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临床酶测定标准化的几个问题
迄今,血清(血浆)中酶测定是通过它们催化的反应速度测量的,以酶催化(活性)浓度表示.这与以免疫实验将酶作为蛋白质测定比较,其优点是快速、敏感、特异和低消耗.但是,酶催化浓度测定结果是相对的,它依从于测定原理、单位定义和相应的测定条件.这些条件中,主要是:(1)底物、辅因子、活化剂、变构剂的种类和浓度.(2)在偶联酶促反应中,指示酶和辅助酶的种类和浓度.(3)反应混合液的pH、缓冲剂种类和离子强度.(4)其它影响酶催化反应的因素,如抑制剂、杂酶等.这些影响酶促反应速度的诸因素中任何一项发生变动,都会导致测定结果不同程度的变化.正是由于这些原因,使酶测定的质量控制远远落后于其它生化项目[1].
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高同型半胱氨酸血症与糖尿病神经病变
从回肠吸收的钴胺在血清中与转运蛋白TC-Ⅱ结合后,其中一部分进入神经细胞和各组织细胞内,将钴胺中3价钴(Co3+)转化为2价钴(Co2+),再形成3种形式的辅因子参与酶反应.细胞液中通过甲基化反应形成甲钴胺(metholcobalamine,MeCo1)就是其中之一.
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四氢生物喋呤缺乏症的研究进展
高苯丙氨酸血症(hyperphenylalaninemia,HPA)中常见的是苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU),它是因肝脏中苯丙氨酸羟化酶活性下降或丧失导致苯丙氨酸代谢紊乱所致.此症早期采用低苯丙氨酸饮食治疗效果很好.目前,我国许多大中城市已开展了HPA的新生儿筛查,对筛出的HPA患儿早期给予低苯丙氨酸饮食治疗,取得了良好的治疗效果.但是,少数HPA患者因辅因子四氢生物喋呤(tetrahydrobiopterin,BH4)缺乏,对单纯的低苯丙氨酸饮食治疗无效.这是因为BH4不仅是苯丙氨酸羟化酶的辅因子,也是酪氨酸和色氨酸羟化酶的辅因子,酪氨酸和色氨酸羟化障碍导致脑内神经递质L-多巴和5-羟色胺的生成减少,故此类患者尽管及早采用了低苯丙氨酸饮食治疗,但仍会出现进行性神经系统症状.因此,对HPA患儿进行早期BH4缺乏症的鉴别诊断非常重要.近年来,各型BH4缺乏症在早期诊断、治疗、基因突变检测、基因型与表现型关系、产前诊断和基因治疗的基础研究等方面均取得了一定的进展,本文将对有关的新进展作一综述.
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脑梗死患者蛋白质Z与部分炎性因子的变化及相互关系
蛋白质Z(protein Z,PZ)是近年来发现的一种新的抗凝血因子,为PZ依赖性蛋白酶抑制剂抑制凝血因子Ⅹa(FⅩa)的辅因子,在新近的文献报道中,表明PZ缺乏与急性缺血性脑卒中(acute ischemic stoke,AIS)和急性冠脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)的危险性明显增加相关.
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079通过分析HPV评价宫颈癌妇女发生转移癌的可能性
宫颈癌在女性肿瘤中居第二位,占癌症患者总数的15%.在美国,每年有15 000例确诊,4 600例死亡,存活率为40%,是世人关注的妇女健康问题.人乳头状瘤病毒(HPV)是引起宫颈鳞状上皮内病变(SILs)和宫颈癌发生发展的辅因子.HPV DNA转染正常鳞状上皮会导致细胞过度增生、结构破坏及核高度非典型变.现已测出HPV有近100个不同的遗传因子类型,其中有25个已证实存在于宫颈病变中.这些因子被划分为低危或高危的类型取决于其所存在病变的良恶性质.
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抗磷脂综合征
1 临床表现及诊断抗磷脂抗体(aPL)包括直接抗磷脂部分的抗体,如抗心磷脂抗体(aCL),或抗其辅因子β2糖蛋白Ⅰ(β2-GP Ⅰ)的抗体,或为狼疮抗凝物(LA).Veres等对急性冠状动脉综合征(ACS)中的aPL进行分析,发现抗β2-GPⅠ抗体的阳性率及血清滴度均较健康对照组显著增高,而且其IgA型可能与ACS的发病及转归的关系为密切,提示抗β2-GPⅠ抗体可能参与了ACS的血栓性事件的发生.
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碳酸酐酶两点速率法测定发锌
发锌的测定通常用原子吸收分光光度法(AAS),但该法仪器昂贵,难以广泛应用.化学法测定发样锌干扰因素多,准确度差,我们利用锌可作为一些酶的辅基这一特性,选择以锌作为辅因子的碳酸酐酶(CA)建立了碳酸酐酶两点速率法测发锌,适合在自动生化分析仪上操作.现报告如下.
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急性缺血性脑血管病患者血浆组织因子及其相关因子的研究
近年认为组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)是血栓形成中起重要作用的一对辅因子;血小板球蛋白(β-TG)是血小板活化的特异性标记物之一[1].本研究观察一过性脑缺血发作(TIA)和脑梗死患者以上指标及相互关系,以探讨诸指标在缺血性脑血管病发病中的作用.
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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A基因酵母表达载体的构建及表达
丙型肝炎病毒(HCV)是一种单股正链RNA病毒,在HCV丝氨酸蛋白酶和宿主细胞信号肽酶的联合作用下,裂解成为10余种结构和非结构蛋白.其中,HCV NS4A蛋白作为一种非结构蛋白形式,是NS3丝氨酸蛋白酶裂解活性的辅因子,并参与NS5A蛋白磷酸化修饰和免疫应答的调节[1].为了进一步研究NS4A蛋白在肝细胞内的功能,我们在酵母细胞中表达了NS4A蛋白.
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一氧化氮对低氧性肺血管结构重建的调节作用
低氧性肺动脉 高压是临床众多疾病发生发展过程中的重要病理生理环节,低氧性肺血管结构重建作为慢性 低氧性肺动脉高压形成中重要的病理生理机制,近年来受到越来越多的重视。然而,低氧性 肺血管结构重建的发生机制尚未完全清楚。一氧化氮(NO)是一种新型的细胞信使分子,由L -精氨酸(L-Arg)和氧分子在一氧化氮合酶(NOS)及其辅因子的作用下产生,近年来人们对 其在调节低氧性肺血管结构重建中的作用进行了新的探索。
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血清叶酸盐与脑卒中关系探讨
越来越多的研究表明,高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化和血栓性疾病独立的危险因素,叶酸(FA)、维生素B6、维生素B12是同型半胱氨酸代谢的维生素类辅因子,体内这些维生素变化与上述疾病的关系受到越来越多的关注,本文旨在探讨血清叶酸盐与脑卒中的关系.
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临床生物化学与生物化学检验练习题(3)
一、单选题(A1/A2型题)1.下列哪一类酶需要磷酸吡哆醛作为辅因子A.还原酶 B.脱氢酶 C.氧化酶 D.转氨酶 E.脱羧酶
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海洋真菌SD116在产物合成中的辅因子谱分析
目的 通过对海洋真菌Aurantiochytrium sp.SD116发酵过程中9种辅因子的定性定量分析,阐述胞内辅因子平衡及能荷水平与其生长、油脂积累及二十二碳六烯酸(DHA)合成等表型的内在联系.方法 对发酵过程进行间断点采样,淬灭,采用超高效液相色谱-串联质谱技术及同位素稀释质谱分析策略进行辅因子的定性定量分析.结果 在细胞快速分裂生长时,细胞内的NADH/NAD+、NADPH/NADP-的比率及能荷水平较低,细胞停止分裂快速积累油脂及DHA时,还原力保持平衡但能荷水平处于高位.而细胞生长及油脂积累均停滞时,胞内各种辅因子出现剧烈的动荡,辅因子的总量呈先升后降直至衰亡趋势.结论 菌体的辅因子浓度及能荷水平与菌体的生长、油脂及DHA的积累及衰亡密切相关,高能荷水平是胞内油脂积累的必要条件,而胞内辅因子循环和氧化-还原态势的失衡则与细胞产物合成停滞及衰亡呈正相关关系.
关键词: 辅因子 能荷 油脂合成 二十二碳六烯酸 超高效液相色谱质谱联用 -
高同型半胱氨酸血症 与动脉粥样硬化性 心血管疾病
高同型半胱氨酸血症的来历Hcy是含硫氨基酸,在体内经蛋氨酸脱甲基化而生成,主要通过以下两条途径进行代谢.再甲基化途径 约有50%的Hcy在蛋氨酸合成酶的作用下,以维生素B12为辅因子,以N5-甲基四氢叶酸为甲基供体,发生再甲基化,重新合成蛋氨酸.在这一过程中,叶酸和维生素 B12起着重要作用,如果叶酸和维生素 B12缺乏,Hcy再合成蛋氨酸障碍,就会导致高同型半胱氨酸血症.
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苯丙酮尿症筛查检测方法进展
苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)是一种常染色体隐性遗传氨基酸代谢病,为一种较常见的遗传性代谢病,发病率约为1/10 000,它是由于患儿肝脏内苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PHA)先天性缺陷或突变,四氢生物蝶呤(tetrahydrobiopterin,BH4)辅因子的合成和BH4的再循环障碍,导致苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)代谢障碍,无法将食物中摄入的Phe分解代谢为酪氨酸(tyrosine,Tyr)等被人体利用的生理活性物质,Phe及旁路代谢产物苯乙酸、苯乳酸、苯丙酮酸等在体内蓄积损害脑及神经细胞,并且不可逆转.
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生物喋呤在脓毒症中的作用及其相关信号转导机制的研究进展
许多研究证实,一氧化氮(NO)过度产生在脓毒性休克和多器官功能障碍综合征的发生中具有重要意义,而生物喋呤(主要为5,6,7,8-四氢生物喋呤,tetrahydrobiopterin,BH4)为一氧化氮合酶(NOS)重要的辅因子,调控着细胞内NO的产生,近年研究表明它可能参与了脓毒性休克的病理、生理过程[1].本文主要介绍BH4的生理及病理作用,以及相关信号转导调控机制在脓毒症中的意义.