中华实用儿科临床杂志
Chinese Journal of Applied Clinical Pediatrics 실용아과림상잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.50
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-428X
- 国内刊号： 10-1070/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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粪菌移植在儿童消化系统疾病中的应用
粪菌移植(FMT)在人类医学史上至少已有1 700年的历史.近年来,FMT得到迅速发展,研究已表明FMT对成人难辨梭状芽孢杆菌感染、炎症性肠病等多种疾病的治疗安全有效.现就FMT在儿童消化系统疾病中的应用进行讨论.
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儿童嗜酸细胞性胃肠炎
嗜酸细胞性胃肠炎是一种罕见疾病,临床表现多样,具体病因不明.儿童罹患嗜酸细胞性胃肠炎可以影响生长发育,引起多种并发症.通过对嗜酸细胞性胃肠炎的发病机制、临床表现、诊断标准和治疗原则进行阐述,有助于加强疾病认识,提高诊治水平.
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儿童非横纹肌软组织肉瘤的美国儿童肿瘤协作组危险度评估与综合治疗单中心研究
目的 研究儿童非横纹肌软组织肉瘤(NRSTS)的临床特点、预后状况、生存影响因素及治疗策略.方法 北京大学肿瘤医院骨与软组织肿瘤科2007年7月至2015年3月共收治34例NRSTS患儿,回顾性研究患儿临床与病理资料、手术与放化疗综合治疗结果,并分析生存影响因素.结果 本组男21例,女13例;年龄7～18岁,中位年龄14岁.肿瘤大径0.5 ～22.0 cm,平均值5.0 cm,中位值3.0 cm.由9种不同的组织学亚型组成,以滑膜肉瘤多[29.4％(10/34例)].部位以四肢多[67.6％(23/34例)],其中下肢占50.0％(17/34例).美国横纹肌肉瘤协作组(IRS)分组:Ⅰ组28例,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组各2例;美国儿童肿瘤协作组(COG)危险分层:低危组23例,中危组7例,高危组4例.随访时间6 ～ 96个月,中位随访时间35个月.术后发生复发2例,远处转移1例,淋巴结与远处转移2例,复发与远处转移1例,死亡3例.34例患儿2年总生存率为89.2％,低危组为100.0％,中高危组为70.0％.其中28例无淋巴结及远处转移患儿,术后2年局部无复发生存率及无远处转移生存率分别为96.4％、87.6％.分析生存影响因素,发现IRS分组、COG危险分层、肿瘤大小与预后相关.能够完整手术切除(P =0.007)、低度危险(P=0.014)、≤5.0 cm(P =0.037)的肿瘤具有更好的生存预期.治疗:单纯手术14例,手术加化疗10例,手术加放化疗4例,手术加放疗2例,单纯放化疗2例,单纯化疗2例.化疗方案主要(17/18例)采用蒽环类药+异环磷酰胺方案(吡柔比星:40 mg/m2,异环磷酰胺:10g/m2),每例总化疗2～12周期,平均4.6个周期.结论 NRSTS患儿在手术、放疗及基于葸环类药物+异环磷酰胺联合化疗的综合治疗后,可取得较好结果.本研究首次采用COG分层研究儿童NRSTS,并证实实肿瘤大小与COG危险度分层是重要的生存影响因素.应该依据NRSTS危险度评估预后,并设计综合治疗策略.
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持续性及慢性免疫性血小板减少症患儿DNA甲基转移酶mRNA的表达
目的 通过检测持续性及慢性免疫性血小板减少症(ITP)患儿外周血淋巴细胞的DNA甲基转移酶(DNMTs)mRNA的表达水平,探讨DNA甲基化在儿童ITP发病机制中的作用.方法 选取2014年1月至2015年1月在新乡医学院第一附属医院儿科病房治疗或随访的25例持续性及慢性ITP患儿和门诊体检健康的20例健康儿童(健康对照组)为研究对象.无菌采集其空腹外周血2 mL,乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,分离单个核细胞,提取RNA,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表达水平.结果 1.持续性及慢性ITP患儿血小板(PLT)为(36.2±19.6)×109/L,明显低于健康对照组(168.8 ±46.8)×109/L,2组比较差异有统计学意义(t=-11.85,P=0.000).2.持续性及慢性ITP患儿DNMT1mRNA表达为0.17 ±0.05,明显低于健康对照组(0.27±0.10),2组比较差异有统计学意义(t=-3.912,P=0.001);持续性及慢性ITP患儿DNMT3A mRNA表达为0.20 ±0.10,明显低于健康对照组(0.32±0.11),2组比较差异有统计学意义(t=-3.779,P=0.000);持续性及慢性ITP患儿DNMT3B mRNA表达为0.16 ±0.11,明显低于健康对照组(0.31±0.11),2者比较差异有统计学意义(t=-4.641,P=0.000).3.DNMT1与DNMT3BmRNA表达呈正相关(r=0.433,P=0.031);DNMT3A与DNMT3B mRNA表达呈正相关(r=0.721,P=0.000).结论 1.儿童持续性及慢性ITP存在DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表达降低,提示DNA低甲基化可能参与儿童持续性及慢性ITP的发病机制.2.在儿童持续性及慢性ITP的DNA甲基化过程中DNMTs可能起协同作用.
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DDX1基因对神经母细胞瘤细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响
目的 探讨dead box 1(DDX1)基因对神经母细胞瘤(NB)细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响.方法 将生长状态良好、处于对数生长期的空细胞[SK-N-BE(2)/blank]、阴性对照组细胞[SK-N-BE(2)/shV]和干扰DDX1组细胞[SK-N-BE(2)/shDDX1]接种于96孔板,每孔5 000个细胞.使用CCK-8(cell count kit 8)试剂盒分别检测12h、24h、36 h、48 h各组细胞的细胞数,并取平均值,以时间(h)为横坐标,450 nm处的吸光度(A)值为纵坐标,绘制出3种细胞的增殖曲线,观察DDX1对NB细胞增殖能力的影响.培养24h后使用流式细胞仪PI染色观察SK-N-BE(2)/shV和SK-N-BE(2)/shDDX1细胞凋亡情况,以此观察DDX1对NB细胞凋亡的影响.使用流式细胞仪PI染色观察SK-N-BE(2)/blank、SK-N-BE(2)/shV和SK-N-BE(2)/shDDX1细胞各自位于G1、S、M、G2期的细胞比例,比较3组细胞周期的不同,观察DDX1对NB细胞周期的影响.结果 CCK8结果显示,SK-N-BE(2)/shDDX1细胞增殖能力明显弱于SK-N-BE(2)/blank和SK-N-BE/shV细胞,即DDX1敲低后NB细胞增殖能力减弱.流式细胞仪结果显示,SK-N-BE(2)/shV细胞总凋亡率平均值为5.28％,而SK-N-BE(2)/shDDX1细胞总凋亡率平均值为9.99％.SK-N-BE(2)/shDDX1细胞凋亡数目明显多于SK-N-BE(2)/shV细胞,即DDX1敲低后NB细胞凋亡增加.相对于SK-N-BE(2)/blank和SK-N-BE (2)/shV细胞,SK-N-BE(2)/shDDX1细胞的细胞周期阻滞,增殖能力受到影响.结论 DDX1表达受到抑制后,NB的细胞周期受到影响,细胞凋亡增加,增殖能力减弱.
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三氧化二砷对大鼠皮质神经元迁移的影响及其机制
目的 通过构建大鼠乳鼠神经元原代细胞培养模型,探讨三氧化二砷(As2O3)对神经元迁移的影响及其机制.方法 取SD大鼠新生乳鼠脑组织进行皮质神经元原代培养,建立细胞培养模型.实验分为4组:正常对照组、1 μmol/L As2O3组、10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L As2O3组.加入不同浓度As2 O3培养24 h,采用Boyden趋化小室检测各组神经元的迁移情况,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察肌动蛋白的结构.结果 正常对照组神经元分布规律;1 μmol/L As2O3组、10 μmoL/L As2O3组和20 μmol/L As2O3组神经元生长稀疏,杂乱分布,其中20 μmol/L As2O3组为明显.正常对照组、1μmol/L As2O3组、10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L AS2O3组神经元在相同单位时间内迁移的平均细胞数分别为64.6±4.3、63.0±7.0、54.8 ±3.6、21.6±3.9.组间比较差异有统计学意义(F =49.31,P＜0.01).共聚焦显微镜下观察到正常对照组和1 μmol/L As2O3组神经元内的肌动蛋白呈纤维状条带分布,10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L As2O3组神经元肌动蛋白断裂、散在分布.结论 As2O3可以干扰神经元的迁移,与As2O3的浓度有关,肌动蛋白的结构破坏可能是其潜在机制.
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Das-Naglieri认知评估系统对注意缺陷多动障碍儿童认知过程评估的对照研究
目的 了解Das-Naglieri认知评估系统(DN:CAS)对注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童认知过程的评价情况.方法 采用DN:CAS对61例ADHD儿童以及与其年龄、性别相匹配的61例健康对照组儿童进行测验,比较2组测验量表分结果的差异.结果 ADHD组与健康对照组的DN:CAS4个分测验中的计划测验[(24.18±5.64)分比(30.07±5.28)分,t=-6.985,P＜0.01]、同时性加工测验[(33.97 ±7.64)分比(36.90±7.20)分,t=-2.211,P＜0.05]、注意测验[(26.52±6.80)分比(31.21±5.86)分,t=-4.909,P＜0.01]以及总分[(117.85±21.45)分比(132.48±17.95)分,t=-5.286,P＜0.01]的量表分差异均有统计学意义.其中计划测验中的数字匹配[(8.77±2.33)分比(10.87±2.31)分,t=-5.220,P＜0.01]、计划编码[(7.87±2.37)分比(9.44±2.61)分,t=-4.006,P＜0.01]、计划连接[(7.54±2.29)分比(9.75±2.01)分,t=-6.643,P＜0.01]、同时性加工测验中的言语-空间关系[(10.05±2.79)分比(11.23 ±3.19)分,t=-2.382,P＜0.05]以及注意测验中的表达性注意[(9.02±2.47)分比(10.34±3.03)分,t=-2.938,P＜0.01]、数字检测[(8.16±2.31)分比(10.08±1.86)分,t=-5.028,P＜0.01]、接受性注意[(9.34±3.68)分比(10.78±3.20)分,t=-3.215,P＜0.01]的量表分差异均有统计学意义.ADHD组与健康对照组的计划测验量表分、注意测验量表分及总量表分的百分等级分布差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 ADHD儿童存在认知过程缺陷,以计划功能和注意功能缺陷为主要特征.DN:CAS在ADHD儿童认知过程的评估方面具有一定的应用价值.
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母亲肥胖对儿童神经精神状况的影响
近年来,肥胖正成为社会各界关注的焦点问题之一.母亲肥胖可能导致产科并发症增多,威胁母亲健康,还可能对子代的近期及远期健康产生重大影响.母亲肥胖可能对儿童神经系统产生影响,但目前国内还没有文献系统地阐述.现就母亲肥胖对儿童神经精神发育的影响进行综述,为指导育龄妇女调节体质量提供合理的建议.
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儿童药物性肝损害的诊治进展
药物性肝损害(DILI)是常见的儿童肝损害和肝衰竭的原因之一,儿童DILI临床表现缺乏特异性,多在肝受损严重时才出现黄疸、恶心、呕吐、腹胀等消化道症状,若没有及时停用致肝损害药物并采取干预措施,部分患儿可能发展成为急性肝衰竭,甚至致死.因此,早期诊断药物性肝损害,积极进行有效的治疗极为重要.现主要针对儿童DILI的发病机制、临床表现以及诊治现状给予综述,以期促进对于该病的早期诊治,降低严重并发症的发生率以及提高生存率.
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食物激发试验在儿童消化道食物过敏诊断中的应用
食物过敏是儿童常见疾病,分为IgE介导型、非IgE介导型和混合介导型.消化道是食物过敏的主要效应器官之一.消化道食物过敏主要由非IgE介导,其机制尚不明确,目前缺乏统一诊断标准,双盲安慰剂对照食物激发试验是诊断食物过敏的金标准.现就食物激发试验的相关操作及其在消化道食物过敏诊断中的应用进行综述.
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Citrin缺陷致新生儿肝内胆汁淤积症29例临床分析及疗效随访
目的 分析Citrin缺陷致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿的临床表现、实验室检查特点及预后.方法 对2012年7月至2015年2月重庆医科大学附属儿童医院经血串联质谱和/或基因检测诊断的29例NICCD患儿临床表现、实验室检查结果进行回顾性分析,随访患儿一般情况、喂养方式、肝功能、生长发育、饮食偏好等.结果 29例NICCD患儿黄疸出现时间早,伴肝大(20/29例)、脾大(13/29例)、贫血(14/29例)、生长发育落后(9/29例)等主要临床表现.实验室检查提示29例患儿结合胆红素、总胆红素、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶升高,28例天门冬氨酸氨基转移酶明显升高,大部分患儿(20/22例)有凝血功能障碍,伴血氨(20/25例)、乳酸(22/26例)、血脂(9/20例)、甲胎蛋白(14/14例)升高,清蛋白(24/29例)、血糖(17/22例)、铜蓝蛋白(4/4例)降低等异常改变.1例肝脏病理学检查提示肝细胞水肿变性、胆汁色素沉着及汇管区少量纤维组织增生.血串联质谱示甲硫氨酸、酪氨酸、苏氨酸、瓜氨酸、精氨酸及游离肉碱、长链酰基肉碱升高,尿气相-色谱以4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸升高为主.20例随访患儿中,18例患儿予无乳糖+高中链甘油三酯奶粉喂养后1岁内症状缓解,肝功能明显好转或恢复正常,1例因肝硬化死亡.3例＞1岁的患儿有喜食高蛋白低碳水化合物的饮食偏好.结论 对于黄疸出现早,以肝脾大、贫血、生长发育落后、凝血功能异常、低血糖、低蛋白血症、高氨血症、高脂血症、高乳酸及甲胎蛋白异常升高为特点的患儿,应及时鉴别NICCD,完善血串联质谱、尿气相-色谱及基因检查.
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红霉素对胃食管反流幼兔模型胃肠道动力作用的影响
目的 建立胃食管反流(GER)幼兔模型,观察红霉素对模型幼兔肌条不同部位(食管下段和胃底)的影响以及损毁Cajal间质细胞(ICC)后红霉素对肌条的影响.方法 8周龄的幼兔40只随机分为对照组(20只)和实验组(20只),实验组通过部分胃底结扎联合幽门限制法建立GER的幼兔模型,对照组分离胃底和幽门后即关腹.4周后随机取实验组和对照组幼兔各10只,每只取食管下端和胃底肌条各2条,取其中1条进行ICC的损毁,离体肌条组织电生理检测模型食管下段和胃底肌条的频率和振幅变化.结果 1.处理后4周通过pH梯度测定、形态学观察、HE染色鉴定GER模型建立成功,ICC的特异性受体c-kit蛋白的免疫组织化学染色显示实验组肌条ICC表达数量显著减少,形态发生变化.2.检测实验组与对照组食管下段和胃底肌条的振幅与频率,对照组食管下段的频率和振幅分别为(2.60 ±0.70)次/min和(3.03 ±0.59)g,实验组食管下段肌条的频率和振幅分别为(0.29±0.49)次/min和(0.61 ±0.43)g,2组比较差异均有统计学意义(t=9.86、8.15,P均＜0.05).对照组胃底肌条的频率和振幅分别为(3.50±0.97)次/min和(5.33±1.09)g,实验组胃底肌条的频率和振幅分别为(0.43±0.54)次/min和(1.13±0.41)g,2组比较差异均有统计学意义(t=8.29、12.55,P均＜0.05).3.红霉素加入后食管下段和胃底肌条的频率和振幅变化:实验组食管下段肌条振幅为(1.16±0.83)g,与加入药物前比较差异有统计学意义(t=2.35,P＜0.05),频率与加入药物前比较差异无统计学意义;胃底肌条的振幅增加至(4.20±1.14)g,与加入药物前比较差异有统计学意义(t=4.76,P＜0.05),频率与加入药物前比较差异无统计学意义.对照组食管下段肌条的频率和振幅为(4.50±0.84)次/min和(5.13 ±0.94)g,与加入药物前相比差异均有统计学意义(=3.79、5.78,P均＜0.05);胃底肌条的频率和振幅为(5.40±1.43)次/min和(7.50±1.28)g,与加入药物前相比差异均有统计学意义(t=3.06、6.45,P均＜0.05).4.损毁ICC后几乎完全阻断了红霉素对肌条的作用,无论是食管下段肌条还是胃底肌条,加入红霉素前后比较收缩活动的频率和幅度均无明显差异.结论 ICC在GER幼兔模型的发生、发展中有重要作用;红霉素促进了GER模型幼兔中肌条组织的运动;在疾病模型中,红霉素通过模型肌条上的ICC调控对胃肠道的促动力作用.
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环孢素联合胆酸减轻鹅膏毒肽攻击人肝细胞损伤的作用及机制
目的 探讨环孢素(CsA)与胆酸减轻受α-鹅膏毒肽(α-AMA)攻击人肝细胞损伤的作用及机制.方法 根据本课题前期研究确定的人肝细胞生存的小α-AMA攻击质量浓度(1.4 g/L)将实验分为5组:空白对照组、损伤组、甘氨鹅脱氧胆酸组、CsA组、CsA联合胆酸组(CsA+牛磺胆酸、CsA+鹅脱氧胆酸、CsA+甘氨胆酸、CsA+甘氨鹅脱氧胆酸和CsA+牛磺鹅脱氧胆酸),每个组均设立3个时间点:攻击24 h、48 h和72 h,在攻击24h后采用CsA、甘氨鹅脱氧胆酸和CsA联合胆酸保护损伤肝细胞,在倒置相差显微镜下观察细胞的形态学改变,使用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法进行活细胞计数,生化法检测培养上清液中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平.结果 与空白对照组比较,损伤组肝细胞生长明显受到抑制,细胞进行性凋亡,MTT法吸光度值明显下降(0.345±0.021);AST、ALT活性逐渐升高,高值在损伤72 h[分别为(98.4±6.7)U/L和(116.2±9.5) U/L].与损伤组比较,甘氨鹅脱氧胆酸组、CsA组和CsA联合胆酸组破碎细胞器明显减少,吸光度值增高,且CsA+鹅脱氧胆酸组在各时间点吸光度值高(0.656 ±0.014) (P ＜0.05);同时AST、ALT升高不明显,CsA+鹅脱氧胆酸组在各时间点数值低[(22.3±6.2) U/L和(20.2±5.4) U/L,P＜0.05].结论 CsA与胆酸一样对α-AMA攻击人肝细胞有保护作用,作用机制是CsA作为有机阴离子转运多肽(OATP1 B1和OATP1 B3)的抑制剂抑制α-AMA的吸收.CsA+鹅脱氧胆酸的联合应用优于单一使用OATP的底物或抑制剂.
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乳清蛋白制剂对儿童重度肝损害的营养治疗
目的 探讨口服补充乳清蛋白制剂对儿童重度肝损害的安全性和营养治疗作用.方法 病理确诊为重度肝损害患儿50例,男26例,女24例;年龄4～14岁,采取前瞻性随机对照研究,分为试验组和对照组,各25例.完善伦理和知情同意后,对照组服用自然食物,试验组予自然食物+乳清蛋白粉,2组热量换算保持相同.分别于治疗前1d和治疗后4周内,观察2组耐受性、营养治疗、肝细胞损伤指标和体质量变化情况.组间比较采用SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 研究期间,试验组有2例(8.6％),对照组有1例(4.8％)患儿发生轻微的恶心、腹胀症状.与对照组比较,第2周开始试验组清蛋白[(35.6±4.1) g/L比(30.2±3.6) g/L,P＜0.05]和前清蛋白[(169.7±40.9) g/L比(103.3±54.8) g/L,P＜0.05]显著高于对照组,4周后作用仍然持续.总蛋白自第3周开始显示出类似差异[(67.8±6.5) g/L比(59.1±6.6)g/L,P＜0.05].2组体质量变化差异有统计学意义[(0.20±0.04) kg比(-0.80 ±0.05)kg,P＜0.05].丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)均较干预前下降,尽管组间比较差异有统计学意义,但试验组ALT[(72.2±30.8) U/L比(88.8 ±33.5) U/L,P＜0.05]和AST[(60.6 ±20.4) U/L比(70.8 ±27.3) U/L,P＜0.05]特定时间下降更为明显.2组血红蛋白始终未显示出统计学差异.结论 分离乳清蛋白粉是一种安全有效的蛋白补充制剂,可作为蛋白补充剂在临床营养治疗中推荐使用.
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脂氧素A4干预幼年期大鼠代谢综合征的意义
目的 探讨脂氧素A4(LXA4)在幼年期代谢综合征(MS)大鼠早期动脉粥样硬化形成过程中所起的保护性作用.方法 3周龄雄性SD大鼠高糖高脂饲料饲养6周制备幼年期大鼠MS模型.将造模成功的大鼠按随机数字表法随机均分为4组:模型组、LXA4小剂量组、LXA4中剂量组和LXA4大剂量组,加之普通饲料喂养的对照组,共5组.LXA4各剂量组每天分别腹腔注射不同剂量的LXA4,对照组和模型组分别予9g/L盐水替代,连续用药2周后取内脏脂肪组织、血清及胸主动脉.半定量(RT)-PCR检测各组内脏脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-oα)、白细胞介素-6(IL-6)及C反应蛋白(CRP)的mRNA水平;ELISA法检测各指标在血清中的分泌水平;免疫组织化学标记血管内皮细胞,比较各组内膜/中内膜比.结果 幼年期MS大鼠体质量、空腹血糖、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和胰岛素水平均较对照组明显增高(P均＜0.05),符合MS大鼠造模标准.RT-PCR:与对照组比较,模型组脂肪组织内IL-6、TNF-α和CRP的mRNA表达均明显增多(P均＜0.05).与模型组比较,小剂量组IL-6和CRP的mRNA表达水平差异均无统计学意义(P均＞0.05),小剂量组的TNF-α及中、大剂量组的IL-6、TNF-α和CRP的mRNA表达水平均明显下降(P均＜0.05).ELISA:与对照组比较,模型组IL-6和TNF-α的血清分泌水平均明显增高(P均＜0.05);在小、中、大剂量组,炎症因子的血清分泌水平均较模型组明显减少,差异均有统计学意义(P均＜0.05).病理学:HE染色结果示模型组大鼠主动脉内膜明显增厚,管腔面内皮细胞层被破坏、毛糙不完整;各干预组大鼠血管腔面亦可见内皮细胞层破坏残缺,但较对照组呈不同程度减轻.胸主动脉血管内膜/中内膜厚度比:给药2周后,模型组内膜/中内膜比值明显大于对照组(P＜0.05);大剂量组内膜/中内膜比值明显小于模型组(P＜0.05),但仍大于对照组,而中、小剂量组与模型组相比膜厚比值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 炎症因子水平增高参与了幼年期MS大鼠动脉粥样硬化的早期形成过程.LXA4可能通过降低脂肪组织和血清中的炎症因子水平而缓解动脉血管壁的损伤.
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13C-美沙西丁呼气试验对儿童肝脏疾病的诊断价值
目的 探讨13C-美沙西丁呼气试验对儿童肝脏疾病的诊断价值,并进一步分析其对儿童肝脏功能损害程度的预测价值.方法 连续入组40例病因和病情严重程度不同的肝病患儿作为病例组,并将其分为Child-PughA级和B级以下(包括1例C级)两级,分别为28、12例,按随机数字表法选取18例健康体检儿童作为健康对照组.所有受试者口服13C-美沙西丁2 mg/kg进行呼气试验肝功能检测,同时常规检测肝功能指标,如血清转氨酶、胆红素、清蛋白和凝血酶原时间等,采用SPSS 17.0软件进行统计分析.结果 1.病例组13C-美沙西丁呼气试验指标30 min前代谢速率峰值(MVmax30)(46.64±27.93)和120 min累积丰度(CUM120) (59.29±30.73)显著低于健康对照组(73.56±26.03和102.97±41.80,t=2.450、3.165,P均＜0.05);2.MVmax30和CUM120与清蛋白、总胆红素、直接胆红素、凝血酶原时间有明显相关性(P＜0.05);3.MVmax30和CUM120可以很好地预测儿童肝病,CUM120的预测作用更明显,当CUM120=85.80时,约登指数达大值0.578,此时敏感度为77.8％,特异度为80.0％;4.B级及以下肝病患儿CUM120显著低于A级肝病患儿(P ＜0.001);5.CUM120可以很好地预测肝病患儿肝功能的严重程度,当CUM120 =56.15时,约登指数达大值0.857,此时敏感度为85.7％,特异度为100.0％.结论 13C-美沙西丁呼气试验指标CUM120对儿童肝病具有一定的诊断价值,并可以很好地评估肝功能的损害程度.
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人miR-148a过表达对人脂肪间充质干细胞成脂分化过程中细胞因子表达和分泌的影响
目的 探讨人miR-148a过表达对人脂肪间充质干细胞成脂分化过程中炎症及胰岛素敏感性相关蛋白IL-6、瘦素、抵抗素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌及表达的影响.方法 采用人miR-148a过表达慢病毒及对照慢病毒分别感染人脂肪间充质干细胞,并进行诱导分化.收集第0天、第4天、第10天、第15天细胞培养基上清并提取各时间点的细胞RNA,采用酶联免疫吸附法检测各个时间点IL-6、瘦素、抵抗素、TNF-oα的分泌水平,采用实时定量PCR法检测IL-6 mRNA、瘦素mRNA水平.结果 人miR-148a过表达慢病毒感染人脂肪间充质干细胞并诱导其分化为成熟脂肪细胞,miR-148a过表达组脂肪细胞中IL-6[第10天:(50.92±14.93)ng/L比(136.86±35.53) ng/L,t=3.86,P=0.018;第15天:(123.64±18.76) ng/L比(178.59±7.54) ng/L,=1.56,P=0.029]、瘦素[第4天:(12.28±0.56) ng/L比(14.38±0.84) ng/L,=3.06,P=0.038;第15天:(34.45±4.30) ng/L比(115.85±28.81) ng/L,t=4,79,P=0.009]的表达量较对照组降低,抵抗素的分泌量较对照组升高,但量很低(＜ 0.20μg/L),在人脂肪细胞分化过程中未检测到TNF-α分泌.与对照组比较,人miR-148a过表达组脂肪细胞中IL-6 mRNA(第4天:0.041±0.018比0.089±0.002,=4.68,P=0.009;第15天:0.138±0.015比0.284±0.069,t =3.55,P=0.024)和瘦素mRNA(第10天:0.163±0.039比0.497±0.042,t=10.13,P=0.001;第15天:0.259±0.033比1.146±0.346,t =4.41,P=0.012)的表达水平降低.结论 人miR-148a参与调节人脂肪间充质干细胞分化过程中炎症及胰岛素敏感性相关蛋白IL-6、瘦素、抵抗素、TNF-α的分泌和表达,提示人miR-148a可能参与肥胖相关炎症及胰岛素敏感性的调节.
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极低出生体质量儿的早期积极营养支持
目的 观察早期积极的静脉营养联合早期微量喂养对极低出生体质量儿(VLBWI)的影响,并评价肠道屏障蛋白和感染相关MicroRNA的临床检测价值.方法 选择2006年1月至2014年6月入住南通大学附属南通妇幼保健院新生儿重症监护病房的VLBWI 62例.其中A组30例采用传统的静脉营养策略;B组32例采用早期积极的静脉营养联合早期微量喂养策略.比较恢复出生体质量时间、恢复出生体质量后每天增长克数、静脉营养时间、住院时间;记录并发症情况;住院期间监测肝肾功能、电解质、血脂分析、血气分析等.酶联免疫吸附法检测血浆中肠道屏障蛋白肠脂肪酸结合蛋白(Ⅰ-FABP).实时定量PCR (RT-PCR)检测感染相关MicroRNA155.结果 2组患儿出生后体质量下降幅度[A组(13.70±3.10)％、B组(5.46±2.64)％]、恢复出生体质量时间[A组(12.20±3.38)d、B组(6.82±3.20)d]、静脉营养时间[A组(29.62±4.16)d、B组(20.80±3.20)d]、平均住院天数[A组(44.60±6.32)d、B组(28.91±4.36)d]比较,B组均优于A组(P均＜0.05).住院期间高胆红素血症发生率(B组31.2％、A组56.7％)、宫外生长迟缓发生率(B组34.3％、A组73.3％)、胆汁淤积发生率(B组6.2％、A组23.3％)、喂养不耐受发生率(B组15.6％、A组53.3％)、坏死性小肠结肠炎发生率(B组0、A组16.7％),B组较A组显著减少,差异均有统计学意义(P均＜0.05).A组肠道屏障蛋白Ⅰ-FABP的血浆水平[(9.083±1.059) μg/L]高于B组[(7.563±0.739) μg/L],但差异无统计学意义(t=1.190,P=0.076 4).A组中坏死性小肠结肠炎患者Ⅰ-FABP的血浆水平[(19.500±3.510) μg/L]高于B组[(7.563±0.739)μg/L],差异有统计学意义(t=5.231,P=0.035 0).A组的MicroRNA155基因表达量2-AACt为0.81±0.12,显著高于B组(0.24±0.08) (P ＜0.05).结论 对VLBWI给予早期积极的静脉营养联合早期微量喂养是安全有效的,能更好地促进生长发育,减少并发症的发生,缩短住院时间.测定肠道屏障蛋白Ⅰ-FABP和感染相关MicroRNA155对VLBWI喂养相关并发症的评估有一定的临床价值.
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肠缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜需肌醇酶1α、肿瘤坏死因子受体相关因子2的表达与意义
目的 通过建立大鼠小肠缺血再灌注损伤(IIRI)模型,探讨肠组织需肌醇酶1d(IRE1α)与肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)的表达及意义.方法 雄性SD大鼠50只,按随机数字表法分为假手术组(sham组,例数=10)和肠缺血再灌注组(I/R组,例数=40).sham组仅开腹、关腹;I/R组给予阻断肠系膜上动脉血流30 min,恢复再灌注2h、6h、12h、24 h分为4个亚组,依据每个亚组存活数量取8只统计.光镜下观察HE染色小肠组织病理学改变,细胞凋亡原位检测法(TUNEL法)检测小肠黏膜上皮细胞凋亡指数(AI),酶联免疫吸附法(ELISA法)检测小肠组织TNF-α及血浆小肠脂肪酸结合蛋白(Ⅰ-FABP)的水平,Western blot法检测小肠组织内质网应激(ERS)蛋白IRE1α、磷酸化IRE1α (p-IRE1α)、TRAF2的表达.结果 1.光镜示I/R组各亚组较sham组小肠损伤明显,6h组损伤重.2.I/R组肠组织TNF-α[sham组:(16.41 ±4.44) ng/L,2h组:(79.71±8.20) ng/L,6h组:(131.70±11.59) ng/L,12 h组:(94.23±7.66) ng/L,24 h组:(69.78±9.58)ng/L]、小肠黏膜上皮细胞AI[sham组:(3.93±0.77)％,2h组:(16.24±1.97)％,6h组:(42.19±2.40)％,12 h组:(37.79±2.34)％,24h组:(10.38±1.46)％]及I-FABP水平[sham组:(0.65±0.10)×103ng/L,2h组:(1.47 ±0.10) ×103 ng/L,6h组:(2.36 ±0.17)×103 ng/L,12h组:(37.79±2.34)×103 ng/L,24h组:(1.41±0.09) ×103 ng/L]较sham组显著升高(F=231.462、149.032、162.491,P均＜0.01).3.I/R组各亚组中p-IRE1 α/IRE1α、TRAF2的表达较sham组均明显升高(F=40.473、59.59,P均＜0.01),再灌注2h表达升高,6～12h维持较高表达,24 h表达明显下调,且p-IRE1 α/IRE1α值的改变与TRAF2在各组中的表达变化趋势一致.结论 IIRI诱发ERS,激活IRE1α,上调TRAF2的表达;IRE1/TRAF2介导ERS可能参与了IIRI的炎性反应与细胞凋亡过程,增加肠道通透性.
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miR-1908过表达的人脂源性多能干细胞基因表达谱分析
目的 研究miR-1908对脂源性多能干细胞基因表达谱的影响,并探讨其在肥胖发生过程中的可能作用.方法 构建miR-1908过表达的脂源性多能干细胞,利用基因表达谱芯片技术筛选得到与阴性对照组差异表达的基因.挑选3个差异表达基因,利用Real-time PCR技术验证miRNA芯片检测结果.结果 基因表达谱芯片结果显示,差异表达的123个基因中,2倍以上上调的基因有69个,下调的有54个,差异均有统计学意义(P均＜0.05).将这些基因按照功能分类,分为15组:高分子配合物亚基基因(18/123,14.63％),RNA结合相关基因(16/123,13.01％),凋亡相关基因(14/123,11.38％),细胞程序性死亡相关基因(14/123,11.38％),磷酸酶活性相关基因(9/123,7.32％),蛋白结构域结合相关基因(10/123,8.13％),蛋白磷酸酶活性相关基因(8/123,6.50％),分子成分分解相关基因(5/123,4.07％),肾脏发育相关基因(6/123,4.88％),RNA聚合酶Ⅱ转录启动子基因(9/123,7.32％),泌尿生殖系统发育相关基因(6/123,4.88％),依赖DNA的转录基因(9/123,7.32％),RNA合成相关基因(9/123,7.32％),Ⅰ型干扰素合成过程相关基因(2/123,1.63％)及Ⅰ型干扰素合成产物相关基因(2/123,1.63％).结论 miR-1908可能在肥胖发生的过程中发挥调控作用.在下调表达的基因中验证了miR-1908可能直接作用的靶基因,为研究miR-1908在肥胖发生中的作用奠定了基础,同时也为miRNA的生物学功能及其作用机制的研究提供了参考.
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发热,反应差,抽搐,肝大
目的 探讨瑞氏综合征的鉴别诊断及原发性肉碱缺乏症特点,并为类似病例提供诊断思路.方法 对武汉市儿童医院收治的1例临床表现为发热、反应差、抽搐、肝脏增大的患儿,总结其临床表现,全面进行体格检查,记录其辅助检查结果,并请小儿重症医学科、神经内科、遗传代谢科、消化内科专科医师查房讨论,根据讨论意见调整治疗方案,追踪治疗效果及终诊断.结果 该病例入院时初步诊断为中枢神经系统感染或中毒性脑病可能,瑞氏综合征待排.经脑脊液及脑头颅MRI检查,未见异常,肝功能提示丙氨酸氨基转移酶升高,血糖降低,肝脏彩超提示肝脏增大,血氨基酸检查提示肉碱水平降低,终证实为原发性肉碱缺乏症,予左卡尼汀治疗效果良好.结论 瑞氏综合征需与中枢神经系统感染及脂质代谢性疾病相鉴别,尤其是原发性肉碱缺乏症.原发性肉碱缺乏症临床表现与瑞氏综合征相似,主要表现为意识障碍及肝脏增大,但婴幼儿起病,有家族史或既往类似病史,感染或饥饿后发病者亦为该病特点.
