临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
Journal of Clinical Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery 림상이비인후두경외과잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 影响因子： 0.83
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1781
- 国内刊号： 42-1764/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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短发夹RNA抑制hTERT基因对鼻咽癌细胞端粒酶活性及PCNA和Caspase-3蛋白表达的影响
目的:研究靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA)对鼻咽癌细胞系(CNE)端粒酶活性及PCNA、Caspase-3蛋白表达的影响.方法:构建表达靶向hTERT mRNA特异的shRNA的质粒pEGFP-shTERT.将pEGFP-shTERT转染CNE细胞,TRAP PCR-ELISA法检测端粒酶活性,MTT法测定细胞增殖活性,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blotting检测蛋白表达.结果:pEGFP-shTERT成功转染入CNE细胞后, 端粒酶活性显著下降;细胞增殖活性明显受抑制;大量细胞凋亡;处理后24及48 h,PCNA蛋白下调至64.41%、58.67%(P<0.05),Caspase-3上调到1.55、1.60倍(P<0.05).结论:shRNA靶向抑制hTERT基因在鼻咽癌CNE细胞系中的表达,能显著地抑制细胞的端粒酶活性,调节PCNA和Caspase-3蛋白表达,从而抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡.端粒酶、PCNA和Caspase-3共同参与了鼻咽癌的发生、发展过程.
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靶向转录因子NF-κB p65的siRNA对Hep-2细胞增殖及表达的影响
目的:以喉鳞状细胞癌Hep-2细胞为研究对象,应用RNAi技术特异性的抑制NF-κBp65的表达,观察其对癌细胞增殖、蛋白和mRNA表达的影响.方法:用NF-κBp65siRNA转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,采用Western Blotting方法检测Hep-2细胞转染前、后NF-κBp65的蛋白表达;采用RT-PCR检测Hep-2细胞转染前、后NF-κBp65的mRNA表达水平;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况.结果:Western Blotting结果显示随着NF-κBp65siRNA作用时间的延长,蛋白表达水平逐渐降低.半定量RT-PCR结果表明,转染NF-κBp65siRNA 24、48和72 h后的Hep-2细胞,与未转染组的Hep-2细胞相比,NF-κBp65 mRNA的表达水平逐渐下调(P＜0.05);MTT法显示不同时间NF-κBp65siRNA转染Hep-2细胞后,细胞增殖活性受抑制情况与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:NF-κBp65siRNA对Hep-2细胞的增殖活性有明显的抑制作用,并且可以特异性地抑制目的基因NF-κB p65在mRNA和蛋白水平上的表达,其作用具有时间依赖性.
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喉鳞状细胞癌瘤内淋巴管生成与淋巴转移关系的研究
目的:探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)瘤内淋巴管生成与淋巴转移的关系,为LSCC转移和预后的判定以及治疗提供一定的理论依据.方法:通过免疫病理学方法计数LSCC组织中淋巴管密度,通过分子生物学方法检测中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达,统计学方法对淋巴管密度(LVD)和患者性别、肿瘤TNM分期、VEGF-C表达和肿瘤分化程度进行分析,得出相关性结论.结果:喉癌瘤体内有新生淋巴管存在,喉癌组织中VEGF-C mRNA的平均水平与正常组织之间存在明显差异(P<0.05),瘤组织比正常组织高4～5倍,而且喉癌组织内VEGF-C的水平与瘤内LVD高低之间差异有统计学意义(P<0.05),LVD在患者的性别,临床T分期以及肿瘤的分化程度各组之间均差异无统计学意义(均P>0.05).而与N分期内差异有统计学意义(P<0.05).结论:LSCC瘤组织中存在小的增殖性淋巴管且LSCC瘤内LVD的增高与肿瘤淋巴转移有关;VEGF-C mRNA在LSCC组织中的表达要比正常对照组织高,且VEGF-C mRNA的高表达可能会通过促进瘤内淋巴管的增生来促进喉癌的淋巴转移.
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儿童腺样体切除术对腭咽闭合功能的影响
目的:研究儿童腺样体切除术对腭咽闭合功能的早期及长期影响.方法:对行腺样体切除术的患儿分别于术前、术后1周、1个月及3个月进行患儿父母或陪护人员调查问卷、吹泡试验及计算机语音声学分析.结果:①患儿父母或陪护人员调查问卷显示,31例中有22例术后有鼻音增高的改变,有9例术后3个月此症状仍存在.有7例术后出现鼻腔食物反流,且均同时有鼻音增高,但鼻腔食物反流全部于术后1个月内消失.②吹泡试验反映术后1周内患儿存在腭咽闭合功能不全(P<0.01),术后1、3个月差异均无统计学意义(均P<0.05).③计算机语音声学分析结果显示,患者术后短期内出现辅音残缺、元音共振峰残缺和鼻化音的异常语图表现,术后3个月时基本恢复正常;术后/i:/音F3峰值与术前相比降低,尤其是术后1周时F3峰值降低明显(P<0.01).结论:儿童腺样体切除术后大部分儿童可出现一过性腭咽闭合功能不全的表现,但未见其对腭咽闭合功能有长期的影响.
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UPPP术后并发症发生率及危险因素分析
目的:探讨UPPP术后24 h内并发症的发生率及其危险因素,为早期预防术后并发症的发生提供理论依据.方法:回顾性分析162例接受UPPP手术的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者,按照有无发生术后并发症进行分组,比较2组患者术前及术中各项临床指标的差异,对重要的临床参数作单因素及多元逐步Logistic回归分析.结果:31例(19.1%)患者术后24 h内出现并发症,包括呼吸并发症21例(13.0%),心血管并发症6例(3.7%),术后出血9例(5.6%).并发症组和无并发症组之间在BMI、AHI、LSAT及困难插管等方面均差异有统计学意义(均P<0.05).多因素回归分析显示,BMI(OR=1.136)、AHI(OR=4.828)及困难插管(OR=1.971)为术后24 h内出现并发症的独立危险因素.结论:OSAHS患者术前BMI、AHI及麻醉困难插管是预测术后24小时内出现并发症的主要指标.对于肥胖、严重OSAHS患者及插管困难患者,应提高警惕,做好围术期处理,避免术后并发症的发生.
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UPPP术后阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者皮质醇及促肾上腺皮质激素的变化
目的:通过研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者UPPP前后皮质醇及促肾上腺皮质激素(ACTH)的变化,探讨OSAHS患者下丘脑-垂体-肾上腺轴激素水平的改变.方法:选择OSAHS患者30例行PSG检查及UPPP术,并于术前及术后6个月均以放射免疫法检测入睡时及晨起ACTH水平及入睡后每2 h皮质醇(COR)血浆浓度测定,分析其变化关系.结果:OSAHS患者术前的COR水平明显高于术后,且分泌的节律发生改变[术前入睡时COR(170.4±56.5)μg/L,0:00时COR(252.2±62.3)μg/L,2:00时COR(276.9±70.4)μg/L,4:00时COR(285.9±63.2)μg/L ,晨起时COR(395.1±85.2)μg/L;术后入睡时COR(133.5±24.8)μg/L,0:00时COR(99.9±9.2)μg/L,2:00时COR(103.8±13.2)μg/L,4:00时COR(146.2±22.5)μg/L,晨起时COR(199.6±20.9)μg/L]而ACTH的分泌差异无统计学意义;术前术后的平均血氧饱和度与平均觉醒时间呈负相关(r=-0.713).结论:OSAHS患者的下丘脑-垂体-肾上腺轴水平异常,反馈调节紊乱,并与睡眠觉醒和夜间低氧有关.
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葫芦素B对喉癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究
目的:体内外观察葫芦素B对人喉癌细胞系Hep-2的抑制增殖和诱导凋亡作用并探讨其作用机制,为临床应用提供实验依据.方法:用0.1、1.0、10.0和100.0 μmol/L的葫芦素B作用于Hep-2细胞24、48和72 h, MTT法检测细胞增殖.用0.1、1.0和10.0 μmol/L的葫芦素B作用于Hep-2细胞24 h或10 μmol/L葫芦素B作用8、12和24 h,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞凋亡.Western blot检测p-STAT3、cyclin B1和Bcl-2的蛋白表达.建立喉癌裸鼠移植瘤模型,观察葫芦素B的体内抑瘤作用.结果:MTT结果显示葫芦素B对Hep-2 细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测发现随着葫芦素B浓度增高或作用时间延长,处于G2/M期细胞的比例逐渐升高,同时伴有G0/G1期细胞减少,细胞凋亡率逐渐升高,经统计学分析,各实验组之间及其与对照组之间的均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);荧光显微镜观察可见典型细胞凋亡;Western blot检测显示葫芦素B可剂量依赖性抑制p-STAT3、cyclin B1和Bcl-2的蛋白表达.体内实验发现低、中、高剂量组的抑瘤率分别是32.43%、43.24%和70.27%.结论:葫芦素B通过抑制STAT3活化,抑制cyclin B1和Bcl-2的蛋白表达,引起喉癌细胞G2/M期阻滞、增殖抑制和凋亡,发挥对喉癌的抗癌效应.
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靶向c-myc基因的siRNA抑制喉癌细胞系Hep-2的研究
目的:探讨siRNA靶向人c-myc基因对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞生长增殖的抑制作用.方法:根据人c-myc基因设计和合成siRNA和随机的siN.C作为阴性对照,通过转染载体Lipofectamine 2000脂质体转染Hep-2细胞,进行MTT、形态学和实时PCR法检测,观察其干扰效果.结果:①MTT结果显示人端粒酶siRNA能有效抑制Hep-2细胞增殖;②实时PCR结果显示转染组与阴性对照组和空白对照组相比,c-myc mRNA表达明显减弱,转染组S3 c-myc mRNA 抑制率达到94%;③形态学结果显示人c-myc siRNA能有效抑制Hep-2细胞增殖,肿瘤细胞异形性减小.结论:靶向c-myc的siRNA能显著抑制喉鳞状细胞癌生长增殖.
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鼻咽癌组织中程序性死亡配体-1的表达及其临床意义
目的:探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)在鼻咽癌(NPC)中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学染色法检测59例NPC患者的癌组织和10例正常鼻咽黏膜组织中PD-L1的表达,RT-PCR技术检测30例NPC患者的癌组织及其中10例距离肿瘤组织3 cm以外的正常鼻咽黏膜组织中PD-L1mRNA的表达,并对其表达水平与临床病理组织学参数之间的关系进行相关性分析.结果:正常鼻咽黏膜组织中不表达PD-L1分子,而NPC癌组织中免疫组织化学PD-L1阳性表达率为67.8%(40/59),RT-PCR检测PD-L1mRNA的阳性表达率为66.7%(20/30).PD-L1的表达与肿瘤分期及淋巴结转移明显相关(P<0.05),但与患者的年龄、性别无明显相关(P>0.05).结论:PD-L1 NPC组织中的高表达,可能在肿瘤的发生、发展中起到一定的作用,有希望成为NPC免疫治疗的一个新靶点.
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化脓性甲状腺炎与第三鳃裂瘘的关系
化脓性甲状腺炎虽然发病率低,但基层医院并不鲜见.其临床情况较急重,且常易误诊.一般认为积极的抗感染治疗或外科切开引流即可治愈[1].笔者观察,化脓性甲状腺炎如反复发作,要探究可能与第三鳃裂瘘有关.
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甲状舌管囊肿感染期的手术治疗
甲状舌管囊肿在感染期手术切除国内尚未报道,本文对我院1995年5月～2006年11月35例感染期甲状舌管囊肿患者进行手术治疗,效果满意,报告如下.
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喉黏膜炎症病变组织活检经抗酸染色诊断结核3例
1950年以后,喉结核已基本消失,而近年来发病率再次升高.喉黏膜结核是由结核杆菌通过直接扩散、血行及淋巴管途径播散所致喉部的特殊性感染性疾病.多继发于肺结核,原发者较少见.但近年来研究发现喉黏膜结核约20%是原发性.喉黏膜结核患者症状不明显,病理形态特点不典型,虽经喉镜黏膜组织活检,但仍容易被误诊或漏诊.现对我院喉黏膜不典型结核病例进行临床病理学分析及文献复习,加深对喉黏膜不典型结核特点的认识,提高本病的诊断率.
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双侧甲状旁腺瘤伴甲状腺乳头状癌致原发性甲状旁腺功能亢进1例
外科治疗原发性甲状旁腺功能亢进(primary hyperparathyroidism,PHTD)时,甲状旁腺伴甲状腺病变并不少见.但甲状旁腺腺瘤伴非髓样甲状腺癌报道较少,发生率约占全部甲状旁腺功能亢进的3.27%.双侧甲状旁腺瘤同时伴甲状腺乳头状癌更为少见.我科2007年6月收治该病患者1例,现报道如下.
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声门上型喉癌临床N0患者颈淋巴结转移及治疗
声门上型喉癌隐性淋巴结转移率高,通常报道其颈转移率约为60%左右,其中声门上型喉癌N0患者的颈淋巴结转移率平均在30%左右[1].许多学者对N0患者行同期或2期颈清扫术后的标本进行连续切片检查,发现隐性淋巴结转移率可达38%以上.而随着分子生物学技术的提高,免疫组织化学的应用以及基因分析的引入,所能发现的潜在转移可能还远不止这个值,如何诊断、治疗此种类型颈淋巴结转移,是人们一直所关注的重点.本文就近年来有关声门上型喉癌N0患者的临床研究资料综述如下.
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激光切除犬前连合不同范围后创面恢复情况观察
目的:采用自行研制的激光光纤把持器,以半导体激光烧灼实验犬前连合不同范围层次后,观察其创面恢复情况,以寻求临床治疗侵犯到前连合处声门癌的可行有效方法.方法:12条实验犬随机分成3组,A组前连合烧灼至甲状软骨内膜加右侧室带、声带加左侧声带前1/3;B组灼除甲状软骨内膜及部分前连合软骨加右侧室带、声带加左侧声带前1/3;C组灼除甲状软骨内膜及前连合处甲状软骨加右侧室带、声带加左侧声带前1/3,并于前连合处开一小窗.术后即刻、1周和4周分别观察各实验犬创面恢复情况、犬吠声嘶情况及有无出现术后并发症等.结果:全部实验犬均在半导体激光下1次完成手术,术后1周A组手术创面即有新生黏膜覆盖,术区水肿,炎性反应,犬吠声嘶程度较重;B组创面新生黏膜覆盖不全,慢性炎性改变,可见少许渗出及伪膜,犬吠声嘶程度较重;C组创面新生黏膜覆盖不全,局部见渗出较多,术区水肿,炎性反应及伪膜,犬吠声嘶程度较重,可见肉芽生长.术后4周A、B、C 3组前连合处均见不同程度粘连,有喉蹼形成,声带长度较前变短,A、B 2组前连合处黏膜色泽基本正常,炎性反应轻;C组前连合处黏膜可见暗红色慢性炎性反应改变,开窗处见有新生黏膜完全封闭,无感染迹象.大体标本观察,3组前连合处创面由修复上皮完全覆盖,C组前连合处见有完整黏膜及瘢痕样组织将开窗处创面封闭.3组1～3号实验犬4周后吠声嘶状况:A组较轻,B、C组2组稍重;3组体重术前术后变化不明显;各组术后均无明显并发症发生.结论:半导体激光烧灼实验犬前连合不同范围层次后,其创面恢复情况有差异,但终创面均可获得良好愈合,无严重术后并发症,对临床中应用激光治疗侵犯至前连合的声门癌有较高的参考价值.
