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三叶因子1在胃黏膜中的表达及存在的分子形式
目的:研究三叶因子1在人胃黏膜中的表达及存在的分子形式,探讨其胃黏膜保护作用的分子生物学机制.方法:采用western-b1ot方法观察三叶因子1在人胃黏膜中的存在形式,并采用免疫组化方法了解三叶因子1在胃黏膜中的定位,比较其在胃溃疡周边及距周边5 cm外胃黏膜中的表达改变.结果:(1)三叶因子1在人胃黏膜中以三种形式存在:单聚体、二聚体及一种分子量约为21 kDa的TFF1与某种分子结合而成的复合物,其中,TFF1复合物的含量高.(2)三叶因子1主要在人胃体及胃窦黏膜上皮表面细胞胞质中表达,核周聚集较明显,越靠近腔面的细胞表达越强.(3)三叶因子1在胃溃疡周边黏膜的表达明显高于距溃疡周边5 cm外的黏膜(P<0.001).结论:三叶因子1主要在人胃体及胃窦黏膜上皮表面细胞胞质中表达,其与某种分子结合形成的复合物是TFF1在胃黏膜中存在的主要形式,这种TFF1复合物可能比TFF1单聚体及二聚体有更强的生物活性.TFF1在胃溃疡周边黏膜表达高于距溃疡周边5 cm外的黏膜,说明其在胃黏膜保护及修护方面具有重要的作用.
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不同载体表达核酶对HBV mRNA细胞内表达的阻断作用
目的:探讨多位点自剪切核酶及突变核酶对细胞内HBVmuRNA的切割作用.方法:构建5个不同的多位点核酶及突变核酶的真核表达载体,将他们分别与乙型肝炎病毒全基因序列共转染HepG2细胞,用ELISA,共聚焦定量及图像分析的方法观察多位点核酶在细胞内对HBV mRNA切割作用.结果:构建的真核表达载体在细胞内确可表达出多位点核酶,核酶及突变核酶在细胞内对HBV基因的表达均有抑制作用,不同表达载体的抑制率不同,以tRNA启动子的表达载体抑制效率高,达81%,突变核酶亦有部分反义RNA的抑制效果.结论:抗乙型肝炎病毒核酶在细胞内可抑制HBV基因的表达,不同表达载体其核酶的表达效率不同.
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Stat3反义寡核苷酸对人胃腺癌MKN45细胞相关信号传导影响的研究
目的:通过研究Stat3反义寡核苷酸对人胃腺癌MKN45细胞增生活性的影响,寻求胃癌治疗中相关信号传导途径的新靶点.方法:Stat3反义寡核苷酸是一种混合骨架寡核苷酸(MBO),采用脂质体介导的方式将其转染人胃腺癌细胞株MKN45;通过MTT法观察转染前后对细胞增生状态的影响;凝胶阻滞电泳(EMSA)和Western blot方法观察转染前后Stat3DNA的结合活性和磷酸化Stat3蛋白表达的变化.结果:Stat3反义寡核苷酸对MKN45细胞的增生有明显抑制作用;转染反义寡核苷酸后MKN45细胞中Stat3信号的组成性激活水平和磷酸化Stat3蛋白的表达分别下降了50.65%及78.86%.结论:Stat3反义寡核苷酸能显著抑制MKN45细胞中Stat3信号的传导,胃癌细胞株中活化的Stat3信号可作为胃癌治疗新的分子靶点.
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肝素对糖尿病大鼠肾小球转化生长因子β1及胞外基质表达的影响
糖尿病性肾小球硬化的实质是肾小球细胞外基质(ECM)的过度聚积.转化生长因子β(TGF-β)对ECM代谢起着重要的调节作用.有研究表明,肝素能抑制ECM的生成[1].为此我们运用免疫组化方法观察了糖尿病大鼠肾小球两种ECM成分,层粘蛋白(LN)、纤连蛋白(FN)的表达与TGF-β1的关系,以及肝素对其表达的调控,以进一步了解糖尿病肾病的发生机制及肝素是否对糖尿病肾病具有一定的防治作用.
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非小细胞肺癌间质纤维母细胞增殖活性及其意义
本研究采用免疫组织化学方法观察非小细胞肺癌间质纤维母细胞的增殖活性,探讨纤维母细胞增殖活性与肺癌生物学行为的关系.
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吸入糖皮质激素对支气管哮喘儿童半胱氨酰白三烯C4合成酶表达水平的影响
吸入糖皮质激素(ICS)是目前首选的支气管哮喘(简称哮喘)长期控制治疗用药,但部分哮喘患者尽管长期规律使用较高剂量ICS治疗,其病情仍迁延反复,推测可能与体内存在某些不能被糖皮质激素(简称激素)有效抑制的重要炎性介质有关.研究结果显示,全身使用或吸入糖皮质激素均不能有效抑制哮喘患者体内半胱氨酰白三烯(CysLTs)合成,且哮喘患者体内CysLTs水平的个体差异大[1-2].我们采用前瞻性和回顾性研究方法观察ICS对哮喘儿童CysLTs基因表达和分泌水平的影响,探讨体内CyaLTs水平与哮喘儿童ICS疗效的关系.
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胰岛β细胞功能损伤的代谢印迹
对于2型糖尿病患者而言,慢性高血糖可促进胰岛β细胞进行性衰竭,这一现象被称为葡萄糖毒性.然而,人类至今尚未全面了解慢性高血糖对胰岛β细胞自身代谢的影响.近,一项研究运用无偏差代谢产物分析方法观察了大鼠胰岛β细胞系INS1E暴露于高浓度葡萄糖下核心代谢模式的时间进程及其与胰岛素基因表达的关系.
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18F-FDG PET显像评价健康人空腹状态下心肌葡萄糖代谢
本研究采用18F-脱氧葡萄糖(18F-FDG)正电子发射型计算机断层( PET)显像的方法观察空腹状态下健康人心肌对18F-FDG的摄取情况,旨在观察空腹状态下健康人心肌对葡萄糖摄取的规律.
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nm23-H1基因产物表达与原发性胆囊癌生物学行为及预后的关系
nm23基因位于人17号染色体长臂(17q21.3),其产物为Mr 17×103的核苷二磷酸激酶(nucleotide diphosphokinase,NDPK),起抑制恶性肿瘤转移的作用,但也有与此不同的报道[1].目前nm23-H1与原发性胆囊癌转移扩散与预后的关系尚未定论.本文应用免疫组化方法观察了nm23-H1/NDPK在胆囊癌原发灶组织的表达情况,并探讨其与胆囊癌临床生物学行为与预后的关系.
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活性氧对膀胱癌树突状细胞调节的研究
我们通过细胞培养方法观察外源性活性氧自由基一氧化氮(NO)、羟自由基对膀胱癌患者树突状细胞(DC)刺激自体淋巴细胞增殖及对DC诱导细胞毒性T细胞(CTLs)杀伤膀胱癌细胞株T-24的影响,了解NO、羟自由基对DC递呈抗原功能的影响.现报告如下.
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组织蛋白酶D和层粘连蛋白在膀胱癌中的表达及意义
我们采用免疫组化方法观察膀胱移行细胞癌(BTCC)中组织蛋白酶D(CD)和层粘连蛋白(LN)的表达,探讨其在BTCC进展中的作用及判断预后的价值.报告如下.
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多沙唑嗪诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡机制的研究
我们采用体外实验方法观察α1受体阻断剂多沙唑嗪对人雄激素非依赖前列腺癌细胞株PC-3增殖的抑制作用,探讨其细胞凋亡的信号传导途径.
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MMP2、MMP9和TIMP1在膀胱癌中的表达及与预后的关系
采用免疫组化方法观察膀胱移行细胞癌(TCCB)组织中MMP2、MMP9和TIMP1的表达,探讨其在TCCB浸润、转移中的作用及预后价值。 材料和方法 TCCB标本51例,男38例、女13例,年龄28~81岁,平均51岁。肿瘤直径0.3~6.5 cm,初发肿瘤40例,复发性肿瘤11例(24次),复发次数2~6次。按TNM分期:Tis~T1 21例、T2 14例、T3 12例、T4 4例。
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P504S、p63、34β-E12抗体混合物在前列腺癌病理诊断中的应用
我们采用免疫组化方法观察α-甲酰基辅酶A消旋酶(AMACR,P504S)、P63、34β-E12抗体混合物在前列腺癌与良性增生的表达情况,探讨其在前列腺癌鉴别诊断中的作用.现报告如下.
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性激素受体及相关生长因子在前列腺基质细胞中的表达
我们采用半定量RT-PCR方法观察了性激素受体及相关生长因子在BPH体外细胞模型前列腺基质细胞中的表达,以及在前列腺基质细胞分化和逆分化中的表达变化.报告如下.
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膀胱肿瘤手术前后血清和尿液bFGF浓度监测的临床意义
我们采用ELISA方法观察22例膀胱肿瘤患者手术前后血清、尿液碱性成纤维生长因子(bFGF)浓度变化,探讨bFGF与膀胱肿瘤的关系.现报告如下.
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基质金属蛋白酶-2、9和Ⅳ型胶原在膀胱癌中的表达及意义
我们采用免疫组化方法观察膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中基质金属蛋白酶2和9(MMP-2,MMP-9)及Ⅳ型胶原的表达,探讨其在BTCC进展中的作用及判断预后的价值.报告如下.材料和方法收集我院1988~1995年间手术切除的膀胱癌石蜡包埋组织标本49例.男40例,女9例.年龄35~84岁,平均59岁.有随访结果者42例,随访时间3~120个月.除1例膀胱全切、1例手术无法切除者外,术后复发24例.初发肿瘤41例,复发8例.WHO分级:G1 14例,G2 23例,G3 12例.UICC-TNM分期:T0 1例,T1 24例,T2 10例,T3 7例,T4 7例.另取10例正常膀胱组织为对照.鼠抗人MMP-2,MMP-9,Ⅳ型胶原单克隆抗体(工作浓度1∶100)及SP免疫组化染色试剂盒均为美国Zymed公司产品,按说明进行操作.
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反义PCNA联合wt-p53基因转染抑制膀胱癌细胞生长的实验研究
我们通过共转染方法观察了反义增殖细胞核抗原(PCNA)联合野生型p53(wt-p53)基因对膀胱癌EJ细胞体外生长活性的抑制作用及其分子机制,现报告如下.
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基质金属蛋白酶及其组织抑制物表达与壶腹癌侵袭转移的关系
我们应用免疫组织化学方法观察壶腹癌中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)MMP-2、MMP-9及其组织抑制物(tissue inhibiton of metalloproteinase,TIM)TIMP-1和TIMP-2的表达,报告如下.
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直肠99mTcO4-门肠闪烁成像观察门奇静脉断流术对门静脉血液循环及门体分流的影响
本研究采用直肠99mTcO4-门肠闪烁成像方法观察门奇静脉断流术前和术后门静脉高压症患者的门静脉压力、门静脉血液循环及门体分流的情况.