医学分子生物学杂志
Journal of Medical Molecular Biology 의학분자생물학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 华中科技大学同济医学院
- 影响因子： 0.31
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1672-8009
- 国内刊号： 42-1720/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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GLP-1与糖尿病基因治疗
胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是由肠道L细胞分泌的一种肽类激素, 综合的降糖作用使它在治疗糖尿病方面具有巨大的潜力.但由于二肽酰基肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)的降解,GLP-1血浆半寿期仅有几分钟,重复多次的给药方式降低了患者的依从性从而限制了它的临床应用.而基因治疗以抵抗DPP Ⅳ的GLP-1突变基因为基础,通过载体介导,旨在体内达到持续高效表达和延长半寿期的双重疗效.这一方法已成为目前关注的焦点.文章介绍了GLP-1分泌及降解,着重阐述近年来GLP-1在糖尿病基因治疗方面所取得的成果及存在的问题.
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动物抗菌肽的抗病毒活性
抗菌肽不仅具有抗细菌作用,某些抗菌肽还具有抗真菌甚至抑制病毒的活性.哺乳动物的防御素家族和两栖动物的Magainin家族、Brevinin-1家族、Maximins家族抗菌肽的成员,以及某些蜘蛛抗菌肽、虾抗菌肽、鲎抗菌肽等均具有抵御包膜病毒(如单纯疱疹病毒、人免疫缺陷病毒、流感病毒)的活性.抗菌肽的抗包膜病毒机制是其与病毒包膜相互作用而破坏病毒完整性,此外,抗菌肽亦可能参与机体免疫途径而抑制病毒.防御素等也具有抑制无包膜病毒(如人乳头瘤病毒、呼吸道轮状病毒、腺病毒)的活性,其可能途径是通过阻断病毒粒子释放达到抑制病毒传播的作用.
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脂类代谢组学的发展和应用
脂类代谢组学(lipidomics)是一个刚刚兴起和快速发展的研究领域,是代谢组学研究领域一个分支.随着代谢组学研究技术的快速发展和应用,人们对脂类代谢组学的研究日益广泛和深入.生物膜脂质的研究主要包括磷脂代谢组学(phospholipidomics)和鞘脂类代谢组学(sphingolipidomics);二脂酰甘油(DAG)作为细胞内第二信使发挥信号传导功能,其动态变化与疾病的发生及发展密切相关;脂类介质(如resolvins及protectins)在炎症的发展及消退过程中发挥重要作用,同时阿司匹林的抗炎机制也与resolvins及protectins密切相关.
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慢病毒载体介导的转基因整合位点研究方法
慢病毒载体整合到宿主细胞的染色体上可以长期稳定表达,目前已成为基因治疗和转基因动物载体研究的热点.慢病毒载体整合的位置效应是影响外源基因表达的重要因素,慢病毒载体整合位点的研究是探索外源基因整合机制的手段之一.转基因整合位点研究的方法主要有5种:荧光原位杂交、个体基因组文库筛选法、反向PCR、接头PCR、锚定PCR.近来的研究后发现整合位点之间可能存在一些共同特征.
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蛋白质组学研究中双向电泳的样品制备
蛋白质组学是目前生命科学研究中的一个热点,而双向电泳技术是现阶段大多数蛋白质组学研究中分离蛋白质混合物时所采用的主要技术.在双向电泳技术中,样品制备是整个分离过程中的关键一步,对实验结果将起到决定性作用.文章介绍了双向电泳技术的样品来源,并重点对样品制备过程一般包括的步骤,如样品匀质化、蛋白质溶解、干扰物去除和蛋白质富集等进行了详细说明.随着样品制备技术的发展,双向电泳技术将在蛋白质组学的研究中发挥更为显著的作用.
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TSC基因的生物学作用
TSC基因TSC1和TSC2分别编码蛋白hamartin和tuberin,初在结节性硬化症中发现其存在突变,作为肿瘤抑制因子,除参与mTOR信号途径调节细胞的生长和增殖外,还参与细胞黏附,细胞内吞等过程的调节.
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NF-κB在学习记忆以及神经变性性疾病中的分子作用机制
NF-κB通过调节多种基因的转录广泛参与神经系统的生理和病理过程.研究表明,NF-κB在神经保护和促进神经变性两方面都具有重要作用.文章以NF-κB在神经系统中的分子作用机制为切入点,着重阐述NF-κB参与学习记忆过程的分子途径,及其在神经病理过程中作用机制的新研究.
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男性免疫性避孕疫苗的应用研究
近年来男性免疫性避孕控制生育的研究日益增多.男性免疫避孕的理想目标是在不影响性激素水平、性欲和性功能的基础上研制出一种高效、安全、可逆的避孕疫苗,其基本原理是通过外源性靶抗原抗体中和体内生殖激素的作用,抑制精子发生,进而避孕.研究方法主要从生殖激素(GnRH、FSH、LH及其相应受体)和精子中筛选为合适的靶抗原用于免疫避孕疫苗的研究,睾酮激素下降明显、抗体滴度小、精子不可逆抑制是目前存在的常见问题.当今选择特异结合靶点抗原以及精子相关靶抗原进行免疫性避孕的方法有效促进了男性避孕疫苗的开发,是有前景的研究重点之一.
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microRNA与肿瘤侵袭转移
microRNA (miRNA)是一类长度为17~25 nt的单链非编码RNA,通过与靶基因mRNA互补位点的结合在转录后水平调控靶基因的表达.miRNA作为调控基因表达的重要分子在肿瘤侵袭转移中的作用越来越受到重视,阐明miRNA在肿瘤侵袭和转移中的作用机制具有重要的理论意义,同时也可以为肿瘤的诊断和治疗提供新方法.文章综述了miRNA在鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、结直肠癌和前列腺癌侵袭转移过程中作用机制的研究进展.
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蛋白酶体激活因子REGγ对细胞周期及凋亡的作用
蛋白酶体降解途径是受到精密调控的特异性蛋白降解途径,在许多细胞通路中执行关键作用,但需要蛋白酶体激活因子来激活.蛋白酶体激活因子REGγ(REGγ)能显著地增强蛋白酶体的催化活性.研究发现,REGγ能以泛素非依赖方式特异地降解其靶蛋白-P21及SRC-3,突破了曾经认为REGγ/20S蛋白酶体复合物仅水解小分子多肽的认识.研究提示,REGγ具有促进细胞增殖及抗凋亡的作用,并与肿瘤发生有密切关系.REGγ/20S蛋白酶体复合物可能作为抗癌治疗的一个靶点.
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诱导多潜能干细胞
通过病毒载体导入4个外源转录因子Oct4、Sox2、c-Myc、Klf或者Oct4、Sox2、Nanog、Lin28入体细胞,可以诱导产生具有胚胎干细胞特性相似的诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS).iPS在疾病治疗和药物研究等领域具有非常重要的应用前景,但是目前存在诱导效率低以及致肿瘤性等缺点,采用改良方法诱导产生iPS是将来研究的重点.
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Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究
目的 观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果.采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶 3(caspase 3)的表达变化.结果 p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期.随着survivin基因被沉默,caspase 3表达升高(P<0.01).结论 靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡.
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HER-2/neu基因探针的制备及特异性分析
目的 筛选、制备乳腺癌标志基因--HER-2/neu的标记探针,利用间接荧光原位杂交(FISH)技术,探索其临床应用价值.方法 通过文库构建、多级筛选、PCR鉴定、序列分析等技术获得HER-2/neu基因组片段,缺口转移法制备生物素标记探针,与生物素-亲和素放大系统和多种荧光显色系统组合,针对病理标本、细胞涂片进行间接FISH检测.结果 制备的HER-2/neu基因探针可以特异性地检测乳腺癌阳性、胃癌阳性病理片,也可以特异性检测阳性、阴性细胞标本,并与不同的荧光显色系统结合使杂交信号可以选择性地呈现绿色或红色荧光.结论 高特异性的HER-2/neu基因探针和灵活的显色系统为FISH的临床应用奠定了基础.
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失血性休克大鼠血浆蛋白质的差异分析
目的 应用蛋白质双向凝胶电泳(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis, 2-DE) 技术分析在急性重度失血性休克(acute severe hemorrhagic shock, ASHS)条件下大鼠血浆蛋白质组表达的差异.方法 16 只雄性 Wistar大鼠随机分成对照组(sham hemorrhage shock, SHS)和ASHS模型组,每组8只.采用股动脉放血的方法制备模型,在规定时间内处死大鼠并收集血浆,去除血浆中的高丰度蛋白后进行 2-DE,运用 Image Master 2D Platinum v 5.0 凝胶图像分析软件对 2-DE 凝胶图像进行差异表达分析,有意义的差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行肽质量指纹图谱分析,借助Swiss-prot 数据库进行蛋白质搜索和鉴定.结果 SHS 组和 ASHS 组肝脏的 2-DE 图谱分别平均识别到(570.0±0.9)和(578.0±1.4)个蛋白质点,SHS 组和 ASHS 组肝脏间平均匹配率达 83.6 %～86.2 %,共发现 8 个差异有意义的蛋白质点,鉴定出了白蛋白、甲状腺激素结合蛋白-D 链蛋白和信号素-3D 前体等 3 种蛋白质.结论 以 2-DE 技术得到重复性和分辨率都较好的 2-DE 图谱,并初步鉴定急性重度失血性休克后大鼠血浆去除高丰度蛋白后的差异表达蛋白质,为深入研究失血性休克的生理病理机制及寻找失血性休克预防和治疗的生物标志物提供了依据.
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一氧化氮对血管紧张素Ⅱ介导的小鼠入球动脉收缩功能的影响
目的 观察NO对血管紧张素Ⅱ介导的入球动脉收缩功能的影响,探讨其机制.方法 使用分离的微灌注的入球动脉行等张收缩试验,给予L-NAME及血管紧张素Ⅱ等血管活性物质,观察入球动脉内径的变化.利用NO荧光探针DAF-FM观测入球动脉内皮NO释放情况.结果 L-NAME (10-4mol/L) 时间依赖性的引起入球动脉的收缩,作用60 min后动脉内径减少了35.2 %.在灌注状态下,内皮NO荧光强度持续增加,60 min后达70 %;L-NAME明显抑制内皮NO的释放速率(从29 %降到5.7 %).血管紧张素Ⅱ(10-14 ～ 10-6 mol/L)浓度依赖性的引起入球动脉收缩,大收缩强度达41 %;L-NAME预处理能够增强入球动脉对于Ang Ⅱ的收缩反应,10-10mol/L Ang Ⅱ收缩动脉直径达46 %(没有L-NAME时为8.5 %),10-8 mol/L时为66 %(没有L-NAME时为41%).结论 灌注产生的血管剪切力是刺激NO释放的重要因素,内皮功能的完整性及NO在调控Ang Ⅱ介导的入球动脉收缩方面发挥重要的作用,NO生物利用度下降可能是肾脏疾病时入球动脉阻力增高的重要机制.
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甲氨喋呤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜骨桥蛋白和整合素αVβ3表达的影响
目的 探讨甲氨喋呤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及其受体整合素αvβ3表达的影响及其作用机制.方法 建立CIA大鼠模型,分为模型组和甲氨喋呤(MTX)组,后者用MTX进行干预治疗;采用免疫组织化学染色技术检测滑膜组织OPN和整合素αvβ3的表达,ELISA方法检测血清TNF-α水平.结果 ① CIA模型组和MTX组大鼠的滑膜OPN、整合素αvβ3表达均明显高于正常大鼠对照组(均为P<0.01);与模型组比较,MTX组OPN和整合素αVβ3的表达减少(均为P<0.01). ②正常对照组和MTX组大鼠血清TNF-α水平显著性低于模型组大鼠(均为P<0.01).结论 滑膜OPN和整合素αvβ3异常表达在CIA发病中具有重要意义.MTX通过下调滑膜OPN和整合素αvβ3的表达,降低血清TNF-α水平从而达到治疗CIA的作用.
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多聚嘧啶序列结合蛋白的表达、纯化及其与HBV转录后调节元件RNA结合的分析
目的 在大肠埃希菌中表达并纯化多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein,PTB)-His融合蛋白,并鉴定PTB与HBV转录后调节元件(HBV posttranscriptional regulatory element,HPRE) RNA的体外结合.方法 构建PTB-His融合蛋白的原核表达载体,经IPTG诱导表达后,用亲和层析的方法进行纯化.用磁珠结合与Western 印迹的方法,验证PTB与HPRE RNA在体外的特异性结合.结果 成功构建了PTB-His融合蛋白的原核表达载体,并在体外大量表达后用亲和层析的方法得到了高纯度的PTB-His融合蛋白.磁珠结合沉淀与Western 印迹实验证明PTB与HPRE RNA在体外能特异性的结合.结论 体外表达的PTB融合蛋白能与HPRE RNA特异性的结合.
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细胞复制性衰老及早衰过程中组蛋白整体乙酰化改变
目的 检测人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导细胞早衰过程中组蛋白整体乙酰化修饰的改变.方法 应用细胞免疫荧光实验观察组蛋白乙酰化水平变化,并基于ELISA样反应方法检测组蛋白总体去乙酰化酶的活性变化,荧光定量PCR检测乙酰化酶mRNA表达,荧光定量PCR和Western印迹检测去乙酰化酶表达变化及曲古霉素A对相应酶表达的影响.结果 在细胞复制性衰老及细胞早衰过程中,组蛋白H3和H4整体乙酰化水平逐渐下降;去乙酰化酶活性逐渐降低;与年轻细胞组相比,中年细胞与复制性衰老细胞组P300表达下降;中年细胞组PCAF稍升高,复制性衰老细胞组降低;早衰起始组P300和PCAF均升高,早衰持续组P300降低;中年细胞组HDAC1表达稍降低;复制性衰老细胞组HDAC2稍降低;而HDAC3均降低;早衰起始组HDAC1,HDAC3有不同程度升高;早衰持续组HDAC2,HDAC3降低显著,而HDAC1明显升高.曲古霉素A诱导P300,PCAF表达,而降低HDAC1,HDAC2和HDAC3表达.结论 组蛋白H3和H4整体低乙酰化是衰老细胞的伴随状态;细胞复制性衰老与过氧化氢诱导的早衰内在调控机制存在差别.
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TIMP-3N端结构域重组腺病毒载体的构建与鉴定
目的 构建N-TIMP3重组腺病毒载体,为深入研究组织金属蛋白酶抑制因子-3(tissue inhibitor of metalloproteinases-3,TIMP-3)N端结构域对胰腺癌的作用奠定基础.方法 PCR扩增编码人TIMP3信号肽及其N端结构域的DNA序列,定向克隆至空载穿梭质粒pShuttle-CMV,构建重组穿梭质粒pShuttle-N-TIMP3,并测序鉴定.将重组pShuttle-N-TIMP3转化BJ5183感受态细菌,与其内的腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,构建重组腺病毒载体pAd-N-TIMP3,并经酶切与PCR鉴定.将线性化的重组载体转染QBI-293A细胞包装病毒,TCID50法检测病毒滴度,用Western 印迹检测目的 蛋白的表达.结果 重组腺病毒载体pAd-N-TIMP3经鉴定正确,病毒滴度为5×108 PFU/ml,并检测到目的 蛋白的表达.结论 成功构建了重组腺病毒载体pAd-N-TIMP3.
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利用pIRES载体构建TCR独特型重组质粒
目的 利用可同时表达两个基因片段的pIRES作为载体,构建TCR独特型重组质粒,为制备诱导抗T细胞肿瘤免疫的TCR独特型DNA疫苗提供基础.方法 设计引物,提取Jurkat及Molt4细胞株RNA为模板,RT-PCR法特异性扩增CDR3区,与pIRES经酶切连接后氯化钙法转化,重组质粒经酶切鉴定后测序.结果 构建出3种重组质粒pIRES-Jurkat Vβ8、pIRES-Molt4 Vβ2①和pIRES-Molt4 Vβ2②,其中pIRES-Molt4 Vβ2②测序正确,可体外表达Vβ2蛋白.结论 利用真核表达载体pIRES可成功构建TCR重组质粒,并有可能用于进一步克隆佐剂基因片段入pIRES的多克隆位点,提高DNA疫苗的免疫原性.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
