重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位: 重庆市教育委员会
- 主办单位: 重庆医科大学
- 影响因子: 0.72
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0253-3626
- 国内刊号: 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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HO-1在良、恶性乳腺组织中的表达及意义
目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在乳腺良恶性组织中的表达及意义.方法:分别用RT-PCR4免疫组化、Western blot蛋白印迹杂交检测正常乳腺组织10例;乳腺增生症18例;乳腺纤维腺瘤20例;乳腺癌25例组织中的HO-1mRNA及HO-1蛋白,并检测HO-1酶活性,探讨HO-1在乳腺肿瘤组织中表达及意义.结果:乳腺癌组织中的HO-1mRNA表达(0.3755±0.0628)明显高于正常乳腺(0.1199±0.0810)、乳腺增生(0.15021±0.0479)及乳腺纤维腺瘤组(0.1834±0.054)(t=2.2992,P<0.01),乳腺良、恶性肿瘤组织中的HO-1表达(23.4617±7.0136,34.2712±4.3423)均高于正常乳腺(4.2742±0.821)及乳腺增生组(6.2525±1.0032)(P<0.05).乳腺良、恶性肿瘤组织中的HO-1酶活性(1.1458±0.0458,1.4646±0.04892)均高于正常乳腺(0.8935±0.0271)及乳腺增生组(0.9375±0.0302)(P<0.01),乳腺癌组织中的HO-1酶活性高于纤维腺瘤(t=3.7546,P<0.01).结论:HO-1mRNA、蛋白表达以及HO-1酶活性的变化与乳腺良性病变及癌变存在相关性,提示HO-1对肿瘤细胞存在保护作用.
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不同孕产史药物流产临床效果分析
米非司酮配伍米索前列醇终止早孕是常用的一种简单,安全,痛苦小的避孕失败补救措施,但仍有部分患者可发生药物流产不全或者失败,为了更好地掌握药物流产和提高完全流产率,我们对近3年药物流产病例1100例进行回顾性分析,以说明孕产史对药物流产效果的影响.
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重组耻垢分枝杆菌经鼻粘膜免疫在小鼠体内的分布与表达
目的:探讨携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)的重组耻垢分枝杆菌经鼻粘膜免疫在小鼠体内的分布与表达.方法:将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因质粒(pUVl5)的重组耻垢分枝杆菌滴鼻BALB/c小鼠后2周,处死小鼠,观察肺、脾组织中荧光蛋白和耻垢分枝杆菌的分布;将携带GLS和IL-12质粒(pZM03)的重组耻垢分枝杆菌滴鼻免疫BALB/C小鼠3次,第1次免疫后4周,处死小鼠,用免疫组化检测肺、脾组织中GLS表达,用ELISA检测血清IL-12和肺泡灌洗液特异性SIgA的水平.结果:在BALB/c小鼠肺、脾组织中均检测到绿色荧光蛋白和耻垢分枝杆菌的分布,以及GLS的表达,并有血清IL-12水平升高和粘膜特异性SIgA的产生.结论:携带GFP的重组耻垢分枝杆菌可在肺和脾组织分布;携带GLS和IL-12的重组耻垢分枝杆菌经鼻粘膜免疫小鼠后,可引起呼吸道粘膜特异性抗菌免疫,以及GLS和IL-12的体内表达,为新型疫苗的研究奠定了基础.
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干细胞移植治疗动脉闭塞性硬化症的观察护理(附37例护理报告)
目的:为评价干细胞移植治疗动脉闭塞性硬化症的观察要点与护理效果.方法:将移植治疗前后患者疼痛程度、无痛行走时间、ABI和皮肤温度等作为观察要点,并统一评价标准;将护理人员进行培训前后的护理效果进行统计学处理.结果:规范化培训后护士的观察评估能力明显提高,P<0.001.结论:将观察要点标准化和对护士进行规范化培训能提高其观察评估能力,有助于提高干细胞移植治疗动脉闭塞性硬化症的护理效果,减少并发症.
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重庆地区儿童肥胖症患病率及其与血压的关系
目的:了解重庆地区城市和农村儿童肥胖的发病情况及其与血压的关系.方法:对重庆地区37785名7~17岁儿童进行流行病学调查.测量指标包括:身高、体重、血压.结果:(1)城市儿童中,超重13.16%,肥胖3.73%,农村儿童中,超重5.26%,肥胖0.90%.(2)男性儿童的超重肥胖患病率13.16%,女性8.39%.(3)超重肥胖组的收缩压及舒张压高于P90和P95者明显高于正常体重组.结论:重庆地区城市儿童超重肥胖患病率高于农村儿童,男性儿童超重及肥胖患病率高于女性,超重肥胖组儿童的血压升高者明显多于正常体重组,对超重肥胖儿童应加强行为干预.
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不同桩长对后牙核桩冠牙本质应力的三维有元分析
目的:通过比较不同长度桩的后牙桩核对牙本质应力分布的影响,以探讨后牙桩核修复时合理的桩的长度,从而指导临床进行合理设计.方法:通过磨片法结合数码相机获取断层图片的建模方法,建立了上颌第一磨牙近中腭尖缺损的桩核冠有限元模型,在其上进行加载,分析牙本质的应力大小和分布.结果:用中熔合金桩核修复的上颌第一磨牙近中腭尖缺损的烤瓷冠修复体,在桩长取其腭根根长的1/2,2/3两种不同长度的情况下,其剩余牙本质的Von mises应力,大主应力,小主应力的峰值均相同.且牙本质应力分布模式二者也完全一样.结论:中熔合金桩核修复的上颌第一磨牙近中腭尖缺损的烤瓷冠修复体,桩长度在其腭根根长1/2-2/3之间变化时,对其剩余牙本质应力及应力分部模式不产生任何影响.
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肺结核不典型X线平片及CT表现误诊分析
目的:对肺结核不典型的X线平片及CT影像特点进行分析以总结误诊原因.方法:30例肺结核均摄CR或DR胸部正侧位片及CT平扫,其中8例做增强扫描,全部经临床或病理确诊.结果:按CR、DR、CT表现分4型:1)结节/肿块型15例,边缘光滑者7例,毛糙者4例,浅分叶者5例;2)片状实变型8例,形态不规则,密度均匀,边缘模糊;3)肺不张型5例,表现为叶或段支气管狭窄或闭赛,肺体积缩小;4)中下肺大片实变影内有多个大气液平征型者2例,表现为2~3个液平征.结论:肺结核的发病出现新趋势,中老年结核增多.其影像表现多样,应根据各种征象进行综合分析,避免误诊.
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90例紫癜性肾炎临床分析
目的:分析过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患者临床特点和提示活跃的临床指标.方法:对90例确诊HSPN患者的临床及相关检查进行分析,并按照尿蛋白定量进行分组比较.结果:就诊时尿蛋白定量大于1g/天的患者占64.44%,肾病综合征占27.78%,持续性肉眼血尿常伴更严重的蛋白尿和低蛋白血症,随尿蛋白的增加,伴白细胞尿的比例增加.结论:青少年和成人HSPN临床表现多样,伴消化道症出血比例较高;随着尿蛋白增加,临床表现也逐渐加重.持续性肉眼血尿和白细胞尿提示HSPN病变严重且具有活动性.
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小鼠呼吸道合胞病毒感染肺TLR4表达与气道高反应性
目的:研究小鼠呼吸道合胞病毒(RSV)感染对肺TLR4表达与气道高反应性的影响.方法:生后6周16只清洁级BALB/c小鼠被同等分成RSV感染组和对照组,感染后1周两组经吸入相同递增浓度乙酰甲胆碱检测气道高反应性,使用RT-PCR方法测定肺组织TLR4mRNA表达,并对二者的相关性进行了分析.结果:在吸入乙酰甲胆碱浓度为3.2g/L时两组气道阻力差异有显著性(P<0.01).TLR4/β-actin的值分别为对照组0.239±0.055,RSV感染组0.361±0.102,两组间有显著性差异(P<0.05);TLR4 mRNA表达与吸入3.2g/L乙酰甲胆碱时的气道反应性呈正相关,相关系数为0.721(P<0.05).结论:小鼠RSV感染后肺TLR4表达增强并呈气道高反应性,二者之间有显著正相关.
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胰腺损伤28例诊治经验
胰腺固定于后腹膜,背靠脊柱,前有腹壁、胃和横结肠,因而外伤比较少见,以往胰腺损伤约占腹部创伤的0.2%~6%[1].近年由于交通事故增多,胰腺损伤有增多的趋势,约占腹部内脏伤的8%~12%[2],胰腺损伤是一种严重的腹部损伤,单纯胰腺损伤少见,约58%~98%胰腺损伤合并其他器官损伤[3],损伤后死亡率为14%~31%[4].从1985年至2005年我院共收治胰腺损伤28例,本文对其诊断治疗的经验总结如下.
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开颅手术术后血肿的危险因素探讨
目的:探讨开颅手术术后血肿(post-craniotomy hematoma,P C H)的危险因素,减少术后血肿的发生.方法:回顾分析颅内三大疾病(脑膜瘤、胶质瘤、动脉瘤)共687例的临床资料.结果:脑膜瘤术后发生血肿显著高于胶质瘤、动脉瘤,胶质瘤和动脉瘤的术后血肿发生情况无显著差异.老年病人术后血肿发生率高于中青年病人,有凝血功能异常的病人术后血肿发生率高.结论:神经外科开颅手术病人术后血肿发生率高,可能与手术种类、患者的年龄、术后凝血纤溶改变有关.
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铝过负荷致小鼠神经退行性变与氧化应激和抗氧化应激系统关系的研究
目的:研究铝过负荷致小鼠神经元退行性变与脑内氧化应激系统和抗氧化应激系统之间的关系.方法:采用氯化铝溶液(相当于400 mg/kg A3+)灌胃小鼠,每天1次,1周6天,连续3月,建立铝过负荷所致小鼠神经元退行性变模型.以被动回避性学习记忆能力和空间识别能力的改变、大脑皮层和海马总SOD、SOD2活性和MDA含量变化、以及海马病理学改变为观察指标.结果:铝过负荷能明显导致小鼠进行性被动回避性学习记忆和空间识别能力障碍;出现海马神经元核固缩和神经元丢失;脑组织总SOD和SOD2活性及MDA含量呈平行变化,出现先升高后降低趋势,但各时点SOD和SOD2活性及MDA含量均明显高于对照组.结论:铝过负荷明显致小鼠神经元退行性变,学习记忆能力下降.其机制可能与铝负荷引起脑内氧化应激反应和抗氧化应激系统动员失恒有关.
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冷疗预防化疗药物所致脱发的临床研究
目的:研究使用冷疗持续头颈部冷敷,对肿瘤患儿化疗药物所致脱发进行临床研究.为指导护理人员对患儿护理干预提供借鉴.方法:随机将40例肿瘤化疗病人分为两组,各20人.观察组:在化疗前20min将冷藏的冰帽罩在病人头部,持续头部冷敷.对照组用药期间不行头部降温.将获得资料进行统计学分析.结果:观察组20人中,无脱发12人.Ⅰ度脱发6人,Ⅱ度脱发2人,Ⅲ度脱发0人.而未用冷疗的20人均有不同程度的脱发,其中无脱发为0人,Ⅰ度脱发4人,Ⅱ度脱发6人,Ⅲ度脱发10人.结果:经统计学分析,两组差异有显著性意义(P<0.01).结论:冰帽持续头颈部冷敷,减轻化疗药物对毛囊的抑制和损害,达到预防和减轻脱发,为临床提供依据和实用价值,应推广使用.
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62例危重患者长途转诊院前急救研究
目的:探讨危重患者长途转诊院前急救的方法和效果.方法:回顾性分析62例危重患者长途转诊院前急救的临床资料.结果:62例患者中,除1例在转运途中发生心室颤动心跳骤停外,其余61例均平安到达目的医院.与转诊前比较,61例患者转诊后心率(HR)增加,平均动脉压(MBP)下降(P<0.05);动脉血氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)亦有所下降,但与转诊前比较,差异无显著性(P>0.05).结论:先进的设备、畅通的通迅、精湛的救护技术和集院前急救-院内急诊-急诊ICU于一体的完善急救医疗体系是长途转诊院前急救的有力保障.
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IL-18在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化
目的:研究人IL-18成熟蛋白(mhIL-18)在大肠杆菌中的高效的非包涵体表达以及纯化方案.方法:利用PCR方法扩增出 mhIL-18基因,构建融合型表达载体pPTYB1-IL18,转化入大肠杆菌ER2566中,IPTG诱导表达,优化表达条件,超声裂解细胞,采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达,亲和层析后用MTT法检测表达mhIL-18的活性.结果:成功构建载体并转化入ER2566后,经IPTG诱导,表达量可占菌体总蛋白的26%以上,其中80%以上的mhIL-18融合蛋白以可溶、有活性的形式存在.亲和层析后的mhIL-18纯度可达95%,具有显著的IL-18的生物学活性.结论:成功的在大肠杆菌中的高效以非包涵体表达mhIL-18,并具有显著的IL-18的生物学活性.
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应用AdEasy腺病毒载体系统构建人GST-π基因的重组腺病毒
目的:利用AdEasy腺病毒载体系统构建人谷胱甘肽转移酶-π(GST-π)基因重组腺病毒并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒.方法:从质粒中通过PCR的方法扩增出目的基因GST-π并带有适宜的酶切位点,双酶切后连pAdtrackCMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrack-GST-π,经酶切线性化后,采用电穿孔转化到含腺病毒骨架质粒AdEasy1的BJ5183大肠杆菌电感受态细菌中,挑选同源重组质粒AdEasy-GST-π,酶切线性化重组质粒并转染HEK293细胞包装成重组病毒颗粒,荧光显微镜观察绿色荧光表达.重组病毒上清乒乓交互感染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光表达.结果:经限制性内切酶检测和GFP表达证实成功地构建了携带GST-π基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒.结论:成功地构建了携带GST-π基因的重组腺病毒载体,为利用GST-π基因转染造血干细胞的基因治疗奠定了基础.
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心脏骤停抢救成功1例
心脏骤停是指由于各种原因引起心室颤动和心室停搏等而使心输出突然停止,是临床上紧急的情况.为提高复苏成功率,必须在心脏搏动停止4~6min内进行有效的心肺脑复苏,若抢救不及时,护理不当,病人将由临床死亡转为生物死亡.我科2006年4月成功救治1例因动脉硬化性闭塞症右下肢足趾坏疽作右下足前半掌截除术后心脏骤停10min患者,经呼吸机辅助呼吸,胸外心脏按压,建立人工循环,降颅内压,保护脑细胞,纠正左心衰,抗感染,维持水、电解质及酸碱平衡等治疗措施并实施整体护理,患者呼吸心跳恢复.现将护理体会介绍如下:
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两种不同方法治疗乳糜尿的临床效果评价
目的:评价硝酸银肾盂冲洗和肾蒂淋巴管剥离术对乳糜尿治疗的临床效果.方法:收集10年多来用两种方法治疗的病例共53例,其中硝酸银冲洗组22例,肾蒂淋巴管剥离术组31例,通过分析两组的乳糜尿复发率和复发时间的差异,对其临床效果加以评价和分析.结果:肾蒂淋巴管剥离术无论在乳糜尿的复发率还是复发时间方面,均明显优于硝酸银肾盂冲洗法(P<0.01).结论:硝酸银肾盂冲洗方法治疗乳糜尿,有简便易行和损伤小的优点,但复发率高,复发时间早;肾蒂淋巴管剥离手术治疗乳糜尿有更好的疗效.
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人MxA基因重组腺病毒载体的构建及鉴定
目的:克隆中国人MxA基因并构建含有MxA基因的重组腺病毒载体,为下一步应用其进行抗乙型肝炎基因治疗研究奠定基础.方法:从健康中国人外周血中分离单个核细胞,用Trizol试剂提取总RNA.应用逆转录PCR(RT-PCR)方法,以自行设计的引物扩增全序列MxA基因,应用基因克隆技术将MxA基因克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack(携带有绿色荧光蛋白基因)中,将线性化的pAdTrack-MxA和腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同电转化入新鲜感受态大肠杆菌BJ5183中,两者在其中完成同源重组,MxA重组腺病毒质粒经卡那霉素抗性鉴别和PacI酶切确证,验证正确的MxA重组腺病毒线性化转染入293细胞中包装成完整病毒颗粒,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达并检测重组腺病毒的病毒滴度.结果:重组腺病毒穿梭质粒pAd-Track-MxA连接成功,测序结果表明克隆的MxA基因序列与GenBank中人MxA基因序列仅有5个核苷酸不同但所编码氨基酸仅1个发生改变,且此氨基酸位于非功能区.MxA重组腺病毒经PacI酶切后产生30kb和4.5kb大小2个片段表明同源重组成功.重组腺病毒经293细胞包装后可观察到绿色荧光,收获病毒并测感染滴度为1.59×108(pfu/m1),具有较高感染效率.结论:我们已成功克隆了中国人的MxA基因,并成功构建重组腺病毒质粒,为进一步应用此基因进行抗乙型肝炎基因治疗研究奠定了基础.
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多西环素与阿奇霉素随机双盲对照治疗泌尿系统感染
目的:评价国产盐酸多西环素注射液治疗泌尿系统感染的有效性和安全性.方法:采用多中心随机对照双盲试验.试验药盐酸多西环素注射液静脉滴注,每次200mg,每日1次,疗程5~12天.对照药阿奇霉素每次500mg,每日1次,静脉滴注,疗程5~12天.结果:试验组与对照组可进行安全性评价者分别有63,60例;可进行疗效评价者分别有62,60例.试验组痊愈率90.32%、临床有效率100%、细菌清除率92.5%、对支原体的清除率为94.1%;对照组分别为73.33%,95%,88.9%,76.7%,两组比较,痊愈率差异有统计学意义(P<0.05).多西环素对革兰阳性菌体外抗菌活性优于其他几种抗生素.对革兰阴性菌的抗菌活性与其他几种抗生素相近或略优.不良事件的发生率分别为7.9%和6.7%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:国产多西环素抗菌谱广、抗菌活性强,是一个高效、安全的抗菌药物,治疗敏感菌及支原体引起的泌尿系统感染疗效确切,安全性好.
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原发性肝癌51例误诊分析
目的:分析原发性肝癌(HCC)误诊原因,增强HCC肝外表现的认识,提高HCC早期诊断水平.方法:回顾性分析51例误诊HCC临床资料.结果:误诊率19.4%(51/263);误诊病种为慢性肝炎、肝硬化、肝脓肿、胆囊炎、胆石症、急性梗阻性化脓性胆管炎、肝血管瘤、脑血管意外、美尼尔氏病、急腹症、消化性溃疡、胃肠炎、骨关节疾病、肺部感染肺癌、胸膜炎等.结论:HCC早期缺乏特异性表现,中晚期临床表现多样化,容易误诊;重视HCC特殊临床表现与转移灶症状,全面细致查体,动态观察实验室检查与影像学资料,可以减少误诊.
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围术期输注羟乙基淀粉对凝血-纤溶动态平衡的影响
目的:考察贺斯在围术期对凝血-纤溶系统的影响.方法:选择ASA Ⅰ~Ⅱ级的择期手术患者34例随机分为两组.经静脉分别输注贺斯1000ml或乳酸林格氏液(以下简称平衡液)1000ml,速度为25ml/Kg/h,然后用乳酸林格氏液500ml/h维持.测定病人的凝血酶活性(F.Ⅱa)、纤溶酶原活性(Plg).采用凝血-纤溶动态图仪测定其曲线的上升斜率(简称上斜)、下降斜率(简称下斜)及参数凝固启动时间(CST)、大凝固时间(MCT)、完全纤溶时间(WFT)、平衡时间(BLT)、大凝固程度(MCE).结果:纤溶酶原活性、凝血酶活性分别在输注完即刻或输注完2h表现为逐渐下降,但同组不同时点的比较无差异显著性(P>0.05),两组间同时点的比较亦无差异显著性(P>0.05).两组病人围术期凝血-纤溶动态平衡各参数输注前与输注后各时点比较均无差异显著性(P>0.05).结论:围术期快速输注贺斯1000ml,在扩容的同时,对凝血-纤溶系统的影响轻微,无过敏样反应发生,在围术斯可以安全的应用.
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靶向COX-2基因的RNA干扰治疗裸鼠胃癌的实验研究
目的:利用RNA干扰技术在裸鼠体内抑制COX-2基因表达,探讨RNA干扰对胃癌治疗的特异性和相关机制.方法:设计靶向COX-2基因的siRNA,构建重组表达质粒pTZU6+1-siRNA-COX-2并导入裸鼠皮下移植瘤,在体外诱导RNA干扰,采用RT-PCR法、免疫组化法同时检测处理组和对照组COX-2基因表达,Western blotting检测了与细胞增殖相关信号分子p53、PCNA及Ki67蛋白表达.结果:pTZU6+1-siRNA-COX-2导入裸鼠皮下移植瘤后14天,肿瘤体积明显变小.COX-2的mRNA表达由98.36%下调到43.44%,COX-2蛋白表达由86.24%下调至47.59%.PCNA及Ki67蛋白表达均明显下调.对照组各指标均无明显变化.结论:siRNA明显抑制了COX-2表达,并抑制肿瘤生长,这可能与上调p53蛋白和下调PCNA及Ki67蛋白表达有关.
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肾癌冻融抗原致敏树突状细胞介导的CTL对肾癌786-0细胞株的体外杀伤作用研究
目的:研究肾癌冻融抗原负载树突状细胞(DCs)诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肾癌786-0细胞株的体外杀伤效应;方法:利用人外周血体外经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、人白介素-4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导产生的DCs负载肾癌冻融裂解物后诱导产生特异性CTL,观察杀伤后肿瘤细胞的形态变化,MTT法测定细胞毒性试验,ELISA测定细胞因子的分泌.结果:(1)负载肾癌抗原的DCs能促进T细胞的增殖;(2)诱导产生的特异性CTL对肾癌细胞具有高杀伤率,显著高于非特异性T细胞(P<0.05);(3)肾癌冻融抗原能够上调DCs人白介素-12(rhIL-12)的分泌,提高抗肿瘤的作用.(4)杀伤后的肾癌细胞发生明显凋亡.结论:由肾癌冻融抗原致敏的DCs所诱导产生的抗原特异性CTL对肾癌786-0细胞株有明显的杀伤效应,提示DCs瘤苗具有为肾癌患者进行特异性过继免疫治疗的临床应用前景.
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多囊卵巢综合征患者妊娠后发生妊娠期糖尿病分析
目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者妊娠后发生妊娠期糖尿病(GDM)的分析.方法:对32例PCOS患者进行葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素测定,在OGTT 4项检测值中2项以上异常者诊断为GDM;1项异常者诊断为糖耐量低减(IGGT).结果:32例PCOS患者经OGTT试验有11例符合GDM诊断,占34.4%,8例符合IGGT诊断,占25.0%.28例对照组有2例符合GDM诊断,占7.1%,1例符合IGGT诊断,占3.6%.PCOS组和对照组比较,两组有显著意义(P<0.05).结论:PCOS患者是发生GDM和IGGT的高危人群,对相应患者应加强预防性监控.
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细胞外信号调节激酶通路激活抑制δ氨基酮戊酸-光动力疗法对SW480细胞的细胞毒作用
目的:探讨δ氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)诱导SW480细胞后的细胞外信号调节激酶(ERK)通路以及阻断此通路对细胞毒作用的影响.方法:将SW480细胞分为空白对照组、激光照射组、ALA组、ALA-PDT组(又分为30、60、90min组)及PD98059组,Western蛋白印迹检测各组细胞MEK和ERK1/2蛋白产物及磷酸化蛋白产物的表达;用MTT比色法分别检测各组细胞在不同时间段的光密度值,计算各组细胞存活率.结果:ALA-PDT后SW480细胞的ERK通路激活;阻断ERK通路后ALA-PDT对SW480细胞的细胞毒作用增强.结论:ERK通路的激活对ALA-PDT后SW480细胞起着保护作用;不同水平阻断ERK通路,可能成为增强ALA-PDT杀伤结肠癌细胞的新靶点.
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少见浆细胞病3例分析
浆细胞病是一组浆细胞克隆性增生性疾病.多发性骨髓瘤是为常见的克隆性恶性增生性浆细胞病,其临床和免疫学特征已为广大血液肿瘤学工作者所熟知,但其余浆细胞病较为少见,常给临床诊治带来困难.近1年来,我科先后收治3例,它们特征各一,现报告如下.
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PTEN表达下调对神经元胞内游离钙离子和神经元凋亡的研究
目的:探讨神经元缺血缺氧损伤再灌后,下调PTEN在阻断Ca2+内流及凋亡调控方面的保护机制.方法:建立神经元缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,用Western blotting检测PTEN水平,Fura2-AM法测定胞内Ca2+浓度,流式细胞术和AO/EB检测神经元凋亡.结果:与正常组相比OGD后细胞凋亡率和胞内Ca2+浓度显著升高(P<0.05);与对照组相比经shRNAspten干预后胞内Ca2+浓度和细胞凋亡率明显降低(P<0.05).结论:shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中,PTEN表达下调可阻断Ca2+内流并对缺糖缺氧诱导的细胞凋亡有拮抗作用,从而达到神经元保护的目的.
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可冲洗气管导管预防呼吸机相关肺炎的临床观察
目的:观察可冲洗气管导管在预防呼吸机相关性肺炎中的价值.方法:将经鼻气管插管行机械通气的患者随机分成观察组和对照组,观察组使用可冲洗式气管导管,对照组使用普通气管导管,分别记录两组呼吸机相关性肺炎发生情况.结果:观察组呼吸机相关性肺炎发生率为21.6%,发生时间13±4天,对照组发生率为48.7%,发生时间6±3天,存在着显著性差异.结论:正确使用可冲洗气管导管,可减少呼吸机相关性肺炎的发生.
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近交系大鼠心脏移植模型建立的实验研究
目的:建立近交系大鼠同种异位腹腔心脏移植动物模型.方法:采用改良的ono术式建立Brown Norway到Lewis大鼠的腹部异位心脏移植,将供心升主动脉、主肺动脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉进行端侧吻合.采用分别结扎右上腔和下腔静脉后一次性集束结扎法取心,行端侧血管吻合连续缝合法.结果:共进行了48例大鼠心脏异位移植,经过预实验16只的技术总结,正式实验32只手术成功率为96.88%,供心冷、热缺血时间和心脏复跳时间明显缩短,手术时间减少至60min.结论:加强供心的综合保护和围手术期的处理,是移植模型建立的关键因素.
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重庆市高校学生膳食结构调查研究
目的:采用膳食平衡指数(DBI)评价方法,了解重庆地区在校大学生膳食质量状况,为指导大学生合理膳食提供理论依据.方法:选取重庆市高等院校大学生基本情况和膳食调查资料,采用DBI评分及评价方法评价在校大学生膳食质量水平及存在的问题.结果:目前重庆市大学生膳食状况仍存在摄入不足和过量的问题;男、女生膳食质量存在着一定的差异;大部分学生膳食结构特点为B模式;经济因素对膳食质量无明显影响.结论:大学生仍存在膳食结构不平衡的问题,并存在性别差异,其主要影响因素并不是经济因素.模式B在人群中所占比例还较多,提示在校大学生的营养膳食状况还有值得改进之处.
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抚触与高压氧联合促进中重度缺氧缺血性脑病康复临床研究
目的:通过抚触与高压氧(HBO)联合促进中重度缺氧缺血性脑病康复的临床研究,早期预测神经系统后遗症,大限度地改善患儿的预后.方法:将日龄<2天的122例中、重度HIE新生儿随机分成4组:Ⅰ组(对照组脑活素)33例;Ⅱ组(抚触治疗组)29例,;Ⅲ组(HBO治疗组)32例;Ⅳ组(抚触HBO联合治疗组)28例,3、6、9、12、18个月均进行MDI(智力发育指数)、PDI(运动发育指数)检测.结果:中度HIE患儿抚触HBO联合治疗组MDI、PDI明显高于对照组(P<0.01),抚触治疗组、HBO治疗组亦高于对照组(P<0.05),随着干预时间延长MDI、PDI愈高,至18月时基本都能达到中等,其中抚触HBO联合治疗组疗效佳.对照组MDI、PDI也有一定进步,大多处于中下、临界状态.重度HIE患儿抚触治疗组、HBO治疗组MDI、PDI变化不大(P>0.05),对照组无变化,至18个月时MDI、PDI均处于智力缺陷,大多伴有不同程度的脑瘫.抚触与HBO联合治疗组患儿MDI、PDI随着干预时间延长,有一定进步,至18月时大多处于临界状态,与对照组差异显著(P<0.05).结论:抚触与HBO联合使用能有效促进中重度HIE患儿的智能发育.
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纳米羟基磷灰石/聚酰胺复合材料预防椎板切除后椎管狭窄、粘连的初步影像研究
目的:探讨影像学关于纳米羟基磷灰石/聚酰胺复合材料(n-HA/pA66)在预防椎板切除后并发症的表现,通过病理对照研究来提供临床指导.方法:建立22只家犬L5椎板切除实验模型,随机分成实验组和对照组.术后行CR和MRI扫描等影像方法与组织学的检测.结果:X线结果术后8周人工椎板与骨接触面开始模糊,至术后24周人工椎板与骨接触界面消失,密度增高,钙化;而对照组始终表现为腰5椎板棘突缺损,无致密影出现.组织学结果术后8周人工椎板内层的纤维组织-材料界面就出现较多成骨细胞团及骨小梁;对照组椎板缺损处是纤维瘢痕逐步形成,终与硬膜粘连.MRI对脊髓受压及硬膜粘连情况显示较好,实验节段与对照节段相比,椎管面积及矢状径有明显差异(P<0.05).显示出重建椎板节段椎管完整性得到恢复,与组织学一致.结论:n-HA/PA66复合材料能够阻止硬膜外粘连,X线及MRI对其检测准确、全面.
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高强度聚焦超声作用下兔脑的病理转归
目的:通过研究高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)对正常兔脑组织作用后损伤灶的病理转归,探讨其治疗脑肿瘤的安全性和可行性.方法:选取合适的HIFU作用剂量,对12只新西兰兔左右两侧脑组织分别照射5s和10s,于即刻、3天、7天、14天、28天及60天处死取材,大体和组织学观察照射后损伤灶的生物学特性及靶区组织病理学变化,并在电镜下观察损伤即刻的超微结构变化.结果:大体与光镜观察发现在作用时间为5s和10s的不同情况下,二者损伤程度以28天差异大,终10s区转归为神经胶质瘢痕,5s区则未见明显损伤痕迹.在HIFU损伤即刻,电镜下可见10s区出现细胞、血管结构完整性受破坏,而5s作用区仍具有完整性.结论:HIFU能定位损伤大脑深部组织,对浅表组织的影响较小.损伤灶的修复方式与照射的剂量有关,提示用适当剂量HIFU治疗脑肿瘤是安全的和可行的,为将来应用HIFU临床治疗脑肿瘤提供了实验依据.
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犬Marshall韧带和房颤的关系及其电隔离方法探讨
目的:研究犬Marshall韧带和心房颤动的关系,探讨电隔离Marshall韧带的方法.方法:对20只健康家犬干预Marshall韧带,根据干预方式不同,分为近中段剪断组(A组)及无水乙醇消融组(B组).将各组内及两组间干预前后房颤诱发率进行对比并作统计学分析处理.结果:A组干预前房颤诱发率为85.7%(6/7);干预后为71.4%(5/7).干预前后房颤诱发率无显著性差异,P>0.05.B组消融之前,房颤诱发率为81.8%(9/11);消融后为9.1%(1/11).干预前后房颤诱发率有显著性差异,P<0.01.干预前A、B两组间房颤诱发率无显著差异(P>0.05).干预后A、B两组间房颤诱发率有显著差异(P<0.05).结论:犬Marshall韧带在房颤的发生和维持中起到重要作用;Marshall韧带关键的消融部位是其在冠状静脉窦和/或左房入口处;消融终点是Marshall韧带电位完全消失.
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蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究
目的:研究蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响.方法:结扎SD大鼠左冠状动脉前降支30min后,松开结扎线再灌注6h制作心肌缺血再灌注模型.治疗(I30min/R6h+T)组于再灌注前5min静脉注射蛋白酶体抑制剂MG-132 0.75mg/kg,对照(I30min/R6h)组、假手术(Sham)组和缺血30min无再灌注(I30min)组注射与之相同容积的生理盐水,观察各组心肌梗死体积、心肌酶标志物水平变化.结果:与Sham组相比,I30min组的心肌梗死体积以及心肌梗死体积占左室心肌体积的百分比均明显增加(P<0.01),血浆肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(TnI)显著升高;再灌注前蛋白酶体抑制MG-132治疗则明显减小了缺血30min再灌注6h组大鼠的心肌梗死体积(P<0.05)以及降低了血浆心肌损伤标志物水平(P<0.05).结论:MG-132能有效地预防急性心肌梗死后的再灌注损伤.
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新生儿体重与孕妇年龄和体重指数的关系
目的:分析母亲年龄与新生儿出生体重的关系,以及孕期体重指数对新生儿出生体重的影响.方法:回顾性分析2005年1~12月在重庆医科大学附属第一医院产科出生的1301例新生儿体重;以及1999年1月至2003年7月在我院住院并进行阴道试产的初产妇576例,其中早孕期肥胖即体重指数(BMI)≥24有184例,分娩时肥胖(BMI)≥27有152例.观察出生体重与孕妇年龄和体重指数之间的关系.结果:在排出了妊娠合并糖尿病,非足月妊娠以及双胎、三胎妊娠,1301例新生儿平均出生体重为3396g,男婴平均出生体重为3453g,女婴为3397g,其中只有20~24岁组分娩的新生儿出生体重低于总体平均体重;早孕期肥胖孕妇巨大儿的发生率与对照组比较,差异有显著性,分娩时肥胖的产妇巨大儿的发生率与对照组比较,差异有显著性,早孕期体重增加≥15kg者巨大儿的发生率高于体重增加<15kg者,差异有显著性.结论:母亲年龄过小影响胎儿生长发育,孕期母亲体重增长过多可导致巨大儿发生率增加.
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维拉帕米对喉癌细胞株耐药逆转作用研究
目的:(1)研究喉癌多药耐药细胞株的耐药谱,为实现临床化学治疗个体化提供实验依据.(2)研究维拉帕米对喉癌细胞株耐药逆转浓度及耐药逆转谱.方法:以喉癌KBV200耐药细胞株为研究对象:(1)采用MTT法检测临床常用8种抗肿瘤药物对该细胞株的增殖抑制作用.(2)采用MTT法检测维拉帕米对喉癌细胞株耐药逆转作用.结果:(1)长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺、阿糖胞苷对KBV200耐药细胞株的抑制作用差,三尖杉酯、5-Fu及顺铂对KBV200耐药细胞株的抑制作用好.(2)维拉帕米(12.5μg/ml)能逆转长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺对KBV200耐药细胞株的耐药作用.结论:(1)KBV200耐药细胞株对长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺、阿糖胞苷5种药物有不同程度耐药.(2)维拉帕米(12.5μg/ml)对KBV200耐药细胞株的耐药逆转谱是长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺.
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抗抑郁药物对抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞的作用
目的:探讨抗抑郁药物对抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞的作用及机制.方法:采用孤养与CUMS联合建立抑郁模型,旷场分析和液体消耗实验进行行为学观察.对抑郁模型进行氟西汀、噻奈普汀、生理盐水灌胃30天,GFAP免疫组化观察星型胶质细胞数量.结果:应激+氟西汀组、应激+噻奈普汀组与应激+生理盐水组比较旷场分析、液体消耗试验及免疫组化图像分析均有显著性差异.结论:抗抑郁药物能促进抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞增生,星形胶质细胞可能参与抑郁症的病理生理机制.
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三维动态增强磁共振血管成像技术显示脊髓Adamkiewicz动脉
目的:探讨三维动态增强磁共振血管成像技术(3D-DCE MRA)显示脊髓Adamkiewicz动脉(AKA)的佳扫描参数、扫描延迟时间及图像重建方法.方法:17例行胸、腰椎MRI检查,发现有脊髓、椎体或附件病变而需行MRI增强检查的病例,利用test bolus技术来预测对比剂注射延迟时间,采用3D-DCE MRA技术和各种图像后处理方法来显示脊髓AKA.结果:3D-DCE MRA的扫描参数为TR/TE 5.3/1.4,翻转角35°,扫描层厚1.4 mm,重建层厚0.7mm,K空间采用椭圆填充技术,FOV43cm×22cm,覆盖范围包括T5~L4的区域.MPR和MIP在显示脊髓AKA方面具有优势.结论:采用优化的扫描参数和恰当的图像重建技术,3D-DCE MRA能清晰显示脊髓AKA,可作为无创性血管成像的首选检查.
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超促排卵周期胚胎移植日血清孕酮/雌二醇比值对胚胎着床的影响
目的:探讨超促排卵周期胚胎移植日血清孕酮/雌二醇(P/E2)比值对子宫内膜容受性的影响.方法:将96例体外受精-胚胎移植患者按胚胎移植日(ET)血清P/E2比值分为5组,对其实验室结果和临床结局进行比较.结果:5组患者的平均年龄、ET日内膜厚度、受精率、卵裂率、可移植胚胎数及移植胚胎数均无差异(P>0.05).组1的取卵数多,妊娠率低;组5的取卵数少,无1例妊娠.而组3(P/E2为100~150)获得显著高于其他组的妊娠率和单胚种植率(P<0.05).结论:恰当的P/E2比值可提高子宫内膜的容受性,在促排卵周期测定ET日的P/E2比值对预测妊娠成功与否有参考作用.
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Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白在大肠癌组织中的表达及相关性研究
目的:探讨Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白在大肠癌组织中表达的意义以及相关性.方法:采用免疫组化SP法检测20例正常大肠粘膜、20例大肠腺瘤性息肉及60例大肠癌组织中Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白表达情况,并分析与临床病理参数之间的关系,以及Skp2与c-Myc和P27kip1蛋白表达的相关性分析.结果:Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白在大肠癌组织中阳性表达率分别为71.67%、66.67%和21.67%.随肿瘤细胞分化程度降低、浸润深度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移,P27kip1阳性表达率逐渐降低,Skp2阳性表达率逐渐升高.c-Myc过表达与浸润深度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移有关.三者的阳性表达率均与大肠癌患者的年龄和性别无关.大肠癌组织中Skp2与P27kip1蛋白表达呈负相关,Skp2与c-Myc蛋白表达呈正相关.结论:从正常大肠粘膜-大肠腺瘤性息肉-大肠癌过程中,Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白表达发生相应变化,均参与大肠癌的发生和发展,其蛋白的检测可为判断大肠癌恶性进程和预后提供重要参考,同时也为大肠癌的靶向治疗提供理论依据.
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特异性SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析
目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域.方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的、N蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白)分别免疫Balb/c小鼠制备McAb,通过检测其亚类、效价及相对亲和力鉴定McAb的生物学特性,以Western blot鉴定单克隆抗体特异性,并对McAb结合表位进行初步分析.结果:筛选出7株抗SARS-CoV N1蛋白及2株抗SARS-CovN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,腹水效价105以上;亲和常数达108以上.Western blot证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoV N蛋白发生特异性反应.ELISA相加实验结果显示2株N1 McAb识别相同的抗原表位,其余均识别不同的抗原表位.结论:通过分段表达纯化的SARS-CoV N蛋白而制备的特异性针对SARS-CoV N蛋白不同区域抗原表位的单克隆抗体中,N1单抗识别N蛋白N端(1~549bp),N2单抗识别N蛋白C端(496~1269bp),可初步定位单克隆抗体识别表位所在区域.
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利用5'-RACE技术进行人肝再生增强因子相互作用肽cDNA5'末端快速扩增及序列分析
目的:利用5'-RACE技术进行人肝再生增强因子(hALR)相互作用肽cDNA5'末端快速扩增并进行序列分析.方法:按照5'-RACE试剂盒(Takara)操作流程进行hALR相互作用肽cDNA5'末端快速扩增,用BLAST技术对扩增序列进行生物信息学分析.结果:成功获取487bp的5'-RACE反应产物,其中5'端延伸了275bp,同源序列分析表明与人Citron激酶mRNA高度同源.结论:5'-RACE技术可以用于快速有效扩增已知部分cDNA序列的5'末端,Citron激酶可能是与hALR具有相互作用的蛋白.
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红花注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤Caspase-3和bcl-2表达
目的:探讨红花注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤凋亡相关基因Caspase-3和bcl-2表达的影响.方法:将75只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注组和治疗组.建立肾缺血再灌注损伤模型,检测肌酐和血尿渗透压值评价肾功能变化,TUNEL法检测凋亡率,免疫组化检测Caspase-3和bcl-2蛋白表达.结果:与正常对照组相比,缺血再灌注组肾功能明显减退,凋亡率显著增加、Caspase-3和bcl-2表达明显增强(P<0.01);运用红花注射液治疗后,与缺血再灌注组相比,治疗组肾功能明显改善,凋亡率显著减少、Caspase-3的表达明显减弱而bcl-2表达明显增强(P<0.01).结论:在肾缺血再灌注损伤过程中,红花注射液具有抑制Caspase-3表达和促进bcl-2表达的作用.
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海藻酸钠凝胶对骨髓间充质干细胞生物学效应的初步研究
目的:初步探讨海藻酸钠凝胶对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,bMSCs)的生物学效应.方法:将在海藻酸钠凝胶上培养的细胞设为实验组,在塑料培养板上的细胞设为对照组.以MTT法检测细胞在两种材料上的增殖;采用甲苯胺蓝染色观察细胞在凝胶上的生长形态;RT-PCR检测bMSCs生长6天后的成骨相关基因.结果:两组的bMSCs均能迅速贴附、铺展进入增殖期;在实验组,细胞成集落样生长较明显,且形态发生改变,伸出较多的伪足,细胞间接触更为紧密;培养至第6天,进行成骨相关基因检测,发现对照组和实验组均有Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶表达,但它们在实验组的表达量高于对照组;同时,实验组骨连接蛋白为阳性表达,而对照组为阴性.结论:bMSCs可能具有自发向成骨细胞分化的趋势;海藻酸钠凝胶具有促进干细胞向成骨细胞分化的生物学活性.提示海藻酸钠凝胶可能是比较适合的骨组织工程支架材料.
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网织红细胞计数在监测胸部肿瘤患者化疗后骨髓抑制状态的探讨
目的:探讨网织红细胞计数监测胸部肿瘤患者化疗后骨髓抑制状态的临床价值.方法:41例胸部肿瘤患者(其中肺癌22例,食管癌19例),根治术后均接受紫杉醇联合顺铂的化疗方案.采用sysmex SE-9000全自动血细胞分析仪动态观察化疗过程中外周血网织红细胞和白细胞数.结果:与化疗前相比,化疗后第7天高荧光强度网织红细胞(HFR)和中荧光强度网织红细胞(MFR)之和(HFR+MFR)显著下降(P<0.01),而白细胞下降没有显著性意义(P>0.05).化疗后第14天上两项指标均降低(P<0.01)结论:网织红细胞计数下降较白细胞计数下降早,可作为早期评价肿瘤病人化疗过程中骨髓造血状态的敏感指标.
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人C型利钠肽基因的克隆及其真核表达载体的构建
目的:为开展C型利钠肽基因治疗,克隆人C型利钠肽基因并构建其真核表达载体.方法:通过RT-PCR从人胎盘组织中克隆人C型利钠肽基因全长编码区,将该DNA片段亚克隆至克隆载体pBS-T中,用Sma Ⅰ单酶切筛选出负向插入片段,用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切将目的DNA片段定向克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,然后用双酶切、PCR鉴定和DNA序列测定三重鉴定方法对重组质粒进行鉴定.结果:酶切、PCR及测序鉴定证实,人C型利钠肽基因全长编码区被准确插入至pcDNA3.1(+)酶切位点Hind Ⅲ和BamH Ⅰ之间,并且未发现有碱基突变或移位.结论:含人C型利钠肽基因真核表达质粒的成功构建并鉴定,为开展C型利钠肽基因治疗奠定了物质基础.
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镉对雄性大鼠颌下腺的影响及丙酸睾酮的保护作用
目的:探讨氯化镉对雄性大鼠颌下腺的影响及丙酸睾酮的保护作用.方法:35只雄性Wistar大鼠分为3组:对照(C)组、镉(Cd)组和镉加丙酸睾酮(Cd+T)组.利用原子吸收火焰法、免疫组化法、透射电镜等作颌下腺组织镉含量测定,雄激素受体(AR)表达和定量分析以及颗粒曲管(GCT)细胞的超微结构观察.结果:镉注射后24h,GCT细胞内出现不同程度的线粒体肿胀和(或)空泡化,胞质和线粒体内可见髓样结构,GCT周围毛细血管内皮细胞线粒体肿胀.7~15天后上述改变明显加重,部分GCT细胞见胞质广泛肿胀和轻度核溶解,30天后细胞形态仍未恢复正常.Cd+T组的超微结构损伤较相应Cd组轻.Cd组和Cd+T组的镉含量均明显高于C组,Cd+T组的镉含量虽低于相应Cd组,但差异无显著性.各实验组AR表达均少于C组,但Cd+T组的AR表达高于相应Cd组,且在3、7、15天组两者比较差异有显著性.结论:镉对GCT细胞的超微结构有早期直接损伤作用,后期雄激素及其受体减少加重此损伤,补充雄激素对上述损伤有一定的保护效果.
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白细胞计数与代谢综合征的关系
目的:探讨白细胞(WBC)计数与代谢综合征(MS)及其亚组分的关系.方法:对662例重庆地区成年人测定了血糖、血脂、胰岛素、WBC计数、超敏C反应蛋白(hsCRP)等指标,根据2005年IDF标准诊断MS.结果:有MS者WBC计数明显高于无MS者(P<0.01),且WBC计数增高与肥胖、高血压、高血糖、高甘油三酯血症等MS亚组分均有关.根据WBC计数的四分位数,将受试者分为4组,结果提示随着WBC水平增加,腰围、BMI、SBP、DBP、TG、TC、LDL-C、HomaIR、hsCRP增高(P<0.01),而HDL-C水平降低(P<0.01).结论:WBC计数作为炎症标志物,与MS及其亚组分关系密切,WBC计数增高可能是MS发生的标志之一.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 z1 |