南京医科大学学报（自然科学版）杂志
Journal of Nanjing Medicial University 남경의과대학학보（자연과학판）
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甲亢患者核素治疗后内环境的改善评估
目的:探讨甲亢患者核素治疗后机体内环境的改变.方法:对明确诊断的甲亢患者行核素131I治疗,在治疗前检测患者体质指数(body mass index,BMI)、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α以及干扰素(interferon,IFN)-γ.选择治疗缓解的31例患者及未缓解的11例患者在治疗后6个月再次检测以上指标,并与40例健康体检者进行对照比较.结果:甲亢患者BMI、NK细胞低于对照组(P＜ 0.05,P＜0.01),TNF-α和IFN-γ显著高于对照组(均P＜0.01)；131I治疗6个月后,缓解组BMI、NK细胞已与对照组无显著性差异；TNF-α和IFN-γ出现降低,但依然显著高于对照组(均P＜ 0.01),未缓解组BMI与对照组比较无显著性差异(P＞0.05),其他指标均有显著性差异(均P＜0.01).结论:甲亢患者核素治疗后,机体内环境也在逐渐回稳,但依然落后于临床症状的改善,需更长时间的恢复或新的治疗策略.
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肌钙蛋白T和脑利钠肽对急性肺栓塞患者病情和预后评价的临床研究
目的:探讨肌钙蛋白T(cardial troponin T,c-Tn-T)和脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)评价急性肺栓塞(acute pulmonary mbolism,APE)患者病情严重程度,及其预测预后的价值.方法:选取南京医科大学第一附属医院急诊科2005年1月～2009年7月确诊的APE患者251例,收集其c-Tn-T、BNP、血气分析(PaO2和PaCO2)检测结果、心脏多普勒指标和临床转归情况；根据血气结果将APE患者分为轻、中、重3组,比较组间差异及其相关性；根据临床转归,分为预后良好组和预后不良组,比较两组间c -Tn-T、BNP、PaO2和PaCO2差异,评价c-TnT、BNP对APE患者预后的预测价值.结果:随着APE严重程度增加,c-Tn-T、BNP指标显著升高和右心功能不全发生率显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05).右心室扩大与c-Tn-T和BNP呈正相关(r=0.614,P=0.001；r=0.598,P=0.005),收缩期室间隔反向运动与BNP呈正相关(r=0.791,P=0.000),肺动脉高压与c-Tn-T呈正相关(r=0.711,P=0.000).预后不良组c-Tn-T、BNP、PaO2和PaCO2和右心功能不全明显差于预后良好组(P＜0.05).ROC曲线分析显示,cTn-T和BNP的曲线下面积(area under curve,AUC)均较大,其佳工作点分别为0.94 ng/ml和458.12pg/ml.结论:c-Tn-T和BNP能很好评估APE患者疾病严重性,同时也能很好的预测APE患者临床转归,为临床治疗和预后评估提供客观依据.
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心脏瓣膜置换术中乌司他丁的应用对炎症相关因子与术后认知功能的影响
目的:观察乌司他丁对心脏瓣膜置换术患者全身炎症反应因子和术后认知功能的影响.方法:42例择期心脏瓣膜置换术患者,随机分为2组,乌司他丁组(U组)和对照组(C组),每组21例.U组于麻醉诱导后立即静脉泵人乌司他丁1.2万U/kg,CPB预充液加入乌司他丁0.6万U/kg,主动脉开放前5 min,体外循环机中加入乌司他丁0.6万U/kg;C组给予等容量生理盐水.于切皮前(T1)、体外循环结束后10 min(T2)、30 min(T3)、1 h(T4)、3 h(TS)和术后24 h(T6)时测定血浆白细胞介素(interleukin,IL)-6,IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和S100β蛋白,及用简易智能状态检测法(mini-mental state examination,MMSE)评估患者术前1d和术后3d认知状态,评定术后认知功能障碍(postoperative cognition disorders,POCD).结果:与T1比较,两组在T2～T6时的IL-6、IL-10、TNF-α、S100β的浓度明显升高(P＜0.05)；与C组比较,U组在T2～T6时点的IL-6、TNF-α、S100β浓度显著降低(P＜ 0.05),IL-10浓度显著升高(P＜0.05)；通过MMSE评定,对照组7例发生POCD(33.3％),U组2例发生POCD(9.5％),具有显著统计学差异(P＜0.01).结论:乌司他丁可降低心脏瓣膜置换手术患者POCD的发生率,其机制可能通过抑制体外循环的炎症反应,降低脑损伤,从而降低POCD的发生.
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应用BSP联合TA克隆测序检测胰腺癌中RASSF1A基因启动子区异常甲基化
目的:检测Ras相关区域家族1A(Ras association domain family 1A,RASSF1A)在胰腺癌细胞株中的甲基化和表达状态,探讨其启动子异常甲基化在胰腺癌发病过程中的作用.方法:采用重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite genomic sequencing PCR,BSP)联合TA克隆测序检测胰腺癌细胞株PANC-1及胰腺癌组织、癌旁组织及正常胰腺组织中RASSF1A启动子区CpG岛的甲基化状态,以甲基化酶抑制剂5-aza-2-deoxycitydine(5-aza-dC)处理PANC-1,观察处理前后甲基化率变化情况,逆转录PCR观察RASSF1A的mRNA表达情况.结果:在PANC-1细胞中RASSF1A启动子的甲基化率平均为100.00％,在正常胰腺、癌旁及癌组 织中平均分别为1.79％、93.75％和100.00％,与正常胰腺组织相比,胰腺癌旁及癌组织的RASSF1A启动子甲基化率明显增高(P＜0.01),而癌旁及癌组织之间无明显差异(P＞0.05).在PANC-1细胞、胰腺癌组织及癌旁组织中RASSF1A基因无表达,在正常胰腺组织中RASSF1A基因呈阳性表达；PANC-1细胞经5-aza-dC处理后,RASSF1A的甲基化率下降(88.89％,P＜0.05),mRNA表达无变化.结论:胰腺癌细胞株PANC-1及癌组织、癌旁组织RASSF1A基因表达与启动子区甲基化状态有关,启动子区的高甲基化导致PANC-1中RASSF1A基因的表达沉默.该基因异常甲基化有望成为胰腺癌的早期诊断指标和治疗靶点.
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心包穿刺置管误入心室腔原因分析及处理
目的:探讨改良心包穿刺引流术中心包穿刺置管误入心室腔的原因及处理.方法:采用一次性中心静脉穿刺管、剑突下及心尖穿刺路径对6例心包积液行心包穿刺引流术,术中心包穿刺置管误入心室腔后观察血流动力学变化,拔管后临床随访.结果:6例患者经保留误入心室腔导管、随即再次心包穿刺置管引流,半个月后拔出误置导管,患者全部恢复,无后遗症出现.结论:心包穿刺置管误入心室腔后,即刻重新穿刺置入引流导管并保留该误入导管半个月后拔除,未见新的严重并发症及后遗症出现.
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进行性骨化性纤维增殖不良症临床及ACVR1基因c·774G＞C突变分析
目的:研究1例具有非典型临床特征的进行性骨化性纤维增殖不良症(fibrodysplasia ossificans progressiva,FOP)患者,并对其致病基因人活化蛋白/促激蛋白A受体1 (activin A type 1 receptor,ACVR1)进行突变分析.方法:根据患者大踇趾轻微畸形和进行性异位骨化等临床表现,结合骨骼系统放射线检查、骨ECT和相关血液生化检查进行临床诊断.采集患者、患者父母和60位正常人外周血,提取基因组DNA,对ACVR1基因全部外显子进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增和序列分析;对突变后的蛋白质结构进行分子模拟以便评估其突变后的功能改变.结果:患者具有非典型的临床表现:先天性大踇趾轻微畸形和进行性非经典顺序的异位骨化,其父母无FOP相关临床表现.患者的ACVR1第5外显子存在c.774 G＞C(R258S)杂合突变,而其父母和正常对照组均无此杂合突变.此外,患者和所有正常人都存在c.690 G＞A(E230E),此为无意义突变.三维蛋白质分子模拟发现R258与高度保守的甘氨酸一丝氨酸(glycine-serine,GS)活化区邻近,该突变可能导致ACVR1与ACVR1的抑制蛋白FK506结合蛋白12(FK506 binding protein 12,FKBP12)结合的亲和力降低,进而对ACVR1抑制作用降低.结论:典型FOP均在ACVR1之GS区发生突变,而本例FOP在ACVR1激酶区发生突变,这可能是该患者在临床表现呈非典型的原因.该结果有助于我们更好地去理解FOP表型和基因型之间的关系.
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33例腹腔镜超低位直肠癌根治保肛术疗效分析
目的:分析腹腔镜超低位直肠癌根治保肛手术的疗效,以探讨腹腔镜及相关技术在超低位直肠癌根治保肛术中应用的可行性.方法:对2005年6月至2010年12 月在江苏省苏北人民医院胃肠外科施行腹腔镜直肠癌前切除术中的33例超低位直肠癌患者的临床资料进行回顾性分析.结果:本研究33例患者均顺利完成手术,无中转开腹者,无手术死亡者.平均手术时间(137±43)min,平均手术切除淋巴结(5～25)枚,术中冷冻切片显示远切缘均为阴性,术后患者平均住院(9～25)d.术后发生吻合口漏3例,吻合口出血1例,肠梗阻1例.随访时间平均(23±17)个月,随访中新发现局部复发4例,远处转移4例,术后切除肿瘤种植1例,术后患者死亡7例,3年总生存率为84.4％.结论:腹腔镜超低位直肠癌根治保肛手术安全可行,可达到与传统开腹手术相同的目的和效果,并可能取得更加良好的安全性.
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经支气管镜针吸活检112例结果分析
目的:评价经支气管镜针吸活检(transbronohial needle aspiration,TBNA)对肺癌、气管与支气管腔内外病变及肺门、纵隔淋巴结肿大诊断的作用.方法:回顾性分析112例行TBNA患者的支气管镜检查结果.结果:112例中65例诊断为肺癌,33例诊断为肺部良性病变,14例未明确诊断.65例肺癌患者,TBNA结果阳性41例(63.1％),其中16例TBNA结果是唯一病理学诊断证据.11例小细胞肺癌患者,TBNA共8例(72.7％)阳性；54例非小细胞肺癌患者,TBNA共33例(61.1％)阳性.结论:TBNA安全性好,不良反应少,对肺部病变尤其是支气管腔外病变及纵隔、肺门淋巴结肿大的诊断有较高的价值.
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全身炎症反应综合征患儿淋巴细胞亚群的变化
目的:观察全身炎性反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)患者淋巴细胞亚群含量的变化,探讨其临床意义.方法:收集SIRS病例60例,对照组20例,应用荧光单抗对血中淋巴细胞进行标记、计数.结果:SIRS组患者外周血CD3+和CD4+细胞数量减少,CD8+细胞数目增高,CD4+/CD8+比值下降,与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).SIRS组CD19+细胞较对照组下降.结论:SIRS患儿淋巴细胞功能呈现抑制状态,参与了SIRS的发生发展过程.
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非综合征耳聋患者线粒体DNA12S rRNA及tRNAser(UCN)基因序列分析
目的:探讨线粒体DNA (mitochondrial DNA,mtDNA) 12S rRNA基因及tRNASer(UCN)基因突变与非综合征耳聋的相关性,以及常见致聋突变携带频率.方法:收集非综合征耳聋患者135例和听力正常对照人群126例的外周血样本,常规方法提取基因组DNA,PCR扩增mtDNA 12S rRNA基因及tRNASer(UCN)基因,扩增产物经直接测序进行耳聋相关突变的鉴定.结果:135例非综合征耳聋患者中共检测到11种mtDNA 12S rRNA碱基变异,其中4种已知致病突变的携带率分别为:A827G,4.4％；T961C,1.5％;T1095C,0.7％;A1555G,1.5％.两组人群均未检测到12S rRNA C1494T突变以及tRNASer(UCN)基因任何形式的致聋突变.结论:mtDNA 12S rRNA是南京地区汉族非综合征耳聋人群的突变热点基因,其常见致聋突变总携带率约为8.1％.
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梗阻性无精子症患者附睾蛋白P34h的表达及其意义
目的:探讨梗阻性无精子症患者的附睾组织中附睾蛋白P34h mRNA及蛋白表达情况,并探讨其在梗阻性无精子症患者中的意义.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例因不同梗阻(输精管或射精管水平梗阻)所致的梗阻性无精子症患者附睾组织中P34h基因mRNA的表达水平,Western Blot检测2组P34h蛋白的表达.结果:2组均有P34h mRNA的表达,输精管梗阻的P34h/β-actin均值为0.418±0.045,射精管梗阻的P34h/β3-actin均值为0.719±0.069,输精管梗阻的附睾组织中P34h mRNA水平显著低于射精管梗阻(P＜0.05).2组亦均有P34h蛋白的表达,输精管梗阻平均光密度为0.095±0.014,射精管梗阻为0.276±0.054(P＜ 0.05),两组P34h蛋白的表达差异有统计学意义.结论:P34h mRNA及其蛋白在不同梗阻因素所致的无精子症患者的附睾中表达水平有明显差异,提示P34h可能是梗阻性无精子症时导致精子成熟障碍的一个重要因素.
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性激素对女性脂肪组织11βHSD mRNA表达的部位特异性调控
目的:观察性激素对育龄期和绝经期妇女不同部位脂肪组织11β3羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型(11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11βHSD1) mRNA表达水平的调控作用.方法:育龄期非妊娠妇女6例,年龄(29.83±3.43)岁及绝经期妇女16例,年龄(65.19±6.81)岁,取其皮下和网膜脂肪组织进行培养,应用雌激素和雄激素刺激脂肪组织24h,实时定量PCR方法测定脂肪组织11βHSD1 mRNA水平.结果:雌激素可使绝经期妇女皮下脂肪组织11βHSD1 mRNA表达明显增加(P＜0.05),使网膜脂肪组织11βHSD1 mRNA表达水平下降30％.雄激素刺激可抑制育龄期妇女皮下脂肪组织11β3HSD1 mRNA表达近40％(P=0.001),而使绝经期妇女网膜脂肪组织11βHSD1 mRNA表达增加1.9倍(P=0.005).结论:性激素对脂肪组织11βHSD1 mRNA表达的调控呈现年龄和部位特异性改变,可能是不同时期女性体脂分布的重要分子生物学机制.
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经两种途径钬激光碎石治疗输尿管上段嵌顿性结石的疗效比较
目的:比较应用钬激光在输尿管镜碎石术(ureteroscopic lithotripsy,URL)及微创经皮肾穿刺取石术(minimally invasive percutaneous nephrolithotomy,MPCNL)处理输尿管上段嵌顿性结石的疗效和并发症.方法:2009年2月～2011年6月广东医学院附属三水医院182例输尿管上段嵌顿性结石患者,应用钬激光经URL治疗85例,MPCNL治疗97例,对两种方法疗效进行临床评价比较.结果:MPCNL术中Ⅰ期碎石清除率为(93/97)95.88％,4例残石者残石大小0.2～0.4 mm,术后1个月结石清除率为(97/97)100％,平均手术时间(75±29) min,平均住院时间(12±5)d,平均住院费用(14 589±3 284)元；URL术Ⅰ期碎石清除率为(39/85)45.88％,46例残石者残石大小0.3～1.5 mm,需术后联合体外冲击波碎石术等治疗排石,术后1个月结石清除率为(71/85)85.33％,平均手术时间(102±43) min,平均住院时间为(6±3)d,平均住院费用(9 086±1 259)元.结论:MPCNL和URL各有其优缺点,手术方式选择应根据患者病情和个体差异,结合术者的经验制定出佳治疗方案.
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肺表面活性物质联合鼻塞式气道正压通气对早产儿防治的临床研究
目的:探讨早产儿极低出生体重儿早期应用肺表面活性物质固尔苏联合鼻塞式气道正压通气(nasal continuous positive airway pressure,NCPAP)的临床防治作用.方法:将100例胎龄＜30周且在出生后0.5 h内入住重症监护室的早产儿,随机分为2组.治疗组和对照组,两组在常规治疗的基础上,入院后即予气管插管滴入固尔苏.治疗组拔管后,继之NCPAP辅助呼吸,而对照组拔管后则根据患儿病情变化采取规范性治疗.分别比较两组患儿固尔苏使用剂量、气管插管率、气管内插管机械通气治疗时间、呼吸窘迫综合征(respiratory distress syndrome,RDS)发生率及其程度、慢性肺部病变(chronic pulmonary disease,CPD)发生率以及病死率等为疗效指标.结果:治疗组固尔苏使用剂量明显低于对照组,气管插管率、气管内插管机械通气治疗时间、RDS发生率及其程度以及慢性肺部病变发生率明显优于对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).结论:早期应用肺表面活性物质联合NCPAP对胎龄＜30周的早产儿能降低气管插管率,减少固尔苏用量,缩短机械通气时间,减少新生儿RDS发生率及其程度,减少CPD的发生率,有一定的临床意义.
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STAT4基因rs7574865多态性与中国汉族人群克罗恩病的相关性
目的:分析信号转导及转录激活因子4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs7574865 G＞T的多态性与中国汉族人群克罗恩病发生的相关性.方法:选取汉族克罗恩病患者318例与健康对照者318例作为研究对象,抽提基因组DNA,采用聚合酶链式反应和直接测序方法检测STAT4基因SNP位点rs7574865的基因型,计算基因型与基因频率,采用x2检验进行组间比较.结果:STAT4基因rs7574865多态位点GG、GT和TT基因型频率在病例组中分别为0.110、0.431和0.459,在对照组中分别为0.097、0.450和0.453,G和T等位基因的频率在病例组分别为0.325和0.675,在对照组分别为0.322和0.678,该位点基因型和等位基因分布在病例组与对照组均无统计学差异(P＞ 0.05).结论:STAT4基因rs7574865 G＞T位点单核苷酸多态性与中国汉族人群克罗恩病发生无明显相关性.
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人源抗Trop-2抗体Fab的制备及条件优化
目的:探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件.方法:将含有抗Trop-2 Fab抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F’大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响；比较不同诱导温度、诱导时间及诱导前加入葡萄糖对蛋白表达的影响；大量表达的抗Trop-2 Fab经亲和层析纯化后,用免疫荧光和流式细胞术检测其免疫学特性.结果:在培养液中加入5 g/L的葡萄糖,人源抗Trop-2抗体Fab片段的表达产量明显增加；16℃的诱导温度比其它温度能表达更多的Fab分子；加诱导剂12h,目的蛋白的表达量至峰值.结论:本实验结果为在原核系统 中大量制备抗Trop-2抗体片段及后续的肿瘤靶向治疗提供了基础.
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人参皂甙Rbl对阿霉素心力衰竭大鼠致心脏纤维化因子表达的影响
目的:探讨人参皂甙Rb1(Ginsenosides-Rb1,Gs-Rb1)是否通过心脏抑制心脏纤维化相关蛋白和mRNA介导其改善慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠的心肌重构效应.方法:在构建阿霉素CHF大鼠模型成功后,将其随机分为Gs-Rb1组(n=17)给予Gs-Rb1 70 mg/(kg·d)和CHF组(n=15),另外选取同龄健康大鼠作为对照组(n=10).第4周心脏超声评估全心质量指数(HW/BW)和左室质量指数(LW/BW),应用Western blot和RT-PCR方法检测转化生长因子-β1 (transforming growth factor β1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、内皮素-1(endothelin 1,ET-1)等蛋白和mRNA的表达.结果:与对照组相比,Gs-Rb1组全心质量指数(HW/BW,P=0.005)及左室质量指数(LW/BW,P=0.000)均显著改善；与CHF组相比,Gs-Rb1组TGF-p1、CTGF和ET-1蛋白的表达均显著下降(P均＜0.05),但均显著高于对照组(P均＜0.05)；Gs-Rb1组TGF-β1、CTGF和ET-1等mRNA的表达均显著低于CHF组(P均＜0.05),但均显著高于对照组(P均＜0.05).结论:在Gs-Rb1改善CHF大鼠心肌重构效应中,Gs-Rb1可通过下调TGF-β1、CTGF、ET-1等蛋白和mRNA等介导其保护作用.
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OX40/FOX40L逆向信号对小鼠主动脉内皮细胞MMP-9表达及机制的研究
目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用.方法:分离与培养8～10同龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性ox40(sOX40)、OX40L单克隆抗体(anti-OX40L)和钙离子螯合剂bapta-AM刺激内皮细胞,RT-PCR和Western blot方法检测内皮细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平,明胶酶谱法检测内皮细胞培养上清MMP-9活性,应用钙离子成像方法观察内皮细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i的改变.结果:与对照组相比,可溶性OX40(0.1 mg/L)刺激后内皮细胞MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均显著增高,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显增高,内皮细胞胞浆[Ca2+]i也明显增高.分别应用可溶性OX40L单克隆抗体(0.1 mg/L)和Bapta-AM(20 μmol/L)预处理培养内皮细胞后,由可溶性OX40引起的内皮细胞基因和蛋白表达水平明显降低,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显下降.结论:内皮细胞OX40L逆向信号的激活可以通过调节胞内的游离钙离子水平参与内皮细胞中MMP-9表达的调控,这可能是OX40/OX40L逆向信号通路参与动脉粥样硬化的发生、发展的机制之一.
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雷贝拉唑在健康志愿者体内的药动学及生物利用度研究
目的:研究健康志愿者单次口服和静脉输注雷贝拉唑20 mg后药动学特征及生物利用度.方法:20名男性健康志愿者,随机分成2组.第1周期分别接受单剂量静脉输注20 mg(输注时间30 min)和单次口服给药(2片,10 mg/片)；经7d清洗期后,2组志愿者接受交叉给药.结果:雷贝拉唑静脉给药后药动学参数如下:t1/2为(62.4±10.7)min,Cmax为(1 308.6±266.4)ng/ml,总清除率为(0.21±0.05)L/min,AUC0-r和AUC0-∞分别为(99.6±21.9) mg· min/L和(102.4±23.3) mg·min/L.口服给药后t1/2为(64.2±15.5)min,Cmax为(508.3±180.2) ng/ml,Tmax为229.5 min,Cl为(0.31±0.10)L/min,AUC0-r和AUC0-∞分别为(69.5±20.0) mg· min/L和(70.6±20.2) mg· min/L.结论:雷贝拉唑在健康志愿者体内的生物利用度为70.1％,雷贝拉唑口服给药的总清除率显著大于静脉给药时的总清除率(P＜0.01).
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H3N2流感病毒非结构蛋白-1真核表达载体的构建与表达及其对293T细胞增殖的影响
目的:构建甲型H3N2流感病毒非结构蛋白-1( nonstructal-1,NS1)真核表达载体并表达其编码蛋白；探讨NS1对细胞增殖的影响.方法:从江苏省甲型H3N2流感病毒毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD 18-T/NS1质粒,双酶切pMD18-T/NS1与pXJ40-HA后,构建真核表达载体pXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过免疫印迹法鉴定NS1蛋白的表达.3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测NS1转染细胞后对细胞增殖的影响.结果:经双酶切、测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功；免疫印迹法证实NS1蛋白的表达.MTT法证实转染NS1质粒后对细胞增殖有抑制作用.结论:成功克隆了NS1全长基因,构建了其真核表达载体,并初步验证了NS1蛋白过表达后能抑制细胞的增殖,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1的细胞模型和NS1蛋白对细胞增殖和凋亡作用机制的进一步研究提供了基础.
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雷米普利对2型糖尿病大鼠microRNA表达谱的影响
目的:建立链脲霉素(streptozocin,STZ)+高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,并以血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)药物雷米普利处理,筛查用雷米普利后2型糖尿病大鼠胰腺组织microRNA(miRNA)表达的变化,并进行实时定量PCR验证芯片结果,寻找与2型糖尿病功能改善相关的miRNA.方法:STZ(40 mg/kg)腹腔注射+高脂高糖饲料喂饲健康雄性SD大鼠,测随机血糖≥16.7 mmol/L成模后1周,雷米普利50 mg/(kg·d)灌胃28 d.实验结束后,取胰腺组织常规抽提总RNA,miRNA芯片检测miRNA表达谱的改变.结果:2型糖尿病大鼠经雷米普利处理后,miRNA表达谱中出现明显差异表达(1.5倍以上)的miRNA共有27个,其中20个表达上调,7个表达下调.结论:在2型糖尿病大鼠模型中,用雷米普利处理后部分胰腺miRNA的表达发生明显变化,提示miR-1、miR-30e可能参与胰腺功能改善的调节.
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黄芪皂苷Ⅳ通过PKA途径减轻缺氧/复氧心肌损伤的机制研究
目的:研究黄芪皂苷Ⅳ(astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)减轻缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的机制.方法:胰酶多次消化法培养新生SD大鼠原代心肌细胞,建立缺氧/复氧模型,测定培养心肌细胞上清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(creatine kinase,CK-MB)含量,检测心肌细胞肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase,SERCA2a)活性、Real-Time PCR法测定PKA催化亚单位α(PKA C subunit α,PKA- Cα)基因的表达水平以及Western blot检测第16位丝氨酸磷酸化受磷蛋白(Ser16 phosphorylated phospholamban,Ser16-PLN)的表达水平,同时以As-Ⅳ(30 μmol/L)干预,观察其作用.结果:与正常组相比,缺氧/复氧( hypoxia/reoxygenation,H/R)引起心肌细胞CK-MB释放增加,SERCA2a活性降低约35％、PKA- Cαt基因表达下调28％以及Ser16-PLN表达下调51％,P值均＜0.05,As-Ⅳ干预则可逆转上述变化,基本恢复至正常水平.结论:黄芪皂苷Ⅳ抑制缺氧/复氧 所致心肌细胞损伤的机制可能是通过上调PKA-Cα基因表达,提高受磷蛋白(phosphorylated phospholamban,PLN)16位丝氨酸的磷酸化水平,解除PLN对SERCA2a的抑制,从而增强SERCA2a的功能.
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国产三件套可膨胀型阴茎假体植入治疗勃起功能障碍
目的:观察国产三件套可膨胀型阴茎假体对勃起功能障碍(erertile dysfuntion,ED)患者的临床治疗效果.方法:对6例ED患者选择阴茎阴囊交界处切口植入国产三件套可膨胀型阴茎假体.其中动脉粥样硬化患者2例,阴茎海绵体纤维化2例,骨盆骨折后勃起功能障碍2例.结果:6例患者手术均获得成功.术后随访3～40个月,平均12个月.术后3个月所有患者及其配偶均对性生活满意.随访过程未发现机械故障和尿道损伤.结论:国产可膨胀型阴茎假体安全有效,患者满意率高.
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胆囊颈横断在腹腔镜复杂性胆囊切除中的应用
目的:探讨复杂性胆囊腹腔镜切除术中胆囊颈横断简化操作的作用及其残端不同处理方案的应用体会.方法:2008～2010年通过胆囊颈横断法完成35例腹腔镜复杂性胆囊切除术.手术指征包括胆囊颈部结石嵌顿伴化脓性胆囊炎、萎缩性胆囊、“冰冻样”Calot三角、胆囊颈管极短、Mirizi综合征Ⅰ型、同时合并胆囊十二指肠瘘.胆囊残端通过逆行游离后结扎或缝扎30例,5例胆囊管闭塞病例残端开放,行胆囊管免结扎腹腔镜胆囊大部切除术.结果:全组均未中转开腹手术,术后暂时性胆漏4例,所有患者均顺利出院,无胆管损伤等严重并发症.结论:在困难腹腔镜胆囊切除术中,胆囊颈部横断这一操作能明显简化手术,对减少手术中转率及减少胆总管损伤有指导作用.
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磁导航系统在急性冠状动脉综合征介入治疗中的初步应用研究
目的:探讨磁导航系统在非ST抬高型急性冠脉综合征(non-ST-elevation acute coronary syndromes,NSTE-ACS)介入治疗中应用的可行性和安全性.方法:连续选择接受磁导航辅助介入治疗的中-高危NSTE-ACS患者37例,分别记录靶病变特征、导丝通过病变的时间、X线暴露时间、造影剂用量和相关并发症.用STATA9.2软件进行数据分析.结果:磁导航引导治疗靶病变37处,其中A/B1型病变7处、B2型病变17处、C型病变13处.术前靶病变平均狭窄程度和长度分别为(88.07±8.33)％和(27.08±8.98) mm.在磁导航指引下,磁导丝顺利通过36处靶病变,病变通过率为97.3％；失败1例,磁导丝未能通过1处次全闭塞伴严重钙化病变.磁导丝通过靶病变的平均时间为(82.0±67.9)s,其中A/B1、B2、C型病变的通过时间分别为(34.7±4.5)s、(61.0±14.7)s和(134.8±92.6) s;X线平均暴露时间(62.6±57.6)s,A/B1、B2、C型病变的暴露时间分别为(22.3±4.7)s、(45.2±14.5)s、(106.9±78.4)s；造影剂平均用量(6.3±4.6) ml,A/B1、B2、C型病变用量分别为(2.7±0.7)nl、(5.1±2.6) ml、(9.8±5.7)rn1.介入术中未出现与应用导丝相关的冠状动脉夹层、穿孔等并发症;术后未发生心血管复合事件.结论:磁导航系统应用于NSTE-ACS的辅助介入治疗有可行性,磁导丝病变通过率高、安全性好.
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腹腔镜下胃旁路术治疗病态性肥胖
目的:探讨腹腔镜下胃旁路术(laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass,LGBP)治疗病态性肥胖症患者的疗效与安全性.方法:南京医科大学第一附属医院普外科自2010年5月至2011年6月间对21例病态性肥胖患者行腹腔镜下胃旁路术,术后l、3、6、12个月随访,总结分析其减重效果以及代谢综合征的缓解情况.结果:21例病态肥胖的患者都伴有代谢综合征,高血压4例,术后1～3周完全恢复正常,高血脂21 例,脂肪肝21例,术后1～6个月完全缓解,伴发2型糖尿病9例,术后3个月以内完全缓解,胰岛素抵抗12例,术后1周～1个月完全缓解.患者术前体质指数(body mass index,BMI)平均37.6 kg/m2,术后1、3、6、12个月的BMI平均分别为34、31.6、31.9、29.7 kg/m2.多余体重减少率(excess weight loss,EWL)分别为术后1个月24.7％,术后3个月39.7％,术后6个月51.6％,术后12个月52.4％.所有患者均无术中及术后并发症,无围手术期死亡.结论:LGBP对于病态性肥胖症的治疗是安全有效的,具有明显的减重效果,对于伴发的代谢综合征特别是合并2型糖尿病具有极好的治疗效果,并且持续可靠,并发症少,具有临床推广应用价值.
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肉鸡胴体中沙门氏菌的分离鉴定及多重耐药谱研究
目的:为了解肉鸡胴体中沙门氏菌的污染状况、多重耐药状况及耐药程度,对样品中的沙门氏菌进行分离鉴定和药敏试验研究.方法:根据GB/T 4789-2008对沙门氏菌进行分离鉴定,采用微量肉汤稀释法测定分离株的耐药性.结果:肉鸡胴体沙门氏菌的检出率高达34.8％；样品中分离的沙门氏菌血清型主要为奥尔巴尼型(29.6％)和印第安纳型(50.7％)；药敏试验显示,大多数沙门氏菌至少对3种以上的抗生素产生耐药,耐3～7种药物的有24株(33.8％),耐8～12种药物的有19株(26.8％),耐13～16种药物的有26株(36.6％)；分离株对抗生素的耐药情况是:萘啶酸(100％)、磺胺嘧啶(98.6％)、氨苄青霉素(97.2％)、复方磺胺甲恶唑(85.9％)、四环素(85.9％)和阿莫西林/克拉维酸(84.5％).结论:肉鸡胴体中沙门氏菌的污染现象严重,沙门氏菌耐药或多重耐药现象十分普遍,未来应加强对鸡胴体中沙门氏菌感染及耐药的监测.
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血培养阳性病原菌种类及耐药性监测
目的:监测南京医科大学第一附属医院2010年血培养阳性病原菌的耐药性,指导临床合理用药.方法:收集南京医科大学第一附属医院2010年3 625份血培养阳性病原菌鉴定结果；细菌及真菌鉴定采用API系统,细菌药物敏感性测定采用纸片扩散法,真菌药物敏感性测定采用Rosco纸片法,Whonet 5.5软件进行数据分析.结果:3 625例血培养标本中有419份阳性,革兰阳性细菌占57.8％,革兰阴性细菌占38.4％,真菌占3.8％.病原菌耐药性分析结果显示:葡萄球菌和肠球菌中均未发现对万古霉素和替考拉宁的耐药株；肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药高度敏感；非发酵菌对多种抗菌药耐药率高.结论:血培养中检出的病原菌种类较多,对多种抗菌药物的耐药率较高,应引起重视.
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基于管家基因和水平转移基因的菌株亲缘性分析:60株耐药大肠埃希菌研究
目的:了解1组(60株)耐药大肠埃希菌的菌株亲缘性.方法:对该组耐药大肠埃希菌4种与耐药相关的管家基因和45种水平转移获得与β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因以及7种整合子、转座子、插入序列、接合性质粒遗传标记进行检测.并对检测结果进行样本聚类分析.结果:60株耐药大肠埃希菌多态性明显,多数菌株已发生演化.只有6、53号株;10、14号株,7、8、26、40号株3组携带相同基因(同一克隆).结论:耐药基因的样本聚类分析可识别出具有相同耐药特征的菌株,具有一定的流行病学意义,为追溯耐药菌传播途径提供方便.
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泛耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药相关基因与可移动遗传元件检测指标的聚类分析
目的:调查泛耐药鲍氏不动杆菌(pandrug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-ABA)中获得性耐药相关基因和可移动遗传元件遗传标记的存在状况,以及两者的相关性.方法:收集2010年3月到2010年5月临床标本中分离的PDR-ABA菌20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法检测37种β-内酰胺类获得性耐药基因、15种氨基糖苷类获得性耐药基因、5种喹诺酮类获得性耐药基因和8种可移动遗传元件,并用指标聚类分析(SPSS法)分析获得性耐药相关基因和可移动遗传元件遗传标记的相关性.结果:20株PDR-ABA菌共检出5种β-酰胺类获得性耐药基因、4种氨基糖苷类获得性耐药基因、1种喹诺酮类获得性耐药基因、5种可移动遗传元件.指标聚类分析显示获得性耐药基因与多种可移动遗传元件相关联:TEM-1、ADC-like、OXA-23、aac(6’)-Ⅰb、ant(2”)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、aphA1、adeB与tnpU、ISCR1、IS26、ISaba1高度关联,DHA-1、CARB与IS903关联.结论:本组PDR-ABA携带获得性耐药相关基因导致对相关药物耐药,且获得性耐药相关基因和可移动遗传元件密切相关.
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阻塞性黄疸起病的急性白血病1例报道
急性白血病是造血干细胞的恶性克隆性疾病,白血病细胞常见的浸润部位为肝、脾、淋巴结,也可浸润全身其他器官,但累及胆道系统引起阻塞性黄疸比较少见.以下报道阻塞性黄疸起病的急性非淋巴细胞白血病1例,并复习相关文献.
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不同类型冠心病中MCP-1变化的Meta分析
目的:探讨血清单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)水平与冠心病的关系.方法:检索并筛检2010年12月31日前发表的MCP-1水平与冠心病关系的相关文献,利用Rev Man 4.2对各项研究结果进行异质性分析,选择适当的分析模型进行Meta分析.结果:共纳入13篇文献,稳定型心绞痛(stable angina,SA)396例、不稳定型心绞痛(unstable angina,UA)366例、急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI) 268例及正常对照446例.Meta分析结果显示,SA、UA及AMI组患者血清MCP-1水平明显高于正常对照组(P均＜0.01).SA组标准化均数差(standardized mean difference,SMD)=0.71,95％可信区间(confidential interval,CI):0.30～1.12;UA组SMD=1.98,95％CI:1.15～2.81；AMI组SMD=2.69,95％CI:1.67～3.70; UA组患者血清MCP-1水平较SA组患者高0.77～2.20倍标准差,AMI组较UA组患者高0.32～0.67倍标准差.结论:冠心病患者血清MCP-1水平明显升高,且MCP-1水平与冠心病的严重程度相关.
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放化疗治疗中晚期胰腺癌疗效的Meta分析
目的:评价联合放化疗在中晚期胰腺癌治疗中的疗效和安全性.方法:计算机检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库和万方数据库中的相关文献,语种不限,所有检索均截止至2011年1月1日.检索所有有关放化疗和单用放疗或化疗治疗中晚期胰腺癌的随机对照试验,由2名评价员筛选和提取资料,并用修改的Jadad量表进行质量评估,对符合纳入标准的研究采用RevMan4.2软件进行分析.结果:共纳入18个随机对照试验,17篇中文,1篇英文,总共944例中晚期胰腺癌患者.Meta分析结果显示与单用化疗或放疗治疗中晚期胰腺癌组的疗效相比,联合放化疗可以明显提高6个月及1年生存率、明显提高瘤灶显效率,并可缓解胰腺癌引起的疼痛症状,6个月及1、2、3年总生存率的相对危险度RR值(95％CI)分别为3.01 (1.88～4.79)、1.97( 1.48～2.63)、3.55 (2.04～6.17)、3.92(1.07～14.34);瘤灶显效率和疼痛缓解率的相对危险度RR值(95％CI)分别为3.18(2.25～4.50)、2.85(1.85～4.41).有15篇研究报道了与治疗相关的不良反应.主要为骨髓抑制反应:包括白细胞、血小板减少；胃肠道反应:恶心、呕吐、呃逆、食欲降低、消化不良、排便次数增多,胃和十二指肠黏膜糜烂、溃疡、腹泻;少量患者出现神经毒性及发热等.结论:相对于单用化疗或放疗手段治疗中晚期胰腺癌,联合放化疗可以明显提高中晚期胰腺癌总生存率、疼痛缓解率,并提高瘤灶显效率,且安全性较高,是一种较好的中晚期胰腺癌治疗方法.
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江苏省HIV耐药警戒线的调查
目的:了解江苏省开展艾滋病抗病毒治疗以来,耐药毒株的传播情况和亚型分布.方法:通过横断面调查,采集17～25岁HIV-1感染者的全血样品,测定HIV-1pol区编码蛋白酶和逆转录酶基因的序列,提交到斯坦福大学HIV在线耐药数据库中鉴定耐药位点.用MEGA4.0软件构建进化树,分析亚型.结果:47份样品中,没有发现HIV-1的耐药株.共有CRFO 1_AE、B、CRF07_BC和CRF08_BC 4种亚型流行,CRF01_AE是主要流行的亚型,占59.6％,其次为B亚型,占25.5％.结论:江苏省还未发现耐药株的传播,个体治疗前尚不需要进行耐药性检测.在江苏省流行的HIV-1亚型与2006年相比,已经发生了显著变化,为掌握目前江苏省HIV-1的亚型分布,应对近2年发现的HIV感染者进行分子流行病学研究.
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江苏省抗病毒治疗者HIV-1基因耐药性及影响因素的分析
目的:了解江苏省抗病毒治疗患者HIV-1毒株的耐药性及其影响因素.方法:以2010年4月底仍在抗病毒治疗的AIDS患者为研究对象,采用横断面调查法和基因型耐药分析法对调查者进行耐药性分析.结果:共591名研究对象被纳入本研究分析.HIV-1毒株总耐药率为8.46％.治疗时间、病程和近期治疗方案NVP+AZT+3TC是HIV-1耐药毒株产生的危险因素.结论:江苏省抗病毒治疗患者耐药率处于较低水平,但耐药突变多样化,出现多重耐药现象,应多关注病程和治疗时间较长的患者,增加病毒载量检测和耐药检测的频率,以尽早发现耐药情况,尽快选择适当的治疗方案,可能有利于降低耐药毒株的发生.
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江苏省娱乐场所女性性工作者艾滋病相关知识与危险行为的调查分析
目的:了解江苏省娱乐场所女性性工作者(female sex workers,FSWs)的艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)相关知识和危险行为情况,为预防和控制艾滋病、提高该人群安全套使用率提供更加有效的理论依据.方法:采用自行设计的匿名调查表随机对江苏省3个县级市867名娱乐场所FSWs进行问卷调查和访谈.结果:娱乐场所FSWs平均年龄(27.12±5.70)岁.文化程度大多为小学和初中,有男友同居和已婚者居多.对AIDS相关知识有一定了解,但不全面.近1次与固定性伴、服务对象发生性行为时使用安全套的比例分别为57.0％和77.7％,差别有统计学意义(x2=73.125,P=0.000),FSWs的服务对象对于使用安全套可以预防性病及艾滋病的传播意识不高.不同年龄段与固定性伴安全套使用率的差别没有统计学意义(x2=2.753,P=0.431).Logistic多因素回归分析显示,年龄、户口所在地、有无固定性伴和对艾滋病预防措施的认知4个变量对近一次性行为是否使用安全套的影响有显著意义.FSWs的艾滋病性病知识主要来源于电视(69.9％),其次为朋友(45.5％).调查对象怀疑患有性病艾滋病后有85.9％的人选择在正规医院求医和治疗.结论:提高服务对象对预防措施的认知是提高安全套使用率的重要因素;FSWs与固定性伴之间安全套使用率较低,这会增加AIDS进一步传播的风险.应根据FSWs人群自身的受教育程度、生活习惯和行为特点加强健康教育和行为干预的针对性,在实践中尝试更灵活、有效的综合策略干预措施,控制AIDS的传播和蔓延.
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江苏省2005～2010年抗病毒治疗艾滋病患者流行病学特征比较分析
目的:了解2005～2010年江苏省艾滋病免费抗病毒治疗患者入组时的流行病学特征,比较分析其变化情况,为江苏省进一步实施艾滋病免费抗病毒治疗工作提供依据.方法:收集江苏省2005 ～2010年内所有接受抗病毒治疗艾滋患者入组治疗时的基本情况,建立Excel数据库并用SPSS17.0软件分析并比较其流行病学特征变化趋势.结果:江苏省2005～2010累计治疗1276例艾滋病患者,新增治疗人数逐年上升,增幅逐年扩大.江苏籍占93.7％,男女性别比2.7:1.平均年龄(39.2±11.o)岁,变化不大,但低年龄组有上升趋势.已婚或同居占65.1％.来源主要为医院被动发现,占40.9％,但有下降趋势.感染途径主要为异性性传播和同性性传播,两者合计占76.1％,同性性传播比例逐年上升,2010年达到32.8％.患者治疗时CD4+T细胞平均为134.9个/μl,开始治疗时间与确证时间的间隔天数中位数为147 d(P25=55, P75=489),有上升趋势.结论:江苏省艾滋病患 者开始抗病毒治疗时机较晚,但逐渐有所改善.患者发现晚仍是主要原因,感染者早发现能力仍需加强.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
