重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位： 重庆市教育委员会
- 主办单位： 重庆医科大学
- 影响因子： 0.72
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-3626
- 国内刊号： 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
重庆地区8024例地中海贫血筛查结果及地贫基因型分析
目的:了解重庆地区人群中α、β地中海贫血基因型的分布情况.方法:送检对象来自重庆各区、县共计8 024例样本,采用单管多重聚合酶链反应法(gap single polymeras chain reaction,GSPCR)结合反向斑点膜条杂交技术(reverse dot blot hybridization,RDB法)同时进行α、β地中海贫血基因检测.各组标本送检之前已在各个医院进行外周血的红细胞数(red blood cell,RBC)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、红细胞平均体积(mean corpuscular volume,MCV)、红细胞平均血红蛋白(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)细胞、血红蛋白电泳指数测定进行地中海贫血的初筛.8 024例样本男1 267例,女6 757例,0～91岁,按年龄分为儿童组(0～16岁)317例,青壮年组(17～49岁)7 552例,老龄组(50～91岁)155例.结果:8 024例样本共检出α、β地贫111 7例,比例为13.92％.α地贫479例,其中常见缺失型α地贫基因型为--SEA/αα(332例),-α37/αα (84例),-α42/αα(15例),基因型以--SEA/αα为常见,构成比分别为69.31％、17.54％、3.13％,共89.98％;以右缺失为主,--SEA/-α375例,--SEA/-α4.21例.非缺失型42例,占8.76％;确定为β地贫共619例,α复合β地贫19例.β地贫基因型本次研究中共计发现12种基因型,其中常见的突变构成类型分别为CD17(A→T)、CD41-42(-TCTT)、IVS-2-654(C→T)、CD43、TATAboxnt-28(A→T)、βE共占96.12％,其中以CD17(A→T)位点突变所占比例高,CAP点突变和IVS1-1点突变各1例;8 024例样本中男性1 267例,其中地贫167例(13.18％),女性6 757例其中地贫950例(14.06％),男性和女性地贫检测阳性率差异无统计学意义(x2=0.691,P=0.433);男性α地贫77例,女性402例;男性β地贫74例,女性545例,男性检测为α地贫或β地贫与女性的2种地贫检测率之间的差异,无统计学意义(x=0.381,P=0.604);儿童组317例确定为地贫107例(33.75％),青壮年组7 552例确定为地贫982例(13.00％),老年组155例确定地贫28例(18.06％),地贫患者各个年龄组检测阳性无统计学差异(x2=1.711,P=0.318).结论:重庆地区地中海贫血患者中α地中海贫血以--SEA/αα基因型为常见,β地中海贫血则以CDl7(A→T)位点的突变为常见.同时,青壮年组地贫的危害在于青壮年为生育年龄的集中段,所以对青壮年人群进行地贫的筛查和基因诊断,对提高人口素质有重要作用.
-
整合素α9在人脂肪源性间充质干细胞向淋巴管内皮细胞分化过程中的表达变化
目的:从人体脂肪组织中分离培养出脂肪源性间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs),诱导其向淋巴管内皮细胞(lymphatic endothelial cells,LECs)分化,同时探讨分化过程中整合素α9 (integrin α9)表达的变化,旨在寻找淋巴水肿分子治疗靶点,为ADSCs应用于淋巴水肿的分子治疗奠定实验基础.方法:①从吸脂术后废弃的人体脂肪组织中分离培养出ADSCs,倒置相差显微镜观察原代及传代细胞的形态特征.②流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测第3代ADSCs表面特征性抗原CD90、CD29、CD34及CD45的表达;MTT法绘制生长曲线.③用人血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)C、人VEGF-A、血小板源性生长因子BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导其向LECs方向分化,同时以人LECs作为阳性对照组.④Western blot检测各组细胞LECs表面特征性抗原淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lym phatic endothelial hyaluronan receptor-1,LYVE-1)、血管内皮细胞特征性抗原CD34及integrinα9的表达.⑤FCM检测各组细胞周期,使用SPSS17.0对实验数据进行统计分析.结果:①ADSCs贴壁生长,呈长梭形,第1、3、5代ADSCs的生长曲线均呈S形;细胞表面抗原为CD90+、CD29+、CD34-、CD45-.②实验组及阳性对照组LYVE-1表达阳性、CD34表达均阴性,integrin α9的表达趋势与LYVE-1一致,且二者在实验组的表达水平低于阳性对照组;三者在阴性对照组中的表达均为阴性.③各组G0/G1期细胞比例有明显统计学差异(P＜0.01),实验组与阳性对照组G0/G1期细胞比例显著小于阴性对照组(P＜0.01),实验组与阳性对照组之间无明显统计学差异(P=0.083).结论:ADSCs离体培养,具有向LECs分化的潜能.使用VEGF-C、VEGF-A、PDGF-BB可诱导部分人ADSCs向LECs分化.在人ADSCs向LECs分化过程中integrin α9的表达增强,分化前后细胞的周期发生了改变.该分子在LECs的形成过程中可能发挥着极为重要的作用,将有望在淋巴水肿的再生治疗中成为重要的分子靶点之一.
-
抵抗素调节人冠状动脉内皮细胞MMP-9表达机制探讨
目的:探讨抵抗素调节冠状动脉内皮细胞中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMP)-9的表达及其机制.方法:用含1％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM/F12培养基培养人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelialcells,HCAECs) 16 h(血清饥饿培养),之后随机分为6组:(1)空白对照(Con)组:无抵抗素干预;(2) Res20组:抵抗素20 ng/ml干预;(3) Res40组:抵抗素40 ng/ml干预;(4)Res100组:抵抗素100 ng/ml干预;(5)Res40+U0126组:细胞中加入细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂U0126 (20 mmol/L)预处理1h,再加入抵抗素40 ng/ml干预;(6)U0126组:细胞中仅加入ERK抑制剂U0126(20mmol/L),细胞各组干预24 h后,用RT-PCR法检测MMP-9和蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-1 mRNA表达,ELISA法检测MMP-9和TIMP-1蛋白水平,Western blot检测HCAECs p-ERK1/2及ERK1/2的蛋白表达.结果:3种浓度抵抗素干预HCAECs 24 h后,MMP-9 mRNA与蛋白水平均较空白组明显升高(P＜0.05);TIMP-1 mRNA与蛋白水平均较空白组明显降低(P＜0.05).40 ng/ml抵抗素干预组加入ERK抑制剂U0126后,MMP-9 mRNA与蛋白水平明显下降(P＜0.05),TIMP-1 mRNA与蛋白无明显变化.与Con组、U0126组及Res40+U0126组相比,Res40组p-ERK1/2蛋白表达明显增高(P＜0.05).结论:抵抗素可诱导HCAECs MMP-9的生成,可能通过下调TIMP-1的表达及激活ERK通路参与这一过程.
-
T2基因突变致3-酮硫解酶缺乏症
目的:在非糖尿病性酮症酸中毒病例中寻找3-酮硫解酶(3-ketothiolase,3KT)(以下简称T2)基因异常情况,进一步为3KT缺乏症(3-ketothiolase deficiency,3KTD)的诊断提供依据,揭示T2在异亮氨酸代谢过程中的作用,并探讨基因突变导致该疾病的潜在机制.方法:采集先证者及家属外周血,同时采集50例正常儿童外周血为正常对照,提取外周血DNA,用PCR法扩增T2基因全部外显子及其侧翼,对扩增产物进行直接测序,检测突变位点.结果:先证者外显子5第46位C突变为T,该突变导致T2蛋白第127位氨基酸由丙氨酸突变为缬氨酸,先证者父母、哥哥及正常对照组该位点均未见突变;先证者外显子1、内含子5、内含子8发现多个单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphism,SNP).结论:T2基因外显子5 A127V,可能是3KTD的潜在病因.
-
中国汉族人群CYP2D6、CYP3A4 SNP位点基因多态性分析
目的:通过对药物代谢酶CYP2D6和CYP3A4的相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)筛选检测,获得其在中国汉族人群中遗传多态性分布的相关数据.方法:筛选11个关于CYP2D6、CYP3A4基因的SNP位点,取192份中国汉族无关个体健康自愿者的血液样本获得基因组DNA,根据单碱基延伸技术通过GenomeLabTM SNPstream(R)基因分型系统进行SNP分型.结果:本次检测的11个SNP位点在研究人群中全部具有多态性(小等位基因频率＞0.01),其中7个SNP(RS28624811、RS28670611、RS9623531、RS5758589、RS3735451、RS2246709、RS2404955、RS4646440)位点的等位基因频率在此人群与白种人相比差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:汉族人群可能有继承特定的遗传信息,导致与其他人群具有不同药物代谢率.
-
转化生长因子-β1以浓度依赖的方式重组人成熟树突状细胞的细胞骨架丝状肌动蛋白
目的:探索转化生长因子β1(tansforming growth factor-β1,TGF-β1)对人成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs)骨架丝状肌动蛋白(filament actin,F-actin)及其部分骨架结合蛋白表达的影响,为深入理解树突状细胞(dendritic cells,DCs)的生物学行为和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗的临床效率提供线索.方法:不同浓度的TGF-β1处理mDCs后,用激光共聚焦显微镜和免疫印迹实验分别研究细胞骨架F-actin的结构和部分细胞骨架结合蛋白表达水平的变化.结果:(1)与对照组相比,TGF-β1处理后的mDCs的F-actin出现了明显重排,F-actin的表达量在3 ng/ml组下调(P=0.000),在5 ng/ml组上调(P=0.000).(2)mDCs表面丝状突起长度和数量的变化,长度在3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组细、短(P=0.001,0.000);数量在1、3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组少而稀疏(P=0.000);在7 ng/ml组mDCs表面丝状突起长度和数量的变化均无统计学意义(P=0.114);通过回归分析细胞丝状突起长度和数量与F-actin表达量之间存在非线性相关性(R2分别为0.828和0.746,P=0.000).(3)细胞骨架蛋白结合蛋白的表达,fascin1在所有实验组中均出现了下调(P=0.001、0.000);p-cofilin1与总cofilin1的表达水平比在1 ng/ml和3 ng/ml组均下调(P=0.000);profilin的表达在1、3 ng/ml和5 ng/ml组均上调(P=0.001、0.001、0.013).结论:TGF-β1以浓度依赖的方式影响mDCs的细胞骨架F-actin结构及其部分结合蛋白的表达,提示在临床上施行基于DCs的抗肿瘤免疫治疗时,需以适当的方式阻断TGF-β1的信号转导通路,这对进一步深入理解DCs的生物学行为和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义.
-
SLC22A3基因intron7对基因转录的负性调控作用研究
目的:探讨人SLC22A3基因intron7序列及其SNPrs2048327 (A/G)位点对基因转录的调控作用.方法:以包含人SLC22A3基因全长序列的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)为模板,PCR扩增hSLC22A3 intron7,克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic和pGL3-Promoter,得到重组质粒pGL3-Basic-SLCi7wt、pGL3-Promoter-SLCi7wt和pGL3-Promoter-SLCi7mut;重组质粒与内参质粒pRL-SV40共转染入人胚肾细胞HEK293T,24 h后检测荧光素酶活性.结果:野生型重组质粒pGL3-Basic-SLCi7wt荧光素酶活性与pGL3-Basic无统计学差异(P=0.986);野生型重组质粒pGL3-Promoter-SLCi7wt 荧光素酶活性(3.514±0.096)相较于pGL3-Promoter(6.286±0.370)降低(P=0.000);突变型重组质粒pGL3-Promoter-SLCi7mut 荧光素酶活性(2.089±0.332)相对于pGL3-Promoter亦有所下降(P=0.000),且较野生型重组质粒pGL3-Promoter-SLCi7wt下调(P=0.000).结论:人SLC22A3基因intron7序列具有负性调节活性,能下调荧光素酶报告基因的表达水平;定位于该序列上的SNP rs2048327(A/G)位点A→G的改变,可能增强该内含子所具有的负性调节作用.
-
细胞跨膜Notch配体4和血管内皮生长因子蛋白在子宫内膜异位症组织中的表达及意义
目的:探讨细胞跨膜Notch配体4(delta-like ligand 4,DLL4)蛋白和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中的表达及意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测48例EMs的异位内膜(A组)、37例在位内膜(B组)及30例正常子宫内膜组织(C组)中DLL4和VEGF蛋白的表达.结果:(1)A、B、C3组中,DLL4蛋白的平均积分光密度(integral optical density,IOD)值分别为(145.01±10.47)、(115.56±10.87)、(90.08±8.56),VEGF的IOD值分别为(148.48±8.36)、(122.79±5.68)、(108.75±7.39),组间差异均有统计学意义(F=279.113和r=296.049,P均＜0.05).(2)A、B两组中DLL4和VEGF蛋白的表达存在正相关(r=0.828和r=0.773,P均＜0.05),C组中二者的表达无相关性.(3)A、B两组中Ⅰ、Ⅱ期DLL4和VEGF蛋白的表达均显著低于Ⅲ、Ⅳ期(P＜0.05).结论:DLL4、VEGF蛋白可能在EMs的发生发展中发挥着重要作用.
-
ERK5信号通路参与BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞的分化
目的:研究细胞外信号调节激酶5(extracellular signal-regulated kinase 5,ERK5)信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化中的作用.方法:用AdBMP9和AdGFP转染C3H10T1/2细胞,流式细胞术检测转染效率,Westem blot检测磷酸化ERK5 (phosphorylation ERK5,p-ERK5)和ERK5的表达水平,免疫荧光检测p-ERK5在细胞内的表达位置;ERK5特异性抑制剂BIX02189预处理细胞再经AdBMP9诱导,Western blot检测p-ERK5和ERK5表达水平,RT-qPCR检测心肌特异性基因肌细胞增强因子(myocyte enhancer factor,MEF)2C、GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA4)表达,Western blot检测心肌特异性蛋白缝隙连接蛋白43 (connexin 43,CX43)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)表达.结果:AdGFP与AdBMP9的转染效率达50％左右,经AdBMP9诱导后的细胞p-ERK5表达明显增高(P＜0.01),免疫荧光结果显示BMP9组p-ERK5表达明显增强且主要集中于胞核;15 μmol/L BIX02189可完全抑制p-ERK5的表达(P＜0.01),且明显降低了由AdBMP9诱导的C3H10T1/2细胞GATA4、MEF2C基因与CX43、cTnT蛋白表达(P=0.000).结论:BMP9可以通过激活ERK5信号通路调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化.
-
TNF-α、ICAM-1在心肌无复流中的表达与调节机制
目的:研究肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、细胞间黏附分子-1 (intracellular adhesion molecules1,ICAM-1)在家兔心肌无复流模型血浆中的表达水平及调节机制.方法:30只新西兰大白兔,随机分为假手术组、心肌缺血再灌注组和四氢吡咯二硫代氨基甲酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)组(缺血前30 min经耳缘静脉注射PDTC 20 mg/kg).心肌缺血再灌注组和PDTC组采用开胸冠状动脉结扎回旋支90 min再松解60 min的方法建立家兔心肌无复流模型.通过酶联免疫吸附试验测定各组家兔缺血再灌注过程中炎症因子TNF-α和ICAM-1在血浆的表达水平、测定心肌不同区域心肌髓过氧化酶(myeloperoxidase,MPO)活性、光镜及电镜下观察心肌细胞受损情况.结果:家兔心肌缺血再灌注组炎症因子TNF-α和ICAM-1的表达水平在缺血后150 min时达高峰,明显高于PDTC组(P＜0.05).心肌缺血再灌注组无复流区及缺血区心肌MPO活性较假手术组和PDTC组均明显升高(P＜0.05).PDTC组无复流区心肌细胞损伤程度轻于缺血再灌注组.结论:家兔心肌缺血再灌注诱导炎症因子的表达;抑制核因子-kB激活可减少无复流区的中性粒细胞浸润和激活,减少炎症因子的表达,减轻无复流区心肌再灌注损伤程度.
-
转录因子激活蛋白-1在Buerger's病中的表达与意义
目的:观察转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在Buerger's病患者腰交感神经元内的表达.方法:收集2011年1月至2012年3月行腰交感神经节切除术的Buerger's病男性患者腰交感神经节标本,Buerger's病患者组:23例,对照组:12例.应用免疫组化、RT-PCR、Westem blot技术测定对照组腰交感神经节神经元AP-1的表达水平并比较其表达差异.结果:Buerger's病患者腰交感神经节神经元中AP-1的基因表达(P=0.045 9)、蛋白表达(P=0.028 3),高于对照组.结论:AP-1在调节Buerger's病细胞增殖和血管炎症反应中发挥着作用.
-
杆状病毒介导肝生长因子在兔骨髓间充质干细胞中的调控表达
目的:建立转染高效可调控的携带肝生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)为目的基因的重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,并探寻其在转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)后的佳诱导浓度.方法:用转基因的方法构建重组杆状病毒v AcrtTA2s-Ptight-HGF,随后转染BM-MSCs,用ELISA和Western blot检测不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导体外培养兔BM-MSCs分泌的HGF浓度.结果:构建了高效可调控重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,并且成功转染兔BM-MSCs,用系列浓度DOX诱导时ELISA和Western blot均检测到BM-MSCs中HGF的表达有DOX诱导剂量依赖关系并且连续7d持续表达,且实验组的HGF的表达量明显高于对照组(P＜0.001).结论:成功构建一次性转染、高效可调控的重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,并实现对HGF表达的调控,当DOX诱导浓度为1μg/ml时为其体外佳诱导浓度.
-
葡萄糖调节蛋白78在大鼠肠缺血再灌注损伤中的表达及其意义
目的:观察大鼠肠缺血再灌注损伤(intestine ischemia repeffusion injury,IIRI)过程中肠黏膜的组织损伤和细胞凋亡及内质网(endoplasmic reticulum,ER)分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)的表达变化,并探讨ER应激在肠IIRI中的作用及机制.方法:45只雄性SD大鼠随机分成9组:缺血再灌注0、1、3、6、12、24、48、72 h组,以及假手术对照组,每组5只.实验组均用无创性动脉夹夹闭肠系膜上动脉1h后实施再灌注来建立再灌注模型,假手术组仅游离肠系膜上动脉,不夹闭.然后采用HE染色观察肠黏膜变化,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot和RT-PCR检测GRP78表达.结果:缺血再灌注后,肠黏膜损伤程度及细胞凋亡指数随再灌注时间延长而增加,于再灌注3h达峰值(与其他组各组比较均P＜0.001);再灌注后,GRP78的表达明显增加,于1h达第1个小高峰(与0h组和3h组比较P＜0.05),但随再灌注时间的延长,表达量逐步减少,再灌注12h后开始回升(与6h组比较P＜0.004),于24 h达峰值(与其他各组比较均P＜0.05),72 h降至对照组水平(与假手术对照组比较P ＞0.069).结论:GRP78在大鼠肠缺血再灌注过程中表达变化,可能与其对肠IIRI保护机制有关.
-
核仁素蛋白调节嗅觉介导素4 mRNA表达的研究
目的:探讨核仁素(nucleolin,NCL或C23)蛋白与嗅觉介导素4(olfaetomedin 4,OLFM4)mRNA之间是否存在相互作用,以及NCL对OLFM4转录水平的调控.方法:本研究利用RNA染色质免疫共沉淀(RNA chromatin immunoprecipitation assay,RNA chip)结合RT-PCR确定NCL是否能与OLFM4 mRNA相互作用,以及双荧光素酶报告基因试验检测NCL对OLFM4报告基因的影响.结果:在SGC-7901细胞内,NCL能与OLFM4 mRNA结合,且过表达NCL质粒的相对荧光素酶活性约为对照质粒的1.15倍,敲低NCL,质粒的相对荧光素酶活性约为对照质粒的0.8倍,NCL对OLFM4具正向调节作用.结论:NCL与OLFM4mRNA可以相互结合,且NCL可以通过增加OLFM4转录水平和延长OLFM4 mRNA的半衰期来增加OLFM4 mRNA的稳定性.
-
人类小脑症基因1与基因组稳定性
人类小脑症基因1 (Microcephalin 1,MCPH1)又叫人端粒酶逆转录酶抑制基因(BRCT-repeat inhibitor of hTERT expression,BRIT1),它编码一个110 kD的含有835个氨基酸的核结合DNA损伤应答蛋白,能与癌症相关基因蛋白(E2F、p53、BRCA1/2等)、DNA损伤应答蛋白(ATM、ATR、RAD51和CondensinⅡ等)以及细胞周期调节蛋白(CDK1、cyclins)等多种重要蛋白相互作用,它能参与到细胞周期调控、DNA损伤修复以及抑制肿瘤发生发展等多种细胞活动中,在维持基因组稳定性方面起重要作用.本文对MCPH1的生化结构、维持基因组稳定性以及在人类肿瘤中所发挥的作用做一综述.
-
MicroRNA-21在器官纤维化中的研究现状
器官纤维化是多种因素引起的急性或慢性病理变化,如若得不到有效治疗终会导致器官功能衰竭.近年来,关于microRNA的研究越来越受到重视,尤其是microRNA-21(miR-21),作为一种小分子调节RNA,在多种疾病包括癌症、心血管疾病、器官纤维化等的发生过程中发挥重要作用.本文就miR-21在各种纤维化疾病中的作用作一综述.
-
人脐血清对人脐带血间充质干细胞生物学特征与衰老的影响
目的:探讨人脐血清(human umbilical cord blood serum,CBS)对体外培养人脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)基本生物学特征的影响.方法:密度梯度离心分离脐带血单个核细胞,以含3％CBS加7％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(CBS组)或10％FBS(FBS组)的完全培养基培养hUCB-MSCs,流式细胞术检测细胞表面分子与细胞周期,显微镜下测定细胞表面积和表达β-半乳糖苷酶细胞百分率,MTT法检测光密度值、绘制生长曲线.结果:CBS组和FBS组均表达CD44、CD105、CD90、CD73,不表达CD45、CD34、CD11b、CD19和人白细胞DR抗原(human leukocyte antigen DR,HLA-DR),但与FBS组比较,CBS组表达CD90细胞百分率更低,G0/G1期细胞比例较少,细胞增殖指数较高(P＜0.05)且细胞表面积也明显更小(P＜0.05).CBS组生长曲线较FBS组左移,峰值更高,细胞倍增时间48.37 h,FBS组则为54.43 h.FBS组β-gal染色阳性细胞百分率明显高于CBS组(P＜0.05).结论:部分CBS合用FBS培养hUCB-MSCs能更好地促进细胞增殖,并更好地保持hUCB-MSCs的基本生物学特征和延缓细胞的衰老.
-
培哚普利对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚中碱性成纤维细胞生长因子-2的影响
目的:探讨培哚普利片对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌肥厚大鼠碱性成纤维细胞生长因子-2 (basic fibroblast growth factor,bFGF-2)表达的影响.方法:将研究大鼠分为对照组、模型组及药物干预组,对照组大鼠背部行皮下注射生理盐水;模型组大鼠皮下注射ISO;药物干预组大鼠皮下注射ISO,培哚普利片灌胃,称量计算各组大鼠左心室质量/体质量(left ventricular mass/body mass,LVM/BM)和全心质量/体质量(heart mass/body mass,HM/BM)并进行对比,应用免疫组化及逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法比较各组大鼠左心室中bFGF-2含量、3组大鼠LVM/BM和HM/BM.结果:大鼠LVM/HM、HM/BM比较,对照组＜药物干预组＜模型组,组间比较差异有统计学意义(F=25.220,P=0.000; F=76.761,P=0.000).免疫组化及RT-PCR显示药物干预组中bFGF-2 mRNA含量高于对照组,但低于模型组(P=0.000,P=0.038).结论:通过皮下注射ISO能成功制备心肌肥厚大鼠模型.bFGF-2对大鼠心肌肥厚具有促进作用,培哚普利可通过降低bFGF-2表达抑制心肌肥厚.
-
携带siRbpj重组腺病毒载体的构建及其对BMP9诱导骨髓间充质干细胞成骨分化作用影响
目的:构建并筛选特异性干扰Notch信号通路核转录因子Rbpj基因的重组腺病毒,探讨通过Rbpj的经典Notch信号通路在骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)9诱导骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化中的作用.方法:设计3对针对小鼠Rbpj的siRNA序列,将其分别亚克隆至pSES-HUS穿梭质粒,再与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183内同源重组获得重组质粒,经脂质体转染至HEK293细胞中包装扩增腺病毒,利用RT-PCR及Western blot进行筛选、验证有效的干扰腺病毒.该重组腺病毒与AdBMP9处理MSCs细胞株C3H10T1/2,采用组织化学和RT-PCR检测早期成骨指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和晚期成骨指标骨桥蛋白(osteopontin,OPN),骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)及BMP下游靶基因Id 1、Runx 2等的表达.结果:成功构建了3个重组腺病毒,并筛选出干扰效率好的AdsiRbpj-2重组腺病毒,转染C3H10T1/2,AdsiRbpj-2可以明显下调BMP9诱导的早期成骨指标ALP的活性及晚期成骨指标OPN、OCN的表达,成骨相关基因Runx2等的表达也有下降.结论:成功构建了特异性阻断Notch经典信号通路腺病毒载体AdsiRbpj-2,该重组腺病毒能够抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的成骨分化进程,从而进一步证明Notch信号通路在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中有着重要的作用.
-
骨髓间充质干细胞在C6脑胶质瘤细胞微环境中瘤性转化的生物学分析
目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在C6脑胶质瘤细胞微环境中是否发生了生物学特性的改变.方法:全骨髓贴壁筛选法分离培养SD大鼠BMSCs,免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测BMSCs表面标志分子CD90+、CD105+、CD45-;活细胞荧光染料CM-Dil标记BMSCs(CM-Dil+BMSCs),流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测标记效率,台盼蓝染色法连续监测BMSCs死亡率;CM-Dil+BMSCs与C6脑胶质瘤细胞直接接触共培养为直接共培养组,BMSCs与C6脑胶质瘤细胞非接触共培养为间接共培养组,阳性对照组为C6脑胶质瘤细胞单独培养,阴性对照组为BMSCs单独培养,培养7d后,IF法检测各组酸性胶质纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、CD90、CD105表达情况;FCM分选实验组CM-dil+BMSCs和C6脑胶质瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1、CD90、CD105基因的表达.结果:①培养至第3代的BMSCs 90％以上表达CD90、CD105且不表达CD45;②IF结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞表达GFAP水平较阴性对照组BMSCs均增高.③RT-qPCR结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1基因表达水平较阴性对照组BMSCs明显增高(P＜0.05),且直接共培养组与间接共培养组比较无明显差异(P＞0.05);同时,直接共培养组、间接共培养组BMSCs的CD90、CD105基因表达水平较阴性对照组BMSCs显著降低(P＜0.05).结论:BMSCs在C6脑胶质瘤细胞微环境中存在潜在瘤性转化的倾向.
-
转化生长因子-β1促进骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化
目的:探讨转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)成骨分化过程中的作用.方法:应用鼠MSC C3H10T1/2,以重组腺病毒法将BMP9导入,施加TGF-β1处理,建立BMP9联合TGF-β1诱导MSC成骨分化模型.改良SEAP化学发光法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;茜素红S染色进行钙盐沉积检测;实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Ⅰ a2型胶原(collagen Ⅰ a2,COL Ⅰ a2)、骨桥素(osteopotin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA转录表达水平,免疫细胞化学法检测细胞内OPN、OCN表达变化.荧光素酶报告基因法检测信号通路的Smad水平.结果:TGF-β1与BMP9联合处理较BMP9单独处理能更早更多地提高ALP活性和引起钙盐沉积(F处理=18 782.10,P=0.000),持续处理达17 d后不再显示明显差异,TGF-β1单独处理与对照组间无明显差异(F=1.03,P=0.318).TGF-β1与BMP9联合处理较BMP9单独处理可使COL Ⅰ a2、OPN、OCN mRNA转录水平明显增高(COL Ⅰ a2的F处理=250.30,P=0.000; OPN的F处理=795.64,P=0.000; OCN的F处理=206.55,P=0.000),COL Ⅰ a2增高发生较早和显著(F=250.30,P=0.000);细胞内OPN、OCN蛋白阳性表达显著增强.TGF-β1联合BMP9处理能刺激信号通路相应的Smad荧光素报告活性(x2=32.84,P=0.000).结论:在BMP9诱导MSC成骨分化中,联合应用TGF-β1具有促进成骨作用,BMP9与TGF-β1在成骨分化中可能存在互补效应.
-
Dkk1对骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的影响
目的:探讨经典Wnt信号通路胞外拮抗因子Dkk1对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetie protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响.方法:以C3H10T1/2为目的细胞,通过重组腺病毒介导BMP9过表达,联用重组腺病毒Dkk1抑制经典Wnt信号通路.检测各处理组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性变化、钙盐沉积、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥素(osteopontin,OPN)变化;体内异位成骨实验分析Dkk1对BMP9诱导MSCs成骨分化的影响.结果:BMP9可诱导C3H10T1/2细胞成骨分化;Dkk1显著降低BMP9诱导的C3H10T1/2细胞ALP活性(F=1 467.21,P=0.000)、钙盐沉积、OC(F=32.95,P=0.000)和OPN(F=127.23,P=0.000)蛋白表达;异位成骨模型中Dkk1抑制BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化和骨块成熟.结论:Wnt信号通路胞外拮抗因子Dkk1可降低BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化可能需要经典的Wnt信号通路参与.
-
新型PPARγ部分激动剂CMHX003在3T3-L1细胞中的胰岛素增敏作用
目的:探讨噻唑烷二酮类(thiazolidinediones,TZDs)新型衍生物CMHX003在3T3-L1细胞中的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)部分激动活性及促进脂肪细胞分化的作用.方法:用双荧光素酶报告基因检测方法测定HEK293细胞中对照组、CHMX003(1μmol/L)、CHMX003(10 μmol/L)和罗格列酮(rosiglitazone,Rosi)(10 μmol/L)对PPARγ的激动活性.采用经典鸡尾酒诱导法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,诱导过程中分别加入CHMX003(1 μmol/L)、CHMX003(10μmol/L)和Rosi(10 μmol/L)处理,诱导分化第7天,用油红O染色观察细胞分化情况,real-time PCR检测细胞脂联素和脂肪酸结合蛋白(aP2)基因mRNA表达水平;ELISA法测定细胞培养上清液中脂联素水平.结果:CMHX003对PPARγ的激动活性低于Rosi(2.46±0.08,3.31±0.15,F=132.19,P=0.008);CMHX003促进3T3-L1前脂肪细胞分化及细胞内脂质沉积的作用较Rosi弱;而增强脂联素基因表达(59.41±3.01,107.91±16.49,x2=9.031,P=0.112)及增加脂联素分泌水平(74.61±16.94,140.07±30.67,x2=9.051,P=0.135)的作用和Rosi相似,且较少增强aP2基因的表达(3.07±1.86,75.95±26.00,x=8.868,P=0.009).结论:新型TZDs衍生物CMHX003具有PPARγ部分激动活性,有望成为安全有效治疗2型糖尿病和代谢紊乱的新型药物.
-
当归多糖对急性辐射损伤小鼠骨髓基质细胞及血管内皮生长因子的影响
目的:研究当归多糖(angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的保护作用.方法:直线加速器一次性全身均匀X射线(4.0 Gy)照射BALB/c小鼠,照射后腹腔注射不同剂量的APS或生理盐水,并于照射后第7、14、21天处死小鼠,取外周血进行常规检查;观察BMSC贴壁情况、细胞80％贴壁时间;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达水平.结果:与正常组相比,辐射第7、14、21天外周血白细胞及血小板计数明显减少;BMSC贴壁细胞数少且折光性差,达80％贴壁时间明显延长;G0/G1期细胞比例及细胞凋亡率升高;VEGF mRNA的表达降低.辐射APS高剂量组和辐射APS低剂量组均能增加外周血各指标计数,BMSC贴壁细胞数增多且折光性变好,达80％贴壁时间缩短,G0/G1期细胞比例及细胞凋亡率均显著降低,VEGF mRNA的表达显著增加.结论:APS可能通过增强VEGF的表达,提高BMSC的增殖能力,减少其凋亡,从而加速机体造血功能的恢复.
-
神经生长因子对培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞增殖的影响
目的:为了探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的促生殖作用及其机理,观察小鼠卵巢腔前颗粒细胞(granulosa cell,GC)增殖情况,同时建立便捷灵敏、毒性小、无污染的细胞增殖检测方法.方法:用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前GC,CCK-8实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)掺入标记,免疫细胞化学染色法检测GC在体外培养中的增殖情况和BrdU标记指数(labeling index,LI);流式细胞技术分析细胞周期各时相的变化.结果:NGF明显促进GC增殖,并且具有一定的量效关系.光镜下可见BrdU阳性标记的GC,其细胞核内可见棕褐色阳性颗粒,提示处于细胞增殖期.NGF组的BrdU LI为40.62％,明显高于对照组23.57％(P=0.000).NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数(proliferation index,PI)升高,G0/G1期细胞相对比例减少(P=0.000).结论:本研究证实NGF能够促进GC增殖,CCK-8分析和BrdU标记是高效、便捷的标记腔前GC增殖的方法,NGF促进GC增殖与促进GC DNA的合成有关系.
-
利用蛋白导入法沉默线粒体分裂调节蛋白Drp1的表达
目的:表达和纯化3转录反式激活因子-RNA结合结构域(3 Trans-Activator of Transcription-RNA binding domain,3TAT-RBD)重组蛋白,并利用蛋白导入法将siRNA运输到细胞中进行基因沉默实验.方法:将双链RNA激活蛋白激酶PKR的RNA结合域(Motif1)与细胞穿膜多肽TAT融合构建3TAT-RBD,并通过原核表达体系进行目的蛋白的表达和纯化.获取重组3TAT-RBD蛋白后,利用非变性胶电泳检测3TAT-RBD与荧光标示Cy3-dsRNA的结合能力.利用蛋白导入法和荧光显微镜观察3TAT-RBD将Cy3-dsRNA导入胶质瘤细胞的效率.在细胞水平检测和比较3TAT-RBD和Lipofectimine 2000将Cy3-dsRNA导入细胞的效率以及对沉默线粒体分裂蛋白动力蛋白相关蛋白1 (dynamin-related protein 1,Drp1)的效果.结果:通过原核表达体系获得3TAT-RBD重组蛋白,体外结合实验证实3TAT-RBD与双链dsRNA具有良好的结合能力.荧光显微镜观察也发现3TAT-RBD与Lipofectimine 2000均能将Cy3-dsRNA导入gli36胶质细胞.在RNA干扰实验中发现,3TAT-RBD和Lipofectimine 2000均能有效地抑制Drp1的表达,Lipo+siRNA和3TAT-RBD+siRNA组Drp1的表达水平分别为对照组的36％和42％.结论:本研究中构建的3TAT-RBD利用了细胞穿膜多肽和RBD与dsRNA结合特性,有效地将siRNA导入细胞进行基因沉默实验,这将为今后RNA干扰实验提供新的工具.
-
TCF7L2基因RNA干扰对胰岛素原水平的影响及机制
目的:研究转录因子7类似物2(transcription factor 7 like 2,TCF7L2)表达下调对胰岛素原水平的影响,进一步探讨TCF7L2通过前蛋白转化酶(proprotein convertase,PC)基因影响胰岛素原水平的机制.方法:在体外培养Beta-TC-6细胞株,通过构建TCF7L2的RNA干扰慢病毒转染细胞,下调TCF7L2的表达,实验分为3组,分别为空白对照组、乱序对照组和TCF7L2干扰组,采用qRT-PCR和Western blot检测TCF7L2和PC基因mRNA及蛋白水平的变化;收集上清液,采用ELISA方法测定基础和葡萄糖刺激状态下胰岛素和胰岛素原水平的变化.结果:慢病毒感染Beta-TC-6细胞48 h后,在荧光显微镜下观察慢病毒感染效率达95％以上,与空白对照组比较,TCF7L2 mRNA的干扰率约为75％(0.25±0.03 vs.0.97±0.11,P=0.000),蛋白质水平的干扰率约为50％(0.29±0.08 vs.0.57±0.09,P=0.008).与乱序对照组比较,TCF7L2干扰组葡萄糖刺激后胰岛素水平明显降低(7.47±0.21) mU/L vs.(10.53±0.38) mU/L(P=0.000),而胰岛素原水平却明显增加(10.73±0.51) pmol/L vs.(7.81±0.29)pmol/L(P=0.001),且PC1和PC2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05).结论:TCF7L2基因的RNA干扰可能通过降低PC基因的表达,进而减少该酶对胰岛素原的加工,从而影响胰岛素原的水平.
-
西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞抑制作用及其分子机制研究
目的:研究西妥昔单抗(Cetuximab)联合紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC) CNE-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制.方法:培养人NPC CNE-1细胞株,随机分为空白对照组、Cetuximab组、PTX组、联合用药组.用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,逆转录PCR(RT-PCR法)及Western blot法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的mRNA和蛋白表达.结果:联合用药组的细胞抑制率高于Cetuximab组和PTX组(P值分别为0.002、0.000);联合用药组的凋亡率高于Cetuximab组和PTX组(P值均为0.000);联合用药组的EGFR、MMP-2的mRNA表达均低于Cetuximab组和PTX组(各组间EGFR mRNA 的表达P值分别为0.000、0.001;MMP-2 mRNA的表达P值均为0.000);联合用药组的EGFR、MMP-2的蛋白表达均低于Cetuximab组和PTX组(各组间EGFR蛋白的表达P值均为0.000; MMP-2蛋白的表达P值分别为为0.000、0.006).结论:Cetuximab 联合PTX能够抑制人NPC CNE-1细胞的增殖,促进其凋亡,两者联用具有协同作用,其分子机制可能是通过抑制肿瘤细胞EGFR、MMP-2的表达来实现.
-
3种药物对饲服TCDD的胎鼠腭突超微结构的影响
目的:观察叶酸、白藜芦醇和α-萘黄酮拮抗四氯二苯二(口恶)英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导胎鼠腭裂发生的效应,及对饲服TCDD的胎鼠腭突表面超微结构的影响.方法:妊娠第10天(gestation day 10,GD10)孕鼠随机分组,每组8只.TCDD组以TCDD 28μg/kg灌胃,对照组以玉米油0.1 ml灌胃,叶酸组以叶酸10 mg/kg+ TCDD 28 μg/kg灌胃、白藜芦醇组以白藜芦醇50 mg/kg+TCDD 28 μg/kg灌胃、α-萘黄酮组以α-萘黄酮5 mg/kg+TCDD 28 μg/kg灌胃,于GD17.5在解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率.另取15只孕鼠随机分组,每组3只,处理方法同前,分别于GD13.5、14.5、15.5剪取胎鼠头部,扫描电镜观察腭突表面的超微结构.结果:TCDD组胎鼠腭裂发生率为92.86％,对照组未见胎鼠腭裂形成.叶酸组、白藜芦醇组和α-萘黄酮组胎鼠腭裂发生率分别为73.08％、74.51％、65.52％,与TCDD组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).TCDD组腭中嵴上皮细胞表面逐渐破裂、皱缩,伪足结构逐渐减少、消失,终形成腭裂;对照组、叶酸组、白藜芦醇组和α-萘黄酮组腭中嵴上皮细胞表面光滑整齐、饱满膨胀,表面丝状伪足逐渐增多、延长,一直持续到腭突融合结束.结论:叶酸、白藜芦醇和α-萘黄酮均能恢复小鼠腭中嵴上皮细胞表面的超微结构,从而拮抗TCDD的致腭裂效应.
-
双源CT直接静脉造影在下肢静脉性溃疡诊断中的价值
目的:探讨双源CT直接静脉造影(direct dual-source computed tomography venography,DSCTV)在协助诊断及治疗下肢静脉性溃疡中的价值.方法:收集因下肢静脉性溃疡行DSCTV检查的患者资料,评价重建图像质量、浅静脉曲张部位;分析静脉曲张来源,比较DSCTV与超声多普勒(Duplex ultrasound,DUS)检出功能不全静脉结果;评估下肢溃疡与局部曲张浅静脉关系并与临床评估结果对比.结果:本组47条患肢图像质量总体良好,发现浅静脉曲张共99处;DSCTV检出深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)5例患肢,余42例患肢均考虑慢性下肢静脉功能不全(chronic venous insufficiency,CVI):与DUS对比检出功能不全深静脉(deep veins,DV)及大隐静脉(great saphenous veins,GSV)无统计学差异(P=0.70、P=0.51),一致性分析Kappa值分别为0.69及0.53;检出不全穿静脉(perforator veins,PV)差别有统计学意义(P＜0.005),DSCTV检出率高于DUS;下肢皮肤溃疡与局部浅静脉曲张关系DSCTV判定与临床评估结果对比无统计学差异(P=0.41).结论:DSCTV可显示曲张静脉分布,提示曲张来源,同时显示参照结构(如骨骼、肌肉及皮肤等),能较好地指导下肢静脉性溃疡患者的临床诊断及治疗.
-
载多西紫杉醇脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤作用的初步研究
目的:初步探讨载多西紫杉醇脂质微泡(docetaxel-loaded lipid microbubbles,DLLM)联合超声靶向微泡破裂(ultrasound targeted microbubbles destruction,UTMD)对兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤的治疗作用.方法:成功建立兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤动物模型30只,随机分为A组、B组、C组、D组、E组、F组(n=5):A组为单纯药物组、B组为单纯载药微泡组、C组为药物+超声组、D组为单纯微泡+超声组、E组为载药微泡+超声组、F组为对照组.治疗前后用超声测量各组动物颈部淋巴转移瘤大小,计算瘤体体积和抑瘤率;比较各组动物颈部淋巴转移瘤组织中CD34、微血管密度(microvessel density,MVD)及血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)的表达.结果:E组实验动物颈部淋巴转移瘤的抑瘤率高于其他组(P＜0.05),与其他各组相比差异有统计学意义;E组实验动物颈部淋巴转移瘤中CD34表达水平低,MVD、VEGF表达水平显著低于其他各组(P＜0.01)与其他各组相比差异有统计学意义.结论:DLLM联合UTMD不仅能在宏观表现上抑制兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤生长,更能一定程度上从分子生物学水平明显抑制兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤的转移、生长.
-
离体猪肺标本低剂量高分辨率CT扫描的佳管电流选择
目的:探讨离体猪肺标本低剂量高分辨率CT(high resolution computed tomography,HRCT)扫描的佳管电流.方法:应用GE公司Brightspeed Elite 16层螺旋CT对5具离体充气的新鲜猪肺标本进行常规扫描和不同低剂量HRCT扫描(常规扫描管电流为200 mAs,低剂量时管电流分别取80、60、40、20、10 mAs,其他扫描参数不变).评价扫描图像质量,并计算每次扫描的有效辐射剂量(effective dose,ED),获得佳管电流的低剂量容积HRCT技术方案.结果:当管电流分别为80、60、40 mAs时,辐射剂量依次降低,差异有统计学意义(F=173.90,P=0.000),图像质量均能满足诊断要求;当管电流为20 mAs时,辐射剂量更低,图像质量基本满足诊断要求;当管电流为10 mAs时,辐射剂量低,但图像质量较差,不能满足诊断要求.结论:选择管电流在40 mAs时,能同时保证CT图像质量及有效降低辐射剂量,这对临床工作中患者肺部低剂量扫描方案的制定具有重要的参考价值.
-
CT与MRI对成人型环状胰腺诊断的对比分析
目的:探讨成人型环状胰腺的计算机体层成像(computed tomography,CT)及磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)表现,以提高对该病的认识.方法:回顾性分析我院6例成人型环状胰腺病例,其中3例行CT腹部平扫及增强扫描;另外3例行MRI腹部平扫及增强扫描,1例结合磁共振胰胆管成像(magnetic resonance cholangiopancreatography,MRCP)检查.详细分析每例影像学图像表现,终诊断由2位高年资医师盲法观察,得出共同结果.结果:CT及MRI能显示环状胰腺直接征象和间接征象,6例均能显示直接征象,即胰头增大,呈环形包绕十二指肠,2例能清楚显示环状部胰管走行.间接征象包括肝内胆管扩张(2例)、胆总管扩张(3例)、胰管扩张(4例)、胰腺炎(1例)、胆囊炎(1例).结论:CT平扫及增强检查显示成人型环状胰腺图像清晰.
-
Rathke囊肿与垂体位置关系的MRI研究
目的:利用MRI研究Rathke囊肿与垂体的位置关系及其鉴别诊断价值.方法:将48例经手术病理证实的Rathke囊肿设为囊肿组,将误诊为Rathke囊肿的垂体腺瘤18例设为对照组,利用MRI观察2组病灶在冠状位及矢状位上与垂体的位置关系,并作统计学分析.结果:①冠状位囊肿组居于垂体中份者出现率大于对照组,其差异有统计学意义(校正x2=37.898,P=0.000).②矢状位上囊肿组与垂体前后叶间的位置关系有3种,以位于垂体前后叶间(38例,79.2％)多见,对照组中除4例腺瘤难以分辨与垂体前后叶的位置关系外,其余14例均位于前叶.③矢状位上囊肿组病灶出现层面与垂体柄均有交叉,其上缘多位于垂体柄垂体插入部之后(32例,66.7％);对照组中腺瘤出现层而与垂体柄交叉或不交叉,发生交叉者(12例,66.7％),其上缘位于垂体柄垂体插入部之后少见(1例,8.3％),2组柄后出现率差异有统计学意义(校正x2=10.947;P=0.001).结论:Rathke 囊肿与垂体的位置关系有一定规律可循,且与垂体腺瘤存在着较大差异,当囊肿冠状位居于垂体中份,矢状位居于垂体前后叶间,其上缘位于垂体柄垂体插入部之后时具有较高的诊断价值.
-
人工液胸辅助高强度聚焦超声治疗儿童肝母细胞瘤安全性的观察
目的:评估在全身麻醉下人工液胸辅助高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)治疗儿童肝母细胞瘤的有效性及安全性.方法:回顾性分析在全身麻醉气管插管下,18例肝母细胞瘤患儿,在其右侧胸腔注入200～300 ml生理盐水建立人工液胸.分别于气管插管后5 min(T0)、人工液胸建立后10 min(T1)、HIFU治疗30 min(T2)、1 h(T3)、2 h(T4)及治疗结束时(T5)记录有创血压(invasive arterial pressure,IABP)、心率(heart rate,HR)、气道峰压(peak airway pressure,Ppeak)、胸肺顺应性(compliance of lung,Cmpl)、呼末二氧化碳(end-tidal carbon dioxide partial press,PETCO2)、血氧饱和度(oxygen saturation,SpO2);并在以上各时点及HIFU治疗后24 h(T6)作动脉血气分析.HIFU治疗后第1天及第7天行胸部X线摄片,观察双肺和胸水转归,治疗前后行彩超及增强MRI对比治疗效果.结果:在HIFU治疗过程中,患儿各血流动力学指标均保持稳定.Ppeak在建立人工液胸后较建立人工液胸前明显升高(P＜0.05),且持续维持在一个较高水平.Cmpl在建立人工液胸后较建立人工液胸前降低(P＜0.05).PETTCO2在HIFU治疗30 min以后较注入胸水前明显升高(P＜0.05);动脉血气分析中PO2及PCO2均较建立人工液胸前增高(P＜0.05),但pH在各个时间点差异无统计学意义(P＞0.05),且以上呼吸参数改变均在临床安全范围内.胸片提示所有患儿胸水在术后7d内全部吸收,且均未出现气胸、血胸等严重并发症.术后影像学检查(MRI或者增强CT)提示所有患儿病灶均达到预定消融效果.结论:全身麻醉下建立人工液胸辅助HIFU治疗儿童肝母细胞瘤是有效、安全的.
-
聚焦超声辐照兔眼角膜的生物效应研究
目的:利用聚焦超声(focused ultrasound,FU)热效应对兔眼角膜进行辐照,观察其生物效应的变化.方法:13只新西兰兔(26眼)根据辐照功率及辐照角膜直径的不同随机分为A、B、C组.设计A组辐照功率为1W,辐照角膜直径为9 mm;B组辐照功率为1.5 W,辐照角膜直径为9 mm;C组辐照功率为1W,辐照角膜直径为7 mm.分别于术前及术后3、10d、1月、2、3月对术眼进行裂隙灯、自动验光仪、角膜地形图、内皮细胞计数仪及非接触眼压的检查及记录.结果:术后即刻24眼(92.3％)角膜辐照区上皮缺损,术后3d26眼(100％)角膜上皮完整.角膜中央曲率于术后1月开始降低,随观察时间延长呈逐渐降低趋势;屈光度术后呈正向增加趋势,向远视方向发展,与角膜中央曲率变化趋势一致.非接触眼压术后3、10d降低,术后1、2、3月恢复到术前水平.角膜内皮细胞计数术前术后无明显变化.结论:辐照兔眼周边角膜引起角膜中央曲率降低.FU应用于兔眼角膜安全性较高.
-
超声造影剂微循环显影对家兔缺血性视神经病变血流动力学改变的研究
目的:探讨超声造影剂在家兔眼部睫状循环的显影并研究颈动脉狭窄与前部缺血性视神经病变(anterior ischemic optic neuropathy,AION)的关系.方法:将36只健康雄性家兔随机分为手术组(20只40眼)、假手术组(8只16眼)、空白对照组(8只16眼).手术组采取家兔颈动脉部分缝合术建立颈动脉狭窄的动物模型,假手术组行颈动脉临时夹闭,空白组不做任何处理.分别于术后3、7、14、21 d和35 d行颈动脉彩色多普勒超声检查、超声造影剂睫状微循环显影与视神经组织病理学分析.结果:手术组家兔造模成功,术后均出现不同程度颈动脉狭窄.3、7、14、21d和35 d颈动脉内径值分别为(0.74±0.15)、(0.74±0.15)、(0.81±0.20)、(0.88±0.20) mm和(1.05±0.29) mm,较假手术组与空白对照组低,差异无统计学意义(P＜0.05).超声造影剂在睫状动脉显影良好,手术组单个超声微泡移动速度在各时间点分别为(7.10±2.12)、(8.20±2.39)、(8.11±2.24)、(7.46±2.19)mm/s和(10.11±3.14) mm/s,较假手术组及空白对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05).光学显微镜下可见手术组视神经纤维排列紊乱,轴突肿胀呈空泡状,细胞质着色浅,炎性细胞浸润.结论:通过超声造影剂微循环显影可观察到颈动脉狭窄的家兔睫状动脉血流速率下降,并出现视神经的组织病理学改变,提示颈动脉狭窄可以引起缺血性视神经病变.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 z1 |
