西安交通大学学报（医学版）杂志
Journal of Xi'an Jiaotong University(Medical Sciences) 서안교통대학학보（의학판）
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包头蒙古族Y染色体的遗传多态性研究
目的 调查包头蒙古族Y染色体上10个STR基因座及单倍型的遗传多态性.方法 应用PCR、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染显色分型技术,检测99例无关系蒙古族男性血样.结果 在DYS392、DYS438、DYS439、DYS456、DYS459、DYS460、DYS461、DYS462、DYS389Ⅰ、DYS389Ⅱ10个基因座中共检出43个等位基因,各基因座DP值分布在0.458(DYS462)至0.727(DYS389Ⅰ、DYS389Ⅱ)之间,除了DYS462(0.458)以外,其余基因座DP值均大于0.5.由10个基因座组成的YH系统单倍型有98种,DP值为0.98.结论 上述10个Y-STR基因座的单倍型具有较高的遗传多态性.
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胰岛素样生长因子-1与糖尿病下肢血管病变的关系
目的 分析血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平在2型糖尿病下肢血管病变中的变化规律,探讨IGF-1在糖尿病大血管病变发病机制中的作用,为糖尿病大血管病变的防治提供依据.方法 选择74例2型糖尿病患者和15例健康人,常规测身高、体重、血压、血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、血脂、尿白蛋白排泄率;用ELISA法测血清IGF-1水平;用多普勒超声进行双下肢动脉病变检查.结果 ①糖尿病患者血清IGF-1水平明显高于对照组;②糖尿病合并下肢动脉血管病变时血清IGF-1水平明显高于无下肢动脉血管病变组,且血清IGF-1水平与下肢动脉血管病变的严重程度呈正相关;③糖尿病下肢动脉血管病变的严重程度与尿白蛋白排泄率、病程、血总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平呈正相关.结论 血清IGF-1水平可以反映糖尿病下肢血管病变的严重程度,对糖尿病大血管病变的诊断有参考价值,并有可能作为糖尿病大血管病变治疗的新靶点.
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自然流产者绒毛组织中印记基因H19的表达及意义
目的 探讨印记基因H19在自然流产者绒毛组织中的表达及意义.方法 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测45例自然流产患者和30例正常早孕妇女的绒毛组织中H19特殊等位基因表达.结果 自然流产患者杂合子绒毛组织21例中19例表达双等位基因,表达率为90.47%(19/21),而正常早孕妇女杂合子绒毛组织13例中H19皆表达单等位基因,无双等位基因表达,表达率为0(0/13),两组比较,双等位基因表达率有统计学意义(P＜0.05).结论 H19基因印记丢失可能是造成自然流产的重要原因.
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丹参乙酸镁活性代谢产物在大鼠体内的药代动力学特征
目的 研究丹参乙酸镁代谢产物M1(3′-O-monomethyl-lithospermic acid B)和M2(3′, 3′′-O-dimethyl-lithospermic acid B)在大鼠体内的药代动力学特征.方法 大鼠静脉注射丹参乙酸镁代谢产物M1或M2,液质联用法进行MRM扫描分析,测定代谢物M1和M2血药浓度,计算药代动力学参数.结果 采用该液质联用色谱测定血浆样品中丹参乙酸镁代谢物的方法,血浆内源性物质均不干扰样品峰,相对回收率为:87%-101.4%,日间和日内相对变异系数(CV%)均小于9.77%,血浆中的低定量限为1μg/L(S/N≥3),线性范围为16-4 096 μg/L.M1和M2的t1/2z分别为(1.54±0.81)h和(1.52±0.42)h,MRT(0-t)分别为(0.46±0.07)h和(0.33±0.05)h,AUC(0-tn) 分别为(13.63±2.7)(mg·h)/L和(14.96±2.54)(mg·h)/L.结论 M1和M2静脉注射的体内代谢过程符合二室模型,消除较快.
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槲皮素对SGC-7901胃癌细胞生长及HSP70和EGFR表达的影响
目的 观察槲皮素对胃癌细胞SGC-7901生长及HSP70和EGFR的影响.方法 以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫组化检测HSP70和EGFR的表达.结果 台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制SGC-7901细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48 h后的IC50为14.12 μmol/L.形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10-20 μmol/L的槲皮素处理,SGC-7901细胞周期阻滞于G0/G1期,经10 μmol/L槲皮素处理的SGC-7901下调HSP70和EGFR蛋白的表达.结论 槲皮素能抑制胃癌细胞的生长,呈时间剂量依赖性,能诱导SGC-7901发生凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调HSP70和EGFR的表达有关.
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兔实验性蛛网膜下腔出血后脑血管超微结构的病理特征与动态变化
目的 探讨蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管的超微结构特征与动态变化,以及这种改变在迟发性脑血管痉挛(CVS)中的作用机制.方法 对日本大耳白家兔采用枕大池二次注血法制做SAH模型.动物随机分为SAH组、盐水对照组、穿刺对照组和正常组,于注血后1 h、第3天、第5天、第7天、第10天灌注固定,留取基底动脉标本,在光镜和电镜下动态观察基底动脉的病理和超微结构的改变.结果 光镜下SAH模型组的主要表现是血管壁增厚,管腔狭窄,内皮细胞变性、肿胀,染色质不均,空泡形成;内弹力膜迂曲皱褶或断裂.电镜下超微结构的主要表现是基底动脉内皮细胞间紧密连接消失,胞膜部分或完全脱落,胞质内线粒体肿胀、嵴紊乱、溶解呈空泡,致密颗粒增多,细胞核内染色质边集、浓缩,异染色质增多;平滑肌细胞变形、核扭曲、染色质不均匀,肌丝排列疏松紊乱,出现断裂或溶解,胞浆内可见大量空泡形成,线粒体增多、肿胀、嵴紊乱或溶解;血管外膜神经纤维肿胀、结构模糊.光镜下基底动脉的结构变化趋势与电镜下基底动脉的结构变化趋势相类似,均在SAH后1 h时可发现结构的微小改变,从第3天开始明显的结构改变,在第5天至第7天结构变化明显.结论 SAH后脑血管的超微结构会发生损害,并在病程发展中呈明显的动态改变;血管内皮细胞的损害是导致迟发性CVS的重要因素之一.
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微量白蛋白尿预测SICU术后患者预后的价值
目的 观察外科监护室(surgical intensive care unit, SICU)患者微量白蛋白尿(microalbuminuria, MAU)水平术前和术后的变化,探讨MAU水平与APACHEⅡ评分的关系,比较两者预测SICU术后患者预后的价值.方法 留取100例收入SICU患者的术前及术后6 h的尿液标本,测定尿白蛋白含量和尿肌酐.分别以尿白蛋白排泄率(urine albumin excretion rate, UAER)或尿白蛋白/尿肌酐比值(microalbuminuia/urinary creatinine ratio, MACR)来评价MAU水平.所有研究对象均在术后入SICU 24 h后进行APACHEⅡ评分.结果 SICU术后患者MAU水平较术前明显增高.UAER、MACR均与APACHEⅡ评分呈显著正相关(r=0.218,P＜0.05;r=0.461,P＜0.01).100例研究对象中,死亡5例,存活95例.死亡组无论是UAER、MACR,还是APACHEⅡ评分,均明显高于存活组(P均＜0.05).UAER、MACR及APACHEⅡ评分在对SICU术后患者死亡预测的受试者工作特性曲线下所占面积(area under receiver operating characteristic curve, AUROC)分别为0.773、0.918和0.941.当以MACR＞14.8mg/mmol为分界时,敏感性为100%,特异性为77%.结论 SICU术后患者MAU水平与APACHEⅡ评分呈显著正相关,可以用来评价疾病严重程度并预测预后.术后患者MACR阈值取14.8 mg/mmoL可同时获得较高的敏感性和特异性.
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较高剂量的缬沙坦与贝那普利对IgA肾病的疗效对比
目的 观察较大剂量的缬沙坦与贝那普利对IgA肾病的疗效和安全性.方法 61例患者随机分为三组:缬沙坦组(对照1组)(n=20),服用缬沙坦160 mg/d,贝那普利组(对照2组)(n=20)服用盐酸贝那普利20 mg/d.联合组(治疗组)(n=21)服用缬沙坦160 mg/d联合盐酸贝那普利20 mg/d,疗程6个月,观察24 h尿蛋白定量、血清肌肝、血压及血钾等变化及不良反应情况.结果 6个月时三组24 h尿蛋白定量均有明显下降,尤以治疗组明显,与其他两组比较差异显著(P＜0.05),总有效率分别为治疗组85.7%,对照1组45.0%,对照2组40.0%,均以治疗组显著;与其他两组比较差异显著(P＜0.01),而对照1组与对照2组比较无明显差异(P＞0.05).三组均能有效降低血压且副作用较轻,三组之间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 较大剂量血管紧张素受体拮抗剂联合较大剂量转换酶抑制剂治疗IgA肾病安全有效,其疗效优于单用盐酸贝那普利或单用缬沙坦.
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人类宫颈癌中白细胞介素-6与髓样细胞白血病-1表达的相关性及临床意义
目的 研究白细胞介素-6(IL-6)、髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白及MCL-1mRNA在宫颈癌、癌前病变及正常宫颈组织中的表达情况及其相关性.方法 采用免疫组化法检测30例宫颈鳞癌、10例宫颈上皮内瘤变(CIN)及10例正常宫颈组织中IL-6和MCL-1蛋白表达情况,采用逆转录PCR法检测组织中MCL-1 mRNA的表达情况.结果 IL-6和MCL-1蛋白在宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织及CIN组织(P＜0.01),且IL-6和MCL-1蛋白的表达呈正相关性(r=0.566,P＜0.01);MCL-1蛋白与MCL-1mRNA表达呈正相关性(r=0.772,P＜0.01).结论 IL-6和MCL-1的表达在宫颈癌的发生、发展过程中起着共同调节作用,这一发现有助于对早期癌前病变的筛查,并为宫颈癌的治疗提供了一个细胞因子靶点.
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用体外致敏联合EB病毒转化技术构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库
目的 构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库.方法 体外致敏并用EB病毒(EBV)转化肝癌患者的外周血单个核细胞(PBMC).RT-PCR扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,将抗体基因分别与载体pComb3连接后,电转化大肠杆菌XLI-Blue,构建噬菌体呈现型Fab抗体库.结果 经EBV转化的4例肝癌患者PBMC,ELISA检测均有抗肝癌抗体产生;经PCR扩增出13条轻链基因片段(κ、λ)和28条重链Fd基因片段(γ);电转化构建的噬菌体抗体库库容为1.7×107puf/mL;Fab基因的重组率约为100%.结论 用体外致敏法结合噬菌体抗体库技术,成功构建了全人源抗肝癌Fab组合抗体文库.
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单纯疱疹病毒2型gG-2"独特区"基因的原核表达及其血清学诊断价值
目的 在大肠杆菌中表达HSV-2的gG-2"独特区"基因(gG-2T)并对其免疫学特性进行初步研究.方法 克隆HSV-2的gG-2T,并在大肠杆菌中表达gG-2T融合蛋白.通过Western blot和间接ELISA鉴定融合蛋白的活性.结果 通过原核系统表达的gG-2T融合蛋白可以与GST多克隆抗体结合并在46 ku附近出现特异性结合条带.并且能够与确诊的HSV-2患者血清反应,而不与HSV-1患者血清和正常人血清反应.结论 获得了HSV-2 gG-2T融合蛋白,它可以与GST多克隆抗体特异性结合并且可以同HSV-2型患者血清特异性反应;获得的gG-2T蛋白为研究以gG-2蛋白作为靶区域的诊断试剂盒和疫苗研发打下实验基础.
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基质金属蛋白酶-9在宫颈癌中的表达及意义
目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白在宫颈癌中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测MMP-9蛋白在18例正常宫颈上皮、20例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌中的表达.结果 MMP-9在宫颈浸润癌中的表达率明显高于正常宫颈组织和宫颈原位癌(P＜0.05),而正常宫颈组织和宫颈原位癌组织之间无显著性差异(P＞0.05).MMP-9的表达与宫颈鳞癌不同临床分期、肿瘤大小、病理分级无显著性差异(P＞0.05),而在宫颈浸润不同深度间及有无淋巴转移的差异有显著性(P＜0.05).结论 MMP-9在宫颈浸润癌中呈高表达,MMP-9可能通过降解破坏细胞外基质(ECM)和基底膜(BM)而发挥促进宫颈癌发生、发展、浸润转移的作用.
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尺神经肘部病变患者的神经电生理定位诊断特征
目的 探讨神经电生理检查对尺神经肘部损害患者的定位诊断价值.方法 应用常规的神经电生理检测法:包括尺神经运动传导、尺神经小指-腕感觉神经传导、尺神经支配肌肉的肌电图;特殊检测法:短节段性神经传导检测法,共检测了21例经临床诊断并进一步做神经电生理检查以确诊尺神经肘部病变的患者,与同期30例正常对照组进行比较.短节段性神经传导检测法重点检测尺神经运动传导肘上至肘下段,以寻找其具体损害部位.结果 ①尺神经病变组中有19例出现尺神经在肘上至肘下段运动神经传导速度减慢;②尺神经肘上至肘下段短节段性神经传导检测结果显示具体病变部位多数集中在肱骨内上髁上下2-3 cm内;③尺神经在肘部病变者并非均有尺侧腕屈肌肌电图的异常.结论 短节段性神经传导检测法在确定尺神经在肘部的具体损害部位时有较高的定位诊断价值,而常规的尺神经感觉传导及肌电图异常能协助诊断.
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罗红霉素胶囊在人体的药代动力学及生物等效性
目的 建立人血浆中罗红霉素浓度的高效液相分析方法,用于研究罗红霉素胶囊在人体的药代动力学和生物等效性.方法 血浆样品采用己烷-异戊醇(98∶2)液-液萃取,反相高效液相法测定.结果 罗红霉素的线性范围为0.25-32.06 mg/L(r为0.999 2),低检出质量浓度为0.25 mg/L,低检出量为12.5 ng,提取回收率为68.0%-72.8%,方法回收率为90.7%-99.4%.单次服用300 mg罗红霉素胶囊受试制剂或参比制剂后的药动学参数AUC0-48h、Cmax、tmax、t1/2分别为(101.84±27.69)(mg·h)/L和(103.5±30.83)(mg·h)/L,(8.54±1.95)mg/L和(8.07±1.81)mg/L,(1.6±0.6)h和(1.8±0.6)h,(10.4±2.9)h和(10.5±2.6)h.受试制剂相对生物利用度为(100.5±19.1)%.结论 该方法专一性较好,血浆内源性杂质无干扰,结果准确.罗红霉素的两种制剂间主要药动学参数无明显差异,具有生物等效性.
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非小细胞肺癌患者血清及癌组织中P185neu的定量检测
目的 探讨P185neu蛋白的定量水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床生物学行为及预后的关系.方法 采用双抗体夹心ELISA法定量检测了37例NSCLC患者及17例良性肺疾病和健康对照者血清和组织中P185neu 的蛋白水平.结果 37例NSCLC患者血清和癌组织中P185neu 的蛋白水平明显升高(P＜0.01),且P185neu 蛋白水平与NSCLC细胞分化程度、TNM分期及淋巴结转移呈显著正相关(P＜0.05).另外,NSCLC患者术前血清P185neu 的蛋白水平明显高于术后10天的血清水平(P＜0.01).结论 P185neu 的蛋白水平与NSCLC的发生、发展和转移密切相关;血清P185neu蛋白水平可作为评估NSCLC进展、复发和预后的有效指标.
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HLA-I类基因多态性与白血病易感性的关联性研究
目的 探讨白血病易感性与HLA-I类基因多态性之间的关联性,寻找白血病的易感基因.方法 采用序列特异性寡核苷酸探针杂交技术(PCR-SSO)对65例白血病患者和48例正常对照组健康者进行HLA-A、B基因分型.结果 在等位基因HLA-A、B中,白血病患者的HLA-A01、B38基因的基因频率高于正常对照组(P＜0.05),而HLA-A11基因的基因频率明显下降(P＜0.05).结论 基因A01、B38对白血病有遗传易感作用,而基因A11对白血病有遗传拮抗作用.
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紫杉醇诱导人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及DNA polβ、mdr1、mrp1、GST-π、lrp和topo Ⅱ基因的表达
目的 体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系,观察其生物学特性并探讨其细胞内DNA polβ和多药耐药基因mdr1、mrp1、GST-π、lrp和topo Ⅱ的表达及意义.方法 以紫杉醇为诱导药,采用间歇逐步增加剂量法建立人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20;MTT法检测A549/TXL20对紫杉醇、顺铂、长春新碱、5-氟尿嘧啶和丝裂霉素的耐药指数(RF);细胞克隆形成法测定A549/TXL20对紫杉醇的敏感性;高效液相色谱测定细胞内紫杉醇的浓度;RT-PCR法测定人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20中DNA polβ、mdr1、GST-π、mrp1、lrp和topo Ⅱ的基因表达.结果 ①A549/TXL20形态不规则,较亲本细胞略小,核/浆比增加,倍增时间没有明显变化;②A549/TXL20对紫杉醇的RF为19.3,对顺铂的RF为67.4,对长春新碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和顺铂等抗癌药物有不同程度的耐药性;③A549/TXL20对紫杉醇的敏感性降低,其紫杉醇的含量较亲本细胞下降;④A549/TXL20细胞中DNA polβ、mdr1、GST-π、mrp1、lrp的基因表达量分别较A549细胞中的表达量明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 建立了相对稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20,其耐药机制可能与mdr1、GST-π、mrp1、lrp和DNA polβ基因的高表达有关.
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褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响
目的 探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制.方法 采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予50μmol/L Mel处理,用免疫荧光检测tau蛋白磷酸化水平,32P-特异底物标记技术检测GSK-3活性,免疫印迹技术检测P-Ser9-GSK-3β和GSK-3β的表达水平,计算P-Ser9-GSK-3β/GSK-3β的比率.结果 ①CA可在N2awt细胞使tau蛋白在Ser396/404位点和Ser198/202位点过度磷酸化,同时伴有GSK-3活性升高和P-Ser9-GSK-3β表达水平降低.②Mel对CA引起的tau蛋白过度磷酸化有保护作用;Mel同时对抗CA诱导的GSK-3活性升高和P-Ser9-GSK-3β表达水平降低.结论 Mel可减轻CA引起的tau蛋白过度磷酸化,其机制可能与调节细胞内P-Ser9-GSK-3β的表达水平和改变GSK-3活性有关.
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沙苑子对运动训练大鼠肝脏自由基代谢的影响
目的 通过建立耐力训练大鼠跑台运动模型,旨在研究沙苑子对运动训练大鼠肝脏组织自由基代谢及对运动能力的影响.方法 将购入大鼠进行7 d适应性训练后随机分为三组,即安静组(A),运动对照组(B),沙苑子运动组(C),然后观察大鼠肝脏组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶活性(CAT)及丙二醛(MDA)含量的变化.结果 灌服沙苑子运动训练组大鼠肝脏组织T-SOD[(78.17±0.17)nmol/mg pro],GSH-Px[(35.42±1.68)nmol/mg pro]、CAT[(17.61±0.05)nmol/mg pro]活性高于运动对照组的T-SOD[(75.13±0.37)nmol/mg pro]、GSH-Px[(28.07±5.11)nmol/mg pro]、CAT[(16.42±0.09)nmol/mg pro];MDA[(6.70±0.53)nmol/mg pro]含量低于运动对照组的[(10.10±1.02)nmol/mg pro].结论 沙苑子是一种有效的自由基清除剂,可显著提高运动大鼠抗自由基氧化的功能,能使大鼠运动能力明显提高.
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香附对未孕大鼠离体子宫肌收缩的影响
目的 探讨香附对未孕大鼠离体子宫平滑肌条运动的影响及其机制.方法 选用Wistar雌性未孕大鼠60只,体重250-300 g,用Biolap410生物机能仪记录正常子宫平滑肌肌条收缩运动,并分别用苯海拉明(2×10-6mol/L)、酚妥拉明(2×10-6mol/L)、异搏定(2×10-7mol/L)、吲哚美辛(2×10-5mol/L)作用于肌条5 min后,加入香附水煎醇沉液(以下简称香附)以及单用香附,观察对离体子宫平滑肌运动的影响并分析作用机制.结果 香附减弱未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动,收缩波的频率减慢,振幅减小,持续时间缩短.结论 香附减弱未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动,该作用可能是通过前列腺素的合成与释放,与L-型钙通道、H1受体、α受体无关.
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淋球菌不同耐药水平中mtrF基因的表达
目的 探讨mtrF基因在多重耐药淋球菌中的表达及其与高水平多重耐药淋球菌的关系.方法 ①纸片扩散法检测58株淋球菌对5种抗生素的敏感性;②试管稀释法测定淋球菌对红霉素的小抑菌浓度(MIC);③采用RT-PCR技术测定敏感组、低-中等水平多重耐药组及高水平多重耐药组中mtrD、mtrF基因的表达.结果 ①58株淋球菌中对2种或者2种以上抗生素耐药的有30株,占待测淋球菌的51.7%;②红霉素MIC为敏感、中介、耐药,分别为7株、21株和30株,有17株MIC值≥32.0 μg/mL;③高水平多重耐药组mtrF基因表达量升高,与低-中等水平耐药组和敏感组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);但后两者之间无明显差异.耐药组mtrD基因表达量升高,与敏感组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);但两个耐药组之间无明显差异.结论 mtrF基因在高水平多重耐药组中表达均高于敏感组和低-中等水平多重耐药组,表明其在介导淋球菌产生高水平多重耐药过程中可能发挥着十分重要的作用.
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人肺腺癌细胞系A549细胞双向电泳-飞行时间质谱研究
目的 初步分析人肺腺癌细胞系A549细胞蛋白质表达情况,从蛋白组水平探讨肺腺癌发病的分子机制.方法 应用2-DE技术对人肺腺癌细胞系A549细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合生物信息学进行蛋白质鉴定.结果 3块胶平均蛋白斑点数为1 138±49,平均匹配点数为986±32,匹配率为85.8%.随机选取背景清晰、分辨清楚、蛋白含量较高的20个斑点进行MALDI-TOF-MS分析,共获得了18个肽质量指纹图谱(PMF).将PMFs质量数据通过Aldente软件查询SWISS-PROT数据库,根据匹配片段及氨基酸序列覆盖率等,初步鉴定出15种蛋白质.根据功能,这些蛋白质可分为:①基本代谢相关的酶类:果糖2-磷酸醛缩酶、视网醛脱氢酶1(RALDH1)、吡多醛激酶;②细胞骨架类:蛋白细胞角蛋白8(CK8)、β-2链微管蛋白;③应激相关蛋白:蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3);④ 信号转导分子:膜联蛋白1(ANX1)、膜联蛋白4(ANX4);⑤分子伴侣:热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白β-1、抑制素(PHB);⑥转录及翻译相关蛋白:不均一性核糖核蛋白H(hnRNP H);⑦杂类:Rgr protein、NPM、PCBP1.结论 应用2-DE/MALDI-MS方法获得了较为理想的人肺腺癌细胞系A549细胞2-DE蛋白质表达谱,初步鉴定了15种蛋白质.
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抗HER-2嵌合抗体chA21对卵巢癌细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响
目的 观察抗HER-2嵌合抗体chA21对卵巢癌细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响.方法 采用免疫细胞化学法检测不同质量浓度chA21(6 mg/L和12mg/L组)作用36 h后,培养的高表达HER-2人卵巢癌细胞株SKOV3中MMP-2和TIMP-2表达的变化;建立SKOV3裸小鼠移植瘤模型,制作组织芯片,观察chA21(30mg/kg)对肿瘤组织MMP-2和TIMP-2表达的作用.结果 细胞实验显示,随着chA21浓度的升高,MMP-2明显降低(P＜0.01,r=-0.945),而TIMP-2显著升高(P＜0.01,r=0.926),MMP-2/TIMP-2比值也明显降低(P＜0.01,r=-0.945),且均呈浓度依赖性改变;裸鼠荷瘤实验结果显示,chA21能明显下调MMP-2的表达(P＜0.01),上调TIMP-2的表达(P＜0.01),并使MMP-2/TIMP-2明显降低(P＜0.01).结论 chA21能调节高表达HER-2人卵巢癌细胞SKOV3的MMP-2和TIMP-2表达水平.
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EB1基因表达与胚胎染色体数目异常的关系
目的 研究EB1基因在胚胎绒毛细胞中的表达,并分析其对染色体分离的影响.方法 采用荧光定量PCR技术检测EB1基因在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞和自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达差异;免疫组织化学方法检测EB1蛋白在两者中的表达情况,并用Western blot加以验证.结果 EB1基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数的均值在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中为0.010 04±0.008 223,在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中为0.150 9±0.063 3.Western blot和免疫组织化学结果表明其在自然流产绒毛核型分析异常胚胎细胞中的表达也高于其在人工流产绒毛核型分析正常胚胎细胞中的表达.经统计分析,EB1基因mRNA水平和蛋白水平在上述两组细胞中的表达均有显著差异.结论 EB1基因在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达明显高于其在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中的表达,其高表达可能导致染色体分离异常.
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丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
目的 克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因.方法 运用原核细胞基因工程技术.设计目的 基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的 片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再亚克隆到原核表达载体pET-28a中;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达;采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平.结果 成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体,并得以表达.结论 成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件.
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激光荧光检查法在肿瘤定位诊断中的应用
目的 探讨激光荧光检查法在肿瘤定位诊断中的应用价值.方法 以荧光素钠、光卟啉等作为荧光物质,以氦-镉激光、氩Ar+激光和KTP激光作为激发光源,对1 400例宫颈病变、56例食道病变、133例胃病变、37例膀胱肿瘤和14例脑肿瘤进行定位诊断,并结合组织形态学方法证实荧光物质在肿瘤组织中的分布特征.结果 激光荧光检查法对上述患者病情均能够明确确诊,对肿瘤的早期定位诊断起到了重要的帮助.结论 激光荧光检查法可作为早期肿瘤的定位诊断方法,值得在临床上广泛使用.
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生存素和CD44V6蛋白在胃癌中的表达及其相关性
目的 探讨生存素(survivin) 和CD44v6蛋白在胃癌中的表达及意义.方法 应用免疫组化技术检测120例胃癌(GC)、30例异型增生(GED)和20例正常胃黏膜组织(NGM)中survivin和CD44v6蛋白表达,并结合肿瘤的病理学行为和临床随访资料进行分析.结果 在胃癌组织中,survivin 和CD44v6阳性率分别为75.8%和81.7%,均显著高于GED和NGM(P＜0.05);survivin和CD44v6表达与GC浆膜浸润、淋巴结转移和患者预后密切相关(P＜0.05).结论 Survivin 和CD44v6表达与GC发生、转移和患者生存期有关,检测survivin 和CD44v6蛋白表达可作为预测胃癌患者预后的参考指标.
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伦尔欣对糖尿病大鼠肾小球血管细胞外基质表达的干预作用
目的 观察伦尔欣对糖尿病大鼠肾小球细胞外基质表达的干预作用.方法 利用链脲佐菌素腹腔注射法诱导建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型,将实验用SD大鼠随机分正常对照组、糖尿病组和伦尔欣治疗组.治疗16周,观察治疗后晚期糖基化终末产物、丙二醛、超氧化物歧化酶、内生肌酐清除率、24 h尿蛋白排泄率;免疫组织化学检测肾小球细胞外基质的表达.结果 造模组大鼠均出现肾脏功能损害;②伦尔欣能降低糖尿病大鼠的晚期糖基化终末产物、丙二醛、24 h尿白蛋白排泄率和Ⅰ型胶原的表达,增加超氧化物歧化酶和内生肌酐清除率,硫酸乙酰肝素蛋白表达显著升高.结论 伦尔欣通过调节肾小球细胞外基质表达发挥对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用.
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钼靶X线导丝定位活检诊断T0期乳腺癌
目的 探讨钼靶X线导丝定位下乳腺活检对临床T0期乳腺癌的诊断价值.方法 25例钼靶X线乳腺摄片显示有结节或有恶性可能的乳腺结构紊乱、簇状钙化灶而临床不能触及肿块的患者,手术活检前2 h在钼靶X线引导下行乳腺病灶细导丝定位,然后在局麻下行病灶活检.结果 25例均一次性定位成功,手术顺利.病理示乳腺癌8例,纤维腺瘤4例,乳腺增生症8例,导管内乳头状瘤2例,慢性炎症1例,囊肿1例,脂肪坏死1例.乳腺癌检出率为32.0%,诊断准确率100%.结论 钼靶X线导丝定位下乳腺活检,定位准确,诊断明确,能确定乳腺微小病变的性质,提高T0期乳腺癌的诊断率.
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老年高血压患者腹腔镜胆囊切除术的麻醉处理
老年高血压患者由于生理退变,心血管系统顺应性降低,在接受腹腔镜胆囊切除手术时,常因原有疾病、CO2气腹压力、胆心反射、麻醉药物的影响等因素,易出现麻醉和手术并发症.因此,我们必须予以足够的重视.本文就近年来我院65岁以上的老年高血压患者行腹腔镜胆囊切除术的麻醉处理资料予以总结,报告如下.
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不同麻醉方式对老年高血压患者术中应激反应的影响
目的 观察不同麻醉方式对老年高血压患者术中应激反应的影响.方法 选择择期行全胃或胃大部切除的老年高血压患者45例,随机分为3组,单纯全麻组(A组)、全麻联合硬膜外阻滞组(B组)、丙泊酚靶控输注静吸复合联合硬膜外麻醉组(C组)各15例.于麻醉前、切皮时、手术60 min时及拔管时采血测皮质醇、肾上腺素及内皮素水平并记录MAP及HR.结果 A组患者手术60 min时及拔管时皮质醇、肾上腺素及内皮素较术前明显升高(P＜0.05).B组、C组患者皮质醇、肾上腺素及内皮素在手术60 min及拔管时明显低于A组(P＜0.05).C组皮质醇及内皮素在手术60 min、拔管时显著低于B组(P＜0.05).C组患者术中MAP、HR显著低于术前(P＜0.05).结论 丙泊酚靶控输注静吸复合联合硬膜外麻醉可很好地调控老年高血压患者手术中应激反应,但应加强术中血流动力学监测,避免低血压的发生.
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蛋白酶活化受体-1单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备蛋白酶活化受体-1(PAR-1)单克隆抗体(mAb).方法 以PAR-1特异性片段为免疫原(13肽)免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR-1 mAb.采用捕获酶联免疫吸附试验(capture ELISA)鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Dot blot、免疫组化染色法、流式细胞仪分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果 获得2株可稳定分泌抗PAR-1 mAb的杂交瘤细胞,其亚型分别为IgM、IgG2b.免疫组化染色表明,mAb与人扁桃体、结肠组织中的淋巴细胞、包皮组织中的成纤维细胞、肺组织中的巨噬细胞反应呈阳性.流式细胞仪分析显示,2株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞胞浆内及细胞膜上的PAR-1均呈阳性反应.激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物在A549细胞胞浆内及细胞膜上均可见.结论 成功地制备出抗PAR-1 mAb,为进一步研究炎症性疾病提供有用的试剂.
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流式细胞术CD45/SSC设门在急性白血病免疫分型中的应用
目的 探讨流式细胞术CD45/SSC设门在急性白血病免疫分型中的应用.方法 选用三色荧光抗体直接标记初诊急性白血病患者骨髓,应用流式细胞术CD45/SSC设门进行免疫分型.结果 49例急性白血病患者分为三型,其中系列专一型25例,占51.2%;系列非专一型21例,占42.8%;裸型3例,占6.0%.结论 流式细胞术CD45/SSC设门,容易将原始/幼稚细胞与正常成熟细胞群区分开,使白血病分型结果更准确、可靠.
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男性不育机制部分研究热点的探讨
半个世纪以来,男性不育患者的比例有升高趋势,但其病因和发病机制仍未完全阐明.本文结合我们的部分研究成果,概括介绍男性不育机制的部分研究热点,着重介绍精索静脉曲张、甲醛及男性不育相关基因与男性不育的可能关系.
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萘乙酸对K562细胞和正常人外周血淋巴细胞遗传物质损伤效应的比较
目的 比较萘乙酸(naphthalene acetic acid, NAA)对K562细胞和正常人外周血淋巴细胞染色体损伤效应的差异.方法 常规方法制备姐妹染色单体互换(SCE)和微核,检测NAA对K562细胞与正常人外周血淋巴细胞SCE、微核形成率以及细胞分裂指数的影响.结果 NAA可诱导K562细胞和人正常淋巴细胞微核形成和提高SCE频率,与对照组相比均存在显著性差异;NAA诱导K562细胞微核形成率和SCE频率绝对增长值高于正常淋巴细胞组.NAA显著抑制K562细胞和人正常淋巴细胞分裂指数,绝对抑制率也表现为K562细胞高于正常淋巴细胞.结论 NAA具有诱导细胞染色体损伤的作用.
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单纯疱疹病毒2型感染与非淋菌性尿道炎的病因关系
目的 探讨非淋菌性尿道炎(NGU)患者单纯疱疹病毒2型(HSV2)感染的流行病学状况及实验室诊断方法.方法 实验分为NGU患者组和健康对照组.免疫快速测定法(C-C快速法)检测沙眼衣原体(CT),培养法检测解脲支原体(UU),血清酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清HSV2抗体,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测尿道分泌物HSV2.结果 NGU患者组的CT、UU感染率分别为23.27%和30.91%.NGU患者组和健康对照组的HSV2 IgG、IgM、HSV2DNA阳性率分别为38.18%/18.03%、10.91%/1.64%、19.63%/4.92%,两组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).NGU患者组无CT、UU、阴道毛滴虫、念珠菌感染的HSV2阳性率为33.33%,与对照组相比差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 HSV2是NGU的重要病原体之一.FQ-PCR法作为HSV感染的实验室诊断技术具有很好的临床应用价值.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 03 04 05 06 |
| 1999 | 03 |
