现代生物医学进展杂志
Progress in Modern Biomedicine 현대생물의학진전
- 主管单位： 黑龙江省卫生厅
- 主办单位： 黑龙江省森工总医院 哈尔滨医科大学附属第四医院
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1个月内
- 国际刊号： 1673-6273
- 国内刊号： 23-1544/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
长沙市开福区小学生超重和肥胖现况调查
目的:了解长沙市开福区小学生超重、肥胖情况,为小学生单纯性肥胖的防治工作提供科学依据.方法:随机抽取长沙市开福区7-12周岁小学生4140名,按照体重指数(BMI)法判定出超重和肥胖.结果:长沙市开福区儿童超重及肥胖检出率分别为9.76%和7.39%.其中,男女生超重检出率分别为12.31%和6.84%,肥胖检出率分别为9.37%和5.13%,男生超重和肥胖检出率均显著高于女生.结论:长沙市开福区小学生超重和肥胖的发生率在国内处于高水平,男童肥胖的发展趋势较为突出,提示及早预防和控制儿童肥胖的重要性.
-
生长发育期上颌牙列严重拥挤患者30例未拔牙治疗机制探讨
目的:探讨生长发育期牙弓宽度宽变化的可塑性的限度及规律,尽可能减少正畸治疗中拥挤患者的拔牙比率.方法:通过回顾性分析选出我科十年来治疗完成的、采用未拔牙手段治疗成功的病例100例.从中选出30例严重拥挤病例,其中男18例,女12例,平均年龄11.2岁,对其治疗前后牙弓宽度长度及拥挤部位进行比较分析.结果:尖牙唇侧错位造成间隙不足的患者,通过牙弓前段和中段宽度的增加来解除拥挤排齐牙列,治疗前后比较,有显著性差异;牙齿腭侧错位造成拥挤的患者,通过拥挤对应区段长度的增加来解除拥挤,治疗前后比较,差异有显著性.结论:生长发育期严重拥挤惠者可通过牙弓长度或宽度的生长适应性改建而非绝对拔牙手段采解除拥挤.
-
淮南地区农村已婚育龄妇女生殖健康现状及KAP调查
目的:了解本地区农村已婚育龄妇女生殖健康现状,知识、态度和行为,以及需求,为有效开展生殖健康教育提供科学依据.方法:用整群抽样调查的方法对淮南地区农村妇女进行妇科病普查和生殖健康知识态度行为的问卷调查.结果:被调查者妇科病患病率为33.10%,居于前3位的是:宫颈炎13.54%、细菌性阴道炎6.77%和念珠菌阴道炎4.69%;被调查者生理卫生及保健知识、避孕、性病和爱滋病等知识较为欠缺;她们对生殖健康的知识主要来自于父母、爱人和朋友,录像和书籍等;多数妇女期望定期进行妇科病查治、参加生殖健康知识讲座、获得医务人员的咨询指导.结论:本地区妇女生殖健康现状不客乐观,需要进一步加强生殖健康服务力度,加强计划生育宣传、咨询和指导力度,多途径开展性传播疾病知识宣教工作等.
-
24h睡眠剥夺后作业效率与心率变异性的变化
目的:探索24h睡眠剥夺(Sleep Deprivation,SD)后作业效率和心率变异性的变化.方法:通过观察8名健康男性在24h睡眠剥夺前后的作业效率、主观脑力负荷和心率变异性的变化,寻找与脑力疲劳相关的敏感指标.结果:在24h睡眠剥夺后,NASA-TLX评分呈显著性增加(p＜0.05),75°立位时HF呈显著性减少(p＜0.05),TINN、LF/HF呈显著性增加(p＜0.05).结论:NAsA-TLX量表从主观感受上很好的反映了脑力疲劳后工作绩效下降的变化,HRV的变化主要原因在于24h SD后迷走神经活性降低,交感神经相对加强.
-
从七肽噬菌体展示库中筛选内毒素结合蛋白质配基
目的:研究从噬茵体展示库中筛选内毒素结合蛋白质配基,为其在内毒素致病作用机理及在内毒素血症防治研究中的应用奠定基础.方法:以内毒素为靶分子从随机七肽噬菌体展示库中筛选内毒素的高亲和力噬菌体配体,通过ELISA鉴定,DNA测序及相关软件分析.结果:所筛选的亲和力高的噬菌体的ELISA检测值A405nm可达1.965通过比较亲和性噬菌体外源插入肽的DNA序列,认为FHENWPS肽段中包含有与内毒素分子发生亲和结合的一个共有序列.该序列展示肽的等电点为5.36,具有双嗜性,这有利于肽与LPS分子表面的位点相互作用从而产生亲和吸附.结论:运用亲和筛选方法从肽库中筛选内毒素结合蛋白质配基是可行的.
-
老年患者腹腔镜手术时应用丙泊酚对血浆内皮素、降钙素基因相关肽的影响
目的:在腹腔镜手术中应用丙泊酚对老年患者血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量的影响.方法:50例腹腔镜手术病人,年龄58-69岁,ASAI-Ⅱ级,随机分P组和C组两组,每组25例.P组为丙泊酚组、C组为对照组,分别于麻醉前、麻醉后、气腹后10min、20min和30min,抽取静脉血测定ET和CGRP值.结果:麻醉前后两组患者ET和CGRP水平无显著性差异(P＞0.05).气腹后10min P组ET水平开始下降,30min时显著低于C组和气腹前,而C组气腹后ET水平显著增高(P＜0.05).P组CGRP水平30min时较气腹前显著增高(P＜0.05),而C组CGRP水平气腹后20min开始下降,30min时显著低于P组(P＜0.05).结论:CO2气腹压可致机体ET水平升高,而丙泊酚能明显拮抗ET水平,提高CGRP水平,减轻老年患者在腹腔镜手术中的心血管应激反应.
-
雷帕霉素治疗系膜增殖性肾小球肾炎的临床研究
目的:观察低剂量雷帕霉素(RPM)治疗增殖性肾小球肾炎的临床疗效和病理改变,并对其安全性进行评价.方法:纳入标准:临床诊断为肾小球肾炎,肾活检证实为中到重度系膜增生(伴有或不伴有Iga沉积);尿蛋白小于800mg.d-1;肾功能正常.排除标准:尿蛋白大于800mg.d-1;急性肾小管坏死存在;患高脂血症,合并其他器质性疾病.观察时间:6个月,停药后继续随访6个月.试验终点:尿蛋白大于3.5 g.d-1;顽固高脂血症药物无法控制;血清肌酐迅速增高;其他严重副反应.给药方法:低剂量RPM(宜欣可口服溶液)口服,3d诱导后根据目标全血谷浓度3-5ng.ml-1调整用药剂量.按计划记录临床和实验室情况.根据临床表现、蛋白尿和/或血尿情况判断疗效,以缓解、改善和无效计,在第6月结束时进行重复肾活检,观察肾组织病理变化并进行肾小球评分,判断病理疗效.结果:共入选11例中到重度系膜增生性肾炎患者,BPM全血谷浓度目标值在3-5 ng.ml-1时药物剂量平均为1.5±0.6mg.d-1;4例达到临床缓解(36.4%),4例改善(36.4%),3例无效(27.3%),总有效率72.7%.与治疗前比较,治疗有效的8例病理结果显示,肾小球内细胞数明显下降,基质增生减轻,毛细血管襻管腔面积增加,肾小球评分具显著性差异(p＜0.05);不良反应包括1例恶心、纳差,1例白细胞下降,以及1例轻度转氨酶升高、2例轻度血脂升高,均在允许靶浓度范围内调整用药后控制,无需针对性治疗和停药,未影响试验.结论:低剂量RPM口服治疗中到重度系膜增生性肾炎疗效可靠,副反应轻,安全性较好.但仍需多中心、大规模的临床试验证实.
-
三种膀胱灌注方法对膀胱树突状细胞及尿IL-2的影响
目的:探讨联合灌注预防膀胱肿瘤复发的免疫机制.方法:将44只雌性wistat大白鼠随机分为生理盐水对照组以及BCG组、丝裂霉素组、IL-2联合BCG组,分别定期进行11次膀胱灌注并分批处死取出膀胱组织,用免疫组化的方法检测膀胱组织中DC的数量,用双抗体夹心酶免疫吸附法(ELISA)测定尿IL-2含量,观察膀胱组织DC及尿IL-2的变化.结果:DC平均数量:IL-2联合BCG组为(28.3±8.0 CDS/HPF)、BCG组为(16.6±5.9 CDS/HPF)、丝裂霉素组为(4±2.3 CDS/HPF)、对照组为(4.8±3.4CDS/HPF);尿IL-2浓度:IL-2联合BCG组为(87.5±30.4 ng/L)、BCG组为(58.7±20 ng/L)、丝裂霉素组为(35.9±9.6ng/L)、对照组为(35.7±11.3 ng/L).结论:IL-2和BCG两者间有免疫促进和协同作用.
-
人HIF-1α miRNA干扰质粒的构建及其在Lovo细胞中有效性的检测
目的:构建人HIF-1α的miRNA特异性干扰表达载体并转染人结肠癌Lovo细胞检测其有效性.方法:设计合成针对人HIF-1α基因的特异性miRNA前体寡核苷酸,依次通过退火、连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组干扰质粒pcDNA?6.2-GW/EmGFP-HIF-1α-miR,并转染人结肠癌Lovo细胞,经半定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性.结果:经双酶切及测序鉴定,针对人HIF-1α基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制人结肠癌Lovo细胞中HIF-1α mRNA表达.结论:成功构建针时人HIF-1α基因的miRNA特异性有效干扰质粒,为后续HIF-1α基因慢病毒miRNA表达载体的构建及其在结肠癌多药耐药中的相关功能研究奠定基础.
-
弓形虫基因缺陷虫株建立方法的初步研究
目的:应用电穿孔技术转染TgP24基因敲除转染质粒于弓形虫RH,探讨电穿孔技术的应用条件,以及TgP24基因敲除质粒转染虫株在不同哺乳动物细胞中筛选的适条件.方法:设定所需的电穿孔参数、条件,如电压,电容,脉冲次数,电击杯的大小,电转染缓冲液,电穿孔后,将弓形虫悬浮液分别转移到长有不同贴壁细胞的培养瓶中,37℃,5%CO2(体积分数)的培养箱中培养,观察弓形虫的生长状况,并对不同电穿孔参数、条件下的弓形虫存活率进行比较.12hr后换成加有福来霉素的完全培养基中选择培养,不同时间观察虫体及细胞生长情况;在细胞中选择培养10天后,收集虫体,4℃下福来霉素处理7天,再回复到细胞内用选择培养基培养5天,收集虫体,腹腔注射昆明小鼠,大量收集弓形虫用于提取RNA进行RT-PCR.结果:优化电穿孔条件后的弓形虫存活率得到提高(P＜0.05);在选择浓度为5.0μg/ml-7.5μg/ml的福来霉素培养基中,筛选虫株采用L929细胞做为宿主细胞为适合;RT-PCR结果显示L929细胞筛选基因敲除虫株的效果较好.结论:初步确定了弓形虫电穿孔技术的应用条件,以及Tg P24基因敲除质粒转染虫株在不同哺乳动物细胞中的佳筛选条件;获得了较好的转染效率,为进一步研究弓形虫Tg P24基因敲除株的生物学特性打下了良好的基础.
-
早、中、晚孕期胎盘因子体外抗HIV-1的研究
目的:探讨早、中、晚孕期胎盘因子(PF)体外抗人免疫缺陷病毒-1(HTV-1)的作用及其在HIV-1垂直传播中可能的作用.方法:采用荧光染料Calcien-AM标记的H9/HIV-1 ⅢB分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,与MT2细胞混合培养,荧光显微镜下观察合胞体的形成;用游离的HIV-1 ⅢB感染MT2细胞,并分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,用MTT法检测HW-1感染细胞的存活率,用HIV-1 p24抗原试剂盒检测细胞培养上清中p24抗原含量的变化.结果:各孕期PF并不能抑制MT2和H9/HIV-1 ⅢB细胞的融合,但可以增加HIV-1感染细胞的存活率及减少HIV-1 p24抗原的表达,且效应以早孕期PF大,中孕期PF其次,晚孕期PF小,并与剂量呈正相关.结论:PF在体外具有抗HIV-1的作用,并呈现孕期和剂量相关性,可能在阻断HIV-1垂直传播中具有一定作用.
-
三七总皂苷对兔腹主动脉粥样硬化防治作用的超声学评价
目的:采用超声技术评价三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对兔腹主动脉粥样硬化的防治作用.方法:日本大耳兔18只随机分成对照组、模型组(AS组)和药物组(PNS组).对照组饲以基础饲料,AS组及PNS组饲以高脂饲料.PNS组给予PNS 45 mg/kg(ig,1次/日).于喂养前及12周分别检测血脂及超声检查腹主动脉,观察内中膜厚度(IMT)及斑块形成情况.12周后处死动物,取其腹主动脉进行病理学检查.结果:超声显示PNS组IMT增厚较AS组明显减轻(p＜0.01),斑块数量也较AS组少.血脂检测PNS组血脂水平较AS组显著降低(p＜0.01).结论:PNS对AS有明显的防治作用,超声检查是评价PNS对AS的防治作用的简单、无创、可靠的指标.
-
运动训练对大鼠局灶性脑梗死区周边皮质GFAP、GAP-43表达的影响
目的:观察运动训练对大鼠局灶性脑梗死区周围皮质的胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAF)和生长相关蛋白-43(growth-associated protein,GAP-43)表达的影响.方法:成年健康雄性sD大鼠42只,随机分为3组:运动组,静止组,假手术对照组.运动组造模后给予电动跑台训练,每天30min;静止组造模后置于普通笼中饲养,不予康复训练;假手术对照组仅给予麻醉及头皮切开、缝合.采用光化学方法建立局灶性脑梗死模型,每组大鼠于术后7d,14d,21d处死,应用免疫组化方法观察各组大鼠不同时期梗死灶周围皮质GFAP和GAP-43的表达结果:运动组梗死灶周围皮质GFAP的表达在14d和21d显著高于静止组和假手术对照组.运动组大鼠GAP-43表达在7d为高,14d后开始下降,但均显著高于静止组和假手术对照组.静止组大鼠GAP-43表达在7d和14d高于假手术对照组.21d时三组大鼠GAP-43表达无明显差异.结论:运动训练能促进梗死灶周围皮质GFAP和GAP-43的表达,促进脑缺血后的突触发生与重建.
-
环氧化合物交联牛颈静脉带瓣管道的体内抗钙化性能评价
目的:探讨环氧化合物交联的牛颈静脉带瓣管道的体内抗钙化性能.方法:取新鲜牛颈静脉带瓣管道16根,分为环氧化合物交联组、戊二醛交联组,经二种不同的方法处理后,建立犬右室肺动脉重建动物模型,观察10个月,采用原子吸收光谱法测定牛颈静脉的组织钙含量;von kossa 钙盐染色观察组织钙化情况;并对比研究重建后牛颈静脉的组织结构变化.结果:经环氧化合物交联的牛颈静脉管道的钙化程度轻,管壁及瓣膜的抗钙化性能比经戊二醛固定处理的均有明显提高.结论:环氧化合物交联方法与传统的戊二醛交联方法相比较,能较好的提高牛颈静脉体内抗钙化性能.
-
VP16损害大鼠卵巢组织结构和内分泌功能的实验研究
目的:探讨抗肿瘤药依托泊苷(VP16)对大鼠卵巢组织结构和内分泌功能的影响.方法:选用40只3～4月龄雌性SD大鼠,随机将其分为空白对照组,VP16低、中、高剂量组.用药后比较4组大鼠卵巢、子宫湿重和卵巢组织结构的变化,采用放射免疫方法测定4组大鼠促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)水平,并用免疫组织化学方法观察VP16不同刺量组对半胱天冬酶-3(caspases-3)在卵巢颗粒细胞中表达的影响.结果:与空白对照组相比:光镜下可见VP16高,中剂量组对卵巢组织破坏程度较大,卵泡数明显减少,且血清FSH升高,E2下降,caspases-3蛋白均强表达,差异有统计学意义;VP16低剂量组对卵巢组织破坏程度较小,卵泡数有所减少,且FSH升高、E2下降不显著,caspases-3蛋白呈弱表达,差异无统计学意义.结论:VP16对大鼠卵巢的损害程度与药物剂量成正相关,对卵巢组织的损伤可能与caspases-3凋亡途径有关.
-
小鼠破骨细胞诱导及成纤维生长因子受体表达检测
目的:检测成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)在小鼠破骨细胞中的表达情况,为探讨FGFRs时破骨细胞的直接调控作用奠定基础.方法:采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-B ligand,RANKL)诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞.提取细胞总RNA后经逆转录获得小鼠破骨细胞cDNA,根据FGFRs基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增并对PCR扩增产物进行测序.为进一步验证转录水平的结果,提取细胞总蛋白电泳后进行免疫印迹实验.结果:诱导5d后可见TRAP(+)多核细胞出现,小鼠破骨细胞在转录水平和翻译水平均只可检测到FGFR1和FGFR3基因的表达产物.结论:M=CSF和RANKL可成功诱导出小鼠破骨细胞,FGFR1和FGFR3基因在小鼠破骨细胞中均有表达.
-
梓醇对鱼藤酮损伤小鼠的记忆、抗氧化能力的影响及安全性评价
目的:研究梓醇对鱼藤酮损伤小鼠的学习记忆能力及皮层抗氧化系统的影响,并对其安全性进行评价.方法:腹腔注射鱼藤酮建立小鼠皮层抗氧化系统损伤模型,腹腔注射给药21 d后进行Y迷宫试验,再测定各组小鼠皮层谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、丙二酫(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平;梓醇安全性评价采取小鼠急性毒性试验和大鼠长期毒性试验.结果:梓醇能够改善小鼠的迷宫成绩,增强GSH-PX活性和GSH含量,降低GST活性和MDA含量,抑制LDH的释放.小鼠腹腔注射给药梓醇的LD50为206.5mg/kg.;大鼠尾静脉注射90天,未见动物出现血液学、血液生化及主要脏器的毒性变化.结论:梓醇能改善鱼藤酮损伤小鼠的记忆能力,减轻皮层氧化应激损伤;长期使用无明显的毒副作用.
-
蛋白药物涂层支架的制备表征与体外释放研究
目的:探讨将蛋白大分子药物以较高的担载量涂层于心脏支架,并在不发生蛋白聚集的前提下实现数周之久缓释的方法.方法:将牛血清白蛋白通过稳定的水相-水相乳液技术制备成多糖玻璃体颗粒,并将多糖玻璃体颗粒分散于聚乳酸溶液中喷涂于支架表面制成蛋白涂层支架,在37°CPBs中进行体外释放动力学研究,用SEC-HPLC比较了蛋白涂层支架制备前后蛋白的聚集情况,并用扫描电镜等对蛋白涂层支架表面进行了表征.结果:蛋白涂层支架在电镜观察下外观圆整,表面光滑,制剂过程中未产生蛋白聚集,且能从涂层中缓慢释放达50天以上.结论:稳定的水相-水相乳液技术及其基础上制备的蛋白多糖玻璃体颗粒应用于心脏支架涂层上,能在有效保护蛋白构象的同时实现蛋白的缓释,为具有抗再狭窄活性蛋白应用于心脏支架提供了技术平台.
-
小檗碱对2型糖尿病大鼠肾组织PPARα/δ/γ表达的影响
目的:观察2型糖尿痛大鼠肾组织PPARα/δ/γ蛋白的表达及小檗碱对它们的影响.方法:小剂量注射链脲菌素(35 mg·kg-1,ip)加高糖高脂饲料饲养16周建立2型糖尿病大鼠模型,随后16周每天分别给予低中高剂量小檗碱75、150、300mg·kg-1、非诺贝特100mg·kg1 和罗格列酮4mg·kg-1,处死大鼠后用免疫组化技术检测肾脏组织中PPARα/δ/γ的表达.结果:糖尿病大鼠肾脏中PPARα和PPARδ蛋白表较正常对照大鼠明显降低(P＜0.01),PPARγ表达则较正常对照大鼠明显升高(P＜0.01).中高剂量小檗碱和非诺贝特都能促进糖尿病大鼠肾组织中PPARα和PPARδ的表达(P＜0.01),中高剂量小檗碱和罗格列酮能明显降低PPARγ表达(P＜0.01).结论:糖尿病大鼠肾脏组织中PPARα/δ/γ的表达失常,小檗碱能恢复其表达至接近正常大鼠水平.
-
针刺对胃黏膜损伤的修复与EGFR信号传导通路的相关性
目的:探讨针刺胃经穴后提取的血清对大鼠胃黏膜细胞表皮生长因子受体(EGFR)后信使物质表达的影响.方法:60只大鼠随机分为模型血清组、胃经血清组、胆经血清组、胃经血清+PD153035组和胆经血清+PD153035组,采用水浸束缚法制作胃黏膜损伤大鼠模型,利用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用EGFR抑制剂PD153035和血清孵育胃黏膜细胞,应用酶联免疫吸附法检测PLCγ-1活性,同位素掺入法检测PKC活性,逆转录聚合酶链反应法检测c-mye的表达水平.结果:模型血清组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1,PKC和c-myc微弱表达;胃经血清组和胆经血清组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1,PKC和c-myc呈现较强表达,其中胃经血清组表达高,两组相比较有显著性差异(P＜0.01):胃经血清+PD153035组和胆经血清+PD153035组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1,PKC和c-myc的表达较弱,胃经血清组与胃经血清+PD153035组比较有显著性差异(P＜0.01).结论:针刺胃经穴后提取的血清能诱导大鼠胃黏膜细胞EGFR后信使物质的活化,并且存在经脉-脏腑的特异性联系.
-
L-肉碱的生理功能及其应用研究进展
L-肉碱是一种季铵化合物,在人类和动物的脂肪酸β-氧化过程中发挥重要作用.L-肉碱极强的生物可利用性使其倍受关注.然而在诸如婴儿、孕妇、血液透析病患者及一些慢性疾病等情况下L-内碱极易缺乏.因此目前L-肉碱被广泛应用于医药、食品及饲料添加荆等方面.本文综述了L-肉碱对婴儿、孕妇、中老年人、运动员、肥胖患者等的营养、保健功能及其在肾衰竭、和透析相关的并发症、心血管疾病、男科不育症、癌症、糖尿病、高血脂症等病症治疗中的应用.随着L-肉碱系列产品研究成为热点,其在保健品、医药及化妆品工业的应用将具有更美好的前景.
-
蛋白质组学及其在神经科学中的应用
蛋白质组学这一概念从提出到现在已应用到生命科学许多领域.在中枢神经系统中,全脑以及许多脑区的蛋白质组数据库逐步建立,并且已经鉴定出了许多在神经系统疾病过程中起重要作用的蛋白.虽然神经系统蛋白质组学的研究尚处于起步阶段,但在阐明某些疾病的发病机制方面已取得长足发展.本文对蛋白质组学及其在神经科学中的研究进展作一综述.
-
细胞因子抗瘢痕的研究进展
瘢痕是创伤修复的必然结果影响,瘢痕的产生,发展的因素很多,虽然国内外学者在病理性瘢痕领域研究取得了一些进展,但其确切的发病机制仍未完全清楚,目前对治疗瘢痕的研究主要集中在生化,细胞水平,对分子机制和基因水平的研究还在不断的深入,人们对细胞因子在瘢痕形成方面起了关键的调节作用这一观点已逐步形成共识,并将细胞因子引入瘢痕的治疗中.常见的细胞因子在抗瘢痕中的应用也将成为可能.本文主要介绍了常见细胞因子的在创面修复中的生物学特征及抗瘢痕的研究情况.
-
金属螯合亲和层析的应用研究进展
金属螯合亲和层析是近30年来出现的一种新型的分离纯化技术,它以配基简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品有效的技术之一.其在蛋白质、酶和核苷酸纯化以及蛋白质分析等方面具有广泛的应用.而随着研究的进一步深入,其新应用也越来越广泛的被发现.
-
胚胎干细胞体外诱导分化
胚胎干细胞能在体外长期不断自我更新,具有高度分化潜能,可分化成胎儿和成体的几乎所有类型的细胞,如心肌细胞、神经细胞、上皮细胞、肝细胞、血细胞、胰岛细胞、脂肪细胞及生殖细胞等.在细胞治疗和组织器官替代治疗、发育生物学等的研究中将具有广阔的应用前景.目前已有多种胚胎干细胞体外定向诱导的报道.本文从体外诱导分化影响因素和几种主要诱导细胞类型进行分析和总结,为胚胎干细胞的诱导分化研究提供参考资料.
关键词： 胚胎干细胞(ESC) 诱导分化 -
环氧合酶2与肝纤维化关系的研究进展
环氧舍酶(cyclooxygenase COX)是花生四烯酸合成前列腺素的关键酶,目前已发现其有三种同工酶COX1、COX2和COX3,其中COX2为诱导型酶.正常状态下在组织中表达极低或不表达,但可被多种激活物诱导例如某些细胞因子、促有丝分裂物质和内毒素等.研究表明COX-2在多种细胞和组织的炎症及增殖中起重要作用.本文对COX2在肝纤维化中的作用及其机制进行了综述.
-
JNK活化机制的研究进展
cJun氨基末端激酶(JNK)家族是促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族成员之一,MAPK信号通路是多级蛋白激酶的级联反应,包括三个关键的激酶:MAPK、MAPK的激酶(MAPKK)和MAPK激酶的激酶(MAPKKK).JNK信号通路中有许多支架蛋白,如:JIP、JAMP、POSH等,能够与JNK及JNK信号通路中相关成员结合成复合物,调节它们的活性和细胞内定位,JNK信号通路可被细胞因子、生长因子、应激等多种因素激活,大量实验提示JNK活化在细胞增殖、细胞凋亡、应激反应以及多种人类疾病的发生与发展中起着重要的作用.JNK信号通路与其他信号通路间也有着相互作用.现对JNK活化机制的研究进展进行综述.
-
DNA错配修复系统组成和功能的研究进展
DNA错配修复(Mismatch repair,MMR)系统广泛的存在于从原核到真核的生物体中,是进化上保守的生化通路.MMR系统由一系列特异性修复DNA碱基错配的酶分子(错配修复基因产物)组成.细胞由于此系统的存在使DNA复制保持忠实性,从而保持遗传物质的完整性和稳定性,避免遗传物质发生突变.MMR系统基因的失活会导致自发突变率的明显增加,从而导致微卫星不稳定(MSI),可能引发某些肿瘤发生.近年来,MMR系统的研究越来越受到学者的重视,对MMR作用机制及组成该系统的几种酶蛋白结构与功能方面的研究不断深入,加深了对MMR系统的理解.这些为MMR系统相关的应用研究,尤其是为肿瘤发生奠定了理论的基础.本文重点讨论了错配修复系统的蛋白组成、各蛋白的功能及它们如何相互协调发挥作用的新研究进展.
-
细菌人工染色体的修饰及其转基因应用研究
细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)是一种新发展起来的DNA载体系统,它具有容量大、遗传特性稳定、易于操作等优点.广泛的应用于基因组文库构建、基因功能分析等方面.随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体进行有目的修饰已成为功能基因组学研究的一个重要环节.BAC载体转基因技术可能成为避开基因打靶获得高效表达的转基因生物的另一途径.本文介绍了BAC作为转基因载体的几种修饰方法及其在转基因研究上的应用.
-
衣原体感染不孕不育患者血清中自身抗体的检测
目的:探讨衣原体感染与血清中抗精子抗体(AsAb)、抗心磷脂抗体(ACA)、抗子宫内膜抗体(EMAb)之间的关系.方法:用ELISA法检测120例衣原体感染不育男性(男性衣原体感染组)和55例正常生育男性(男性正常时照组)的血清中AsAb、ACA;检测142例衣原体感染不孕女性(女性衣原体感染组)和60例正常生育女性(女性正常对照组)的血清中AsAb、ACA、EMAb.结果:男、女衣原体感染组AsAb、ACA检出率高于相应对照组,具有显著性差异(P值均＜0.05);女性衣原体感染组EMAb检出率高于女性对照组,具有显著性差异(P＜0.05).结论:生殖道衣原体感染和与不孕不育有着密切的相关性,且AsAb、ACA、EmAb的产生与衣原体感染有关.
-
一种新的基于STR的染色体三体性疾病诊断策略中遗传标记的评估
背景:在此前发表的文章中,我们提出了一种新的基于短串联重复序列(Short Tandem Repeats,STR)的染色体三体性疾病的诊断策略.当应用这种策略来检测特定染色体拷贝数时,需要从人类基因组众多的STR中选择适宜的染色体特异性STR基因座构建一个诊断系统,根据系统中的STR基因座是否检测到三种不同的等位基因产物来判断个体是否为三体患者.目的:本研究拟进一步提出并验证对单个STR基因座及由多个STR基因座构成的诊断系统的评估方法,旨在帮助选择适宜的STR基因座构建一个高效能的诊断系统.方法:我们提出一个新的参数--三等位基因栓出率,并推导出该参数的计算公式,用于定量评估一个STR基因座在这种诊断策略中的效能.在此基础上,推导出另一个数学公式,计算一个非整倍体诊断系统能够在一个三体性患者?哌检测到三个不同等位基因的概率,根据这个概率的大小来衡量系统诊断效能的高低.后,我们将所提出的两个公式用于评估我们在先前研究中构建的一个21三体的诊断系统.结果:这个21三体诊断系统由9个21号染色体特异性STR基因座构成.根据我们所提出的两个公式,这些STR基因座的三等位基因检出率在0.203-0.638之间,该系统在21三体患者能够检测到三个不同等位基因的概率大于0.95.结论:我们所提出并验证的公式可以对单个STR基因座和系统的诊断效能进行定量评估,帮助选择适宜的STR遗传标记,并确定一个高效能诊断系统所需的STR基因座的数量,从而为这种诊断策略的广泛应用提供基础.
-
人肝癌细胞系HepG2中survivin-3鉴定及其真核载体构建
目的:鉴定肝癌细胞系HepG2中survivin异构体(survivin variant,SVV variant)并构建其真核表达栽体.方法:提取HepG2细胞总RNA,根据Gen-Bank内survivin 3个异构体核苷酸序列设计3条引物对其进行鉴定;设计含有BamH I和Xho I双酶切位点的SVV-3引物,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增SVV-3完整编码区,扩增产物用BamHI和XhoI双酶切后定向克隆到真核细胞表达栽体pcDNA3.1中,序列测定进行鉴定.结果:HepG2细胞表达SVV-3、1,SVV-3表达尤为丰富.对SVV-3克隆测序,与Gen-Bank报道完全一致.结论:成功鉴定出HepG2表达SVV-3、1,构建了SVV-3真核表达载体.
-
云南红豆杉内生真菌分生孢子的固定化研究
目的:建立TTC法测定红豆杉内生真菌分生孢子的固定化效果.方法:用海藻酸钠包埋云南红豆杉内生真菌12.3.2分生孢子制成固定化孢子.通过TTC法测定红豆杉内生真菌分生孢子的活力,并以此来考察海藻酸钠的浓度、CaCl2浓度、固定化时间以及温度对固定化效果的影响.结果:通过实验确定,当海藻酸钠浓度为4.0%,CaCl2浓度为2.6%,固定化时间为6h,包埋率为46%,温度为40℃时,内生真菌12.3.2活力强,固定化效果佳.结论:TTC法可以准确反应红豆杉内生真菌分生孢子的固定效果,固定的分生孢子具有更好的发酵特性.
-
PLGA-脱细胞猪皮的性质研究
目的:猪皮来源的细胞外基质(ECM)被广泛应用于组织工程材料的研制中,由于使用目的的不同,常需要和其它组织工程原料进行复合使用.本研究将PLGA和脱细胞猪皮进行复合,在体外考察此复合体系的力学性质和三维结构,探讨其作为组织工程支架的可行性.方法:(1)采用高压渗透法将PLGA和脱细胞猪皮制备成供检试件.(2)以扫描电镜观察其内部的三维结构.(3)用拉伸实验机测试其拉伸力学特性.结果:(1)力学测试显示,其断裂强度为1.32MPa,断裂伸长率约为132%,弹性模量为1.6×106Pa.(2)扫描电镜显示PLGA渗入到脱细胞猪皮的空隙中而相互融合,形成了蜂窝状结构.结论:本研究所构建的PLGA-脱细胞猪皮复合物具有适宜的机械性能,其蜂窝状结构为其作为细胞载体提供了良好的空间结构,是一种具有良好应用前景的组织工程支架.
-
皮肤损伤后SDF-1分泌量的变化及其受体CXCR4在表皮组织中分布表达的实验研究
目的:研究皮肤受损后不同时间点伤口液和皮肤组织中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的含量变化,同时验证SDF-1受体CXCR4在表皮组织内的分布.方法:分别在伤后即刻、12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、96小时留取Ⅱ°烧伤患者的大疱液,用ELISA法检测伤口液中SDF-1的含量;用免疫组织化学染色的方法检测伤后1天、3天、7天创缘表皮内SDF-1的表达水平和其受体CXCR4在表皮组织上的分布.结果:用ELLSA法检测发现在受伤后几小时内大疱液中SDF-1的含量开始升高,1天后达到高水平,伤后的3天SDF-1分泌量逐渐下降,而免疫组织化学染色结果显示创缘表皮层和真皮层上有散在的SDF-1分泌,且分泌量随创面愈合时间的推移逐渐增多;表皮细胞表达有CXCR4,且越靠近表皮基底层细胞膜的阳性越强.结论:SDF-1在皮肤损伤后表达量的增多可能对皮肤组织创伤修复起一定的调节作用.
关键词： 基质细胞衍生因子-1 皮肤损伤 -
乳腺纤维瘤蛋白质组的凝胶内差异显示电泳分析
目的:建立具有高分辨率和稳定性的乳腺纤维瘤组织蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析.方法:取乳腺纤维瘤病患者病变部位及正常乳腺组织,匀浆提取乳腺组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每一时Cy3和cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱.所获得的图谱经DeCyder软件分析.结果:在乳腺纤维瘤病的病变组织中,有37个蛋白质表达水平显著增加,另外8个蛋白质表达水平显著下降.结论:分析所得的45个差异蛋白质可能与乳腺纤维瘤疾病的发生与发展有关.
-
转染腺相关病毒对骨髓间充质干细胞分化潜能的影响
目的:探讨转染腺相关病毒对骨髓间充质干细胞分化潜能的影响.方法:运用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞;将pAAV-GFP、pAAV-RC、pHelper用磷酸钙法共转染HEK-293细胞,得到rAAV-GFP,转染骨髓间充质干细胞.进行成骨诱导分化,观察rAAV-GFP对骨髓间充质干细胞分化潜能的影响.结果:与未转染rAAV-GFP的间充质干细胞相比较,转染rAAV-GFP后,骨髓间充质干细胞分化潜能未见改变,均表现为细胞浆蓝紫色,核周明显.结论:转染腺相关病毒对骨髓间充质干细胞分化潜能未见明显影响,为基因修饰腺相关病毒转染骨髓间充质干细胞进行体内移植提供了实验基础.
-
siRNA抑制c-myc基因的表达对宫颈癌细胞增殖的影响
目的:利用siRNA(small interference RNA)技术研究c-myc基因的对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法:依据Promega公司在网上提供的设计软件,设计针对c-myc基因的siRNA,合成DNA模板,体外转录合成siRNA.通过阳离子聚合物jet-SITM-ENDO将合成的siRNA转染入HeLa细胞,以未转染细胞以及错义序列siRNA-scr转染细胞为对照.用细胞计数法检测siRNA对HeLa细胞增殖的影响.流式细胞法检测细胞周期及蛋白表达的变化,RT-PCR法比较转染前后c-myc mRNA表达水平的变化.结果:细胞计数法结果显示,转染24h后c-myc基因siRNA明显抑制MCF-7细胞增殖,转染48h后,抑制效率稳定.c-myc基因siRNA转染后能有效地抑制HeLa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期,siRNA转染组c-myc mRNA、蛋白的表达量明显低于空白对照组、错义序列组.结论:体外转录合成的siRNA可有效降低HeLa细胞c-myc基因的表达,抑制细胞增殖.
-
α-淀粉酶水解魔芋飞粉佳条件优化的研究
本研究采用单因素和正交试验的方法对α-淀粉酶水解魔芋飞粉的酶用量、pH值、温度、[Ca2+]和底物浓度等条件进行优化,结果表明当α-淀粉酶用量为4u/g淀粉、pH为6.0、温度为60℃、[Ca2+]为0.01mol/L和底物浓度为8%时,水解度达20%,为佳反应条件,研究为进一步利用α-淀粉酶水解魔芋飞粉生产燃料乙醇奠定了基础.
-
扁蓄总黄酮提取方法的比较研究
目的:筛选扁蓄总黄酮的佳提取方法和提取工艺.方法:以扁蓄总黄酮的提取率为指标,分别采用乙醇回流法、超声波法和微波法提取扁蓄总黄酮,通过正交试验对提取工艺中的温度、固液比、提取功率及时间等技术参数进行考察,使用分光光度法测定扁蓄总黄酮含量.结果:回流提取扁蓄总黄酮提取率为1.09%,超声波提取扁蓄总黄酮的佳条件为温度80℃,固液比1:10,功率700 W,提取2次,每次20 min,提取率为1.67%,微波法提取扁蓄总黄酮的佳条件为温度100℃,功率700 W,固液比1:20,提取2次,每次10min,提取率为1.98%.结论:微波提取法提取扁蓄总黄酮具有高效、省时、节能等优点,在中药提取中有良好的应用前景.
-
菌株HYR-08色素的理化性质的初步研究
目的:探讨菌株HYR-08分泌的生物活性物质-色素的理化性质.方法:收集刚进入生长平稳期的菌株,采用酸热、研磨、酶解和超声波四种不同的破壁方法进行破壁,随后用丙酮萃取法获得色素粗产品.比较了该色素在蒸馏水、无水乙醇、甲醇、丙酮、四氢呋喃、氯仿中的溶解情况.同时我们也分析了酸碱度、光照和温度对该色素稳定性的影响.结果:超声波裂解法的提取效率高.色素提取物在上述溶荆中的溶解能力由高到低依次为:四氢呋喃、丙酮、氯仿、无水乙醇、蒸馏水、甲醇.色素的稳定性对碱的耐受性明显强于酸.该色素提取物的稳定性与温度的升高及水浴时间的延长呈负相关.相同功率紫外光对该色素提取物的破坏能力要强于日光.结论:超声波裂解法是一种相对高效、经济简单的提取菌株HYR-08中色素的好方法.菌株HYR-08的色素提取物具有良好的对酸碱、温度和光照的耐受能力,提示该色素具有良好的生物医药开发前景.
-
嗜酸热原体菌的超氧化物歧化酶的结构模建和进化踪迹分析
为考察来源于极端高温酸性环境中的超氧化物歧化酶,建立了一个由嗜酸热原体茵的sod基因编码的蛋白质的可靠三维分子结构,并对这个蛋白质进行进化踪迹分析识别出了11个踪迹残基?其中,残基Asn39,Gly105和Glu162的位置随机遍布整个结构,其余的残基却全部都明显地聚于一个靠近铁原子的子类当中?由此从在三维结构确认sod基因编码含铁的超氧化物歧化酶.此外,那些被识别的靠近铁原子的踪迹残基可能跟铁的绑定和催化功能直接相关?
-
甘氨酸对缺血缺氧心肌细胞能量代谢的影响
目的:明确甘氨酸对缺血缺氧心肌细胞具有保护作用.方法:建立心肌细胞缺血缺氧模型,施加甘氨酸干预,应用高效液相色谱观察心肌细胞ATP、ADP、AMP含量变化及ATP/ADP比值.结果:模拟缺血缺氧1 h后开始心肌细胞ATP含量较正常组明显降低(P＜0.01),而ADP、AMP含量与ATP变化相反,ATP/ADP比值较正常组也明显降低(P＜0.01);甘氨酸干预复合缺血缺氧后,心肌细胞ATP含量及ATP/ADP比值较单纯缺血缺氧组显著降低(P＜0.01),而ADP、AMP含量明显升高(P＜0.01).结论:甘氨酸可以明显改善缺血缺氧心肌细胞的能量储备,发挥其保护效应.
-
相同基源的赤芍和白芍中芍药苷含量的比较
通过采用HPLC法比较了中江产芍药的根部不同加工品-赤芍和白芍中芍药苷的含量,以期为研究二者功效差异的具体原因奠定基础.结果表明,赤芍和白芍的化学成份及其含量均存在一定差异,大、中、小三个规格的赤芍和白芍中芍药苷含量分别2.97%、2.94%、2.98%和1.86%、1.82%、1.91%;白芍中芍药苷含量低于赤芍,芍药苷含量与规格无明显关系,化学成份及其含量的差异可能是二者功效差异的具体原因之一.
-
呼吸道感染常见致病菌及耐药性分析
目的:调查导致呼吸道感染的主要致病菌的种类,及这些致病菌对我科常用抗生素的药敏性情况,为呼吸道感染的合理用药提供依据.方法:对680个样本进行分离培养,用全自动微生物分析仪-VITEK32进行菌种鉴定及抗生素的药敏实验.结果:共分离获得1484株主要致病菌,其中G+致病菌706株,占总量的47.6%,G-致病菌686株,占总量的46.2%,真菌92株,占总量的6.2%.G+致病菌对检测10种抗生素的药敏性主要表现为传统的抗生素的疗效普偏低;而G-致病菌对检测的抗生素10种的药敏性情况表现出多元化态势.结论:呼吸道感染常见致病菌的种类多样,且表现出较高能力的耐药性,这值得我们注意.
-
万氏牛黄清心缓释胶囊在比格犬体内药动学研究
目的:研究比格犬单剂量交叉口服万氏牛黄清心缓释胶囊和市售普通丸给药的药动学.方法:采用高效液相色谱法测定10只比格犬单剂量口服万氏牛黄清心pH-依赖型梯度释药胶囊和市售丸后血浆中盐酸小檗碱的血药浓度.血浆样品采用碱化后乙醚萃取浓缩方法制备.以青藤碱为内标物质,流动相采用乙腈-0.1 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-磷酸(30:70:0.01),检测波长为262nm,流速为1.0mL·min-1.结果:血浆中内源性物质对盐酸小檗碱及青藤碱的测定无干扰;低检出限为1.25ng·mL-1;盐酸小檗碱在1.25～250ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,r=0.9990;绝对回收率为82.94%～88.36%,方法回收率为89.28%～92.29%;日内精密度RSD≤4.87%、日间精密度RSD≤7.03%.缓释胶囊和普通丸药动学参数AUC0∞分别为668.02和809.95 h·ng·ml-1,MRT分别为5.27和4.34h,缓释胶囊相对于普通丸的生物利用度为84.6%.结论:建立的测定方法处理简单,无干扰,灵敏度高,适合测定中药缓释制剂的药物动力学研究.万氏牛黄清心缓释胶囊具有明显的缓释作用,药物在体内呈梯度释放.
-
老年肺结核125例临床分析
目的:探讨老年肺结核的临床特点.方法:将2004～2006年登记342例肺结核中化疗结束的125例老年肺结核与同期青中年125例的临床特点进行对比分析.结果:老年肺结核男性患病率高于女性、合并症多、复治病例多、易出现肝损害、治疗效果差.结论:老年肺结核必须积极控制合并症、早期诊断及全程合理用药.
-
唇腭裂患儿七氟醚吸入诱导麻醉下行静脉穿刺的效果观察
目的:提高唇腭裂手术惠儿术前静脉穿刺一次成功率.方法:A、B两组唇腭裂惠儿各50例,A组于清醒状态下行静脉穿刺,B组在七氟醚吸入诱导后行静脉穿刺.结果:B组与A组相比,穿刺时间短,一次穿刺成功率高.结论:唇腭裂惠儿吸入七氟醚后再行静脉穿刺,可缩短穿刺时间,提高一次穿刺成功率为手术顺利完成提供有力保障.
-
网络环境下医学高校图书馆服务的特点
网络环境下,医学高校图书馆在资源构成、用户需求以及外部环境等方面都发生了很大变化.为适应形势,必须采取一系列新举措,才能保证高质量的读者服务.本文分析了网络环境下医学高校图书馆读者服务的特点,提出了加强高校图书馆信息资源共享的具体措施.
