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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3上调硫氧还蛋白还原酶1基因的表达
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3对硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)启动子转录的激活作用.方法:以HCV非结构蛋白NS3反式调节基因的基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定TXNRDl的启动子区域(TXNRDlp),聚合酶链反应(PCR)扩增TXNRDlp,克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-TXNRD1p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫黏附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与pcDNA3.1(-)-NS3共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果:成功获得TXNRDl启动子的正确克隆.CAT3-TXNRDlp和pcDNA3.1(-)-NS3瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的9倍,pCAT3-TXNRDlp的2.0倍,进一步验证了利用基因表达谱技术研究HCV NS3蛋白反式激活作用的结果.结论:TXNRD1启动子有顺式激活下游基因的活性;HCV的NS3蛋白具有对TXNRD1的反式激活作用.
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胰腺癌p53上下游基因Mdm2、p21WAF/CIP1以及p14ARF蛋白的表达及相互作用关系
在肿瘤的形成过程中,有两条通路研究的较为深入,即pRb(p16-pRb-cyclin D1)和p53(ARF-Mdm2-p53-p21WAF/CIP1)通路,由于p53突变在胰腺癌中是一主要事件,我们利用传统的免疫组化技术并结合新兴的组织芯片技术检测p53通路中相关基因:ARF、Mdm2、p53和p21在胰腺癌、癌旁与良性病变组织中的表达情况,以探讨四种蛋白在胰腺癌组织中的改变情况、临床意义及相互作用关系.
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Nag1基因对胃癌细胞增殖与凋亡的影响
新近研究表明,非甾体抗炎剂(NSAIDs)类药物能预防结肠腺瘤和腺癌发生及抑制多种肿瘤的生长[1].研究显示,NSAIDs抑瘤作用除了研究较多的COX-2途径外,另存在非COX-2途径,而后一途径与诱导下游基因Nag-1表达有关[2].本研究构建Nag-1基因载体,将其转染胃癌细胞株SGC-7901和MKN-28,观察对胃癌细胞生长、凋亡与侵袭能力的影响.
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HIF-1α、VEGF和Sema4D蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义
实体肿瘤在发展过程中,因体积增大、血液供应不足而出现缺氧,缺氧又通过关键的转录因子——缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)使肿瘤血管增生、转移等恶性行为更加明显[1].HIF-1α在恶性肿瘤发生、发展中所发挥的作用主要与其调节的下游基因,如血管内皮生长因子(VEGF)等有关[2].研究证实,HIF-1α通过上调轴突导向蛋白(semaphorin,Sema;又名:信号素)Ⅳ亚族中的重要成员—Sema4D的表达,增强内皮细胞趋化运动,介导肿瘤血管的发生,从而促进恶性肿瘤远处转移[3].Sema4D是近来越来越受到关注的参与肿瘤血管发生的重要蛋白分子[4].研究发现,卵巢癌组织中Sema4D的阳性表达率明显高于良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织[5].为进一步研究卵巢癌发生、发展的相关因素,本研究通过免疫组化方法探讨HIF-1α、VEFG和Sema4D在卵巢癌组织中的表达及3者之间的关系,并分析其临床意义.
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PIRES-EGR-1-endostatin基因放疗抗肿瘤效应的实验性研究
肿瘤基因-放疗(gene-radiotherapy,GR)是目前研究热点,电离辐射可启动重组表达载体中早期生长反应因子1(early growth response-1,EGR-1)同时诱导下游基因的超强表达.
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射线诱导PIRES-Egr-1-IFN-γ在小鼠体内的表达
电离辐射可迅速诱导细胞中早期生长反应(Egr-1)基因的表达,Egr-1基因启动子含有6个CArG元件,电离辐射通过细胞产生活性氧自由基作用于CArG元件诱导Egr-1的表达,用Egr-1启动子经辐射可诱导下游基因的超强表达[1,2].
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电离辐射诱导人外周血淋巴细胞gadd45基因表达的变化
电离辐射诱导的一些特殊基因表达的改变,有可能作为新的分子生物标记物用于估算细胞的受照剂量.其中生长抑制和DNA损伤诱导基因gadd45(growth arrest and DNA damage 45)[1]尤其引人关注.当DNA受到辐射损伤后,作为p53基因下游基因,gadd45表达增强,诱导受损细胞停滞于G1期,抑制细胞进入S期进行DNA复制及细胞增殖,同时激活细胞的核酸切除修复(Nucleotide excision repair,NER)功能[2].
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转录共激活因子TORCs在神经病理性疼痛中的研究进展
国际疼痛学会(IASP)将神经病理性疼痛新定义为由躯体感觉神经系统的损伤或疾病直接造成的疼痛[1].常表现为自发性疼痛和诱发性疼痛.诱发性疼痛又可分为痛觉过敏和痛觉超敏,其发病机制还不清楚.目前研究认为该类疼痛的产生和维持与外周敏化和中枢敏化相关[2].神经病理性疼痛是一种广泛存在而又极难治愈的临床症状,是一种慢性改变,其涉及基因表达的改变,而基因表达的关键就是基因转录的调控.转录共激活因子(TORCs)作为一类重要的反应结合蛋白(CREB)转录共激活因子,通过增加CREB和其辅助因子的结合,诱导其下游基因在启动子水平的活性[3].由此可知,TORCs在神经病理性疼痛的发生发展中具有重要作用.
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P53治疗肺癌的临床观察与护理
肺癌是当今世界上对人类健康与生命危害大的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐渐上升趋势.随着基因技术的深入研究和发展,P53治疗肺癌成为当今具前途的治疗方式[1].P53基因是研究透彻、功能强大的一种抑癌基因,而重组人P53腺病毒(rAd-P53)可特异性地引起肿瘤细胞程序性死亡,或者使肿瘤细胞处于严重冬眠状态,而对正常细胞无损伤.尽管rAd-P53对细胞的感染缺乏特异性,但它对细胞的影响效应具有特异性[2].rAd-P53参与细胞周期调控,在防止细胞癌变过程中起着十分重要的作用[3].它具有调节P21、mdm2、GADD45等下游基因的作用,调节与凋亡有关的基因如Bax、DR5、IGFs和干扰生长因子的信号转导通路的作用;并有抑制血管内皮生长因子基因和药物多抗性基因表达的作用,从而使癌细胞凋亡[4].为提高肺癌病人的生活质量,P53治疗肺癌并发症的防治和护理越来越受到广大护理同仁的重视.现将我科2004年5月-2005年4月收治的10例肺癌病人经过P53基因治疗前后的护理经过报告如下.
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EZH2在胚胎干细胞和肿瘤方面的研究进展
PcG蛋白家族成SEZH2是PCR2复合物的催化活性亚单位,通过甲基化核小体组蛋白H3的27位赖氨酸残基,沉默下游基因.这些下游靶基因大部分具有抑制肿瘤发生和调控干细胞分化的作用,它们的沉默将导致肿瘤的发生和干细胞多向分化潜能障碍.EZH2介导的基因沉默机制和DNA甲基转移酶(DNMTs)以及组蛋白脱乙酰酶(HDACs)之间存在密切的联系.现就EZH2在胚胎干细胞、肿瘤研究和临床应用前景作一综述.
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人参提取物对Ⅰ型干扰素及下游基因表达的调节作用
目的 探讨人参提取物对Ⅰ型干扰素及下游基因表达的调节作用.方法 培养THP-1细胞并加入人参提取物后,ELISA检测干扰素-α、干扰素-β分泌水平,Real-time PCR检测BST-2、APOBEC3G表达.结果 与空白组比较,人参提取物组干扰素-α分泌水平显著提高(P<0.01),但对干扰素-β无明显影响(P>0.05);与对照siRNA组比较,该组BST-2、APOBEC3G表达显著提高(P<0.01),并与干扰素-α诱导呈正相关.结论 人参提取物可通过Toll样受体途径诱导单核细胞分泌干扰素-α,从而提高抗病毒因子表达.
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NOTCH3信号通路与肝癌研究进展
Notch3是细胞Notch家族重要成员之一,其在进化上高度保守,可与相邻细胞的配体结合而被激活,通过调控下游基因,维持着细胞增殖、分化、凋亡之间的平衡,对细胞的命运起着决定性作用.近年研究表明Notch3信号通路与肝癌的发生发展关系密切.本文就Notch3信号通路与肝癌关系作一综述.一、NOTCH信号通路的组成及调控Notch基因于1917年由Morgan等在果蝇体内发现,之后研究发现Notch还广泛分布和表达于无脊椎动物及哺乳动物体内,它属于跨膜受体蛋白家族.
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T 细胞因子4在肿瘤发生发展中作用的研究进展
随着人们在分子遗传学和细胞生物学方面对肿瘤发生研究的深入,发现调控正常细胞生长、分化、凋亡等生命活动的信号通路发生异常是肿瘤发生的必要条件。近年来 Wnt 通路逐渐受到关注,它不仅在人体胚胎器官发育中发挥重要作用[1],而且其过度激活参与人体多种肿瘤的发生。T 细胞因子4(TCF-4)是 Wnt 通路核内信号传导的主要蛋白之一,大量的基因和生化研究已经证明其所在的家族是 Wnt 信号通路下游基因的初始特异性转录因子,因而被称为 Wnt 信号通路的开关[2]。本文就 T 细胞因子4的结构功能及其剪接异构体参与人体肿瘤的发生发展进行综述。
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p53诱导基因3在膀胱癌中的表达及意义
p53是膀胱癌发生发展中的重要因子,其行使生物学效应主要通过激活下游基因的表达来实现[1-3].p53诱导基因3(PIG3)是p53的下游基因之一[4],本研究旨在检测40例膀胱癌标本及15例非肿瘤膀胱组织中PIG3蛋白表达情况,探讨其在膀胱癌发生发展中的作用.
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血管紧张素Ⅱ、内皮素1及缺氧诱导因子1α在糖尿病肾病肾组织的表达及意义
血管紧张素(Ang)Ⅱ和内皮素1(ET-1)是重要的致炎及纤维化因子,且2者间存在交互作用[1],共同参与糖尿病肾病(DN)肾间质纤维化(RIF)的进程.缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是组织缺氧时表达增多的产物.AngⅡ可使肾小管上皮细胞中HIF-1α的表达增加,而ET-1是HIF-1α的下游基因,3者之间密切关联.本研究采用免疫组化技术检测AngⅡ、ET-1及HIF-1α在DN患者肾组织中的表达,探讨其与肾脏损害的关系,为进一步阐明DN的发病机制提供依据.
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激活蛋白1诱饵寡核苷酸对肾小管上皮细胞转化生长因子β1和白介素1β基因及蛋白表达的影响
核转录因子激活蛋白1(AP-1)在肾小管上皮细胞的活化、炎症介质产生的信号转导中起着重要作用[1].诱饵(decoy)核酸技术作为一个新的基因治疗策略,可特异性地阻断核转录因子的活性而抑制下游基因的表达,也极可能成为有效治疗肾脏疾病的新方法[2].
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MicroRNAs在p53信号通路中的调节作用
MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性的具有调控功能的非编码小RNAs,其大小为20~25个核苷酸.编码miRNAs的基因是一类进化上高度保守的基因家族,各种属间具有很高的保守性.根据生物信息学研究预测,大约30%的人类蛋白编码基因直接受到miRNAs的调控[1].目前已发现了1 000多种人类miRNAs,它们参与调节大约92%的人类基因,被认为是重要的调节分子之一.p53作为重要的抑癌基因,其在恶性肿瘤的发生和发展过程中起着关键性的作用.p53信号通路包含上百种基因和基因产物.当DNA损伤时,p53蛋白表达量增加,进而调节靶基因,以发挥阻滞细胞周期、促进细胞凋亡、维持基因组稳定和抑制肿瘤血管生成等作用[2].近年来的研究表明,p53与miRNAs具有紧密联系.一方面,p53可以调节miRNAs的转录;另一方面,miRNAs也可以直接抑制p53或p53上下游基因的表达.miRNAs调控p53的系列研究揭示了一批新的受p53调节的基因.大量研究资料表明,p53信号通路的众多基因已成为miRNAs的重要调节靶点.
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血小板衍生生长因子-D 基因与肿瘤的关系
血小板衍生生长因子-D ( PDGF-D )是一种新近发现的生长因子,能调节许多细胞过程,包括细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、血管生成和转移。 PDGF是成纤维细胞、平滑肌细胞以及其他间充质来源细胞的强有丝分裂原和化学驱动剂。PDGF家族每一成员都含有一个高度保守的PDGF/VEGF同源结构域。生物活性PDGF分子由二硫键连接的同源二聚体或异源二聚体组成,特异性结合和激活同源受体PDGFR。PDGF及其受体在胚胎发育过程中扮演着非常重要的角色,尤其是肾脏、血管、肺和中枢神经系统。目前发现的 PDGF家族成员至少有4个,即PDGF-A、B、C、D。 PDGF-C、D是近年来刚发现的两个新成员。 PDGF-D信号通路在人类肿瘤起着重要作用,PDGF-D信号通路可能代表一种新的治疗靶向。 PDGF-D的功能在人类癌症的进展在很大程度上是未知。本文通过阐明PDGF-D与PDGF配体结合后通过不同的信号通路激活PDGF-D的下游基因,论述PDGF-D基因及其信号通路如何参与肿瘤的发生、发展、转移。
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缺氧诱导因子-1α在乳腺癌中的研究进展
缺氧是实体肿瘤微环境的基本特征之一,同时肿瘤细胞的缺氧也是肿瘤发生恶性转化甚至转移的始动因子.目前认为缺氧诱导因子( hypoxia-inducible factor,HIF)在肿瘤缺氧环境下起了重要作用,有代表性的为HIF-1,它的α功能亚基(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-lα)被激活后可以调节多种下游基因,如与肿瘤相关的基因主要有血管生成相关因子、葡萄糖转运和糖酵解酶、肿瘤侵袭和转移相关因子、肿瘤增殖和凋亡相关蛋白等,使细胞对缺氧环境产生应激反应,从而更好地适应缺氧环境.