医学分子生物学杂志
Journal of Medical Molecular Biology 의학분자생물학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 华中科技大学同济医学院
- 影响因子： 0.31
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1672-8009
- 国内刊号： 42-1720/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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间充质干细胞诱导分化为胰岛分泌细胞治疗1型糖尿病
糖尿病是严重危害人类健康的一类疾病,注射胰岛素和胰岛移植虽能用于治疗糖尿病,但都存在一定的局限性.大量研究表明,间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)可以在化学以及生物因子的作用下,或通过基因转染的方式在体外被诱导分化为胰岛素分泌细胞,且移植后对糖尿病鼠模型有一定降血糖效果,因而成为糖尿病治疗领域的研究热点.文章综述了不同来源的MSC诱导分化为胰岛分泌细胞(insulin-producing cells,IPC)的方法及诱导分化后用于治疗1型糖尿病的研究进展.
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Prokineticin2与睾丸炎的关系
Prokineticin2(PK2)是一种分泌性蛋白,属于Prokineticins家族.具有促进胃肠蠕动,调节昼夜节律和免疫反应,参与血细胞生成、嗅觉和促性腺激素释放激素系统的发育等生物学作用.近年来证实PK2是一个功能强大的炎性趋化因子,可促进炎性细胞增殖分化和细胞因子的分泌,在男性生殖领域的研究渐受关注.PK2主要在初级精母细胞中表达,睾丸虽是免疫豁免器官,但睾丸炎仍是引起男性不育的重要原因,PK2本身又是炎性趋化因子,明确其在睾丸正常生理和病理情况下的作用,将为睾丸炎所致男性不育更有效治疗方法的探究提供可靠的理论依据.
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SUMO化修饰在NF-κB信号通路中的作用
小泛素相关修饰物(small ubiquitin related modifier,SUMO)修饰是与泛素化修饰类似的蛋白质翻译后修饰,在细胞信号转导、核质运输与转录调控等方面发挥重要作用.核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路是公认的参与炎症和免疫反应的重要调节通路.近年来研究发现,SUMO通过各种机制广泛参与NF-κB信号通路的调节.研究两者的关系,可能为相关疾病的防治找到新的思路.
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B细胞不对称分裂
细胞的不对称分裂对于细胞多样性产生的重要性已经被大部分人所认识.B细胞的不对称分裂首先是在抗体类别转换的研究中发现的.近,美国5科学家对B细胞在免疫发生中心中不对称分裂的原因进行了探索.结果 发表在2012年1月20日出版的
中.B细胞的不对称分裂参与体液免疫的抗体类别转换和抗体亲和力成熟过程.对于其机制仍不清楚,但目前研究初步提示细胞内分子的不对称分布是其发生的上游因素.并且B细胞的不对称分裂可能与不对称抗原分离可能在抗体亲和力成熟过程中具有独立协同作用. -
朊病毒中朊蛋白及朊蛋白现象
朊病毒病是一种由朊病毒侵染动物神经系统并引发神经退行性症状的传染性疾病.朊病毒是由正常朊蛋白PrPC通过构象转化形成具蛋白酶抗性的异常朊蛋白PrPSc的病原微生物.新研究表明,朊蛋白通过构象转变形成新的功能分子的现象在生物界中普遍存在,并与正常生物功能密切相关.通过研究类朊蛋白现象可以有助于揭示朊病毒感染机制以及深化对生物遗传多样性的了解.
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肝癌细胞系中Yamanaka因子的内源和异位表达及其作用
目的 检测肝癌细胞系中Yamanaka因子的表达,为肝癌细胞来源的诱导多能干细胞(iPS细胞)的建立和通过细胞重编程逆转肝癌的恶性表型提供实验依据.方法 通过反转录PCR检测Huh7、SMMC-7721、HepG2等肝癌细胞系中4种Yamanaka因子Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc的mRNA水平,通过Western印迹方法检测上述因子在蛋白质水平的表达,并构建上述因子的慢病毒表达载体,在肝癌细胞中过表达上述转录因子.结果 4种Yamanaka因子在肝癌细胞系中均有不同程度表达,mRNA和蛋白质水平的检测结果一致.统计学分析显示,c-Myc的表达显著高于正常肝细胞.成功构建了Yamanaka因子的慢病毒表达载体,并诱导肝癌细胞呈现类似iPS细胞的形态.结论 Yamanaka因子在肝癌细胞中有不同程度的内源表达,而外源高表达外源Yamanaka因子对于iPS细胞的诱导至关重要.
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已建株鼻咽癌细胞的PLUNC基因启动子区序列多态性分析
目的 检测人类标准鼻咽癌细胞中是否存在已知的PLUNC基因启动子-437 bp～+87 bp区域的单核苷酸多态性(SNP).以便进一步探索SNP与鼻咽癌的关系.方法 采用PCR产物直接测序的方法,对7株体外培养的鼻咽癌细胞基因组DNA的PLUNC基因启动子区进行序列分析.结果 发现7株PLUNC基因的启动子区皆存在已知的3个SNP位点(1 888、2 128和N2)和未知一个突变位点(N1),其测观杂合度分别为85.7 %、100 %、100 %和28.6 %.其中3个已知SNP位点在筛查的细胞株中均存在T→C的突变,而且SUNE-1鼻咽癌细胞株的1888位点基因型为突变纯合子CC型.结论 体外培养的标准鼻咽癌细胞株中存在已知的3个SNP位点(1 888、2 128和N2)的突变现象,且突变率为100 %;1 888位点鼻咽癌易患型(CC型)已在体外稳定建株;首次发现启动子-195 bp区域N1突变位点.
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兔脑皮质静脉闭塞后脑组织Caspase-3活性的变化
目的 观察兔脑皮质静脉闭塞后Caspase-3活性的变化.方法 采用电凝法制作兔脑皮质引流静脉急性闭塞模型,琼脂糖凝胶电泳、荧光实时定量PCR和Western印迹检测Caspase-3表达.结果 脑皮质静脉闭塞后8 h Caspase-3活性已升高,24 h达高峰,48 h明显下降.结论 细胞凋亡是脑缺血后脑损伤发生机制,Caspase-3蛋白参与了皮质静脉闭塞后脑缺血后神经元损伤的病理过程.
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慢病毒介导的靶向沉默信息调节因子1(SIRT1)的RNA干扰对肝癌细胞生长及凋亡的影响
目的 探讨慢病毒介导的靶向SIRT1 shRNA对肝癌细胞生长和凋亡的影响.方法 Western 印迹分析SIRT1在多个肝癌细胞系中的表达;通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT1的表达,并通过Western印迹验证SIRT1基因的沉默效果.台盼蓝排斥实验分析SIRT1基因沉默对肝癌细胞生长的影响;流式细胞术和Western印迹检测PARP蛋白的剪切物观察细胞凋亡状态.结果 SIRT1在多个肝癌细胞系中表达水平明显上调;慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞中SIRT1的表达.流式细胞术及Western印迹结果均显示SIRT1表达沉默显著诱导了肝癌细胞的凋亡.结论 慢病毒介导的靶向SIRT1 shRNA显著地抑制SIRT1的表达;SIRT1基因沉默抑制肝癌细胞生长并促进了细胞凋亡.
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新型鬼臼毒素衍生物诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及其机制研究
目的 探讨新型鬼臼毒素衍生物10Ⅲg诱导人肺腺癌细胞A549细胞凋亡及其调控机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术测定细胞周期细胞凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳和微管蛋白组化染色,Western 印迹法检测凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达.结果 新型鬼臼毒素衍生物10Ⅲg对A549细胞增殖具有明显的剂量和时间依赖性抑制作用,细胞周期分析显示S期细胞数明显增多,出现G2/M期阻滞;10Ⅲg作用48 h后DNA电泳可见明显的梯状条带;10Ⅲg能破坏A549细胞的细胞骨架,与依托泊苷相比有明显促进微管解聚现象;10Ⅲg浓度为10-6 mol/L时能显著促进Bax、Caspase-3蛋白的表达.结论 新型鬼臼毒素衍生物10Ⅲg通过诱导A549细胞发生G2/M期阻滞而抑制其增殖,其机制可能与抑制细胞微管解聚及诱导细胞凋亡有关.
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应用二维电泳和质谱技术筛选喉癌及癌旁组织中的差异表达蛋白质
目的 分离并鉴定喉癌和癌旁正常粘膜组织的差异表达蛋白质,为喉癌早期临床诊断、治疗提供新的有关的肿瘤生物学标记和靶标.方法 收集5对人喉癌组织和对应的癌旁正常粘膜组织,提取组织总蛋白质,采用二维凝胶电泳技术分离蛋白并进行比较.选择在喉癌中明显差异表达的蛋白质点,进行质谱分析.结果 获得了分辨率和重复性均较好的凝胶蛋白图谱.筛选出的在喉癌及癌旁正常粘膜组织中明显差异表达的10个蛋白质点,并成功鉴定.其中在喉癌组织中高表达的7个,低表达的3个.结论 喉癌组织与癌旁正常粘膜组织蛋白存在明显的差异,筛选并鉴定出的这些蛋白质可能成为喉癌早期临床诊断、治疗的标志物和靶标.
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LMO3逆转录病毒表达载体的构建及其对SK-N-AS细胞增殖的影响
目的 构建包含LMO3 ( LIM-only 3,LMO3)全长基因的逆转录病毒表达载体,感染人神经母细胞瘤SK-N-AS,检测LMO3对SK-N-AS细胞增殖的影响.方法 将质粒pEGFP-C1-LMO3经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建重组逆转录病毒表达载体pLXSN-LMO3,导入包装细胞pA317,获得逆转录病毒颗粒,感染SK-N-AS细胞,用RT-PCR及Western 印迹鉴定,检测LMO3感染后细胞的增殖及细胞周期分布情况.结果 获得了能正确表达LMO3基因的重组逆转录病毒表达载体pLXSN-LMO3;LMO3基因被逆转录病毒成功导入SK-N-AS细胞后,与对照组细胞相比,LMO3感染组G0/G1期细胞减少,S期细胞增加,感染48 h后,LMO3感染组细胞的增殖能力显著高于空载体对照组及SK-N-AS组(P＜0.05).结论 成功构建了LMO3基因的逆转录病毒表达载体,LMO3可以通过促进SK-N-AS细胞由G0/G1期进入S期,从而促进细胞的增殖.
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小鼠GITRL基因真核表达质粒的构建转染及其在Kupffer细胞中的表达
目的 构建含小鼠GITRL基因的真核表达质粒pEGFP-N1-GITRL,体外转入小鼠Kupffer细胞.方法 利用PCR方法扩增GITRL基因,克隆至pEGFP-N1载体,选择阳性克隆并进行序列测定.以脂质体化学法转染至Kupffer细胞中.结果 构建了真核表达质粒pEGFP-N1-GITRL,基因测序与GenBank中发表的序列完全一致,体外瞬时转染Kupffer细胞,RT-PCR及WB检测该Kupffer细胞表达GITRL.结论 成功构建了真核表达质粒pEGFP-N1-GITRL,并在小鼠Kupffer细胞成功表达,为进一步研究GITRL在Kupffer细胞中的的生物学功能提供研究基础.
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IRE1α上调人骨肿瘤细胞XBP1启动子转录活性的研究
目的 研究内质网跨膜蛋白肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)对其下游转录因子XBP1启动子转录活性的影响.方法 在成功构建人IRE1α基因全长重组质粒的基础上,设计合成并构建靶向IRE1α基因的siRNA干扰载体(pS1;pS2);采用巢式PCR扩增XBP1启动子,插入到pGL3-Basic载体,构建携带XBP1启动子的报告基因重组质粒pGL3-XBP1.分别将siIRE1α干扰质粒与pGL3-XBP1报告基因重组质粒共转染入SW1353细胞和Saos-2细胞中,48 h后采用双荧光报告系统检测IRE1α对XBP1启动子转录活性的调控作用.结果 酶切及测序结果证实siRNA1α干扰质粒和XBP1启动子真核表达载体均构建成功,双荧光报告系统检测显示SW1353细胞和Saos-2细胞中,直接载体pcDNA3.15(-)IRE1α与pGL3-XBP1共转实验组的荧光素酶活性明显高于其他实验组(P＜0.5),并随着IRE1α转染剂量的增加逐渐达到饱和;而siIRE1α与pGL3-XBP1共转实验组的荧光素酶活性明显降低.免疫印迹结果显示,过表达IRE1α明显上调剪接型XBP1S蛋白的表达.结论 人恶性骨肿瘤细胞中,过表达IRE1α明显上调XBP1启动子的转录与表达,并能有效促进XBP1U剪切生成XBP1S;通过siRNA方法抑制IRE1α后,XBP1启动子的转录与表达受到抑制.本实验为进一步研究骨肿瘤细胞中IRE1α调控XBP1启动子转录与剪接的分子机制奠定基础,为临床骨肿瘤的诊断与治疗提供一定的实验依据.
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重组人胱抑素C的原核表达及鉴定
目的 构建重组人胱抑素C(cystatin C,Cys C)的原核高效表达质粒,诱导表达并纯化获得Cys C重组蛋白.方法 根据大肠埃希菌编码蛋白的特性设计Cys C编码基因序列,人工合成目的 基因克隆至pET-22b(+)表达载体中,测序及酶切鉴定正确后诱导其在大肠埃希菌BL21中表达,所获得的包涵体蛋白经亲和层析纯化后采用SDS-PAGE及Western印迹鉴定.结果 酶切结果证实构建的表达质粒结构正确;测序结果显示克隆的基因序列所编码的蛋白与GenBank中的CysC氨基酸序列相符;SDS-PAGE及Western印迹结果证实获得的重组CysC融合蛋白分子量约为16 kD,经Ni2+亲和层析纯化获得纯度大于90 %的目的 蛋白.结论 建立了重组人Cys C的原核高效表达系统并获得了Cys C重组蛋白.
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一种快速检测CLN6模型小鼠基因型的方法——高分辨率熔解曲线分析法
目的 建立利用高分辨率熔解曲线(HRM)分析快速鉴定CLN6(神经元蜡样脂褐质沉积症,ceroid-lipofuscinosis,neuronal 6)小鼠(Cln6基因移码突变)基因型的方法.方法 根据NCBI公布的小鼠cln6序列(NC 00075)设计HRM引物和测序引物,然后采用HRM技术获得高分辨熔解曲线鉴定实验小鼠基因型,同时通过直接测序法进行验证,评价其灵敏性和准确性.结果 181只实验小鼠经HRM检测,共有野生型11只、Cln6基因突变杂合子73只和纯合子97只,HRM结果和直接测序结果完全一致,准确性为100 %.结论 HRM方法检测DNA微小突变时具有操作简便、快速、灵敏,单管避免污染以及准确度高等优点,值得推广.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
