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天螺多糖抑制HBV复制的体外实验研究
天螺多糖是我院首次以天螺(江西巴蜗牛,Bradybana.Jiangxinensis)为原料采用溶剂提取法制取的生物活性物质[1].为进一步了解天螺多糖的药理活性及其细胞毒性,我们以HBV转染的人肝癌细胞2.2.15细胞株为靶细胞,通过细胞培养实验观察其对HBV-DNA复制的抑制作用.
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载脂蛋白M基因真核表达载体构建及其对HBV复制的影响
载脂蛋白(apolipoprotein,apo)是脂蛋白中的蛋白成分,主要由肝细胞合成,是正常脂蛋白颗粒的装配和分泌所必需的.载脂蛋白M(apoM)是高密度脂蛋白(HDL)胆固醇的主要成分之一,参与HDL的合成和分泌[1].研究表明HBV感染患者apoM血清学水平升高[2],但apoM能否影响HBV的复制还不清楚.本研究通过构建apoM的真核表达载体,探讨apoM对HBV复制的影响.
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对陈华根读者来信的回复
编辑同志:陈华根同志的读者来信已收悉,现答复如下:HBsAg是乙肝病毒S基因表达的一种包膜蛋白,尽管其本身没有传染性,但由于是HBV感染后先出现在血清中的病毒抗原,在慢性乙型肝炎患者血液中长期存在.现认为血液中HBsAg的水平与肝脏中HBV复制模板--cccDNA水平有良好的相关性~([1]),因此对HBsAg的检测具有非常重要的临床意义.
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HBx及其截短体在乙型肝炎病毒复制中的作用
HBV感染作为引起慢性乙型肝炎、乙肝后肝硬化、原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的起始因素,已成为世界性的健康问题.据统计,目前世界上已有超过5亿人感染HBV,每年有1百万人死于乙肝相关疾病.HBx蛋白作为HBV的一个多功能调节蛋白,已被证实在HCC的发生过程中起了重要作用.近年来,关于乙肝病毒X蛋白(HBV X protein,HBx)影响HBV的复制研究也有了一定的进展.同时,越来越多的HBx截短体在肝病发展过程中的作用也被重视.本文将对HBx及其截短体在HBV复制中的作用作一综述.
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肝细胞核因子4α和3β在人主要器官中的表达
目的:观察肝细胞核因子4α(Hepatocyte Nuclear Factor 4α,HNF-4α)和HNF-3β在人主要组织器官中的表达情况,为进一步探索这两个因子与慢性乙型肝炎患者HBV复制之间的可能关系提供理论基础.方法:采用免疫组织化学染色方法检测HNF-4α和HNF-3β在14例尸解标本的主要器官(肝、脑、肺、肾、心、脾、肠、胰腺、胃和甲状腺)中的表达情况.结果:HNF-4α和HNF-3β在10个器官的表达情况不同(HNF-4α:F=22.479,P<0.01;HNF-3β:F=13.021,P<0.01).HNF-4α在肝、肾、心、脾和肠中呈高水平表达,在肺和甲状腺呈低水平表达;HNF-3β在肝、肾、心和胰腺中呈高水平表达,在脾、肺、肠和甲状腺中呈低水平表达;HNF-4α和HNF-3β在脑、胃、阑尾、胸腺、肾上腺和扁桃体中均不表达;上述HNF-4α和HNF-3β高表达组和低表达组的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),而高表达组各器官之间的表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:人体各组织中HNF-4α与HNF-3β的表达水平不同,在肝脏的表达水平较高,这提示二者有可能参与了HBV的组织特异性复制.
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利用肝癌细胞系研究HBV的新进展
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)属嗜肝DNA病毒科.一般可采用原代肝细胞或肝癌细胞系对HBV复制进行体外研究.由于原代肝细胞来源困难、存活时间短,而肝癌细胞系具有来源方便、操作简便、条件可控和可重复性等优点,是研究HBV的理想工具.
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恩替卡韦治疗慢性重型乙型肝炎疗效观察
慢性重型乙型肝炎肝功能损害严重,病情发展迅速,并发症多,病死率较高.恩替卡韦是新一代的核苷类抗病毒药物,具有良好的抑制乙型肝炎病毒的作用,部分慢性重型肝炎患者血清HBV DNA水平较高,通过抑制HBV复制,可以改善慢性重型肝炎患者的病情及阻断发病过程,预防病情反复,促进恢复.
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干扰素β-1α治疗拉米夫定失效慢性乙型肝炎10例临床观察
拉米夫定(lamivudine,LVD)是第一代抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)口服药,可有效抑制HBV复制、改善临床症状和肝脏组织学病变[1,2],但长期应用所导致的耐药性是一个令人困扰的难题,急需探索对策.
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乙型肝炎病毒感染患者的丁型肝炎标志的检测
目的了解乙型肝炎病毒(HBV)感染者中丁型肝炎病毒(HDV)感染情况.方法对30例肝癌和40例肝硬化患者HBV复制 标记和HDV感染标志的检测.结果慢性肝病患者中HDV感染率为17. 4%,肝癌患者HDV检出率低于肝硬化患者,在HBV复制阳性组中HDV检出率为3.33%,阴性组为 27.5%,两者差异有显著性(P<0.01).结论 HDV 感染抑制了HBV的复制,通过检测发现肝硬化病情加重的原因与HBV活跃复制及HDV重叠感染 有关,而肝癌病情恶化与HBV复制活跃及HDV重叠感染关系不大.
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HBeAg阴性慢性乙型肝炎的研究进展
乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球面临的一个重大公共卫生问题,全世界超过20亿人曾感染HBV,其中3.5亿为慢性HBV感染者,慢性HBV感染者中约有15%~40%会发展成肝硬化(LC)、肝衰竭和原发性肝细胞癌(HCC),致使每年几乎有100百万人死亡[1].过去人们认为HBeAg阳性提示HBV复制活跃,传染性强,HBV DNA水平高;当HBeAg阴转或伴有抗Hbe阳转时,则HBV DNA水平下降或消失,传染性小,同时伴肝脏炎症减轻或消失,表现为转氨酶正常,是病情趋于稳定的状态.
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乙型肝炎病毒的基因变异及其检测
拉米夫定是一种慢性乙型肝炎抗病毒治疗新药,具有很强的抑制HBV复制的作用.但由于其抑制病毒复制作用短暂,停药后易于复发,因此需要长期用药,然而长期服药治疗可引起HBV DNA多聚酶活性区核苷酸序列的变异,称为YMDD变异.因此,选择和建立简便、快速、特异并适合临床应用的实验方法用于检测YMDD的变异,对及时调整治疗方案、合理用药及提高疗效具有重要意义.
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慢乙肝患者HBsAg定量与HBV DNA和HBV cccDNA含量的相关性分析
血清中的乙肝病毒脱氧核糖核酸( HBV DNA)是乙肝病毒(HBV)感染直接的证据,检测其阳性提示HBV复制和有传染性;而肝细胞核内的HBV共价闭合环状DNA( HBV cccDNA)则是HBV前基因组RNA复制的原始模板,只有清除了肝细胞核内的HBV cccDNA,才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态.然而血清HBV DNA和肝组织HBV cccDNA检测价格昂贵、操作繁琐,不适宜普遍开展;近年来有研究表明,血清HBsAg定量与血清HBV DNA和肝组织HBVcccDNA含量有一定的相关性,可用于临床诊断与治疗检测[1,2].本文就其相关性进行初步研究,旨在将血清HBsAg含量指标应用于HBV复制状态和临床治疗效果的评价中.
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乙型肝炎病毒感染孕妇孕期及产后病毒载量与抗原表达的动态变化
目的:探讨妊娠对乙型肝炎病毒(HBV)感染孕妇病毒复制及抗原表达的影响.方法:选取2008年9月~2014年3月孕前肝功能正常的371例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性孕妇为研究对象,本研究共有5个不同的采血时期,分别为孕中期(孕25~ 28周)、分娩时(分娩前后各2天)、产后6~8周、产后7~12个月及远期随访[平均(4.8±1.1)年],每例孕妇至少观察两个时间点.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HBV血清学标志,采用实时荧光定量PCR法检测HBVDNA水平,应用S基因测序确定病毒基因型.结果:371例孕妇中,34例乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性孕妇在孕期或产后出现谷丙转氨酶(ALT)升高;孕中期或分娩时HBV DNA水平及HBsAg浓度与产后7~12个月比较,差异均无统计学意义(P>0.05),仅HBeAg浓度在产后7~ 12个月有所降低(P<0.05).337例ALT正常者中,77例孕中期HBeAg阳性孕妇及其产后7~12个月的HBV DNA均为7.94 log IU/ml,HBsAg分别为4.54 log IU/ml和4.61 log IU/ml,HBeAg分别为3.10 log S/CO和3.09 log S/CO (P>0.05).70例分娩时HBeAg阳性孕妇及其产后7~ 12个月的HBV DNA分别为7.73 log IU/ml和7.98 log IU/ml,HBsAg分别为4.46 log IU/ml和4.59 log IU/ml,HBeAg分别为3.09 log S/CO和3.08 log S/CO (P>0.05).173例HBsAg阳性孕妇孕中期与远期随访比较,其中HBeAg阳性28例,HBV DNA分别为8.06 log IU/ml和7.95 log IU/ml(P=0.973),HBsAg分别为4.82 log IU/ml和4.79 log IU/ml(P=0.062),HBeAg分别为2.96 log S/CO和2.94 log S/CO (P=0.414);另145例HBeAg阴性孕妇孕中期与远期随访比较,其中HBV DNA分别为2.62 log IU/ml和2.82 log IU/ml(P=0.171),HBsAg分别为3.45 log IU/ml和3.44 log IU/ml (P=0.055).此外,对17例肝功能正常孕妇孕中期、分娩时、产后6~8周及产后7~12个月的动态观察结果显示:其HBV DNA水平在不同时期均无明显波动,HBsAg及HBeAg浓度也无明显变化(P>0.05).结论:不论肝功能正常与否,HBsAg阳性孕妇在不同孕期及产后时期,血清中HBV DNA水平和病毒抗原浓度均无明显变化,说明妊娠对HBV感染者体内病毒复制以及抗原表达无显著影响.
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前S1蛋白在HBeAg阴性乙型肝炎患者中的临床价值
前S1蛋白(PreS1)位于乙肝病毒外壳的外面,含有肝细胞膜受体,在乙肝病毒附着和侵入人体肝细胞的过程中起重要作用[1],PreS1阳性和HBeAg阳性均被认为是HBV复制的标志,但不少临床标本显示两者并非完全一致.
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慢性乙肝患者未经抗病毒治疗HBV DNA的动态观察
FQ-PCR法检测血清HBV-DNA水平是反映HBV复制的可靠指标.一般认为HBV-DNA载量高低对病情的临床严重程度没有影响[1].
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替比夫定治疗乙型肝炎肝硬化96周疗效观察
在我国,乙型肝炎病毒(HBV)是导致肝炎后肝硬化常见的原因,有研究表明,HBV复制活跃的乙型肝炎肝硬化患者,更易发生肝功能衰竭或肝细胞癌,而抗病毒治疗抑制HBV复制,是控制病情进展的关键[1].替比夫定对HBV有抑制作用,本研究通过口服替比夫定治疗92例乙型肝炎肝硬化初治患者,观察其临床疗效及肝纤维化指标改变情况.资料与方法一、病例资料所有病例来自2008年1月至2009年1月在本院住院或门诊治疗的乙型肝炎肝硬化患者共92例,(其中HBeAg阳性者63例),女28例,男64例,年龄20~65岁,平均(34.1±6.4)岁,诊断符合《慢性乙型肝炎防治指南》标准[2],且(1) HBVDNA阳性;(2)除外甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染;(3)无吸毒、嗜酒、药物、输血及自身免疫性疾病等;(4)首次抗病毒治疗.
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应用巢式-实时定量PCR方法检测慢性乙型肝炎患者PBMC中HBV cccDNA
乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA( HBV cccDNA)是HBV复制的原始模板,是HBV持续感染的关键因素.外周血单核细胞(PBMC)中HBV cccDNA的存在状态及动态变化成为研究HBV肝外分布及复制问题的热点.诸多研究证实,PBMC中存在HBV DNA,但是否存在HBV复制模板HBVcccDNA及复制过程,却有不同意见.国内外学者进行大量探索,建立了许多方法用于检测乙型肝炎患者PBMC等标本中HBV cccDNA,但因方法的特异性和敏感性不够高,重复性欠佳,迄今尚无可靠的检测方法和商品化试剂[1-3].本实验建立巢式-实时荧光定量PCR方法,用于检测慢性乙型肝炎患者PBMC中HBV cccDNA,并初步分析PBMC中HBV cccDNA的存在状态及临床意义,探索研究HBV复制状态、指导临床诊断和治疗的新方法.
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恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎96周的疗效评估
我国现有的慢性HBV感染者约9 300万人,其中慢性乙型肝炎患者约2 000万例[1],每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC)[2-3],抗病毒治疗可控制慢性乙型肝炎(CHB)发作和疾病进展已成为共识.口服核苷(酸)类抗病毒药的研发成功为治疗CHB提供了新的武器.恩替卡韦(ETV)是近批准新一代的抗HBV环戊基鸟嘌呤核苷类似物,在体外和动物模型中有很强的抑制HBV复制的作用,自2007年在国内上市以来,因疗效肯定、服用方便、不良反应小在临床上得到了广泛应用.本研究采用恩替卡韦治疗HBeAg阳性CHB取得了较好疗效,现报道如下.
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树突状细胞在乙型肝炎病毒感染中的作用
树突状细胞(dendritic cell,DC)能有效地激活并诱导初始T细胞分化,是机体免疫反应的始动者,在免疫应答或免疫耐受中具有独特地位.大量研究证实慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者中,DC表型及功能存在不同程度的损伤,影响DC对HBV各种抗原的提呈及免疫激活反应,从而使机体免疫耐受致慢性化.如何有效活化DC抗原提呈及免疫激活能力,以抑制体内HBV复制成为新的免疫治疗热点.
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HBeAg阴性乙型肝炎患者前C区G1896A变异及其与前S1抗原的关系
HBV感染初期表现为血清HBV DNA水平升高,随之出现HBeAg;当患者体内出现抗-HBe时,血清HBeAg转阴,HBV DNA水平则会降低.然而,有部分HBeAg转阴的患者仍表现为慢性乙型肝炎(乙肝).有研究表明,前C区或核心启动子变异是导致HBeAg阴性慢性乙肝的原因之一,血清前S1抗原能敏感地反映体内的HBV复制情况[1-2].本研究使用分子信标技术来分析HBeAg阴性乙肝患者前C区变异率及其与前S1抗原的相关性.