XRCC1单核苷酸多态性与结直肠癌风险的关系

背景与目的:X线交叉互补基因1(X-ray repair cross complementing group 1,XRCC1)编码蛋白在DNA单链断裂修复和DNA碱基修复过程中起重要作用.该基因外显子多态性的存在可影响编码蛋白的功能活性,终使机体对癌症的易感性发生变化.本研究旨在探讨该基因外显子常见的3处单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)--C26304T、G27466A和G28152A与结直肠癌风险的关系.方法:以聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和限制性片段长度多态性(restrictive fragment length polymorphism,RFLP)分析方法,检测207例结直肠癌病例和621例成组匹配的正常对照XRCC1 C26304T、G27466A和G28152A基因型,并比较不同基因型与结直肠癌风险的关系.采用EH Linkage Software 1.2统计分析软件对研究对象的单体型分布进行预测.结果:年龄、性别、身体质量指数(body mass index,BMI)等个体特征,以及吸烟、饮酒等常见环境暴露因素的分布和/或构成比在结直肠癌病例组和对照组间差异均无显著性(P＞0.05).对XRCC1各多态基因型检测分型发现,结直肠癌病例组携带26304T、27466A和28152A变异等位基因的频率分别为29.95%、11.22%和28.22%,对照组分别为32.87%、12.34%和27.27%,各多态等位基因在两组间分布均没有显著性差异(P＞0.05).各多态基因型分布经x2拟合优度检验均符合Hardy-Weinberg平衡定律,且在两组间都没有显著性差异(P＞0.05).没有观察到各多态基因型与结直肠癌发病风险存在显著相关关系(P＞0.05).单体型分析发现,各变异等位基因在病例组和对照组内均存在遗传连锁不平衡现象,CGG、CGA、CAG和TGG是常见的4类单体型,其在两组的分布频率总和分别为95.54%和96.64%,然而在两组间同样不存在显著性差异(P＞0.05).结论:我国浙江省嘉善县人群中,XRCC1 C26304T、G27466A和G28152A基因多态性与结直肠癌发病风险不存在相关性,然而各变异等位基因存在遗传连锁不平衡现象,CGG、CGA、CAG和TGG是常见的4类单体型.

PTEN在人脑胶质瘤细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

背景与目的:PTEN基因的缺失及突变与多种肿瘤有关,而脑胶质瘤是与PTEN基因变异关系为密切的恶性肿瘤之一.本研究旨在观察PTEN基因对人脑胶质瘤细胞生物学特性的影响,为PTEN用于胶质瘤基因治疗提供科学的实验依据.方法:(1)应用RT-PCR方法扩增人脑胶质瘤细胞U251、SHG-44中PTEN基因,序列测定分析.(2)采用阳离子聚合物转染试剂,将携带野生型PTEN基因的重组真核表达载体质粒转染至胶质瘤细胞,G418筛选出稳定转染的细胞并扩增培养.通过细胞形态学、细胞生长曲线观察PTEN基因表达对细胞形态和增殖的影响,应用Western blot、免疫细胞化学法检测相关蛋白的表达.结果:(1)胶质瘤细胞U251和SHG-44的PTEN mRNA分别存在着突变型、缺失型两种表达方式.(2)稳定转染的U251和SHG-44细胞株的生长曲线显示细胞增殖明显受抑制,第7天细胞计数分别为未转染对照组细胞数的39.1%、27.8%;Westem blot显示稳定转染细胞株有外源性PTEN蛋白的表达;细胞免疫化学法显示胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达量增加,从而表现出对细胞形态影响的差异,稳定转染的U251细胞出现向星形细胞分化的特征,SHG-44细胞形态转染前后无明显改变.结论:恢复野生型PTEN基因表达对胶质瘤细胞存在差异性的诱导分化作用.

siRNA抑制Ku80表达后对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

背景与目的:Ku80为细胞受辐射后DNA双链断裂(DNA double strand break,DSB)的主要修复蛋白.现阶段关于Ku80的研究主要集中在DSB修复方面,其他方面研究较少.本研究建立利用siRNA抑制Ku80表达的宫颈癌HeLa细胞模型,以此探讨Ku80在细胞增殖方面的作用.方法:构建靶向抑制Ku80的siRNA表达载体,转染HeLa细胞,筛选稳定表达siRNA的转化克隆;Western blot检测Ku80表达变化:克隆形成实验、MTT法和裸鼠皮下瘤形成实验分别检测细胞克隆形成率及细胞在体外和体内的增殖情况.结果:构建表达质粒pKu80-siRNA与pNeg-siRNA转染HeLa细胞,G418筛选后获得稳定转染克隆,Western blot分析表明转染pKu80-siRNA后的细胞Ku80蛋白表达受到明显抑制,将其命名为HeLa/Ku80-siRNA;转染pNeg-siRNA的HeLa细胞克隆形成率为0.62±0.02,而HeLa/Ku80-siRNA细胞的克隆形成率为0.46±0.05,明显低于对照细胞(t=5.11,P＜0.01);MTT显示细胞培养48 h和72 h时,HeLa/Ku80-siRNA细胞的增殖率均显著低于对照细胞(P＜0.05);裸鼠皮下瘤生长实验示种植25天时,HeLa/Ku80-siRNA细胞种植瘤的平均体积为(18.92±3.60)mm3,明显低于对照细胞种植瘤体积(194.88±30.61)mm3,(t=12.69,P＜0.01).结论:稳定转染及siRNA技术建立的Ku80表达抑制克隆可以成为简单实用的细胞模型:Ku80-siRNA抑制Ku80的表达后可以在体内外抑制HeLa细胞的增殖.

水泡口炎病毒M蛋白对小鼠Lewis肺癌LL/2c细胞增殖与凋亡的影响

背景与目的:水泡口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)具有明显的抗肿瘤作用,在人的A549肿瘤模型和小鼠的LL/2c模型中已取得了明显的治疗效果.但复制完全型病毒在临床应用中存在着一定的安全隐患,且研究报道VSV抗肿瘤作用与其基质蛋白(matrix protein,M蛋白)有关.本研究旨在探讨VSV-M蛋白对小鼠的LL/2c肿瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用分子克隆技术构建VSV-M蛋白重组真核表达质粒pcDNA3.1-M,经酶切、PCR、测序鉴定得到阳性重组子,体外转染LL/2c细胞,RT-PCR、Western blot检测M蛋白的表达.采用噻唑蓝(MTT)法检测了M蛋白质粒对LL/2c肿瘤细胞增殖的影响.DNALadder、Hoechst33528染色检测LL/2c肿瘤细胞凋亡.结果:构建了VSV-M蛋白真核表达质粒pcDNA3.1-M.重组质粒体外转染LL/2c细胞后,检测到M蛋白的表达;倒置显微镜下观察到细胞形态学的改变,且48 h后细胞生长抑制明显,抑制率达41.3%(P＜0.05),而空载体转染组只有6.5%的抑制率(P＞0.05).琼脂糖凝胶电泳可见DNA ladder形成,Hoechst 33528染色检测到LL/2c细胞凋亡,细胞核改变.结论:VSV-M蛋白可抑制小鼠LL/2c细胞增殖,并诱导细胞凋亡.

恶性胶质瘤细胞甲酰化肽受体表达及其活化后促瘤细胞增殖和血管生成因子产生的作用

背景与目的:趋化因子受体在多种病理过程中发挥重要作用,通过促进肿瘤细胞增殖、迁移或血管生成过程,进而在肿瘤发生、演进和转移中发挥极为重要的作用.本研究拟探讨甲酰化肽受体(formylpeptide receptor,FPR)在人恶性胶质瘤细胞中的表达和激活后的功能活性.方法:以人恶性胶质瘤细胞U87和FPR-siRNA-U87细胞为研究对象,采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测人恶性胶质瘤细胞FPR的表达和定位;用FPR配体甲酰-甲硫酰-亮氨酰-苯丙氨酰胺(formy-Met-Leu-Phe,fMLF)激活FPR后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,双抗夹心酶联免疫(ELISA)吸附法检测细胞分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)水平,RT-PCR法检测细胞IL-8 mRNA的水平.结果:恶性胶质瘤细胞U87有FPR表达,定位于细胞膜,FPR-siRNA-U87细胞不表达FPR:FPR激动剂fMLF对人恶性胶质瘤细胞具有明显的促增殖作用,U87细胞fMLF刺激组A值较对照组显著升高(P＜0.05),FPR-siRNA-U87细胞fMLF刺激组A值与对照组相比无显著性差异(P＞0.05);fMLF作为FPR的激动剂,在12 h、24 h、36 h和48 h等各时相点U87细胞的VEGF和IL-8蛋白水平均显著增加,以处理36 h为观察时间点,U87细胞VEGF蛋白水平[(3.13±0.23)ng/ml]较对照组显著增加(P＜0.05),IL-8蛋白分泌量为(7.54±0.53)ng/ml,较对照组显著增加(P＜0.05);FPR-siRNA-U87细胞VEGF和IL-8蛋白分泌量分别为(1.26±0.05)ng/ml和(1.54±0.05)ng/ml,较对照组无明显改变(P＞0.05);fMLF能显著上调U87细胞IL-8 mRNA的表达,较对照组显著升高(P＜0.05),FPR-siRNA-U87细胞IL-8 mRNA水平与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论:人恶性胶质瘤细胞膜存在功能性FPR受体,其活化后具有促瘤细胞增殖和分泌血管生成因子的作用.

XRCC5基因多态性与高发区食管癌、贲门癌遗传易感性的相关性

背景与目的:XRCC5为DNA双链断裂修复基因,其表达异常、活性紊乱与肿瘤的发生和发展密切相关.本研究旨在探讨XRCC5基因多态性与河北省食管癌高发区一磁、涉县人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)遗传易感性的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测329例ESCC患者、255名GCA患者和631例健康对照人群XRCC5 C74468A、G74582A单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)的基因型分布.结果:XRCC5基因C74468A C和A的等位基因频率及C/C、A/C、A/A基因型频率在ESCC、GCA及对照组之间差异无显著性(P＞0.05).根据吸烟状况和上消化道肿瘤(UGIC)家族史分层分析发现,携带A等位基因(A/C+A/A基因型)可能降低上消化道肿瘤阳性家族史人群的ESCC、GCA发病风险(经性别、年龄和吸烟校正后的OR分别为0.58和0.61,95%CI分别为0.38～0.90和0.38～0.97).XRCC5 G74582A基因G、A等位基因频率及鞍A/A、A/G、G/G基因型频率在ESCC、GCA及对照组之间亦差异无显著性(P＞0.05).分层分析发现,携带G等位基因(A/G+G/G基因型)可能降低上消化道肿瘤阳性家族史人群的GCA发病风险(经性别、年龄和吸烟校正后的OR为0.63,95%CI为0.40～0.98).两多态性位点联合分析显示,ESCC、GCA患者与健康对照组的单体型分布差异也无显著性(P＞0.05).结论:XRCC5 C74468A A等位基因(A/C+A/A基因型)可能降低磁县和涉县上消化道肿瘤阳性家族史人群的ESCC、GCA发病风险.而G74582A G等位基因(A/G+G/G基因型)可能仅降低该地区上消化道肿瘤阳性家族史人群的GCA发病风险.

胃癌患者调节性T细胞胞内外细胞因子的检测及其意义

背景与目的:目前认为CD4+CD25+调节性T细胞与胃癌患者的免疫功能抑制密切相关,但CD4+CD25+调节性T细胞发挥免疫抑制功能的作用机制并不十分清楚.本研究通过检测胃癌患者CD4+CD25+调节性T细胞产生具有不同生物活性的细胞因子干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-10及肿瘤生长因子-β(tumor growth factor-β,TGF-β)的分泌情况,进一步探讨这些细胞因子在胃癌患者CD4+CD25+调节性T细胞发挥免疫抑制功能的作用.方法:按常规方法制备患者外周血单个核淋巴细胞,采用免疫磁珠分选方法分离CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25-T细胞后,用细胞内细胞因子染色法及ELISA法分别研究CD4+CD25+T细胞在胞内及胞外产生具有不同生物活性的细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-1O及TGF-β的水平.结果:(1)与健康对照组比较,胃癌患者分泌内细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-10的CD4+CD25+T细胞占CD4+细胞的百分比均显著增高(P＜0.05).(2)培养96 h后,上清液的各种细胞因子水平,无论是胃癌患者还是健康对照组,CD4+CD25+T细胞分泌的IL-10及TGF-β均显著高于CD4+CD25-T细胞(P＜0.05).CD4+CD25+T细胞分泌的IFN-γ显著低于CD4+CD25-T细胞(P＜0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞体外免疫抑制作用的发挥可能与一些抑制性细胞因子有关,特别是细胞因子TGF-β在胃癌CD4+CD25+调节性T细胞的免疫抑制功能中起着相当重要的作用.

自噬基因Beclin1与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性研究

背景与目的:有研究表明自噬的抑制与肿瘤的发生有关,沉默自噬基因Beclin1可导致多种恶性肿瘤的发生.本研究探讨Beclin1基因在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用,并分析其过表达对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响.方法:用免疫组化检测25例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤、19例交界性上皮性卵巢肿瘤及69例上皮性卵巢癌组织的Beclin1表达;构建真核表达载体pcDNA3.1/Beclin1,脂质体法分别将质粒pcDNA3.1/Beclin1、pcDNA3.1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,并用流式细胞仪检测凋亡情况.结果:正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织中Beclin1表达的积分光密度(integrated optical density,IOD)值均较高,两者之间的差异无显著性(P＞0.05);交界性卵巢肿瘤组织中Beclin1的表达降低,而在上皮性卵巢癌中Beclin1表达的IOD值低,与正常卵巢组织比较差异有显著性(P＜0.05).ocDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后细胞生长抑制率为(68.75±5.10)%,而pcDNA3.1转染组为(10.91±4.20)%,两者之间差异有显著性(P＜0.05).pcDNA3.1/Beclin1转染后72 h SKOV3细胞的凋亡率为19.07%,高于pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P＜0.05).结论:Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达下调,可能与上皮性卵巢癌的发生、发展有关;自噬基因Beclin1的过表达可抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖,并诱导其凋亡.

应用蛋白质组学技术研究反义Cyclin B1的抗肿瘤作用机制

背景与目的:先前研究发现采用反义技术下调cyclin B1基因表达水平,可产生抗肿瘤的作用,但其抗肿瘤机制有待进一步研究.本研究旨在利用比较蛋白质组学的方法来探讨反义cyclin B1抗肿瘤作用的分子机制.方法:首先用含有小鼠cyclin B1反义全长cDNA的重组质粒转染小鼠CT26结肠癌细胞,经双向凝胶电泳(2-DE)分离转染组和未转染组的总蛋白,再用PDQuest图像分析识别2-DE胶图像,然后对差异表达的蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF-MS)质谱分析,再经Mascot软件搜索数据库鉴定这些差异蛋白.后根据被鉴定肽段的可信度,从这些蛋白质中选出肽段可信度高的2个,用Western blot对其丰度差异进行了验证.结果:初步鉴定出7个差异表达蛋白,其中Axin2、CCTθ、DR5和HPCM27蛋白质在实验组上调,RFP17、mKIAA1195及LOC77035蛋白在实验组下调,而可信度高的Axin2和DR5的蛋白质表达丰度差异为Western blot所证实.结论:多种蛋白质在反义cyclin B1后表达有明显差异,这些差异蛋白质参与细胞的增殖、分化、迁移、凋亡及转录调控等多条信号通路,提示反义cyclin B1的抗肿瘤机制可能与上述蛋白质的作用有关.

白血病单倍型骨髓移植后T细胞克隆的T细胞受体分子特征

背景与目的:临床及实验研究结果表明,异基因造血干细胞移植后T细胞免疫恢复延迟,单倍型造血干细胞移植免疫重建与临床经过密切相关.本课题通过T细胞受体谱型分析,研究白血病单倍型骨髓移植后细胞免疫重建特点及与移植物抗宿主病(GVHD)相关的T细胞克隆的T细胞受体β链可变区互补决定3区(TCRBV CDR3)分子特征.方法:应用RT-PCR扩增9例不同类型白血病单倍型骨髓移植后患者及5名正常供者的外周血的TCRBV 24个家族的基因序列,并通过基因扫描的方法判断TCRBV家族的克隆表达情况、CDR3克隆性质及测定BV家族的利用率.对于单克隆表达的与GVHD相关T细胞克隆进行序列测定.结果:在移植后10～19个月,TCRBV家族的利用仍处于不均一状态,检测到部分BV家族缺失,部分家族出现寡克隆、单克隆T细胞增殖.在疾病相对稳定的4例患者中,在9～14个BV家族中有表达,且多克隆家族的表达率在50%以上.另5例为疾病处于活动状态,发生Ⅱ～Ⅲ度GVHD或巨细胞病毒(CMV)感染,对BV家族的利用明显减少,多为单克隆或寡克隆表达,多克隆表达率仅30%,未发现共用的单克隆BV家族.其中2例患者在治疗前后不同时间,随着疾病趋于稳定,BV家族的利用增加,CDR3的多克隆群体增加.得到的一组与GVHD直接相关的TCRBV CDR3分子,通过比较未发现共同使用的氨基酸基序.结论:单倍型骨髓移植后10～19个月,在疾病相对稳定期,9～12个BV家族有表达,以多克隆家族表达为主.在疾病活动状态,BV家族表达减少,以单克隆或寡克隆表达为主.与GVHD相关的克隆性T细胞,未发现共同使用的CDR3氨基酸基序.

宫颈腺癌细胞CXCR4/CXCL12过表达与淋巴结转移和慢性炎症的关系

背景与目的:CXCL12是一种炎症趋化因子,CXCR4是其特异性受体.有文献报道CXCR4参与多种恶性肿瘤的转移过程.但CXCR4/CXCL12在宫颈腺癌细胞中表达的意义鲜见报道.本研究探讨CXCR4/CXCL12在宫颈腺癌细胞中过表达与淋巴结转移及宫颈慢性炎症程度的相关性.方法:收集35例行子宫颈癌根治术的Ⅰ B1～ⅡB期宫颈腺癌标本,其中有淋巴结转移组8例,无淋巴结转移组27例.组织切片行CXCR4和CXCL12免疫组化染色及HE染色,90%以上肿瘤细胞强着色定义为过表达.采用Fisher's精确概率检验法、卡方检验及Pearson相关检验分析结果.结果:35例均有不同数量肿瘤细胞表达CXCR4.有淋巴结转移组CXCR4过表达率(62.50%,5/8)高于无淋巴结转移组(22.00%,6/27),P＜0.05.临床Ⅰ B期有淋巴结转移组CXCR4过表达率(33.33%,1/3)高于无淋巴结转移组(26.01%,6/23),但P＞0.05;临床ⅡB期,有淋巴结转移组CXCR4过表达率高于无淋巴结转移组(80.00%,4/5 vs.0.00%,0/4),P＜0.05.CXCR4过表达预测淋巴结转移的阳性预测值为45.45%,阴性预测值为87.50%.35例中33例有数量不等的肿瘤细胞表达CXCL12.无论有淋巴结转移组或无淋巴结转移组,临床Ⅱ期病例CXCL12过表达率均明显高于I B期(0.00% vs.80.00%,21.73% vs.75.00%),P＜O.05.23例临床Ⅰ B期无淋巴结转移组,CXCR4过表达率与CXCL12过表达率呈正相关(P＜0.05):但在Ⅰ B期有淋巴结转移组(3例)及ⅡB期(9例)病例组,两者间无相关性.35例病例均伴有不同程度慢性炎症,炎性浸润主要为淋巴细胞.CXCL12过表达率与宫颈慢性炎症浸润程度无相关性,P＞0.05.结论:宫颈腺癌细胞CXCR4过表达提示具有较高淋巴结转移潜能.随着肿瘤进展,CXCL12过表达率也随之升高.宫颈腺癌中慢性炎症细胞可能由其它趋化因子吸引所致,而非CXCL12.

声门下型喉癌10例临床回顾性分析并文献复习

背景与目的:声门下型喉癌发病率低,且解剖部位隐匿,故极易漏诊、误诊,确诊时常为临床晚期;因缺乏大宗病例对照研究,其治疗方法目前尚存在争议.本研究旨在探讨声门下型喉癌的临床特征、治疗方法及疗效.方法:回顾分析1981年1月至2005年10月中山大学肿瘤防治中心收治的10例声门下型喉癌患者临床资料.结果:10例中4例喉内侵犯超过半周,4例侵犯喉外器官,1例颈部淋巴结转移;随访15年,1例失访.总的5年生存率为55.5%(5/9),经过治疗5年生存率提高至71.4%(5/7),5年无瘤生存率为42.9%(3/7).行单纯放疗、单纯手术、手术+辅助放疗患者的5年无瘤生存分别为0/2、1/2和2/3.结论:声门下型喉癌早期诊断困难,易在喉内扩散及向周围器官浸润,预后较差.全喉切除术仍为主要手术方式,采用手术与放疗综合治疗疗效满意.

瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在肝癌射频消融术中的应用

背景与目的:经皮射频消融是治疗小肝癌的新有效的微创手术,但手术的麻醉尚未得到重视,一般的局部麻醉或者单次使用镇痛药物均无法获得满意的效果.本研究将瑞芬太尼复合异丙酚应用于经皮射频消融治疗肝癌的麻醉,探讨其临床效果以及安全性.方法:选择射频治疗肝癌患者60例,随机分为瑞芬太尼复合异丙酚(R组)组与芬太尼复合异丙酚(F组)组,每组各30例.R组用微量泵输注瑞芬太尼0.1μg·kg-1·min-1,F组单次静注芬太尼1.5μg·kg-1,两组均以异丙酚微量泵维持麻醉.使用UT 4000型床边监护仪记录术前、手术开始时、手术开始后5 min及患者术后苏醒时的平均动脉压、心率、脉搏氧饱和度及呼吸频率,监测动脉血二氧化碳分压;记录患者苏醒时间;记录术中体动、呼吸暂停、胸肌强直次数.结果:R组患者的清醒时间[(5.0±1.8)min]显著短于F组[(10.7±3.0)min](P＜0.001).异丙酚用量R组[(172.0±37.3)mg]显著少于F组[(330.3±61.2)mg](P＜0.001).术中R组的平均动脉压下降明显低于F组(P＜0.05).术中体动R组(5例)少于F组(12例),呼吸暂停R组(12例)多于F组(6例).两组均未见胸肌强直.结论:肝癌射频消融术中应用微量泵静脉输注瑞芬太尼复合异丙酚麻醉效果确切、安全,但需要加强呼吸循环监护与管理.

上皮性卵巢癌组织中uPA和PAI-1的表达及意义

背景与目的:近年研究表明,尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)及其抑制物(plasminogen activator inhibitor,PAI)在肿瘤侵袭、转移过程中起重要作用,但其与上皮性卵巢癌的关系研究甚少.本研究从蛋白水平探讨uPA、PAI-1在上皮性卵巢癌浸润、转移中的作用,组织中的分布情况、及与预后的关系.方法:应用免疫组化法检测80例上皮性卵巢癌、20例良性卵巢肿瘤组织uPA、PAI-1蛋白表达,并结合临床病理因素、预后进行分析.结果:上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤组织中uPA阳性率分别为77.5%和30.0%(P＜0.001),PAI-1阳性率分别为55.0%和20.0%(P=0.005).上皮性卵巢癌组织中uPA表达与PAI-1表达呈显著性正相关(P=0.001).uPA阳性与盆腹腔转移病灶直径＞1 cm有关(P=0.038),与患者年龄、FIGO分期、组织学类型、病理分级、术前血CA125值、卵巢病灶大小、残留病灶大小无显著性相关(P＞0.05);PAI-1阳性与FIGO分期有显著性相关(P=0.022),与上述其他临床病理因素无显著性相关(P＞0.05).多因素Cox回归模型显示,uPA表达是肿瘤无进展生存、总生存的独立危险因素:PAI-1表达是总生存的独立危险因素.结论:上皮性卵巢癌组织中uPA、PAI-1表达上调.uPA、PAI-1有可能作为预测上皮性卵巢癌预后的参考指标.

外阴恶性肿瘤保留大隐静脉的腹股沟淋巴结清扫术改良术式的探讨

背景与目的:外阴恶性肿瘤传统手术方式为外阴广泛切除术+双侧腹股沟淋巴结清扫术伴大隐静脉的结扎和切除,术后多种并发症的发生严重影响了患者的生存质量.本研究探讨外阴恶性肿瘤行腹股沟淋巴结清扫术保留大隐静脉对手术操作、预后及并发症的影响.方法:将1989年1月至2005年12月期间收住院并行双侧腹股沟淋巴结清扫术的64例外阴恶性肿瘤患者分为两组,31例行双侧腹股沟淋巴结清扫术时保留双侧大隐静脉主干(简称保留组),33例结扎、切除一段大隐静脉(简称切除组),对两组患者的手术时间、术中出血量、5年生存率、复发率及术后急慢性并发症进行比较.结果:(1)保留组中,双侧腹股沟淋巴结清扫术手术时间为130～170 min,中位时间155 min:出血量100～450 ml,中位出血量295 ml.切除组中,手术时间为120～170 min,中位时间140 min;出血量150～390 ml,中位出血量270 ml.两组比较,两个参数差异均无显著性,P值均＞0.05;(2)两组患者总的5年生存率为67.3%,切除组为66.7%,保留组为68.0%,两组比较差异无显著性,P＞0.05.随访至2006年3月,保留组共发现3例5侧腹股沟淋巴结复发,切除组5例7侧复发,复发率分别为8.9%(5/56)、12.1%(7/58),两者比较差异无显著性,P＞0.05;(3)保留组急性下肢静脉炎,急性下肢淋巴水肿的发生率分别为11.3%,43.5%;切除组分别为25.8%,66.7%,两组比较差异有显著性(P值分别＜0.05,＜0.01).保留组迟发性下肢水肿和下肢疼痛的发生率分别为25.0%,23.2%,切除组48.3%,46.6%,两组比较差异均具有非常显著性(P值均＜0.01);两组下肢蜂窝组织炎及感觉异常的发生率差异亦具有显著性(P值均＜0.05).结论:外阴恶性肿瘤行腹股沟淋巴结清扫术时保留双侧大隐静脉主干不延长手术时间,不增加手术难度,不降低患者长期生存率,但能明显降低术后并发症的发生率,提高患者的生活质量,是值得推广的手术方式.

不典型肾错构瘤诊治的临床分析(附22例报告)

背景与目的:肾错构瘤属良性病变,可采取定期复查或手术治疗,手术疗效满意.但不典型肾错构瘤,术前诊断困难,容易误诊、误治.本研究总结分析22例不典型肾错构瘤诊治体会,以提高不典型性肾错构瘤的诊治水平.方法:回顾性分析1999年1月至2005年11月中山大学肿瘤防治中心及第一附属医院收治的22例不典型肾错构瘤的临床资料、影像学资料、治疗方法、术后病理及随访资料.结果:7例误诊为肾癌,其中6例行肾癌根治术,1例行肾部分切除术.1例误诊为肾盂癌,行肾盂癌根治术.其余14例行B超及CT检查,结合MRI、IVU、超声造影及穿刺活检,诊断为肾错构瘤,9例行肾部分切除术,3例行肾切除术,2例保守治疗.所有手术病例,术后病理学诊断均为肾错构瘤.所有患者随访均未见肿瘤复发.结论:对不典型肾错构瘤,应仔细分析影像学资料,多可明确诊断.肾错构瘤经治疗后,预后好.

临床Ⅰa期非小细胞肺癌淋巴结清扫范围的探讨

背景与目的:肺癌手术中淋巴结的处理方式在学术界一直存在争论,尤其是早期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者.我们通过研究淋巴结转移规律来探讨Ⅰa期NSCLC手术中淋巴结清扫的合理范围.方法:41例临床Ⅰa期NSCL,C患者进行肺叶切除及纵隔淋巴结系统清扫,将淋巴结行病理切片,HE染色明确是否有癌转移.研究肺门、纵隔淋巴结转移规律.结果:共清扫淋巴结295组,转移42组(占14.2%),其中肺门淋巴结转移33组,纵隔淋巴结中转移9组.纵隔淋巴结转移中第7站淋巴结出现转移4例,第5、9站淋巴结出现转移各2例,第4站淋巴结出现转移1例.上叶肿瘤转移包括5、7站淋巴结,中下叶肿瘤转移包括4、7、9站淋巴结.结论:临床Ⅰa期非小细胞肺癌的肺门、纵隔淋巴结转移遵循区域性淋巴结引流规律,可行区域选择性淋巴结清扫,即上叶肿瘤在无肺门或隆突下淋巴结转移时可只清扫上纵隔淋巴结而无须清扫下纵隔淋巴结,中下叶肿瘤无论有无肺门或隆突下淋巴结转移都需要进行上下纵隔淋巴结清扫.

HBV感染与非霍奇金淋巴瘤的关系

背景与目的:文献报道乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染率在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)患者中较同一地区的非原发性肝癌实体瘤患者和普通人群高,但HBV和NHL之间的关系尚无定论.本研究旨在对比同一地区NHL患者与结直肠癌患者HBV的感染率.方法:比较109例NHL患者和128例结直肠癌患者乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的阳性率,并与普通人群对照,通过卡方检验判断有无统计学意义.结果:NHL患者HBsAg阳性率(40.4%)明显高于结直肠癌患者(14.1%)及当地普通人群(约17.3%),有统计学意义(P＜0.01);以结直肠癌患者作参照组,HBsAg阳性者患NHL的优势比为2.87,95%可信区间为1.830～4.502.结论:NHL患者的HBsAg阳性率高于结直肠癌患者和普通对照人群.

个体化口腔支架在鼻咽癌患者放疗中对口腔正常组织的保护作用

背景与目的:随着鼻咽癌放射治疗技术的进步,鼻咽癌治疗后生存率有了明显提高.生存时间的延长使鼻咽癌患者对放射治疗后的生存质量提出了更高的要求,由放射治疗所导致的各种急性、晚期放射性损伤如放射性粘膜炎和放射性味觉损伤等越来越受到重视.本研究探讨在放射治疗过程中使用个体化的口腔支架(简称口腔支架),将舌和一部分口腔粘膜推离照射野范围,以期达到保护舌、味觉和部分口腔粘膜的作用.方法:首先选取1例合适的鼻咽癌患者,作佩戴口腔支架前后舌受照射剂量和体积的分析;然后将按人组条件收治的鼻咽癌患者随机分为试验组和对照组.临床上共收治鼻咽癌患者43例,其中试验组19例,对照组24例.两组患者均采用CT模拟常规设野的放射治疗技术,在放疗过程中,试验组患者佩戴口腔支架,对照组不佩戴.两组患者均根据病情需要采用诱导、同期或辅助化疗,并酌情使用放射增敏剂,在放疗结束时根据颅底骨质破坏情况及肿瘤消退情况决定是否补量或加量.放疗前和放疗中每周检查两组患者基本味觉、体重、口腔各部分粘膜和舌粘膜反应程度.结果:剂量学分析表明患者佩戴口腔支架后舌的受照射剂量和体积均较佩戴前明显下降.试验组与对照组1～2度和3～4度粘膜反应发生的比例分别为73.68%和62.50%,26.32%和37.50%(P=0.470),但3度以上粘膜反应发生的例数试验组较对照组有减少的趋势(5/19和9/24).味觉检查,至放疗结束时试验组有4例(21.05%)患者出现轻度的味觉减退,对照组患者有19例(79.17%)出现味觉减退,差异有显著性(P=0.000).结论:个体化的口腔支架对于行放射治疗鼻咽癌患者的口腔粘膜特别是舌的味觉具有一定的保护作用.

Ivor Lewis食管切除术二野淋巴清扫治疗73例胸下段食管鳞癌的临床疗效

背景与目的:食管切除局部区域淋巴清扫是胸下段食管癌的主要治疗手段.本研究旨在评价Ivor Lewis食管切除术二野淋巴清扫治疗胸下段食管癌的临床效果.方法:选择1998年1月至2001年12月73例行Ivor Lewis食管切除术二野淋巴清扫的胸下段食管鳞癌病例,观察清扫的淋巴结数目、术后并发症发生率、死亡率等指标,Kaplan-Meier法进行生存分析.结果:术后并发症发生率15.1%,死亡率2.7%.淋巴结转移率71.2%,上纵隔淋巴转移率17.8%.Ⅰ期5例,Ⅱ期34例,Ⅲ期32例,Ⅳ期2例.总的5年生存率为23.3%.N0与M病例5年生存率分别为38.1%与17.3%(P＜0.01).ⅡA、ⅡB、Ⅲ期病例的5年生存率分别是31.2%、27.8%、12.5%(P＜0.01).结论:Ivor Lewis食管切除术二野淋巴清扫治疗胸下段食管鳞癌是一项安全的手术,可增加完整切除(肉眼及镜下均无癌残留)机会.

胸腺素α原与肿瘤关系的研究进展

胸腺素d原(prothymosin alpha,ProTα)是一种天然无结构、强酸性小分子蛋白质,具有高度遗传保守性,含量丰富,存在于所有哺乳动物组织中.其生理功能尚未澄清,新研究发现,ProTα与肿瘤关系密切,可能作为一个新的、重要的肿瘤诊断和治疗靶点.本文对近年来有关ProTα在细胞增殖、肿瘤发生、细胞凋亡和免疫调节方面的作用及其基因表达的调节和可能的作用机制等方面的文献作一综述,并对ProTα在肿瘤诊断和治疗中的意义进行展望.

癌症患者生命质量测定量表体系共性模块的研制(二):信度与效度分析

背景与目的:我们已经开发了癌症患者生命质量测定量表体系共性模块(quality of life instruments for cancer patients-general module,QLICP-GM),但其心理测量学特性有待考评.本研究拟考评QLICP-GM的信度与效度.方法:用QLICP-GM对600例肺癌、乳腺癌、大肠癌、胃癌和头颈癌患者的生命质量进行测定和评价,用相关分析、配对t检验、等效检验、结构方程模型等统计学方法分析QLICP-GM的信度和效度;同时与FACT-G量表测定和评价结果比较,分析QLICP-GM的效标效度.结果:QLICP-GM各领域及总量表的重测信度均在0.85以上,除社会功能外各领域内部一致性信度α值均在0.70以上,总量表的α值和分半信度分别为0.88和0.93;相关分析与结构方程模型分析显示量表有较好的结构效度:与FACT-G的相关分析显示有较好的效标关联效度.结论:QLICPGM具有较好的信度和效度,可用于癌症患者生命质量测定.

人吲哚胺2,3-双加氧酶多克隆抗体的制备

背景与目的:吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是一种哺乳动物细胞质中的血红素蛋白,是催化色氨酸沿犬尿氨酸途径代谢的限速酶.它的表达不仅能抑制病原微生物的生长,还能抑制T细胞的应答,从而介导肿瘤免疫耐受.本研究的目的是表达和纯化His-hIDO融合蛋白,制备兔抗人IDO多克隆抗体,并用此抗体检测IDO在肿瘤细胞中的表达.方法:将编码人IDO全长cDNA克隆入pET30a(+),测序鉴定表达载体pET30a(+)-hIDO,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达目的蛋白His-hIDO;用纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,获得兔抗人IDO多克隆抗体;用Western blot检测该多克隆抗体与重组蛋白His-hIDO的反应性,并用该抗体分析表皮癌细胞A431和肝癌细胞HepG2经IFN-γ诱导前后的IDO表达情况.结果:His-hIDO融合蛋白可与抗His多克隆抗体特异性结合;兔抗人IDO多克隆抗体的效价高,特异性好,能检测肿瘤细胞经IFN-γ诱导后的IDO的表达.结论:兔抗人IDO多克隆抗体能够有效地识别体外表达的IDO蛋白,为研究IDO在肿瘤免疫耐受中的作用提供有力工具.

我国著名肿瘤神经外科专家黄强教授