一个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系的基因与表型分析

目的:研究遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷家系基因与表型的特点.方法:一个遗传性FⅦ缺乏家系19名成员的FⅦ及其他凝血因子促凝活性检测和用PCR及DNA序列检测FⅦ基因缺陷,初步探讨遗传性FⅦ缺乏的血液凝固变化.结果:在这一家系中,FⅦ缺乏伴FⅫ:C下降或FX:C增高的,在临床上无明显出血现象;FⅦ缺乏症与其基因10827核苷酸C→T突变有关.结论:遗传性FⅦ缺乏发生临床出血除与FⅦ:C水平有关外,还可能与FⅫ:C和FX:C变化引起的凝血和纤溶活性改变有关.

大鼠同种肝移植免疫耐受机制的研究

目的:探讨与大鼠肝移植免疫耐受相关的细胞学改变.方法:分析从肝移植物分离出的移植物浸润细胞(GIC)的表现型和功能,同时比较长期生存的BN→LEW模型和急性排斥反应的DA→LEW模型.结果:通过流式细胞仪计数确定DA→LEW受体的T细胞和激活的T细胞相对比例高于BN→LEW受体;移植后第7、14和30天,GIC表现型证实所有T细胞、OX8阳性细胞(细胞毒T细胞和NK细胞)和OX39阳性细胞(IL-2受体)的相对比例在移植后第7天高,移植后30 d下降;移植后第7天急性排斥反应时GIC细胞毒T细胞活性高于长期生存者.结论:移植后第7天免疫抑制机制已存在;在长期生存的肝移植物中细胞毒T细胞的激活和浸润均受到抑制.

41例Ⅱb型早期胃癌临床及生物学特征分析

目的:了解Ⅱb型早期胃癌的临床和生物学特性.方法:回顾分析1990～2002年我院经手术切除和病理检查证实的早期胃癌203例.结果:203例中,Ⅱb型早期胃癌41例,男女比例为1.05:1(21比20).在Ⅱb型早期胃癌中,女性的平均发病年龄早于男性[(47±14)岁比(52±12)岁,P＜0.05],且男性的分化程度高于女性(高分化12例、低分化9例比高分化3例、低分化17例,P＜0.05).在分化型病例中,12例为黏膜内癌,3例为黏膜下癌,而未分化型病例中21例为黏膜内癌,5例为黏膜下癌.41例Ⅱb早期胃癌中,5例发生淋巴结转移,其中3例为黏膜内癌,2例为黏膜下癌,所有病例均未发现远处转移.结论:在Ⅱb型早期胃癌,女性发病早于男性,肿瘤的分化程度低于男性;而Ⅱb早期胃癌肿瘤的浸润深度与其分化程度有关;淋巴结转移与肿瘤的浸润深度有关.

两个遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系FⅫ基因突变分析

目的:检测两个中国汉族人遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系中的FⅫ基因突变.方法:检测先证者及家系成员血浆FⅫ:C.,并以其外周血单个核细胞中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增FⅫ基因的所有外显子及其侧翼序列,用DNA测序仪检测FⅫ的基因突变.结果:在两个家系中共发现3种杂合型基因突变,即Gly526Asp、7142insertC和Glv542Ser.结论:上述3种FⅫ基因突变是导致中国人遗传性FⅫ缺陷的分子发病机制之一,且均为国际首次发现.

红细胞体积分布宽度在地中海贫血和缺铁性贫血中的实验研究

目的:探讨在血常规检测中红细胞体积分布宽度(RDW-CV)鉴别缺铁性贫血(IDA)和地中海贫血(Thal)的简易方法.方法:用全自动血细胞分析仪检测血常规,全自动快速电泳分析系统作血红蛋白(Hb)分析(部分标本作α、β-Thal基因分析),并用化学发光免疫分析仪检测血清铁蛋白.结果:共检测2 890例(名),其中正常组800名;IDA组210例;Thal组共1 880例,分为6个组:轻型α-Thal组520例,轻型β-Thal组550例,血红蛋白H病(HbH)组180例,重型β-Thal组(重B组)100例,不贫血的α-Thal组(A▲组)210例,不贫血β-Thal组(B▲组)320例.在血常规的RBC、Hb、MCV、RDW-CV等各项检测中,Thal组和IDA组都与正常组差异有非常显著性(P＜0.01),其中RBC、Hb及RDW-CV的比较中,IDA组与Thal组差异有非常显著性(P＜0.01).结论:以血常规分析鉴别IDA和Thal有以下3点:①IDA组RBC总数在4.50×1012/L以下,Hb为50～95g/L;Thal组RBC总数常在4.30×1012/L以上,Hb在80～110g/L范围;②RDW-CV比较中,建议修订参考范围在＜0.150;轻型Thal中A▲组和B▲组,A组和B组分别在0.152、0.157、0.171和0.167;IDA组在0.187;Hb H组和重B组在0.237、0.250,Thal组的RDW-CV值并非在正常范围内;③当血常规显示明显小细胞低色素性贫血时,RDW-CV为0.18～0.23时,必须做Hb电泳分析,以鉴别Hb H病、重型β-Thal还是IDA.以血常规RDW-CV鉴别IDA与Thal,对于暂时无条件开展血清铁蛋白和基因诊断检测的情况下,对小细胞低色素性贫血鉴别诊断有积极的临床意义.

血清6-磷酸葡萄糖异构酶水平对类风湿关节炎的诊断价值

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者血清6-磷酸葡萄糖异构酶(GPI)含量与其他体液免疫指示之间的相关性及对RA的诊断价值.方法:用ELISA法检测60例RA患者、55例SLE患者、20例其他自身免疫病患者及130例非自身免疫病对照组的血清GPI浓度.用全自动特种蛋白仪检测60例RA患者的体液免疫指标.结果:当GPI以0.33μg/ml为临界时,60例RA患者GPI阳性率为38%,55例SLE患者为29%,20例其他自身免疫病患者为25%,70名正常对照阳性率为4.2%,20例炎症患者为10%,20例肿瘤患者及20例乙型肝炎患者阳性率均为零.当临界值为2.0μg/ml时,60例RA患者GPI阳性率为25%,此时其敏感度为25%,特异度为98.2%;55例SLE患者阳性率为5.5%;20例其他自身免疫病患者、70名正常对照、20例炎症、20例肿瘤患者及20例乙型肝炎患者GPI值均为零.RA患者中GPI浓度与类风湿因子(RF)浓度呈正相关(r=0.828,P＜0.05),但与其他体液免疫指标无相关性.结论:GPI对RA的发生可能起到一定的作用.尤其当值＞2.0μg/ml时,对RA的诊断具有较高的特异性.

血红蛋白分析对地中海贫血筛查的评估

目的:评估血红蛋白分析对地中海贫血(Thal)诊断能力.方法:用HLC-723G7自动血红蛋白分析仪对以临床表现流行病学资料和醋纤薄膜电泳等确定的115例Thal患者进行血红蛋白分析,结合分子诊断评估诊断价值.结果:以HbA2≥5.5%作为血红蛋白分析对β-Thal的诊断标准,则与DNA分析的符合率为81.5%;以HbA2≤2.5%为仪器对α-Thal的诊断标准,则与DNA分析的符合率为92.5%.结论:血红蛋白分析可提供α、βThal的诊断信息,若能结合更多的临床和DNA分析数据,可作为α、β地中海贫血的确诊手段.

远程细胞学诊断的准确性分析

目的:建立全国范围的远程细胞学诊断网络,初步探讨远程细胞学诊断的准确性.方法:在全国8个城市13所医院或医学院建立远程细胞学诊断网络,60份细胞学标本的数码图像资料通过专门的网页或电子邮件发送给参加单位.参加者根据屏幕图像作出远程诊断.结果:共收到456份远程诊断报告,与传统光学显微镜检查相比,符合率达86%～97%,平均94%.远程诊断自信度达96%,图像满意度达98%.结论:利用互联网传送细胞学图像,其诊断的准确度与光学显微镜相似,这种模式还可应用到全国范围的远程教学和形态学诊断的质量控制.

门控心肌显像在测定左心室射血分数中的应用

目的:应用单光子发射计算机体层摄影(SPECT)技术同时测定不同采集条件下左心室射血分数(LVEF)值,并与超声LVEF值比较,研究其一致性和相关性.方法:选择172例受试者,利用SPECT共行门控显像技术,用99mTc-MIBI作为示踪剂,同时将心动周期设定8和16等份,在一次采集中得到两种条件的LVEF值,并与1周时间所得超声LVEF值作比较,研究门控心肌显像在LVEF测定中的影响因素,以及与常规超声法有无相关性.结果:统计分析显示,心动周期分成8和16等份所得的LVEF值大小是不同的,后者LVEF值较大,但两种方法所得结果存在相关关系.另一方面,SPECT所得的LVEF值均较超声心动图(UCG)所得值大,但与UCG所得结果具有很好一致性.结论:门控心肌显像在心肌活力判断时,利用共行显像技术可同时得到LVEF等心功能参数,其LVEF大小与超声结果有很大相关性,但其值存在显著差异,其正常参考范围尚需进一步研究.

正常上皮细胞特异性-1基因在胃癌细胞株中的表达及甲基化调控

目的:研究正常上皮细胞特异性-1(NES1)基因表达及其CpG岛甲基化状况与胃癌的关系.方法:分别培养胃癌细胞MKN-28(高分化)、SGC-7901、AGS(均中分化)、MKN-45(低分化)、HGC-27(未分化)和原代正常胃上皮细胞.提取细胞RNA,经RT-PCR检测NES1在各细胞株中的表达.以不同浓度DNA去甲基化抑制剂5-aza-dc处理胃癌细胞,RT-PCR检测其NES1 mRNA表达.提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后MSP分析其CpG岛甲基化状态.结果:各肿瘤细胞株中NES1 mRNA表达较胃正常上皮细胞有不同程度降低.甲基化检测显示NES1表达减少的胃癌细胞株均存在不同程度的NES1基因外显子3 CpG岛甲基化.NES1表达降低的胃癌细胞株经5-aza-d处理后NES1表达上调.结论:NES1胃癌细胞株中低表达,表达下调与该基因外显子3周围CpG岛甲基化有关.5-aza-dc可使NES1表达降低的胃癌细胞株重新表达NES1 mRNA.提示NES1基因CpG岛甲基化可能是NES1在胃癌细胞系中表达缺失的分子机制.

家族性高胆固醇血症黄色瘤的家系遗传分析

目的:检测中国汉族家族性高胆固醇血症(familial hyper-cholesterolemia,FH)家系低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变,探讨FH发病的分子机制.方法:采用PCR扩增结合核苷酸序列分析检测1例临床诊断为FH纯合子患者及其家系成员LDLR基因启动子和全部18个外显子片段,结果与GenBank公布的该基因正常序列对比找出突变,同时检测载脂蛋白B100(apoB100)基因Q3500R突变,以排除家族性apoB100缺陷症.结果:该患者LDLR基因第12外显子的第1747位和1773位碱基发生替换,前者导致H583Y突变,而后者未发现氨基酸改变.同时未检测出患者及其核心家系成员apoB1000Q3500R突变.结论:FH是一常染色体显性遗传性疾病,为基因突变导致LDLR缺陷所致的遗传性疾病.检测相关基因突变对临床干预和遗传指导有参考价值.

一种新的整合素αⅡbPro126His突变导致的遗传性血小板无力症

目的:对1例遗传性血小板无力症(GT)先证者及其家系成员进行表型和基因诊断,并探讨其分子发病机制.方法:通过血小板计数、血涂片观察血小板、出血时间测定、凝血象检查和血小板聚集试验进行表型诊断;流式细胞术检测血小板表面αⅡb和β3的含量;PCR法扩增先证者基因组DNAαⅡb和β3的所有外显子及其侧翼序列;PCR产物采用末端标记双脱氧法进行直接基因测序,对发现的突变位点采用AS-PCR法扩增先证者及其家系成员和正常人相对应的片段.结果:先证者血小板计数正常、血涂片血小板分散不聚集,出血时间明显延长,凝血象正常,对ADP、凝血酶、肾上腺素、胶原、花生四烯酸等多种诱聚剂反应低下,而对瑞斯托霉素的反应基本正常;先证者血小板表面未检测到αⅡb,β3阳性血小板仅占8%,平均荧光强度明显减弱;先证者在αⅡb基因外显子4存在C470A纯合突变,导致αⅡb氨基酸序列Pro126His(P126H)替换.父母为近亲婚配,均为该位点的杂合突变.AS-PCR排除了该突变为基因多态性的可能.结论:整合素αⅡb基因外显子4C470A(P126H)纯合错义突变是导致该患者GT的分子机制,是国际上首次报道的一种新的整合素αⅡb基因错义突变.

子宫上皮样滋养细胞肿瘤

目的:探讨子宫上皮样滋养细胞肿瘤的临床病理学特征.方法:复习3例子宫上皮样滋养细胞肿瘤的临床资料,并进行组织病理学和免疫组织化学方法观察.结果:3例子宫上皮样滋养细胞肿瘤患者的年龄分别36、46和48岁.临床上主要表现为不规则的阴道流血和盆腔包块.组织学检查显示肿瘤主要由相对单一的单个核滋养细胞组成,排列成片状和条索状的紧密细胞巢,常见广泛坏死区周围绕以存活的瘤细胞岛,形成"地图样外观".免疫组化标记检查显示瘤细胞表达人体胎盘催乳素(hPL)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、胎盘碱性磷酸酶(PLAP)、细胞角蛋白(CKpan)、CK18、上皮膜抗原(EMA)、表皮因子生长受体(EGFR)、上皮钙黏素、黑色素瘤细胞黏附分子(Mel-CAM)和抑制素-α.结论:子宫上皮样滋养细胞肿瘤是罕见的、起源于中间滋养细胞的肿瘤.确诊依赖于组织病理学观察和免疫组织化学标记.

血脂与肝脂酶启动子514C/T多态性的关系

目的:探讨肝脂酶(HL)启动子514C/T基因多态性与血脂水平的关系.方法:用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP),对112名三酰甘油(TG)正常水平者和103例高TG者的HL启动子514C/T基因多态性进行研究.结果:HL启动子514TT等位基因频率在高TG组为0.4563,比正常TG组0.3348高,但差异无显著性.在总研究组中TT型的年龄、TG浓度明显高于CC型和CT型,而载脂蛋白A1(ApoA1)则明显降低(P0＜.05).按性别分层后发现TT型女性和男性的TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的浓度均明显高于非TT型同性(P＜0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、ApoA1浓度则分别低于非TT型的同性(P＜0.05).经Logistic回归分析显示总胆固醇(TC)、ApoB、TT型是高TG危险因子,而ApoA1、HDL-C则是保护因子.结论:HL启动子514C/T多态性与高TG血症的发生相关,并可影响血浆脂类的代谢,可能是高TG所致疾病的危险因素.

正确选择血标本的思考

循环着的血液在维持机体稳态中处于位.绝大多数疾病的发生发展在血液中都有一定的反映.因此,血标本的正确选择对于临床检验和医学科研具有重要意义.

培养适应学科发展需要的检验医师--我国医学检验教育的当务之急

医学检验科是以诊断、预防、治疗人体疾病或评估健康状况提供信息为目的,对取自人体的材料进行生物学、生物化学、微生物学、免疫学、血液学、血液免疫学、细胞学、生物物理学等检验,是临床医学二级学科.医学检验科还可以从实验室的角度为临床科室提供咨询性服务,包括实验结果的解释和为进一步适当检查提供建议.从此定义来看,医学检验科是临床医学的一个重要组成部分,既是一个独立的临床科室,又与临床各学科密切相关.

论精品课程建设中的关键问题

精品课程建设是教育部实施"质量工程"的重要内容之一.近年,不断增长的教育需求与教育供给不足、特别是优质教育供给不足的矛盾日益突出.为使更多学生享受优质教育,精品课程强调教授主讲、使用信息技术和教学资源免费开放三个关键问题,故将教育信息化的重点引向课程建设、改革教学模式、带动教学现代化是提高教学质量和培养高素质人才的重大举措.教育部规划用5年时间建成一拥有数千门各门类、专业的校、省、国家三级精品课程的开放体系,为不断提高我国教学质量奠定重要基础,为我国高等教育事业的可持续发展将产生深远影响.自教育部提出精品课程建设至今已有3年,在其建设和申报的过程中,已积累了一些经验和体会,也发现一些不利于精品课程健康发展的问题.本文就精品课程建设中的关键问题作一评述.

血小板无力症的临床诊断和发病机制的研究进展

血小板无力症是一种常染色体隐性遗传的血小板功能障碍性疾病,由Glanzmann于1918年首先报道本病,故又称为Glanzmann病(Glanzmann thrombasthenia,GT).本病的特点是血小板对多种生理性诱聚剂反应低下或缺如,由血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)或Ⅲa(GPⅢa)质或量的缺陷引起,患者常终生存在出血倾向[1].血小板膜糖蛋白Ⅱb-Ⅲa(整合素αⅡbβ3)复合物是血小板表面表达量丰富的整合蛋白,在血小板活化后其可以结合纤维蛋白原和血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF),介导血小板的聚集,是正常止血机制的重要因素[2].由于αⅡbβ3中任何亚基发生异常改变,导致该复合物在血小板膜上数量减少和(或)功能缺陷,血小板发生聚集障碍,导致GT的发生[1].

实时荧光PCR技术的研究及其应用进展

聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一敏感特异的检测核酸分子的定性方法,在疾病的基因诊断中起重要作用,但传统的PCR技术在临床应用中遇到些难以克服的问题,如PCR后处理需手工操作、难以实现定量、PCR产物的污染等.近年,实时PCR(real-time PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,其以特异性强、灵敏度高、自动化、重复性好、定量准确、全封闭反应等优点,成为分子生物学和分子诊断的重要技术平台,并广泛应用于遗传病、病原体和肿瘤等方面的检测和诊断.

X染色体的克隆性分析及其在乳腺肿瘤研究中的应用

近年,乳腺癌的研究由形态病理学进入分子病理学领域.探讨病变的克隆性即克隆性分析(clonality analysis)在肿瘤病理诊断和基础研究中有着重要价值,自20世纪90年代以来,国外一些实验室陆续建立该技术,本世纪初,国内也有数名学者引进该技术探讨肿瘤的克隆性,取得了重要进展.本文主要介绍基于女性X染色体的克隆性分析技术及其在乳腺肿瘤研究中的应用进展情况.

网织血小板的研究和应用

Ingram和Coopersmith 1969年首次发现,在大量失血后,外周血中会出现一种不同的血小板.这种新释放出来的血小板比成熟血小板体积更大,更加活跃,胞质颗粒粗糙,可以被美蓝染色,胞质中残存RNA成分,这种不成熟血小板称为网织血小板(reticulated platelet,RP)或未成熟血小板,与网织红细胞相似,其是巨核细胞转化为血小板过程中的一种幼稚阶段.

乳腺良性与恶性上皮性病变中钙化特性的比较研究

本研究旨在通过对乳腺手术切除标本病理组织学中钙化的成形结构、位置以及钙化性状的综合比较,讨论其在乳腺上皮性疾病诊断的意义,特别是在乳腺穿刺活检诊断中的应用价值.

肝纤维化时血清Ⅳ型胶原蛋白的临床意义

本试验采用一种新的检测方法--乳胶透射比浊法检测118例肝病患者和20名正常人血清Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)浓度及其他肝功能指标水平,以探讨血清Ⅳ-C浓度对不同肝脏疾病的临床诊断价值.

崇明地区小儿呼吸道感染流感嗜血杆菌的分型及耐药性分析

流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)是引起儿童急性呼吸道感染的常见病原菌[1],国内报道Hi对其常规用药氨苄西林耐药率升高及对新型抗菌药出现不同程度的低耐药情况,因此对我院和崇明县妇幼保健院2003年1月～2005年6月儿科门诊及住院部诊断为呼吸道感染儿童培养分离的嗜血杆菌行血清分型、生物学分型及耐药性监测,为崇明地区治疗由Hi引起的小儿呼吸道感染提供实验依据.

骨内腱鞘囊肿的MR影像学表现

原发性骨内腱鞘囊肿又称邻关节骨囊肿,是指邻近关节软骨下的良性囊肿,是由纤维组织构成的多发性病变,伴有广泛的黏液样变,是一种少见病变.本文回顾分析17例原发性骨内腱鞘囊肿,共23处病灶,现报道如下.

胃癌和癌前病变患者血清中血管内皮生长因子含量与临床病理特征关系

本研究应用ELISA法检测胃癌、胃癌前病变患者和正常人血清血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,探讨其与胃癌侵袭和转移的关系.

右侧股骨下端神经纤维瘤一例

病例:男,48岁.因右膝关节疼痛2年余人院.患者2年前出现右膝关节疼痛,呈持续性钝痛,且疼痛逐渐加重,右膝活动受限.在当地医院以"右膝关节结核"治疗无明显好转,遂转入我院.体检:右侧股骨下端稍肿胀,局部压痛,右下肢萎缩,右膝关节屈伸度约30°～80°.实验室检查均正常.右膝关节正侧位片见右股骨下端骨骺端腓侧一溶骨性破坏,边缘清楚,但不规则,骨皮质尚存在,但明显变薄,邻近软组织略肿胀,未见骨膜反应,考虑骨巨细胞瘤可能(见图1).

易栓症的实验诊断与循证

血栓形成(thrombosis)是常见的临床疾病和死亡原因之一.Bick认为[1],在美国血栓形成是常见的死亡原因;每年超过200万人,还有数量相当的非致命性深静脉血栓形成(DVT)、肺栓塞(PE)、脑血栓形成(CVT)、暂时性脑缺血、冠状动脉血栓形成、视网膜血栓形成等;每年血栓性疾病的死亡率为恶性肿瘤(55万人/年)的4倍;因此,血栓形成的发病率、死亡率和医疗费用均甚高.Bauer等[2]认为静脉血栓形成(VT)的年发病率为100～300/10万,主要为DVT和PE.

凝血与临床检验中血标本的选择

从生物医学观点来看,机体内环境的稳态(homeostasis)是十分重要的.所谓机体内环境,实际就是体内的细胞外液.细胞外液理化性质与组成的相对恒定,是细胞维持生理、生化与形态正常的必要条件.在维持机体内环境稳态中,循环着的血液起着关键作用.大多数疾病可能与血液中一定变化息息相关,故血液检验在疾病诊断与疗效判断中十分重要.

诊断学理论与实践2005年第4卷总目次