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可溶性HLA-Ⅰ类分子与自身免疫性疾病
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子(HLA-A,B,C)是存在于细胞表面的异二聚体,由具有高度多态性的相对分子质量为44 000的重链和与之非共价结合的相对分子质量为12 000的β2M组成.人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类抗原除以膜抗原形式表达于几乎所有有核细胞和血小板的表面,还被发现在血清及其他体液中存在可溶形式,即可溶性HLA(soluble HLA,sHLA).1970年,Van Rood等[1]用淋巴细胞毒抑制试验在血清中检测到了HLA-A2,从而证实了HLA可溶性形式的存在.
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以噬血细胞综合征为主要临床表现的初发系统性红斑狼疮二例
噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)是以发热,肝、脾或(和)淋巴结肿大,全血细胞减少,肝功能异常和凝血障碍为临床特征,骨髓和淋巴结活检可见组织细胞吞噬红细胞、血小板及有核细胞.系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种累及多系统和脏器的自身免疫性疾病,在疾病过程中可并发HPS,且病情危重,临床上需及时诊断和治疗[1-3].
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腹膜透析患者自发肠穿孔诊治分析
持续性不卧床腹膜透析(CAPD)是尿毒症患者的主要治疗手段,其主要并发症为透析相关性腹膜炎,自发肠穿孔少见,早期很难与腹膜炎鉴别.近年我院收治3例,报告如下.病 例例1:患者,女,55岁,尿毒症行CAPD已4年半,原发病慢性肾炎.4年半前腹膜透析置管时采取直视下外科手术法,经腹直肌切口,使用标准Tenckhoff透析导管.1月前复诊时血压正常,血白蛋白36g/L,血红蛋白100 g/L.因“下腹疼痛2h、放出腹透液混浊”入院.查体:体温37℃,血压200/80 mmHg,表情痛苦,强迫屈曲位,腹部轻度膨隆,轻度肌紧张,全腹轻度压痛反跳痛,肠鸣音减弱.血白细胞7.4×109/L,中性粒细胞0.86,血红蛋白53g/L.腹水常规有核细胞6/μl,红细胞4 150/μl,涂片找到大量Gˉ杆菌和少量G+杆菌.
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慢性粒细胞性白血病加速期合并高钙血症肾功能衰竭一例
患者:男性,66岁.因乏力、腹胀2个月,于1998年2月10日入院.查体:脾大平脐,血常规:白细胞81.7×109/L,血红蛋白97 g/L,血小板282×109/L,幼稚粒细胞35%,未见原、早期粒细胞.骨髓象:骨髓增生明显活跃,粒红比明显增高14:1,粒系以中、晚幼粒细胞为主,占有核细胞的62%,原始细胞占有核细胞的3%,早幼粒细胞占有核细胞的4.5%.
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嗜酸粒细胞性胃肠炎2例
例1:患者,女性,40岁.因腹痛、腹泻、恶心、呕吐3个月加重伴腹水1个月入院.患者3个月前因饮食不当出现上腹灼痛,反复恶心,呕吐胃内容物,4~5次/d,量不多,自服吗丁啉无效,并出现阵发性脐周绞痛及腹泻,为黏液稀便或稀水样便,5~6次/d,量不多,无脓血便及里急后重,便后腹痛不缓解.在厂医院予氟哌酸等治疗效果不佳.1个月前腹痛加重, 伴腹胀、纳差,B超发现腹水,在某区医院“剖腹探查”发现有中等量腹水及阑尾红肿,腹腔未见占位病变,行阑尾切除术后关腹.术后腹泻加重,每日解稀水便10~15次,量约500 ~800 g,伴里急后重及频繁呕吐,经禁食及抗炎治疗2周无效.病人睡眠差,不能进食水, 体重减轻9 kg.对磺胺、环丙沙星过敏.查体:体温37.4 ℃,脉搏100次/min,呼吸20次/min,血压105/80 mm Hg,发育正常,营养较差,消瘦,神志清楚,精神不振,贫血貌,皮肤干燥,弹性差.皮肤黏膜无黄染及出血点,浅表淋巴结未触及.心肺无异常,腹平坦,无胃肠型及蠕动波,全腹压痛、反跳痛,无腹肌紧张,肝脾未及,移动性浊音阳性,肠鸣音6次/min.实验室检查:血常规白细胞4.2×109/L,嗜酸粒细胞0.13,嗜酸粒细胞计数0.7×109/L.便常规:稀水便,镜检(-),便培养(-),便集卵及找阿米巴(-) .腹水:比重1.035,细胞数4×109/L,白细胞1.8×109/L,嗜酸细胞占有核细胞73% ,李氏反应(+),ADA(-),癌细胞(-),细菌培养(-).胃B超:胃肠壁弥漫性增厚,蠕动慢,少量腹水,肝胆胰脾内生殖器未见异常.胃镜:胃十二指肠弥漫浸润性病变,蠕动慢, 胃腔小,胃液潴留.病理:黏膜慢性炎.十二指肠降部、幽门前区大弯侧、体下部小弯侧有嗜酸粒细胞浸润,多处40~50/HP.结肠镜:结肠黏膜水肿,轻度狭窄.病理:肠腺体正常,间质见大量嗜酸粒细胞浸润.小肠造影:小肠黏膜弥漫浸润性病变,肠蠕动减弱.病理 :空肠黏膜慢性炎,固有层中有散在嗜酸粒细胞浸润,多处30~40/HP.诊断为:嗜酸粒细胞性胃肠炎,经用泼尼松30 mg/d每日一次,并抗感染、保护胃肠黏膜治疗,10 d后症状明显缓解,将泼尼松逐渐减量,病情好转出院.
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单细胞凝胶电泳在放射医学中的应用进展
单细胞凝胶电泳技术(Single Cell Gel Electrophoresis Assay,SCGE),又称彗星试验(Comet Assay)或微凝胶电泳(Microgel Electrophoresis,MGE),它是在核酸沉淀法(Nucleoid Sedimentation)和晕圈分析(Holo Assay)及弱碱性条件下的单细胞凝胶电泳等检测技术基础上逐步发展起来的一种在单细胞水平检测哺乳类有核细胞DNA断裂的新技术.它主要包括Olive等(1984)建立的测定DNA双链断裂(dsb)的中性微凝胶电泳技术和Singh等(1988)建立的测定DNA单链断裂(ssb)的碱性微胶电泳技术.
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脐血有核细胞移植治疗脑卒中的动物实验
目的:脐血有核细胞中富含多系前体细胞,具备改善受损神经系统功能的潜能.为此建立阻塞性脑卒中动物模型,探讨脐血有核细胞移植对其治疗的可行性.方法:实验于2004-09/2005-05在深圳市宝安区人民医院动物实验室完成.①实验材料:脐带血取自足月新生儿,由深圳宝安血站研究室提供,产妇及其家属均签署知情同意书.SD清洁级成年大鼠80只,随机取20只作为正常对照组,另60只以电凝法建立阻塞性脑卒中模型.剔除运动功能障碍不典型鼠后,随机取5只作为模型观察,余鼠按1∶1随机分为细胞移植组和模型对照组,当出现单只为尾数时,将其分配在细胞移植组.②实验方法:无菌抽取脐血20 mL,加入乙二胺四乙酸抗凝,Ficoll法分离脐血有核细胞.造模后第10天,细胞移植组大鼠将头部固定,按前囟尾侧3.0 mm,中线旁1.5 mm,深度1.2 mm注入1011 L-1脐血有核细胞悬液5 μL,1 μL/min.模型对照组注射等量无细胞脐血清,正常对照组不给予任何干预.③实验评估:造模后4周,5只模型观察大鼠制作脑切片,行苏木精-伊红染色镜检.各组分别于细胞移植前、细胞移植后2,6周进行横木行走实验和触觉刺激试验,检测其运动和触觉功能的恢复.处死各组大鼠制作病理切片,免疫荧光检测脐血有核细胞在脑内生存和分化情况.结果:正常对照组、细胞移植组、模型对照组各20只、24只、24只进入结果分析.①阻塞性脑卒中模型大鼠病理特征:造模大鼠出现行为障碍,缺血部位出现中风囊,病理切片可见缺血坏死区等阻塞性脑卒中所致脑组织病理损伤.②运动和触觉功能测试:细胞移植前,细胞移植组与模型对照组大鼠的横木行走能力、撕胶纸能力均基本相似(P=0.05),且明显低于正常对照组(P<0.01).移植后第2周,细胞移植组大鼠两项能力均明显强于模型对照组(P<0.05),但仍低于正常对照组(P<0.01).移植后第6周,细胞移植组大鼠的横木行走能力明显改善,与正常对照组基本相似(P>0.05);撕胶纸能力仍低于正常对照组(P<0.01).③阳性细胞免疫荧光检测:细胞移植组进针注射部位存在大量抗人RNP/CD45双阳性完整细胞,并向大脑中线、皮层梗死部位迁移.所植入的细胞约2.95%表达胶质纤维酸性蛋白,3.41%表达神经特异性烯醇化酶.结论:移植人脐血有核细胞能有效改善阻塞性脑卒中大鼠的运动和触觉功能缺陷.
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有核细胞对淋球菌存活力的影响
目的观察不同浓度的淋球菌在有核细胞内外和体外的存活状况.方法白带标本在密闭保湿和开放干燥的环境下,分别在0、12、24、48 h接种于巧克力平板,另将淋球菌用生理盐水配成不同浓度的菌液与有核细胞悬液混合培养30 min、1 h、5 h,然后分别取不同时间段的混合培养液接种于巧克力平板.结果在密闭保湿状况下,白带标本中的淋球菌在中量时存活时间长,少量或大量时其存活力相对较低;在干燥状况下,淋球菌存活时间短;在菌量很少(10/ml)时,有核细胞可以吞噬淋球菌而导致淋球菌存活时间减少,但在菌量较多时(大于300/ml)时,有核细胞可以延长淋球菌存活时间.结论温暖湿润环境有利淋球菌存活;有核细胞对淋球菌既具有保护作用又有杀伤作用.
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嗜银相关蛋白染色在骨髓增生异常综合征诊断中的应用
我们采用AgNOR嗜银染色方法测定了骨髓增生异常综合征(MDS)、多种白血病、非白血病和正常人骨髓涂片有核细胞中的嗜银颗粒,将其结果报告如下.
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脂肪基质血管细胞群的分离:一项针对细胞群4种商用细胞分离系统的直接对比
背景与目的 在脂肪移植物中加入基质血管细胞群(stromal vascular fraction,SVF)细胞是一项用于改善脂肪移植可靠性的新技术.市场上有各种各样的用于分离SVF细胞的系统.因缺乏在标准环境下操作系统的性能数据,而缺少客观的性能评估.因此,对4种商用SVF分离系统的临床门诊手术环境下的操作表现进行前瞻性、盲性对照研究.方法 对4种不同的系统进行比较:①PNC's MultiStation;②CHA Biotech Cha-Station;③Cytori Celution 800/CRS System;④Medi-Khan's Lipokit with Max-Stem.从5例志愿者供体获取相同的脂肪抽吸物样本,用于评估系统的处理时间、活细胞产量、成分、残余物酶属性及生产费用.结果 平均处理时间的范围为88 ~ 115 min.可获取活性有核细胞量高的为Celution系统(2.41×105/g),其次为Multi Station(1.07×105/g).Lipokit和Cha-Station生产出较少的有核细胞,分别为0.35×105/g和0.05×105/g.Celution系统同样可以生产更多的内皮细胞,CD34+CD31细胞和脂肪来源干细胞(集落生成单位——成纤维细胞).观察残余物酶属性水平,Multi Station、Cha-Station和Lipokit分别是Celution的5.1倍、13.0倍和57.0倍.结论 紧缩所有系统均可生成大量可测得的SVF,但在数量、特性、获取活细胞的安全性方面存在明显差异.须行并列的临床研究,以确定此类差异的关联.
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142.组织干细胞
1.定义组织按相应的分化阶段分为①干细胞(stem cells);②前体细胞(progenitor cells/transit amplifying cells);③成熟细胞(mature cells)三类.组织干细胞或称躯体性干细胞,既有多分化能力,也保持未分化性的胚胎性干细胞特征.干细胞具有多分化能力的同时,也具有干细胞产生干细胞的自我复制能力.这样的由干细胞系统产生的细胞群有血细胞、皮肤表皮细胞、消化道黏膜细胞、睾丸生殖细胞等.干细胞占构成组织的全体细胞的比例很低,例如造血干细胞仅以有核细胞的1/100000的低比率存在.但是,利用多种单克隆抗体和干细胞特有的药剂排泄活性、荧光细胞分离技术(FACS),使分离干细胞成为可能.干细胞的细胞转化周期非常慢,该集团中一部分细胞进入细胞周期后,区别于前体细胞可显示出高的增殖能力.明确什么刺激使干细胞开始增殖、分化、子细胞的不均等分裂,或自我复制(birth)和细胞分化(death)两个不同的方向是由怎样的机制产生的是今后的课题.
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血清 CysC 测定在心力衰竭患者预后状况判定中的临床意义研究
血清胱抑素 C(CysC)广泛存在于有核细胞以及体液之中,属于半胱氨酸蛋白酶的竞争性抑制剂,在人体中的表达水平较为稳定,不受年龄、性别以及饮食习惯影响,对于肾小球的滤过率有很高的特异性以及敏感性评价价值[1]。相关研究表明,CysC 不仅可以反应心血管疾病发生以及发展的进程,还可以用于对预后的评价。为进一步研究血清 CysC 在心力衰竭患者预后中的临床价值[2]。分析了不同级别心力衰竭患者以及健康者的 CysC 水平,为临床预后判定提供依据。
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脾破裂脾切除术后10年高血小板症1例报告
病例摘要田某,男性56岁.2011年4月以皮肤软组织肿瘤来院手术,术前常规检查时发现:血小板高达1603×109/L,次日复查为1301×109/L,血常规见表1.腹部彩色多普勒超声检查:脾区未探及脾脏影像,肝、胆、胰腺未见异常.追询病史,十年前因交通事故脾破裂在当地公社卫生院行脾切除术,术后十年来身体健康,无血液系统或其他系统疾病,未进行体格检查.4月13日骨髓细胞学检查特征:①有核细胞增生活跃;②粒细胞系:占67.5%,粒细胞比例正常,形态无明显改变;③红细胞系:占16%,有核红细胞、成熟红细胞无明显形态学异常;④淋巴比例与形态正常;⑤全片找到巨核细胞100个以上,易见成堆血小板;⑥骨髓小粒细胞造血面积正常.血片分类:分叶核粒细胞比例增多,成熟红细胞形态正常,血小板成堆多见.检验诊断:考虑血小板增多症.
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HLA-B27平均荧光强度与强直性脊柱炎其它指标相关性分析
强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种慢性病程,以侵犯中轴关节为主,为类风湿因子阴性的脊柱关节病.属于自身免疫性疾病,好发于16-30岁的青年.HLA-B27表达在机体所有有核细胞特别是淋巴细胞表面.HLA 与疾病相关性研究资料表明,AS与HLA-B27强相关.
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CD45设门在流式细胞术检测急性白血病中的应用
流式细胞术(Flow cytometry)为急性白血病免疫分型诊断提供了一项重要依据,但由于传统的前向角/侧向角光散射设门法(forward scatter/side scatter,又称FSC/SSC)不能将白血病细胞与正常细胞特别是正常淋巴细胞区别开来,因此一般要求样本中原始幼稚细胞占全部有核细胞70%以上,才可对检测结果做出准确判断.
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45例儿童再生障碍性贫血骨髓像分析
1 临床资料①一般资料:45例再障均为本院儿科2 000 年门诊和住院诊治的患儿,男26例,女19例,年龄2~14岁,平均8.5岁.②方法:血像,全血常规检查2~3岁患儿耳垂采血,3岁以上抽静脉血抗凝,CD-1600电子血球计数仪自动计数 ;骨髓像,于髂前上棘进行骨髓穿刺,抽取骨髓液置于玻片上,常规涂片,常规涂片瑞氏染色,低倍镜下观察有核细胞增生程度,油镜下分类200个有核细胞,全片计数巨核细胞及观察血小板分布情况、骨髓小粒中的细胞成分,并注意各系统各阶段的细胞形态.③结果:a. 血像.
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左上腹巨大囊性肿物1例误诊分析
1 病历摘要 患者,男,53岁,病历号A88448,于1991年9月7日因上腹胀痛3.5个月,肿物48d入院。患者平素体健。骑自行车跌倒后发病,当即感左上腹隐痛,未治疗,10d后于当地医院就医,未明确诊断,对症治疗无效,且出现乏力,并逐渐加重,2个月后左上腹出现一鸭卵大小的包块。到营口市中医院就医,检查脾大,WBC 270×109/L,诊断为白血病,口服马利兰治疗,乏力减轻,WBC降至7×109/L,但左上腹包块逐渐增大,至入院时已达儿头大小。查体:肝大肋下3横指,质中等度硬,左上腹巨大肿物,上界位于左肋弓下,下界达髂嵴水平,囊性感,活动度欠佳,无触痛,未触及结节及切迹。辅助检查:WBC 6×109,Sg 0.62。钡透示胃向右前移位,呈垂直位与脊柱重叠,胃充盈良好,粘膜正常,无充盈缺损及龛影,十二指肠球呈三角形。入院前1周B超检查示肝脏形态、大小及内部回声正常,脾脏被压向左外上方,大小正常,左腹部有一巨大肿物,边缘光滑,上界位于肋弓内,下界达髂嵴,内侧已超越中线,肿物前后径17.6cm,其内部回声前部为液性,后部可见不规则实质性回声团声,表面不光滑,并略有浮动感;胰腺探查不清。诊断为腹部以液性为主并有混合成份的肿物,来源以胰尾可能性大(胰尾囊腺瘤或癌)。入院后2周复查B超:左上腹可见一肿物,上界在左锁骨中线第6肋间,下界至脐水平线下1.0cm,前后径13.5cm,肿物内呈液性为主的混合性回声反射,脾大小正常,似被肿物推向后方,肿物上界与肝左叶相邻,但并无明显粘连,肝上界位于右锁骨中线第6肋间,肋下1.0cm,剑突下3.0cm,肝内光点粗密,回声增强,分布均匀,但未见占位性病变,胆囊正常,胰腺探查不清,诊断为左上腹混合性肿物,不除外来自胰腺。骨髓涂片检查显示骨髓增生活跃,G/E为5∶1,粒细胞系增生活跃,约占有核细胞75.5%,其中晚幼粒比例偏高,形态大致正常,红细胞系增生尚可,形态大致正常,淋巴细胞比例减低,全片查到4个核细胞,血小板分布多见,呈慢粒缓解征象。入院诊断:胰腺假性囊肿。手术治疗,术中发现脾肿大,内侧越过正中线,下界达脐下,前缘上方部分为正常脾组织,其余均为囊肿改变,引出棕褐色液体约3 000ml,其内有坏死组织。行脾切除,术后病理:脾假性囊肿,病理号:109720。
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牡丹江市264例献血源弓形虫调查
弓形虫是人、畜共患传染病,弓形虫病分为两类:一类为先天弓形虫病,是孕妇感染.弓形虫可通过胎盘传染给胎儿,造成胎儿的组织、器官损害,所以孕妇早期感染常发生流产,晚期感染常发生早产或死胎.在侥幸出生的弓形虫病儿中常伴有脑积水、脑钙化、小脑症、脉络网膜炎、畸型及愚型等.二类感染病人称为获得弓形虫病,因为弓形虫在有核细胞寄生可造成任何器官的损害,没有本身感染的特异症状,因此不易和其他疾病鉴别.常见的有低热扁桃体炎、淋巴结炎、肺炎、肾炎、脑膜炎、心肌炎等.
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运用转基因技术研究卵巢内细胞凋亡的进展
1972年,Kerr等首先提出了apoptosis的概念[1].Apoptosis一词原意是指树叶从树上凋谢,用此来命名今天认识到的细胞凋亡现象.细胞凋亡又称细胞程序性死亡(Programmed Cell Death, PCD),是有核细胞在生理条件下,通过启动其自身的遗传机制,主要通过内源性DNA内切酶的激活,而发生的自动死亡过程.凋亡细胞有其明显的形态学和生物化学的特征[2].表现为:①细胞皱缩(cellshrinkage),此时细胞变小,胞浆致密,细胞器互相靠近.②核的致密化(chromation condensation)是凋亡细胞重要的形态特点.染色质浓缩,沿着核膜排列,形成不同形状和大小的块状,然后染色质逐步分裂为碎片.⑧与此同时细胞器也发生浓缩,失去水分.而后细胞膜下陷,包裹核碎片和细胞器,形成凋亡小体.凋亡细胞核DNA断裂成不连续的片段等重要特征.细胞凋亡不同于细胞坏死,后者是由于某些外界因素的影响,如各种理化损伤和生物的侵袭等引起细胞病理性死亡的过程[3].
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SYSMEX XN-2000血液分析仪在体液标本计数与分类中的应用
目的:探讨SYSMEX XN-2000全自动血液分析仪(简称XN-2000)在体液标本计数中的应用。方法收集76例患者的体液(胸腹水)标本,分别用XN-2000和手工镜检法对其进行有核细胞计数,以手工法计数结果为依据,将76例胸腹水标本分为≤199个/μL(A组)、200~999个/μL(B组)和≥1000个/μL (C组)3个组,并进行统计分析。结果 XN-2000与手工法有核细胞计数和分类结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 XN-2000能满足临床检测需求。