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多层螺旋CT腹部血管成像及临床应用
多层螺旋CT血管成像(multidetector CT angiography,MDCTA)由于其良好的质量与独特的重组技术大大拓宽了腹部成像的应用范围.其图像质量已可与DSA媲美.由于仅需周围静脉穿刺,MDCTA几乎可视为无创性检查.笔者对200余例患者进行了腹部动脉与静脉系统MDCTA,现结合文献,介绍腹部MDCTA的技术与临床应用.
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多层螺旋CT重组技术在先天性支气管肺囊肿术前评估中的价值
目的 探讨多层螺旋CT重组技术在先天性支气管肺囊肿术前评估中的价值.资料与方法 对15例先天性支气管肺囊肿患者采用多层螺旋CT进行薄层扫描,并在工作站上对扫描数据进行支气管和肺的表面重组(SSD)和多平面重组(MPR),明确诊断以后,协同胸心外科医师根据肺部病灶的形态、部位、大小、数目、密度、范围、周边解剖关系、继发病变、肺功能可能受损情况等,从影像学角度评价手术切除的可行性,选择手术适应证.结果 15例先天性支气管肺囊肿中单发13例,多发2例;右肺11例.左肺4例.含气囊肿7例;含液囊肿3例;含气液混合囊肿5例.5例含气液混合囊肿与7例含气囊肿用支气管和肺SSD、MPR重组方式均能很好显示,3例含液囊肿则用MPR重组方式能良好地显示.15例患者经术前CT明确诊断和评估,实际手术治疗12例,成功切除11例.4例行单纯囊肿摘除术,6例行肺楔形切除术,1例行肺叶切除术,病灶均彻底切除.切除标本术后经病理证实.手术、病理情况与术前CT影像学评估一致.结论 多层螺旋CT的SSD、MPR重组技术是先天性支气管肺囊肿术前诊断的佳影像学检查方法,并且在外科术前评估中具有重要意义.
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MSCTA在评价颈动脉内膜斑块性TIA中的作用
短暂性脑缺血发作(transient ischemic attacks,TIA)是临床常见的神经系统疾病.TIA后脑卒中发病率及卒中致死率均明显增高.因此加强对TIA的研究,探讨其确切病因和发病机理对寻找有效的治疗途径、估计预后十分必要.颈动脉内膜斑块或粥样硬化斑块可引起TIA及脑卒中的临床症状[1].多层螺旋CT血管造影(MSCTA)及血管重组技术已应用于血管病变的诊断,在评价颈动脉粥样硬化内膜斑块引起的TIA中正逐渐显示其优势[2].
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64层螺旋CT血管造影三维及多平面重组在婴儿声门下血管瘤的应用
目的 探讨64层螺旋CT血管造影(MSCTA)三维(3D)多平面重组(multiplanar reconstruction,MPR)技术显示婴儿声门下血管瘤的价值.资料与方法 搜集行MSCTA增强扫描的10例声门下血管瘤患儿资料进行回顾性分析,观察瘤体外形、大小、交通血管及与气道的关系.结果 3D MPR清晰显示了10例声门下血管瘤的位置、形态、大小、范围以及与气道、周围组织的关系.结论 MSCTA 3D MPR技术对声门下血管瘤的定位,显示其大小、范围、与气道关系等方面具有优势,是声门下血管瘤急症发作期诊断及鉴别诊断的选择替代方法.
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冠心病基因治疗的基础与临床研究
近年来,随着细胞生物学及基因重组技术的发展,基因治疗冠心病的研究已取得很大的进展,一些成果已成功应用于临床[1,2],成为当今心血管领域研究的热点.本文就冠心病基因治疗的基础与临床研究作一简介.
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慢性乙型肝炎的治疗性疫苗研究进展
乙型肝炎病毒(HBV)感染是常见的感染性疾病之一,全世界大约有3.5亿的慢性HBV携带者[1].我国是HBV感染的高发区,其中HBV携带者约1.2亿人,25%的HBV携带者将死于乙肝相关疾病(门脉高压,肝功能衰竭和肝癌).闻玉梅等于1986年发现我国90%以上的乙肝患者肝内无病毒基因整合[2],提示乙型肝炎有治愈的可能.然而目前抗病毒治疗上常用的两个药物是干扰素和拉米呋啶,前者能使1/3的患者有持续性反应[3],拉米呋啶能迅速抑制病毒复制,但是停药后易反跳,用药后导致变异株的产生[4],两种药物治疗均使病毒进入低复制状态.因此,为了治愈乙型肝炎,需要探索其他的治疗途径.近年来,由于基因重组技术的发展与应用、免疫学理论和技术的新进展等使得利用疫苗来治疗慢性HBV感染成为研究的热点[5].
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PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合A-T丰富区的初步分离和鉴定
一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合,影响多种基因的转录.目的:分离和鉴定PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合的A-T丰富区,并初步分析其功能.方法:DNA重组技术和凝胶迁移率改变法(EMSA).结果:重组人HMGI蛋白(rHMGI)可与PDGF-B链基因上游序列结合.在-1758/+43 bp片段内至少存在两个与HMGI结合的A-T丰富区,其中一个位于-190/+43 bp片段内,可能是涉及TATA盒在内的TTTATAAA,另一个位于-1304/-990 bp内,该区有两个TTTATAAA序列.被蛋白激酶C和CDC2激酶磷酸化的rHMGI与-1304/990 bp片段内A-T丰富区的结合活性明显减低,但未观察到PKC磷酸化明显减弱rHMGI与-190/+43 bp片段的结合.在肿瘤坏死因子α(TNFα),弱氧化低密度脂蛋白(mmLDL)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的ECV304核抽提物中,加入低剂量的rHMGI显著增强核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合,并呈一定的剂量依赖性.结论:高迁移率蛋白Ⅰ可与PDGF-B链基因上游一个或数个A-T丰富区结合,促进转录因子NF-κB与SSRE的相互作用,并可能受蛋白激酶C和CDC2激酶的磷酸化调节.这对深入阐明致动脉粥样硬化相关因素诱导PDGF-B链基因转录的机制具有重要意义.
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问号赖型钩端螺旋体内鞭毛与外膜基因融合DNA疫苗载体的构建
目的:为增强问号赖型钩端螺旋体(017株钩体)内鞭毛抗原(flaB)与外膜抗原(ompL1)的免疫保护作用,克服保护性免疫持续时间短的难题,应用DNA重组技术以pcDNA 3.1为载体构建-表达flaB与ompL1基因的融合DNA疫苗载体,以期注入肌体后能延长保护期,激发机体长期免疫.在pcDNA3.1载体上,ompL1与flaB前后相连,前者较后者先获得递呈,与钩体天然递呈过程相似,并且双嵌合基因可诱导机体产生针对2个不同抗原表位的抗体,从而增加免疫应答能力.pcDNA3.1载体能表达融合蛋白,并且具有CpG motifs,因而可发挥佐剂作用.方法:提取017株钩体基因组DNA,参照钩体特有的高度保守的flaB与ompL1序列,设计二对四条引物:P1、P2、P3、P4.flaB与ompL1已被证实是两个良好的钩体疫苗候选抗原.通过聚合酶链反应(PCR),P1、P2引物扩增017株钩体的ompL1抗原基因;P3、P4引物扩增钩体的flaB抗原基因,分别经双酶切,以pcDNA3.1载体,将ompL1与flaB顺次同时定向嵌入同一pcDNA3.1中,获得重组质粒(ompL1与flaB),并将其转入JM109宿主菌中.在设计引物时,分别在P2、P3引物中,采用多个结构简单又不易形成折叠的甘氨酸作为接头,以维持其空间构象,不影响自然折叠,保持天然活性.结果:经酶切鉴定证实:有一1.8 kb片段插入载体,进一步经酶切证实这一1.8 kb可被酶切为9.6 kb及8.5 kb的片段,与预期的片段大小一致.以嵌合重组质粒DNA为模板,经PCR证实:P1、P2引物扩增出9.6 kb片段;P3,P4引物扩增出一8.5 kb片段.重组质粒经DNA序列检测,其中ompL1与flaB序列与文献报道的完全一致.结论:表达017钩体flaB与ompL1抗原的融合蛋白的DNA疫苗载体构建成功,从而为下一步表达复合功能蛋白,进行钩体免疫保护性研究打下了基础.
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正常活体下颌骨CT解剖学测量及分析
下颌骨是人体面部骨骼的重要组成部分,是急诊外伤、美容整形的常见部位。目前,国内外学者针对颌面部的三维测量已做过一些研究[1-5]。多层螺旋CT已经广泛应用于临床,本文利用重组技术明确下颌骨解剖特征、进行精确测量。
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生物制药治疗肺部疾病前景看好
随着生物技术与基因工程的快速发展,治疗学领域提出了生物药物(biologic agents)的概念.生物药物可分为:生化药物、生物制品、微生物药物及生物技术药物四大类.有些难以成规模化生产的微量生命活性物质,经分离纯化研究确认其结构、药效后,利用生物技术方法进行规模化生产,统称为生物技术药物,如基因重组技术、蛋白质工程获得的在医药领域应用的产品,如基因重组多肽、蛋白质类药物、基因疫苗、反义核酸药物等,本文中所述的生物药物实际上是生物技术药物的简称.
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哮喘的基因治疗
近年来研究已经表明,哮喘是一种具有复杂性状的,具多基因遗传倾向的疾病,并已发现了多个与哮喘发病相关的候选基因,如位于5q31-33区域内的所谓“细胞因子基因簇”的一些基因,在IgE调节以及在哮喘的炎症发生发展中起着极为重要的作用[1]。任何疾病的发生都是建立在基因表达、基因调控异常基础上的。基因治疗就是对缺陷基因进行补充或对表达异常的基因进行纠正,因而是能从根本上治疗疾病的方法。狭义上的基因治疗仅适用于那些确定的某一基因缺陷或突变以致基因表达产物异常引起的遗传病,通常是指正常基因的添加补充或对突变基因的定点修复来达到治疗目的。然而,尽管支气管哮喘也是一种与遗传有关的疾病,但由于其具有如下遗传特征:(1)外显不全,(2)遗传异质化,(3)多基因遗传,(4)协同作用,因此导致在一个群体中发现的遗传连锁或相关,而在另一个不同的群体中则不能发现。除此以外,不同的环境因素与多遗传基因的相互作用是本病发生机制的重要特点。因此,狭义上的基因治疗方法并不适用于哮喘。广义上的基因治疗还包括基因外围的治疗(epigene therapy),如对基因表达的调节,反义技术便是一个好的例子。再者,免疫调节DNA或称之为DNA疫苗亦是基因外围治疗的方法。不仅如此,运用基因重组技术在体外生产拮抗某种重要炎性细胞因子的重组生物蛋白或多肽药物,则在更广阔的领域里,通过体外基因的构建及操作表达出治疗用蛋白,再送入体内,以达到阻断体内蛋白生物活性的方法,达到了与基因治疗殊途同归的治疗目的。如重组抗人IgE鼠/人嵌和单克隆抗体,通过基因的改造,使之主要结合循环血IgE和表达在B细胞表面的IgE分子,不结合肥大细胞及嗜碱性细胞上的IgE,无需担忧由此而诱发这些炎症效应细胞脱颗粒的危险,达到了传统抗体所不能达到的治疗哮喘等变态反应性疾病的目的[2]。
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乙型肝炎核酸疫苗研究进展
全世界大约有3.5亿的慢性HBV携带者[1],慢性乙型肝炎的防治研究一直是肝病研究的重大课题.干扰素能使部分患者有持续性反应[2],拉米呋啶能迅速抑制病毒复制,但是停药易反跳,用药后导致变异株的产生[3],两种药物治疗均使病毒进入低复制状态.因此,为了治愈乙型肝炎,需要探索其他的治疗途径.近年来,由于基因重组技术的发展与应用,使得利用核酸疫苗来治疗慢性HBV感染成为研究的热点[4].本文对目前乙肝核酸疫苗研究情况作一综述.
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丙型肝炎病毒NS3区不同末端基因的表达及产物抗原性分析
近年研究证实约有半数丙型肝炎患者无输血及血制品历史,并以慢性丙型肝炎为首发表现。但目前尚无实验方法能够判断患者有慢性化倾向,并在理论上得以阐述,因此利用基因重组技术,力求在HCV基因组中寻找其慢性化的原因及诊断指标。
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胰岛素类似物的研究与其在临床治疗糖尿病中的应用进展
近年来,科学家利用基因脱氧核糖核酸(DNA)重组技术,改变胰岛素肽链上某些部位的氨基酸组合和等电点,并增加六聚体的强度;或对胰岛素氨基酸的序列进行修饰,或在分子上增加脂肪酸链,加大与白蛋白的结合,均改变了普通胰岛素的理化和生物学特征,从而研制出较常规人胰岛素更适合人体生理需要以控制血糖的胰岛素,并合成了一系列胰岛素类似物(Insulin similitude),亦被称为"速效胰岛素"或餐时胰岛素(Mealtime insulin).
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人类重组红细胞生成素治疗成人肾性贫血的几点建议
人类重组红细胞生成素(rHuEPO)是利用DNA重组技术人工合成的激素,它的产生,标志着贫血治疗的新阶段,目前rHuEPO已成为治疗肾性贫血的首选药物和标准替代疗法.根据文献报道,结合临床经验,我们对如何应用rHuEPO治疗成人肾性贫血提出以下建议.
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人类重组红细胞生成素作用的研究进展
人类重组红细胞生成素(rHuEPO)是利用DNA重组技术人工合成的激素,它的产生,标志着贫血治疗的一个新阶段,目前rHuEPO已成为治疗肾性贫血的首选药物.近年来随着对rHuEPO研究的不断深入,人们对rHuEPO在慢性肾功能衰竭(CRF)患者中的临床作用又增添了许多新的知识.下面就这些研究进展作一简述.
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生物技术发展对医学本科教育的影响
生物技术也称生物工程,是人们以现代生物科学为基础,利用生物体的特性和功能,运用工程技术手段,设计构建具有预期性状的新物种或新品系,为社会提供商品和服务的一个综合性技术体系.生物技术的研究领域十分广泛,它包括所有对生物进行干预的技术手段:基因重组技术、基因治疗、生物制药技术、克隆技术、基因芯片技术等.生物技术包含许多方面的内容,其中基本的是:蛋白质工程、基因工程、酶及发酵工程.
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干扰素的临床应用
1干扰素的生物学基础干扰素(IFN)的发现是基于两种病毒感染同一宿主细胞时出现的相互干扰现象.细胞内发生干扰现象的原因,是病毒诱导一种细胞基因(IFN基因)进行表达,而产生的一种非抗体性纸分子糖蛋白,可以干扰病毒的复制.IFN基因不同,其表达产物按分子结构和抗原性可分α、β、γ三型,分别由白细胞、成纤维细胞和T淋巴细胞产生.在同一型内按氨基酸的差异再分亚型.IFNα有20多个亚型:α1、α2、α3…….在同一亚型内又因个别氨基酸的差异而细分,如α2有3种α2a、α2b和α2c.IFN制剂有自然的和重组的.自然的即血源性干扰素,主要是由白细胞产生,因产量有限、活性差、纯度低,对病毒性肝炎疗效差,基本上已被淘汰.应用重组技术,将人类IFN基因连接于载体,然后转入大肠杆菌中表达IFN,通过大规模生产和纯化,可以得到高纯度(>99%)、高活性(1 mg>108IU)产品,这是目前国际上获得IFN的主要技术途径.
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MPR与旋转图像相结合直观显示机械性肠梗阻
我们在2006年7月~2008年8月间对20例急性机械性肠梗阻患者进行CT扫描后,将三维卡中的旋转图像与MPR重组技术栩结合,重建的三维图像能更直观、真实地再现机械性肠梗阻发生的部位、形态及原因,在肠梗阻的影像诊断中发挥了极其重大的作用,报道如下.
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抗体治疗皮肤病的研究
以DNA重组技术等为基础而产生的基因工程抗体以降低抗原性,提高亲和力等为目的,已逐步由实验研究走向临床应用,并成为治疗用抗体的主要组成部分,目前在美国和欧洲已经有抗肿瘤坏死因子(TNF)-α抗体、抗CD20抗体等在内的10余个治疗用抗体正式被批准上市[1,2]在皮肤科领域亦有很多治疗用抗体进入各期临床试验或应用阶段.