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044 当归对高分子右旋糖苷诱导人红细胞聚集性增强的抑制效应
研究当归对高分子右旋糖苷诱导人红细胞聚集性增强的抑制效应. 方法: 采用高分子右旋糖苷(Dextran500)促进正常人红细胞体外聚集程度, 观察当归(20 mg/ml)能否改善Dextran500引起的红细胞聚集性增强. 实验采用红细胞聚集测定仪, 观察指标包括: Ta: 开始聚集时间; Tf: 后聚集时间; I10: 10 s内聚集率指数: I60: 60 s内聚集率指数; rD: 红细胞聚集部分解聚的剪切率; rS: 红细胞聚集全部解聚的剪切率. 结果显示: (1) Dextran500组与对照组相比, Ta、 Tf、 I10明显下降, I60无显著差异, rD、 rS显著升高. (2) 当归组与Dextran500组相比, Ta、 Tf、 I10明显下降, I60无显著差异, rD、 rS有升高倾向. 结果: 当归能够使Dextran500处理后的红细胞的开始聚集时间显著延缓, 程度下降, 终聚集时间显著延缓, 虽然终聚集程度不变. 结论: 当归能够抑制Dextran500桥联所致红细胞聚集性增强.
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大鼠胚胎胸腺细胞体外培养后存活率及表面抗原的变化
应用同种胸腺移植治疗免疫缺陷和恶性肿瘤,疗效已经得到肯定.但对于胚胎胸腺取出后,经体外培养,细胞的存活情况及是否需经处理以降低其抗原性,尚无统一认识,本实验对其进行了研究,现报道如下.
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不同压力CO2气腹对肝癌细胞体外侵袭能力的影响
腹腔镜肝癌手术中,CO2气腹是否会增加肝癌细胞的侵袭能力,以及由此促进了肿瘤在腹腔内的种植和转移,是腹腔镜外科医生尤为关心的问题.我们应用体外模拟CO2气腹环境,观察不同气腹压力对肝癌细胞体外侵袭能力的影响.一、材料和方法1.细胞培养及分组:肝癌SMMC-7721细胞(取自南昌大学消化研究所)常规培养于含10%小牛血清的RPMI 1640中.
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冷冻与化疗在促进肝癌细胞凋亡中的协同作用
在长期肝癌冷冻实践中可见,经冷冻后体内仍有残余病灶、AFP水平仍高的部分患者可长期生存,残余病灶逐渐变小、AFP水平逐渐降低甚至正常、病灶消失.因此不能单纯靠冷冻的物理损伤的病理过程解释~([1]).本研究旨在观察肝癌细胞体外冷冻结合化疗诱导凋亡的作用.
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生物可降解尿道支架种植尿道移行上皮细胞的研究
我们应用人工合成的生物可降解性单纯型尿道内支架修复战伤性尿道狭窄,证实该材料及方法是可行的[1].本实验旨在将自体的尿道上皮细胞体外培养后,种植于单纯尿道内支架上,制备成附有自体尿道上皮细胞的复合型尿道内支架,为修复尿道损伤提供较实用有效的治疗方法.
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重组组织因子途径抑制物-2对人胰腺癌细胞体外侵袭能力的影响
我们通过脂质体法将组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因转染人胰腺癌细胞株Panc-1,观察其对胰腺癌细胞体外侵袭、转移能力的影响[1,2].
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芹黄素对乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-435S侵袭和增殖能力的影响
透明质酸酶(Hyalase)是一种基质降解酶,它参与了肿瘤的侵袭转移过程[1].有研究表明,芹黄素可以抑制Hyalase的活性[2].我们通过建立乳腺癌细胞体外侵袭模型,观察芹黄素对两种乳腺癌细胞株侵袭和增殖能力的影响.
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增殖细胞核抗原反义寡核苷酸对人不同恶性肿瘤细胞体外增殖活性的影响
设计针对增殖细胞核抗原(PCNA)基因的特异性反义寡核苷酸(PCNA-ASO)可抑制人胃癌不同细胞系增殖,而对正常细胞生长则无影响[1].本研究旨在探讨PCNA-ASO对人膀胱癌EJ细胞、人结肠癌HCT-8细胞、人肺癌GLC-82细胞、人恶性胶质瘤BT-325细胞体外增殖活性的影响及作用的敏感性.
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小儿肿瘤的基因治疗研究现状
基因治疗是指应用正常或野生型基因校正或置换致病基因的一种治疗方法[1].经历了动物细胞体外遗传修饰、动物直接基因转移、病毒载体的应用, 尤其是重组DNA技术的诞生, 使基因治疗成为了肿瘤、遗传病及病毒性感染等临床治疗的全新方法.
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高磷和肿瘤坏死因子α对大鼠血管平滑肌细胞体外钙化的作用
心血管疾病是终末期肾病(ESRD)患者主要的并发症和死亡原因.临床研究显示高血磷、慢性炎性反应可能是ESRD患者心血管钙化的主要危险因素.
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鼻咽癌干细胞的研究进展
鼻咽癌高发于我国华南地区、东南亚等地.目前鼻咽癌的治疗主要以放疗为主,因其高转移率及局部复发,5年生存率徘徊于10%~40%.目前鉴别肿瘤干细胞的"金标准"[1] 是联合肿瘤细胞体外增殖实验及动物移植瘤实验.肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)具有分化潜能,其大部分子代细胞为非致瘤细胞,具有增殖能力但不能生发和维系肿瘤等特征,移植极少量该型细胞到免疫缺陷动物即可成瘤.故针对鼻咽癌CSCs的靶向治疗在鼻咽癌的治疗具有广泛的前景.CSCs是肿瘤中存在的极少部分具有自我更新、多向分化潜能、维系肿瘤生长的恶性细胞.传统放化疗不能完全消除肿瘤,因为遗留了真正致瘤的CSCs,被认为是肿瘤复发、转移及放化疗抗拒的根源.鼻咽癌中也可能存在CSCs,针对鼻咽癌CSCs的靶向治疗在鼻咽癌治疗具有广泛的前景.但寻找特异的鼻咽癌CSCs分选标志物是研究的颈瓶.本文拟对鼻咽癌CSCs存在证据及表面标志物筛选等方面的进展进行简要综述.
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日本血吸虫细胞体外培养研究
寄生于人体的血吸虫主要有3种:分布于我国及东南亚等地的日本血吸虫,分布于非洲、南美洲等地的曼氏血吸虫和分布于中非等地的埃及血吸虫.
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血管内皮生长因子与糖尿病视网膜病变
1血管内皮生长因子的生物学特点血管内皮生长因子(VEGF)是Ferrara等[1]于1989年从牛垂休滤泡星状细胞体外培养液中首先纯化出来的,根据其促血管内皮细胞有丝分裂而命名为VEGF,也称为血管通透因子(VPF).VEGF的结构具有高度的保守性,它是一种由亚基内及亚基间二硫键交联形成的同型二聚体糖蛋白,分子量在34~45KD之间.VEGF的基因定位于第六对染色体的长臂上[2],基因结构为交替剪接的8个外显子和7个内含子组面.VEGF有四种形式,分别由121、165、189、206个氨基酸组成,大多数情况下,VEGF121分泌出细胞后呈可溶的游离状态,而VEGF189和VEGF206分泌出细胞后主要呈基质结合状态,VEGF165的性质则介于而者之间,是体内产生多的一种亚型.
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人脐带血基质细胞体外扩增体系建立的临床前研究
人脐血中存在基质细胞,但由于其数量少,扩增能力弱而限制了在临床上的使用.本课题通过研究不同细胞因子:成纤维细胞生长因子(BFGF)、干细胞生长因子(SCF)、白细胞介素-3(IL-3)、肿瘤坏死因子(TNF)及其组合对人脐血基质细胞集落形成作用的比较,筛选出能高效稳定扩增人脐血基质细胞的体外培养体系并观察扩增后基质细胞的生物学性状.
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急性白血病骨髓基质对残留白血病形成作用的实验研究
微小残留病是缓解后白血病复发的根源,极大地制约了白血病的终疗效.本研究采用Dexter型骨髓培养体系形成骨髓基质细胞贴壁层,接种HL-60细胞共培养,用去甲氧基柔红霉素(IDA)处理后,动态观察白血病骨髓基质细胞体外生长特点,检测基质细胞Fn、VCAM-1及培养上清中IL-6、TNF-α表达水平,探讨急性白血病骨髓基质对残留白血病形成的作用机制.
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人胸腺细胞与小鼠脾细胞体外共同孵育的MTT比色法测定
为了观察人胸腺细胞与小鼠脾细胞的关系,我们运用了M TT比色法进行体外测定.人胸腺取材于胸外科手术及妇产科手术,年龄在5月-6岁范围内.将胸腺块消毒、剪碎并研磨,尼龙网过滤后进行体外原代细胞培养,T细胞密度与小鼠脾细胞密度均为1x106/ml,培养基为DMEM,添加15%小牛血清、25mM hepes、4mM谷氨酰胺、10μM 2-巯基乙醇、2mM丙酮酸钠、100U/ ml青霉素及100μg/ml链霉素,37℃、5% CO2孵箱孵育1月.60μl 人卵巢癌细胞与60μl人胸腺细胞体外共同孵育作为实验组,60μl DMEM与60 μl人胸腺细胞孵育作为阴性对照.2天后,进行96孔板MTT比色法体外测定T细胞活率 .10μlMTT溶液加入每孔中,将96孔板置于孵箱中,4小时后,100μl 20% SDS加入每孔中,过夜后检测OD值.实验组的OD值(OD=0.0462,平均1 .3287±0.3538)高于阴性对照组(OD=0.045,平均0.5270±0 .0582),P<0.01,说明小鼠脾细胞能促使人T细胞增殖.
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中药视神经保护有效成分筛选的方法学研究
目的:(1)建立大鼠视网膜神经细胞体外培养模型;(2)建立视网膜神经节细胞(RGCs)培养模型;(3)用噻唑兰比色法(MTT法)测试不同培养时间视网膜神经细胞及RGCs存活率;(4)绘制体外培养视网膜神经细胞和RGCs存活曲线.方法:(1)取出生72h内的SD乳鼠视网膜,制成细胞悬液,放于已包被多聚鸟氨酸和层粘连蛋白的培养皿中,加20%EMDM培养液、于5%二氧化碳孵箱中培养,分别于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(2)在混合培养的视网膜神经细胞中加入5'-溴-2'-脱氧脲苷(Brdu),并于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(3)利用羊抗鼠IgG和小鼠抗大鼠Thy1.1抗体纯化视网膜神经节细胞,分别于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(4)采用MTT法测定体外培养的视网膜混合细胞和RGCs在体外培养4小时,24小时,48小时的存活率,绘制细胞生长曲线.
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用原代培养方法建立炎症性牙龈和牙周膜组织细胞有限细胞系
体外培养方法、培养条件、病例标本来源的特殊性、细胞种类及实验技巧等均影响各自原代细胞培养的成功率,同时也是限制了很多研究的原因之一.虽然已有报道尝试通过克隆杂交、基因转染技术建成体外无限细胞系,但不可避免地含有部分肿瘤样细胞的特性,其结果的参考价值受到影响.临床健康者来源的牙龈和牙周膜成纤维细胞培养方法已有介绍且成功率较高[1~4],但炎性病变时牙龈和牙周组织的表现和反应至今未见专门报道.作者结合有关炎症牙周组织成纤维细胞体外培养实验报道[5~7],将培养牙周炎症组织原代成纤维细胞的方法介绍如下.
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气管缺损与重建
气管缺损的研究在国外已开展一百多年了.气管缺损分为部分缺损与环行缺损、局部缺损与广泛缺损(≥6cm).目前局部缺损已在临床上取得了较大成功,但广泛的环行缺损仍停留在实验室研究阶段.重建方式以移植修复为主.为了解国外目前在此领域的进展情况,本文就气管缺损重建的有关问题综述如下. 历史概要:1881年Gluck和Zeller开始对狗的缺损气管行端端吻合重建术.1948年Danel开始将假体材料应用到气管重建领域,此后人们开始了有记载的广泛自体、同种异体和异种移植重建气管的临床及实验室研究.1976年Neville指出血供问题是移植物存活和上皮化的关键.此后研究的重点就转移到了移植物的血管发生学方面.1991年Vacanti开始用异种软骨细胞体外人工合成的软骨组织重建气管的组织工程移植研究.1995年Park等成功地用自体软骨细胞体外合成了软骨组织[1].
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间充质干细胞体外软骨定向诱导条件的研究进展
种子细胞来源一直是限制软骨组织工程发展的主要瓶颈.软骨细胞增殖能力有限,体外大量扩增后易发生老化及去分化,丧失软骨形成能力,且软骨细胞的增殖能力随年龄增长逐渐下降进一步限制了其在组织工程中的应用[1].如何寻找到佳的种子细胞是目前组织工程研究的热点之一.间充质干细胞是中胚层来源的一类多能干细胞,具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种细胞的能力[2].本文就问充质干细胞体外软骨定向诱导条件的研究进展综述如下.