重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位： 重庆市教育委员会
- 主办单位： 重庆医科大学
- 影响因子： 0.72
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-3626
- 国内刊号： 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
保留二尖瓣全瓣生物瓣替换术对左心功能的影响
目的:前瞻、对比、双盲的研究保留二尖瓣全瓣生物瓣替换术对左心功能的影响.方法:选取2012年5月至2014年2月到我院就诊的适合二尖瓣生物瓣替换术的患者共41例,随机分为2组:A组(实验组),术中保留二尖瓣全瓣及瓣下结构;B组(对照组),术中不保留二尖瓣瓣下结构.术前、术后10 d、术后6个月行超声心动图检查,评价左心功能.结果:病例无手术死亡,无左室破裂,无瓣膜功能障碍等严重并发症.A组发生1例术后食道超声提示左室流出道(left ventricular outflow tract,LVOT) 梗阻及前叶前向运动.术后10 d经胸超声心动图,A组和B组在左室舒张末容积[left ventricular end diastolic diameter,LVEDD;A组:(52.8±7.1)mm,B组:(59.5±6.5) mm]、左室收缩末容积[left ventricular end systolic diameter,LVESD;A组:(43.7±6.1) nn,B组:(51.5±6.3) mm]、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF;A组:(52.8±5.5)％,B组:(48.1±6.8)％均有明显差异,A组明显优于B组(P＜0.05).术后6个月经胸超声心动图,左室舒张末容积[A组:(49.9±6.5) mm,B组:(61.3±6.3) mm]、左室收缩末容积[A组:(37.6±4.0)mm,B组:(49.3±6.1) mm]、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS;A组:(39.9±4.9)％,B组:(31.2±3.7)％,A组明显优于B组(P＜0.05).结论:保留二尖瓣全瓣的生物瓣替换术,技术安全可行,术后6个月左心功能的改善明显优于不保留二尖瓣瓣下结构的二尖瓣生物瓣替换术.
-
体部伽玛刀治疗原发性肝癌伴门静脉癌栓疗效分析
目的:探讨体部伽玛刀治疗原发性肝癌伴门静脉癌栓(portal vein tumor thrombosis,PVTT)的临床疗效.方法:在64例经CT/MR证实伴有PVTT的肝癌患者中,28例未接受任何治疗,36例针对癌栓行伽玛射线立体定向放疗,以50％～70％等剂量曲线覆盖靶区边缘,分割照射剂量3～5 Gy/次,5次/周,共治疗10次,总照射剂量30～50 Gy.并随访观察其近期疗效及生存率.结果:伽玛刀治疗组癌栓治疗有效率(objective response rate,ORR)为63.9％,其中完全缓解(complete response,CR)9例(25％),部分缓解(partial response,PR) 14例(38.9％),疾病稳定(stable disease,SD)6例(16.7％),疾病进展(progressive disease,PD)7例(19.4％).患者1年生存率为36.1％,2年生存率为8.3％,中位生存期为10个月.而未治疗组病灶稳定3例(10.7％),进展25例(89.3％),1年和2年生存率均为0,中位生存期为3个月.结论:伽玛刀治疗原发性肝癌伴PVTT安全有效、毒副反应轻,能延长患者生存期.
-
超微型内窥镜系统行离体猪肝内细小胆管成像研究
目的:评估超微型内窥镜系统对离体猪肝肝内细小胆管(直径＜1 mm)成像的可行性,并探讨其临床价值.方法:取新鲜离体猪肝10具,在实时图像监测下,经肝胆总管处缓慢地插入超微型光纤(外径=0.8 mm),逐级观察肝叶、肝段胆道结构、黏膜形态并记录图像,直到不能再进入,固定光纤后行胆道CT三维重建,获得超微型光纤到达小胆管直径数据.结果:超微型内窥镜系统可清晰显示猪远端肝内细小胆管,CT三维重建证实超微型内窥镜系统能观察到直径＜1mm的肝内细小胆管.结论:超微型内窥镜系统对远端肝内细小胆管成像可行,在肝内细胆道疾病方面诊治方面有潜在价值.
-
重庆市7～16岁儿童青少年代谢综合征组分的调查及影响因素的分析
目的:探讨重庆市7～16岁儿童青少年代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的组分及其影响因素,为有针对性的干预提供流行病学依据.方法:按照整群随机抽样方法抽取重庆市5所中小学7～16岁在校生共4481名进行代谢指标及影响因素问卷调查.按照体质指数(body mass index,BMI)法分为正常组、超重组、肥胖组.对各代谢指标进行分析,对MS影响因素进行Logistic回归分析,并比较MS影响因素的性别差异.结果:(1)重庆地区7～16岁儿童青少年总超重率9.8％,其中男生12.0％,女生7.4％.总肥胖率5.4％,其中男生7.3％,女生3.4％.男生超重率、肥胖率均高于女生(P＜0.05).(2)随着BMI的增加,收缩压、舒张压、甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇、腰围有升高的趋势,高密度脂蛋白胆固醇呈降低趋势(P＜0.05).(3)MS总体检出率为0.45％.肥胖组MS的患病率(6.9％)明显高于超重组(0.5％)和正常组(0.0％)(P＜0.05),且男生患病率高于女生(P＜0.05).肥胖儿童MS出现单项异常的检出率依次为高腰围(37.9％)、高甘油三酯(22.7％)、低高密度脂蛋白(19.7％)、高非高密度脂蛋白(7.4％)、高血压(4.4％)、高空腹血浆葡萄糖(2.0％).(4)MS影响因素logistic回归分析结果显示,有3个因素与MS相关:腰围、每次肉类摄入量、高血脂家族史均与MS的发病率呈正相关.男生高腰围、每次肉类摄入量≥3两检出率高于女生(P＜0.05).结论:MS组分异常已在重庆地区超重肥胖儿童青少年中发生.高腰围、高甘油三酯、低高密度脂蛋白是重庆肥胖儿童常见的代谢异常,应引起社会的重视.
-
双眼外直肌后徙联合下斜肌断腱术治疗集合不足型外斜视临床分析
目的:观察双眼外直肌后徙联合下斜肌断腱术矫正集合不足型外斜视合并下斜肌功能亢进的手术效果.方法:对2013年1月至2014年6月我院行双眼外直肌后徙联合下斜肌断腱术的44例患者术前术后的远近眼位、双眼视功能进行回顾性分析,随访至少6个月.结果:44例患者术后1～3 d正位率88.6％,术后6个月正位率77.2％.术后的视近、视远斜视度与术前比较,均明显减小,差异有统计学意义(P＜0.05).术后6个月获得同时机Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级功能及动态立体视人数较术前均增加,差异有统计学意义(P＜0.05).年龄＜12岁组患者立体视恢复明显优于年龄≥12岁组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:双眼外直肌后徙联合下斜肌断腱术可有效矫正集合不足型外斜视,通过斜视矫正术后患者的融合功能及立体视功能得到明显改善,越早手术治疗,术后远期效果恢复越好.
-
CHR抑制白假丝酵母菌生物被膜形成作用及机制探讨
目的:CGA47-66(chromofungin,CHR)是嗜铬粒蛋白A(chromograinin A,CGA)水解形成的生物活性多肽,已有研究证实其具有免疫调节和抗菌作用,本研究旨在进一步证实CHR抗白假丝酵母菌生物被膜形成的作用,探讨其作用机制.方法:根据CLSI-M27-A3参考方法检测CHR对浮游状态下白假丝酵母菌的低抑菌浓度,菌落计数法及XTT比色法验证CHR是否具有抑制生物被膜形成的作用,并确定CHR对白假丝酵母菌的BIC50,通过菌落计数法和倒置显微镜证实CHR抗真菌粘附作用,并使用qRT-PCR检测粘附基因Hwp1的表达情况从而进一步验证其作用的分子机制.结果:CHR对浮游状态白假丝酵母菌的MIC值为10～20 μmol/L,并证实CHR具有抗白假丝酵母菌生物被膜形成作用,BIC50值为80～160 μmol/L,且具有浓度依赖性;qRT-PCR检测CHR下调C.albicans Hwp1基因的表达,160μmol/L CHR处理组相对Hwp1基因表达量通过2-△△C值计算为(0.089 5±0.036 0),无处理组Hwp1基因的表达是CHR组的11.17倍,差异具有统计学意义(t=44.008,P=0.001).结论:CHR具有抑制白假丝酵母菌生物被膜形成的作用,其机制可能与CHR减少白假丝酵母菌细胞的粘附有关.本研究为CHR在抗真菌材料方面的应用提供了理论基础.
-
脉冲高强度聚焦超声联合微泡介导兔肝VX2移植瘤细胞凋亡的研究
目的:探讨脉冲高强度聚焦超声(pulsed high intensity focused ultrasound,PHIFU)联合微泡(microbubbles,MBs)以非热效应导致兔肝VX2移植瘤细胞凋亡.方法:建立兔肝VX2移植瘤模型,将36只荷瘤兔随机分为对照组、PHIFU辐照组和PHIFU+MBs辐照组.PHIFU辐照参数为频率0.87 MHz、空间峰值声强(spatial peak intensity,ISP)5900 W/cm2、脉冲重复频率100 Hz、占空比15％、辐照时间90 s,MBs采用0.1 mL/kg SonoVue.HIFU辐照后ld处死动物,取部分肿瘤组织采用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化染色检测PCNA抗原,剩余肿瘤组织进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色观察.结果:对照组、PHIFU组和PHIFU+MBs组经TTC染色后,肉眼可见肿瘤组织被均匀红染,表明各组均无肉眼可见的凝固性坏死形成.TUNEL法检测发现,对照组发现少量阳性染色的肿瘤细胞,PHIFU组和PHIFU+MBs组见较多细胞核棕褐色染色的阳性细胞.PCNA检测结果表明,对照组靶区见大量着色部位在肿瘤细胞核的阳性细胞,而PHIFU组和PHIFU+UCA组阳性染色细胞少.PHIFU辐照组和PHIFU+UCA辐照组凋亡指数(apoptosis index,AI)比对照组高,增殖指数(proliferating index,PI)比对照组低(P=0.000);PHIFU+MBs辐照组AI高,PI低(P=0.000).结论:PHIFU联合MBs可促进兔肝VX2移植瘤细胞凋亡.
-
siRNA抑制Cyclophilin A基因对喉鳞癌细胞Hep-2增殖和转移的影响
目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制亲环素A(cyclopilin A,CypA)的表达对喉癌细胞株Hep-2增殖和侵袭迁移的影响及相关机制.方法:实验分为3组:化学合成的靶向CypA的siRNA转染喉癌细胞Hep-2(CypA siRNA组),转染阴性对照NC siRNA的细胞(NC siRNA组)和对照组(control组).运用real-time PCR(RT-PCR)检测CypA及CD147mRNA的表达,Western blot检测CypA、CD147的蛋白表达.MTT法检测CypA对细胞生长曲线的影响;平板克隆形成实验检测CypA在喉癌细胞增殖中的作用;Transwell法检测CypA在喉癌细胞侵袭迁移中的作用.结果:CypA siRNA转染后的喉癌细胞株Hep-2中CypA、CD147的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P=0.000).CypA siRNA转染后的Hep-2细胞生长缓慢,克隆形成被抑制,control组克隆数为(235.00±23.90)、NC siRNA组为(240.67±10.07)、CypA siRNA组为(129.33±14.22)(F=40.460,P=0.000);转染后Hep-2细胞的迁移(F=497.124,P=0.000)、侵袭(F=129.787,P=0.000)能力明显降低.结论:CypA表达下调后可抑制喉癌细胞株Hep-2的增殖和侵袭迁移能力,其机制可能与抑制CD147的表达有关.
-
人乳头瘤病毒L1壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达及其临床意义
目的:研究人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)L1壳蛋白在各级宫颈病变脱落细胞中的表达及其临床意义.方法:选择2013年7月至2015年3月,重庆市妇幼保健院宫颈病专科薄层液基细胞学检测(thinprep cytologic test,TCT)结果异常和/或高危型HPV-DNA检测[采用第二代杂交捕获法(hybrid capture Ⅱ,HC-2)]结果阳性,且阴道镜检查疑有宫颈病变的妇女共248例,所有研究对象均行HPV L1壳蛋白检测及宫颈活检,并对患者进行跟踪研究.结果:在正常宫颈、宫颈上皮内病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN) Ⅰ级、CIN Ⅱ/Ⅲ级和宫颈鳞癌(squamous cell carcinoma,SCC)患者中,HPV L1壳蛋白阳性率分别为13.04％(3/23)、28.36％(19/67)、11.92％(18/151)、0％(0/7),其中CIN Ⅰ组L1壳蛋白阳性表达率明显高于CIN Ⅱ/Ⅲ 组,差异有统计学差异(x2=8.898,P=0.003).将患者以年龄30岁为界分为2组,在年龄＜30岁组(共76例)中,各组织学分组之间L1壳蛋白阳性表达率差异均无统计学意义;在年龄≥30岁组(共172例)中,CIN Ⅰ组(13/45,28.89％)与CIN Ⅱ/Ⅲ组(12/104,11.54％)比较L1壳蛋白阳性表达率明显增高,差异有统计学意义(x2=6.772,P=0.009);HPV负荷量＞100 RLU/CO组HPVL1壳蛋白表达率(27/82,32.93％)高于HPV负荷量≤100 RLU/CO组(13/166,7.83％),差异有统计学意义(x2=25.553,P=0.000);83例CIN患者随访12～24个月,HPV L1壳蛋白表达阴性组病变进展率(23/62,37.10％)大于阳性表达组(2/21,9.52％),差异有统计学意义(x2=4.432,P=0.035).结论:HPV L1壳蛋白在CIN Ⅱ/Ⅲ中阳性表达率较CIN Ⅰ呈下降趋势,HPV L1壳蛋白阳性表达组病变进展率低,可作为预测宫颈病变进展风险的临床参考指标.
-
重庆地区尸食性蝇类侵袭建群时间初步研究及法医学意义
目的:研究重庆主城区嗜尸性蝇类侵袭动物尸体并在其上建立群落的时间规律,探索其在死亡相关案件中的应用价值与意义.方法:在野外引诱丽蝇产卵,连续培养3代,建立封闭群.处死大鼠后放置野外,在距尸体不同距离地点同时释放2个封闭群,并分别标记.比较不同距离的蝇类原始栖息地、不同季节、不同时刻死亡的动物尸体对蝇类侵袭及建群时间的影响,每组实验重复1次.结果:距离大鼠尸体100 m处释放的蝇类侵袭尸体的时间用M(Q1,Q3)表示是152.50(117.50,555.75) min,在尸体上建群的时间用M(Q1,Q3)表示是253.00(186.75,720.50) min,距离大鼠尸体1000m处释放的蝇类未对大鼠进行侵袭及建群.在比较不同时刻处死大鼠和不同季节处死大鼠对蝇类侵袭尸体及建群影响时:9时、14时及21时3组的侵袭时间分别是Tü9(100.67±61.59) min、Tii14(133.00±32.39) min、Tii21(683.83±119.38) min,建群时间分别是Tci(267.50±201.97) min、(198.00±39.41) min、(842.83±163.63) min.不同时刻的蝇类侵袭及建群时间的3组间比较(Tii+ vs.Tii14 vs.Tii21,H=11.942,P=0.003;T9 vs.Tci14 vs.Tci21,H=11.380,P=0.003)均存在差异,9时与21时的侵袭及建群时间比较(Tii9 vs.Tii21,H=8.308,P=0.004,Tci9Vs.Tci21,H=8.308,P=0.004)均存在差异,14时与21时的侵袭及建群时间比较(Tii14vs.Tii21,H=8,308,P=0.004,Tii14 VS.Tii21,H=8.308,P=0.004)均存在差异,21时蝇类对尸体的侵袭及建群时间长于9时与14时的时间.春、夏、秋3组侵袭时间及建群时间分别是(293.83±314.74、289.00±206.30、334.67±365.76,339.83±331.48、489.17±214.07、479.33±444.22) min.不同季节对蝇类侵袭及建群的3组间比较不存在统计学差异(Tii春vs.Tii夏vs.Tii秋,H=0.573,P=0.751;Tci春 vs.Tci夏 vs.Tci秋,H=1.556,P=0.459),季节对蝇类的侵袭及建群时间无明显影响.结论:位于尸体不同距离的蝇类对尸体的侵袭及建群时间有影响,较远的距离会延迟蝇类对尸体的侵袭及建群,甚至不发生侵袭;重庆地区季节的变化对蝇类侵袭尸体及建群时间没有明显的影响,主要是白天和黑夜的差异,黑夜会延长蝇类侵袭尸体及建群的时间.本研究结果对命案现场中根据尸体的具体情况准确推断死亡时间有指导意义.
-
LPS通过p38/MAPK通路和NF-κB的活化诱导RAW264.7细胞HIF-1α的表达
目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在低氧条件下对RAW264.7细胞低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)表达的影响及其可能的调控机制,探讨对牙周炎破骨细胞吸收的影响.方法:观察低氧条件下,用1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞,应用Western blot以及qRT-PCR检测HIF-1α的表达和P38/丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)和核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路活化情况.干扰HIF-1α后在低氧中用LPS诱导RAW264.7细胞.ELISA检测炎症因子TNF-α、PGE2、IL-13以及qRT-PCR检测破骨细胞分化标志基因肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,Traf6)、活化T细胞核因子c1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic1,Nfatc1)、组织蛋白酶K(cathepsin K,Ctsk)、cFos、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,Trap)的变化.结果:低氧条件下LPS诱导RAW264.7细胞3、6、9、12h分别与1h比较,HIF-1α表达量明显增加(P=0.000、P=0.000、P=-0.000、P=0.000).在低氧条件下,LPS刺激RAW264.7细胞HIF-1α mRNA的相对表达量水平(0.81±0.14)高于单纯的低氧组(0.21±0.05),2组比较存在统计学差异(P=0.000).低氧条件下LPS上调了p38的磷酸化水平(-0.009),抑制p38以及NF-κB的表达明显抑制HIF-1α的表达(P=0.011、P=0.039).干扰HIF-1α的表达明显抑制了低氧条件下LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2(94.46±8.89)和IL-1β(83.96±7.71)的生成,分别与siRNA-Control组的PGE2(134.66±21.11)和IL-1β(121.34±20.42)比较,2组比较存在统计学差异(P=0.008、P=0.008);同时也抑制了低氧条件下LPS诱导的破骨细胞标志基因Traf6、Nfatc1的mRNA相对表达量(0.50±0.20,0.60±0.30)的表达,分别与siRNA-Control组(1.00±0.00、1.00±0.00)比较(P=0.000、P=0.000).结论:LPS在低氧条件下通过p38/MAPK通路和NF-κB的活化诱导了RAW264.7细胞HIF-1α表达,干扰HIF-1α的表达能够抑制低氧条件下LPS诱导的炎症因子的生成以及破骨细胞的分化.
-
DNMT1在不同年龄组人群角质形成细胞中的表达及意义
目的:检测不同年龄组非曝光部位表皮组织的角质形成细胞中DNA甲基化转移酶l(DNA methyhransferase 1,DNMT1)蛋白和mRNA的表达水平,初步探讨DNMT1在人表皮年龄衰老过程中的意义.方法:收集40例手术患者非曝光部位的表皮标本,根据年龄分为4组:儿童组(0～14岁)、青年组(15～39岁)、中年组(40～59岁)和老年组(60岁及以上),用免疫组织化学、RT-PCR及Western blot检测每例表皮组织中DNMT1蛋白和DNMT1 mRNA表达量,分析不同年龄组之间DNMT1表达水平的差异.结果:DNMT1主要表达于各组人表皮角质形成细胞的细胞核内,角质形成细胞DNMT1蛋白及mRNA表达依次在儿童组、青年组、中年组和老年组中呈下降趋势.儿童组、青年组、中年组和老年组角质形成细胞DNMT1阳性表达率分别为84.7％、69.4％、51.1％、12.3％,表达率得分分别为:23.10分、19.30分、14.40分和3.80分,采用LSD检验法对4组间进行两两比较,表明角质形成细胞DNMT1阳性表达率随年龄的增长呈递减趋势(均P＜0.05).DNMT1 mRNA相对表达量为1.347、0.817、0.567和0.202,DNMT1蛋白的相对表达量为1.102、0.494、0.320和0.088,统计学分析DNMT1随着年龄的增长表达量降低(两两对比,均P＜0.0S).结论:随着年龄的增长,DNMT1的表达水平下降,推测入表皮衰老可能与DNMT1的表达下调有一定的关联.
-
星形胶质瘤细胞GFAP的缺失对细胞周期相关蛋白的影响
目的:应用RNA干扰(RNAi)方法下调胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)基因表达,研究GFAP对星形胶质瘤细胞U251细胞增殖的影响及可能的作用机制.方法:采用小分子RNA干扰(Small interfering RNA,siRNA)技术特异性的干扰U251细胞中内源性GFAP的表达,并通过RT-PCR和Western blot技术检测U251细胞中GFAP的mRNA和蛋白表达水平,确定干扰效率.Western blot技术检测si-NC和si-GFAP转染48 h后,U251细胞中GFAP、CREB、cyclinD1、CDK2、CDK4、CDK6、p15、p18、p27、Bax、Bcl-2和Caspase 3蛋白表达变化;MTT检测各组的细胞增殖情况.结果:(1)在U251细胞中特异性的抑制GFAP表达,抑制细胞增殖,降低细胞总RNA和总蛋白含量(si-NC组vs.si-GFAP组:t=3.962,P=-0.017;t=3.833,P=0.019).(2)在U251细胞中干扰GFAP表达,显著性抑制CREB(si-NC组vs.si-GFAP组:t=4.834,P=0.008)、cyclin D1(si-NC组vs.si-GFAP组:t=3.610,P=0.023)、CDK2(si-NC组vs.si-GFAP组:t=6.678,P=0.003)和CDK4(si-NC组vs.si-GFAP组:t=4.530,P=0.011)的表达水平;并且显著性提高细胞周期依赖性激酶抑制因子pl8(si-NC组vs.si-GFAP组:t=-3.339,P=0.029)和p27(si-NC组vs.si-GFAP组:t=13.859,P=0.000)的蛋白表达水平.(3)MTT检测结果显示24和48 h时si-GFAP组细胞生长速度明显低于si-NC组(si-NC组vs.si-GFAP组:t=6.389,P=0.000;t=6.058,P=0.000),差异有统计学意义.(4)在U251细胞中抑制GFAP表达,对凋亡相关蛋白Bax(si-NC组vs.si-GFAP组:t=-0.657,P=0.547)、Bcl-2(si-NC组vs.si-GFAP组:t=-0.991,P=0.378)和Caspase 3 (si-NC组vs.si-GFAP组:t=-1.848,P=0.138)的表达无明显影响.结论:在U251细胞中抑制GFAP的表达,影响细胞周期相关蛋白的表达,从而抑制细胞的增殖.
-
基于iTRAQ技术筛选肝癌转移相关差异蛋白
目的:通过对不同转移潜能的肝癌细胞系的差异蛋白组学研究,以筛选鉴定出与肝癌转移相关的差异表达蛋白.方法:3株具有相同遗传背景、不同转移潜能的肝癌细胞系MHCC97-L、MHCC97-H及HCCLM3作为研究材料,经过收集胞质蛋白,浓缩、酶解、脱盐并用同位素标记相对和绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)对其进行标记,应用二维液相色谱串联质谱技术对肽段进行鉴定,得到的结果与数据库进行比对,对蛋白进行注释.基于WebGestah数据库对差异表达的蛋白进行GO (gene ontology)功能分析和通路分析以筛选与肝癌转移相关的目标蛋白.并用Western blot对3个关键蛋白(PLEC、SHMT2、LDHA)进行验证.结果:经过iTRAQ标记并质谱检测分析,共发现鉴定1 170个蛋白,其中在L/H(MHCC97-L/MHCC9-H)组鉴定发现47个差异表达蛋白,在M/H(HCCLM3/MHCC97-H)组鉴定发现65个差异表达蛋白.生物信息学分析显示L/H和M/H组差异表达的蛋白主要参与酶催化和细胞间粘附及细胞代谢的过程.应用Western blot在蛋白水平上的验证,PLEC在高转移细胞株MHCC97-H和HCCLM3中表达上调,SHMT2在HCCLM3中表达上调,LDHA在MHCC97-H中表达上调.结论:在本研究中应用iTRAQ标记高通量的蛋白质组学技术对3株不同转移潜能的肝癌细胞系的差异表达蛋白进行检测和鉴定分析,发现PLEC和SHMT2蛋白是两种新的与肝癌转移可能相关的蛋白.
-
欧亚旋覆花总黄酮对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用
目的:探讨欧亚旋覆花总黄酮(Inula britannica flower total flavonoids,IBFTF)对D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用.方法:随机将昆明小鼠分为6组(每组10只):空白对照组,模型组,维生素E(vitamin E,VE)组,欧亚旋覆花总黄酮低、中、高剂量组.空白对照组给予颈背部皮下注射0.3 mL生理盐水,其余组均给予等体积500 mg/kg D-半乳糖,每日1次,连续8周.造模第3周,低、中、高剂量组分别灌服0.5 mL欧亚旋覆花总黄酮100、200和400 mg/kg,VE组灌服等体积维生素E 100 mg/kg,空白对照组和模型组灌服等体积生理盐水,每日1次,连续6周.检测小鼠体质量、胸腺指数和脾指数,同时测定血清中抗氧化酶活性如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)等衰老指标.β半乳糖苷酶染色试剂盒检测小鼠海马组织中衰老相关的β半乳糖苷酶含量.结果:低、中、高剂量组小鼠体质量明显高于模型组,差异具有统计学意义(P=0.053、P=0.001、P=0.000);低、中、高剂量组小鼠胸腺指数和脾指数明显高于模型组(均P=0.000);低、中、高剂量组小鼠血清中SOD、CAT和GSH-Px活力明显高于模型组,其MDA含量低于模型组(均P=0.000);低、中、高剂量组小鼠海马组织β半乳糖苷酶(senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-gal)阳性率明显低于模型组,差异有统计学意义(P=0.001、P=0.000、P=0.000).结论:欧亚旋覆花总黄酮是一种天然抗氧化剂,可延缓D-半乳糖诱导的模型小鼠的机体衰老.
-
顺铂调控舌鳞癌细胞增殖和迁移能力的研究
目的:探讨舌鳞癌细胞(human tongue squamous cell carcinoma cells,sCc)经顺铂化疗后的增殖和迁移能力的改变,及其对细胞增殖相关Nanog基因表达的调控作用.方法:本文应用5、4、3.5 μg/mL顺铂分别作用于舌鳞癌细胞系SCC-15,处理时间分别为24、48、72 h(实验组),未经顺铂处理的细胞为对照.流式细胞仪检测细胞凋亡率,qRT-PCR及Western blot检测2组细胞中Nanog的表达情况,划痕实验检测2组细胞迁移能力的变化.结果:经顺铂处理后细胞凋亡率增加,48 h后凋亡率显著增加(P=0.000).qRT-PCR结果显示24、48、72 h组的Nanog基因相对表达量在顺铂处理的细胞中逐渐增加,48 h Nanog基因表达量与对照组相比,差异具有统计学意义(P=0.000).Western blot实验结果进一步验证了顺铂处理的舌鳞癌细胞中Nanog蛋白相对表达量较对照组高(P≤0.001).划痕实验显示经顺铂作用时间越长的实验组,细胞迁移速率越高.结论:顺铂化疗对舌鳞癌细胞增殖能力和迁移能力有调控作用.
-
双下肢远端缺血后适应减轻SD大鼠脑缺血再灌注损伤及相关VEGF、MMP-9表达的影响
目的:通过建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,探讨肢体远端缺血后适应(limb remote ischemic postconditioning,RIP)对脑缺血再灌注损伤(ischemic/reperfusion,VR)的影响.方法:将98只SD雄性大鼠随机分组,分为3大组:假手术组(n=14),对照组(缺血再灌注模型组,n=42),RIP组(缺血再灌注+肢体远端缺血后适应组,n=42),对照组和RIP组根据缺血再灌注之后不同时间再次分为12、24、72 h组,每组各14只.Longa评分法对其进行评分,HE染色、磁共振弥散加权像计算梗死体积百分比.测定缺血半暗带周围血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9 (matrix metaUoproteinase-9, MMP-9)表达变化.结果:RIP组大鼠24 h后Longa评分较对照组有统计学意义(P=0.000)、RIP组大鼠HE染色脑梗死百分比在12、24、72 h均较对照组减少,差异有统计学意义(P=0.000).免疫组织化学显示RIP组12、24、72 h在缺血半暗带周围VEGF表达均较对照组高,MMP-9表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P=0.000).结论:RIP减少缺血再灌注后24h神经功能评分,减少梗死体积,具有减轻脑缺血再灌注损伤作用;远端缺血后适应明显增加缺血半暗带VEGF的表达,减少MMP-9的表达,表明RIP的神经保护作用与脑梗死后VEGF、MMP-9表达密切相关.
-
全生物可降解型封堵器封堵猪房间隔缺损的实验研究
目的:评估全生物可降解型房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)封堵器封堵猪ASD的疗效、组织覆盖情况、降解情况及生物相容性等.方法:15只小型猪经外科开胸术后在心脏超声指引下行房间隔穿刺术,并置入全生物可降解ASD封堵器.术后行心脏超声检查观察封堵效果并测量封堵器大小,于1个月、3个月、6个月及9个月各处死3只,大体肉眼观察组织覆盖情况并测量覆盖面积与封堵器双盘面积;苏木素-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察周围组织的炎症反应,酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定猪血清白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平.结果:除了3只建模失败,其余12只均建模成功并进行了ASD封堵;术中及术后未出现感染、封堵器脱落等并发症.超声结果显示封堵器位置良好,无残余分流.大体解剖标本可见置人ASD封堵器术后1月新生组织部分覆盖封堵器装置表面,术后3个月、6个月及9个月均已完全覆盖.与降解前的封堵器扇面直径比较,术后1个月、3个月及6个月均降低(P＜0.05),且随时间延长降低明显,差异有统计学意义(P＜0.05);与降解前的封堵器高度比较,除了术后1个月无明显差异(P＞0.05),术后3个月、6个月均降低(P＜0.05).与降解前封堵器双盘面积比较,术后1个月、3个月、6个月及9个月均降低(P＜0.05),且随时间延长降低明显,差异有统计学意义(P＜0.05).术后1个月、3个月封堵器周围组织炎症反应明显,在术后6个月、9个月消失;术后3个月及6个月血清IL-6浓度较术前升高(P＜0.05),术后9个月降至正常(P＞0.05),差异有统计学意义.结论:全生物可降解型ASD封堵器在猪ASD模型封堵技术成功率高,组织覆盖迅速,生物相容性与降解效果良好,是一种比较理想的可降解封堵器.
-
TNF-α对SD大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响及其相关分子机制的探讨
目的:探讨炎症因子转化生长因子(transforming growth factor-α,TNF-α)对SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响及相关的分子机制.方法:将生长良好的第3代(P3)SD大鼠BMSCs分为对照组(Con组)、成脂诱导组(Ad组)和10 ng/mL TNF-α干预成脂诱导组(Ad+TNF-α组),每组各接种5块6孔板,培养14 d后,收集各组细胞的RNA和蛋白质.于第14天时间点处进行油红O染色和异丙醇萃取,酶标仪490 nm处检测吸光度(absorbance,A)值,观察各组成脂分化的程度.qRT-PCR检测各组基因Wnt10b、前体脂肪细胞因子-1 (preadipocyte factor-1,Pref-1)、CCAAT区增强子结合蛋白-α(CCAAT/enhancer-binding protein-α,C/EBP-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-y,PPAR-γ)、脂肪酸结合蛋白-4(fatty acid binding protein-4,FABP-4)的mRNA表达水平.Western blot检测第14天3组基因β联蛋白(β-catenin)、PPAR-y、C/EBP-α、FABP-4的蛋白表达水平.结果:TNF-α可以明显抑制SD大鼠BMSCs的成脂分化.在Ad+TNF-α组,油红O染色明显低于Ad组,异丙醇萃取后A值检测也明显低于Ad组(0.360±0.035 vs.0.770±0.025,P=0.000).qRT-PCR结果显示,在Ad+TNF-α组,Wnt10b、Pref-1的mRNA水平(17.050±2.706,4.135±0.280)明显高于Con组(P=0.019,P=0.003)和Ad组(0.575±0.065,0.514±0.060) (P=0.020,P=0.006),而C/EBP-α、PPAR-y、FABP-4的mRNA水平(0.200±0.012,0.768±0.030,0.883±0.048)明显低于Ad组(2.965±0.455,2.330±0.211,3.847±0.171)(P=0.019,P=0.000,P=0.001).Western blot结果显示,诱导14 d后,Ad+TNF-α组的C/EBP-α、PPAR-γ、FABP-4蛋白表达水平(0.586±0.013,0.356±0.008,0.118±0.002)明显低于Ad组(1.082±0.018,0.840±0.112,1.094±0.038)(均P=0.000).在Ad+TNF-α组,磷酸化β-catenin(P-β-catenin)的蛋白水平(0.648±0.005)明显低于Ad组(3.376±0.211)(P=0.000).结论:TNF-α抑制SD大鼠BMSCs成脂过程分化相的作用可能与Wnt/β-catenin信号通路活性的增加和Pref-1的高表达有关,由此BMSCs的成脂分化停留在了前体脂肪细胞阶段.
-
磁性抗体转染结肠癌干细胞的佳浓度探索
目的:通过对不同质量浓度的磁性抗体体外转染结肠癌干细胞后的系列研究,探索佳转染浓度.方法:将磁性抗体含铁浓度分别设定为5、10、25、50、75、100 mg/L,分别转染结肠癌干细胞,采用普鲁士蓝染色观察细胞内铁颗粒,原子吸收光谱仪法测定细胞铁含量并检测细胞活性,MR成像检测细胞信号强度变化.结果:各组细胞内铁含量组间比较采用单因素方差分析,组间差异具有统计学意义(F=71.709,P=0.000),在α=0.05的检验水准下,可以认为各组间均数不完全相同,进一步采用单因素方差分析LSD法(双侧检验)进行组间均数多重比较,结果显示,50 mg/L组与5 mg/L组、10 mg/L组、25 mg/L组相比,差异均有统计学意义(P=-0.000,P=0.000,P=0.000),但与75 mg/L组、100 mg/L组比较,差异均无统计学意义(P=0.607,P=-0.419).细胞活性检测组间比较采用单因素方差分析,组间差异具有统计学意义(F=69.306,P=0.000),在α=0.05的检验水准下,可以认为各组间均数不完全相同,进一步采用单因素方差分析LSD法(双侧检验)进行组间均数多重比较,结果显示,50 mg/L组与75mg/L比较,细胞活性差异无统计学意义(P=0.134),与5 mg/L组、10 mg/L组、25 mg/L组、100 mg/L组比较,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.008).T2WI信号强度采用单因素方差分析进行组间比较,组间差异具有统计学意义(F=3 180.748,P=-0.000),在α=0.05的检验水准下,可以认为各组间均数不完全相同,进一步采用单因素方差分析LSD法(双侧检验)进行组间均数多重比较,结果显示,50 mg/L组与75 mg/L、100 mg/L各组信号强度之间差异无统计学意义(P=0.945,P=0.960),与空白对照组、细胞对照组、5 mg/L、10 mg/L、25 mg/L各组信号强度相比,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000).由此可见,磁性抗体含铁浓度在一定范围内(5～25 mg/L)增加,结肠癌干细胞内铁含量逐渐增加,当磁性抗体含铁浓度为50 mg/L时达到饱和,且细胞活性下降,MR成像T2×WI序列图像显示信号强度明显降低.结论:当磁性抗体含铁浓度为50 mg/L时,可有效转染结肠癌干细胞,能被MR成像可视化.
-
ZHX3基因沉默对BMSCs中BMP2/smad通路的影响
目的:探讨转录抑制因子——锌指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)基因沉默对骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)中BMP2/smad通路相关因子骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、磷酸化smad1 (phospho-smad1(或pho-smad1))表达的影响.方法:构建ZHX3低表达慢病毒载体转染大鼠BMSCs,同时设阴性对照空载病毒转染BMSCs及空白对照不做任何处理的BMSCs.采用荧光显微镜下测定细胞转染率、免疫印迹技术鉴定转染效果、免疫细胞化学和免疫印迹技术定性定量检测ZHX3沉默时BMP2、pho-smad1和smad4的表达情况.细胞经成骨诱导液处理后进行碱性磷酸酶和茜素红染色检测各组细胞成骨能力.结果:①复苏培养的细胞具有BMSCs形态.②转染后,ZHX3低表达组和空载体对照组均表达绿色荧光,转染率分别为(93.18±4.41)％和(92.56±4.35)％,空白对照组不表达荧光,未见转染阳性细胞(F=1 123.464,P＜0.05).③免疫细胞化学及免疫印迹结果显示,BMP2、pho-smad1、smad4于3组细胞内均可见阳性表达,但ZHX3低表达组的BMP2、pho-smad1水平(0.383 0±0.006 3,0.329 1±0.025 8)明显高于空白对照组(0.306 2±0.011 6,0.209 0±0.017 0)和空载体对照组(0.291 2±0.022 2,0.180 0±0.018 7),P＜0.05;而ZHX3低表达组smad4的表达(0.107 4±0.004 3)显著低于空白对照组(0.380 1±0.023 6)和空载体对照组(0.353 7±0.016 7),P＜0.05.④空白对照组、空载体对照组、ZHX3低表达组均可见碱性磷酸酶阳性表达的细胞及矿化结节,但后者数量均小于前两者.结论:ZHX3基因低表达可延迟BMSCs体外成骨能力,可能通过调控BMP2/smad通路中的smad4来发挥作用.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 z1 |
