医学分子生物学杂志
Journal of Medical Molecular Biology 의학분자생물학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 华中科技大学同济医学院
- 影响因子： 0.31
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1672-8009
- 国内刊号： 42-1720/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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PTEN在维护基因组稳定性中的作用
新研究发现,具有磷酸酶活性的肿瘤抑制基因pten在维持染色质和基因组稳定性方面起着重要的作用.PTEN可以磷酸酶依赖型和非依赖型两种方式维护基因组的稳定性.PTEN的磷酸酶依赖型调控机制主要通过PI3K/AKT通路;PTEN的磷酸酶非依赖型调控机制主要通过蛋白质的相互作用;此外还存在一些未知的途径.
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基因转录与pre-mRNA剪接的偶联蛋白
真核基因的表达是一个复杂的过程,包括转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤.其中转录和pre-mRNA的剪接是基因表达中的两个重要环节,它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能.目前研究发现这两个过程并不是绝对独立的,而是偶联在一起同时进行的.多种蛋白的偶联作用将二者联系在一起.RNA聚合酶Ⅱ、SKIP、SMN以及新近发现的人类P100蛋白不仅参与基因转录调节,同时它们在剪接加工中也具有相应的作用.
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NeuroD在神经细胞分化中的调控作用
神经分化因子(NeuroD)是一种含bHLH结构域的结合E-box的转录调控因子,主要参与神经细胞分化过程和胰腺发生、功能维持.近年来的研究表明, NeuroD的表达受细胞因子调控或某些化学因子影响,同时与多种蛋白,如Brg1,AK1和Htt等共同调节下游基因表达,进而调控细胞周期和神经细胞分化进程.这些研究为NeuroD参与细胞分化进程,糖尿病和其他神经性疾病的发生提供了依据.
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Polycystin-1相关的信号转导通路
已知85%～90%的常染色体显性遗传性多囊肾病是由pkd1突变引起的,因此pkd1编码的多囊蛋白-1的功能受到研究者的关注.多囊蛋白-1是一个具有长的细胞外氨基末端,11个跨膜区,短的细胞内羧基末端的跨膜蛋白.近年来发现多囊蛋白-1与多条信号转导通路有关.文章主要介绍多囊蛋白-1相关的PI3-K/Akt/mTOR、Wnt/β-catenin和JAK-STAT等信号转导通路、各信号通路之间的联系及其在常染色体显性遗传性多囊肾病致病中的作用.
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组蛋白赖氨酸甲基化与去甲基化
组蛋白赖氨酸甲基化是组蛋白尾段发生的一种重要共价修饰,在基因的表观遗传转录调控中起着关键的作用.目前,组蛋白H3的K4、K9、K27、K36、K79和H4的K20是组蛋白赖氨酸甲基化的常发位点,不同位点的甲基化及甲基化程度会引发不同的效应.随着组蛋白赖氨酸甲基转移酶和去甲基化酶的陆续发现,对组蛋白赖氨酸甲基化有了一个全新的认识,走出了一直认为组蛋白赖氨酸甲基化是一个稳定修饰的误区,与此同时,组蛋白的去甲基化也受到更为广泛的关注.
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GRIM-19的功能及与肿瘤的相关性
GRIM-19初被认为定位于细胞核,后来发现在线粒体中也有表达.GRIM-19还是线粒体中NADH脱氢酶1复合物的基本亚单位,在线粒体Ⅰ型呼吸过程中至关重要.在病毒感染导致细胞癌变的过程中,GRIM-19很可能是病毒癌基因结合的靶点,目前认为,GRIM-19参与和细胞的增殖、凋亡的调控过程,其表达降低或位点突变可以导致细胞的异常增殖和恶性转化.在肿瘤的形成及凋亡抑制中发挥着重要的作用.
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Chediak-Higashi 综合征的相关基因及蛋白质
Chediak-Higashi综合征(CHS)是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病,其致病基因--溶酶体转运调节因子基因定位于染色体1q42.1-42.2.该基因在转录过程中可形成两种大小不同的转录本.两种转录体在各组织中的表达不同,提示它们的生物学性质也不相同.其编码的蛋白--溶酶体转运调节因子(lysosomal-trafficking regulator)属于一个大的BEACH蛋白家族,与家族中其他成员有着相似的结构和功能.BEACH家族蛋白的鉴别和相关动物模型的研究使我们认识到BEACH的蛋白质参与了多种不同的生化途径, BEACH蛋白突变或缺乏可以导致囊泡转运缺陷.
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蛋白磷酸酶2A及其在细胞转化中的作用
由特异蛋白激酶和蛋白磷酸酶共同参与的蛋白质可逆性磷酸化是细胞生物学过程的重要调节机制,蛋白磷酸酶2A是真核生物主要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,具有复杂的亚基构成,参与细胞的各种调节机制,包括信号转导途径、细胞周期进程、DNA复制、基因转录和蛋白质翻译等,其功能受多种层次的调控.新的研究揭示了PP2A的三维晶体结构以及甲基化在全酶组合中的作用,同时对PP2A在细胞转化方面的功能与机制有了更深入的阐释.
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核基质蛋白在肿瘤研究中的应用
核基质蛋白(nuclear matrix proteins, NMPs)是一种参与细胞核构建、染色质/体构成、DNA复制和转录的具有组织特异性和肿瘤相关性的重要蛋白质.目前在膀胱癌、前列腺癌、食管癌、白血病、肝癌等肿瘤组织细胞中均发现了NMPs的特异性表达和变化.近年来,NMPs在肿瘤发生、发展中的作用,在肿瘤的诊断、治疗中的价值成为人们研究的热点.
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重组质粒pYES-GFP mRNA在动物细胞中表达的研究
目的 提取重组酿酒酵母 mRNA,并对动物细胞进行转染,为进一步探索证明重组酿酒酵母 mRNA可以作为基因治疗物质提供依据.方法 利用酶法制备重组酿酒酵母的原生质体后提取其总RNA.对提取的总RNA纯化后利用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增,鉴定GFP基因的正确无误后,脂质体转染绿猴肾细胞COS-7.在光显微镜下观察绿色荧光的发生.结果 成功制备重组酿酒酵母原生质体,克隆鉴定基因片段正确.转染细胞后有绿色荧光出现,能够表达目标基因.结论 成功制备了重组酿酒酵母原生质体,提取的mRNA能够在动物细胞中表达.证实重组酿酒酵母 mRNA可以作为基因治疗物质,能达到基因治疗的目的 .
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离子交换色谱法去除rhOP-1蛋白溶液中内毒素的方法
目的 建立一种去除重组人成骨蛋白(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)溶液中内毒素的方法.方法 提取包涵体蛋白,经纯化、复性得rhOP-1溶液.此溶液经DEAE离子交换色谱柱,通过线性增加盐浓度方式先将蛋白洗脱,内毒素则由较强盐浓度和NaOH洗脱.收集洗脱峰,用鲎试剂检测其内毒素含量.结果 凝胶法检测rhOP-1溶液在DEAE-琼脂糖色谱柱上样前内毒素含量在限值以上,DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱峰的蛋白内毒素含量降到限值以下,而经0.22 μm滤膜除菌的蛋白溶液中内毒素含量在限值以上.结论 rhOP-1蛋白溶液经DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱,可得低于内毒素限值的蛋白溶液,因此这种方法可作为一种去除rhOP-1缓冲液中内毒素的方法.
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人类P100蛋白表达抑制稳定株的建立及其对HeLa细胞周期的影响
目的 构建针对人类P100(hP100)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒, 转染后筛选P100表达抑制的稳定细胞株并鉴定其表达情况;同时检测其对细胞周期的影响.方法 设计针对hP100基因的siRNA序列,构建pGenesil-shRNA-hP100质粒(small hairpin RNA,shRNA,小发夹RNA),经测序鉴定后转染入宫颈癌细胞HeLa;经G418筛选出稳定株;Western印迹检测稳定株之抑制率.流式细胞术检测hP100蛋白表达抑制对细胞周期的影响.结果 成功构建了针对hP100 的siRNA质粒,并用之筛选出hP100蛋白表达抑制的稳定株,瞬时转染及稳定株hP100表达明显降低.流式细胞术显示抑制hP100蛋白表达使G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例降低.结论 RNAi(RNA interference, RNA 干扰)可持续稳定地抑制人类P100蛋白的表达,人类P100蛋白表达抑制对细胞周期有调节作用.
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肝脏内源性microRNA调控乙型肝炎病毒基因的表达与复制
目的 探讨肝脏内源性microRNA对乙型肝炎病毒(HBV)复制与基因表达的影响.方法 通过miRNA靶点分析软件寻找与HBV序列之间相关联的肝脏内源性microRNA, 体外化学合成相应的microRNA分子,将合成寡核苷酸及对照与1.3倍HBV全基因组真核表达质粒pUC18-HBV1.3采用Lipofectamine2000共转染HepG2细胞,转染48 h后收集细胞培养上清;通过ELISA检测HBsAg、HBeAg的表达水平; Western 印迹检测HBcAg的表达水平;Trizol抽提转染细胞RNA,逆转录后用荧光定量PCR检测HBV mRNA的水平; 提取细胞基因组DNA, Southern印迹检测HBV的复制中间体.经以上检测从HBV蛋白表达、转录和复制水平评价相应的microRNA作用效应.结果 生物信息学方法提示miR-16和 miR-122存在与HBV 基因组作用的可能结合位点.经试验初步证实miR-16可下调HBV蛋白的表达及HBV DNA水平;miR-122可下调HBsAg、HBeAg的表达,上调HBV mRNA的水平.结论 肝脏内源性microRNA可以调节HBV的复制与基因表达.
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重组病毒rAAV2-IRES-EGFP/MnSOD的构建及其表达
目的 构建含有大鼠源性锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因的重组病毒rAAV2-IRES-EGFP/MnSOD,检测其在大鼠耳血管纹边缘细胞和耳蜗组织内的表达.方法 将大鼠心肌组织来源的SOD基因克隆入融合表达载体pEGFP-N1中,再以限制性酶切方法克隆入真核表达载体pSNAV2.0-IRES-EGFP中,后将其包装为rAAV2-IRES-EGFP/MnSOD病毒颗粒,用激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、RT-PCR及Western印迹检测MnSOD基因的表达.结果 真核表达载体pEGFP-N1/MnSOD和pSNAV2.0-IRES-EGFP/MnSOD经酶切、PCR和测序鉴定均检测到MnSOD基因的完整序列,被rAAV2-EGFP/MnSOD感染的耳边缘细胞和内耳组织中MnSOD蛋白的表达均高于空白对照耳.结论 成功构建了大鼠源性MnSOD基因的重组病毒rAAV2-IRES-EGFP/MnSOD,并使其在大鼠耳边缘细胞和大鼠耳蜗组织中成功表达,为抗氧化基因治疗内耳疾病的研究奠定了基础.
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大鼠对氧磷酶1真核表达载体的构建及在体外的表达
目的 构建大鼠对氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)真核表达载体,并检测其在体外培养细胞中的表达及功能,为进一步探索运用其进行基因防治肺部感染奠定基础.方法 利用RT-PCR扩增大鼠PON1编码区全长序列,克隆入pcDNA 3.1(+),鉴定无误后,脂质体转染A549细胞及293细胞, Western印迹检测蛋白表达,并检测其芳香酯酶活性及对铜绿假单胞菌密度感知系统信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs)的水解功能.结果 分别从大鼠肝组织中扩增出1 153 bp片段,克隆入表达载体后进行酶切鉴定和测序结果正确.转染细胞后能够表达目的 蛋白,该蛋白具有芳香酯酶和AHLs内酯酶活性.结论 成功构建了含有大鼠PON1真核表达载体,质粒能够在真核细胞中表达,能够有效地水解铜绿假单胞菌密度感知系统信号分子.
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人EPHB2基因启动子的初步鉴定
目的 为进一步研究人EPHB2基因的表达调控机制,初步鉴定、分析该基因的启动子.方法 在对人EPHB2基因的生物信息学分析的基础上,在EPHB2基因的转录起始位点已明确的前提下,克隆了该基因的5′侧翼区,并对该区进行功能分析,分别构建了5种含不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒,将它们瞬时转染293细胞,检测其荧光素酶活性.结果 EPHB2的5′侧翼区的-138～+83区域的启动子活性不高,而从-425～+83开始显著升高,-1 174～+83区域的启动子活性又出现明显降低.结论 人EPHB2基因启动子的较小区域位于其5′侧翼区的-425～-139区域.另外,在-1 174～-970区域可能存在着沉默子.
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荧光蛋白标记的GABAB受体在CHO中的表达及亚细胞定位
目的 确定荧光蛋白标记是否影响GB1、GB1asa和GB2亚基在CHO细胞中的表达、亚细胞定位及功能.方法 构建GB1-DsRed2和GB1asa-DsRed2真核表达载体,利用ELISA和IP3积累法检测融合蛋白在CHO细胞中的表达情况及功能,在激光扫描共聚焦显微镜下观测融合蛋白的亚细胞定位.结果 荧光蛋白标记既不影响GB1、GB1asa和GB2亚基的表达,也不影响GB1和GB2在CHO细胞上的共定位过程,同时对二聚体的功能不存在显著的影响.结论 GB1-DsRed2、GB1asa-DsRed2和GB2-EGFP在CHO细胞中具有正常的生理功能和分布,为进一步研究GABAB受体在细胞膜上的运动及分布以及各亚基之间的相互作用奠定了基础.
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白介素-10表达上调介导脂氧素在急性肝损伤中的保护效应
目的 研究脂氧素对四氯化碳诱导的肝损伤的保护作用与保护性细胞因子白介素-10的关系.方法 小鼠腹腔注射四氯化碳诱导急性肝损伤.以脂氧素受体激动剂BML-111 1 mg/kg腹腔注射,或再应用抗-IL-10中和抗体后,取肝组织切片、HE染色观察肝细胞受损情况;收集血清检测转氨酶ALT和AST活性;RT-PCR检测肝组织中IL-10 mRNA含量;ELISA检测血浆IL-10和TNF-α浓度.结果 BML-111促进四氯化碳损伤的小鼠肝组织中IL-10 mRNA表达、升高血浆IL-10浓度.抗-IL-10中和抗体可明显削弱BML-111对肝组织损伤及血清转氨酶水平的抑制作用,这一效应伴有血浆TNF-α浓度的升高.结论 脂氧素受体激动剂BML-111可增强四氯化碳损伤的肝组织中白介素-10的表达,白介素-10是介导BML-111的保肝效应的重要细胞因子.
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人延伸体复合物Elp3亚基表达及功能研究
目的 将人延伸体复合物﹙elongator﹚的中心亚基elp3﹙elongtor complex protein 3﹚基因导入293T细胞,观察它对293T细胞生长特性以及基因转录活性的影响.方法 用脂质体将pFlAGCMV4-Elp3真核表达载体导入293T细胞,通过G418持续筛选阳性克隆,建立elp3的稳定表达细胞株.通过RT-PCR、免疫荧光法检测外源性elp3基因的表达.MTT法测定细胞生长曲线、流式细胞仪法测定细胞周期及凋亡情况.瞬时转染不同组合的质粒后,收集细胞用荧光素酶报告基因法检测转染前后荧光素酶活性的变化.结果 Elp3可以抑制293T细胞生长,并使细胞出现G1期阻滞,未引起293T细胞凋亡.elp3能激活转录,但作用较弱.elp4也可激活转录,过量表达elp3基因与elp4基因时,可明显激活转录,说明两者有协同激活转录作用.Elp3与转录因子TFⅡF亚基RAP30基因过量表达时,两者也可协同激活转录.结论 Elp3对293T细胞的生长有明显抑制作用,可诱导G1期细胞阻滞,具有转录激活功能,并可分别与Elp4亚基、RAP30亚基协同激活转录.
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TLR激动剂抑制IL-27诱导的THP-1细胞HLA-DR的表达
目的 研究白介素27(IL-27)对THP-1单核细胞系Ⅱ类转录活化子(class Ⅱ transactivator,CⅡTA)和Ⅱ类主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex class Ⅱ,MHC Ⅱ)分子的表达的影响及Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)激动剂LPS和Pam3CSK4的干预作用.方法 RT-PCR检测CⅡTA Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ以及人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DRA和干扰素调节因子-1(interferon regulatory factor-1,IRF-1)mRNA的表达.半定量PCR检测HLA-DRA、DRB、DPA、DPB、DQA、DQB、IRF-1、CⅡTA mRNA的表达.流式细胞术检测细胞表面HLA-DR的表达.结果 IL-27刺激24 h后可分别上调THP-1细胞CⅡTA Ⅲ、CⅡTAⅣ和IRF-1 mRNA表达水平.IL-27刺激24 h和48 h可升高MHC Ⅱ类分子mRNA的表达,并能诱导HLA-DR在28 %和53 %的THP-1细胞表面表达.在THP-1细胞和PMA诱导的THP-1巨噬细胞,LPS和Pam3CSK4均可抑制IL-27诱导的CⅡTA和HLA-DR的表达.结论 IL-27可上调THP-1细胞CⅡTA和MHC Ⅱ类分子的表达,这种作用可被LPS和Pam3CSK4抑制.
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靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移
目的 构建靶向daintain/AIF-1的siRNA表达载体pRNAT-H1.1-daintain/AIF-1(pRNAT-DT),研究靶向daintain/AIF-1的siRNA对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和迁移的影响.方法 设计合成靶向daintain/AIF-1的siRNA模板双链,将其克隆入siRNA空载体pRNAT-H1.1, 用脂质体法导入乳腺癌细胞MDA-MB-231中;RT-PCR 和 Western印迹方法检测 daintain/AIF-1 以及cyclin D1的表达;MTT方法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期; Trans-well细胞板检测细胞迁移.结果 针对序列1和序列2的siRNA表达载体pRNAT-DT均能有效抑制daintain/AIF-1的表达.靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制细胞增殖和cyclin D1表达,阻滞细胞周期由S期向G2/M期转变.同时,daintain/AIF-1表达的下调抑制了细胞的迁移.结论 靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
