血就诊,初诊时胸部平扫CT均未发现明显异常,经治疗后咳嗽痰血症状无明显好转.随后的PET/CT和纤支镜检查提示肺癌,终通过病理学和痰细胞学确诊为中央型肺癌.2例获得手术完全切除,1例肺功能极差无法手术.结论 早期中央型肺癌的患者,平扫CT检查阳性率较低,易导致部分病人无法得到早期诊断.因此,对于反复痰血的患者,即使初诊时平扫CT未发现肺癌,仍不能放松警惕.行纤支镜检查和PET/CT检查可发现此类中央型肺癌.因此,纤支镜检查和PET/CT在胸部平扫CT未发现明显异常的早期中央型肺癌诊断中有重要意义.
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Ⅵ型胶原肌膜选择性缺失型Ullrich型先天性肌营养不良临床及免疫病理特点
目的 探讨Ⅵ型胶原肌膜选择性缺失型Ullrich型先天性肌营养不良(Ullrich congenital muscular dystrophy,UCMD)的临床和免疫病理特点.方法 收集2例Ⅵ型胶原肌膜选择性缺失型UCMD患者的临床资料,进行肌肉活体组织检查,标本行Ⅵ型胶原免疫荧光染色和Ⅵ型胶原/Ⅳ型胶原双重免疫荧光染色,对病理结果进行分析.结果 新生儿肌张力低下、近端关节挛缩和远端关节弹性过度是Ⅵ型胶原肌膜选择性缺失型UCMD的临床特点.抗Ⅵ型胶原免疫荧光染色提示2例患者均为Ⅵ型胶原表达部分缺失.Ⅵ型胶原/Ⅳ型胶原双重免疫荧光染色可见肌膜Ⅵ型胶原表达选择性缺失.结论 Ⅵ型胶原肌膜选择性缺失型UCMD以近端关节挛缩和远端关节弹性过度为临床特征,临床严重度和Ⅵ型胶原完全缺失者没有显著差异.双重免疫荧光染色提示Ⅵ型胶原在肌膜上表达选择性缺失是其免疫病理特点.
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克罗恩病临床特征与处理对策评价
目的 通过分析克罗恩病(Crohn's disease,CD)住院患者的临床特点,随访其预后,评价目前的处理对策.方法 按照2007年中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组"对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见",收集2002年～2007年在复旦大学附属中山医院住院的CD住院病例,随访治疗情况和预后.结果 共纳入66例CD患者,男女比例2.47:1,年龄12岁～76岁,平均(32±17)岁.临床表现中胃肠道症状以腹痛的多(80.3%),其次为腹泻(54.6%),和瘘管形成(31.8%),全身表现以发热(80.3%)和营养障碍多见.60.6%患者发生并发症,34.8%患者发生一种以上并发症.7.6%患者有肠外表现.86.4%为活动期患者,以回结肠受累为主(57.6%).与静止期患者相比.活动期患者有明显腹痛(P:0.011)、便血(P=0.008)、发热(P=0.001)、贫血(P=0.020)、体重过低(P=0.010)和CRP增高(P=0.033)等表现.诱导缓解治疗药物主要为单纯氨基水杨酸制剂(33.3%),氨基水杨酸制剂联合糖皮质激素(36.4%),或氨基水杨酸制剂、糖皮质激素和免疫抑制剂联合治疗(7.6%).经内科治疗6.8%患者临床缓解,62.7%有效,28.8%无效,1.7%死亡,55.9%复发.21.2%行手术治疗.42.4%患者既往有手术病史,9.1%多次手术治疗.结论 CD活动期患者并发症多,肠外表现少,异型增生率低,癌变率低,手术率较高,复发率高.
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erbB-2和erbB-3在涎腺腺样囊性癌中的表达及临床病理相关性
目的 通过对erbB-2、erbB-3表达水平与涎腺腺样囊性癌临床病理指标相关性的研究,初步探讨erbB-2、erbB-3在涎腺腺样囊性癌发生、发展及预后中的可能作用.方法 免疫组织化学方法检测34例涎腺腺样囊性癌标本中erbB-2、erbB-3的表达情况,分析其蛋白表达与患者性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、神经侵袭的相关性.结果 erbB-2在腺样囊性癌临床病理标本中的阳性表达率为64.7%,erbB-3阳性率为32.4%,erbB-2/erbB-3双阳性率为29.4%.erbB-3阳性表达与肿瘤TNM分期呈正相关(P=0.026),erbB-2表达与erbB-3表达相关;而erbB-2、erbB-3、erbB-2/erbB-3阳性表达与腺样囊性癌患者性别、年龄、肿瘤大小、神经侵袭无相关性.结论 erbB-3和erbB-2可能均参与了该肿瘤的发生、发展过程;erbB-3阳性表达可能与涎腺腺样囊性癌的生物学行为、患者预后相关,其有可能成为患者预后评价的指标之一.
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卵泡液NO、VEGF、ET-1水平与IVF-ET妊娠结局关系探讨
目的 探讨卵泡液NO、VEGF、ET-1水平对IVF-ET妊娠结局的预测价值.方法 对131例接受IVF-ET的不孕症患者.采用比色法测定其卵泡液内NO水平、ELISA检测其卵泡液内VEGF、ET-1水平.应用经阴道超声于控制性超排卵(COH)周期人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射日进行卵巢体积、窦状卵泡数检测.结果 131例患者中临床妊娠49例,妊娠率为37.40%.妊娠组卵泡液内NO、VEGF水平均高于未妊娠组,ET-1水平则低于未妊娠组(P<0.05).HCG注射日,妊娠组总卵巢体积、窦状卵泡数均大于未妊娠组(P<0.05).卵泡液内NO、VEGF水平与总卵巢体积、窦状卵泡数呈正相关.而卵泡液内ET-1水平与总卵巢体积、窦状卵泡数则呈负相关.结论 卵泡液内NO、VEGF水平增高.ET-1水平降低,可能促进卵巢局部血流丰富,提高卵巢反应性,利于IVF-ET中妊娠成功.
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重型阑尾炎术后非腹腔引流与腹腔引流的系统评价
目的 评价重型阑尾炎术后非腹腔引流的临床疗效和安全性.方法 计算机检索中国期刊全文数据库(1994～2008.10),中国生物医学文献数据库(1978～2008.10),中文科技期刊全文数据库(1989～2008.10),数字化期刊全文数据库(1997～2008.10),MEDLINE(1966～2008.10),EMBASE(1974～2008.10),Cochrane Library(2008年第3期)和SCI(1974～2008.10),并辅手工检索和其他检索.按照纳入排除和标准,由两名研究者独立筛选并提取资料,采用Jadad评分标准评价纳入研究的方法学质量,采用RevMan 5.0软件进行统计学处理.结果 终纳入15个研究,包括2809例患者.Meta分析结果显示,非腹腔引流与腹腔引流在切口感染率[OR=0.43,95%CI(0.29,0.65)]、肠粘连发生率[OR=0.26,95%CI(0.18,0.37)]和住院时间[WMD=-0.38,95%CI(-4.96,-1.20)]方面有统计学差异,而脓肿发生率[OR=0.77,95%CI(0.39,1.51)]没有统计学差异.结论 当前研究显示,与腹腔引流相比,非腹腔引流能显著减少重型阑尾炎患者的切口感染率和肠粘连发生率,减少住院天数.由于纳入研究样本量小且质量较低,上述结论尚需要高质量、大样本的随机双盲对照试验加以证实.
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糖尿病足溃疡的性质及好发部位分析
目的 探讨糖尿病足溃疡的性质及其相关的病理生理机制,同时对糖尿病足溃疡的好发部位作初步分析.方法 分析糖尿病足病门诊121例患者的溃疡诱因等基本情况,测量溃疡面积.通过浅感觉、腱反射、肌电图或振动感觉阈值(vibration perception threshold,VPT)检查周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN);通过症状、下肢血管超声或磁共振显像判断有无周围血管病变.根据病变基础将溃疡分为神经性溃疡组(n=33)、缺血性溃疡组(n=27)和混合型溃疡组(n=61).结果 121例患者中97例(80.2%)溃疡发病部位为足趾与足底.神经性溃疡组中,48.5%病变部位于足底,30.3%位于足背,21.2%位于足趾.缺血性溃疡组中,溃疡位于足趾59.3%,足背29.6%.足底11.1%.混合性溃疡组的溃疡49.2%位于足趾,41%位于足底,9.8%位于足背.3组的溃疡分布差异有显著性统计学意义(P<0.01).3组中以混合型溃疡组患者年龄大,糖尿病病程长(P<0.05),诊断时溃疡面积大,而缺血组的BMI与血压则较其余两组高(P>0.05).结论 病变发病基础不同可导致糖尿病足患病部位的不同,拇趾和足底为糖尿病足的高发部位.
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原发性及转移性胰腺癌细胞中TGFβ1和TGFβR1的表达
目的 分别对具有原发癌特性的BxPC-3及转移癌特性的AsPC-1胰腺癌细胞株中TGFβ1及其Ⅰ型受体TGFβR1 mRNA及蛋白的表达情况进行研究.方法 采用实时荧光定量RT-PCR及Western blot方法检测AsPC-1和BxPC-3胰腺癌细胞中TGFβ1和TGFβR1 mRNA及蛋白的表达.结果 BxPC-3中TGFβ1和TGFβR1的mRNA和蛋白均呈低表达,AsPC-1中TGFβ1和TGFβR1的mRNA和蛋白呈高表达,两者相比较有显著统计学差异(P<0.05).结论 TGFβ1和TGFβR1的高表达可能与胰腺癌的远处转移密切相关.
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三羟基异黄酮对关节软骨细胞合成胶原和蛋白多糖的影响
目的 通过对体外培养软骨细胞的实验研究,探寻受体酪氨酸激酶抑制剂对软骨细胞在细胞分子水平的影响及其可能机制.方法 对软骨细胞进行原代及传代培养.通过对培养细胞形态学及甲苯胺蓝染色观察,选择适合传代软骨细胞,应用三羟基异黄酮干预后1、2、3、4天RT-PCR、ICC及甲苯胺蓝染色观察法比较药物干预对体外培养软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的转录和翻译水平及蛋白多糖的表达变化.结果 20 μg/mL及25μg/mL 三羟基异黄酮干预可以抑制Ⅰ型胶原表达.同时增加Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达.结论 三羟基异黄酮可以抑制脂多糖刺激诱导的软骨细胞反分化,对体外培养关节软骨细胞的正常表型具有一定的保护作用,其保护作用与三羟基异黄酮浓度呈现一定的相关性.
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甲基CpG结合域四聚体蛋白的原核表达、纯化及鉴定
目的 在大肠埃希菌中表达甲基CpG结合域四聚体蛋白,并对其进行纯化和鉴定.方法 将重组表达质粒4×MBD-pET30b+转化大肠埃希菌DH5a克隆扩增并测序鉴定后.转化大肠埃希菌BL21(DE3)后接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达.表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达,用此蛋白免疫染色人胚肾细胞后用荧光显微镜观察.结果 克隆质粒测序结果与理论预期完全一致,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达出相对分子量为46 000的目标蛋白,Western blot显示目标蛋白带有His融合标签(氨基端)和HA标签(羧基端).荧光显微镜观察显示MBD蛋白能与细胞内的甲基化CpG基序特异性结合.结论 成功表达并纯化了具有免疫原性的甲基CpG结合域四聚体蛋白,为今后进一步研究DNA甲基化奠定了基础.
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曲马氨酚片的人体药物动力学研究
目的 测定曲马氨酚片中曲马多和对乙酰氨基酚的药动学参数.方法 采用高效液相色谱法分别测定20名健康志愿者口服曲马氨酚片(2个剂量组:1片和2片,每组10名)后血清中的药物浓度,进行药动学分析.结果 2组健康志愿者口服曲马氨酚片后的主要药动学参数:曲马多AUC_(0-24h)(ng·h·mL~(-1))分别为2 724.89±1 016.54,1 361.61±441.79;AUC_(0-∞)(ng·h·mL~(-1))分别为3 065.49±1 190.66,1 555.04 ± 582.51;t_(max)(h)分别为1.8±0.75,1.9±0.57;t_(1/2)(h)分别为7.34±1.39,7.63±2.02;Kel(h~(-1))分别为0.098±0.019,0.097 ± 0.027;Clr(mL·min~(-1))分别为31.84±13.65,30.03±9.20;MRT(h)分别为7.62±1.07,7.77±0.75.对乙酰氨基酚的AUC_(0-24h)(μg·h·mL~(-1))分别为40.28±10.36,18.37±3.84;AUC_(0-∞)(μg·h·mL~(-1))分别为41.63±10.96,18.81±4.06;t_(max)(h)分别为0.9±0.46,0.9±0.39; t_(1/2)(h)分别为5.39±1.16,4.96±1.03;Kel(h~(-1))分别为0.13±0.03,0.15±0.03;Clr(mL·min~(-1))分别为17.17±4.57,18.42±3.89;MRT(h)分别为4.86±0.48,4.50±0.53.结论 各剂量组之间的主要药动学参数(t_(max),t_(1/2),Kel,Clr,Vd,MRT)无显著性差异,各剂量组AUC_(0-t)/dose,AUC_(0-∞)/dose,C_(max)/dose比较无显著性差异;符合线性动力学特征.
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免膀胱平滑肌细胞的分离培养与鉴定
目的 建立分离、培养高纯度兔膀胱平滑肌细胞的方法,并进行细胞学鉴定与分析.方法 正常成年新西兰白兔共6只,运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层.然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞.在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况,同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析,并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴定分析.后根据细胞计数绘制细胞生长曲线和增殖曲线.结果 24 h可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,7 d可进行传代,传至第10代时细胞仍迅速生长.倒置显微镜下观察细胞相互交叉、重叠生长形成多层,高低起伏呈"谷和峰"样结构.至第12代时,细胞开始变形.至第15代时细胞已失去平滑肌细胞的典型形态特点,细胞生长杂乱且不规则.至第20代时细胞已死亡.以第4代细胞进行形态学细胞爬片H-E染色和透射电镜观察分析,以及平滑肌特有的α-肌动蛋白免疫荧光染色分析均证实,该分离培养的细胞为膀胱平滑肌细胞,且纯度高达100%.结论 酶分离法在短时间内成功培养大量高纯度的膀胱平滑肌细胞,为深人研究膀胱平滑肌细胞的病理生理及分子生物学奠定了基础.
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4种石杉科植物中产生石杉碱甲的内生真菌的分离及初步鉴定和HPLC测定石杉碱甲的含量
目的 从4种石杉科植物中得到产生石杉碱甲(Huperzine A)的内生真菌,改进筛选内生真菌的培养条件.方法 消毒后的材料在培养基上培养和分离其内生真菌,HPLC检测代谢产物,显微形态鉴定菌种.结果 从蛇足石杉,长柄石杉,伏贴石杉,柳杉叶马尾杉中分离得到32株内生真菌,其中从柳杉叶马尾杉分离出的2株内生真菌能够产生石杉碱甲,分别是HA15.(芽胞菌属)和HA23.(葡萄孢属).结论 首次从柳杉叶马尾杉中分离出能产生石杉碱甲的内生真菌.
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慢性颞叶癫痫大鼠海马内向整流钾通道Kir2.3 mRNA的动态变化
目的 探讨慢性颞叶癫痫大鼠海马不同时间点内向整流钾通道Kir2.3 mRNA的表达变化及Kir2.3通道与颞叶癫痫发病机制之间的关系.方法 匹罗卡品诱发大鼠产生癫痫持续状态(status epilepticus,SE),经过2周成模为慢性颢叶癫痫大鼠.以SE终止后0 h、6 h、72 h和2周作为时间点,分别用RT-PCR方法检测致痫大鼠海马中Kir2.3通道mRNA的表达变化.结果 正常对照组、SE终止后0 h、6 h、72 h、2周各时间点Kit2.3 mRNA与β-actin比值分别为0.080±0.030、0.103±0.045、0.164±0.026、0.132±0.024和0.011±0.008,其中6 h组比值增高,和对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);2周组比值的降低,和对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05).结论 离子通道的改变可能是一个动态变化的慢性过程.在致痫大鼠SE发生2周后,即转入慢性自发性癫痫发作时,可能是Kit2.3通道表达发生变化的转折点,从而成为痫性发作的基础.
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怀地黄叶中梓醇的积累分布动态
目的 探索梓醇在怀地黄叶生长过程中的积累分布规律,为开发梓醇资源提供新思路.方法 采用高效液相色谱法测定新鲜药材中的梓醇含量.流动相:乙腈-水(0.6:99.4),检测波长:210nm,回归方程Y=377.26X-1.054 3.测定不同发育阶段的怀地黄叶的水分含量,换算成干燥品中梓醇的含量.结果 怀地黄叶与块根中均含有梓醇.地黄叶中的梓醇含量先迅速上升.在8、9月份的生长旺盛期达到大值.然后逐渐降低直到地黄叶枯萎、凋谢.地黄块根中的梓醇随块根的增大而不断增多,一直持续到采收期收获.结论 怀地黄中的梓醇积累变化是植物生理调节的结果.怀地黄叶中含有大量梓醇,应根据其积累规律进行深入研究.以利于地黄的综合利用.
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桥本甲状腺炎合并不典型亚急性甲状腺炎1例报道
桥本甲状腺炎(HT)与不典型亚急性甲状腺炎是临床上常见的甲状腺炎类型,前者是一种自身免疫性甲状腺疾病,而后者一般认为是病毒感染引起的甲状腺炎性破坏,两者发病机制不同,很少合并出现,现将我院于2008年5月收治的1例病例报告如下.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
