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两种结核DNA疫苗的免疫原性和保护效力
MPT64和ESAT6都是结核分支杆菌复合群主要的分泌性蛋白,也是其重要的T细胞抗原,ESAT6编码基因在BCG菌株中缺失[1],而MPT64编码基因在某些BCG菌株中也缺失[2].因此,本研究将结核分支杆菌MPT64和ESAT6 DNA疫苗免疫小鼠后,观察小鼠的体液和细胞免疫应答,并通过脏器的菌落计数评价这两种DNA疫苗的保护效力,以筛选有效的结核病DNA疫苗.
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链球菌M6蛋白的纯化及其在银屑病患者血清检测中的应用
为了进一步研究A群化脓性链球菌M6蛋白和点滴型银屑病之间的关系,我们对银屑病患者咽部菌群进行分离培养[1]并对培养分离的链球菌中的M6蛋白基因进行检测[2],对检测具有M6蛋白的化脓链球菌菌株再进行增殖培养,然后采用分子筛和阴离子交换层析的方法对链球菌菌体中的M6蛋白进行纯化,现将结果报道如下:
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空肠弯曲菌flaA-PCR-RFLP分子检测技术的初步应用
空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是导致细菌性肠炎的常见病原菌[1],作为食源性病原菌,主要是由于食用了被污染的食物、水等而感染,建立快速、准确的分子亚分型方法对于追踪污染来源和监控暴发流行具有重要意义.PCR-RFLP(PCR re-striction fragment length polymorphism)是针对单基因的一种亚分型方法,能够在短时间内对大量菌株进行调查研究,不需要特殊设备,普通临床实验室即可开展,已被应用于多种人兽共患病原菌的流行病学监测和溯源性分析[1].
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2株产KPC-2型碳青霉烯酶肠聚集性大肠埃希菌的分离
肠聚集性大肠埃希菌( EAEC)可引起成人和儿童的持续性水样腹泻。多重耐药的EAEC菌株在多个国家和地区均有报道,国内尚未见相关报道。本研究首次报道重症监护病房中分离到2株对碳青霉烯类抗生素耐药的EAEC菌株。
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cagA和cagM在中国人群感染幽门螺杆菌中的检测
cag致病岛(cag pathogenicity island)为新近在cagA表达阳性的幽门螺杆菌(Hp)菌株中发现的又一致病相关的基因群,其编码蛋白被认为是毒素及毒素转运机能相关的分泌系统.cag致病岛被认为是由水平转移的方式来源于质粒或噬菌体,具有部分或全部丢失等不稳定性表现.
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应用AFLP方法对我国土拉弗菌基因分型的研究
土拉菌病又称"野兔热",是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病,呈世界性分布.其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌,包括4种基因型.由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异,基因分型研究一直是该领域的研究热点,而近年来随着16S rRNA的序列分析、随机引物扩增多态性(RAPD)、限制性片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)等分子生物学方法在细菌分型中的应用,世界范围内许多地区的土拉弗菌株得到了很好的基因型鉴别,也对一些传统认识提出了新的质疑,如欧亚地区是否也存在致病性较强的A型菌株?事实上在1998年科学家们证实了这一疑问[1].
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第三相蛋白分离结合水平双相凝胶电泳对福赛类杆菌蛋白分离影响的研究
福赛类杆菌菌株(Bacteroides forsythus ATCC43037)在以TSB为基础培养基中加入酵母提取物,氯化血红素,维生素K3,DTT及NAM,37℃厌氧(80% N2,10% H2,10% CO2)培养7 d,超声波破碎细胞,然后用ReadyPrep TM Sequential Extraction试剂盒按说明书对超声破碎细菌全细胞蛋白进行分步系列提取.
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临床常见产AmpC β-内酰胺酶菌株中染色质ampD基因的测定与分析
AmpC β-内酰胺酶(简称AmpC酶)的产生由其产酶基因所控制.细菌染色质上AmpC酶的基因包括结构基因ampC和多种调控基因ampR、ampD和ampG等.
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40株MRSA菌消毒剂及抗菌药物耐药基因研究
近年国外学者从金黄色葡萄球菌中检出耐消毒剂的菌株.为了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐消毒剂和抗菌药物耐药基因状况,我们收集了2003年12月~2004年5月苏州大学医学院附属第三医院分离到的20株MRSA菌和解放军98医院分离到的20株MRSA菌,共40株.对其进行了耐消毒剂基因(qacA)和β内酰胺类耐药相关基因(mecA、TEM)、氨基糖苷类耐药相关基因[aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、ant(6)-Ⅰ]、四环素耐药相关基因(tetM)、红霉素耐药相关基因(erm)、万古霉素耐药相关基因(vanA、vanB)等12种主要耐药基因检测.
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尿道分离产blaKPC-9型碳青霉烯酶大肠埃希菌的耐药基因研究
大肠埃希菌是医院感染的重要病原菌,该菌可产生多种β-内酰胺酶,包括KPC-2、KPC-3及 KPC-9型碳青霉烯酶类,此酶可在质粒间传播。目前产blaKPC-9型大肠埃希菌株国内尚未见文献报道。我们在1株大肠埃希菌中检测到KPC-9型碳青霉烯酶,现报道如下。
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全国首次疑难菌株研讨会暨临床微生物学学术研讨会征文通知
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大肠杆菌O157∶H7基因组分析的启示
大肠杆菌O157∶H7是1982年新发现的一种病原菌,近年来在美国、日本、欧洲等地已经成为重大的公共卫生问题.2001年美国和日本先后发表了大肠杆菌O157∶H7 EDL933和SAKAI菌株的基因组序列[1,2].Perna等报道[2],与大肠杆菌K12 MG1655菌株的序列比较,EDL933菌株有很多外源性基因的插入.因此,将大肠杆菌K12 MG1655菌株特异性的序列命名为"K"岛,将大肠杆菌O157∶H7 EDL933菌株特异性的序列命名为"O"岛, 发现ELD933菌株有分子量大于50bp的177个"O"岛和234个"K"岛.
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脉冲场凝胶电泳技术及其在细菌分型中的应用
随着对细菌感染研究的日益深入,传统的细菌鉴定技术已不能很好地满足医院感染的诊断和流行病学调查的需要,表型分型方法如药敏试验等可用于检测疫情的爆发流行,但不能确认菌株之间的相关性[1].如今,从型、亚型、株甚至分子水平上去认识细菌变得愈来愈重要,因此分子生物学在细菌分型上得到了广泛应用.
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烧伤科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染特点及防治策略
感染是烧伤患者的常见并发症,也是导致创面加深、延迟愈合或不愈合,甚至威胁患者生命的重要原因之一[1]。革兰阳性球菌中的金黄色葡萄球菌,尤其是具有多重耐药属性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA)是烧伤创面及全身性感染中的主要致病菌[2]。 MRSA是指对甲氧西林、苯唑西林、头孢西丁耐药或mecA基因阳性的金黄色葡萄球菌[3]。医院内各个科室的MRSA感染率不尽相同,其中以烧伤科、重症监护室、神经外科的感染率高。通过文献报道可知,由于各科室疾病各具特点,其感染及传播方式也不尽相同, MRSA菌株及耐药性存在明显差异。因此了解烧伤病房MRSA菌株特点及其感染、传播途径,对烧伤科MRSA感染的救治具有重要的指导意义,同时也有利于制定合理、有效的预防及控制方案。现根据文献资料对烧伤病房MRSA感染特点及防治策略作一综述。
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ICU 医院获得性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌下呼吸道感染及耐药分析
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是常见的产ESBLs菌株,此类菌株具有较高的交叉耐药性和多重耐药性,是医院感染暴发流行的常见原因.ESBLs是能够水解头孢他定、头孢噻肟等第三代头孢菌素及氨曲南等抗菌药物,并介导细菌对这些抗生素产生耐药的β内酰胺酶,其耐药基因随质粒可在革兰阴性菌间迅速传播.
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社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的遗传学分析
金黄色葡萄球菌是社区获得性感染和院内感染的主要致病菌之一.自从1944年从医院分离到了耐青霉素的金黄色葡萄球菌临床株以来,欧洲及世界各地相继报道了许多耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)在院内暴发的事件[1-2].
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肝移植术后感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的随机扩增多态性DNA分析
肝移植术创伤及免疫抑制剂使用等是术后易发生感染的原因,其术后感染发生率高达37%~86%[1].国内外大量研究均表明金黄色葡萄球菌(SA)是肝移植术后感染的主要病原菌之一[2-4],且耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率呈升高趋势.本研究分析肝移植术后感染SA的耐药性,用随机扩增多态性DNA技术(RAPD)对MRSA菌株进行同源性分析,可为预防与降低肝移植术后SA的感染,正确合理运用抗生素,制定有效控制医院感染措施提供依据.
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重复序列引物聚合酶链反应在医院感染流行病学调查中的应用
随着医学治疗手段日益增多和细菌耐药株逐年增加,医院感染的暴发流行时有发生.绿脓假单胞菌由于在外界生长繁殖分布广泛,耐药性强,已成为当今医院尤其是重症监护室(ICU)医院感染主要病原菌之一[1].重复序列聚合酶链反应(rep-PCR)是一种新型基因分型方法[2,3].本研究通过优化反应体系,建立自己实验室绿脓假单胞菌rep-PCR分型技术,并对上海市某医院同一时期ICU病人及相关呼吸机的螺旋管、储水池及湿化器采样分离得到的绿脓假单胞菌株进行分型,并与同一时期其他病区菌株相比较.
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肺炎克雷伯菌产ESBL和AmpC酶菌株基因分型
随着抗生索在临床应用的不断增多,革兰阴性杆菌引起的多重耐药问题已成为全球关注的焦点,其中尤以β内酰胺类抗生素耐药为主~([1]).我国是世界上滥用抗生素为严重的国家之一,耐药菌引起的医院感染人数,已占到住院感染患者总人数的30%左右~([2]).
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长期使用抗生素引起大肠埃希菌产生耐药性与基因突变的鉴定
产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌株多重耐药给临床治疗造成了极大的困难,在多种耐药机制中,产生β内酰胺酶(BLA)是细菌对BLA类抗生素耐药主要的机制[1].为此,我们对患多发性肝脓肿的一例患者进行了追踪分析,在其长期使用抗生素治疗期间,从肝脓肿穿刺液和血培养液中分离出有代表性的7株大肠埃希菌,对它们形成耐药的环境、发生突变的途径和产生突变的类型进行了探讨研究.