医学分子生物学杂志
Journal of Medical Molecular Biology 의학분자생물학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 华中科技大学同济医学院
- 影响因子： 0.31
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1672-8009
- 国内刊号： 42-1720/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Prion疾病疫苗研究策略
朊病毒病是一类侵袭人类及多种动物中枢神经系统的致死性退行性脑病,目前缺乏有效的预防和治疗方法.朊病毒病的重组蛋白亚单位疫苗、DNA疫苗、合成肽疫苗、病毒样颗粒疫苗、树突状细胞疫苗、黏膜免疫疫苗等已取得一定进展,但现有的免疫策略仅能部分克服免疫耐受,诱导较低或中等滴度的抗体,对PrP~(Sc)感染动物模型只能提供部分保护,Prion疫苗研究任重而道远.
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朊蛋白相关蛋白Shadoo与朊病毒病
朊病毒病,即传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs),是一类传染性、致死性神经退行性疾病.在朊病毒病的病理过程中,细胞正常朊蛋白PrP~C转化为异常构象的PrP~(Sc)是至关重要的,但是PrP~C的正常生理功能仍不清楚.国外学者利用比较基因组学发现了一个新的朊蛋白相关蛋白-Shadoo(Sho).Sho与PrP~C在氨基酸序列和细胞定位的相似性及主要在脑组织表达,使它成为一个非常值得研究的PrP相关蛋白.对Sho可能存在的与PrP~C重叠的功能甚至直接相互作用的研究工作,将对今后揭示PrP~C正常生理功能以及揭示Prion病发病机制具有重要现实意义.
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PrP~C介导的细胞信号转导
朊病毒病的发生是由于细胞正常朊蛋白PrP~C转变成了异常构象的PrP~(Sc)形式.PrP~C 的生理学功能目前尚不完全明确,可能与铜离子代谢、脂质摄取以及细胞信号传递有关.PrP~C可以与小窝蛋白相互作用而活化Fyn非受体酪氨酸激酶从而引起下游信号通路的转导;可以作为受体与PrP~C键合多肽结合后激活cAMP/PKA信号通路;以及引起细胞内钙离子浓度变化而活化信号通路.
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mTOR信号通路与调节
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR是一种非典型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,可整合细胞外信号,磷酸化下游靶蛋白核糖体p70S6激酶,如S6K1及4E-BP1,影响转录与翻译,从而参与调控细胞生长、增殖等过程.近年来研究发现,调控mTOR通路可以干预某些疾病的病理过程.mTOR研究的新发现,可望为今后相关疾病的治疗提供新的靶点.
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Necroptosis的调控机制及其在组织及细胞缺血损伤中的作用和意义
Necroptosis不同于坏死和凋亡,具有坏死的细胞形态特点和自噬的活化,并且是主动耗能的,是被一系列信号传导通路所调控的细胞死亡机制.Necroptosis的发现和确认为细胞死亡的逆转和治疗开创了一个新的研究和应用途经.RIP1激酶是调控Necroptosis 形成的关键酶,Necrostatins则是一类小分子化合物,它通过特异性地抑制细胞RIP1激酶而抑制Necroptosis 的形成.
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组蛋白去乙酰化酶11与基因表达
组蛋白去乙酰化酶11(histone deacetylases11,HDAC11)是新发现的第Ⅳ类HDACs成员,是调节APC细胞IL-10转录的关键因子,对移植免疫耐受的产生起着负性作用.HDAC11还与中枢神经系统的发育有着紧密联系.拟通过对HDAC11在染色质中的作用靶点和作用机制进行综述,以期为移植免疫耐受的诱导和神经系统的功能的调节寻找到适宜的靶点.
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中国汉族人群2型糖尿病易感性相关基因多态性
2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的发病与多个基因累加效应及多种环境因素相关.已在中国汉族人群中研究过的与T2DM易感性相关的基因多态性包括:全基因组相关研究中的CDKAL1、CDKN2A/B、SLC30A8、IGF2BP2、HHEX、FTO 以及KCNQ1基因;脂联素基因;核呼吸因子基因;葡萄糖激酶基因;肿瘤坏死因子α基因等.探索这些易感基因可以为人类治疗T2DM起到极大的推动作用.但至今已明确的基因依然很少,国内外的研究结果不尽相同,尚需进一步地深入研究.
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精神分裂症易感基因
精神分裂症是一类遗传倾向性较高的多基因疾病.近年来,随着遗传学和分子生物学为主的多学科研究技术的快速发展,不断有新的易感基因报道;一些重要易感基因的生物学功能及其在该疾病发病机制中的作用研究也取得了一定进展.
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大鼠白介素10真核表达质粒在大鼠体内外肝细胞中的表达及影响
目的 探讨体外重组的大鼠白介素10(rIL-10)真核表达质粒能否在大鼠体内外肝细胞中表达及表达产物对肝细胞的影响.方法 通过受体介导的脂介体转染法及尾静脉大容量注射法将rIL-10真核表达质粒分别转入大鼠BRL细胞及体内大鼠肝细胞中,采用RT-PCR法、ELISA法和免疫组织化学法检测体内外肝细胞rIL-10的表达情况,MTT法及流式细胞术检测rIL-10真核表达质粒转染对BRL细胞增殖与凋亡的影响.结果 转染rIL-10真核表达质粒的BRL细胞及大鼠肝组织高表达rIL-10基因,BRL细胞培养上清与大鼠血清中rIL-10浓度分别为(12.78±0.94)ng/ml,(61.68±3.60)ng/ml.MTT法及流式细胞术显示rIL-10的表达对肝细胞有一定的保护作用.结论 rIL-10真核表达质粒可在大鼠体内外肝细胞中表达并对肝细胞有一定的保护作用.
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荧光定量PCR测定端粒长度
目的 应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)方法测定端粒长度.方法 选取9种人类细胞株,提取基因组DNA,采用Q-PCR方法测定相对T/S比率,DNA印迹法测定末端限制性片段(TRF)长度,进行二者之间的相关性分析.结果 定量PCR测定端粒长度相对T/S比率为0.68±0.57,DNA印迹法测量平均TRF值为8.57±2.34,两种方法测定结果的相关性分析R~2=0.7807(P＜0.01).结论 采用荧光定量PCR方法测量端粒长度具有重复性好、省时、简便、可靠的特点,可高通量处理大量样品.
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非小细胞肺癌中Livin和JNK1的表达及相关性研究
目的 探讨在非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)中的Livin、JNK1蛋白的表达及相关性.方法 采用免疫组织化学(二步法)检测187例NSCLC肺癌组织Livin、JNK1[包括总JN1蛋白(t-JNK1),磷酸化JNK1(p-JNK1)]蛋白的表达情况,采用Spearman等级相关分析探讨其相关性.结果 Livin主要在胞浆中定位表达,在肺癌中的表达阳性率明显高于肺良性病变对照组;在鳞癌中表达阳性率明显高于腺癌和其他癌类(P＜0.05).其在肺癌表达的积分明显高于良性对照组(P＜0.05),其在鳞癌中表达的积分明显高于腺癌及其他癌类组织.t-JNK1、p-JNK1在肺癌细胞上及在假复层纤毛柱状上皮均可见表达,主要在胞浆中定位表达,t-JNK1未见核内定位表达,而p-JNK1偶见核内定位表达.t-JNK1在肺癌组表达阳性率明显低于对照组(P＜0.05),t-JNK1在肺癌中表达的积分低于对照组;而p-JNK1在肺癌组表达阳性率明显高于对照组(P＜0.05).p-JNK1在肺癌中表达的积分高于对照组,但两者无统计学意义(P＞0.05).Livin与t-JNK1呈现显著的负相关,Livin与p-JNK1呈现显著的正相关.结论 Livin在肺癌中高表达,其在鳞癌中表达高于腺癌和其他类型癌.t-JNK1在肺癌中低表达,而p-JNK1在肺癌中高表达.Livin与p-JNK1表达正相关,推测Livin可促JNK1蛋白磷酸化.
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醛固酮腺瘤模型大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与mdm2和p53的表达
目的 初步探讨肾上腺醛固酮腺瘤血管重构的机制.方法 将微量渗透泵植入大鼠皮下,随机分为对照组、腺瘤组、腺瘤+依普利酮组和腺瘤+肼苯哒嗪组.8周后检测主动脉平滑肌细胞的增殖状态和mdm2、p53的表达.结果 ①成功建立大鼠醛固酮腺瘤模型;②与对照组相比,腺瘤组大鼠主动脉平滑肌细胞增生活跃(P＜0.05);MDM2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05);而p53只在蛋白水平增加(P＜0.05);③相较于肼苯哒嗪,依普利酮能抑制醛固酮的作用(P＜0.05).结论 醛固酮通过诱导mdm2表达而逆转p53的细胞周期阻滞作用,促使平滑肌细胞增殖,可能是醛固酮腺瘤血管重构的原因之一.
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ApoAⅠ促进THP-1源性泡沫细胞ApoE分泌的研究
目的 通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型,观察ApoAⅠ对THP-1源性泡沫细胞 ApoE分泌的影响,探讨ApoAⅠ与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响.方法 采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)沉淀法制备人血浆HDL,再利用凝胶过滤柱层析法分离ApoAⅠ;佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)使分化后THP-1细胞荷脂,建立动脉粥样硬化细胞模型;ELISA检测不同浓度ApoAⅠ(0,5,10,15,25 μg/ml)及不同孵育时间(0,3,6,12,24 h),THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌;RT-PCR检测细胞ApoE mRNA的表达情况.结果 ApoAⅠ增加THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌量;且ApoE蛋白质的分泌随着ApoAⅠ孵育时间增加而增加,在24 h ApoE的分泌量达大;在剂量试验中,ApoE的分泌量随着ApoAⅠ剂量的增加有增加趋势,ApoAⅠ浓度为25 μmol/L时,ApoE分泌量大;而ApoE基因的表达不受ApoAⅠ的影响.结论 一定浓度的ApoAⅠ促进THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌,且具有时间及剂量依赖性.而在基因水平上,ApoAⅠ对ApoE mRNA表达没有影响.
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共转染CDK1、CDK2 siRNA对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响
目的 研究共转染CDK1、CDK2 siRNA同时抑制CDK1、CDK2蛋白表达对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响,探讨细胞周期主要调控分子在肿瘤细胞凋亡中的作用.方法 以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象,用脂质体lipofectamine2000同时转染CDK1 和CDK2 siRNA.在转染后48、60 h收集细胞,用Western印迹检测CDK1、CDK2蛋白的表达,AnnexinV/PI检测转染细胞的凋亡,流式细胞术DNA含量检测分析细胞周期.转染细胞进行瑞氏-姬姆萨染色(Wright-Giemsa)后在显微镜下观察其形态变化.结果 共转染CDK1、CDK2 siRNA后48和60 h,Western 印迹结果显示CDK1和CDK2蛋白的表达都同时降低.共转染CDK1、CDK2 siRNA后,细胞周期S期和G_2/M期比例与对照相比有明显增加;共转染细胞经瑞氏-姬姆萨染色后在显微镜下可见双核或多核细胞增多;AnnexinV/PI检测结果显示共转染CDK1、CDK2 siRNA的细胞在48和60 h细胞凋亡率与对照相比有显著的升高.结论 siRNA 干扰导致的CDK1、CDK2表达同时降低不仅导致细胞周期S期和G_2/M期的阻滞,也诱导了肿瘤细胞的凋亡.
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AFP的亚细胞定位及对肿瘤细胞生长的影响
目的 观察甲胎蛋白(AFP)在不同肿瘤细胞中的亚细胞定位及对肿瘤细胞生长的影响.方法 运用免疫荧光的方法观察内源性AFP在HeLa细胞、QGY-7703细胞、MCF-7细胞中的亚细胞定位.将构建的表达AFP的质粒pcDNA3-AFP及AFP腺病毒siRNA干涉载体Adv-AFP siRNA作用于QGY-7703细胞,MCF-7细胞,运用MTT,集落形成实验检测细胞增殖状况.结果 免疫荧光显示,内源性的AFP在 HeLa细胞、QGY-7703细胞、MCF-7细胞均只在细胞质中表达.pcDNA3-AFP 使QGY-7703的细胞活性增加了21%(P＜0.05)及集落形成能力增加了32 %(P＜0.01),MCF-7实验组比对照组细胞活性降低了30%(P＜0.01),克隆形成能力降低82 %(P＜0.01).Adv-AFPsiRNA使QGY-7703的细胞活性降低了22 %(P＜0.05),平均克隆形成能力降低52 %(P＜0.01),MCF-7细胞活性提高了24.5 %(P＜0.05),克隆形成能力提高了89 %(P＜0.01).结论 内源性的AFP只在细胞质中表达.AFP能促进QGY-7703细胞的增殖及克隆形成能力,而在MCF-7细胞中发挥相反的作用.腺病毒介导的内源性的AFP表达的下调能降低QGY-7703的增殖,却增加了MCF-7的细胞活性及克隆形成能力.
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嘌呤霉素抗性基因捕获载体的构建及在细胞中的功能验证
目的 构建具有嘌呤霉素抗性基因捕获载体,扩大基因捕获载体的应用范围.方法 用经改造的捕获载体(gene trapping vector)稳定转染HepG2.2.15肝癌细胞系,经嘌呤霉素筛选,制作单克隆细胞株.用PCR方法验证该载体的在细胞染色体中的整合,ELISA方法证明捕获载体捕获基因后的细胞的功能改变.结果 嘌呤霉素抗性基因捕获载体整合在HepG2.2.15肝癌细胞的染色体上,并能影响细胞HBsAg和HBeAg的分泌.结论 新构建的嘌呤霉素抗性基因捕获载体能在具有G418抗性的细胞中捕获有意义的目的 基因.
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用聚乙二醇分离富集microRNA的方法探讨
目的 探讨用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)溶液分离富集miRNA的操作方法和分离富集效果,并与Ambion公司的miRNA分离试剂盒分离效果进行比较.方法 用PEG溶液和Ambion公司的miRNA分离试剂盒从肝脏组织总RNA中分离富集miRNA,用变性琼脂糖和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定分离效果,并在富集的miRNA中用RT-PCR扩增miR-122以鉴定是否有效地回收了miRNA.结果 PEG和Ambion公司的miRNA分离试剂盒都能有效地富集miRNA,PEG富集的RNA片段比Ambion公司的试剂盒的大.结论 PEG溶液能有效地分离富集miRNA,和Ambion公司的miRNA分离试剂盒分离效果相当,并具有操作简便、快捷及成本低廉的优点.
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DOC-1R基因表达载体的构建及其重组蛋白的表达纯化
目的 构建DOC-1R(deleted in oral cancer-1 related)的原核表达载体并且纯化其重组蛋白,用于进一步研究DOC-1R蛋白的结构与功能.方法 采用基因重组技术构建原核表达载体pGEX-DOC-1R,经DNA测序鉴定后,转化E.coli BL21,IPTG诱导表达并纯化融合蛋白.结果 以菌落PCR及限制性内切酶酶切鉴定得到候选阳性克隆,测序结果表明所得到的克隆序列及开放阅读框架完全正确,IPTG诱导后SDS-PAGE电泳分析表明在40 kD处出现特征蛋白表达带,经磁珠亲合层析后Western印迹检测证实得到较高纯度的GST-p14~(DOC-1R)融合蛋白.结论 成功构建了pGEX-DOC-1R的原核表达载体,表达并纯化出GST-p14~(DOC-1R)融合蛋白,为DOC-1R抗体制备及研究DOC-1R蛋白结合蛋白及其在细胞周期调控中的生物学功能奠定了基础.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
