西安交通大学学报（医学版）杂志
Journal of Xi'an Jiaotong University(Medical Sciences) 서안교통대학학보（의학판）
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
硒对大骨节病和骨关节炎软骨细胞超微结构的影响
目的 观察不同浓度硒对体外培养大骨节病(Kashin-Beck disease,KBD)、骨性关节炎(osteoarthritis,OA)和正常关节软骨细胞的超微结构变化,为大骨节病病因、发病机制研究提供科学依据.方法 依据《大骨节病诊断标准》选择Ⅱ度和Ⅲ度KBD患者8例、WOMAC诊断的OA7例和非病区正常人意外事故者5例的关节软骨进行体外分离、培养,传1代.KBD组、OA组和正常组分别给予0、0.025、0.05、0.10、0.25 mg/L不同剂量的硒,采用透射电镜方法观察细胞超微结构的变化.结果 ①正常组第6天时,硒质量浓度在0.1～0.25 mg/L之间组的细胞明显坏死和细胞器结构丧失,KBD组细胞超微结构细胞器丰富,状态良好,OA组细胞结构完整,细胞器存在,细胞有凋亡和坏死征象;②硒质量浓度在0.025～0.10 mg/L组之间KBD、OA细胞超微结构趋于正常细胞,超微结构细胞器丰富,状态良好,而同浓度正常组细胞凋亡、坏死征象明显.③硒质量浓度＞0.25 mg/L时,KBD、OA组细胞微观结构受损,正常组细胞坏死明显.结论 适宜的补硒对KBD、OA软骨细胞生长有一定的保护作用,而正常软骨细胞耐受力低、凋亡坏死较明显.
-
2型糖尿病肾病患者血清总胆红素水平与胱抑素C的相关性
目的 探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血清总胆红素(TBIL)水平与胱抑素C(Cys-c)之间的关系.方法 选择561例T2DM患者,根据尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)分为单纯糖尿病组(NAU组,232例)、微量白蛋白尿组(MAU组,211例)和大量蛋白尿组MAAU组,118例),采用酶法测定血清TBIL水平并比较,分析TBIL与Cys-c、预估肾小球滤过率(eGFR)、UACR、血糖、血脂、血压等指标的关系.同时将所有研究对象以TBIL上四分位为切点分为A组与B组,比较两组间DN的患者比例及Cys-c等肾功能指标的变化趋势.Binary logistic回归法分析T2DM患者发生肾病的危险因素.结果 MAAU组和MAU组血清TBIL水平明显低于NAU组(9.26±3.28 vs.10.69±3.66 vs.11.97士3.78 μmol/L,均P＜0.01),MAAU组血清TBIL水平明显低于MAU组(9.26±3.28 vs.10.69±3.66 μmol/L,P＜0.01).相关分析显示,T2DM患者血清TBIL与BMI、HDL-C、apoA、DBIL、IBIL和eGFR呈正相关,与Cys-c、Scr、UACR、WBC和RDW呈负相关(P＜0.05或P＜0.01).校正性别、年龄和BMI后,T2DM患者TBIL与Cys-c仍呈明显负相关(P＜0.01).多元逐步回归分析显示,Cys-c、BMI和WBC是影响T2DM患者血清TBIL水平的独立相关因素.B组Scr、Cys-c、UACR、DN患者比例和MAAU患者比例均明显高于A组(P均＜0.01).Logistic回归分析显示,Cys-c、年龄和WBC是预测T2DM患者DN发病的独立危险因素,TBIL是预测T2DM患者DN发病的独立保护因素(P＜0.05或P＜0.01).结论 早期DN患者血清TBIL水平较单纯T2DM患者明显下降,随着UACR增加,血清TBIL水平逐渐下降,且与血清Cys-c水平密切相关.
-
MicroRNA-21在急性髓系白血病骨髓细胞中的异常表达及意义
目的 分析急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中miR-21的表达情况及其在白血病发生发展中的可能作用及临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR检测40例初治AML患者、22例完全缓解期AML(AML CR)患者、13例难治复发患者、20例非血液肿瘤患者及健康人骨髓中miR-21的表达水平,并分析AML患者miR-21的表达水平与临床指标的相关性.结果 miR-21在AML中的表达是上调的,初治组、完全缓解组及难治复发组miR 21的表达水平均高于对照组(P＜0.05);完全缓解组miR-21的表达量较初治组有所下降(P＜0.05);难治复发组miR-21的表达量高于初治组,但两组间无统计学意义(P＞0.05);初治AML miR-21表达水平与骨髓原始幼稚细胞数呈正相关(P＜0.05),与外周血白细胞数、血小板计数、血红蛋白含量以及年龄、性别、染色体异常等均无明显相关性(P＞0.05).结论 miR-21在急性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达上调,并与肿瘤负荷相关,可能在白血病的发生发展中起重要作用,并有望成为白血病诊断的新的分子标志物.
-
瓣膜性心房颤动患者心房结构重塑特征分析的多中心研究
目的 在人体组织学水平观察瓣膜性心房颤动患者心房结构重塑的特点.方法 选取西安交通大学医学部第一附属医院、西京医院、陕西省人民医院心脏外科因风湿性心脏瓣膜病住院并行瓣膜置换手术的患者84例,其中心房颤动组39例,窦性心律组45例.收集整理患者的临床资料,并于手术中获取右心房组织(0.3～0.5 mm3).HE染色、Masson染色观察两组患者右心房纤维化程度;RT-qPCR技术测定心房组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达.结果 两组患者在性别构成比、年龄、血压、血常规、生化指标等方面经统计学分析,差异无统计学意义(P＞0.05);心房颤动组左、右心房直径明显大于窦性心律组(P＜0.05);HE染色、Masson染色结果提示心房颤动组心房组织存在明显纤维化,心房颤动组胶原容积分数显著高于窦性心律组(45.37±2.33 vs.12.90±1.02,P＜0.05);心房颤动患者心房组织中Ⅰ型胶原mRNA表达明显高于窦性心律组(2.042±0.177 vs.0.988±0.099,P＜0.05),而Ⅲ型胶原mRNA的表达较窦性心律组高,但组间比较差异无统计学意义(1.228±0.151 vs.1.067±0.068,P＞0.05).结论 瓣膜性心房颤动患者心房组织存在明显的心房纤维化,与Ⅰ型胶原基因转录水平上调密切相关.
-
新疆哈萨克族原发性高血压与KCNMB1基因多态性的关系
目的 探讨新疆哈萨克族原发性高血压与大电导钙激活钾通道(large-conductance Ca2+ activated potassium channel,BKCa) KCNMB1基因多态性位点rs11739136的相关性.方法 分别提取原发性高血压组(essential hypertension group,EH,n=277)和正常组(normotensive group,NT,n=247)血液中的基因组DNA,运用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测KCNMBI-rs11739136多态性位点的基因型.应用非条件Logistic回归分析新疆哈萨克族高血压相关危险因素.结果 非条件Logistic回归分析结果显示,KCNMB1-rs11739136位点基因型、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)和总胆固醇等与高血压无关联;体质量指数(body mass index,BMI)和甘油三酯是影响高血压的危险因素.新疆哈萨克族人群中普遍存在KCNMB1-rs11739136位点的基因多态性(P＞0.05).在EH组该位点CC、CT、TT基因型频率及C、T等位基因频率分别为74.00％、23.83％、2.17％、85.92％、14.08％,与NT组相比较,两组间无统计学差异(P＞0.05).结论 KCNMB1基因rs11739136多态性位点可能与新疆哈萨克族原发性高血压无关联.
-
炎症小体Nod样受体蛋白3及胱天蛋白酶募集域蛋白8基因多态性与急性冠脉综合征的相关性
目的 探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3) rs10754558位点C＞G和胱天蛋白酶募集域蛋白8(CARD8) rs2043211位点A＞T多态性与急性冠脉综合征(ACS)发病的关系.方法 入选450例ACS患者和380例对照组人群,使用ABI Snapshot方法分析NLRP3 rs10754558位点和CARD8 rs2043211位点多态性;冠状动脉造影后以Gensini评分评价冠脉狭窄程度;Elisa测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)浓度.结果 NLRP3 rs10754558位点对照组和ACS组基因型频率比较差异有统计学意义(x2 =7.64,P=0.022),NLRP3 rs10754558位点G等位基因与ACS发病相关(AOR=1.334,95％ CI=i.085～1.642,P=0.006).而CARD8 rs2043211位点两组间基因型频率比较差异无统计学意义(x2=1.08,P=0.582),且与ACS发病无明显关系(AOR=1.168,95％CI=0.942～1.449,P=0.156).ACS患者NLRP3 rs10754558位点GG基因型Gensini评分高于CC基因型(74.07±2.13 vs.42.91±1.80,P＜0.001);IL-1β质量浓度GG基因型显著高于CC基因型[(3.21±2.68)pg/mL vs.(1.37±1.36) pg/mL,P＜0.001].结论 NLRP3 rs10754558位点C＞G基因多态性与中国汉族人群ACS发病及冠状动脉狭窄程度有关;G等位基因是ACS发病的危险等位基因,其作用与IL-1β浓度升高有关.
-
贝伐珠单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌的疗效观察
目的 观察贝伐珠单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌的近期疗效、安全性及远期生存期.方法 回顾性分析2008年6月～2013年12月应用贝伐珠单抗联合以奥沙利铂、伊立替康、氟尿嘧啶及其衍生物为基础的化疗方案,治疗51例晚期结直肠癌的临床疗效、生存分析以及贝伐珠单抗的不良反应.结果 完全缓解(CR)4例,部分缓解(PR)13例,疾病稳定(SD) 15例,疾病进展(PD)19例,有效率(ER)为33.33％,疾病控制率(DCR)为62.75％.一线治疗32例,ER为40.63％,DCR为75％;二线治疗19例,ER为21.05％,DCR为42.11％.贝伐珠单抗联合一线、二线化疗患者的ER差异无统计学意义(P＞0.05),但DCR差异有统计学意义(P=0.019),贝伐珠单抗联合不同化疗方案及分别治疗结、直肠癌患者的ER和DCR差异均无统计学意义(P＞0.05).贝伐珠单抗联合一线化疗的无进展生存时间(PFS)明显优于联合二线化疗(P＜0.001),但总生存期(OS)差异无统计学意义(P=0.08);贝伐珠单抗联合FOLFIRI、FOLFOX、XELOX及XELIRI方案的中位PFS及OS差异有统计学意义(P＜0.001),且以贝伐珠单抗联合以伊立替康为基础的化疗方案疗效更佳.贝伐珠单抗的不良反应主要有高血压7例(13.73％)、皮疹6例(11.76％)、蛋白尿2例(3.92％)、出血2例(3.92％),绝大多数是可控制的.结论 贝伐珠单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌患者的疗效是肯定的,贝伐珠单抗一线治疗的DCR及PFS均优于二线,且以贝伐珠单抗联合伊立替康为基础的化疗方案疗效更佳.
-
SALL4在肝癌中的表达及其对预后的影响
目的 检测人类婆罗双树样基因4 (SALL4)在肝癌中的表达情况,探讨SALL4表达与原发性肝细胞癌(HCC)患者预后的相关性.方法 应用免疫组织化学法检测60例石蜡HCC标本及其中32例癌旁组织标本SALL4蛋白的表达,分析其与HCC患者临床病理学资料及预后的关系;采用荧光定量RT-PCR、Western blot法,分别检测23例新鲜HCC及癌旁肝组织中SALL4 mRNA和蛋白的相对含量.结果 HCC组织中SALL4蛋白的表达率(81.67％,49/60)显著高于癌旁组织(6.25％,2/32),差异有统计学意义(x2=48.047,P＜0.01);SALL4蛋白在HCC中的表达与甲胎蛋白水平有关(P＜0.05);SALL4高表达和低表达组患者的平均生存时间分别为(26.20士2.37、34.05±1.26)个月,SALL4高表达组患者的1、3年生存率(75.9％、55.2％)显著低于SALL4低表达组1、3年生存率(95.0％、85.0％,x2=5.044,P＜0.05).肝癌及癌旁组织的SALL4 mRNA的相对量分别为14.80±8.62、0.17±0.13,两组比较差异有统计学意义(t=8.14,P＜0.01).Western blot检测结果显示,SALL4蛋白在HCC中的相对量为0.354±0.103.癌旁组织中几乎不表达.结论 SALL4表达与肝癌患者预后密切相关,可作为肝癌患者判断预后的预测指标.
-
慢性乙型肝炎患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞表达及其与肝组织病理、HBV-cccDNA的关系
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞与肝组织HBV-cecDNA及HBV-DNA载量、血清HBV-DNA载量、肝脏病理及肝功能的相关性.方法 采用流式细胞仪检测30例CHB及30例健康体检者外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞占CD4+T细胞百分率;并对其中22例患者行肝组织活检,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测CHB患者肝组织HBV-cccDNA、HBV-DNA载量;肝组织进行苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色、网染、VG染色,行炎症(G)分级及纤维化(S)分期;同期检测肝功能ALT水平,并对各检测值进行比较和相关性分析.结果 CHB患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞的百分率为(9.27±2.07)％,明显高于健康对照组(4.96±0.97)％,差异具有统计学意义(P＜0.05);CHB患者外周血CD4+ CD25+CD127low/-Treg细胞与血清HBV DNA(lgIU/mL)载量呈正相关(Pearson相关系数r=0.38,P＜0.05);与肝组织HBV-cccDNA及HBV-DNA(lgcps/mg)均无明显相关性(Pearson相关系数r分别为0.162、0.306,两者均P＞0.05);与肝组织炎症级别及纤维化分期均无明显相关性(Spearman秩相关系数r分别为0.056、一0.047,两者均为P＞0.05);与ALT亦无明显相关性(Pearson相关系数r=0.044,P＞0.05).结论 慢性乙型肝炎患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞水平明显升高且与血清HBV-DNA载量呈正相关,提示Treg细胞在慢性乙型肝炎中发挥着重要的负性免疫调节作用,可能是导致病毒复制持续存在的重要因素.
-
先天性厚甲症2型一家系的基因突变研究
目的 研究先天性厚甲症的基因突变,从而探讨基因型与表现型之间的关系.方法 提取1个先天性厚甲症家系中先证者及其家人的外周血基因组DNA,用聚合酶链反应扩增,产物测序检测.取先证者母亲的皮损做组织病理检查,观察皮损组织的角蛋白17的表达.结果 家系中两患者的角蛋白17的1号外显子第275位碱基发生A→G的杂合突变,其突变导致其编码角蛋白17的第92位氨基酸的密码子发生改变,使其编码的氨基酸由天冬酰胺变为丝氨酸(N92S).先证者母亲皮损组织病理检查为多发性脂囊瘤,免疫组化显示角蛋白17阳性表达.结论 验证了角蛋白17的1号外显子α螺旋1A区突变在先天性厚甲症发病机制中的重要作用.角蛋白17 1A区突变对脂囊瘤的早发可能存在一定影响,基因型与表型存在一定关联.
-
NRP-1在胃癌组织及细胞系中的表达及临床意义
目的 研究神经纤毛蛋白1(NRP-1)在胃癌组织的表达,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理因素的关系及可能的临床意义.方法 应用免疫组织化学染色检测180例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织标本NRP-1表达,用免疫印迹方法检测胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞NRP-1表达,K-M生存曲线和多因素回归模型用于分析胃癌预后.结果 胃癌组织中NRP-1表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.001),胃癌组织中NRP-1高表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、AJCC分期、T分期呈正相关(P＜0.05).多因素生存分析表明高表达NRP-1是胃癌患者总生存期的独立预后因子.结论 过表达NRP-1可能在胃癌进展中发挥着重要作用,过表达NRP-1可作为生物标志物预测胃癌患者的不良预后.
-
热诱导肿瘤特异性基因治疗载体的靶向性鉴定
目的 检测已构建热反应元件修饰的端粒酶逆转录酶hTERT基因启动子(8HSEs-hTERTp)调控的基因表达载体肿瘤特异性和热诱导特性.方法 ①RT PCR、Western blot和免疫细胞化学检测细胞内hTERT mRNA和蛋白表达水平,选择hTERT高表达和低表达的细胞株作为该研究阳性细胞株和阴性细胞株;②收集前期已包装成功的热反应元件8HSEs和人端粒酶逆转录酶启动子hTERTp联合调控自杀基因PNP表达的慢病毒表达载体8HhP病毒液,感染hTERT+ SW480细胞及hTERT-MKN28细胞、hTERT-MRC-5细胞,细胞免疫荧光技术检测该治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性;并用Western blot和RT-PCR分别检测热刺激条件下目的基因PNP在不同hTERT水平细胞株中的表达水平.结果 hTERT mRNA及蛋白在SW480细胞中高表达,在MKN28细胞和MRC-5细胞中低表达甚至阴性表达;免疫荧光、RT-PCR和Western blot结果显示,8HSEs-hTERTp调控的目的基因PNP只有在43℃处理下的SW480细胞中呈现高表达,而在阴性细胞株MKN28和MRC-5中PNP表达较少,而常温下SW480细胞中PNP的表达水平明显低于热处理组.结论 8HSEs修饰的hTERT启动子可以明显提高治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性.
-
相关蛋白在携带载脂蛋白-J基因大鼠BMSCs中的表达及意义
目的 检测重组质粒pEGFP-N1-apoJ在不同量、不同时间条件下转染大鼠骨髓间充质干细胞的瞬时转染效率,并测定载脂蛋白-J(ApoJ)在靶细胞中能否高表达.方法 贴壁培养细胞,并用脂质体LipofectaminTM 2000分别介导0.8、1.2、1.6、2.0μg重组质粒pEGFP-N1-apoJ转染,置荧光显微镜下观察转染结果,测定在24、48、72h时间点的瞬时转染效率.蛋白免疫印迹法分别检测pEGFP-N1-apoJ质粒转染组、空pEGFP-N1质粒转染组、空白对照组ApoJ的表达情况.结果 不同的质粒量中1.6 μg pEGFP-N1-apoJ质粒与3.0μL脂质体制备的复合物瞬时转染效率高,分别作用24、48、72 h可达27.8％、34.3％、28.2％.蛋白免疫印迹法检测到pEGFP-N1-apoJ质粒组大量ApoJ表达,空质粒及空白对照组见微量ApoJ表达;并且pEGFP-N1-apoJ质粒组Apo-J的表达明显高于空载体及空白对照组(P＜0.05).结论 利用脂质体介导可将重组质粒pEGFP-N1-apoJ成功转染入大鼠骨髓间充质干细胞,ApoJ在大鼠骨髓间充质干细胞中得到大量表达.
-
c-Jun氨基末端激酶信号通路参与电刺激大鼠三叉神经节偏头痛模型降钙素基因相关肽表达调控
目的 探究c-Jun氨基末端激酶(c Jun N-Terminal Kinase,JNK)信号转导通路对电刺激大鼠三叉神经节(TG)偏头痛模型中降钙素基因相关肽(CGRP)表达调控的作用.方法 成年雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、DMSO+模型组、SP50+模型组、SP25+模型组.采用电刺激大鼠单侧TG制作偏头痛模型,选择JNK信号通路特异性阻滞剂SP600125为干预药物.观察偏头痛造模前后的行为学变化.各组大鼠处理后24 h,Westernblot检测TG中磷酸化JNK蛋白(p-JNK)和JNK蛋白表达量并计算磷酸化比率,免疫组织化学染色检测CGRP表达量.结果 大鼠造模后前肢挠头次数增加、爬笼次数减少(P＜0.05).模型组、假手术组、DMSO+模型组、SP25+模型组大鼠TG内p-JNK比率较空白对照组明显升高(P＜0.05);SP50+模型组TG内p-JNK比率较模型组、SP25+模型组明显降低(P＜0.05);模型组TG内CGRP表达量较空白对照组、SP50+模型组明显升高(P＜0.05);模型组刺激侧TG内CGRP表达量明显高于未刺激侧.结论 电刺激大鼠单侧TG可使偏头痛急性发作过程中关键的神经血管活性肽CGRP表达升高,引发大鼠行为学变化,且JNK信号通路参与了TG内CGRP的表达调控过程.
-
水通道蛋白-1在小鼠肾小管发育中的表达
目的 观察水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP-1)在小鼠肾小管发育过程中的时空性表达,探讨AQP-1与肾小管发育的关系.方法 采用免疫组织化学技术结合体视学方法和免疫印迹法,测定不同胚龄(E)12、14、17、18d及生后日龄(P)1、3、7、14、24、40、70 d小鼠肾小管内AQP-1的表达及其含量变化.结果 免疫组织化学结果显示AQP-1在E14 d髓质部位发育中的小管即有表达,之后主要表达在近端小管、髓袢降支细段的管腔膜和侧基底膜,生肾区则无阳性表达.图像分析和体视学测量显示随着胚龄的增加,AQP-1在肾小管表达逐渐增强后趋于稳定;免疫印迹法显示AQP-1在肾脏的表达量在P7d达到高峰后趋于稳定.结论 AQP-1在肾小管的发育过程中存在时空性表达,对肾小管的发育和成熟起关键作用.
-
靶向下调Cep55表达水平对肝癌细胞增殖能力的影响
目的 通过siRNA干扰技术下调中心体相关蛋白Cep55的表达水平,并检测对肝癌HepG2和Hep3B细胞增殖能力的影响,为原发性肝癌的基因靶向治疗提供理论依据.方法 应用Cep55特异性siRNA转染肝癌HepG2和Hep3B细胞,采用Real-time PCR和Western blot方法分别从mRNA和蛋白质水平检测Cep55 siRNA对Cep55基因的干扰效果,MTT法检测下调Cep55表达水平时细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞周期分布变化.结果 与阴性对照组比较,干扰siRNA组Cep55的mRNA及蛋白表达水平均出现明显降低(P＜0.05);MTT检测结果显示下调Cep55表达水平能够显著抑制肝癌细胞增殖(P＜0.05);流式细胞仪检测显示下调Cep55表达水平能够增加G1期细胞的比例,同时降低G2-M期细胞的比例,出现明显的G2期阻滞.结论 下调Cep55表达水平能够显著抑制肝癌细胞的增殖能力,并出现G2期阻滞,提示Cep55可能成为原发性肝癌的有效治疗靶点.
-
靶向RWDD3基因shRNA慢病毒载体的构建及功能鉴定
目的 构建RWD结构小泛素化增强子(RWDD3) shRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制人脑胶质瘤细胞RWDD3基因的相关研究奠定基础.方法 设计RWDD3的3条siRNA的靶点序列,合成含干扰序列的双链DNA发卡结构shRNA,分别与双酶切后的载体连接,构建3种重组质粒pGC-LV-shRNA1、pGC-LV-shRNA2和pGC-LV-shRNA3,并转化于DH5α感受态细胞,提取阳性克隆质粒测序,转染293T细胞,生产慢病毒颗粒,并检测病毒滴度.将3种重组慢病毒及阴性对照病毒分别感染人脑胶质瘤细胞U251,实时定量PCR和Western blot分别检测RWDD3 mRNA和蛋白的沉默效果.结果 测序结果证实3种慢病毒载体均包装成功,滴度分别为5×1011 TU/L、4×1011 TU/L、5×1011TU/L.感染U251后,RWDD3 mRNA及蛋白的表达量均较阴性对照组和未感染组明显降低(P＜0.05);其中以LV-RWDD3-shRNA-1作用显著,mRNA表达下调79.2％,蛋白表达下调68.2％ (P＜0.05);而阴性感染对照组和未感染组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 成功构建3种RWDD3 shRNA慢病毒表达,可有效下调U251细胞RWDD3 mRNA和蛋白的表达,其为进一步研究以RWDD3为靶点的脑胶质瘤基因治疗提供稳定转染细胞的载体奠定基础.
-
α-硫辛酸对小鼠卵巢颗粒细胞氧化应激损伤和凋亡的影响
目的 探讨α-硫辛酸对小鼠颗粒细胞培养过程中抗氧化水平和抗凋亡水平的影响.方法 收集经PMSG处理的小鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24 h后,添加终浓度为100μmol/L的α-硫辛酸继续培养24 h,测定氧化水平SOD、MDA和GSH-Px参数,评价抗氧化能力,采用Trizol法提取各组细胞的RNA,进行RT-PCR法检测α-硫辛酸对caspase-3和caspase-9基因的表达情况的影响,同时利用细胞免疫荧光和ELISA法检测caspase-3和caspase-9蛋白表达,并分析α-硫辛酸降低细胞凋亡的作用.结果 分离培养的小鼠卵巢颗粒细胞α-硫辛酸添加后,SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P＜0.05);经过RT-PCR扩增技术获得长度为180 bp的特异性caspase-3产物,获得长度为152 bp的特异性caspase-9产物,α-硫辛酸添加可显著性降低caspase-3和caspase-9 mRNA的表达(P＜0.05);免疫荧光细胞化学染色显示颗粒细胞caspase-3和caspase-9蛋白阳性染色定位于细胞胞质,分别呈现绿色荧光和红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;ELISA结果显示α-硫辛酸添加后caspase-3和caspase-9酶活性显著下调(P＜0.05).结论 小鼠颗粒细胞培养过程中添加α-硫辛酸可明显改变细胞抗氧化能力,对卵巢颗粒细胞培养过程中的氧化应激诱导的细胞凋亡起到一定的保护作用.
-
阿托伐他汀对胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭能力的影响及机制
目的 研究阿托伐他汀体外对胰腺癌细胞株PANC-1的影响及其机制.方珐 不同浓度阿托伐他汀干预胰腺癌PANC-1细胞后,MTT法检测细胞的增殖、黏附作用,Transwell小室测定胰腺癌细胞的侵袭能力;RT-PCR方法测定MMP-2和VEGF的mRNA表达变化;Western blot方法检测ERK1/2的蛋白表达水平.结果 不同浓度阿托伐他汀干预胰腺癌PANC-1细胞后,细胞的增殖能力降低,并呈剂量时间依赖性.此外,阿托伐他汀可以抑制PANC-1细胞的黏附、侵袭能力,检测加药后PANC-1细胞内MMP-2、VEGF mRNA的相对表达量降低,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P=0.001 3,P=0.007),ERK1/2蛋白的相对表达量降低(P=0.001 5).结论 在体外细胞培养实验中,阿托伐他汀能显著抑制胰腺癌PANG1细胞的增殖、黏附、侵袭能力,其机制可能是通过调控MAPK/ERK1/2通路减少MMP-2及VEGF的表达而实现.
-
重组异种骨对Balb/c小鼠的免疫学影响
目的 动态评价小鼠植入重组异种骨后的免疫毒性改变,揭示该重组异种骨的免疫学作用机制.方法 以广东冠昊生物科技股份有限公司研发的重组异种骨为材料,进行体外检测该重组异种骨的淋巴细胞转化实验;将重组异种骨植入Balb/c小鼠右侧股部肌间隙,分别通过血生化分析仪、ELISA和流式细胞术,于植入后1周、2周、4周动态监测Balb/c小鼠免疫学改变,综合评价该重组异种骨对机体的免疫学影响.结果 通过实验发现,该重组异种骨无明显的体外淋巴细胞免疫刺激作用;异种骨植入小鼠后,其血清中C3、IgG、IgM、炎性因子(TNF-α、IL-6)水平以及植入物局部碱性磷酸酶(ALP)含量均与阴性对照组(即假手术组)无明显差异,且该异种骨植入对小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)及其淋巴结淋巴细胞的分群和活化均无显著影响.结论 该重组异种骨不能引起体内外的免疫毒性反应,从而为重组异种骨的临床应用提供实验数据和理论依据.
-
抗氧化剂对过氧化氢处理的急性单核细胞白血病细胞增殖的影响
目的 通过建立急性单核细胞白血病活性氧(ROS)细胞模型,观察抗氧化剂对其增殖的影响.方法 选用人单核细胞白血病U937细胞株,用不同浓度过氧化氢(H2O2)处理,成功建立ROS细胞模型后给予不同浓度抗氧化剂超氧化物歧化酶(SOD)处理,检测细胞增殖、细胞内ROS含量、线粒体膜电位的变化.结果 低浓度H2O2 (50 μmol/L)刺激U937细胞增殖;高浓度H2O2(500 μmol/L)对U937细胞产生毒性作用.以50 μmol/L H2O2处理U937细胞48 h建立实验模型.正常U937细胞内存在少量ROS,少量凋亡细胞;50 μmol/L H2O2处理后细胞内ROS增多,线粒体膜电位升高,凋亡率下降,细胞增殖旺盛,新合成的DNA增多;加入不同浓度抗氧化剂SOD,随着SOD浓度升高,ROS含量减少,线粒体膜电位下降,凋亡率增加,细胞增殖减慢,新合成的DNA减少,表现出剂量依赖性.结论 抗氧化剂对急性单核细胞白血病细胞增殖有抑制作用,且表现剂量依赖性.
-
3-MA通过抑制自噬反应提高结肠癌5-FU的化疗效果
目的 探索新的联合化疗方案以提高5-FU为基础的结肠癌化疗效果.方珐 研究5-FU(7.5 μmol/L)、3-MA(5 mmol/L)以及两种药物联合使用对人结肠癌细胞株HCT116的自噬及凋亡影响.MTT、Hoechst+ PI染色检测细胞生长及凋亡,MDC染色观察细胞内自噬反应,Western blotting观察细胞内的凋亡及自噬相关蛋白改变.将HCT116细胞注射至裸鼠皮下建立在体肿瘤模型并进行治疗,观察肿瘤生长情况.结果 MTT检测结果显示HCT116在5-FU作用下细胞生长受到抑制,Hoechst+PI染色显示5-FU联合3-MA组凋亡数量较5-FU组明显增加;Western blotting检测5-FU联合3-MA组的凋亡蛋白Caspase-3、PARP表达较5-FU组明显增高.同时,MDC染色以及自噬特异性蛋白LC3II检测发现在5-FU作用下自噬反应升高,而通过3-MA抑制5-FU引起的细胞自噬反应,细胞生长抑制率从5-FU单独作用的(51.64±4.04)％提高至(79.89±1.35)％,凋亡增加超过100％.皮下注射HCT116细胞的裸鼠肿瘤模型,5-FU联合3-MA组较单独使用5-FU组有效抑制肿瘤生长,肿瘤体积及质量均明显减少.结论 3-MA可抑制5-FU处理引起的细胞自噬反应,促进细胞凋亡,HCT116细胞生长抑制率明显增加;为提高5-FU为基础的结肠癌化疗提供新思路.
-
脊柱转移瘤患者的预后因素分析
目的 研究脊柱转移瘤的预后因素,试图找出影响患者预后的独立因素.方法 对2009年1月1日至2014年9月31日收治的脊柱转移瘤患者进行随访,共105名患者获得满意随访,随访时间5～56月.采用Kaplan-Meier生存曲线,行单因素分析,再将结果中与患者预后相关的因素纳入COX比例风险回归模型中,行多因素分析.运用SPSS20.0软件进行统计学分析,以α=0.05为检验水准.结果 单因素分析结果显示,原发肿瘤类型、累及椎体数目、脊柱外骨转移、内脏转移、治疗前一般状况(Karnofsky评分)、神经功能状态(Frankel分级)、行走功能、大小便功能等与患者的预后相关;多因素分析显示,原发肿瘤类型、内脏转移、治疗前Karnofsky评分及行走状态是影响患者预后的独立因素.结论 原发肿瘤类型、内脏转移、治疗前Karnofsky评分及行走状态是影响脊柱转移瘤患者预后的独立危险因素.
-
老年危重症患者心衰发病特征及相关危险因素分析
目的 分析老年危重症住院患者心衰构成比及临床特点,并探讨老年危重症患者发生心衰的相关危险因素.方法 采用回顾性队列研究的方式,连续收集2010年1月至2014年6月笔者单位ICU收治的2 871例老年危重症患者作为研究对象,收集患者临床资料,计算心衰构成比,分析患者心衰特点,采用多因素Logistic回归分析筛选老年危重症患者发生心衰的相关危险因素.结果 2 871例老年危重症患者中,689例患者合并有心衰,心衰构成比为24.0％.心衰患者的平均年龄高于无心衰患者[(77.2士10.6)岁vs.(72.9±15.6)岁,t=6.759,P＜0.001];而心衰患者与无心衰患者的性别构成之间差异无统计学意义(x2=1.021,P=0.312).有126例(22.7％)患者的左室射血分数(LVEF)＜40％;低LVEF的老年危重症患者相较于左室收缩功能正常的心衰患者的年龄明显偏小[(73.5±12.6)岁vs.(77.4±9.7)岁,t=-7.456,P＜0.001],而男性所占比例更多(68.1％ vs.53.1％;x2=47.977,P＜0.001).多因素Logistic回归分析显示:冠心病(OR=8.907)、瓣膜性心脏病(OR=7.152)、糖尿病(OR=2.213)、肾功能不全(OR=2.905)、急诊手术(OR=3.374)是老年危重症患者心衰发病的独立危险因素.结论 老年危重症患者的心衰发病受到基础病因等多因素影响,针对老年危重症患者维持肾脏功能、减少急诊手术等可以有效降低心衰的发病风险.
-
姜黄素对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B侵袭转移的影响
目的 研究姜黄素对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B侵袭转移的影响及其可能的机制.方法 不同浓度(0、10、20、30 μmol/L)的姜黄素处理HEC-1-B细胞后,MTT法检测其对HEC-1-B细胞的生长抑制作用;体外Transwell小室实验检测姜黄素和/(或)PDTC对HEC-1-B细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测姜黄素对MMP-2、MMP-9表达、活性以及p65、p50蛋白水平的影响.结果 体外实验结果显示,姜黄素明显抑制子宫内膜癌细胞的生长、迁移及侵袭,且其作用呈时间-剂量依赖关系,其差异具有统计学意义(P＜0.001).此外,姜黄素处理HEC-1-B细胞24 h后,细胞中MMP-2、MMP-9的表达、蛋白酶活性及P65、P50水平均明显减弱.单独使用姜黄素、PDTC组均可抑制其侵袭力,两者联合用药后对癌细胞侵袭能力的抑制效应较单独使用更明显,且明显下调MMP-2、MMP-9的表达,从而进一步拮抗HEG-1-B细胞的粘附和侵袭.结论 姜黄素通过抑制上游核转录因子κB(NF-κB)活性而下调MMP-2和MMP-9的表达,进而抑制人子宫内膜癌HEC-1-B细胞的侵袭和转移.因此,姜黄素是一种潜在的子宫内膜癌治疗剂.
-
苏子油干预血管内皮细胞miR-21靶向调控MMP-9的机制
目的 探讨不同浓度苏子油干预人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC) miR-21和基质金属蛋白酶MMP-9的表达,为苏子油改善动脉粥样硬化提供依据.方法 体外培养HUVEC,以TNF-α诱导细胞进行造模,将细胞分为空白组、模型组及苏子油高、中、低剂量组.MMT法检测各组细胞A值;PT-PCR检测细胞miR-21、MMP-9基因水平;脂质体转染法将miR-21模拟物转入HUVEC细胞,Western blot检测转染后MMP-9蛋白的表达.结果 苏子油高、中、低剂量能明显改善TNF-α诱导的HUVEC损伤,且苏子油对内皮细胞的保护作用呈剂量依赖关系;RT-PCR结果显示,模型组miR-21及MMP-9的表达高,苏子油干预后,miR-21及MMP-9基因的表达逐渐减弱,且二者分别与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞转染miR-21后,MMP-9蛋白的表达显著增强;miR-21与MMP-9 mRNA3'UTR区经生物信息学软件预测存在靶向结合位点.结论 苏子油可能通过干预miR-21靶向调控MMP-9的表达对血管内皮细胞发挥保护作用,从而发挥抗动脉粥样硬化作用.
-
绿原酸对高强度运动引起的膝关节软骨损伤的保护作用
目的 探讨绿原酸在高强度运动引起的大鼠膝关节软骨损伤中的保护作用及其可能的机制.方法 将同龄SD大鼠随机分为3组:运动组、干预组和对照组.运动组和干预组大鼠每天在自制电刺激运动装置中进行一次持续40 min的跳跃运动,中间休息10 min,每周运动6d,休息1d;干预组在每日运动前,给予腹腔注射绿原酸;对照组无任何处理.4周后,取含左后肢膝关节液的生理盐水用ELISA法测定其中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)含量和MMP-3酶活性,并利用蕃红染色评估膝关节软骨损伤情况.结果 与对照组相比,运动组大鼠膝关节软骨表面不光滑,出现很多微小裂隙,滑膜肿胀,软骨细胞增多紊乱,基质中糖胺多糖含量减少,关节液中IL-1β、TNF-α含量明显升高,MMP-3含量和酶活性均升高;而干预组大鼠膝关节软骨损伤程度较运动组轻,关节液中IL-1β、TNF-α含量、MMP-3含量和酶活性均低于运动组.结论 绿原酸对高强度跳跃运动引发的膝关节软骨损伤具有一定的保护作用,抑制炎症因子介导的MMP-3活化可能是其发挥上述保护作用的主要机制之一.
-
复方丹参滴丸对大鼠糖尿病肾病早期的肾脏保护及作用机制
目的 探讨复方丹参滴丸对早期糖尿病肾病的保护作用及可能机制.方法 腹腔注射链脲佐菌素建立高血糖大鼠动物模型.造模成功的大鼠随机分为模型组、复方丹参组以及厄贝沙坦组,分别给予蒸馏水、复方丹参滴丸及厄贝沙坦灌胃.另设正常对照组以同体积蒸馏水灌胃.测定尿白蛋白、血肌酐及血糖;肾脏组织行PAS、Masson染色,电镜观察超微结构,免疫组化检测肾组织血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)、巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达.结果 复方丹参滴丸大剂量时可减少尿白蛋白排泄率、减轻肾脏的病理变化.降低肾小球VEGF、CTGF、MCP-1蛋白表达水平.结论 复方丹参滴丸能有效改善糖尿病所致的肾脏损害,其保护作用可能与降低生长因子和炎症因子有关.
-
围产期母体营养状态对子代下丘脑食欲调控网络胚胎编程的研究进展
围产期的不良营养因素对子代相关组织的发育具有程控作用,可能引起能量代谢异常并导致代谢相关性疾病的发病.下丘脑是各种食欲调节信号的主要整合中枢,目前已发现多种食欲调节肽在下丘脑食欲调节网络中都扮演了重要的角色.研究表明,下丘脑的食欲调节网络在出生前就已建立,孕晚期及断奶前是食欲调控神经系统的分化发育的关键时期.食欲的调控是一个复杂的生理过程,多种递质、调质或肽类物质参与介导这一机制.其中,脂肪细胞释放的瘦素(leptin)是调控食欲和能量代谢的重要因子.Leptin在围产期母体肥胖程控子代肥胖及代谢异常中可能同样扮演着重要角色,下丘脑食欲调控神经网络的正常发育也一定程度地依赖于出生早期leptin水平的迅速升高.下丘脑的多个脑区,包括摄食调控中枢神经元均表达瘦素受体.研究围产期营养状态对子代下丘脑leptin神经调控网络发育的胚胎编程作用对揭示代谢性疾病发病的先天因素具有重要意义.
-
小鼠皮肤光老化动物模型建立方法的改良
目的 改良小鼠皮肤光老化动物模型的建立方法,为临床防治皮肤光老化打下基础.方法 设计制作一种构建小鼠皮肤光老化动物模型的装置,利用装置中紫外线(UVA 315～400 nm;UVB 280～315 nm)照射ICR小鼠,3次/周,共12周,累计照射剂量:UVA为151.20 J/cm2,UVB为22.68J/cm2;观察照射部位皮肤的临床表现、组织病理及超微结构的改变情况,测定皮肤中羟脯氨酸含量.结果 与正常对照组小鼠皮肤比较,模型组皮肤出现粗糙增厚、弹性丧失、粗深皱纹、毛细血管扩张、脱屑及皮革样外观;组织病理可见表皮不规则增厚,真皮胶原纤维变性,断裂减少,排列紊乱,分布不均;超微结构显示胶原纤维排列紊乱,分布不均,周期性横纹不清,横断面胶原纤维直径增大,粗细不等;皮肤中羟脯氨酸含量显著减少(P＜0.01).提示造模成功.结论 利用改良的自制造模装置建立ICR小鼠皮肤光老化动物模型是一种简便易行、经济实用、可复性强的方法.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 03 04 05 06 |
| 1999 | 03 |
