HIV+/AIDS患者的医疗服务需求调查

目的对HIV+/AIDS患者的医疗服务及其影响因素进行调查,为满足其需求提供科学依据.方法对全国111例经血、性和吸毒3种途径感染的HIV感染者进行流行病学问卷调查和个人深入访谈,分别采用定量分析(单因素和多因素分析)和定性分析的方法,对其医学服务需求和医疗服务满意度进行分析.结果对医疗服务的满意度,血途径感染者的满意率高,达到51.61%,而吸毒感染者和性途径感染者对医疗服务满意率仅为31.11%和20%.结论加强医务人员对艾滋病治疗技术的培训,提高其治疗水平.

成骨生长肽促进实验性再生障碍性贫血小鼠造血的恢复

目的研究人工合成成骨生长肽(sOGP)对实验性再生障碍性贫血(EAA)小鼠造血功能恢复的促进作用.方法BALB/C小鼠辐射5Gy后,尾静脉输注DBA/2小鼠混合淋巴细胞1×105个/鼠,建立EAA动物模型.造模次日始腹腔注射sOGP共12d,每天分别为0.05、0.5、5.0 nmol/鼠,共3个剂量组,第14天杀鼠检测体重、脾重、血常规、骨髓有核细胞数(BMNCs)、骨髓涂片及胸骨切片等,并作粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)培养.结果骨髓涂片与胸骨切片中均可见随着sOGP治疗剂量的增高,骨髓增生逐渐有所恢复;各组CFU-GM增殖能力则表现出显著差别,治疗效果与剂量有明显的正相关线性关系.结论sOGP可有效促进EAA小鼠造血功能的恢复,其作用环节可能位于干细胞或其上游水平,提示sOGP在促进造血恢复方面的潜在前景.

原发性肝癌介入治疗前后凝血及纤溶功能变化及临床意义

目的研究原发性肝癌介入治疗前、后凝血及纤溶功能的变化.方法血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原含量(Fg)、凝血因子Ⅶ(FVⅡ)、凝血因子Ⅷ(FⅥI-Ⅱ)、因子X(FX)采用光散射比浊法.P-选择素(Ps),血管性血友病因子(vWF),尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)采用ELISA法测定.uPA抑制物(PAI)采用发色底物法.结果(1)与对照组比较,治疗前PT、APTT、TT、Ps、VWF、uPA升高,Fg、FⅦ、FⅧ、FX降低.(2)与治疗前比较,治疗后PT、APTT、Ps、vWF、uPA降低,FⅦ、FⅧ升高.(3)与对照组比较,治疗后PT、APTT、TT、Ps、vWF、uPA升高,Fg、FⅦ、FⅧ、FX降低.结论原发性肝癌患者血凝降低,纤溶亢进,血小板活化,介入治疗后减轻,但未恢复正常.

非甾体类孕酮受体激动剂5-亚苄基-1,2-二氢-5H-苯并吡喃并[3,4-f]喹啉衍生物三维定量构效关系

目的建立非甾体类孕酮受体激动剂5-亚苄基-1,2-二氢-5H-苯并吡喃并[3,4-f]喹啉衍生物的三维定量构效模型,为设计高效的非甾体类孕酮受体激动剂提供理论依据.方法利用比较分子力场分析方法,建立31个非甾体类5-亚苄基类取代-1,2-二氢-5H-苯并吡喃并[3,4-f]喹啉人体内孕酮受体激动剂三维定量构效模型.结果该模型的交叉验证相关系数q2=0.780,非交叉验证相关系数R2=0.983,标准误SE=0.092,F=157.531.用此模型预测了3个非甾体类孕酮受体激动剂的活性,结果与实验值相符.结论该模型具有较好的预测能力,可为非甾体类孕酮受体激动剂的结构优化提供理论指导.

SARS-Cov M蛋白的真核表达及其免疫原性研究

目的初步研究SARS-Cov病毒M蛋白基因的真核表达效率和免疫原性为进一步的疫苗研究奠定基础.方法以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长M基因,分别克隆至pcDNA4-his/myc和pVAON33载体获得重组质粒pcDNA4-his/myc-M和pVAON33-M.以Western Blot方法利用融合分子羧基段的myc表位检测pcDNA4-his/myc-M转染的293T细胞中M蛋白的真核表达.以ELISA方法检测pVAON33-M质粒基因免疫小鼠诱导产生特异性抗血清.结果pcDNA4-his/myc-M转染后48 h可检测到SARS-Cov M蛋白表达.pVAON33-M基因免疫能够诱导产生M特异的体液免疫应答.结论本研究的结果表明SARS-Cov M蛋白可以在真核细胞中有效表达并有良好免疫原性,可以作为SARS-Cov疫苗研制的候选抗原之一.

虚拟护理信息服务系统的设计与实现

目的整合网络护理学科信息资源和Internet技术,进行一体化设计建立虚拟护理信息资源服务系统.方法系统采用模块化结构,学科信息资源包括复旦图书馆订购的网络数据库、网上免费护理资源、护理科研人员知识积累.系统平台构架采用Web的多层体系结构Browse Server模式,数据库为SQL Server2000,开发工具为Jbuilder 9.0.结果系统在一个完整的平台上实现系统管理功能、信息处理功能和通讯功能,具有共享性、安全性、开放性、可扩展等特点.系统实现了护理学科信息资源数字化、一体化、网络化管理.结论建立"基于学科"的网络信息资源服务平台能够充分有效地利用生物医学网络资源,必将在生物医学领域的临床和研究工作中起到重要作用.

肾大部切除大鼠肾皮质环加氧酶2的表达及调节

目的探索肾大部切除大鼠肾皮质环加氧酶2(cyclooxygenase,COX2)的表达及特异性COX2抑制剂罗非昔布对其的影响.方法将大鼠随机分为6组,每组6只:Ⅰ.假手术组(Sham组),Ⅱ.肾大部切除组(SNX组),Ⅲ.SNX+罗非昔布组(Rof组),Ⅳ.SNX+吲哚美辛组(Ind组),Ⅴ.SNX+氯沙坦组(Los组),Ⅵ.SNX+罗非昔布+氯沙坦合用组(R+L组).6周后检测大鼠尿蛋白与尿血栓烷素B2(TXB2)的排泄量,检测肾皮质血管紧张素Ⅱ浓度,应用免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting的方法检测COX2及COX1mRNA及蛋白质的表达.结果SNX组大鼠血压较Sham组显著升高,Los组及R+L组血压较SNX组明显降低(P＜0.01),而Rof组及Ind组血压与SNX组相比无显著差别(P＞0.05).与Sham组相比,SNX组大鼠尿蛋白及肾皮质COX2的表达与尿TXB2排泄明显增多,COX1表达无明显变化,AngⅡ浓度明显增高.Rof组及R+L组肾皮质COX2表达下调,尿TXB2排泄明显减少,COX1表达无明显变化,AngⅡ浓度降低.Ind组COX2及COX1表达均下调,尿TXB2排泄明显减少;氯沙坦对COX2及COX1无明显影响.结论肾大部切除大鼠肾皮质COX2的表达与尿TXB2排泄明显增多,COX1表达无明显变化.特异性COX2抑制剂罗非昔布使COX2的表达下调,部分抑制肾素-血管紧张素系统的兴奋.

急性脑出血大鼠脑内纤溶酶原和组织型纤溶酶原激活物mRNA变化与中枢神经二次损伤关系

目的探讨急性脑出血大鼠脑内纤溶酶原和组织型纤溶酶原激活物(tPA)mRNA的变化与中枢神经二次损伤关系.方法使用Zea-longa方法连续观察神经功能缺损,对脑出血大鼠模型脑内纤溶酶原与tPAmRNA表达使用逆转录聚合酶链反应方法进行连续监测.结果部分脑出血大鼠于出血后第4天开始出现中枢神经二次损伤现象,约第7天为损伤的高峰.与正常对照组相比,脑出血后第3天tPA mRNA表达出现明显增高,脑出血后7天纤溶酶原mRNA出现明显增高.结论纤溶酶原与tPA mRNA的改变可能与中枢神经二次损伤有关.

高压氧对链脲佐菌素大鼠糖尿病性心肌病变的治疗作用

目的研究高压氧治疗(HBOT)是否可改善STZ(链脲佐菌素)大鼠的糖尿病性心肌病变.方法STZ大鼠造模成功3月,电镜证实有心肌病变后,随机分为3组:(1)HBOT组(n=30):每天接受0.15 MPa、HBOT1 h,连续20 d.(2)糖尿病对照组(n=32):不做治疗.(3)正常对照组(n=20):腹腔注射生理盐水的无糖尿病的正常大鼠.分别在疗程5、10、20 d后处死治疗组及同期对照组大鼠,取心脏进行HE染色病理学观察和电镜观察.结果HBOT治疗20 d后STZ大鼠的糖尿病性心肌病变明显好于同期糖尿病对照组,电镜观察显示肌丝排列整齐、Z线明显、线粒体排列规则、结构紧凑.结论HBOT可改善STZ大鼠糖尿病性心肌病变.

大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎TGF-β1和calponin h1表达变化的初步研究

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性调宁蛋白(calponin h1)在大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎中的表达及其意义.方法制备大鼠抗Thy-1系膜增生性肾肾炎模型,提取其肾组织的总蛋白和总RNA.应用免疫组织化学ABC法、Western blot、RT-PCR等方法分别从蛋白和核酸水平检测TGF-β1和calponin h1在肾炎模型1、3、5、7、14、21、28 d组织中的表达,研究其相互关系.结果大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎中TGF-β1的蛋白表达从7天组起明显随时间延长增强,至21 d组达高峰后回落,核酸表达差异不明显;calponin h1的少量表达见于正常对照组,1、3、5 d组起表达明显增强,7 d组达到高峰后开始回落,核酸表达的变化趋势则与TGF-β1的蛋白表达变化趋势一致.结论大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎组织中calponin h1表达增强,并在肾炎病变早期呈增强趋势,后者与TGF-β1在肾炎早期的增强表达趋势相似.calponin h1可能在肾炎早期发挥抗细胞增殖的作用.

瘦素对胃癌细胞系SGC7901增殖和凋亡的影响

目的观察人胃癌细胞系SGC7901瘦素及瘦素受体的表达及瘦素对SGC7901增殖及凋亡的影响.方法免疫组化和RT-PCR检测SGC7901瘦素和瘦素受体的表达,噻唑蓝比色实验观察瘦素对SGC7901的增殖作用,流式细胞仪检测瘦素对细胞周期及凋亡的影响,RT-PCR方法半定量检测瘦素对促凋亡基因bax mRNA表达的影响.结果SGC7901既表达瘦素又表达瘦素受体,重组瘦素呈剂量依赖性地促进细胞的增殖,并明显抑制细胞的凋亡,瘦素可抑制促凋亡基因bax mRNA的表达.结论瘦素可能以自分泌方式调节人胃癌细胞系SGC7901的增殖及凋亡.

接触丙烯腈工人血中一氧化氮与一氧化氮合酶的变化

目的探讨职业性接触丙烯腈对人体血管内皮功能的影响.方法以某石化厂从事腈纶纤维生产的111名工人为接触组,条件相近的不接触任何毒物及不进行有害作业的健康体检者89人为对照组.进行血清一氧化氮代谢产物水平、血清总一氧化氮合酶(tNOS)活力、血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力测定,作为评估血管内皮功能的指标.结果与对照组比较,接触组NO水平显著降低(P＜0.01).以NO水平为应变量,以接触丙烯腈、性别、年龄、家族史、吸烟量、饮酒量、血清三酰甘油等指标自变量,进行逐步多元线性回归分析.接触丙烯腈与血清NO水平呈显著负相关(P＜0.01),且相关性随工龄的延长而增加.结论职业性接触丙烯腈可损害血管内皮功能,且这种损害可能具有累积效应.

人乳腺癌中3种耐药基因产物的表达及其与预后的相关性

目的研究多药耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)在乳腺癌组织中的表达及其与预后指标的关系.方法采用免疫组织化学技术,检测105例乳腺癌中P-gp、GST-π和TopoⅡα耐药基因蛋白.结果(1)105例乳腺癌中P-gp、GST-π和TopoⅡα的阳性表达率分别为77.1%、76.2%和36.2%;(2)P-gp及GST-π高表达和TopoⅡα的低表达与肿瘤的浸润性和腋窝淋巴结转移相关;(3)P-gp、GST-π和TopoⅡα与C-erbB-2的表达显著正相关;(4)GST-π与ER、PR的表达呈负相关.结论P-gp、GST-π和TopoⅡα在乳腺癌的表达与其预后指标存在一定的联系,对乳腺癌患者在化疗前进行耐药基因检测,有助于判断预后及选择合理的化疗方案,从而提高疗效.

维持性血透患者营养不良与炎症的相互关系

目的探讨维持性血液透析(MHD)患者营养不良、炎症与心血管并发症之间的相互关系.方法79例稳定的MHD患者分别运用传统主观全面营养评价法(SGA)、改良SGA、人体学测量进行营养评估;分析营养不良、炎症以及心功能之间的联系.结果营养不良组的理想体重%、体重指数(BMI)、三头肌皮褶厚度(TSF)、血球压积(HCT)、血清白蛋白(ALB)值均明显低于营养正常组;改良SGA值、CRP、SF明显高于正常组.高CRP组营养不良发生率和改良SGA评分明显高于正常组;生化指标方面,高CRP组的总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)较正常组高,ALB则低于正常组;高CRP组心功能检查E/A＜1的比例高于CRP正常组.CRP与ALB存在负相关,与改良SGA值、ALB、白细胞(WBC)、GLB存在正相关,但进行多因素分析后,CRP仅与ALB、改良SGA值存在相关.营养不良患者中Ⅱ型约占60%.结论MHD患者中相当一部分存在Ⅱ型营养不良,该型营养不良与炎症关系密切;炎症尚与心功能受损(尤其是左心舒张功能受损)有关.

盐酸昂丹司琼口崩片与普通片的生物等效性研究

目的对昂丹司琼口崩片和普通片进行生物利用度和生物等效性评价.方法20名健康男性志愿者随机分成2组,单剂量交叉口服盐酸昂丹司琼口崩片1片(8 mg/片)和普通片2片(枢丹片,4 mg/片),于一定时间采集血样,用高效液相色谱-紫外检测法测定16 h内的血浆药物浓度.经统计得到有关参数,3P97软件进行方差分析与生物等效性判断.结果口崩片和普通片的峰浓度(cmax)为(35.67±8.944)和(35.81±10.03)ng/mL,达峰时间(tmax)为(1.509±0.790 7)和(1.525±0.580 4)h;0至∞时间药时曲线下面积(AUC0～∞)为(265.2±101.5)和(272.6±114.2)ng·h/mL,,0至16 h药时曲线下面积(AUC0～t)为(230.2±77.99)和(230.7±83.59)ng·h/mL.两种制剂的主要药动学参数cmax,AUC0～t经对数转换后进行方差分析及双单侧检验并计算90%置信区间,表明两种制剂生物等效.盐酸昂丹司琼口崩片平均相对生物利用度为102.0%.结论口崩片与普通片具有生物等效性.

椎板整块切除后回植椎管成形术在椎管内肿瘤中的应用

目的探讨采用T-型锯进行椎板整块切除、回植椎管成形术在治疗椎管内肿瘤中的应用价值.方法2000年7月～2002年12月,对17例椎管内肿瘤采用T-型锯将椎板整块锯下,切除肿瘤后将椎板原位精确回植.平均随访1年,观察病人的神经恢复情况和影像学变化.结果17例患者神经功能恢复良好,ASIA术前评分3例为C,13例为D,1例为E,术后6个月均恢复到E,其中1例恶性肿瘤术后11个月因肿瘤复发神经症状突然加重而再次手术.17例患者术后6个月再植椎板均愈合,没有发现骨质吸收、椎管狭窄、脊柱后突及不稳.结论采用T-型锯将椎板整块切除后精确回植的椎管成形术,可恢复椎管正常解剖,操作安全,是一种新的治疗椎管内肿瘤的手术方法.

曲面断层摄影术观察牙生长发育的临床应用评价

曲面断层摄影术(orthopantomograph)又称全景摄影术,它是用窄缝及圆弧轨道体层摄影原理在一张胶片上获得上下牙弓的总影像.全景片可用于观察骨和牙的病变,确定牙的形态大小以及牙长轴与颌骨的角度关系[1].由于其放射剂量低、操作时间短、病人易于合作等优点而广泛应用于临床[2].

糖尿病足部病变的辅助检查

目前对于糖尿病足部病变的检查,多数停留于一些简单的物理检查,如足部的触觉和痛觉检查、足背动脉搏动的检查、Semmes-Weinstein尼龙丝检查等.但有研究[1]提示,这些检查并非十分敏感,大约有50%左右的患者缺乏上述检查的阳性表现,更有约16%的患者在发生终点事件(截肢)时仍然没有物理检查的阳性提示.因此有关糖尿病足部病变的辅助检查显得尤为重要.

戒烟方法的理论与实践

世界卫生组织指出,烟草的使用与全球日益蔓延的死亡和疾病流行高度相关.烟草是导致人们失能和早死的主要原因.目前全世界每天有13 000多人死于烟草.按照该速度计算,从2000年到2030年吸烟者将从12亿上升到16亿,每年死于烟草的人数将从490万上升到1 000万[1].

大动脉转位术治疗合并室间隔缺损的大动脉错位

目的报道采用动脉转位手术(Switch手术)治疗合并室间隔缺损的大动脉错位(transposition of greatarteries associated with ventricular septal defect,TGA/VSD),探讨围手术期治疗要点.方法2000年11月至2003年7月,8例合并室间隔缺损的大动脉错位接受Switch手术.6例完全性大动脉错位合并室间隔缺损中5例为大型室间隔缺损伴肺动脉高压,1例为小型室间隔缺损,急诊行球囊房间隔造口术以缓解缺氧.另2例为右心室双出口伴肺动脉瓣下室间隔缺损伴肺动脉高压.其中6例术前经心导管和造影检查.所有病例均在深低温低流量体外循环下行Switch手术.结果全组体外循环时间132～225 min[(189±52)min],主动脉阻断时间68～162 min[(115±41)min].术后常规施行改良超滤,机械辅助通气,应用血管活性药物.1例进行腹膜透析,6例应用吸入一氧化氮治疗.全组死亡1例(12.5%).机械通气时间3～7 d[(4.5±2.8)d].并发症包括切口渗血1例,肺不张2例,切口感染1例.术后随访所有病例发绀、气急、多汗症状消失,生长发育明显改善,活动耐量增加.胸片肺血正常,心影明显缩小.超声心动图检查显示,1例残余室间隔缺损,轻度主动脉和肺动脉瓣上狭窄各1例.结论大动脉转位术是治疗TGA/VSD的首选方法,及时诊断治疗和恰当的围手术期处理是成功的关键.

肱骨近端锁定接骨板治疗42例严重粉碎性肱骨近端骨折

目的探讨肱骨近端锁定接骨板治疗肱骨外科颈粉碎性骨折的治疗效果.方法42例严重粉碎性肱骨近端骨折患者,观察行切开复位肱骨近端锁定接骨板手术治疗与保守治疗的效果.结果手术治疗组22例病人术后随访12～20个月,骨折均愈合,肩关节活动良好,患者发生肱骨头缺血性坏死和骨折不愈合的机会少.肩关节功能评分优于保守治疗组.结论应用肱骨近端锁定接骨板治疗严重粉碎性肱骨外科颈骨折能有效固定骨折块,使患者能早期进行功能锻炼.

高能聚焦超声治疗宫颈糜烂的疗效

目的探讨高能聚焦超声治疗宫颈糜烂的有效性及安全性.方法采用海极星超声波妇科治疗仪对40例宫颈糜烂患者进行聚焦超声治疗的临床观察,比较治疗前后临床症状的变化和宫颈糜烂面积的改变,综合评价超声治疗的临床疗效.结果聚焦超声治疗后,白带增多,性交后出血等症状基本缓缓,轻、中和重度宫颈糜烂面积分别缩小97.89%、90.69%和81.91%;疗效分别达到100%、93.33%和72.22%.聚焦超声治疗后,宫颈局部组织有短暂的渗出性炎症反应,阴道排液的时间约5～21 d,1月后可基本恢复正常;无组织结痂脱落出血的过程,无宫颈瘢痕形成.结论治疗剂量的高能聚焦超声波能安全有效地治疗慢性子宫颈炎.

双钢丝球囊在支架内再狭窄中的应用

目的评价双钢丝球囊在支架内再狭窄治疗中的有效性和安全性.方法32例支架内再狭窄病人,共有再狭窄靶病变37处,采用双钢丝球囊对靶病变进行扩张,观察扩张效果并进行临床随访.结果全部37处再狭窄病变的双钢丝球囊扩张成功率为100%,术后血管狭窄程度明显减轻[(87.7±8.6)%比(7.7±6.7)%,P＜0.001],住院期间无1例发生死亡、未发生Q波性心肌梗死和心力衰竭等严重临床并发症.1处支架外缘受累的再狭窄病变在扩张后出现轻度内膜撕裂(A型),4处支架外缘受累的再狭窄病变于支架外缘受累血管段补充置入支架.临床随访3～15(8.0±3.4)个月,2例出现心绞痛复发.结论双钢丝球囊成形术对支架内再狭窄是有效、安全的治疗方法.

毛细管电泳法检测美普他酚手性拆分中的光学纯度

目的建立测定二对甲苯甲酰酒石酸美普他酚对映体的毛细管区带电泳法,并检测其光学纯度.方法采用72 cm× 50μm未涂层石英毛细管,30 mmol/L磷酸缓冲液(pH 8.05,内含0.5%TM-β-CD,乙腈12%),运行电压20 kV,毛细管柱温20℃,压力进样3 kPa×3 s,检测波长200 nm.结果在选定的实验条件下二对甲苯甲酰酒石酸美普他酚对映体达到基线分离.两对映体在0.10～0.80mg/mL的浓度范围内,浓度与峰面积的响应均呈良好的线性关系,相关系数分别为:0.999 6和0.999 8.迁移时间的RSD在3%以内,峰面积的RSD在10%以内,左旋体的加样回收率为100.26%(n=6),低检测浓度为0.02 mg/mL.测定3批样品的光学纯度分别为84.10%、92.54%、≥99.60%.结论本法适用于实验室中二对甲苯甲酰酒石酸美普他酚光学纯度的常规测定.

流式细胞仪测定成人与儿童中性粒细胞功能

目的建立评价中性粒细胞吞噬和氧化功能的流式细胞仪方法.方法取健康成人、儿童外周血,佛波脂(PMA)刺激中性粒细胞活化后吞噬并氧化二氢若丹明123(DHR)为可发出绿色荧光的若丹明123,用流式细胞仪检测阳性细胞以评价中性粒细胞吞噬和氧化功能.结果10 μg/mL佛波脂(PMA)可有效刺激中性粒细胞吞噬和氧化功能.20例健康成人无刺激时中性粒细胞活化率＜10%[(4±3)%],10μg/mL PMA刺激后中性粒细胞活化率均＞90%[(96±3)%];19例健康儿童无刺激时中性粒细胞活化率＜10%[(5±4)%],10 μg/mLPMA刺激后中性粒细胞活化率均＞90%[(95±4)%];8例足月儿脐带血无刺激时中性粒细胞活化率为(7±4)%,10 μg/mLPMA刺激后中性粒细胞活化率(89±6)%.采用刺激指数(SI),PMA刺激与对照荧光强度几何均数,也可用于评价中性粒细胞刺激后活化情况,但变异较大.结论流式细胞仪-DHR分析可用于临床评价成人与儿童中性粒细胞吞噬和氧化功能.

急性分离的成年大鼠心肌细胞在免疫荧光染色中的应用

目的介绍用急性分离的心肌细胞进行免疫荧光染色的方法.方法采用急性分离的成年大鼠心肌细胞和培养的乳鼠心肌细胞为标本,分别用免疫荧光染色直接法和间接法对细胞的肌动蛋白和肌钙蛋白进行染色.结果无论是用肌动蛋白或肌钙蛋白抗体,两种心肌细胞染色效果无明显差别.结论可以尝试用急性分离的成年大鼠心肌细胞为标本进行免疫荧光实验.

共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用

目的观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响.方法选择Fluo-3/AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计.结果在0.5 mmol/L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P＜0.001);0.5 mmol/L谷氨酸与3 mmol/L牛磺酸共同作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P＜0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P＜0.001).结论抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化以及定量分析.该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性.

反相高效液相色谱法测定猪脑提取物中神经生长因子的含量

目的建立猪脑提取物中神经生长因子含量测定的方法.方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Dia-monsil C18(150mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈:(0.5%三氟乙酸水溶液:甲醇=52:48)=30:70,10 min后梯度升至50:50.柱温30℃,流速1.0 mL/min,波长280 urm,进样量20μL.标准曲线法计算含量.结果在该色谱条件下,测得神经生长因子的线性良好(r=0.999 4);平均回收率100.9%～102.4%;日内精密度RSD1.36%～1.77%,日间精密度RSD1.85%～2.40%;低检测浓度0.25 mg/L;3批样品中神经生长因子含量分别为0.326%、0.321%0.332%(mg/100 g).结论该方法灵敏、准确、可靠,适用于本品中神经生长因子含量的测定.

融合功能磁共振影像的神经导航在脑皮质运动区肿瘤术中的应用

颅内海绵状血管瘤CCM1基因第12外显子及其5'端内含子新突变位点

9-硝基喜树碱在Caco-2细胞模型中的体外摄取、转运及外排动力学

胃肠道间质瘤c-kit基因突变的研究

同源重组构建表皮葡萄球菌附属基因调节子(agr)阴性突变株

自体许旺细胞桥移植治疗帕金森病模型猴的研究

老年人不典型腰椎结核1例报道

临床资料患者,男性,74岁,因发热、畏寒、头痛、咽痛1 d入院.入院前患者曾用头孢唑林静滴1 d,效果不明显.既往有高血压、冠心病和前列腺肥大史.

前列腺癌双侧睾丸切除结合氟他胺治疗后PSA谷值的意义

双侧睾丸切除结合口服氟他胺(Flutamide)是国内治疗前列腺癌常用的联合雄激素阻断方法,本文探讨了该疗法后前列腺特异抗原(PSA)的谷值(Nadir).

胰胆合流异常胆汁和血清淀粉酶的二维电泳

目的通过二维电泳分析胰胆合流异常(PBM)患者的胆汁和血清淀粉酶的等电点和相对分子质量(Mr).方法通过醋酸纤维素薄膜电泳,将正常人血清和PBM患者胆汁和血清中淀粉酶初步分离提纯,继经等电聚焦和SDS-PAGE二维电泳,测定淀粉酶同工酶的Mr和等电点.结果在醋酸纤维素薄膜电泳中,淀粉酶泳动在γ球蛋白负极侧,显示出2条谱带.在二维电泳中,正常人血清淀粉酶的2个同工酶分别是等电点pI6.4(Mr≈54×103)和等电点pI6.7(Mr≈55×103)的两个点:PBM患者胆汁和血清中,存在6个淀粉酶同工酶点,除了上述正常人血清淀粉酶的两个主要点之外,在pI6.8和pI7.2分别出现Mr≈55×103两个新点,在pI6.0和pI6.2分别出现Mr≈53×103～54×103的两个新点.结论在PBM患者胆汁和血清中,淀粉酶存在6种同工酶,这一系列同工酶的Mr都接近正常的55×103,而等电点分布在pI6.0到pI7.2之间的6个点上,而正常人血清淀粉酶只存在两种同工酶.

整合素β3反义寡核苷酸抗小鼠妊娠的作用

目的探讨整合素β3反义寡核苷酸(ASODN)活体转染假孕小鼠子宫内膜抗早孕的可能性.方法将整合素β3反义寡核苷酸注入假孕1 d小鼠子宫,同时同侧输卵管植入2细胞期受精卵10枚,小鼠正常饲养,5 d天取小鼠子宫内膜进行Western Blotting检测整合素β3蛋白表达情况;19 d进行小鼠子代出生率评估.结果Western blotting检测5 d小鼠子宫内膜整合素β3蛋白强表达,10 pmol整合素β3反义寡核苷酸转染假孕小鼠子宫内膜后5 d小鼠子宫内膜整合素β3蛋白减弱表达,100pmol整合素β3反义寡核苷酸转染时弱表达,单纯脂质体轻度影响其表达;19 d进行小鼠子代出生率评估,受孕鼠转染整合素β3反义寡核苷酸后子代小鼠出生抑制率为85%.结论整合素β3反义寡核苷酸可能整合到假孕小鼠子宫内膜抑制其蛋白表达,阻止胚胎着床.由于例数较少,其整合素β3反义寡核苷酸后抑制子代小鼠出生率需进一步研究.

未成熟树突状细胞联合骨髓移植诱导肾移植大鼠免疫耐受及其机制

目的供体来源未成熟树突状细胞输注联合骨髓移植,诱导异体肾移植大鼠产生免疫耐受,并探讨其机制.方法肾移植大鼠分为5组:阴性对照组、未成熟树突状细胞组、骨髓移植组、联合诱导组、环磷酰胺组.51Cr释放实验测定大鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)细胞毒效应;ELISA检测脾细胞培养上清IL-4、IFN-γ、TGF-β水平.结果阴性对照组肾移植大鼠的平均存活时间(MST)为(7.12±1.25)d,未成熟树突状细胞组为(24.38±3.20)d,骨髓移植组为(7.87±2.1)d,环磷酰胺组为(18.13±2.36)d,而联合诱导组延长到(80.75±16.88)d,与上述4组比较,均存在显著性差异(P＜0.01).耐受组大鼠(CTL)杀伤率低于排斥组(4.3±1.0)vs(39.6±4.4),(P＜0.01).耐受组大鼠脾细胞培养上清IL-4和TGF-β水平为(185.44±32.17)ng/L和(716.82±197.62)ng/L,高于排斥组(P＜0.01);而IFN-γ水平为(532.78±34.54)ng/L,低于排斥组(P＜0.01).结论术前供体来源未成熟树突状细胞输注联合骨髓移植,可成功诱导受体大鼠产生免疫耐受,其机制可能与特异性CTL无能及TH1/TH2/TH3细胞因子网络的免疫偏离有关.

含Triclosan和Sodium Monofluorophosphate 新型牙膏对牙菌斑量和唾液中变异链球菌数的影响

目的评价一种含0.3%Triclosan和1.1%sodiummonofluorophosphate(SMFP)新型牙膏抑制牙菌斑和唾液中变异链球菌数的效果.方法对239名12-13岁学生进行为期6个月的临床检查,在首次及以后的第3个月和第6个月进行.检查内容包括牙菌斑计数和唾液中变异链球菌数的检测.结果(1)与对照组相比较,实验组3个月和6个月后的牙菌斑计数有很明显的降低,两组间有显著性差异(P分别为0.016和0.047).(2)两组唾液中变异链球菌数在6月后均有明显降低,但无显著性差异(P=0.41).结论含0.3%trielosan和1.1%SMFP新型牙膏能显著抑制牙菌斑的形成.

中药治疗溴隐亭致大鼠流产模型中HB-EGF对滋养细胞增殖的影响

目的探讨中药治疗自然流产中滋养细胞肝素表皮生长因子(HB-EGF)、核增殖抗原(PCNA)的表达及相关性分析对滋养细胞增殖的影响.方法中药治疗溴隐亭致SD大鼠流产模型组,另设黄体酮、外源性泌乳素(PRL)治疗模型;单纯模型、正常孕鼠、非孕鼠为对照组,各12只;于孕12 d处死观察妊娠结局.通过RT-PCR及免疫组化观察各组胎盘、子宫内膜HB-EGFmRNA及PCNA的表达,电镜观察微绒毛变化.结果中药与黄体酮、外源性PRL治疗组及正常孕鼠组胎盘HB-EGF和PCNA无显著差异,微绒毛结构正常;上述4组胎盘PC-NA显著高于模型组,模型组微绒毛结构消失;模型组HB-EGF不表达,动情期子宫内膜HB-EGF显著高于上述4组;PCNA与HB-EGF正相关.结论(1)HB-EGF和早孕期滋养细胞的增殖明显相关.(2)中药可能通过自分泌或旁分泌增加滋养细胞HB-EGF表达,增强滋养细胞的增殖及侵入和对缺氧的耐受.

基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化

目的以基因工程酵母表达的胞内D-氨基酸氧化酶(DAAO)为原料,通过破细胞,分离纯化DAAO.方法采用机械研磨,反复冻溶,超声波等多种方法破细胞,获得粗酶液,硫酸铵分段沉淀.沉淀透析后,经DEAESephadex A-50,DEAE-DE52,Q-sepharose等离子交换柱进行第一步分离,获得的含酶粗品,再经SephacrylS-100分子筛进一步纯化获得电泳纯的DAAO.结果超声波破壁为佳的破壁方法,得到的每毫升酶液所含的酶活力是其他破壁方法的两倍以上,高达到12 000 U/mL.两步硫酸铵沉淀能粗分DAAO,50%硫酸铵沉淀酶回收率可达85%以上.用Q-sepharose、Sephacryl S-100分子筛柱层析两步纯化,酶活力回收率高可达90%,SDS-PAGE显示单一蛋白条带.结论本实验方法能得到电泳纯的DAAO,总回收率约为40%.

分子流行病学的研究设计

分子流行病学应用先进的分子生物学实验技术检测生物标志物,从分子水平阐明疾病的病因、致病过程及发病机制,打开了传统流行病学中的"黑匣子",为病因学研究和预防措施评价开辟了新的途径.而同时作为一门交叉学科,它具有与传统流行病学不同的研究设计特点.因此,本文将主要介绍如何在流行病学研究设计中应用生物标志物.