托吡酯对多巴胺能神经元保护作用研究

目的 研究托吡酯对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用.方法 将48只雄性SpragueDawley大鼠随机分成4组:生理盐水组(A组),6-OHDA组(B组),造模前托吡酯预处理组(C组)和造模后托吡酯处理组(D组),每组各12只;第1～3 d A、B、D组分别行生理盐水灌胃,C组用托吡酯稀释后灌胃;第4d B、C、D组分别向右侧纹状体注入6-OHDA,A组注入生理盐水;第5～7 d A、B、C组行生理盐水灌胃,D组用托吡酯(剂量同前)稀释后灌胃;分别于造模后第4、28 d断头处死,用免疫组织化学方法观察黑质区域内酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数量,用分光光度计测定纹状体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)含量.结果 与B组损毁侧比较,C、D组损毁侧黑质TH阳性细胞计数明显增多(P＜0.01),纹状体内SOD及GSH-Px活性显著增高,MDA含量明显降低,同时C、D组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 托吡酯对多巴胺能神经元具有保护作用,其保护机制可能与降低脂质过氧化水平及毒性产物的作用和减少自由基的产生有关.

脑慢性低灌注老龄大鼠海马ε型蛋白激酶C及α分泌酶ADAM17表达的变化

目的 观察脑慢性低灌注对老龄大鼠海马组织ε型蛋白激酶C(PKCε)及α分泌酶ADAM17蛋白表达的影响.方法 将老龄大鼠随机分为假手术组和低灌注组,低灌注组永久性阻断双侧颈总动脉,制作脑慢性低灌注模型;采用Y型电迷宫分别于术后14和28 d检测大鼠学习记忆能力;采用免疫组化法和免疫印迹法检测上述时间点海马组织PKCε和ADAM17的表达.结果 低灌注组术后14和28 d学习记忆能力较假手术组减退(P＜0.01);与假手术组比较,低灌注组术后各时间点大鼠海马PKCε和ADAM17表达明显下降(P均＜0.01).结论 脑慢性低灌注损害老龄大鼠学习记忆能力,导致痴呆发生,其机制可能与海马PKCε表达下降有关,而PKCε参与调节α分泌酶的表达,推测PKCε表达的下调,导致ADAM17表达减少,间接促进β淀粉样蛋白(Aβ)生成,损伤脑组织形成痴呆.

凝血酶大鼠脑内注射ICAM-1mRNA表达和MPO活性的影响

目的 探讨大鼠脑内注射凝血酶(Thrombin,TM)对细胞间粘附分子-1(Intracellular adhension molecule-1,ICAM-1)mRNA表达及白细胞浸润的影响及其可能机制TM、TM+组织蛋白酶G(CathepsinG,CATG)脑内立体定向注射于SD大鼠尾状核,在不同的时间点处死动物,RT-PCR技术检测ICAM-1mRNA表达,通过测定髓过氧化物酶(MPO)活性来检测中性粒细胞的浸润情况.结果 凝血酶脑内注射后24 h ICAM-1mRNA表达开始增加(P＜0.05),48 h达高峰(P＜0.01),然后逐渐下降.MPO活性动态变化趋势与ICAM-1mRNA相似.CATG组ICAM-1mRNA及MPO活性与对照组比较差异均无显著性(P＞0.05).结论 TM通过蛋白酶激活受体-1(protease activated receptor-1,PAR-1)诱导ICAM-1mRNA,促进白细胞浸润.

实验性脑出血灶周MMP-9的表达与神经元凋亡的关系

目的 探讨脑出血(ICH)后出血灶周脑组织MMP-9表达的动态变化,分析其与神经元凋亡的关系.方法 健康雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠56只,分为正常组(8只)和手术组(48只),手术组选择出血后12、24、48、72、96、120 h共6个时间点,每点8只,在脑立体定向仪下采用自体动脉血注入尾状核法制备脑出血模型,用免疫组化法和RT-PCR法检测MMP-9的表达,TUNEL法检测神经元凋亡,电镜观查神经元形态变化.结果 ICH灶周脑组织MMP-9的表达在48 h达峰值,神经元凋亡于72 h达峰值,两者变化同步,呈正相关(r=0.829,P＜0.05);电镜可观察到脑水肿和神经元凋亡.结论 MMP-9参与了ICH后灶周组织神经元凋亡的过程,诱导或加重了神经元的凋亡.

锂-匹罗卡品癫(癎)模型中核转录因子的表达及干预机制

目的 探讨癫(癎)发作时核转录因子(nuclear factor kappaB,NF-κB)在神经元损伤中的表达变化以及拉莫三嗪、黄芪注射液对这一过程的影响.方法 干预组大鼠预处理3 d后制作大鼠锂-匹罗卡品(lithium-pilocarpine,Li-PC)癫(癎)模型,造模后24 h、3、7 d应用光镜及电镜进行神经元形态学观察,利用免疫组织化学法半定量检测NF-κB的表达含量.结果 与正常组比较,模型组海马内NF-κB表达明显增多(P＜0.01),在24 h达峰值;与模型组比较,拉莫三嗪、黄芪注射液能够使NF-κB表达增加(P＜0.05).结论 NF-κB的主要作用是有利于神经元生存,拉莫三嗪、黄芪注射液可通过调控凋亡因子的表达而发挥对癫(癎)的神经元保护作用.

青年缺血性脑卒中TOAST分型的临床意义

目的 采用TOAST分型法研究青年缺血性脑卒中的特征.方法 收集64例15～45岁急性缺血性脑卒中患者,并经头部CT或MRI证实;所有患者均行胸部X线、心电图、血常规、血糖、血脂、凝血功能及血管炎方面的检查,多数患者做了血管方面的检查;脑卒中依据TOAST标准分型.结果 青年缺血性脑卒中男性患者所占比例较女性患者明显增高,脑卒中亚型;大动脉粥样硬化性脑卒中占21.9%,小动物闭塞脑卒中占32.8%,心源性脑栓塞占18.8%,其他原因引发的缺血性脑卒中占15.6%,原因不明的缺血性脑卒中占10.9%.15～35岁患者心源性脑栓塞和其他原因引发的缺血性脑卒中占相对高的比例;35岁以上患者大动脉粥样硬化性脑卒中及小动脉闭塞性脑卒中占相对高的比例.吸烟、酗酒的男性患者比例较女性患者显著增高,女性患者高血压病的比例较男性患者增多.结论 根据TOAST分型及危险因素的研究结果,对不同年龄层次的青年缺血性脑卒中患者有不同的临床意义.

原发性低颅压综合征18例临床、脑脊液和影像学特点分析

目的 探讨原发性低颅压综合征的临床、脑脊液和影像学特点.方法 回顾性分析18例原发性低颅压综合征的临床资料.结果 原发性低颅压综合征以体位性头痛、恶心、呕吐、头晕、耳鸣为主要表现,部分伴有神经系统体征,腰穿脑脊液压力均低于70mmH2O,27%患者红细胞增多,33%脑脊液蛋白增高,影像学检查可见硬膜增厚、强化、硬膜下积液和硬膜下血肿等表现,给予大量补液治疗及对症支持治疗,效果良好.结论 体位性头痛、腰穿脑脊液压力低为原发性低颅压综合征的主要临床特点,影像学可呈现硬膜增厚强化等特征性改变,治疗以大量补液为主.

家族性致死性失眠症临床及相关特征(附1例报道)

目的 研究1例家族性致死性失眠症(Familial Fatal Insomnia,FFI)的临床及相关特征.方法 分析家族性致死性失眠症患者的临床特征、动态脑电图正电子发射计算机断层扫描及基因测序等相关检查结果.结果 朊蛋白基因分析基因D178N突变,并与129Met等位基因连锁;动态脑电图检查未见睡梭波出现,慢波睡眠明显减少;正电子发射计算机断层扫描显示丘脑代谢明显降低.结论 家族性致死性失眠症具有特征性的临床、基因学、动态脑电图及正电子发射计算机断层扫描影像学改变.

ERK对缺血缺氧性脑损伤后神经元凋亡的影响

目的 研究在缺血缺氧性脑损伤后细胞外信号调节激酶(ERKs)对神经元凋亡的影响.方法 建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(缺血组和干预组)和假手术组,干预组于缺血前30 min尾静脉注入U0126溶液,缺血组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液;2,3,5-氯化(或溴化)三苯四氮唑(TTC)染色显示梗死灶;应用免疫组织荧光化学法检测梗死灶周围神经元核心抗原(NeuN)的表达及通过TUNEL方法检测神经元凋亡,并做NeuN与TUNEL的双标;用免疫印迹(Western blot)方法观察损伤侧皮层NeuN、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞周期蛋白E(CyclinE)蛋白的表达.结果 缺血组的梗死体积明显大于干预组,在假手术组未见梗死灶;缺血组大鼠NeuN阳性细胞数和NeuN蛋白表达明显少于假手术组,TUNEL阳性细胞数和CyclinD1和CyclinE蛋白表达明显高于假手术组(P＜0.05).干预组NeuN阳性细胞数和NeuN蛋白表达亦少于假手术组,但多于缺血组,TUNEL阳性细胞数和CyclinD1及CyclinE蛋白表达亦多于假手术组,但少于缺血组(P＜0.05).结论 ERK可通过对细胞周期的调控而对神经元凋亡产生影响,抑制脑缺血引起的pERK1/2磷酸化可部分抑制神经元凋亡,减少缺血梗死灶,对缺血性脑损伤起一定的保护作用.

急性脑梗死患者S-100b蛋白的动态检测及其临床意义

目的 动态监测急性脑梗死(ACI)患者血清S-100b蛋白的变化,探讨其与脑梗死体积、神经功能缺损程度及预后的关系.方法 采用ELISA对50例颈内动脉系统ACI患者血清S-100b蛋白进行动态检测,并与30例对照组进行比较,同时进行神经功能缺损评分(NIHSS)及CT扫描测定脑梗死体积,随访2个月进行日常生活能力评分(BI).结果 ACI患者血清100b蛋白在入院第1 d开始升高,第3 d达到峰值,第7 d下降,第14、21 d与对照组无明显差异;第3 d血清S-100b蛋白浓度高峰水平与脑梗死体积、神经功能缺损程度呈正相关,与2个月后BI呈负相关.结论 急性脑梗死后血清S-100b蛋白可作为缺血性脑损伤的生化指标,并可评估预后,对脑梗死的临床治疗有指导意义.

组胺H4受体在慢性脑缺血大鼠模型海马内的表达

目的 观察慢性脑缺血大鼠模型海马内一种新型组胺受体-H4受体的表达.方法 通过RT-PCR半定量技术检测在慢性脑缺血组和对照组中海马内H4受体的表达水平.结果 在8周以后的成功慢性脑缺血模型中海马内H4受体的表达显著低于对照组(P＜0.05).结论 在慢性脑缺血模型中海马内H4受体表达减少,并可能引起组胺作为神经递质和神经调质的作用减弱.

溶血磷脂酸对原代培养的小鼠小胶质细胞的活化作用

目的 探讨溶血磷脂酸(Iysophosphatidic acid,LPA)对原代培养的小鼠小胶质细胞的活化作用.方法 神经胶质细胞的混合培养及小胶质细胞的分离、纯化,用免疫化学染色鉴定小胶质细胞,用MTT法检测不同浓度的LPA对小胶质细胞数量的影响,用ELISA法检测不同浓度LPA活化小胶质细胞后所释放的TNF-α.结果 免疫组化显示原代培养的小胶质细胞纯度高,达95%;LPA在0.001～20 μmol/L范围内小胶质细胞的数量呈剂量依赖性的递增趋势,与对照组差异显著(P＜0.01),而在大于40 μmol/L的浓度范围内小胶质细胞数量逐渐减少;LPA在0.001～100 μmol/L浓度范围内促进小胶质细胞分泌TNF-α,其量比对照组显著增高(P＜0.05),其中在30 μmol/L范围内小胶质细胞分泌TNF-α的量与LPA浓度呈正比,而大于50 μmol/L时TNF-α的分泌量减少,各浓度组间差异显著(P＜0.05),而在48 h作用组每个浓度段所刺激分泌的TNF-α量与24 h作用组相应浓度段比较无显著差异.结论 在一定浓度范围内LPA对原代培养的小鼠小胶质细胞有活化作用,分泌炎性因子TNF-α增多,从而可以推论脑部病理情况下增高的LPA可能通过活化小胶质细胞在介导脑损伤的病理过程中发挥了一定的作用.

进展性脑梗死危险因素Logistic回归分析

目的 探寻引起脑梗死进展的相关危险因素.方法 所选病例均为本科2004年3月～2006年5月住院的急性脑梗死患者388例,根据入院后病情演变分为进展性脑梗死组(SIP)和非进展组.观察项目包括年龄、高血压病史、糖尿病史、冠心病史、脑卒中史、高脂血症史、吸烟史、饮酒史、入院时神经功能缺损评分、入院时高血压、入院后血压降低、发热、血脂、血糖、纤维蛋白原、红细胞压积、同型半胱氨酸、颈动脉狭窄、颅内动脉狭窄.首先用单因素分析对上述观察项目(自变量)进行筛选,然后对经单因素分析有显著意义的自变量作多因素Logistic回归分析.结果 388例急性脑梗死患者中符合条件的进展性脑梗死患者120例,发生率为30.93%,其中发病后24 h内发生SIP 32例(26.7%),48 h内40例(33.3%),72 h 18例(15.0%),96 h24例(20.0%),120 h3例(2.5%),144 h3例(2.5%).进展组和非进展组之间有19个因素行χ2检验或t检验,其中有8个因素的差异有显著性,分别是糖尿病史、脑卒中史、入院后血压降低、高血糖、纤维蛋白原增高、高同型半胱氨酸、颅内动脉狭窄、颈动脉狭窄.以脑卒中是否发生进展为因变量,对经单因素分析有显著意义的自变量作多因素Logistic回归分析,回归分析显示糖尿病史、入院后血压降低、颅内动脉狭窄、高同型半胱氨酸及高血糖有显著意义,而纤维蛋白原增高、颈动脉狭窄、脑卒中史无显著性意义.结论 进展性脑梗死发生率高,糖尿病史、入院后血压降低、颅内动脉狭窄、高同型半胱氨酸、高血糖是引起脑梗死进展的危险因素,寻找与脑梗死进展有密切关系的危险因子对临床降低进展性脑卒中的发生率有一定指导作用.

遗传性痉挛性截瘫患者MJD1基因的突变分析

目的 探讨中国汉族人群中遗传性痉挛性截瘫(Hereditary Spastic Paraplegia,HSP或SPG)患者的MJD1基因突变特点,进一步探索HSP和遗传性脊髓小脑性共济失调(Spinocerebellar Ataxia,SCA)的遗传和临床异质性.方法 应用聚合酶链反应、8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA T载体连接测序等方法对78例临床诊断为HSP的患者进行MJD1基因突变分析.结果 在18个HSP家系中检出SCA3/MJD1家系2个,占11.1%,该2例家系均为常染色体显性遗传,2例家系先证者在临床上符合HSP的诊断标准,突变的MJD1等位基因CAG三核苷酸异常重复次数分别为65和69次,散发的HSP病例未发现MJD1等位基因的异常.结论 HSP和SCA都具有明显的临床和遗传异质性,其表型在临床上有相互交叉现象,部分SCA3/MJD1患者临床上可为典型的痉挛性截瘫特征而无任何明显的共济失调表现.对临床表现为HSP的患者,尤其是有明显阳性家族史的患者进行MJD1基因诊断可以弥补HSP临床诊断的不足.

胚胎干细胞定向诱导分化为神经细胞的方法研究进展

胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)具有自我更新和多分化潜能,在适当培养条件下可被诱导分化为神经细胞,包括神经前体细胞,各种类型的神经元和胶质细胞.了解ES细胞向神经细胞分化的方法和机制是对神经损伤进行修复和治疗的前提,也可为神经系统损伤的治疗提供大量的健康备用细胞.

脑出血的遗传学研究进展

脑出血是受环境因素和遗传因素共同影响的多因素疾病.近年来,随着脑出血家族聚集现象的发现[1,2],遗传因素在脑出血发病中的作用引起了人们的关注,成为研究的热点.现就近年来有关脑出血的遗传学研究进展综述如下.1肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)1.1 血管紧张素转换酶(angiotensin-convertiong enzyme,ACE)基因

偏瘫型偏头痛2例报道

偏瘫型偏头痛为偏头痛的一类特殊类型,临床少见,报道不多,现报道2例如下.1病例例1,男性,14岁.因发作性偏侧头痛伴一侧肢体无力、失语13个月入院.患者于13个月前无明显诱因突然出现左侧头痛伴视物模糊,数分钟后出现右侧肢体麻木无力,言语不清,伴恶心呕吐,急诊头颅CT检查未见异常,约10 h后症状缓解;此后1年期间类似发作约十几次,肢体麻木无力均为对侧,每次发作均伴有偏侧头痛,左右侧均有发生,每次多在1 h左右自行缓解.

早期康复训练对脑卒中患者偏瘫肢体功能恢复的影响

脑卒中是临床常见病之一,其致残率较高,同时也给社会和家庭带来了很大的负担.如何采取正确的康复手段,以提高患者的生存质量已成为康复医学的重要课题之一.本研究通过对比观察,探讨早期康复训练对脑卒中偏瘫患者偏瘫肢体功能恢复的影响.

短暂性脑缺血发作的非典型临床表现分析

短暂性脑缺血发作(TIA)常表现为颈内动脉系统或椎基底动脉系统的短暂性脑缺血的各种神经功能缺失症状,而以发作性精神障碍、意识障碍、双下肢无力伴尿失禁为表现的TIA临床较少见.此类病例容易造成误诊.现对本院3年来收治的9例非典型临床表现的TIA患者分析如下.

第十届全国肌电图与临床神经电生理学术会议暨规范化研讨会征文启事