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E V71复制策略研究进展
EV71属人类肠道病毒基因组A组,微小核糖核酸病毒科,是单链正链RNA病毒。其基因组包含约7400个核苷酸,其中开放阅读框包括3个区域:P1编码4个结构蛋白:VP1~4;P2和P3编码7个非结构蛋白:从2A到2C,3A到3D;开放阅读框两侧是复杂的5′UTR和带有polyA尾的3′UTR;且5′UTR与病毒VPg蛋白共价结合。 EV71通过识别宿主细胞上特定的受体(人类P选择性糖蛋白配基1以及清道夫受体B2)进入细胞[1-2]。感染宿主细胞后,其基因组虽缺乏5′帽子结构,但在其5′非转录区(5′UTR )有内在核糖体进入位点( internal ribo-some entry site,IRES),其能在不依赖帽子结构的情况下翻译成单个的多聚蛋白质,该蛋白质可被病毒编码的蛋白2Apro及3Cpro加工成外壳结构蛋白和非结构蛋白,参与病毒RNA的复制[3-5]。虽然目前关于EV71复制的具体机制尚不清楚,但几乎所有的肠道病毒均具有相似的病毒基因组结构及复制策略。其中,脊髓灰质炎病毒是已被深入研究的小RNA病毒,其复制的特点可作为研究EV71复制的参考模式。本文将主要描述参与EV71复制的宿主因素、尤其是在病毒RNA合成、依赖IRES翻译中的作用。
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单核细胞增生李斯特菌自溶素的功能与调控
单核细胞增生李斯特菌( Listeria monocytogenes)是一种在环境中普遍存在的革兰氏阳性菌,无芽孢结构、兼性厌氧,能引起人和动物严重的食源性感染。食用被该菌污染的食物后,病原菌可经胃到达小肠,若突破肠屏障,可引起发热性肠胃炎,患者或携带者的排泄物经土壤又可能再次污染食物。若病原菌转移至肝脏,可引发隐形肝炎。对免疫功能低下或不全的个体,还可能导致败血症、脑膜炎及孕妇流产等病症,其致死率高达30%~40%[1]。
自溶素( autolysin )是一类能够降解细菌自身细胞壁的肽聚糖水解酶,在细菌中普遍存在[2]。自溶素与细菌的多种生物学功能有关,如降解细胞壁、促使细胞分离及调节细胞壁更新。在感染宿主时自溶素可以协助细菌黏附并入侵宿主细胞,影响细菌在胞内及胞间的扩散力并诱导免疫细胞产生细胞因子。自溶素的生物学功能还体现在生物膜、鞭毛及孢子形成、遗传转化能力、蛋白分泌及自我溶解等方面,与细菌的致病力密切相关[1,3]。本文就自溶素的结构、基因功能和调控机制进行综述,旨在为自溶素功能研究提供参考。 -
栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型吸附后宿主细胞膜电位的影响
经我试验组反复验证栀子提取物ZG在体内外均有明显的抗病毒感染作用,其作用机理之一可能是通过抑制病毒吸附来发挥抗病毒作用[1].通常情况下,稳定的膜电位是维持细胞正常功能所必需的;而在病毒感染过程中,细胞膜跨膜电位差(△φ)则作为促使病毒内化的主要能态来源.
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HBV感染PBMC后对宿主细胞CD25 mRNA表达的影响
HBV除对肝细胞具有高度亲和性外,还可侵犯外周血单个核细胞(PBMC)[1],这不仅是HBV肝外感染的直接证据,也是HBV潜伏或隐匿的场所.CD25是IL-2Rα链,主要存在于T淋巴细胞表面,是T淋巴细胞活化的标志,在抗病毒免疫反应中起重要作用[2].为探讨HBV感染PBMC后对宿主细胞CD25mRNA表达的影响,本文选择249例慢性乙肝患者进行观察,现将结果报道如下.
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肿瘤转移的治疗进展
肿瘤转移是指肿瘤细胞从原发部位扩散到远隔器官的病理过程,是一个复杂的,多步骤的过程,是肿瘤细胞和宿主细胞双方作用的结果.一方面肿瘤细胞自身的特性决定它是否有能力完成转移的各个步骤,即细胞膜表面的黏附能力,转移能力,细胞所释放的某些酶及抗原性物质等;另一方面是由机体(宿主)的内环境决定是否接受转移来的肿瘤细胞,即宿主的免疫防御机制决定了肿瘤的转移特性是否表现[1].机体免疫系统能清除癌细胞,从而抑制肿瘤转移,这一事实已得到公认[2].本文将从几个方面对肿瘤转移来的治疗研究进展加以阐述.
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慢病毒载体用于转基因技术的研究进展
慢病毒载体作为目前研究多的外源性转基因载体之一,已成为一种高效率的转基因和基因治疗工具。该载体大的优势是能够感染分裂和静止状态下的细胞,并且能够高效、稳定地整合于宿主细胞内。目前研究该载体在多种动物转基因技术方面的应用,有助于我们利用除了大鼠和小鼠以外的多种实验动物来研究基因的功能,并实现通过调节基因表达治疗人类疾病的目的。
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乳腺癌患者术前血清基质金属蛋白酶-9及其抑制因子水平的检测及意义
乳腺癌的侵袭和转移是导致患者死亡的主要原因,有效监控和及时发现肿瘤转移,是合理采用综合治疗方案治愈乳腺癌的关键.研究表明,基质金属蛋白酶(MMP)-9及其特异性组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)-1在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用,肿瘤细胞可通过自分泌或诱导宿主细胞大量分泌MMP和TIMP进入血液[1],多种恶性肿瘤外周血MMP和TIMP水平与肿瘤生物学行为关系密切[2-4],但鲜见乳腺肿瘤与其关系的报道.本研究对乳腺肿瘤患者血清MMP-9和TIMP-1水平进行检测和临床应用价值评价,以探讨其与组织中相应指标表达的关系.
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荚膜组织胞浆菌感染一例
荚膜组织胞浆菌(histoplasma capsulatum)[1]是一种能在自然界或室温下培养生长的霉菌,但在37℃或侵犯宿主细胞时,则转变成小的酵母菌细胞(直径1~5 μm).人类常因吸入被鸟或蝙蝠粪便污染的泥土或尘埃中的真菌孢子而感染HP.HP呈全球分布[1],临床症状与肺结核、黑热病相似.
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影响泌尿生殖道沙眼衣原体分离培养的关键因素
笔者多年从事沙眼衣原体分离培养研究,取得点滴经验如下。 标本采集:同时采集患者宫颈及尿道标本或间隔1周连续多个宫颈标本,用细头拭子需插入宫颈口3~5 cm,旋转1周(5~10 s)取出;男性患者在症状出现7~8 d后,采集尿道(3~5 cm)拭子,以不含精液为好。标本采集前应避免使用避孕药及抗生素。 标本培养:初次分离培养细胞系以McCoy敏感。培养基以RPMI-1640、DMEM好,其中加入庆大霉素、制霉菌素或万古霉素,勿用青霉素,因其影响富含半胱氨酸的蛋白质合成,阻止始体向原体转变,不能形成感染性原体。10%新生牛血清有助于包涵体形成,培养液中尚需加入放线菌酮(终浓度为1 μg/ml),抑制宿主细胞的核酸、蛋白质合成,以便有充足的营养和大分子前身物质供衣原体利用。
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HIV分型的分子流行病学和临床意义
HIV在病毒分类中属逆转录病毒科慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组.由于以下4个方面的原因其基因有很高的变异特征,①高错误率的逆转录酶,其复制时,不能及时切除错误引入的核苷酸,约每个复制循环中就会发生一个错误使病毒复制时发生随机变异;②病毒快速的复制,估计每天一个HIV感染者要产生并清除100亿个病毒颗粒;③宿主的免疫选择作用,在宿主免疫压力的作用下,使能激发宿主细胞或体液免疫的基因组的变异高于其他部位,如gp120 V3环高变区;④不同病毒株DNA之间的基因重组.迄今为止,全球流行的HIV根据血清学反应和病毒核酸序列测定可分为二型,HIV-1型和HIV-2型.
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HIV疫苗的研制进展
HIV属逆转录病毒科慢病毒属,该属病毒因其保护性机制尚未明确、病毒基因整合入宿主细胞、基因变异率高、病毒常通过黏膜传播及病毒可直接侵犯免疫系统等特点,使得疫苗的研制难度大大增加.有关艾滋病疫苗效果的评价有3项指标:①能产生不同血清型的中和抗体;②CTL能特异地破坏感染细胞;③免疫过的黑猩猩对试验性感染有抵抗力.目前研制HIV疫苗的方法主要为以下6种.
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RNA干扰的抗病毒效应
双链RNA介导的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)能序列特异性的诱发转录后基因沉默,被认为是机体阻止外来病毒感染、保护细胞免受病毒入侵的一种细胞自我保护机制.近年来研究表明,以病毒基因和宿主细胞受体分子为靶点,引入外源的小分子干扰RNA(siRNA)能显著性抑制病毒的复制与感染.RNAi作为一种抗病毒的有力武器,将给病毒性疾病的基因治疗带来新的希望.
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丙型肝炎病毒蛋白结合蛋白
0 引言丙型肝炎病毒(HCV)是1989年Choo et al应用分子生物学技术克隆成功的一个RNA病毒,属黄病毒科.可以引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌,目前全世界有1.7亿人感染,干扰素联合利巴韦林是其治疗药物,但是疗效不佳[1-9].目前正在积极研究其发病机制,探索新的治疗方案.HCV的宿主范围较窄,只能在人及黑猩猩中繁殖,为研究带来困难.目前机制的研究限于体外的细胞模型或转基因动物.HCV是怎样与宿主细胞相互作用的,世界上进行了广泛的研究,特别是HCV各蛋白组分(C、E1、E2、P7、NS2、NS3、NS4a、NS4b、NS5a和NS5b)[10 ]与人体蛋白之间的相互作用,为HCV所致疾病的发病机制提供了线索.
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丙型肝炎病毒调节基因结合蛋白的研究
0 引言丙型肝炎病毒(HCV)是一种单股正链RNA病毒,其基因组的长度约10千碱基对(kb),其中含有唯一的开放读码框架(ORF)1-4].在其基因组RNA翻译起始点的上游,有一段341个核苷酸(nt),称为5'非翻译区(5'-NTR),控制着HCV基因组的翻译过程[5-7].HCV的3'-非翻译区(3'-NTR)的核苷酸序列自身能够相互结合以形成复杂的二级结构,与一系列蛋白质因子结合,形成病毒复制过程所必须的复制酶(replicase)复合物[8-10].HCV 3'-NTR结合的蛋白质因子除了其自身编码的RNA依赖性RNA聚合酶(NS5B)以外,还能够与感染宿主细胞的某些蛋白进行结合,以决定HCV的复制过程.HCV还必须借助病毒感染的靶细胞的一些蛋白质分子[11-13].
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丙型肝炎病毒核心蛋白反式激活作用的研究
0引言丙型肝炎病毒(HCV)是1989年应用分子生物学技术克隆成功的一个RNA病毒,属黄病毒科,可引起慢性肝炎、肝硬化及肝细胞肝癌,目前有1.7亿人感染,干扰素联合利巴韦林是其治疗方案,但是疗效不佳[1-9].目前世界各国都在积极研究其发病机制,探索新的治疗措施.但由于HCV的宿主范围较窄,只能在人及黑猩猩中繁殖,为研究带来一定困难.HCV是怎样与宿主细胞相互作用的,世界上进行了广泛的研究.
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巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体
结核分支杆菌是典型的胞内致病菌,它在机体内的主要宿主细胞是巨噬细胞[1].结核分支杆菌与巨噬细胞膜表面受体结合后,经膜内陷形成吞噬小体进入细胞,除了被细胞消化清除外,它有一系列的措施,如抑制巨噬细胞的激活,消除氧化基团,抑制细胞溶酶体与吞噬体的融合并抵抗溶酶体酶的作用,从而在细胞内存活下来.文中综述了与巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体,以及结核分支杆菌利用膜受体进入巨噬细胞的机制.
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2011年KeystoneSymposium结核病国际会议简介
2011年Keystone Symposium结核病国际研讨会于201 1年1月15-20日在加拿大温哥华举行.笔者将会议的主要内容概述如下.1.结核病免疫学研究:微小RNA通过调节细胞因子和化学因子的效应而在先天免疫中发挥作用,本次会议上有研究者报道,在分析MTB感染巨噬细胞过程中微小RNA的表达谱时,发现微小RNA-155显著增高.另有研究者介绍了白细胞介素-12p40同源二聚体在介导树突状细胞和T细胞活化的新功能,当MTB入侵免疫系统时,活化和记忆T细胞迁移到病灶周围的过程相对较慢,如果能促进这一过程,就能改善现有的疫苗设计.以往认为,分枝杆菌的特点是定位于宿主细胞的吞噬体内,现在这种认识受到挑战.有研究者在细胞质内发现分枝杆菌的存在,但这种迁移只存在于致病性分枝杆菌中,尚未在非致病性分枝杆菌及其突变菌株中发现这种现象,其意义在于,将MTBⅦ分泌家族分泌系统导入卡介苗中,可使卡介苗获得迁移至细胞质中的能力.
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骨科基因治疗中腺病毒载体的应用进展
腺病毒载体(AdV)能利用病毒自身感染宿主细胞,简便有效地将目的基因导入细胞内,使其有效的表达.而且腺病毒为DNA病毒,极少发生插入突变,且载体操作方便、宿主广泛、容易繁殖、繁殖滴度高、装载容量大、表达时间多在几个月以内,所以,腺病毒正在成为骨科基因治疗中使用多的载体之一.
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泌尿系肿瘤侵袭与转移重要分子:基质金属蛋白酶
侵袭转移是肿瘤细胞、宿主细胞及细胞外基质之间一系列主动、复杂、多步骤相互作用的过程.首先,有转移潜质的肿瘤细胞从母体脱离,粘附于其他细胞和 (或)基质蛋白的表面;接着由肿瘤细胞或基质细胞释放蛋白水解酶,降解细胞外基质(EC M)和基底膜(BM),破坏BM屏障,肿瘤细胞穿透血管或淋巴管壁向远处转移或直接侵入到周围组织中;后肿瘤细胞在多种生长因子的作用下形成转移灶[1].基质金属蛋白酶(MMPs)是一组具有高度保守锌依赖性的肽链水解酶,因参与ECM 和BM多种成分的降解而与恶性肿瘤的侵袭转移之间存在密切的关系.
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疝修补材料进展与使用中的问题
补片修补筋膜缺损的原理可以简单地理解为:因外源性的人工补片的置入所诱发的异物反应和连续增强的纤维化,形成了以非吸收补片细丝作为机械性密封的成分和其间充满胶原的瘢痕组织,终形成一个人工腹壁.在应用补片进行疝修补时,要求补片有与筋膜和肌腱相近或一致的密度和坚韧度,有较强的张力强度、抗感染能力以及与宿主细胞的亲和力,同时还要有柔软性和敷贴性.