医学分子生物学杂志
Journal of Medical Molecular Biology 의학분자생물학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 华中科技大学同济医学院
- 影响因子： 0.31
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1672-8009
- 国内刊号： 42-1720/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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微小RNA与胃癌的关系
微小RNA(microRNA、miRNA)与胃癌的发生发展可通过调控其靶基因参与的信号传导通路,影响胃癌的发生、侵袭和转移等过程,发挥着类似于癌基因或抑癌基因的作用.目前,已发现多种microRNA与胃癌关系密切,包括通过调节周期蛋白依赖性蛋白激酶(Cdk)表达影响胃癌细胞增殖的miR-106b～93～25家族、miR-222～221家族和抑制高迁移率族蛋白A2(HMGA2)基因表达抑制胃癌细胞转移的miR-129和let-7 miRNA家族等.另有研究表明,miR-421和miR-31检测阳性率显著高于血清CEA,可能成为新的胃癌肿瘤标志物.miR-15b和miR-16与胃癌多药耐药的关系也说明microRNA可能成为胃癌治疗新的靶点.
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硫酸肝素与甲病毒感染
硫酸肝素存在于细胞膜表面、基底膜及细胞外基质,是一种高度硫酸化的、带负电荷的多糖结构.研究表明辛德毕斯病毒等甲病毒可通过与细胞表面的硫酸肝素结合进入宿主细胞,完成对细胞的感染.提示细胞表面的硫酸肝素是甲病毒感染细胞的受体或共受体.
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药物基因组学相关P450和ABCB1多态性及SNP检测技术
药物基因组学(phamacogenomics)是临床检测遗传差异引起药物应答个体性差异的学科,它涉及药物代谢和有害的药物反应的预测等方面的内容.个性化药物和个性化治疗发展的关键条件是能够快速简便的检测出病人的遗传多态性.文章综述了药物基因相关问题,细胞色素酶P450和ABCB1转运蛋白的遗传多态性以及检测遗传多态性的相关技术.
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Th17细胞及其在器官移植排斥反应中的作用
近发现的辅助T细胞17(T helper cell 17,Th-17)是不同于辅助T细胞1型(T helper cell 1,Th-1),辅助T细胞2 型(T helper cell 2,Th-2)及调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的T细胞亚群,有其独立的分化和发育调节,且互相影响.它由初始T细胞在转化生长因子Β(transforming growth factorB,TGF-B)与白细胞介素6(interleukin6,IL-6)、白细胞介素23(interleukin23,IL23)联合作用及转录因子维甲酸相关孤儿素受体γt(retinoic acid related orphan nuclear receptor γt,ROR-γt)的协同诱导精细的调节下分化而来.其主要分泌的生物效应分子白细胞介素17(Interleukin17,IL-17)是一种促炎性反应细胞因子,在免疫和造血系统等发挥重要的作用.而器官移植排斥反应的本质就是炎性反应.因此深入研究Th-17细胞分化及其相关生物效应,有助认识其在器官移植排斥中的病理机制,也为治疗移植排斥反应提供新的靶点和途径.
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α-catenin在肿瘤中的多种角色
α连环蛋白(α-catenin)可将钙粘素/β连环蛋白(cadherin/β-catenin)复合体连接于肌动蛋白丝(actin filament,F-actin),为细胞表面黏附分子与细胞骨架提供了稳固的机械连接.近年,人们对α-catenin的研究发现,其作用不仅仅是稳固cadherin/catenin的结构、参与细胞黏附,还在肿瘤细胞侵袭、迁移中发挥着重要作用.此外,α-catenin还可能参与cadherin/catenin与Ras/MAPK,NF-κB和 Wnt等通路之间的串话,涉及了细胞的膜动态、增殖和凋亡的调节.
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FOXl2基因的研究现状
FOXL2基因为一单外显子基因,定位于染色体的3q23区域,编码一个分叉头的转录因子.FOXL2基因的正常表达是维持女性性别特征的极其重要的基本条件.该基因若发生突变可导致女性性别特征呈现异常.同时证实其是睑裂狭小、逆向内眦赘皮和上睑下垂综合征(blepharophimosis-ptosis-epicanthus inversus syndrome,BPES)的致病基因.此外,FOXL2基因发生突变与卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)有关,并认为FOXL2是卵巢分化早期的调控因子.另有资料提示FOXL2基因突变与生殖系统肿瘤有相关性.
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TLR9与先天性免疫反应
TLR9(Toll-like receptor 9)是一种微生物病原相关分子结构模式识别受体,TLR9能够识别CpG-ODN(胞嘧啶磷酸鸟甘-寡聚脱氧核苷酸),使病原相关受体在先天性免疫细胞上表达,并激活下游炎性通路.研究表明,TLR9在先天性免疫反应中产生了重要作用,如脓毒血症、自身免疫性疾病、刀豆体球蛋白A介导肝炎性肝脏损伤、炎性泡沫细胞形成、缺血再灌注损伤等,并且与多种致病因子相关联,如肝X受体、甲酰多肽受体、线粒体DNA等.
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泛素与自噬
泛素调节的蛋白质降解过程和细胞的自噬现象都是细胞自我调节的基本机制.其中,泛素可能作为一种普遍的识别信号参与了自噬过程;而自噬的诱导又能促进泛素化作用,从而增强对底物的降解.本文着重探讨这两者间的关系及可能存在的相互调节作用,并兼及两者共同涉及的细胞程序性死亡现象.
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NPM1突变基因调控K562白血病细胞侵袭表型的相关机制
目的 探讨CXCR4、Angs在NPM1突变参与调控的白血病细胞浸润转移中的作用,以期进一步明确NPM1突变在白血病浸润转移中的调控机制.方法 通过基因转染构建稳定表达NPM1突变蛋白的K562白血病细胞株(K562-mA).qRT-PCR检测各组细胞CXCR4、Ang-1/2的mRNA表达水平;Western免疫印迹和流式细胞仪分别检测细胞CXCR4总蛋白和膜蛋白的表达.结果 建立了稳定表达NPM突变基因的K562-mA细胞株.与未处理组和空载体转染组相比,K562-mA细胞CXCR4的mRNA和蛋白表达水平显著增高;Ang-1 mRNA表达水平明显降低、Ang-2 mRNA表达水平明显增高.结论 CXCR4、Ang-1/2可能在NPM1突变调控白血病细胞的浸润转移中发挥重要作用.
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构建稳定表达RFP及嘌呤霉素抗性的K562细胞株
目的 构建稳定表达红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)和嘌呤霉素(puromycin)抗性的K562-PM-RFP细胞株,便于慢性粒细胞性白血病研究中K562细胞的观察和筛选.方法 采用PCR法获得RFP片段,将其插入到慢病毒pGC-FU-3FLAG-IRES-Puromycin 载体中获得pGC-PM-RFP重组质粒,经脂质体转染到293T 细胞中获得慢病毒LV-PM-RFP,有限稀释法检测慢病毒在293T细胞中的转染效率,用包装获得的慢病毒感染K562细胞,经嘌呤霉素筛选获得RFP阳性的K562-PM-RFP细胞株.结果 PCR及测序结果证实目的 基因RFP正确克隆至慢病毒质粒中,经慢病毒LV-PM-RFP感染的K562细胞能在嘌呤霉素抗性培养基中存活,并稳定表达RFP.结论 成功构建了慢病毒重组质粒pGC-PM-RFP,并获得了携带RFP及嘌呤霉素抗性基因的K562-PM-RFP细胞株.
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特异结合人禽流感病毒H5N1的scFv分子性能鉴定
目的 从人源化噬菌体抗体库(human single fold scFv libraries I+J)中筛选到能高亲和性、特异结合人禽流感病毒H5N1的单链抗体,为建立H5N1快速筛查试剂和人源化治疗单抗奠定基础.方法 以H5N1病毒的血凝素(hemagglutitin,HA)蛋白和核蛋白(nucleoprotein,NP)为目的 蛋白,对上述单抗噬菌体文库以亲和性为原理进行筛选,经过3轮筛选富集后,随机挑选了96个噬菌体克隆扩增培养,ELISA法挑选能特异性、高亲和性结合目的 蛋白的噬菌体克隆,并换用HB2151宿主菌对阳性单链抗体克隆进行可溶性表达,ELISA法鉴定可溶性单链抗体的结合活性,PCR扩增阳性克隆的轻、重链基因片段,并对阳性单链抗体分子测序和序列分析.结果 经过3轮筛选,分别从96个噬菌体克隆中挑选到了两株能特异结合NP蛋白、3株能特异结合HA蛋白的单链抗体,PCR扩增都得到了长为300、302和935 bp的轻链、重链和轻链-连接片段-重链的基因片段,测序结果分析发现上述5条单链抗体片段在轻链的47、49、50、51、53、54、56、96、97、98和99位的氨基酸组成不同,而特异结合NP蛋白的单链在重链区域氨基酸组成完全相同,而特异结合HA蛋白的单链在重链的44、47、85、86、87、88和89位氨基酸组成不同.结论 从噬菌体抗体库中筛选到的特异结合HA和NP蛋白的单链抗体片段,可为进一步研发H5N1快速筛选试剂和人源性治疗抗体奠定基础,也可为鉴定HA和NP蛋白中的抗原决定簇提供结构信息.
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大肠埃希菌嘌呤核苷磷酸化酶基因载体的构建及对胰腺癌细胞的作用
目的 构建大肠埃希菌(Escherichia coli)嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)基因表达载体,研究其生物活性,为肿瘤的基因治疗奠定基础.方法 PCR扩增大肠埃希菌K12的PNP基因,T4连接酶将PNP连接入pMSCV逆转录病毒载体,构建重组逆转录病毒载体pMSCV/PNP.pMSCV/PNP转化感受态大肠埃希菌XL1-Blue,提取pMSCV/PNP,酶切、PCR和测序鉴定.病毒包装细胞293产生重组逆转录病毒pMSCV/PNP,流式细胞仪测病毒滴度.pMSCV/PNP转染胰腺癌细胞BXPC-3,倒置荧光显微镜观察,FACS分离转染阳性细胞(GFP阳性).RT-PCR检测PNP mRNA在胰腺癌细胞BXPC-3 细胞中的表达,MTT法检测PNP基因的生物活性.结果 PCR扩增出大肠埃希菌PNP基因(738 bp),酶切和PCR的电泳条带显示pMSCV/PNP,测序结果正常.293包装细胞产生高滴度(3.6×107 U/ml)重组逆转录病毒pMSCV/PNP.RT-PCR实验结果表明,pMSCV/PNP转染的胰腺癌细胞BXPC-3表达PNP mRNA.前药6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(MePdR)作用72 h 浓度达1.00 mg/L,BXPC-3/PNP细胞存活率为10.09 %,随着MePdR浓度加大,BXPC-3/PNP细胞存活率继续下降直至为0.结论 构建了pMSCV/PNP载体,获得了表达大肠埃希菌PNP基因的BXPC-3细胞克隆,PNP/MePdR自杀基因系统对胰腺癌细胞BXPC-3有较强的抑杀作用.
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脱氧核酶抑制Akt1基因对MCF-7乳腺癌细胞生长的影响
目的 应用脱氧核酶抑制Akt1的表达,观察MCF-7乳腺癌细胞生长及凋亡情况.方法 采用噻唑蓝比色法(MTT)检测脱氧核酶抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖作用;DAPI染色法分析细胞凋亡形态学的变化;流式细胞术检测脱氧核酶对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响;运用蛋白免疫印迹检测分析Akt1、pro-caspase-3、pro-caspase-9的变化.结果 Akt1脱氧核酶对MCF-7乳腺癌细胞在体外的生长具有抑制作用;DRz1组的细胞早期凋亡率显著高于未处理组;荧光显微镜下可见典型的凋亡形态学变化;脱氧核酶作用后,免疫印迹检测Akt1蛋白表达降低,pro-caspase-3、9均被活化.结论 Akt1 DRz1能有效下调MCF-7乳腺癌细胞Akt1的蛋白表达水平,抑制MCF-7细胞的生长,且凋亡途径可能依赖于caspase-3、9的相关的线粒体凋亡途径.
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脂肪酸诱导胰岛β细胞凋亡过程中FoxO1对MTP的转录调控研究
目的 研究微粒体甘油三酯转移蛋白MTP在脂肪酸诱导的胰岛β细胞凋亡过程中,转录水平受FoxO1调控的情况.方法 脂肪酸处理胰岛β细胞系MIN6细胞,MTT和Hoechst染色检测细胞活力和凋亡情况;Realtime PCR检测MTP相对表达量;染色质免疫共沉淀技术检验FoxO1与MTP启动子区的结合情况;荧光素酶报告基因系统检测FoxO1对MTP的转录调控情况.结果 脂肪酸处理引起MIN6细胞活力下降、凋亡增加,使MIN6细胞中MTP mRNA水平上升;糖尿病模型小鼠胰岛中MTP mRNA水平上升;转录因子FoxO1的过表达可上调MTP的转录活性;ChIP-PCR结果显示FoxO1能与MTP的启动子区相结合.结论 MTP在脂肪酸诱导胰岛β细胞凋亡的过程中,作为转录因子FoxO1的下游靶基因,转录水平受到FoxO1的调控.
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grp78真核表达载体构建及其稳定转染HeLa细胞系建立
目的 构建人grp78基因真核表达载体,并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系.方法 用RT-PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区,将PCR产物克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/grp78并测序鉴定.用构建成功的pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体转染入人宫颈癌HeLa细胞,经G418筛选获得grp78稳定高表达的HeLa细胞系,并用RT-PCR及Western 印迹方法鉴定.结果 成功构建pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体,筛选获得稳定高表达人grp78的HeLa细胞系.结论 grp78真核表达载体的成功构建和稳定高表达grp78的HeLa细胞系的建立为进一步研究grp78的功能奠定了基础.
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十字孢碱对宫颈癌细胞中Btk表达的影响
目的 探讨十字孢碱对宫颈癌细胞生长及酪氨酸激酶 Btk(tyrosine kinase)基因和蛋白表达的影响.方法用不同浓度的十字孢碱处理宫颈癌 HeLa 细胞24 h,采用 MTT 比色法分析 IC50.用不同浓度十字孢碱处理 HeLa 细胞 24 h,Real-time PCR检测酪氨酸激酶Btk mRNA表达的变化,Western 印迹检测酪氨酸激酶Btk蛋白表达的变化.结果随着十字孢碱浓度及处理时间的增加,宫颈癌 HeLa 细胞生长抑制率升高;随着十字孢碱剂量的增加,酪氨酸激酶 Btk mRNA及蛋白的表达水平逐渐减少.结论 十字孢碱可呈剂量依赖性抑制 HeLa 细胞的生长,呈浓度依赖性减少酪氨酸激酶 Btk mRNA及蛋白的表达.
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视黄酸核受体γ重组腺病毒构建及其鉴定
目的 构建携带大鼠视黄酸核受体γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)的重组腺病毒,为研究RARγ在骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的作用奠定基础.方法 体外扩增大鼠RARγ基因,将其定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrace-TOX构建重组质粒pAdTrace-RARγ,并在BJ5183菌中与骨架质粒pAdEasy-1重组获得腺病毒载体pAd-RARγ,PacⅠ酶切后转染HEK 293细胞包装腺病毒.腺病毒Ad-RARγ感染大鼠MSCs,Real-time PCR和Western印迹检测 RARγ的表达.结果 PCR,酶切及测序均证实RARγ正确克隆至腺病毒质粒载体中,Ad-RARγ对MSCs感染率达60 %~70 %,并明显增强RARγ基因和蛋白的表达.结论 成功构建携带RARγ的重组腺病毒,并具有上调大鼠MSCs RARγ基因和蛋白表达的功能.
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MEKK3基因siRNA重组腺病毒表达载体的构建及其对胃腺癌AGS细胞MEKK3的表达抑制
目的 构建人MEKK3基因的小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体表达载体,观察其在胃腺癌AGS细胞中对MEKK3的表达抑制.方法 设计并合成针对人MEKK3基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,以MluⅠ及XhoⅠ克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,得到的质粒用PmeⅠ线性化后在大肠埃项菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组.卡那霉素筛选后,用PacⅠ酶切鉴定.鉴定正确的质粒经PacⅠ酶切、乙醇沉淀后转染293A细胞,包装得到具有感染能力的pAd-MEKK3-siRNA重组腺病毒.病毒体外转导人胃腺癌AGS细胞,Western印迹法检测其对MEKK3蛋白表达的抑制.结果酶切和测序鉴定表明3个MEKK3 siRNA重组腺病毒表达载体正确无误.Western印迹检测结果显示3个pAd-MEKK3-siRNA重组腺病毒表达载体中有两个可有效地抑制胃腺癌AGS细胞中MEKK3基因的表达,其中以pAd-MEKK3-siRNA3的抑制作用显著,有效率达89 %.结论 成功构建了针对MEKK3基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步研究MEKK3基因在人胃腺癌AGS细胞中的作用和功能奠定了基础.
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通过替代失活的方法分析核酸片段在肺炎链球菌毒力中的作用
目的 鉴定基因spd-ABC、spd-1672、spd-1673和长间隔序列spd-J在肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)毒力中的作用.方法 采用长臂同源聚合酶链反应(LFH-PCR)的方法分别构建这4个序列的红霉素抗性基因(erm)替代缺失突变体,通过PCR和测序鉴定是否构建成功;通过绘制生长曲线观察基因对细菌生长繁殖的影响,通过小鼠毒力实验观察基因对细菌致病性的影响.结果 所构建缺陷菌目的 基因由erm基因完全替代;spd-ABC、spd-1673和长间隔序列spd-J 3个片段缺陷菌的生长趋势与野生菌没有明显差异,生长大约5 h A值均可达到峰值,而spd-1672缺陷菌出现明显的延迟现象,生长8 h后其A值才达到高值;野生菌与缺失spd-ABC、spd-1673和长间隔序列spd-J的缺陷菌感染小鼠各组半数死亡时间分别为19、22、24和24 h,差异无统计学意义,而spd-1672缺陷菌感染小鼠的半数死亡时间在75 h左右,显著长于野生菌感染小鼠组(P＜0.05).结论 在构建的4个单个基因缺失突变体中,spd-1672缺陷后S.pn生长明显延迟,毒力显著下降,提示spd-1672是S.pn的一个新的毒力因子.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
