医学分子生物学杂志2014年第十一卷（第1～6期）总目次

非编码 RNA 在肿瘤中对自噬的调控

非编码 RNA (ncRNA)是不参与蛋白质编码的 RNA 的总称，包括微小 RNA (miRNA)﹑ siRNA﹑piRNA﹑长链非编码 RNA (lncRNA)﹑转运 RNA (tRNA)﹑核糖体 RNA (rRNA)等。其在蛋白质转录与后转录过程中有重要的调节作用。自噬是细胞在异常环境中维持生存的一种方式。大量研究表明自噬与肿瘤也存在着密切的关系，而自噬对于肿瘤的影响具有“两面性”。许多研究探讨了非编码 RNA 在肿瘤细胞中对于自噬过程的调控，文章综述了 miRNA 与 lncRNA 这两种研究深入的非编码 RNA。

Endocan 与肝细胞肝癌发生发展

Endocan 是一种可溶性蛋白多糖，它由165氨基酸组成的核心蛋白及与之共价结合的单链硫酸皮肤素构成。 Endocan 主要表达于活化的内皮细胞并接受多种细胞因子和生长因子的调节。在肝细胞肝癌中， endocan 的表达明显增加，并可促进肝细胞肝癌的发生﹑发展。研究发现其可通过核因子 kappa B (NF-ΚB)调节肝脏炎症-纤维化-癌轴﹑扰乱细胞周期﹑作用于血管内皮生长因子﹑破坏细胞间连接﹑抑制淋巴细胞功能相关抗原1/细胞间黏附分子1及改变肿瘤微环境多种复杂方式参与细胞增殖﹑肿瘤血管生成﹑转移及免疫多个病理过程。因此， endocan 可作为一种潜在的肝细胞肝癌标志物及治疗靶点。

转录因子 FOXA2与肺发育相关研究

在肺发育过程中，需要多种转录因子﹑生长因子以及其他的信号分子协调作用，共同促进细胞的增殖和分化，实现肺正常发育，其中翼螺旋转录因子 Foxa2可参与促进肺上皮细胞增殖分化﹑表面活性物质合成等过程，在建立正常肺形态和功能上发挥重要作用，其表达异常可致肺发育异常。

姜黄素对小鼠妊娠期子宫内膜凋亡的分子调控

目的：研究姜黄素对小鼠胚胎着床，及其妊娠期子宫内膜细胞凋亡的分子调控机制。方法将见阴栓昆明白小鼠随机分为5组，连续隔日腹腔注射姜黄素，第7天(D7)回收组织进行 RT-PCR 和 West-ern 印迹检测。结果与姜黄素低剂量组相比，姜黄素中剂量组平均妊娠胎仔数显著升高(P ﹤0.05)，而在高剂量组则显著下降(P ﹤0.05)，且妊娠率随之下降。基因检测结果表明，凋亡因子 PTEN﹑ Caspase-3的相对 mRNA 水平随着姜黄素剂量的升高显著升高(低剂量组，中剂量组 P ﹤0.05；高剂量组 P ﹤0.01)。而核转录因子 NF-ΚB 的表达则显著降低(低剂量组，中剂量组 P ﹤0.05；高剂量组 P ﹤0.01)。且蛋白水平的检测与基因水平的检测结果相一致。结论姜黄素在小鼠胚胎着床及妊娠期子宫内膜细胞凋亡中起重要的调控作用，这对于寻找新的生殖调控手段具有重要意义。

NINJ2基因多态性与大动脉粥样硬化型脑梗死的关系

目的：对神经损伤诱导蛋白2(nerve injury induced protein 2, NINJ2)基因多态性与大动脉粥样硬化型脑梗死(artery atherosclerotic cerebral infarction, LAA)的相关性进行研究,为其临床研究提供依据。方法选择128例我院诊断为 LAA 的患者作为病例组,同期随机抽取112例健康体检对象作为对照组,根据既往研究的阳性结果及 HapMap 数据库,选择 NINJ2基因 rs11833579及 rs108493732个单核苷酸多态性(SNP)位点。采用 PCR-RFLP 技术进行2个 SNP 基因分型,分析2 SNP 位点多态性与 LAA 的相关性。结果病例组﹑对照组基因型及等位基因频率分布均符合 Hardy-Weinberg 平衡检验( P ﹥0.05)。两组间rs11833579与 rs10849373基因型(P ＝0.512﹑0.514)﹑等位基因频率(P ＝0.811﹑0.713)及显性模型(P＝0.544﹑0.656)比较均无统计学意义(P ﹥0.05)；但两组间 rs11833579位点隐性模型(AA + AG)比较差异有统计学意义(P ＝0.033)。 NINJ2基因 rs11833579的 GA + AA 基因型在后循环动脉粥样硬化中的频率高于其他基因型,差异具有统计学意义(P ﹤0.05)。结论 NINJ2基因 rs11833579位点隐性模型(AA +AG)与 LAA 的发生存在密切相关性。但仍需对单体型及易感基因和环境因素的交互作用进行研究,以进一步分析 NINJ2基因与 LAA 的相关性。

牛蒡苷元通过调节 MMP-2，MMP-9表达抑制增生性瘢痕的形成

目的：观察牛蒡苷元对增生性瘢痕(hypertrophic scar)形成的作用,并探讨其抑制增生性瘢痕形成的机制。方法新西兰大耳兔25只,将其分为对照组( A 组),模型组(B 组),牛蒡苷元治疗组(0.5 mg/ ml)(C 组),牛蒡苷元治疗组(2 mg/ ml)(D 组),牛蒡苷元治疗组(6 mg/ ml)(E 组),在兔耳腹侧面建立增生性瘢痕模型,术后按组别进行相应处理,观察创面愈合和瘢痕的增生情况。用药后在第6周取材,进行 HE 染色,天狼猩红染色和 Masson 染色,并用 Western 印迹检测 MMP-2, MMP-9表达情况。结果 HE 染色,天狼星红染色和 Masson 染色结果表明,牛蒡苷元治疗组(2 mg/ ml)可以明显抑制增生性瘢痕的形成。与模型组相比,牛蒡苷元治疗组的瘢痕较平坦,成纤维细胞的数量减少,胶原的密度降低。并且 Western 印迹的结果表明,牛蒡苷元治疗组(2 mg/ ml)能够使 MMP-2, MMP-9表达降低。结论牛蒡苷元能有效抑制增生性瘢痕的发展,其机制可能是通过下调 MMP-2和 MMP-9的表达。牛蒡苷元可能具有治疗增生性瘢痕的作用。

小鼠 Usp25基因的雄激素反应元件的克隆与功能鉴定

目的：我们前期研究中进行全基因组表达谱检测发现在雄激素受体(androgen receptor, Ar)基因睾丸支持细胞特异性敲除小鼠( S-Ar-/ y )睾丸组织中泛素特异性蛋白酶25(ubiquitin specific peptidase 25, Usp25)基因表达较低。本研究的目的是了解雄激素及其受体是否可以作用于 Usp25基因,并测定其雄激素反应元件(androgen-responsive element, ARE)。方法采用 RT-qPCR 方法检测 Usp25基因表达量。通过生物信息学预测 Usp25基因上游可能的 ARE,构建 Usp25基因 ARE 报告质粒 pGLP/ Usp25。在 TM4细胞中,采用荧光素酶报告系统分析雄激素及其受体对 Usp25基因 ARE 活性的调控作用。结果在 S-Ar-/ y小鼠睾丸组织中 Usp25基因表达量比在野生型小鼠中显著降低。在 TM4细胞中睾酮可以显著提高 Usp25基因表达量。在 TM4细胞中,雄激素可以显著提高 pGLP/ Usp25的荧光素酶活性。结论 Usp25基因表达可以被雄激素睾酮激活, Usp25基因第一内含子519至1102 bp 区域含有 ARE,可以调控启动子的转录水平。

体外受精-胚胎移植后生化妊娠的相关危险因素分析

目的：通过分析 IVF-ET 治疗后终止于生化妊娠与发展为临床妊娠两种结局患者之间的各相关因素，试图探讨生化妊娠发生的影响因素。方法对55例生化妊娠﹑100例同期临床妊娠患者的临床资料进行回顾性分析，采用非条件 Logistic 回归方法比较两组间的各暴露因素。结果男方年龄﹑原发/继发不孕﹑是否有自然流产史﹑降调方案﹑基础窦卵泡数﹑受精率是生化妊娠的显著影响因素(P ﹤0.05)，是否有自然流产史，基础窦卵泡数是生化妊娠的独立影响因素。结论 IVF-ET 治疗中生化妊娠的发生受年龄﹑卵巢储备功能﹑超促排卵方案﹑是否有自然流产史等多因素影响的。

氟伐他汀调节 SHR 大鼠血管平滑肌细胞钙泵的表达对血管重构的影响及作用机制

目的：探讨氟伐他汀(fluvastatin, Flu)对小牛血清(CS)干预的高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖及血管重构的影响并初步探讨其可能的机制。方法 CS﹑ Flu 和甲羟戊酸(mevalonic acid, Me-va)处理血管平滑肌细胞4 d,将细胞分为 SHR 组﹑ SHR +20％ CS 组﹑ SHR +20％ CS + Flu 组和 SHR +20％ CS + Flu + Meva 组,采用 MTT 检测细胞的增殖能力, Transwell 检测细胞的迁移能力,体外管样实验﹑天狼星红染色以及免疫荧光的方法分别检测细胞的管样结构的生成能力﹑胶原纤维以及 F-actin 的表达, Western 印迹检测 PMCA﹑ SERCA 和 LTCC 的表达。结果 Flu 能够抑制 CS 促进的 VSMCs 增殖效应﹑迁移能力,管样结构生成,胶原蛋白表达,以及骨架蛋白的聚合,并下调 VSMCs 中 PMCA 的表达,上调 SERCA和 LTCC 的表达,而 Meva 则对 Flu 的作用进行逆转。结论氟伐他汀对 CS 诱导的 VSMCs 增殖及血管重构产生抑制,该过程可能是通过调节钙泵的表达实现的,而 Meva 代谢途径可能在其中发挥了重要的作用。

Menin 对 MyD88表达调控的初步研究

目的：探讨 menin 蛋白对髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)基因表达的调控作用。方法在 Men1基因敲除的小鼠 mef (Men1-/- mef)细胞中,转染可以过表达 menin 蛋白的 me-nin-PCI-NEO 质粒,运用 Western 印迹技术检测 menin 对 MyD88蛋白表达的影响。构建包含 MyD88启动子的报告基因质粒,在 Men1-/- mef 细胞中,将 MyD88启动子质粒和 menin-PCI-NEO 质粒或其阴性对照 PCI-NEO 共转染,利用荧光报告基因系统分析 menin 对 MyD88基因启动子活性的影响。结果转染 menin-PCI-NEO 质粒后, menin 蛋白表达升高的同时, MyD88蛋白的表达减少。在荧光报告基因系统中,转染 menin-PCI-NEO 质粒后 MyD88基因启动子活性被抑制。结论 menin 蛋白可以下调 MyD88蛋白的表达,这种作用可能通过抑制 MyD88基因的转录而实现。

胸腺肽 a1对老年脓毒血症患者免疫功能的影响

目的：探讨老年脓毒血症患者细胞免疫功能的变化,观察胸腺肽 a1的治疗效果。方法120例老年脓毒症患者随机分为两组：干预组和对照组,每组60例。对照组给予常规治疗,干预组在常规治疗基础上加用胸腺肽 a11.6 mg/ d,皮下注射,疗程1周。比较两组患者治疗前后细胞免疫功能﹑ APACHEⅡ评分和住院死亡率。结果两组患者治疗前 CD4+﹑ CD8+﹑ CD4+/ CD8+﹑ APACHE Ⅱ评分差异无统计学意义(P ﹥0.05)。治疗后干预组 CD4+﹑ CD4+/ CD8+较常规治疗组明显增高(P ﹤0.001), CD8+明显降低(P﹤0.001), APACHEⅡ评分和住院死亡率亦明显降低(P ﹤0.05)。结论老年脓毒血症患者细胞免疫功能明显降低,胸腺肽 a1能改善此类患者的细胞免疫功能,提高临床治疗效果。