西安交通大学学报（医学版）杂志
Journal of Xi'an Jiaotong University(Medical Sciences) 서안교통대학학보（의학판）
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COL9A1基因多态性与大骨节病膝关节软骨中COL9A1表达的关系
目的 探讨COL9A1基因多态性(rs6910140)与大骨节病(KBD)患者膝关节软骨COL9A1表达之间的关系.方法 获取65例KBD患者的外周静脉血及膝关节软骨;提取静脉血全基因组DNA,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对全部DNA标本进行了基因多态性(rs6910140)分析;SP法组化染色检测软骨COL9A1的表达.结果 与TT基因型携带者相比,CC基因型携带者软骨COL9A1的表达积分差异有统计学意义(P<0.005);结合X线分级结果分析显示,总的样本和TT基因型携带者患者软骨中COL9A1的表达水平与KBD膝关节炎的严重程度相关.结论 COL9A1基因多态性(rs6910140)与KBD患者膝关节软骨COL9A1表达存在相关性,且COL9A1表达与KBD的严重程度相关.
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Wnt/β-catenin信号活化与乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞的相关性及其临床意义
目的 以β-catenin胞质/胞核聚集作为Wnt/β-catenin通路信号活化的指标,研究乳腺癌Wnt/β-catenin信号异常活化对淋巴细胞浸润的影响及其临床意义.方法 在90例乳腺癌手术标本连续石蜡切片中,应用免疫组化SP法评价乳腺癌β-catenin的异常表达情况,应用HE染色观察肿瘤间质淋巴细胞浸润的密度,分析β-catenin表达与临床病理特征及肿瘤浸润淋巴细胞密度的相关性.结果 β-catenin异常表达与乳腺癌组织学分级(P<0.05)、雌激素受体(P<0.01)及孕激素受体表达(P<0.01)相关,而与患者年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移及肿瘤TNM分期无关.与激素受体阳性乳腺癌(Luminal A、B型)相比,β-catenin异常表达病例数在激素受体阴性乳腺癌(HER2过表达型、三阴性型)显著增加(P<0.05).进一步研究发现,β-catenin异常表达与肿瘤间质浸润淋巴细胞密度呈正相关(P<0.05).在激素受体阴性乳腺癌中,间质浸润淋巴细胞密度显著高于激素受体阳性乳腺癌.结论 Wnt/β-catenin信号在激素受体阴性乳腺癌中显著异常活化并促淋巴细胞向肿瘤间质浸润,提示Wnt/β-catenin通路参与激素受体阴性乳腺癌肿瘤免疫应答过程,可能成为调控肿瘤淋巴细胞浸润的关键靶点.
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计算机辅助下支气管自动测量与手动测量的对照研究
目的 基于计算机辅助比较支气管自动测量及手动测量的优劣.方法 回顾性收集"数字肺"数据库中心自2015年6月至2015年8月在西安交通大学第一附属医院行肺癌筛查的体检人群19例.采用手动、计算机辅助的半自动和计算机自动测量支气管内径及外径.比较3种方法测量结果的一致性.结果 自动测量与半自动测量相关性高(内径r=0.993,外径r=0.991),其次是半自动测量与手动测量(内径r=0.992,外径r=0.985),后是自动测量与手动测量(内径r=0.979,外径r=0.980).自动测量、半自动测量及手动测量对内径(r=0.992,r=0.993,r=0.991)和外径(r=0.990,r=0.994,r=0.992)的测量重复一致性较好.结论 自动测量与半自动测量的一致性好,手动测量与前两者的相关性较好.
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空巢老人疏离感对其生活质量的影响
目的 探讨空巢老人疏离感、心理韧性、生活质量这三者之间的作用过程,为制订改善空巢老人生活质量的措施提供理论依据.方法 通过分层随机抽样的方法选取西安市3个社区205例空巢老人,对其进行一般资料、一般疏离感问卷、心理韧性量表及生活质量问卷的调查,用SPSS19.0对数据进行相关分析及中介效应分析.结果 ①空巢老人疏离感与心理韧性(r=-0.395,P<0.001)及生活质量(r=-0.161,P<0.001)之间呈负相关,而心理韧性与生活质量之间呈正相关(r=0.145,P<0.01).②心理韧性在空巢老人疏离感对其生活质量的作用过程中起部分中介效应,中介效应占总效应的比例为44.70％.结论 空巢老人的疏离感可直接影响其生活质量,亦可通过作用于心理韧性进而影响其生活质量.
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经会阴三维超声监测产程进展各参数的可重复性研究
目的 评估在同一检查者自身、2位检查者间经会阴三维超声监测第二产程进展各指标测量的可重复性.方法 选取本院2016年3月至2016年9月经阴道试产的初产孕妇共48例(单胎、头位),进入第二产程后每隔15 min进行一次超声检查,应用Sono VCAD软件由2位检查者分别测量产程进展角、胎头下降距离、胎头方向角、中线角.应用组内相关系数、Bland-Altman分析法来评价检查者自身及检查者间各指标测量的可重复性.结果 ①4 个指标中,检查者间的偏差要高于检查者自身的偏差;②除中线角外,其余3 个指标的可重复性好.其中,产程进展角?胎头下降距离的可重复性好.结论 超声评估第二产程进展的各项参数中产程进展角?胎头下降距离的可重复性较好,是评估产程进展程度的可靠指标.
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影响急性心肌梗死PCI术后患者心功能的危险因素分析
目的 探讨急性心肌梗死(AMI)经皮冠状动脉介入术(PCI)术后患者心功能分级与各危险因素之间的关系.方法 收集陕西中医药大学第二附属医院AMI急诊时间窗内行PCI术患者61例,根据Killip分级法将患者心功能分为4级,采用R语言3.4.3软件和SPSS 17.0软件对影响其心功能预后的各因素进行综合分析比较.结果 心功能4级患者女性偏多,平均年龄为(72.27±9.62)岁,显著高于1、3级患者(P<0.05);心功能3、4级患者血清血浆前体脑钠钛(pro-BNP)水平显著高于心功能1、2级患者(P<0.05);心功能4级同型半胱氨酸、肌钙蛋白T均高于1、2、3级患者(P<0.05);心功能3级患者的白细胞计数高于1、2级患者(P<0.05);心功能4级患者心肌梗死部位多发前臂、或前臂合并下壁,而1、2、3级患者单发下壁、前臂;热图分析提示,pro-BNP为影响AMI患者心功能的重要因素;决策树分析模型预测准确率高达93.44％.结论 影响急性心肌梗死PCI术后患者心功能的各因素中,年龄、性别、梗死部位、入院时血糖水平、血清脑钠肽水平、白细胞计数、血清肌酐、肌钙蛋白T、C-反应蛋白、血清同型半胱氨酸等因素与AMI患者心功能分级存在密切关系;其中性别、年龄、脑钠肽水平、肌钙蛋白等因素为重要的独立危险因素,对客观评价患者的心功能具有临床指导意义.
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自由呼吸对提高冠状动脉CT图像强化效果及均一性的研究
目的 比较屏气与自由呼吸在不控制心率的情况下对冠状动脉图像强化效果及均一性的影响.方法 2017年3月-7月期间,在我院256排Revolution CT行冠状动脉CT检查的60例患者随机纳入本研究.60例患者随机分为两组,A组:屏气组(30例,检查过程中嘱患者吸气后屏气);B组(30例,检查过程中嘱患者平静呼吸).两组患者扫描方案及对比剂注射方案均一致.比较两组图像的CT值、强化变化率、信噪比、对比噪声比、主观得分(1～5分,1分差,不能诊断,5分优)及两组患者扫描前后心率变化差异.结果 自由呼吸组的CT值[(405.10±58.20)Hu]及强化均一性(14.37％)均优于屏气组[(337.60±72.70)Hu,21.53％],差异有统计学意义(P<0.01).两组冠脉节段平均得分分别为4.49±0.41、4.33±0.36,两组患者扫描前后的心率分别是(1.74±1.86)次/min、(1.30±1.25)次/min,两组比较均无统计学差异.结论 自由呼吸可提高图像的强化效果及强化均一性,且可得到与屏气条件下同样质量的图像.
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DUSP 10与SMAD 7基因多态性与结直肠癌遗传易感性研究
目的 探究DUSP 10和SMAD 7基因多态性与结直肠癌遗传易感性的相互关系.方法 采取病例对照研究,以临床确诊结直肠癌患者276例作为病例样本,体健对照者385例作为对照样本,共661例外周血液样本,使用SequenomMassARRAY技术平台进行SNP分型.计算位点间的连锁程度是使用χ2检验与SNPStsts对数据进行统计及分析,而单体型的构建则应用SHEsis软件.结果 基于χ2检验,在等位基因模型下,DUSP 10rs908858位点、SMAD 7rs1295692位点及rs11874392位点与结直肠癌的发生危险度明显相关,在进行遗传模型分析过程中,使用佳模型-加性模型分析显示,DUSP 10rs908858可减少结直肠癌的发病风险,而SMAD 7rs11874392增高结直肠癌的发病风险;使用SHEsis软件分析发现,DUSP 10基因上的9个SNP位点分别构成了2个单体域,在校正了年龄和性别后,分析发现DUSP 10基因中的单体型"GTCAA"增加结直肠癌的患病风险.结论 DUSP 10和SMAD 7基因可能跟结直肠癌的发病风险有关.
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戒烟后COPD患者肺气肿CT定量指标变化的纵向研究
目的 利用CT定量分析技术纵向观察戒烟后慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺气肿定量指标的变化情况.方法 回顾性收集"数字肺"数据库中心COPD患者130例(前后行胸部CT检查2次、间隔2年),按吸烟现状分为不吸烟组、吸烟组、戒烟组,戒烟组按戒烟时限又分为短期戒烟组和长期戒烟组.采用"数字肺"肺气肿定量软件分析COPD患者的两肺体积、PD15、两肺％LAA-950和各肺叶％LAA-950.各组中比较前后两次肺气肿的定量指标的差异.结果 不吸烟组的第二次右肺下叶％LAA-950高于第一次(P<0.05),吸烟组第二次两肺和两肺上叶％LAA-950高于第一次(P<0.05),戒烟组中,第二次右肺中叶％LAA-950高于第一次(P<0.05);短期戒烟组中第二次两肺和右肺中叶％LAA-950高于第一次(P<0.05),长期戒烟组中前后两次肺气肿的定量指标无统计学差异(P>0.05).结论 CT定量分析可直观显示戒烟后COPD患者肺气肿定量指标的变化情况,戒烟能延缓肺气肿的进展.
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基于CT定量评估肺气肿肺叶分布特点与肺功能的相关性
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者肺气肿的空间分布特点及其与肺功能参数的相关性.方法 收集COPD患者61例及正常对照91例,均行肺功能及CT定量扫描,按《2018年慢性肺疾病诊断、治疗及预防全球策略》的诊断标准,将COPD患者分为4级.所得图像导入"数字肺"自动检测平台,计算各肺叶低密度区容积百分比(low attenuation areas volume percentage,LAA％).分析COPD患者肺气肿的空间分布特点及其与肺功能参数的相关性.结果 各个肺叶中除了右肺中叶LAA％和右肺下叶LAA％与DLCO％预计值、RV/TLC无相关性外,其余各肺叶与肺功能各参数均明显相关.双肺上叶LAA％ 与肺弥散功能(DLCO％ 预计值)相关性高于双下肺,双肺下叶与肺气流受限的相关性高于双上肺.随着COPD分级增高,肺叶及各肺叶的LAA％在一定程度上逐渐增加.结论 CT定量测量低密度区容积百分比(LAA％)可以反映肺功能受损的严重程度,还可反映不用肺叶的肺气肿程度,在肺减容术的临床评估起到一定临床价值.
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CYP2C19基因检测指导抗血小板治疗的成本-效果分析
目的 评价CYP2C19基因检测指导中国急性冠脉综合征患者抗血小板治疗的有效性与经济性.方法 使用经济学评价专业分析软件TreeAge Pro 2012构建决策树及Markov模型,采用我国相关数据,比较基因检测指导抗血小板治疗与传统治疗的成本及效果.结果 当意愿支付阈值为三倍我国国内生产总值时,基因检测方案和替格瑞洛方案比直接使用氯吡格雷更有优势,且替格瑞洛方案比基因检测方案更具有成本-效果.结论 对于中国急性冠脉综合征患者而言,具有成本效用的抗血小板方案是直接使用新一代抗血小板药物替格瑞洛,其次是药物基因组学检测指导的个体化治疗.
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血清维生素D水平与原发性高血压患者血管内皮功能及血浆肾素活性的关系
目的 评估维生素D缺乏对原发性高血压患者血管内皮功能及血浆肾素活性的影响.方法 选取133名接受钙通道阻滞剂或无药物治疗的原发性高血压患者进行了横断面分析.采集患者的空腹血液样品,测定血清维生素D水平及血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素II和血浆醛固酮浓度(PAC).同时,利用血管内皮功能检测仪评估血流介导的血管舒张功能(FMD).结果 入选患者中,有94名(70.7％)患者存在维生素D缺乏.维生素D正常组和维生素D缺乏组在年龄、坐位收缩压、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、维生素D、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、甲状旁腺激素、PRA、FMD指标比较存在统计学差异(P<0.05).Pearson相关性分析结果显示,维生素D与年龄(r=-0.21,P=0.033)、坐位收缩压(r=-0.22,P=0.035)、Hs-CRP(r=-0.23,P=0.031)、甲状旁腺激素(r=-0.19,P=0.039)、PRA(r=-0.31,P=0.013)和FMD(r=0.35,P=0.010)之间具有相关性.多元逐步线性回归分析显示,血清维生素D与PRA(β=-0.235,P=0.002)存在负相关性,与FMD(β=0.432,P<0.001)存在正相关性.结论 维生素D缺乏症在原发性高血压患者中非常普遍,并且维生素D水平与PRA活性及FMD独立相关.
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包埋式胰管空肠吻合在胰十二指肠切除中的应用体会
目的 探讨新的包埋式胰管空肠吻合方法在临床中的应用前景.方法 53例因壶腹周围肿瘤接受胰十二指肠切除手术患者分为改良组和对照组,改良组采用新的包埋式胰管空肠吻合技术,对照组采用传统胰管空肠吻合方法进行处理.观察两组之间手术时间、术后感染、出血、胰瘘发生率、平均住院时间及平均住院花费等指标是否存在差异.结果 改良组平均手术时间、平均住院时间、术后感染、出血、胰瘘发生率等指标与对照组比较存在统计学差异(P<0.05),两组平均住院花费无统计学差异(P>0.05).结论 包埋式胰管空肠吻合方案安全可靠,具有操作简单、易于掌握等优点,是一项值得临床推广的吻合技术.
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纤维介素2在慢性病毒性肝炎患者中的表达水平及临床意义
目的 探讨可溶性纤维介素2(sFgl2)检测对预测慢性病毒性肝炎患者临床转归和预后的价值.方法 采用ELISA法分别检测85例慢性肝炎患者(42例乙型肝炎和43例丙型肝炎)、108例肝硬化患者(35例乙型肝炎和73例丙型肝炎)及72例健康对照者外周血sFgl2的水平,并与Child-Pugh分级及肝功能指标进行Spearman相关性分析.结果 血清sFgl2水平在肝硬化组显著高于非肝硬化组及健康对照组,且在肝硬化患者中,随Child-Pugh评分升高,外周血sFgl2水平逐渐升高.Spearman相关性分析显示,不考虑病原学,sFgl2水平与TBIL呈正相关,与ALB呈负相关.但与病毒载量、ALT或AST无相关性.结论证实了外周血sFgl2在肝硬化患者中明显升高,同时发现sFgl2水平与肝硬化患者Child-Pugh分级呈正相关,提示sFgl2水平与肝病严重程度相关,可能成为评估肝硬化患者预后的因素之一.
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肺炎克雷伯菌果糖磷酸转移酶系统EⅡC编码基因frwC缺失株的构建及表型分析
目的 利用同源重组技术构建肺炎克雷伯菌果糖磷酸转移酶系统(PTS系统)EⅡC编码基因frwC无痕缺失株,并构建回补株,探讨frwC基因对肺炎克雷伯菌生长、超黏表型及毒力的影响.方法 利用自杀载体pKO3-Km质粒构建frwC基因缺失株,同时扩增包含frwC基因编码区、启动区及转录终止区的基因片段,克隆至pGEM-T-easy质粒电转至缺失株构建frwC基因回补株.通过生长曲线测定、高速离心实验、小鼠毒力实验分析frwC基因对肺炎克雷伯菌生长、超黏表型及毒力的影响.结果成功构建了肺炎克雷伯菌frwC基因缺失株与回补株,发现frwC基因敲除后细菌生长速度下降、黏性增加、细菌毒力减弱.结论 肺炎克雷伯菌果糖磷酸转移酶系统 frwC 基因编码蛋白 EⅡC 影响细菌的生成、超黏表型及毒力.
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二甲双胍治疗对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中Fas/FasL表达的影响
目的 探讨二甲双胍(dimethylbiguanide,DB)治疗前后多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠卵巢组织中Fas(factor associated suicide)和FasL(factor associated suicide ligand)蛋白的表达变化,为研究DB临床治疗PCOS的分子机制提供实验资料.方法 选取30只85天龄SD雌性大鼠,随机分为PCOS组(10只)、DB治疗组(10只)、对照组(10只).前两组通过皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)建立PCOS大鼠模型,PCOS组和对照组喂服安慰剂,同期DB治疗组喂服二甲双胍.14 d后取出各组大鼠卵巢称重,观察卵巢大体解剖和组织学结构变化(HE染色),并取外周血测定血清胰岛素(insulin,INS)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和睾酮(testosterone,T)水平.采用免疫组织化学SP法和Western blot法检测3组卵巢组织中Fas蛋白和FasL蛋白的表达变化.结果 ①PCOS组大鼠卵巢的重量、体积、平均卵巢面积、大卵泡直径和卵泡膜厚度均比对照组增加;DB治疗组大鼠以上各指标均比PCOS组降低,所有差异均有统计学意义(P均<0.05);②PCOS组和DB治疗组大鼠血清INS、LH和T值均比对照组增高,且DB治疗组大鼠血清T值比PCOS组降低,所有差异均有统计学意义(P均<0.05);③免疫组化显示,Fas蛋白和FasL蛋白主要表达于囊状卵泡颗粒细胞胞质内,且在PCOS组囊状扩张卵泡中近卵泡腔的1～2层颗粒细胞中表达较强,而在初级卵泡卵母细胞胞质和透明带表达较弱;④Western blot显示,PCOS组大鼠卵巢组织中Fas和FasL蛋白的表达较对照组增高,但DB治疗组Fas蛋白的表达较对照组和PCOS组均降低,而FasL蛋白的表达却较对照组增加,所有差异均具有统计学意义(P均<0.05).结论 Fas/FasL的表达改变是DHEA诱导的PCOS组大鼠卵泡异常凋亡的主要通路之一,可以通过DB治疗逆转卵巢多囊性改变.
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二甲双胍介导的增强CD8阳性T细胞肿瘤浸润与增加的肿瘤灌注的相关性
目的 探讨二甲双胍产生的增强CD8阳性T细胞肿瘤浸润作用与增加的肿瘤灌注之间的相关性.方法 6～8周雌性小鼠乳腺脂肪垫接种4T1细胞后9 d,随机分为对照组及二甲双胍干预组.提取标本前15 min,经尾静脉注射TRITC标记的Lectin溶液,提取标本并制备成冰冻切片后行CD8抗体荧光染色,用激光共聚焦显微镜采集结果.用Spearman分析方法观察相关性.结果 二甲双胍干预组的CD8阳性细胞浸润数量[(120.8±26.9)个/mm2 vs.(67.9±22.9)个/mm2]及Lectin阳性信号面积[(18357.0±5865.0)像素/μm2 vs.(10233.0±4434.0)像素/μm2]显著高于对照组(P<0.05).两组的CD8阳性T细胞浸润数量与Lectin阳性信号面积均呈线性相关(对照组:R=0.884,P=0.007;二甲双胍组:R=0.928,P<0.001).结论 增加的肿瘤灌注与二甲双胍介导的增强CD8阳性T细胞肿瘤浸润密切相关.
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脂联素基因rs266729(-11377C/G)位点多态性与血压对钠、钾反应性的相关性研究
目的 通过慢性盐负荷及补钾干预试验,研究脂联素基因rs266729(-11377C/G)位点多态性与血压钠、钾反应性的相关性.方法 选取陕西眉县农村汉族人群中126个家系342名受试者,参与为期3周的慢性盐负荷及补钾干预试验,包括基线资料调查3 d,低盐(LS)饮食、高盐(HS)饮食、高盐补钾(HS+K)饮食各7 d.根据其高盐饮食期较低盐饮食期的平均动脉压(MAP)升高幅度≥10％为标准分为盐敏感组(130例)和盐不敏感组(212例),分别于基线及各干预期末抽取空腹静脉血标本.采用ReadyAmpTM基因组DNA纯化系统纯化外周血DNA,运用连接酶特异检测技术(LDR-PCR)对脂联素rs266729位点进行基因分型.结果 盐敏感者检出占38％.先证者基线期收缩压、舒张压、MAP水平高于同胞、配偶及子女,父母基线期收缩压水平高;饮食干预后血压在低盐期下降,高盐期升高,而高盐补钾期再次下降.与基线期比较,尿钠排泄量在低盐期明显下降,在高盐期明显升高;此外,补钾不仅能够增加钾的排泄量,而且能轻微促进钠的排泄.脂联素基因启动子区rs266729(-11377C/G)位点多态性与盐敏感性(Z=2.320,P=0.020)及血压对钾的反应性(Z=2.325,P=0.020)均具有明显相关性.结论脂联素基因启动子区rs266729(-11377C/G)位点多态性与血压盐敏感性以及血压对钾的反应性有关.
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茶多酚对糖尿病心肌病大鼠心功能的保护作用及其机制
目的 观察茶多酚(green tea polyphenol,GTP)保护糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)大鼠心功能的作用机制.方法 建立链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠并随机分为正常对照组(NG,n=15)、糖尿病组(DM,n=12)、GTP组(n=12)、GTP+氯喹(CQ)组(n=11)、CQ组(n=12).NG组和DM组灌胃蒸馏水,GTP组灌胃GTP[400 mg/(kg?d)]溶液,CQ组灌胃CQ溶液(50 mg/kg),GTP+CQ组灌胃等量的CQ和GTP溶液.Western blot检测左心室心肌组织中β-catenin/TCF4/GSK-3β和MTOR通路相关蛋白的表达.结果 与NG组相比,DM组中LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和BECN1表达显著降低(P<0.05),且SQSTM1水平显著增加(P<0.05).与DM组相比,GTP组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和BECN1蛋白表达水平显著增加(P<0.05),同时SQSTM1蛋白水平显著降低(P<0.05).与NG组相比,DM组β-catenin、TCF4和MYC的蛋白表达均显著提高(P<0.05),且p-GSK3β/GSK3β和p-MTOR/MTOR的比值显著提高(P<0.05).与DM组相比,GTP组的β-catenin、TCF4和MYC蛋白表达水平及p-GSK3β/GSK3β和p-MTOR/MTOR的比值显著降低(P<0.05).结论 GTP可以通过调节与自噬相关的β-catenin/TCF4/GSK-3β和MTOR通路参与对DCM大鼠的心功能保护作用.
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1-磷酸鞘氨醇对2型糖尿病小鼠胰岛β细胞损伤的保护作用
目的 研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰岛β细胞的促进增殖、抑制凋亡情况和对血糖的影响,以及S1P受体S1PR1-3在T2DM小鼠胰腺中的表达定位,探讨S1P对糖尿病胰岛 β细胞损伤的保护作用.方法 雄性C57BL/6J小鼠,高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM小鼠模型,随机分为S1P高剂量组(S1PH)、S1P低剂量组(S1PL)、糖尿病对照组(DC)及正常对照组(NC),每日予S1PH组和S1PL组S1P溶液100μg/kg及20μg/kg腹腔注射,DC组及NC组予同体积溶剂替代.给药3周后行葡萄糖耐量试验(IPGTT),胰腺组织HE及TUNEL染色,免疫组化检测胰岛中胰岛素、Ki67及S1PR1-3蛋白的表达.结果 S1P给药3周后,S1PL组及S1PH组空腹血糖及IPGTT 2 h血糖较DC组轻度下降.胰岛组织HE染色及胰岛素免疫组化染色示S1PL组及S1PH组较DC组胰岛病变减轻.Ki67免疫组化染色示S1PL组及S1PH组胰岛β细胞增殖率较DC组明显升高(P<0.05);TUNEL染色示S1PL组及S1PH组胰岛β细胞凋亡率较DC组明显降低(P<0.05).胰岛组织免疫组化示S1P受体S1PR1-3均表达于小鼠胰岛β细胞中,在胰腺组织外分泌部表达甚微或不表达.其中S1PL组、S1PH组和DC组S1PR1及S1PR2的表达均较NC组明显增多,各组间S1PR3表达差异无统计学意义.结论 S1P与其受体S1PR1及S1PR2结合能够显著改善T2DM小鼠胰岛β细胞形态,促进小鼠胰岛β细胞增殖、抑制凋亡,提示S1P对T2DM胰岛β细胞损伤有保护作用.S1P/S1PR信号通路在T2DM中发挥着重要作用,有可能成为未来药物治疗的新靶点.
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小肠黏膜下层促血管内皮细胞体外增殖及成血管化作用
目的 探讨体外共培养条件下小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)对脐静脉内皮细胞(umbilical vein endothelial cells,UVECs)增殖及成血管化功能的影响.方法 采用胶原酶消化法原代培养获取UVECs并进行细胞形态学及免疫荧光鉴定.组织工程学方法制备SIS,免疫组化及酶联免疫吸附(ELISA)法检测SIS中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b-FGF)等.建立UVECs与SIS体外共培养体系,设UVECs单独培养为对照组,比较两组UVECs的增殖状况及成血管化作用.结果 通过原代培养成功获得UVECs.免疫组化检测制备的SIS主要由Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白等细胞外基质成分组成;ELISA检测SIS孵育液中VEGF、b-FGF质量浓度分别为(48.83±5.67)、(72.36±8.71)ng/mL.体外共培养时,UVECs单独培养组无血管样结构形成,UVECs和SIS共培养组较UVECs单独培养组UVECs生长相对致密,且有血管样结构形成;UVECs生长曲线于UVECs和SIS共培养组上移,在对数生长期的第4、5天,UVECs和SIS共培养组UVECs细胞数分别为(7.91±0.42)×104、(9.15±0.48)×104,大于UVECs单独培养组的(4.26±0.27)×104、(6.71±0.31)×104(P<0.01),计算UVECs和SIS共培养组UVECs群体倍增时间短于UVECs单独培养组(P<0.01).结论 SIS和UVECs体外共培养时,SIS可通过其Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白等细胞外基质成分及所含的血管内皮细胞各生长因子等促进UVECs增殖及成血管化.
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OGD动态处理后大鼠海马神经元线粒体裂解及凋亡相关蛋白的变化
目的 大鼠海马神经元经过不同时间糖氧剥夺(oxygen and glucose deprivation,OGD)处理后,观察其线粒体形态改变与凋亡相关蛋白的变化.方法 将原代培养大鼠海马神经元随机分为5组:空白对照组(对照组)与OGD处理30 min组、45 min组、60 min组及90 min组,采用激光共聚焦显微镜观察线粒体形态;JC-1检测线粒体膜电位变化;Western blot检测胞质内磷酸化线粒体动力相关蛋白(P-Drp1蛋白)、细胞色素C(CytC)及含半胱氨酸的天冬氨酸水解蛋白3(caspase 3)蛋白的表达.结果 随着OGD处理时间延长,①P-Drp1蛋白表达下降,线粒体裂解率逐渐增加(P<0.05);②线粒体膜电位下降越严重;③与对照组相比,60 min组及90 min组CytC、caspase 3蛋白的表达显著增加(P<0.05).结论 随着OGD处理延长,线粒体裂解增加,膜电位下降,膜通透性增加,且在OGD处理60 min时伴随凋亡发生.
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不同参数的超声对脂多糖诱导人系膜细胞增殖的影响
目的 探索不同参数的超声对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人系膜细胞(human mesangial cell,HMC)增殖的影响,为超声联合微泡和(或)药物治疗肾小球肾炎奠定实验基础.方法 利用10μg/mL LPS诱导HMC增殖模型,①采用正交设计的方法,将频率为0.8 MHz超声的强度(1.48 W/cm2,2.56 W/cm2,2.79 W/cm2)、占空比(1:4,1:1,4:1)和辐照时间(5 min,10 min,15 min)按3因素3水平分成9个实验组,分别作用于LPS诱导的HMC,利用MTT法测定细胞增殖情况,并对这3种超声参数进行极差分析和方差分析;②选定超声占空比为1:1,对10μg/mL LPS诱导的HMC给予不同强度和辐照时间的超声辐射,观察细胞生长情况.结果 极差分析和方差分析结果显示,这3种超声参数对LPS诱导HMC的增殖生长均有抑制作用,其中占空比是主要的影响因素,其次为超声强度和辐照时间.当占空比为1:4时,细胞增殖生长状态均未见明显抑制;当占空比为4:1时,细胞增殖生长明显受到抑制,其抑制率均达到60.00％以上;当占空比为1:1时,不同辐照时间与强度组合的超声对LPS诱导HMC增殖的抑制作用不同.结论 不同参数的超声对LPS诱导HMC增殖生长的抑制作用不同,而占空比是体外超声抑制细胞生长主要的影响因素.
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海藻糖氧钒对小鼠胃肠道的氧化损伤以及Vc和GSH的抗氧化保护作用
目的 探讨海藻糖氧钒(VT)对小鼠胃肠道的氧化应激损伤、GSH/GSTs通路基因表达的影响以及维生素C(Vc)和还原型谷胱甘肽(GSH)的保护作用.方法 30只雄性昆明小鼠随机分组:VT组(B组)、Vc+VT组(C组)、GSH+VT组(D组)、Vc+GSH+VT组(E组),每天灌服VT(125 mg/kg),而正常对照组(A组)灌服等量生理盐水,Vc和GSH在VT给药前1 h灌服,连续15 d.取各组小鼠胃和十二指肠,DTNB法测定GSH含量,谷胱甘肽氧化法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,实时荧光定量PCR法检测GSH/GSTs通路相关基因GCLC、GSS、GSR和GSTpi的表达.结果 VT组胃、十二指肠的GSH含量、GSH-Px活性及GCLC、GSS、GSR和GSTpi的表达均低于A组(P<0.05).C、D、E组各指标显著提高,但仅E组小鼠胃组织的指标恢复到正常对照组水平.C组和D组除十二指肠中GSR表达显著差异外,其余指标差异均无统计学意义.结论 灌服VT对小鼠胃肠道产生一定的氧化应激损伤,并可影响GSH含量和GSH-Px活性以及GSH/GSTs通路相关基因的正常表达.外源补充Vc、GSH及两者联用有一定的抗氧化保护作用,降低了VT的毒性,且两者联用的效果更优,使胃中的相关指标达到正常水平.
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DEN和NMOR联合诱导F344大鼠肝癌形成过程中SERPINB5的表达变化
目的 观察化学法诱导F344大鼠肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)形成过程中肝组织内SERPINB5蛋白的表达变化,探讨其与HCC发生、发展的关系,为肝癌早期诊断和治疗提供新的思路.方法 采用复合化学法诱导50只F344雄性大鼠建立HCC模型(化学诱癌组),对照组为30只F344雄性大鼠.观察两组大鼠生长状态,每隔4周随机处死观察组10只,对照组6只大鼠,观察肝脏的肉眼和组织形态学改变,并采用免疫组化法检测肝组织内SERPINB5蛋白的表达情况.结果 复合化学法诱导16周能成功诱导大鼠HCC.与对照组相比,诱导不同时间的化学诱癌组的大鼠肝组织形态学和SERPINB5蛋白的表达出现不同的改变.自第4周起,两组大鼠肝组织形态学出现差异.随着化学诱导时间的延长,化学诱癌组大鼠肝组织形态学出现不同的特征改变,第12周时,呈现典型的肝炎表现,第16周时,呈现典型的肝硬化表现,并伴有癌细胞微浸润,第20周时,癌细胞异型性更加明显,可见癌细胞大量浸润.第16周时,SERPINB5蛋白的表达量开始明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),第20周时,SERPINB5的表达明显降低(P<0.05),且与诱癌第16周比较,差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 在大鼠肝脏组织中,SER-PINB5蛋白表达呈下降趋势,表明SERPINB5与HCC的发生、发展有密切关系;SERPINB5可能是肝癌早期诊断的新分子标记及其治疗的新靶点.
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长链非编码RNA DOCK9-AS2对甲状腺乳头状癌细胞增殖和迁移的影响
目的 检测长链非编码RNA DOCK9-AS2在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达水平及对PTC细胞增殖、迁移能力的影响.方法 收集2016年6月至2017年6月间在南京医科大学第一附属医院手术切除的PTC标本及对应的癌旁组织,采用qRT-PCR检测62对组织中DOCK9-AS2的表达,并分析其与患者临床病理资料的关系.通过细胞转染技术构建沉默DOCK9-AS2的甲状腺癌BCPAP细胞株,用CCK8方法检测DOCK9-AS2对PTC细胞增殖能力的影响;划痕实验观察沉默下调DOCK9-AS2的表达对细胞侵袭转移能力的影响.结果 DOCK9-AS2在PTC的mRNA表达水平(0.0097±0.0044)高于癌旁组织(0.0026±0.0010),差异具有统计学意义(P<0.05).DOCK9-AS2在PTC组织中的表达与淋巴结转移、腺外侵犯有关(P<0.05).在BCPAP细胞中下调DOCK9-AS2的表达时,PTC细胞的增殖和侵袭转移能力减弱(P<0.05).结论 DOCK9-AS2在PTC中表达显著增高,沉默DOCK9-AS2的表达可抑制PTC细胞的增殖、侵袭和转移.
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儿童头皮血肿伴膜性成骨的手术治疗分析
目的 探讨儿童头皮血肿伴膜性成骨的外科手术诊治特点及预后.方法 收集并分析西安市儿童医院神经外科2014年1月至2017年3月收治的62例临床资料,对其特点进行总结分析.结果 62例确诊为头皮血肿伴膜性成骨患儿中54例(87％)有产伤,8例(13％)为颅脑外伤所致;54例的膜性成骨位于顶部.全部患儿接受膜性成骨切除+颅骨整复术治疗,均无术后并发症.结论 对于儿童头皮血肿伴膜性成骨的治疗应早期干预、积极手术,外科手术治疗效果肯定,预后良好.
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大鼠主动脉内皮细胞改良型分离培养方法
目的 建立一种简便的大鼠主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分离纯化及培养方法.方法 无菌条件下分离获得大鼠主动脉,在眼科显微器械的辅助下翻转暴露血管内膜.按处理方式的不同,将获得的主动脉血管段分为消化压片法组、单纯消化法组和单纯压片法组,并进行对应的处理和培养,通过倒置相差显微镜观察VECs形态,免疫荧光法鉴定VECs的细胞标记物.结果 消化压片法组在接种后48～72 h即有VECs自血管段中迁移出,原代细胞约10～11 d可达到近融合状态,子代细胞生长速度加快,5 d后达到融合状态,呈典型的"铺路石"样特征.相对于其他两组,消化压片法组VECs的迁移速度快、细胞数量多.免疫学鉴定显示细胞标志物Ⅷ因子、vWF和CD31的阳性率高达99％.所培养的VECs传代培养至第10代,未见明显的细胞形态特征变化,免疫荧光鉴定至第8代,未见明显的细胞免疫特征变化.结论 本研究成功建立了一种简单经济的大鼠主动脉VECs分离、纯化和培养方法.
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二代测序技术筛查肥厚型心肌病伴房颤家系致病基因研究
目的 对1个肥厚型心肌病伴房颤先证者及其家系成员进行致病基因筛查研究.方法 收集先证者及其家系成员外周血,提取基因组DNA,应用二代测序法对先证者进行心血管疾病候选基因突变检测.发现可疑致病位点后,进一步通过Sanger测序法在家系内其他成员以及100个健康个体者中进行验证.用PolyPhen-2等生物信息学软件对新突变位点进行致病突变分析.家系资料收集包括临床表现、体格检查、心电图、超声心动图.结果 先证者及家系内多个成员均携带PRDM16基因c.3124G>A(p.G1042R)杂合突变,但先证者父母及100例健康个体中并未发现该突变,因此,该突变可能为新生突变(生殖细胞嵌合).生物信息学分析结果显示PRDM16基因c.3124G>A(p.G1042R)杂合突变位于保守位点,可能影响蛋白功能,为致病性突变.结论 本研究发现1个肥厚型心肌病伴房颤的家系中存在PRDM16基因c.3124G>A(p.G1042R)杂合突变,该突变所在区域在不同种系间高度保守,可能是该肥厚型心肌病家系的致病基因突变位点.
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豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞的原代培养及鉴定
目的联合2种常用的细胞培养方法从豚鼠耳蜗螺旋动脉中提取平滑肌细胞,为相关实验研究提供材料.方法从豚鼠耳蜗中分离出螺旋动脉,应用1.25 g/L的胰蛋白酶进行消化并将组织块贴壁,运用自然纯化法及根据不同细胞贴壁能力的差异性对细胞进行纯化,通过形态学观察及免疫荧光、免疫组化和Western blot对细胞进行鉴定.结果85％的组织块存活,第4代平滑肌细胞纯度达95％.镜下可见细胞呈典型的"峰-谷"样生长,免疫荧光、免疫组化及Western blot结果显示平滑肌细胞特异性的肌动蛋白呈阳性表达.结论通过本研究方法,可以得到大量高纯度的豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞,有望为内耳循环系统紊乱导致的病理生理变化的体外研究及血管平滑肌药物评价提供一个理想的研究材料.
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中医药对血管新生促进或抑制作用的研究进展
中医药促进或抑制血管新生在缺血性心脑血管疾病和肿瘤中的应用是目前研究的热点.本文对国内外近5年(2012年-2017年)相关文献进行整理,发现促进血管新生的复方多是益气活血化瘀类,如血府逐瘀汤、当归补血汤、补阳还五汤、桃红四物汤、芪参益气方等,单味中药如川芎、丹参、黄芪、人参、三七、红花、当归等,中药药对如黄芪与当归、川芎与黄芪、当归与赤芍等;其作用机制与血管内皮生长因子(VEGFA、VEGFB)及其受体Flt-1(VEGFR1)、KDR/Flk-1(VEGFR2)、血管生成素(Ang)-1及其受体Tie-2密切相关.而抗血管新生的多是清热燥湿解毒散结的复方(如鳖甲煎丸、复方苦参注射液、西黄丸、六神丸、解毒消癥饮等),单味中药如姜黄、半枝莲、黄芩、雷公藤、蟾酥、蝎毒等居多,其机制多是抑制基质金属蛋白酶(MMPs)的活性,如降低MMP-2、TIMP-1的表达或者抑制VEGF、bFGF等促血管生成因子的表达.通过概述中医药对血管新生促进或抑制的作用,可为今后相关的研究提供更多的思路.
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焦虑对注意控制过程中抑制加工的影响
焦虑是在威胁情境下出现的一种负面的情绪状态和动机状态,与注意控制密切联系.在此基础上,EYSENCK等提出了焦虑的注意控制理论,认为焦虑不仅影响刺激驱动与目标导向的注意系统,而且影响中央执行系统的抑制和转移功能.本文系统介绍了注意控制理论的渊源和发展、核心观点以及主要研究范式,以期对注意的控制理论有更全面的了解,为以后的研究提供借鉴.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 03 04 05 06 |
| 1999 | 03 |
