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大鼠胰腺组织神经胆碱酯酶、弹力纤维和胶原纤维的组合染色
目的:阐明大鼠胰腺组织中的神经胆碱酯酶与弹力纤维和胶原纤维等分布情况.方法:将大鼠断头处死后取胰腺组织,冰冻连续切片(厚度8 μm),选用Karnovsky-Roots和Victoria blue-Ponceau-Picric acid(简称K-R-VB-P-PA法)组合染色法观察其中神经胆碱酯酶、弹力纤维和胶原纤维的分布情况.结果:胰腺组织腺泡间隙、胰岛及其血管的神经胆碱酯酶呈棕红色,弹力纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈淡红色,平滑肌纤维呈黄色.结论:K-R-VB-P-PA组合染色法,能够同时观察到胰腺组织中的神经胆碱酯酶、弹力纤维、胶原纤维和平滑肌纤维的分布情况及其相互伴随关系.
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盆底器官脱垂患者主要支持韧带中雌激素受体GPR30表达的研究
目的·研究盆底器官脱垂(POP)患者子宫圆韧带及主韧带中雌激素受体GPR30及支撑组织细胞外基质(ECM)主要成分的表达情况.方法·选取22例POP患者(POP组)和10例子宫颈上皮内瘤变Ⅲ级患者(对照组)作为研究对象.收集子宫切除标本,采用Western blotting及免疫组织化学方法,对子宫圆韧带及主韧带组织中GPR30及弹性蛋白(elastin)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、ColⅢ的表达进行检测.结果·Western blotting检测及免疫组织化学评分结果均显示POP组患者子宫圆韧带及主韧带组织中GPR30、elastin、ColⅠ和ColⅢ的表达显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论·POP发生可能与相关组织中雌激素受体缺乏、胶原蛋白的含量下降、elastin减少有关.GPR30是否参与盆底支撑组织ECM主要成分的合成、分泌及降解,有待进一步的深入研究.
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慢病毒载体介导RNA干扰LOX表达对人阴道壁成纤维细胞弹性蛋白、基质金属蛋白酶2表达的影响
目的 探讨人阴道壁成纤维细胞中赖氨酸氧化酶(lysine oxidase,LOX)的表达在盆腔器官脱垂发生中的可能机制.方法 选取绝经前、后无症状对照组的阴道前壁组织,用酶消化+组织块培养法分离培养成纤维细胞,细胞免疫荧光法对细胞进行鉴定.针对LOX基因,设计并构建4个慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV),分别转染HEK-293T细胞,Real-Time PCR检测LOX的表达情况,筛选出其中1个干扰效率高的LOX-RNAi-LV,将其包装成慢病毒并测定效价,将慢病毒感染人阴道壁细胞,Real-Time PCR检测细胞中弹性蛋白和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA表达水平.结果 培养出绝经前、后无症状对照组的阴道前壁成纤维细胞各4例,成功筛选出了具有较高干扰效率的LOX-RNAi-LV并成功包装入慢病毒,感染慢病毒的人阴道前壁成纤维细胞,弹性蛋白表达均降低,MMP-2表达均增高,差异有统计学意义.结论 LOX-RNAi-LV慢病毒感染后的人成纤维细胞弹性蛋白表达降低,MMP-2表达增高,因此推测LOX对弹性蛋白和基质金属蛋白酶2的表达有调节作用.
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LOXL-1与盆底器官脱垂的关系
盆底器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)是以盆底支持组织薄弱为特性的一类功能障碍性疾病,其发生是一个复杂的过程.盆底组织内弹性纤维结构或功能异常可直接导致POP的发生.类赖氨酰氧化酶-1(lysyl oxidase-like protein-1,LOXL-1)是弹性蛋白保持正常结构功能的关键酶.LOXL-1缺失或功能障碍,将导致弹性纤维功能紊乱,从而引起POP.本研究就LOXL-1在POP发生机制中的作用进行综述.
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蛋白多糖在衰老过程中的生化改变
生物体在衰老过程受遗传因子的影响,然而环境和代谢所造成的长年累月的损伤,种种生化副反应引起的变化,更造成许多明显的不可逆转的组织老化性状,例如氧自由基和糖基化过程造成的血管硬化和脂褐素堆积等.许多长寿蛋白如胶原蛋白、弹性蛋白以及蛋白多糖会在生物体的衰老过程中逐步出现由量变到质变,引起一些与衰老相关的明显的病理生理现象,而这些变化往往构成了衰老过程中机体组织的结构与功能改变的基础[1,2].本文重点介绍和归纳蛋白多糖在衰老过程中的一些主要生化改变.
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弹性蛋白酶抑制剂对动脉损伤后血管平滑肌细胞的作用
目的 探讨弹性蛋白酶抑制剂对大鼠颈动脉损伤后内膜增厚的影响.方法 球囊导管损伤Wistar大鼠颈总动脉内皮,治疗组每日一次给予弹性蛋白酶抑制剂,模型组给予同等剂量的溶剂,空白对照组注射等量的生理盐水.于损伤10d时测定颈总动脉内膜细胞数及面积,用原位末段缺口标记法检测内膜细胞凋亡指数.结果 球囊损伤10d后,模型组颈总动脉内膜面积增厚,平滑肌细胞数增多,凋亡指数下降.治疗组较模型组,内膜面积及平滑肌细胞数减少,凋亡指数大幅上升.结论 弹性蛋白酶抑制剂能够有效抑制损伤后平滑肌细胞的增殖,诱导平滑肌细胞的凋亡,从而抑制血管损伤后内膜的增厚.
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弹性蛋白和Ⅰ型胶原α2基因多态性与颅内动脉瘤
颅内动脉瘤主要由动脉管壁局部缺陷和管腔内压力增高所致。未破裂的小动脉瘤一般无症状,而破裂动脉瘤则可引起蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)。颅内动脉瘤的病因和发病机制迄今尚不完全清楚。大量证据表明,颅内动脉瘤是环境因素与多基因共同作用的复杂性疾病。文章对弹性蛋白(elastin, ELN)和Ⅰ型胶原α2(colagen type Ⅰα2, COL1A2)基因多态性与颅内动脉瘤的联系进行了综述。
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弹性纤维与皮肤衰老
成熟的弹性纤维主要由弹性蛋白、原纤维蛋白微纤维及与弹性纤维有关的蛋白组成.内源性老化的皮肤弹性和柔韧度降低,弹性纤维网断裂和衰退.光老化皮肤不仅是富含原纤维蛋白的微纤维在表皮真皮交界处丢失,弹性蛋白变性,更重要的是在真皮深层混乱的弹性纤维蛋白物质的沉积,弹性蛋白的功能也受到影响.弹性纤维的修复可归纳为促进组成蛋白表达、改善组装条件、减少破坏因素3方面.
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持续被动运动对兔膝关节损伤后侧副韧带内弹性蛋白表达的影响
目的:观察持续被动运动( continuous passive motion,CPM)对兔膝关节损伤后侧副韧带内弹性蛋白的影响。方法选取15只新西兰雄性大白兔造膝关节软骨全层缺损模型,术后按运动方式不同,随机分成3组即制动组、自由活动组, CPM组。6周后提取韧带采用蛋白免疫印迹法( western blotting)进行弹性蛋白的检测。结果制动组的膝关节出现不同程度的僵硬,功能出现障碍;三组弹性蛋白的表达量分别是制动组(0.84±0.25)、自由活动组(2.91±0.34)、CPM组(2.04±0.69)。自由活动组侧副韧带内弹性蛋白的表达高于制动组和CPM组,CPM组侧副韧带内弹性蛋白的表达高于制动组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 CPM和自由活动均可有效防止关节损伤后导致的韧带挛缩及关节僵硬,而自由活动效果更好。
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佳保健食物
①佳美容食物:美容专家瞩目以下食物:温开水,每天8~10杯,可使皮肤丰润光泽;绿色蔬菜,如苋菜、青菜等,含大量维生素与矿物质;西瓜、哈密瓜,既补充水分又供营养;瘦肉、鸡肉、鱼肉,提供丰富蛋白质和铁质;糙米、豆类,供给皮肤特殊养分;脱脂奶与低脂奶酪,热量低而含钙多,可柔软皮肤,强壮筋骨;柑桔类水果,含丰富维生素C,防面部微血管破裂与色素斑形成;猪皮,含胶原蛋白及弹性蛋白颇多,能增强皮肤弹性.
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LOXL1基因rs2165241C/T多态性与开角型青光眼易感性的meta分析
青光眼是眼科常见病,其中约50%为原发性开角型青光眼(POAG)。流行病学研究提示POAG有遗传背景。随着分子遗传学的发展,发现10多个与POAG发生有关的基因,其中LOXL1是研究较多的基因之一。该基因属于赖氨酸氧化细胞外酶家族,编码的蛋白质具有多种生物学功能,如弹性蛋白的产生与交联等,因而, LOXLl基因与弹性蛋白在睫状体、角膜、晶状体囊膜、虹膜、视神经等部位的表达相关。近年来的研究显示LOXL1基因rs2165241C/T多态性与开角型青光眼易感性存在一定的关系,但结果并不完全一致[1,2]。为此,本文采用meta分析对LOXL1基因rs2165241C/T多态性与开角型青光眼易感性关系做一系统评价。
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基质金属蛋白酶、TNF-α、IL-1β在腰椎管狭窄症中的表达和作用
腰椎管狭窄症(Lumbar spinal stenoSIS, LSS)的病因中包括黄韧带增厚及小关节的退变.黄韧带增厚的组织学变化中,黄韧带细胞外基质中的弹性蛋白的分解与纤维化是其中一个很重要的表现.
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肉苁蓉多糖对衰老小鼠肺蛋白含量与抗氧化功能关系的影响
使用D-半乳糖造成小鼠实验性衰老模型,观察肉苁蓉多糖对实验性衰老小鼠肺胶原蛋白、弹性蛋白含量的影响,对肺组织和红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)含量的影响。结果灌服肉苁蓉多糖的衰老小鼠的肺组织及红细胞中SOD、GSH-Px活力不同程度提高,肺及血浆中丙二醛含量有所降低。同时肺胶原蛋白含量减少,弹性蛋白含量增多。结论肉苁蓉多糖具有抗氧化性损伤和抗肺衰老的作用。
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幽门螺杆菌融合蛋白UreB-Omp11在大肠杆菌中的表达与纯化
近年来,研究者发现了多种Hp的有效保护性抗原成分,UreB、Omp、Hsp、NAP等,其中尿素酶、外膜蛋白等是人们研究的焦点.但它们单独免疫动物时,获得的免疫保护效果均不理想,为克服单一抗原分子诱导的免疫保护水平偏低的问题,本研究用重叠延伸PCR法将H.pylori郑州分离株MELHP27的ureB与omp11两个基因进行融合,中间加入弹性蛋白连接肽编码序列为接头,并通过设计合适的酶切位点,将融合蛋白插入原核表达载体pMAL-c2X中,使其融合表达,为Hp多价抗原基因工程疫苗的研究奠定基础.
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Fibulin-3在盆腔脏器脱垂子宫骶韧带中的表达
目的:研究Fibulin-3在子宫骶韧带组织中的表达以及与脱垂程度之间的关系。方法:应用实时定量RT-PCR和Western blot测定子宫脱垂组(POP组)46例和正常对照组28例子宫骶韧带组织中Fibulin0 mRNA及蛋白的相对表达量。结果:两组中Fibulin-3均有表达,POP组骶韧带中Fibulin-3 mRNA及蛋白表达均降低,POP组Fibulin-3mRNA表达水平为0.68±0.38低于对照组的0.96±0.44(P<0.05);POP组Fibulin-3蛋白表达水平为0.76±0.48低于对照组的1.14±0.52(P<0.05),且随脱垂程度的增加表达降低(P<0.05)。结论:Fibulin-3的表达与盆腔脏器脱垂的发生相关。
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绝经前盆腔器官膨出患者子宫主韧带中Elastin、LOX基因表达的研究
目的 检测女性盆底器官膨出(pelvic organ prolapse,POP)患者子宫主韧带中弹性蛋白(Elastin)和赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)表达水平,探讨Elastin、LOX基因与POP发生机制间的关系.方法 选择因POP而行全子宫切除术的绝经前患者42例,同期选择因妇科良性疾病、无压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)或POP行全子宫切除术绝经前患者27例作为对照.术中取子宫主韧带,采用逆转录一聚合酶链式反应(TR-PCR)法测定Elastin和LOX的mRNA表达,免疫蛋白印迹法(Western blotting)检测两种蛋白的表达.结果 POP组子宫主韧带中Elastin、LOX mRNA及其蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05),POP组患者子宫主韧带中Elastin与LOX mRNA 及蛋白表达水平呈明显的正相关(P<0.05).结论 POP患者子宫主韧带Elastin表达减弱影响弹性纤维形成,同时LOX表达减弱可通过影响胶原与弹性纤维的交联亦使盆腔支持结构稳定性降低,进而参与POP的发生.
关键词: 盆底器官膨出 弹性蛋白 蛋白赖氨酸6-氧化酶 -
细胞外基质产物的产生及其在调节细胞活性中的作用
细胞外基质是指分布于细胞外空间,由细胞分泌蛋白和多糖所构成的网络结构[1].长期以来,人们普遍认为,细胞外基质只是作为结缔组织细胞的框架而起作用.然而,随着研究的进展,人们发现,细胞外基质不仅仅是一种支持物,而且在调节细胞的活动中起到很重要的作用.例如,细胞外基质蛋白可为与之接触的细胞提供特别丰富的信号,从而调节细胞的各种执行功能.细胞外基质中的某些大分子可被部分水解,产生不同的肽,可调节细胞的活动,我们把它们称作matrikines[2].
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眼部皮肤防衰老对策
皮肤是人体大的器官,担负着保护、感觉、调节体温、分泌、排泄和免疫等诸多方面的作用.皮肤衰老是生物体发育成熟后,随年龄增长而渐进发生的、受遗传因素影响的、形态结构与生理功能不可逆的衰退过程.皮肤衰老的表现衰老皮肤的真皮层中成纤维细胞数量逐渐减少、合成胶原蛋白和弹性蛋白的能力下降,且Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的比例变小,胶原纤维变粗.此外,由于老化皮肤中黑素细胞数目明显下降,暴露于阳光下易受伤,导致脂褐质明显增加,呈现出老年斑和其他局部色素性改变.
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胶原蛋白的6个基本问题
胶原蛋白是常见蛋白质之一我们每天通过食物摄入各种各样的蛋白质,如乳清蛋白(来自奶类)、酪蛋白(奶类)、卵白蛋白(蛋类)、卵磷蛋白(蛋类)、大豆蛋白(大豆)、肌蛋白(肉类)、谷蛋白(大米和小麦)、麦胶蛋白(小麦)、白蛋白(肉类、肝脏和血液)、血红蛋白(血液)、弹性蛋白和胶原蛋白(动物皮、骨骼、筋等结缔组织)以及各种酶蛋白(动植物细胞).
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近距离小剂量放疗对血管平滑肌细胞纤黏连蛋白及弹性蛋白基因表达的影响
目的:探讨近距离小剂量放疗对血管平滑肌细胞(VSMC)纤维黏连蛋白(FN)和弹性蛋白基因表达的影响及其机制.方法:以7、14、28 Gy 60Co射线辐射培养的大鼠主动脉VSMC弹性蛋白及FN mRNA表达的影响·无辐射为对照组.结果:7 Gy放疗组对VSMC弹性蛋白及FN mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义,而14、28Gy放疗组FN mRNA分别为0.72±0.12和0.49±0.09,与对照组(0.95±0.07)比较差异有统计学意义(P<0.05).14和28 Gy辐射后细胞弹性蛋白mRNA水平分别为1.93±0.25及2.16±0.22,与对照组(1.07±0.11)比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:14、28 Gy60Co射线辐射可以抑制FN nRNA及加强弹性蛋白mRNA的表达.