药物分析杂志
Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药学会
- 影响因子： 1.03
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-1793
- 国内刊号： 11-2224/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
一测多评法同时测定注射用血栓通(冻干)中5个主要皂苷含量
目的:建立一测多评法(QAMS法),用于测定注射用血栓通(冻干)中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd 5种主要皂苷成分的含量.方法:先采用UPLC外标法测定三七皂苷R1的含量,再计算该成分与人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd的相对校正因子,并进行含量计算,通过方法学验证及各成分外标法含量测定结果比较,验证一测多评法的准确性;色谱条件:采用BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL· min-1,检测波长203 nm,样品室温度15℃,柱温40 ℃,进样量10 μL.结果:各相对校正因子系统适用性和重现性良好(RSD＜2％),采用外标法和一测多评法测定6个批次样品的含量(人参皂苷Rg1:42.52％→45.61％;人参皂苷Re:5.27％～5.79％;人参皂苷Rb1:23.87％～24.55％;人参皂苷Rd:1.14％～1.78％),经t检验分析,p＞0.05,表明没有显著性差异.结论:研究建立的一测多评法可用于注射用血栓通(冻干)中5种主要皂苷类成分的含量测定.
-
高效液相色谱法同时测定清肺抑火片中8个成分的含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定清肺抑火片中栀子苷、黄芩苷、小檗碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚8个有效成分的含量.方法:采用Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温30℃.结果:8个有效成分的线性范围:栀子苷,4.782～95.648 μg· mL-1(r=0.999 3);黄芩苷,1.449 ～28.988μg· mL-1(r=0.999 4);盐酸小檗碱,1.625～32.498 μg· mL-1(r=0.999 7);芦荟大黄素,0.982～19.650μg· mL-1(r=1.00 0);大黄酸,0.703～14.070 μg· mL-1(r=1.00 0);大黄素,0.535～10.710 μg· mL-1(r=1.000);大黄酚,0.945～18.900 μg· mL-1(r=1.000);大黄素甲醚,1.505 ～30.100 μg· mL-1(r=1.000).平均加样回收率(n=3)在98.8％～100.4％之间,RSD均在0.24％～ 1.3％.8个成分的含量分别为栀子苷,0.610～0.916mg·g-1;黄芩苷,0.249～0.374 mg·g-1;小檗碱(按盐酸小檗碱计),0.043～0.065 mg·g-1;芦荟大黄素,0.088～0.132 mg· g-1;大黄酸,0.147～0.221 mg·g-1;大黄素,0.089～0.133 mg·g-1;大黄酚,0.193～0.290mg·g-1;大黄素甲醚,0.046～0.070 mg·g-1.结论:该方法可用于清肺抑火片中主要8个有效成分的含量测定.
-
柱后衍生阳离子交换色谱法测定甘肃紫斑牡丹花粉氨基酸含量
目的:建立柱后衍生阳离子交换色谱方法,测定甘肃紫斑牡丹花粉氨基酸的含量.方法:样品加6 mol·L-1盐酸于110℃水解22 h.采用柱后衍生阳离子交换色谱法,对甘肃产紫斑牡丹花粉氨基酸的含量进行分析;色谱柱:LCAK06/Na型磺酸基强酸性阳离子交换树脂色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),梯度洗脱,其中A泵(溶液泵)流速为0.45 mL· min～1,M泵(茚三酮泵)流速为0.25 mL· min-1,检测波长为440 nm(脯氨酸)和570 nm(其余氨基酸),进样量为50 μL.结果:该测定方法中天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸的线性关系良好;精密度RSD范围为0.10％～ 1.6％,重复性RSD范围为0.20％～1.5％;平均回收率(n=6)在89.5％～98.2％之间,RSD在0.81％～2.9％之间.样品中所含氨基酸的范围为4.13～44.23 mg·g-1,破壁前后所测得氨基酸含量无显著差异.结论:所建立的分析方法可作为紫斑牡丹花粉中氨基酸的定量分析.
-
柱前衍生化RP-HPLC法对黄杨宁片原料中环维黄杨星D和杂质的定性定量研究
目的:建立黄杨宁片原料中环维黄杨星D准确定量和全面反映杂质色谱信息的分析方法.方法:选择可使主成分和所有杂质衍生化反应的试剂进行柱前衍生化反应,采用RP-HPLC法对衍生产物进行分析,C8柱分离,乙腈-0.01％甲酸水溶液(71∶29)洗脱,流速1 mL· min-1,检测波长230 nm,柱温25℃.结果:新建立的方法能使环维黄杨星D与有关生物碱的低分离度达1.5,检测到的12个杂质峰,其中9个可被定量.环维黄杨星D检测限为0.35 ng(RSD=2.2％,n=5),定量限为1.37ng(RSD=4.6％,n=5);平均回收率为102.4％,RSD为1.4％(n=6).来自4个厂家的10批样品中环维黄杨星D含量范围为78.28％～85.48％;9个杂质总合量范围为10.14％～15.57％.结论:该法既可使主成分与杂质完全分离,又可全面反映杂质色谱信息,能同时用于准确测定原料中主成分含量和杂质检查.
-
灵芝孢子油中7个脂肪酸的含量测定
目的:建立气相色谱法测定灵芝孢子油中7个脂肪酸(肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、油酸和亚油酸)含量的分析方法.方法:采用HP-FFAP(30 mm×0.32 mm×250 μm)色谱柱,程序升温的方式对灵芝孢子油中7个脂肪酸含量进行测定研究.结果:各脂肪酸线性关系良好,重复性RSD均在3.0％以下,加样回收率(n=9)在96.6％～103.3％之间;样品测定结果显示在灵芝孢子油脂肪酸中,不饱和的脂肪酸约占总量的76.41％,以油酸和亚油酸为主,饱和脂肪酸以棕榈酸和硬脂酸为主,约占总量的18.05％.结论:该方法可作为检测灵芝孢子油中7个脂肪酸的推广方法.
-
HPLC法测定山野豌豆与狭山野豌豆茎叶中5个黄酮苷的含量
目的:建立HPLC法测定山野豌豆与狭山野豌豆中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷及山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的含量,为山野豌豆与狭山野豌豆的质量控制提供依据.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1;紫外检测波长350 nm;柱温25℃;进样量10 μL.结果:金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的检测下限质量浓度分别为0.20、0.21、0.10、0.22、0.18 μg· mL-1,线性范围分别为15.12～756.00(r=0.999 9)、14.92～746.00(r=0.999 9)、10.46～523.00(r=0.999 9)、28.84～1442.00(r=0.999 9)、3.20～160.00(r=0.999 9)μg· mL-1,精密度试验RSD分别为0.21％、0.49％、0.31％、0.12％和0.11％.山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷平均回收率分别为102.3％、99.2％、98.9％、98.3％和99.5％,重复性试验的RSD分别为1.4％、1.9％、1.3％、1.7％和1.2％,稳定性试验的RSD分别为0.85％、0.62％、0.91％、0.25％和0.26％;山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷平均含量分别为0.166、0.080、0.762、0.600和0.192 mg·g-1.狭山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的平均回收率分别为101.9％、98.6％、100.1％、98.1％和99.8％,重复性试验的RSD分别为1.6％、2.1％、1.6％、2.1％和1.7％,稳定性试验的RSD分别为0.71％、0.87％、0.82％、0.15％和0.23％;狭山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷平均含量分别为0.735、0.919、0.526、1.312和0.173 mg·g-1.结论:该方法可用于检测狭山野豌豆与山野豌豆中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的质量浓度.
-
HPLC法同时测定漏芦花中6个成分的含量
目的:建立HPLC法测定蒙药漏芦花中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、木犀草素、芹菜素、5,7,4'-三羟基-3'-甲氧基黄酮、蜕皮甾酮和泥胡木脂素B葡萄糖苷的含量.方法:采用YMC-Pack C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0 μm),以乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温35℃,检测波长254 nm.结果:槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、木犀草素、芹菜素、5,7,4'-三羟基-3'-甲氧基黄酮、蜕皮甾酮和泥胡木脂素B葡萄糖苷6个成分的进样量分别在0.090～2.24 μg(r=1.000 0)、0.048～1.19 μg(r=0.999 8)、0.040～1.00 μg(r=0.999 9)、0.008～0.20 μg(r=0.999 8)、0.080～2.00 μg(r=1.000 0)、0.092～2.31 μg(r=1.000 0)范围内线性关系良好;平均回收率在99.2％～103.9％范围内,RSD范围为0.82％～2.9％.8批漏芦花样品中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、木犀草素、芹菜素、5,7,4'-三羟基-3'-甲氧基黄酮、蜕皮甾酮和泥胡木脂素B葡萄糖苷的含量范围分别为0.66％～1.26％、0.19％～0.60％、0.08％～0.24％、0.03％～0.05％、0.31％～0.99％、0.42％～2.26％.结论:该方法可以用于蒙药漏芦花中6个指标性成分的含量测定,为漏芦花药材的质量控制提供科学依据.
-
UPLC-MS/MS法分析3种蜂蜜及其蜜源花中的特征黄酮类组分
目的:分析柑橘、油菜和紫云英蜜中的特征黄酮类组分.方法:采用UPLC-MS/MS同时分析油菜蜜、紫云英蜜和柑橘蜜及其蜜源花中的黄酮类组分.色谱柱采用Inertsil ODS-3柱(2.1 mm×75 mm,2μm),柱温40℃,以甲醇-0.02％甲酸为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL· min-1;以儿茶酸、表儿茶酸、芦丁、芸香柚皮苷、桑黄素、杨梅素、山柰酚、生松素等16个黄酮类对照品作为对照,采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)进行分析.结果:不同蜜源蜂蜜中的特征黄酮类组分及其含量(从高到低排列)有所不同:柑橘蜜的特征组分有柚皮素、木犀草素、芹菜素和汉黄芩素;油菜花蜜的特征组分有柚皮素、槲皮素和汉黄芩素;紫云英蜜的特征组分有槲皮素、山柰酚、芹菜素和汉黄芩素.结论:该方法灵敏度高,以蜜源花作为“对照”寻找蜂蜜中的特征成分具有数据可靠、可溯源性,并对蜜源花中化学成分的分析具有指导意义.
-
HPLC法同时测定九苷肽蛹虫草软胶囊中还原型及氧化型谷胱甘肽含量
目的:建立HPLC-SPD法同时测定九苷肽蛹虫草软胶囊中还原型和氧化型谷胱甘肽的含量.方法:以流动相为提取溶剂对样品进行超声提取;选用Atlantis T3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.1％三氟乙酸-乙腈(95∶5)为流动相,流速1.0 mL· min-1,紫外检测波长203 nm,柱温35℃.结果:样品中还原型和氧化型谷胱甘肽在8 min内得到很好的分离;质量浓度分别在50.4～504 μg· mL-1(r=0.999 7)和6.2～62 μg· mL-1(r=0.999 4)线性良好;检测限分别为0.44和0.12 mg· g-1;平均回收率(n=9)分别为97.5％和93.4％;3批样品中还原型和氧化型谷胱甘肽含量分别是70.2、70.5、70.1 mg·g-1和1.3、1.4、1.3 mg·g-1,其含氧化型谷胱甘肽均小于谷胱甘肽总量的2.0％.结论:本方法能够满足日常分析检测的需要,为含谷胱甘肽保健食品的质量控制提供科学依据.
-
HPLC同步测定咳喘平散中4个成分的含量
目的:建立HPLC法同时测定咳喘平散中芥子碱硫氰酸盐、细辛脂素、五味子甲素、五味子乙素含量.方法:采用C18(4.6 mm× 250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.08 mol· L-1磷酸二氢钠水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长为286 nm(芥子碱硫氰酸盐、细辛脂素)、220 nm(五味子甲素、五味子乙素).结果:芥子碱硫氰酸盐、细辛脂素、五味子甲素、五味子乙素线性范围为0.238～1.789、0.061～0.457、0.071～0.533和0.069～0.521 μg;平均回收率为98.7％～101.8％,RSD为1.6％～ 1.8％.3批样品中芥子碱硫氰酸盐、细辛脂素、五味子甲素和五味子乙素4个成分的含量分别为1.508～1.566、0.470～0.497、0.398～0.420、0.470～0.553 mg·g-1.结论:本法可为咳喘平散及其类似组方制剂的质量评价提供研究基础.
-
HPLC-MS法同时测定健脾益肾丸中8个成分的含量
目的:建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定健脾益肾丸中8个主要成分(丹参素钠、丹酚酸B、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、黄芪甲苷、芒柄花素)的含量.方法:采用ZORBAX C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-10 mmol· L-1乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～1.2 min,5％A;1.2～2 min,5％A→20％A;2～4 min,20％A→40％A;4～8 min,40％A;8～10 min,40％A→÷95％A;10～17 min,95％A;17～25 min,5％A),流速为0.8 mL· min-1,进样量为5 μL;采用电喷雾离子源(ESI),SIM模式,正负离子同时检测方式.结果:丹参素钠、丹酚酸B、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、黄芪甲苷和芒柄花素检测的线性范围分别为0.04～2.5 μg· mL-1(r=0.999 7)、0.035～1.0 μg· mL-1(r=0.999 5)、0.15～20 μg· mL-1(r=0.999 2)、0.04～20 μg· mL-1(r=0.999 8)、0.004～2.0 μg· mL-1(r=0.999 9)、0.06～2.0 μg· mL-1(r=0.999 4)、0.035～2.5 μg· mL-1(r=0.999 8)和0.006～0.2(r=0.999 5)μg·mE-1;精密度、稳定性、重复性试验的RSD小于3％;平均回收率(n=6)均在97.0％～102％范围内,RSD均小于3％.3批样品中丹参素钠、丹酚酸B、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、黄芪甲苷和芒柄花素含量测定结果分别为0.490～0.500、1.792～1.812、0.505～0.511、0.680～0.684、0.609～0.615、0.100～0.110、0.056～0.057和0.020～0.022 mg·g-1.结论:所建立可作为健脾益肾丸的质量控制提供依据.
-
HPLC-ELSD同时测定猴头菌丝固体培养物及胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇的含量
目的:建立HPLC-ELSD同时测定猴头菌丝固体培养物及胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇含量方法.方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),以甲醇为流动相,流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测器为ELSD,漂移管温度70℃,载气压力275.8 kPa.结果:麦角甾醇和β-谷甾醇峰面积的对数与浓度的对数呈良好的线性关系(r＞0.999 2),猴头菌丝固体培养物中麦角甾醇和β-谷甾醇平均回收率分别为92.6％和94.1％;胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇平均加样回收率分别为103.0％和94.6％.10批猴头菌丝固体培养物中麦角甾醇和β-谷甾醇的含量分别为0.081～0.178和0.101～0.128 mg·g-1;10批胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇的含量分别为0～0.252和0～0.380 mg·g-1.结论:该方法可用于猴头菌丝固体培养物及胃乐宁片质量控制.
-
银杏叶提取物HPLC指纹图谱研究及共有峰的LC-MS鉴定
目的:建立银杏叶提取物的HPLC指纹图谱,为银杏叶提取物掺假鉴别提供依据.方法:采用HPLC梯度洗脱建立银杏叶提取物的指纹图谱,以0.1％甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～40 min,10％B→36％B;40～45 min,36％B→50％B;45～50 min,50％B→100％B;50～55 min,100％B;55～56 min,100％B→÷10％B;56～65 min,10％B),流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温30℃.并运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对不同批次的银杏叶提取物进行相似度评价;采用LC-MS方法对共有峰进行鉴定.结果:建立了银杏叶提取物的特征指纹图谱,标定了20个共有峰,并结合LC-MS分析,确定了10个峰对应的化合物,分别为6-羟基犬尿喹啉酸、3,4-二羟基苯甲酸、芦丁、异槲皮素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素3-O-芸香糖苷、槲皮苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素.疑似掺假提取物的色谱图与对照指纹图谱相比芦丁(峰6)响应低,而槲皮素(峰18)、山柰酚(峰19)、异鼠李素(峰20)响应值高,两者差异极大.结论:本文建立的银杏叶提取物指纹图谱对银杏叶提取物掺假评判具有指导意义.
-
银杏叶提取物及其制剂质量监督专项工作中的风险控制
目的:介绍银杏叶提取物及其制剂质量监督的专项治理行动中成功运用的风险控制体系,以推进在全系统中的应用.方法:采用高效液相色谱法,使用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.4％磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,建立了银杏叶提取物及其制剂的指纹图谱;并就风险控制体系的几个方面进行介绍,包括风险分析、风险交流及风险管理等在银杏叶提取物专项治理工作中的作用的详细论述.结果:通过比较银杏叶提取物及其制剂指纹图谱的异同,发现银杏叶药品存在的系统性风险,通过风险分析,发现补充检验方法可能存在的风险点并对风险进行控制.风险管理和风险交流贯穿于银杏叶药品专项治理工作的始终.结论:银杏叶提取物及其制剂质量监督专项工作中成功运用了风险控制,通过风险分析、风险管理及风险交流,使得银杏叶药品专项治理工作得以完成.
-
HPLC法测定罗氟司特的有关物质
目的:建立罗氟司特有关物质测定的HPLC方法.方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱,以0.01 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(磷酸调节pH至3.5±0.1)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速0.5 mL· min-1,柱温为25℃,检测波长为215 nm,对有关物质进行定性、定量分析.结果:罗氟司特和相邻杂质以及各杂质之间的分离度均大于1.5;3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸(杂质A)、4-氨基-3,5-二氯吡啶(杂质B)、3-(环丙基甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-羟基苯甲酰胺(杂质C)、3-羟基-Ⅳ-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺(杂质D)、3,4-二羟基-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)苯甲酰胺(杂质E)、3-(环丙基甲氧基)-N-(吡啶-4-基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺(杂质F)、3-(环丙基甲氧基)-N-(3-氯吡啶-4-基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺(杂质G)、3-(二氟甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-(环丙基甲氧基)苯甲酰胺(杂质H)、3,4-二(环丙基甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)苯甲酰胺(杂质I)、3,4-二(二氟甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)苯甲酰胺(杂质J)和罗氟司特氮氧化物(杂质K)在各自的线性范围内线性关系良好(r＞0.999 0,n=5),相对校正因子分别为1.14、1.00、1.17、0.96、0.70、1.76、1.08、1.37、1.14、1.65和1.22,检测限分别为0.1、0.03、0.1、0.1、0.1、0.03、0.1、0.1、0.1、0.1和0.1 ng;定量限分别为0.3、0.1、0.3、0.2、0.2、0.1、0.2、0.2、0.2、0.3和0.3 ng,低、中、高3种浓度的平均回收率(n=9)分别为102.9％、100.0％、107.6％、107.5％、98.1％、99.9％、98.3％、97.6％、86.9％、100.0％和98.7％.5批样品有关物质测定结果显示,各已知杂质的含量均低于0.1％,其他大单个杂质的含量均低于0.1％,杂质总量均低于0.5％.结论:本方法可用于罗氟司特的有关物质测定.
-
高效液相色谱法拆分阿雷地平对映异构体
目的:建立阿雷地平对映异构体高效液相色谱手性拆分方法,用于S构型阿雷地平光学纯度的分析测定.方法:采用硅胶表面涂敷有纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)填料(Chiralcel OJ-H)为固定相,以正己烷-乙醇(75∶25)为流动相,流速1.0 mL· min-1,检测波长238 nm,柱温35 ℃.结果:S-阿雷地平与R-阿雷地平之间的分离度为3.5;R-阿雷地平质量浓度在0.04～2.0 μg· mL-1范围内线性关系良好,线性方程为A=61 971C-0.321 4,r=0.999 9;R-阿雷地平的定量限和检测限分别为0.8 ng和0.3 ng;低、中、高3个浓度的R-阿雷地平回收率(n=3)分别为97.5％、98.5％、99.8％,RSD(n=9)为1.5％;供试品溶液在避光条件下室温放置12 h内稳定性良好.经检测,S-阿雷地平中R-阿雷地平的含量为0.08％.结论:所建立的方法经方法验证可用于分离和测定S-阿雷地平中的R-阿雷地平.
-
酒石酸唑吡坦片中杂质的色谱-质谱结构鉴定
目的:采用LC-MS对酒石酸唑吡坦片中的杂质进行结构鉴定.方法:通过酸、碱、高温、氧化和光照对酒石酸唑吡坦片中的杂质进行富集,采用液相色谱-超高分辨飞行时间质谱对未知杂质进行鉴定,色谱柱为C18(2.1 mm×100mm,1.9 μm),流动相为10 mmol· L-1乙酸铵溶液-甲醇-乙腈(53∶23∶ 18),采用ESI正离子模式进行质谱扫描.结果:结合酒石酸唑吡坦的处方工艺初步推测了6个杂质的化学结构.杂质1∶4-(二甲胺基)-3-(6-甲基-2-对甲苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-4-氧代丁酸;杂质4:Ⅳ-甲基-2-(6-甲基-2-对甲苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰胺;杂质5∶2-羟基-N,Ⅳ-二甲基-2-(6-甲基-2-对甲苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰胺;杂质6∶N,Ⅳ-二甲基-2-(6-甲基-2-对甲苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺;杂质7∶N,Ⅳ-二甲基-2-(6-甲基-2-对甲苯基-2,3-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰胺;杂质8∶6-甲基-2-对甲苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲醛.它们都具有6-甲基-2-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶的母核.结论:超高分辨飞行时间质谱技术能够有效地用于药物中杂质的鉴定,酒石酸唑吡坦杂质研究可为其质量控制和工艺优化提供参考依据.
-
钴60辐照对柴胡药材有效成分的影响研究
目的:建立柴胡药材活性成分含量的HPLC测定方法,考察钴60射线辐照前后活性成分含量的变化.方法:采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1％磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温30℃.分别选择剂量为5、8、10 kGy对柴胡药材进行辐照,比较辐照前后活性成分含量的变化,并进行成组t检验考察其显著情况.结果:柴胡皂苷a、c、d质量浓度分别在0.020～0.806、0.022～0.893及0.025～1.003 mg· mL-1范围内有良好线性,平均加样回收率分别为99.4％、98.7％和99.8％;未经辐照的6批柴胡药材中柴胡皂苷a、c、d含量范围分别为3.023～3.245、1.034～1.341和5.023～5.298 mg·g-1;经10 kGy辐照后,上述3个成分的含量范围分别为2.975～3.226、0.823～0.978和4.963～5.136 mg· g-1;经过5、8、10 kGy辐照后,柴胡药材所含的成分柴胡皂苷a、c、d均有变化,经成组t-检验,在超过5 kGy后,柴胡皂苷c辐照前后含量变化显著(P＜0.01).结论:所建立的柴胡活性成分测定方法可作为柴胡质控方法.在辐照剂量不超过5 kGy时,各成分变化不显著,可为柴胡药材辐照灭菌手段提供参考.
-
紫外分光光度法用于青霉素酶活力测定的研究
目的:建立紫外分光光度法测定青霉素酶活力,并研究中国药典青霉素酶活力单位与国际单位之间的关系.方法:利用青霉素与青霉噻唑酸在232 nm处的吸光系数不同,分别在30℃和37℃下,于232 nm处用紫外分光光度计监控青霉素酶与一定量青霉素的反应过程,通过反应时间计算青霉素酶的活力;同时用中国药典的碘量法进行测定.结果:本文所用的紫外分光光度法测定结果与中国药典规定的碘量法相比无显著性差异(P=0.302＞0.05).中国药典青霉素酶活力单位(U)与国际单位(IU)的换算关系为:1 U=4.4×107 IU+2.6×105.结论:紫外分光光度法测定青霉素酶活力方法重复性好,操作简单,快速.建立的中国药典青霉素酶活力单位与国际单位之间的关系使两者具有可比性.
-
木香顺气丸HPLC特征指纹图谱研究及多成分含量测定
目的:建立木香顺气丸的指纹图谱,并进行多成分定量分析,为评价其质量提供依据.方法:采用SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-乙腈(B)-0.2％磷酸水溶液(C)为流动相,梯 度洗脱(0～5 min,10％A,10％B;5～20 min,10％A→20％A,10％B-÷20％B;20～40 min,20％A-÷50％A,20％B→10％B;40～60 min,50％A,10％B),流速1.0 mL· min-1,检测波长225 nm,柱温35℃.通过相似度评价结合聚类分析对15批次木香顺气丸指纹图谱进行质量评价,并对指认的5个指标成分进行定量测定研究.结果:在特征图谱研究中,共确定木香顺气丸HPLC指纹图谱8个共有峰,通过与对照品比较指认其中5个共有峰分别为木香烃内酯、去氢木香内酯、和厚朴酚、厚朴酚和甘草酸,利用相似度软件对15批样品指纹图谱进行分析,各批样品相似度均在0.90以上.木香烃内酯、去氢木香内酯、和厚朴酚、厚朴酚和甘草酸进样量分别在0.067～2.688、0.057～2.264、0.033～1.304、0.032～1.264和0.067～2.688 μg范围内线性关系良好,r均大于0.998 0;平均加样回收率为98.6％～99.6％,RSD在1.0％～1.9％.15批样品中木香烃内酯、去氢木香内酯、和厚朴酚、厚朴酚和甘草酸含量范围分别为3.93～8.15、0.52～9.73、8.00～13.67、2.21～5.96、1.99～5.01 mg·g-1.通过聚类分析,15批样品聚成三类.结论:所建立的木香顺气丸HPLC指纹图谱和含量测定分析方法可用于木香顺气丸的质量控制.
-
重组人促红素理化对照品的质量评价
目的:建立重组人促红细胞生成素的理化对照品的质量标准,对8家企业的促红素理化对照品进行质量评价.方法:用正常小鼠网织红细胞计数法测定体内生物学活性,使用LC-MS绘制质量肽图谱.色谱条件:采用BEH300 C4色谱柱(2.1 mm×50mm,3.5 μm),流动相为水(A)-乙腈(B)-1％甲酸水溶液(C),梯度洗脱(0～60 min,1％B→60％B,10％C;60～61 min,60％B→90％B,10％C;61～75 min,90％B→÷1％B,10％C),流速0.2 mL· min-1,柱温为40℃,样品保存温度为10℃,上样量5 μL;质谱条件:MSE模式采集数据,毛细管电压3 000 V,Cone电压40 V,去溶剂气体温度350℃,源温120℃,去溶剂气体流速800 L· h-1,扫描范围m/z 50～2 000.确证一级结构,二硫键链接方式及糖基化位点;绘制N糖图谱,分析寡糖结构;用毛细管区带电泳分析异构体.采用压力进样3.45 kPa;进样时间10 s,分离电压15.4 kV,分离时间80 ain,检测波长214 nm.其余检测项目按中国药典2015年版三部方法进行.结果:建立的方法适合促红素理化对照品的检测,各样品的氨基酸序列均与理论一致;二硫键连接方式均为Cys7-Cys161、Cys29-Cys33;O-糖基化位点均为Ser126,Ⅳ-糖基化位点均为Asn24、Asn38、Asn83;各样品的糖基修饰方式存在差异,不同糖型的相对比例不一致.等电聚焦结果为5～8条电荷异构体条带,不同样品的电荷异构体的组成比例有所差异,蛋白质含量、体内比活性、电泳纯度、液相纯度、等电聚焦、唾液酸含量、N端氨基酸序列、肽图结果均符合拟定的理化对照品质量标准.结论:建立了理化对照品的质量标准,不同企业的理化对照品质量总体稳定一致,但糖基化水平存在一定差异,分析比较了不同企业的促红素理化对照品在生物比活性,糖基化,异构体分布、电荷异质性等方面的差异.
-
LC-MS/MS测定左旋奥拉西坦及其在SD大鼠生殖毒性中体内组织分布检测
目的:建立一种左旋奥拉西坦的LC-MS/MS检测方法,用以SD大鼠生殖毒性毒代动力学中体内组织分布检测,以评价该药物是否通过胎盘屏障,为新药安全性评价提供依据.方法:液相色谱分离采用XTerraMS C18(2.1 mm×100 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(35∶65)为流动相,流速0.2 mL· min-1;质谱检测采用ESI离子源,正离子MRM方式检测.将16只SD孕鼠随机分成溶媒对照组(0.9％氯化钠注射液)和低(400 mg· kg-1)、中(800 mg· kg-1)、高(1 600 mg· kg-1)3个给药剂量组.各给药组于妊娠第6天至第20天(GD 6～GD 20)尾静脉注射给药,每日给药1次.GD 20给药5 min后眼球静脉取血,剖宫,取出仔鼠,解剖,分离母鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胎盘、羊水组织,取胎鼠心脏、肝脏和肺组织,匀浆处理,-20℃保存待测.运用LC-MS/MS测定左旋奥拉西坦在母鼠和胎鼠各组织中药物浓度.结果:方法学研究显示,该药物在20～5 000 ng· mL-1(r值均＞0.99)范围内线性良好,定量下限为20 ng· mL-1,准确度为100.6％～ 114.8％(n=5),日内和日间精密度RSD＜6.6％(n=5),稳定性RSD值＜6.9％(n=5),回收率为89.8％～107.5％(n=5),符合方法学要求.其体内组织分布研究表明,母鼠体内分布广泛,在肝脏和肾脏组织中分布较高,少量进入脑.各组织中含量随给药剂量的增加而增加.各组胎鼠心脏、肝脏和肺检测到少量,但均低于母体胎盘的含量.结论:本文建立的左旋奥拉西坦生物样本分析方法可用于左旋奥拉西坦体内分析;左旋奥拉西坦生殖毒性毒代动力学研究表明,其在作为促智药可透过血脑屏障的同时,也可透过SD大鼠的胎盘屏障.
-
液相色谱-串联质谱法同时测定血清中5个三唑类抗真菌药物浓度及其治疗药物监测应用
目的:建立同时测定血清中5个三唑类抗真菌药物(氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、羟基伊曲康唑、泊沙康唑)浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,并应用于临床三唑类抗真菌药物的治疗监测.方法:50μL血清样品加入同位素内标,采用乙腈直接沉淀法处理样品后稀释进样分析.采用XSELECTTMCSHTM C18(2.1 mm×100 mm,3.5 μm)色谱柱进行色谱分离,流动相为0.1％甲酸10 mmol·L-1乙酸铵水溶液-0.1％甲酸乙腈水溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1,进样量5μL,色谱分析时间5.5 min;采用电喷雾离子源,反应监测模式,正离子扫描进行测定.结果:5个三唑类抗真菌化合物的线性范围为0.02～20μg·mL-1,线性相关系数均大于0.998 6,各浓度的批内和批间相对标准差(RSD) ＜10.6％,提取回收率为80.5％～98.4％,方法准确度为87.4％～111.0％,收集临床ICU和血液科严重侵袭性真菌病20例接受伏立康唑治疗的患者,伏立康唑的血药浓度0.24～4.06 μg·mL-1,个体间差异较大.结论:本方法同时定量检测5个三唑类抗真菌药物的血药浓度,可应用于临床治疗药物监测.
-
HILIC-MS/MS法测定人尿中内源性糖类化合物浓度
目的:利用亲水色谱-质谱联用技术对人尿中15个内源性糖类化合物进行快速测定.方法:分别对色谱条件、质谱条件和样品前处理方法进行优化,终以含内标的甲醇-乙腈(50∶50,v/v)为沉淀剂,按体积比5∶1加入到尿液中除杂,以含10 mmol·L-1醋酸铵的水-乙腈(95∶5,v/v)和含10 mmol·L-1醋酸铵的乙腈-水(95∶5,v/v)为流动相,梯度洗脱,样品经ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1 mm× 100 mm,1.7μm)色谱柱分离,在多反应监测(MRM)模式下,采用电喷雾离子化源、负离子扫描模式进行定量分析.结果:人尿中糖类物质线性关系良好,大部分糖类物质r＞0.99,低检测限在0.075～30 nmol·L-1之间;日内、日间精密度范围分别为2.5％～7.6％和3.3％～7.3％,均小于15％;回收率范围为85.5％～ 115％;大部分化合物的基质效应在80％～ 120％之内,样品上清液4 ℃稳定性好,72 h内浓度变化范围为93.1％～106％,终测得20例健康人尿液中各糖的含量分别为(平均值±标准误差):楝二糖(2 668.1±134.4) nmol·L-1,蔗糖(5 070.6±277.6) nmol· L-1,麦芽糖(15 214.5±442.5)nmol· L-1,麦芽三糖(849.7±42.6)nmol· L-1,葡萄糖(173 965.0±4 918.9) nmol· L-1,果糖(22 172.5±1 463.6) nmol· L-1,棉子糖(292.1±17.6) nmol·L-1,肌苷(2 083.5±93.4) nmol·L-1,腺苷(2 645.5±78.2) nmol·L-1,甘露糖醇(83 925.0±3 938.6) nmol·L-1,赤藓糖醇(375 805.0±12 094.6) nmol· L-1,阿拉伯糖醇(192 921.1±5 689.2) nmol·L-1,麦芽四糖、木糖和核糖均低于定量限(分别低于60、600和3 000 nmol·L-1).结论:该方法能快速测定人尿液中15个内源性糖类化合物含量,对代谢组学后期的靶标验证、代谢机理研究等具有重要意义.
-
基于经皮给药途径研究白芍对制川乌6个酯型生物碱组织分布的影响
目的:探讨制川乌配伍白芍经皮给药对制川乌中6个酯型生物碱组织分布的影响.方法:SD大鼠随机分为2组,分别经皮给予制川乌-白芍凝胶及制川乌凝胶,连续5d,末次给药后4、8、20 h采集大鼠皮肤、脑、心、肺、肝、脾、肾等组织,以溶剂萃取法对样品进行提取,应用LC-MS/MS方法对组织中6个酯型生物碱乌头碱(AT)、次乌头碱(HT)、新乌头碱(MT)、苯甲酰乌头原碱(BA)、苯甲酰次乌头原碱(BH)、苯甲酰新乌头原碱(BM)的含量进行测定.采用spss统计软件对各组织中药量进行t检验,比较配伍前后6个酯型生物碱在各组织中分布的变化情况.应用主成分分析法(principal component analysis,PCA)、偏小二乘判别法(partial least quares discriminant analysis,PLS-DA)分析配伍对6个酯型生物碱在皮肤及毒靶器官心脏、脑组织中分布的影响.结果:大鼠多次经皮给予制川乌凝胶后,6个酯型生物碱分布较广,主要分布在皮肤,其次为肝、脾、肺、肾,而在脑、心脏组织中的含量较低;配伍后单酯型生物碱苯甲酰新乌头原碱(BM)、苯甲酰乌头原碱(BA)在皮肤组织中的分布显著增加,而3个单酯型生物碱苯甲酰新乌头原碱(BM)、苯甲酰乌头原碱(BA)、苯甲酰次乌头原碱(BH)在心脏和脑组织的分布明显减少;同时双酯型生物碱新乌头碱(MT)、次乌头碱(HT)、乌头碱(AT)在各组织中的分布均呈下降趋势;基于皮肤、心脏、脑组织中6个酯型生物碱的分布规律,利用PCA统计方法可将实验组分为单用组与配伍组;PLS-DA法分析显示,白芍对制川乌中6种酯型生物碱在皮肤、心脏、脑组织中分布的影响由大到小的顺序分别为HT、AT、MT、BM、BH、BA,MT、AT、BA、BH、BM、HT,AT、BH、BA、HT、MT、BM.结论:制川乌配伍白芍经皮给药,可促进部分单酯型生物碱在皮肤中的分布与吸收,同时减少6个酯型生物碱在心脏、脑等毒靶器官的分布,从而发挥“增效减毒”的作用.
-
液相色谱-酶亲和检测联用技术研究进展
液相色谱-酶亲和检测(high performance liquid chromatography-enzyme affinity detection,HPLC-EAD)联用技术是近年来逐渐建立的,根据酶对具有某一相同立体结构的底物具有亲和性,进而出现竞争性抑制现象的原理,用于筛选复杂体系中对某种酶具有亲和性的底物的一种新技术.本文调研了与该联用技术相关的大量文献,并从该技术的概述、应用和展望这3个方面进行综述.经过分析与总结发现这种技术虽然起步较晚,但是发展迅速,目前多用于药物代谢酶的抑制剂,中药活性成分的筛选和药物筛选.细胞色素P450酶、黄嘌呤氧化酶、α-葡萄糖苷酶等生物酶都在人体内发挥着十分重要的作用,通过筛选能够与这些酶高效结合的底物,进而研究其具体结合模型以及在体内的作用机制,是药物研发的重要手段.由于酶亲和技术本身存在的一些还未解决的缺陷,比如安全性与有效性、渗漏与变性、成本较高的问题,因而在一定程度上限制了它的发展与大规模应用.但是由于它的亲和特性,这一技术仍然在体内重要的代谢酶抑制剂的筛选、复方中药产生临床疗效的主要活性成分群的筛选等方面具有重要的理论意义和应用价值.
-
色谱柱表征体系在选择佳反相色谱柱中的应用
反相高效液相色谱法是目前药物分析中常用的分析技术.不同色谱柱选择性的差异,常导致溶质的保留值、色谱峰分离度甚至色谱峰顺序出现较大差异.因此,寻找到性能适宜的色谱柱关系到整个色谱实验的成败.利用色谱柱参数寻找选择性相似或者互补色谱柱指导实际分离工作,推动了色谱柱选择模式的发展.本文综述了近年来基于疏水消除模型的色谱柱表征体系在色谱柱选择中应用的进展,主要包括选择相似或互补的色谱柱,选择佳分离色谱柱,选择UHPLC色谱柱,并对目前各选择方式的局限性进行了讨论.
-
SD大鼠连续灌胃给药对碱性彗星电泳和骨髓微核的影响
目的:开展SD大鼠3天重复经口灌胃给药毒性实验,联合肝、肾和外周血碱性彗星电泳试验和骨髓微核试验,并对遗传毒性试验常用的溶媒及阳性化合物进行检测和比较.通过对比相同实验条件下开展的以染色体损伤和DNA断裂为检测终点的组合遗传毒性试验结果,为给药和取材时间点以及阳性剂的选择提供参考依据.方法:雄性SD大鼠随机分为去离子水组、0.9％氯化钠注射液组、玉米油组、环磷酰胺(CPA) 10mg· kg-1组、环磷酰胺(CPA) 40 mg·kg-1组、Ⅳ-乙基-N-亚硝基脲(ENU) 40 mg· kg-1组和甲磺酸乙酯(EMS) 200mg·kg-1组,每组5只.连续3d灌胃给药,实验期间记录动物临床症状和体重变化.末次给药后3h处死大鼠.称量肝、肾脏器重量,并收集肝、肾及外周血制备单细胞悬液开展多脏器碱性彗星试验.样本制片后分别经裂解、解旋、电泳、染色等步骤,使用Komet 6.0软件进行图像分析;取材同时收集骨髓细胞制作涂片,计数2 000个嗜多染红细胞(PCE)的含微核细胞发生率.结果:1)CPA、ENU和EMS均未对动物整体产生严重的毒性作用.2)只有EMS组的肝细胞、肾细胞和淋巴细胞的刺猬细胞百分率明显升高,CPA及ENU对刺猬细胞百分率无明显影响.ENU组在3种组织的彗尾DNA含量百分率及Ohve尾矩与溶媒对照组比较为弱致DNA断裂作用;而EMS则在3种组织中均显示了强致DNA断裂作用.3)CPA作为经典的骨髓微核试验阳性剂,其微核结果显示了一定的剂量相关性;ENU的致微核作用相对较弱.结论:将多脏器彗星试验与微核试验与3天重复给药毒性实验整合是可行的;实验流程的标准化、阳性剂的选择及实验设计等需根据具体情况来设计.
-
白色念珠菌TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测及抗真菌药物敏感性分析
目的:建立TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应方法,快速定量检定临床标本中的白色念珠菌并进行抗真菌药物敏感性分析.方法:针对白色念珠菌内转录间隔区和26S核糖体核糖核酸基因设计特异性引物和探针,构建含有上述基因的标准质粒进行定量分析,建立TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,评价其特异性、灵敏度、重复性和稳定性.对1 185份临床标本中的白色念珠菌进行检测,同时进行真菌培养、普通PCR、基因克隆和测序鉴定.对所有真菌分离株进行抗真菌药物敏感性试验.结果:研究结果显示,建立的白色念珠菌TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法专属性强,能准确检出白色念珠菌,而与其他念珠菌属真菌、非念珠菌属真菌、细菌、寄生虫和病毒均无交叉反应,特异性为100％.该技术灵敏度高,能精确定量检测白色念珠菌DNA线性范围达11个数量级,白色念珠菌低检测限度为5个菌落形成单位.该方法重复性非常好,组内和组间相对标准偏差均小于2％.测试中相关系数、斜率和效率没有显著变化,表明该方法稳定性好,精密度高.将其成功应用于临床标本中白色念珠菌载量的定量检测,用普通PCR和基因克隆测序分析进行了确证.整个检测过程可在2h内完成,可以用作定量分析快速诊断方法.应用TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应从1185份临床标本中检出94份白色念珠菌阳性标本,真菌培养获得8株存活的白色念珠菌,抗真菌药物敏感性试验分析结果显示:这些白色念珠菌分离株对制霉菌素、咪康唑、克霉唑、益康唑、氟康唑、沃尔康唑均敏感,但对两性霉素B、酮康唑、特比萘芬、氟胞嘧啶已经产生了耐药性.结论:本研究新开发评价的TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应,可以快速简易,精准稳定,特异灵敏地定量检定白色念珠菌,适用于动物源性产品中白色念珠菌检测、食品药品生物制品医疗器械安全检查、环境监测、流行病学调查.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1997 | 05 |
