郑州大学学报（医学版）杂志
Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) 정주대학학보（의학판）
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内皮素-1对小鼠脑微血管内皮细胞环氧化酶-2、前列腺素 E2表达的影响
目的：探讨内皮素-1（ET-1）对小鼠脑微血管内皮细胞中环氧化酶-2（COX-2）及前列腺素E2（PGE2）表达的影响。方法：培养小鼠脑微血管内皮细胞bEnd．3株，分别加入不同浓度（1、10、100和1000 nmol/L）的ET-1处理2、4、6、16和24 h，用Western blot技术检测不同浓度ET-1处理不同时间后细胞内COX-2表达的变化；另取生长良好的细胞与10 nmol/L的ET-1在37℃下分别培养2、4、6、16和24 h，以不加ET-1培养的细胞为对照，检测各组细胞上清液中PGE2水平的变化。结果：bEnd．3细胞经不同浓度ET-1处理不同时间后，COX-2蛋白表达在2～4 h时显著增加，6 h 时达到高峰，具有浓度及时间依赖性（F浓度＝127．079，F时间＝40．158，F交互＝5．783，P 均＜0．001）。10 nmol/L的ET-1处理不同时间后各组bEnd．3细胞上清液中PGE2释放水平于4 h开始升高，6 h达峰，24 h下降，差异有统计学意义（F＝195．630，P＜0．001）。结论：ET-1可上调bEnd．3细胞中炎症因子COX-2的表达及PGE2的释放，终对bEnd．3细胞株造成损伤。
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聚乙烯亚胺-黄芪多糖共聚物的制备及其基因传递性能观察
目的：制备聚乙烯亚胺（ PEI）-黄芪多糖（ RAP）共聚物，探讨其作为非病毒基因载体的可行性。方法：采用氮丙啶法、高碘酸钾-PEI法以及羰基二咪唑-PEI法制备PEI-RAP。利用红外光谱鉴定3种方法所得产物的结构表征。通过琼脂糖凝胶电泳以及粒径和Zeta电位的测定考察PEI-RAP与质粒DNA的相互作用。 MTT法考察PEI-RAP载体的细胞毒性。 PEI-RAP负载绿色荧光表达载体pEGFP转染MCF-7、Hela和SMMC-7721细胞株观察转染效能。结果：通过氮丙啶法成功地将PEI接枝在RAP上，但是另外2种方法未得到目标产物。琼脂糖凝胶电泳结果表明PEI-RAP可以通过静电作用负载质粒 DNA。当PEI-RAP与pEGFP 质量比为12砄1时，复合物粒径为156．61 nm，电位为＋26．89 mV。 PEI-RAP载体无细胞毒性。体外转染实验表明，PEI-RAP可将pEGFP高效转染至MCF-7、Hela、SMMC-7721细胞。结论：成功制备了PEI-RAP共聚物，该共聚物是一种具有潜在应用前景的新的非病毒基因载体。
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河南农村肥胖成年人酪酪肽基因rs2880416位点多态性分析
目的：探讨河南农村成年居民酪酪肽（ PYY）基因rs2880416位点多态性与肥胖易感性的关系。方法：抽取河南省某农村地区18岁以上的肥胖和非肥胖居民各410名，进行血液生化指标测定、体格检查及PYY基因rs2880416位点多态性检测。结果：共检出PYY基因rs2880416位点2个等位基因（ G和C）及3种基因型（ GG、CC、CG），肥胖和非肥胖组等位基因频率和基因型频率分布差异均有统计学意义（χ2＝53．110和56．842，P＜0．001），肥胖组C等位基因频率高于非肥胖组（P＜0．001）。经调整体育锻炼情况，在隐性模型中，CC型携带者肥胖的患病风险是GG/CG型携带者的2．327倍（OR＝2．327，95％CI＝1．338～4．047）；在显性模型中，CC/CG型携带者肥胖的患病风险是GG型携带者的3．013倍（OR＝3．013，95％CI＝2．257～4．023）；在相加模型中，C等位基因携带者肥胖的患病风险增加1．337倍（OR＝2．337，95％CI＝1．845～2．961）。肥胖组不同基因型携带者BMI、腰围、腰围身高比差异均无统计学意义（F＝1．931、0．235、0．115，P均＞0．05）。结论：PYY基因rs2880416位点C等位基因可能是河南农村成年居民肥胖发生的危险因素。
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血管紧张素Ⅱ对小鼠骨髓间充质干细胞中ERK1／2和 NF-κB信号途径介导的炎症反应的影响
目的：研究血管紧张素Ⅱ（ AngⅡ）对小鼠骨髓间充质干细胞（ bmMSC ）炎症反应的影响。方法：分别采用0、10-8、10-7、10-6和10-5 mol/L Ang Ⅱ体外诱导培养bmMSC 12 h，然后应用ELISA法检测细胞TNF-α和IL-6的分泌水平，RT-PCR法检测细胞TNF-α和IL-6 mRNA的表达水平， Western blot法检测细胞中 ERK1/2和NF-κB-P65蛋白磷酸化程度。结果：5组bmMSC TNF-α和IL-6分泌水平、mRNA表达水平，ERK1、ERK2和NF-κB-P65蛋白磷酸化程度差异均有统计学意义（F＝34．562、53．940、24．622、30．208、96．129、106．293和24．752，P＜0．001）。与0 mol/L Ang Ⅱ组比较，10-8、10-7、10-6和10-5 mol/L Ang Ⅱ组细胞TNF-α和IL-6分泌水平升高（P＜0．05）， TNF-α和IL-6 mRNA表达水平升高（P＜0．05），ERK1/2和NF-κB-P65磷酸化程度升高（P＜0．05），并且表现出一定的剂量依赖性（P＜0．05）。结论：AngⅡ可通过活化ERK1/2和NF-κB信号途径介导bmMSC的炎症反应。
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睾酮对血管紧张素Ⅱ诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响
目的：观察睾酮对血管紧张素Ⅱ（ AngⅡ）诱导的乳鼠心肌成纤维细胞（ CF）增殖和胶原合成的影响。方法：分离、培养CF，分别用无血清DMEM培养液（对照组）、含10-6 mol/L AngⅡ的无血清DMEM培养液（ AngⅡ组）、含30 nmol/L睾酮的无血清DMEM培养液（睾酮组）、含30 nmol/L睾酮和10-6 mol/L AngⅡ的无血清DMEM培养液（睾酮＋AngⅡ组）培养24 h，应用流式细胞技术检测细胞周期分布，VG染色法检测胶原含量，免疫细胞化学染色法检测磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）的表达。结果：AngⅡ组S期细胞比例、胶原含量和p-ERK1/2表达水平较对照组和睾酮组明显增加，睾酮＋AngⅡ组S期细胞比例、胶原含量和p-ERK1/2表达水平较AngⅡ组明显降低（ S期细胞比例：FAngⅡ＝30．403，F睾酮＝5．812，F交互＝18．073，P＜0．05；胶原含量：FAngⅡ＝10．365，F睾酮＝4．533，F 交互＝42．049，P＜0．05；p-ERK1/2表达水平：FAngⅡ＝174．762，F睾酮＝184．828，F交互＝152．240，P＜00．5）。结论：睾酮可能通过抑制ERK1/2的活化，抑制AngⅡ诱导的CF的增殖和胶原合成。
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慢性阻塞性肺疾病模型大鼠骨骼肌组织中 Caspase-12和 m-Calpain的表达
目的：探讨慢性阻塞性肺疾病（ COPD）模型大鼠骨骼肌组织中Caspase-12和m-Calpain的表达情况。方法：将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD模型组和对照组各20只，模型组采用反复熏香烟加气道内滴猪胰弹性蛋白酶法建立COPD模型。采用TUNEL法测定2组大鼠骨骼肌（膈肌、趾长伸肌）细胞凋亡率，采用免疫组化法、RT-PCR检测2组大鼠骨骼肌内Caspase-12和m-Calpain蛋白及mRNA的表达。结果：与对照组相比，模型组大鼠膈肌、趾长伸肌的凋亡率增加（t＝23．190和28．184，P＜0．001），Caspase-12和m-Calpain蛋白和mRNA的表达亦增强（P＜0．001）。模型组大鼠膈肌、趾长伸肌中Caspase-12和m-Calpain 蛋白与mRNA的表达有关（r＝0．885和0．787，P＜0．05；r＝0．862和0．774，P＜0．05）。结论：Caspase-12可能参与 COPD 大鼠骨骼肌萎缩，m-Calpain可能通过激活Caspase-12参与该过程。
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白藜芦醇对膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡及组织蛋白酶B表达的影响
目的：探讨白藜芦醇（ RES）对膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡及组织蛋白酶B（ CB）表达的影响。方法：取对数生长期的T24细胞，RES（25μmol/L ）处理后分别培养24、48、72 h，以不作处理的细胞作空白对照。应用流式细胞术检测T24细胞的凋亡情况，RT-PCR法检测CB mRNA的表达情况，Western blot方法检测CB 蛋白的表达情况。结果：RES 作用后，实验组T24细胞凋亡增加， CB mRNA 和蛋白的表达增强，均呈时间依赖性（ F组间＝20．742、27．767、38．750，F时间＝164．963、22．399、27．912，F交互＝63．745、76．532、91．722，P均＜0．001）。结论：CB可能参与了RES诱导膀胱移行细胞癌T24细胞的凋亡。
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乳癌组织中 Pax1的表达及其对乳癌 MDA-MB-231细胞生物学行为的影响
目的：研究Pax1在乳癌组织中的表达及其对乳癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法：采用Western blot检测200乳腺原发癌和癌旁组织中Pax1蛋白的表达。采用化学合成针对Pax1基因的两个小干扰RNA （ siRNA-Pax1-1和siRNA-Pax1-2）下调该基因的表达，应用MTT和Transwell实验检测其对MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。结果：Pax1在乳腺原发癌组织中的表达低于相应的癌旁组织，沉默Pax1表达可促进乳癌细胞增殖、迁移和侵袭（ F＝52．413和72．741，P＜0．001）。结论：Pax1有望成为乳癌早期诊断和预测预后的生物分子标志物。
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煤焦沥青烟提取物对 BEAS-2 B细胞环氧化酶-2 mRNA 表达的影响
目的：探讨煤焦沥青烟提取物（ CTPE）对人支气管上皮细胞环氧化酶-2（ COX-2） mRNA表达的影响。方法：应用RT-PCR方法测定不同质量浓度（2、4、8 mg/L）CTPE作用不同时间（2、4、8 h）对人支气管上皮BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达水平影响。使用放线菌素（Act）D（1 mg/L）作用于BEAS-2B细胞，观察其对2 mg/L CTPE作用30 min后的BEAS-2B细胞COX-2基因转录的影响。利用ZnSO4溶液刺激BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达，去除ZnSO4后，加入1 mg/L的Act D 30 min，检测CTPE 作用不同时间点（0、2、4 h）的COX-2 mRNA表达的变化。结果：2、4、8 mg/L CTPE刺激均可以使BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达水平升高（ F组间＝71．750，F时间＝93．120， F交互＝17．300，P＜0．001），2 mg/L是佳剂量。用Act D（1 mg/L）预处理细胞30 min，可降低CTPE对COX-2 mR-NA表达的诱导作用（FAct D ＝174．203，FCTPE ＝260．312，F交互＝188．521，P＜0．001）。使用ZnSO4刺激，然后使用Act D终止COX-2 mRNA合成后，不同时间点， CTPE 组和对照组COX-2 mRNA的表达差异有统计学意义（ F组间＝365．700，F时间＝37．780， F交互＝6．240，P＜0．001）。结论：CTPE可以通过转录水平和转录后水平诱导人支气管上皮细胞COX-2 mRNA的表达。
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T7噬菌体尾蛋白 P11的表达、纯化及鉴定
目的：表达、纯化T7噬菌体尾蛋白P11并进行鉴定。方法：PCR扩增T7噬菌体尾蛋白P11基因片段， EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后连接表达载体pTIG-TRX，重组表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导表达，纯化目的蛋白，SDS-PAGE分析P11蛋白的相对分子质量大小，并多次免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体，Western blot鉴定蛋白活性。结果：PCR扩增P11基因后，成功诱导表达了含6×His标签的P11蛋白，SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量约为25000，通过多次免疫获得了抗P11的多克隆抗体并对其纯化；制备的多克隆抗体能够识别T7噬菌体和P11蛋白，具有较高特异性。结论：成功表达了P11蛋白并制备了其多克隆抗体，为T7噬菌体展示系统的应用奠定了基础。
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脑胶质瘤组织中 Beclin-1的表达及与预后的关系
目的：探讨人脑胶质瘤组织中自噬相关基因Beclin-1的表达及与预后的关系。方法：采用免疫组化SP法及RT-PCR技术检测43例脑胶质瘤组织（包括Ⅰ级5例，Ⅱ级17例，Ⅲ级12例，Ⅳ级9例）及11例非瘤脑组织中Beclin-1蛋白和mRNA的表达，同时对随访资料进行Kaplan-Meier生存分析。结果：非瘤脑组织，Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级脑胶质瘤组织中Beclin-1蛋白和mRNA的表达水平差异均有统计学意义（ F＝99．962和41．951，P均＜0．001）。Ⅲ级、Ⅳ级脑胶质瘤组织中Beclin-1蛋白和mRNA的表达水平低于Ⅰ级、Ⅱ级脑胶质瘤组织和非瘤脑组织（P＜0．05），Ⅰ级、Ⅱ级脑胶质瘤组织中Beclin-1蛋白的表达水平低于非瘤脑组织（P＜0．05）。43例患者随访到35例，以脑胶质瘤组织中Beclin-1蛋白表达水平的中位数为界限，将35例患者分成Beclin-1蛋白低表达组（16例）及高表达组（19例），两组的Kaplan-Meier生存曲线差异有统计学意义（χ2＝4．962，P＝0．026），Beclin-1蛋白高表达组预后优于低表达组。结论：Beclin-1可作为判断人脑胶质瘤预后的新指标用于临床。
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结肠癌组织中 SLP-2蛋白的表达及 SLP-2基因对 HCT-116细胞侵袭、迁移力的影响
目的：探讨结肠癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及SLP-2基因对结肠癌细胞HCT-116侵袭、迁移力的影响。方法：采用免疫组化法检测50对结肠癌及正常结肠黏膜组织中SLP-2蛋白的表达，分析患者临床病理特征与SLP-2蛋白表达的关系。设计合成SLP-2 siRNA，转染结肠癌HCT-116细胞，Transwell法及Matrigel基质实验检测转染SLP-2 siRNA对HCT-116细胞侵袭、迁移力的影响，RT-PCR及Western blot 检测转染48 h后HCT-116细胞中SLP-2 mRNA及蛋白的表达情况。结果：正常结肠及结肠癌组织中SLP-2蛋白的高表达率比较，差异有统计学意义（χ2配对＝23．188，P＜0．001）。 SLP-2蛋白表达与结肠癌TNM分期（χ2＝10．474，P＝0．001）及淋巴结转移（χ2＝19．647，P＜0．001）有关。 SLP-2 siRNA转染组细胞迁移力、侵袭力、SLP-2 mRNA及蛋白表达水平均低于阴性对照组和空白对照组（P均＜0．05）。结论：结肠癌组织中SLP-2高表达；SLP-2可能通过促进结肠癌细胞的侵袭、迁移能力，参与结肠癌的转移。
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索拉菲尼对肝星状细胞活性及活化的影响
目的：研究索拉菲尼对肝星状细胞（ HSC ）活性及活化的影响及作用机制。方法：分别将1、2、5、10μmol/L索拉菲尼培养液作用于LX2细胞，通过MTT检测观察不同浓度索拉菲尼对LX2细胞增殖的影响，应用免疫细胞化学染色法检测LX2细胞α-SMA的表达，ELISA法检测LX2细胞上清中PDGF-BB和TGF-β1水平变化， Western blot法检测各组LX2细胞PDGF信号通路各蛋白表达情况。结果：各组、各时间点LX2细胞增殖抑制率比较，差异均有统计学意义（F组间＝1045．010，F时间＝279．740，F交互＝20．130，P均＜0．001）。各组α-SMA的表达情况比较，差异有统计学意义（H＝35．630，P＜0．001）。各组、各时间点PDGF-BB和TGF-β1水平比较，差异均有统计学意义（ P均＜0．05）。实验组与对照组中ERK1、ERK2、AKT的表达基本相同，但在10μmol/L索拉菲尼干预后，各磷酸化蛋白表达降低。结论：索拉菲尼可抑制HSC的增殖及活化。
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氟病区成人血清钙、镁含量与卵泡刺激素受体基因多态性的关系
目的：探讨不同氟暴露水平地区汉族人群卵泡刺激素受体（ FSHR）基因rs1394205多态性与血清钙、镁含量的关系。方法：采用整群抽样方法分别在氟病区（305例）、改水区（250例）和对照区（465例）选择居住5 a以上18～55岁者为观察人群，采用Real-Time PCR方法检测FSHR基因rs1394205多态性；采用氟离子选择电极法检测人群尿氟含量，采用原子吸收分光光度法检测血清钙、镁含量。结果：不同氟暴露组男性人群之间血清钙、镁含量差异有统计学意义（F＝8．713、6．553， P均＜0．05），不同氟暴露组女性人群之间血清钙、镁含量差异有统计学意义（F＝6．760、6．879， P均＝0．001）。男性人群中，携带AG基因型者改水组血清钙含量低于对照组和病区组，携带GG基因型者改水组血清镁含量低于对照组和病区组（P均＜0．05）。女性人群中，携带AA、AG基因型者改水组血清镁含量低于对照组和病区组（ P均＜0．05）。结论：氟暴露和FSHR基因rs1394205多态性的相互作用可能影响人群血清钙、镁含量。
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宫颈癌患者外周血中髓源抑制细胞比例变化及CD73的表达
目的：探讨宫颈癌患者外周血中粒细胞样髓源抑制细胞（ G-MDSCs ）和单核细胞样髓源抑制细胞（ M-MDSCs）的比例及其CD73的表达在宫颈癌发病中的作用。方法：收集37例宫颈癌患者和21例健康人外周血，以CD11b＋CD14-为G-MDSCs标志物，CD11b＋CD14＋为M-MDSCs标志物，采用流式细胞术检测两群MDSCs的比例及其CD73表达。结果：宫颈癌组外周血G-MDSCs、M-MDSCs的表达水平[（52．5±2．9）％、（27．7±15．2）％]均高于健康组[（20．1±9．2）％、（22．0±6．3）％]（ t＝7．584、2．021，P＜0．05）；宫颈癌组外周血M-MDSCs上CD73的表达水平[（21．4±17．1）％]高于健康组[（5．9±5．0）％]（t＝5．128，P＜0．001）；宫颈癌组外周血G-MDSCs比例及其CD73的表达与病理类型、临床分期、分化程度、淋巴结转移均无关（P均＞0．05），M-MDSCs比例与临床分期有关（F＝9．566，P＝0．001），其CD73的表达与临床分期和淋巴结转移有关（t/F＝7．664、2．419，P＜0．05）。结论：宫颈癌患者外周血MDSCs的比例与肿瘤发生相关，其中M-MDSCs的水平可能与病情进展有关。
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盐酸夫拉平度对人骨肉瘤细胞 MG63细胞周期及凋亡的影响
目的：观察不同浓度盐酸夫拉平度（ FP）对人骨肉瘤MG63细胞增殖活力、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法：用含体积分数10％胎牛血清的RPMI 1640培养液常规培养MG63细胞，取对数生长期增殖旺盛细胞分为对照组和不同浓度FP干预组。 MTT比色法测定不同浓度的FP对细胞增殖活性的影响；流式细胞术检测不同浓度的FP干预24和48 h后细胞周期变化和凋亡情况；RT-PCR测定不同浓度FP干预后，细胞周期相关基因表达的变化；Western blot检测细胞内CDK2蛋白表达变化。结果：50～2000 nmol/L FP可抑制MG63细胞增殖活性，且有时间和浓度依赖性（F时间＝319．470，F浓度＝616．988，P均＜0．001）；不同浓度的FP分别干预MG63细胞不同时间后均可引起细胞G2期阻滞（F24 h ＝6．805，F48 h ＝12．000，P均＜0．001），凋亡率增加（P均＜0．001），且可明显降低MG63细胞中CDK2、Survivin mRNA及CDK2蛋白的表达（FmRNA ＝415．517、15．068，F蛋白＝50．405，P均＜0．001）。结论：FP可抑制人骨肉瘤MG63细胞增殖及周期相关蛋白的表达，同时使细胞G2/M期阻滞并诱导细胞凋亡。
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信号转导和转录激活因子-3基因多态性与河南汉族人群肥胖易感性的关系
目的：探讨信号转导和转录激活因子-3（STAT3）基因rs2293152位点多态性与河南汉族人群肥胖易感性的关系。方法：采用整群抽样的方法收集河南省某农村地区汉族肥胖病例379人（病例组）和体重正常对照391人（对照组），应用限制性酶切片段长度多态性分析STAT3基因多态性；采用logistic回归模型分析基因多态性与肥胖的关联强度；采用MDR模型分析基因-环境之间的交互作用。结果：病例组和对照组STAT3基因rs2293152位点（CG＋CC）和GG基因型频率分布差异有统计学意义（χ2＝4．712， P＝0．029）。调整年龄、性别等因素后，rs2293152位点（CG＋CC）基因型携带者肥胖危险性升高（调整OR＝1．391；95％CI：1．009～1．919）。基因-环境交互作用分析显示STAT3基因rs2293152位点和吸烟存在基因-环境交互作用（ P＜0．05）。结论：STAT3基因rs2293152位点多态性与肥胖有关联，且该基因多态性和吸烟对肥胖的发生具有交互作用。
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杜氏盐藻过氧化物酶1酵母双杂交诱饵质粒的构建
目的：构建杜氏盐藻过氧化物酶1（ DsPrdx1）的酵母双杂交诱饵质粒并检测其对酵母细胞有无自激活及毒害作用。方法：PCR扩增DsPrdx1的开放阅读框，将扩增出的基因片段插入酵母表达质粒pGBKT7中构建诱饵质粒。经酶切鉴定正确后，用PEG/LiAc法将构建的诱饵质粒分别转化到酵母菌株Y187和AH109中，检测诱饵蛋白对酵母菌有无自激活和毒性作用。结果与结论：构建的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-Prdx1对Y187和AH109既无自激活又无毒害作用，可用于酵母双杂交系统。
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高效液相色谱法同时测定膀胱镜胶中利多卡因与羟苯乙酯的含量
目的：建立采用高效液相色谱法同时测定膀胱镜胶中利多卡因与羟苯乙酯含量的方法。方法：采用DI-ONEX Acclaim PA2柱（250．0 mm ×4．6 mm，5μm），以磷酸盐缓冲液（10 mmol/L，pH 7．2）-甲醇（体积比350砄650）为流动相，流速为1．0 mL/min，柱温为25℃，利多卡因的检测波长为220 nm，羟苯乙酯为256 nm。结果：利多卡因的线性范围为100．8-1008．0 mg/L，r＝0．9997，加标回收率为99．1％-101．5％， RSD小于2．0％；羟苯乙酯的线性范围为20．0-200．6 mg/L，r＝0．9995，加标回收率为98．8％～100．1％，RSD小于2．0％。结论：该方法简便、准确、重复性好，可用于膀胱镜胶中利多卡因与羟苯乙酯含量的同时测定。
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丙谷二肽对γ射线致小鼠肺组织损伤的防护作用
目的：探讨N（2）-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（丙谷二肽）对γ射线致小鼠肺组织损伤的防护作用及可能的作用机制。方法：将27只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、辐射组和丙谷二肽组，每组9只。丙谷二肽组按照1000 mg/kg的剂量灌胃给药，1次/d，连续7 d。然后辐射组、丙谷二肽组均给予4．0 Gy 60 Coγ射线照射3 d，正常对照组不作处理。照射后测定小鼠肺脏指数、肺组织超氧化物歧化酶（ SOD）活性，MTT法测定肺组织细胞增殖率， AnnexinV和PI双染法测定细胞凋亡率，Western blot法检测肺组织Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果：3组小鼠肺脏指数、肺组织SOD活性、细胞凋亡率、肺组织Bcl-2和Bax蛋白表达水平差异均有统计学意义（ F＝6．352、51．459、462．790、74．434和675．500，P＜0．05）。与正常对照组相比，辐射组小鼠肺组织SOD活性下降，肺脏指数升高，细胞凋亡率增加，肺组织Bcl-2蛋白表达降低，Bax蛋白表达升高（P均＜0．05）。与辐射组比较，丙谷二肽组肺组织SOD活性显著升高，细胞凋亡率降低（P均＜0．05），细胞增殖率升高（t＝5．294，P＜0．05），Bcl-2/Bax比值显著提高（t＝218．920，P＜0．05）。结论：丙谷二肽对60Co γ射线辐射损伤小鼠肺组织具有一定的防护作用，这种保护作用可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。
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牙根纵折牙齿23例牙周状况分析
牙根纵折是指发生在牙根而未波及牙冠的纵向折裂，其裂隙仅发生在牙根，从根管向外贯通到牙周膜，涉及牙体、牙髓和牙周组织，是一种较严重的牙科疾病。牙根纵折在临床上并不罕见，病因比较复杂且临床症状不典型，诊断比较困难，常出现漏诊和误诊。该研究收集临床确诊的牙根纵折患者23例（共23牙），以对侧同名牙作为对照，观察其牙周状况并分析其临床特点，为牙根纵折的诊断及预后判断提供依据。
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输液泵控制冲洗联合负压封闭引流治疗腰椎术后感染一例
脊柱内固定术后切口深部感染难以处理，据统计，术后感染率为0．7％～12．0％［1］。文献［2-3］报道可以通过清创、引流，联合应用抗生素，不用取出内固定装置来治疗术后早发感染，疗效可靠，但对于迟发感染仍建议取出内固定装置。近年来，有文献［4］报道使用负压封闭引流（ vacuum sealing drainage ， VSD）技术辅助治疗内固定术后感染。郑州大学第一附属医院骨科对一例术后35 d出现切口深部感染患者行清创术后联合使用输液泵控制闭式冲洗引流及VSD技术并静脉应用抗生素进行治疗，随访半年，效果满意，现报道如下。
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先天性巨结肠肠壁组织中 L1 CAM 的表达
目的：探讨先天性巨结肠（HD）肠壁组织中L1CAM的表达情况，从而分析L1CAM与HD的关系。方法：利用免疫组化SP法和RT-PCR法检测48例HD患儿狭窄段和扩张段肠壁组织以及46例正常结肠肠壁组织中L1CAM蛋白和mRNA的表达。结果：HD狭窄段肠壁组织中L1CAM蛋白表达量为（13．1470±0．5198），低于HD扩张段及正常结肠肠壁组织的（16．9618±0．9054）、（17．9083±0．7406）（t配对/t＝27．697、25．346，P均＜0．001）。 HD狭窄段肠壁组织中L1CAM mRNA表达量为（4．3164±0．3870），低于HD扩张段及正常结肠肠壁组织的（5．7178±0．4860）、（6．3443±0．2366）（t配对/t＝19．661、14．237，P均＜0．001）。狭窄段肠壁组织中L1CAM蛋白和mRNA的表达呈正相关（r＝0．968，P＜0．001）。结论：L1CAM蛋白和mRNA的异常低表达可能参与了HD的发生过程。
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更年期糖尿病女性 C肽分泌功能对骨密度的影响
目的：探讨更年期糖尿病女性C肽水平对骨密度的影响，为糖尿病骨量异常的治疗提供依据。方法：选择在河南省人民医院就诊或健康体检的更年期女性170例，根据C肽水平将其分为糖尿病C肽分泌减少组（ A组）、糖尿病C肽分泌低下组（B组）和正常对照组（C组），行标准馒头餐试验（血糖测定应用葡萄糖氧化酶法）及C肽释放试验（化学发光法），同时采用双能X线测定正位腰椎及左侧股骨颈骨密度（ BMD）。结果：糖尿病各组BMD除A组左侧股骨颈骨密度值外，其余均低于C组，其中以B组明显（F腰椎＝32．687，F左股骨颈＝19．518，P＜0．001）；组间比较，B组C肽水平低（F空腹＝312．289，F餐后2 h ＝117．284， P＜0．001），而相应时限血糖值高（F空腹＝383．077，F餐后2 h ＝418．116， P＜0．001）。结论：C肽分泌功能越低相应血糖值越高，对骨密度影响越大。
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姜黄素对多囊卵巢综合征大鼠代谢紊乱的影响
目的：探讨姜黄素（Cur）对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠代谢紊乱的影响。方法：30只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组和Cur组，每组10只。模型组和Cur组通过灌胃来曲唑建立PCOS模型。 Cur组大鼠每日灌胃Cur（200 mg/kg）0．5 mL，模型组和正常组大鼠灌胃等体积的生理盐水，连续14 d 。测定大鼠体重、双侧卵巢质量、空腹血糖（FBG），放射免疫法测定血清黄体生成素（LH）、睾酮（T）、空腹胰岛素（FINS），酶联免疫法测定血清脂联素（ APN），计算稳态模型胰岛素抵抗（ HOMA-IR）。结果：3组大鼠体重、双侧卵巢质量、LH、T、FBG、FINS、HO-MA-IR和APN比较差异有统计学意义（ F＝6．530、6．755、20．379、37．488、8．456、12．851、14．854和36．371，P＜0．05）；Cur组大鼠血清APN水平较模型组上升，其他指标较模型组降低（P＜0．05）。结论：Cur能够降低PCOS大鼠雄激素水平及卵巢质量，可能与其可减轻大鼠体重、缓解胰岛素抵抗、调节脂联素水平有关。
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脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化效果观察
目的：探讨脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的效果。方法：30例Child C级失代偿期肝硬化患者经传统内科综合治疗，效果不佳。无菌采脐血，采用负筛选混合法分离、纯化脐血干细胞。对30例行术前检查除外恶性肿瘤、其他重要脏器功能衰竭等禁忌证后，在数字减影血管造影下经肝动脉灌注1×107个脐血干细胞。术后1周、2周、4周、8周、12周、半年、1 a定期随访，观察患者症状、体征及相关实验室指标改善情况和不良反应发生情况。结果：所有病例未发生与干细胞治疗相关的并发症及不良反应。术后1周开始，患者乏力、纳差、腹胀等症状逐渐改善，4周时明显缓解；血清白蛋白水平逐渐升高（F＝306．080，P＜0．001）；21例伴顽固性腹水的患者腹水明显减少；术后1 a，15例肝功能恢复至Child A级，12例恢复至Child B级。结论：脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化安全、有效。
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血浆催乳素水平与绝经后女性乳癌危险性的关系
目的：评价血浆催乳素（ PRL）水平与绝经后女性乳癌危险性的关系。方法：采用化学发光法测定83例绝经后女性乳癌病例和85例对照的血浆PRL水平，应用logistic回归分析绝经后血浆PRL水平与乳癌危险性的关系。根据肿瘤临床病理特征（肿瘤大小、病理类型、肿瘤分级以及ER是否阳性）对病例组进行分组，评估血浆PRL水平与不同乳癌亚组危险性的关系。结果：①病例组血浆PRL水平高于对照组（t＝2．104，P＝0．037）。②以血浆PRL＜P25为非暴露参考，血浆PRL P25～水平调整OR（95％CI）为1．04（1．01～2．83），血浆PRL P50～水平调整OR （95％CI）为1．38（1．26～3．83），血浆PRL≥P75水平调整OR（95％CI）为1．62（1．38～4．14），χ2趋势＝4．986，P＝0．027。③PRL与绝经后乳癌危险性的关系在ER＋的肿瘤中略增强（χ2异质性＝5．127，P＝0．024），在不同肿瘤大小、病理类型、肿瘤分级间无明显变化（P均＞0．05）。结论：血浆PRL水平与绝经后女性乳癌的危险性呈正相关，尤其是ER＋的乳癌。
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河南汉族冠心病患者 CYP2 C19基因多态性分布
目的：研究河南冠心病患者氯吡格雷代谢相关基因CYP2C19基因多态性的分布。方法：采用PCR-RFLP技术检测600名来自河南的冠心病患者CYP2C19的基因型。结果：CYP2C19倡1/倡1占42．6％、CYP2C19倡1/倡2占40．9％、CYP2C19倡1/倡3占6．5％、CYP2C19倡2/倡2占7．2％、CYP2C19倡2/倡3占2．5％、CYP2C19倡3/倡3占0．3％。结论：河南省人群CYP2 C19基因多态性的分布与全国其他地区基本一致。
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郑州市家庭养老老年人的生存质量及影响因素
目的：了解河南省郑州市家庭养老模式老年人的生存质量及影响因素。方法：采用分层简单随机抽样方法对河南省郑州市762名≥60岁的家庭养老的老年人进行调查，调查内容包括一般资料调查、生活满意度调查（采用生活满意度指数A量表）、幸福感调查（采用总体幸福感量表）和健康调查（采用SF-36健康调查简表）。结果：郑州市家庭养老的老年人慢性病患病率为59．2％，总体幸福感平均得分为91．1，生活满意指数平均得分为9．7。影响郑州市家庭养老老年人生存质量的因素有性别、年龄、文化程度、职业、月退休工资和慢性病患病种数。结论：郑州市家庭养老的老年人生存质量不高，应该从家庭和社会多方面努力，提高老年人的身心健康。
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17β-雌二醇对小鼠肺成纤维细胞细胞周期的影响
目的：观察17β-雌二醇（17β-E2）对小鼠肺成纤维细胞细胞周期的影响。方法：根据L9（33）正交实验设计，用不同质量浓度SiO2（20、50、100 mg/L）诱导小鼠肺成纤维细胞，再用不同浓度17β-E2（10-6、10-7、10-8 mol/L）干预不同时间（24、48、72 h），MTT法检测小鼠肺成纤维细胞的增殖状况，以增殖活性较低为筛选标准，选取佳实验条件。将小鼠肺成纤维细胞分成3组：空白对照组、SiO2诱导组和17β-E2干预组，在相应实验条件下培养细胞，运用流式细胞术检测细胞周期。结果：佳实验条件筛选结果为：用20 mg/L SiO2诱导，用10-6 mol/L 17β-E2干预24 h。3组G1期细胞比例、S＋G2期细胞比例差异均有统计学意义（F＝50．300、29．896，P＜0．001）。 SiO2诱导组G1期细胞比例较空白对照组降低，S＋G2期细胞比例升高；而17β-E2干预组G1期细胞比例较SiO2诱导组升高，S＋G2期细胞比例降低（P＜0．05）。结论：17β-E2可能是通过阻滞小鼠肺成纤维细胞由G1期进入S期和G2期，从而抑制其增殖。
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银屑病患者血清 IL-26蛋白和全血 Th17细胞因子 mRNA 表达水平的测定
银屑病是一种慢性、反复发作的自身免疫性皮肤病，其确切的病因不明，与基因、激素、环境和感染因素有关。银屑病病变组织可见大量活化的T细胞、异常增殖的角质形成细胞和浸润性白细胞［1］。研究［2］发现浸润的T细胞和角质形成细胞以及其分泌的细胞因子在疾病的发生中扮演重要的角色。在病变皮肤组织中可见大量Th1细胞分泌的细胞因子如TNF-α、IFN-γ和IL-1β，所以一直认为Th1细胞在银屑病中起主导作用。近年来发现一种新的T细胞亚群Th17细胞，其可合成IL-17和IL-22。 IL-17和IL-22可参与银屑病的发病过程，是银屑病发生中重要的炎症细胞因子。除了可以分泌IL-17和IL-22之外，Th17细胞还可合成IL-26［3］。该研究测定银屑病患者血清IL-26蛋白水平，分析IL-26水平与银屑病严重程度的关系，同时检测不同类型银屑病患者全血中Th17细胞因子（ IL-17 A、IL-22和IL-26） mRNA的表达水平，报道如下。
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内镜黏膜下剥离术治疗胃黏膜下肿瘤
消化道黏膜下肿瘤（ submucosal tumor ，SMT）泛指一类来自黏膜层以下（非黏膜组织）的消化道病变［1］。近年来，随着内镜黏膜下剥离术（ endoscopic submucosal dissection ， ESD ）设备改善、技术创新及经验累积，国内外逐渐开展ESD 治疗消化道早期癌、癌前病变及黏膜下肿瘤。 ESD可以一次切除较大的病变并提供更准确的病理检查结果［2］。但ESD治疗消化道SMT时易并发出血及穿孔，尤其是治疗来源于固有肌层的SMT，限制了ESD治疗消化道SMT的推广。2012年7月至2013年6月，作者应用头端弯曲的针形切开刀对35例胃 SMT 行ESD，取得了较好的治疗效果，现报道如下。
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老年糖尿病前期人群疾病不确定感与应对方式的关系
目的：调查老年糖尿病前期人群疾病不确定感和应对方式状况，并探讨两者之间的关系。方法：选取243例老年糖尿病前期患者，应用疾病不确定感量表和医学应对方式量表对其进行问卷调查。结果：老年糖尿病前期人群中，60～岁组疾病不确定感得分为（102．21±7．86），65～岁组疾病不确定感得分为（96．58±6．84），75～83岁组疾病不确定感得分为（95．79±14．61），3组老年糖尿病前期人群疾病不确定感均为中等水平；面对应对方式得分为（19．66±5．81），回避应对方式得分为（14．69±3．26），屈服应对方式得分为（8．69±3．89）；面对应对方式与疾病不确定感复杂性呈负相关，屈服应对方式与疾病不确定感不明确性、不可预测性和总分呈正相关（ r＝-0．006、0．200、0．206和0．126， P均＜0．05）。结论：医护人员应对老年糖尿病前期人群的疾病不确定感进行评估并给予个体化干预，以期降低疾病不确定感，提高应对方式。
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乳癌患者原发灶、复发灶中 VEGF 与 Cath-D蛋白的表达
目的：检测乳癌患者原发灶、复发灶中VEGF、组织蛋白酶D（ Cath-D）蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测38例乳癌患者（有淋巴结转移者25例）和22例乳癌胸壁复发患者（有淋巴结转移者5例）原发灶、复发灶及有、无淋巴结转移组织中VEGF、Cath-D蛋白的表达。结果：正常乳腺组织，乳癌原发灶、复发灶中VEGF、Cath-D蛋白的表达差异有统计学意义（χ2＝50．029和24．461，P＜0．05），且乳癌原发灶、复发灶中VEGF、Cath-D蛋白的表达均高于正常乳腺组织，但二组织间差异无统计学意义。乳癌患者有淋巴结转移组VEGF、Cath-D蛋白的表达高于无淋巴结转移组（χ2＝9．017和5．963，P＜0．05）。乳癌组织中VEGF和Cath-D蛋白的表达呈正关联（rP ＝0．411， P＜0．001）。结论：乳癌原发灶、复发灶及有淋巴结转移的乳癌组织中VEGF与Cath-D蛋白高表达，二者可能在乳癌复发和淋巴结转移中起协同作用。
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河南省青年人上前牙区游离龈和牙龈乳头的形态
目的：分析总结河南省青年人上前牙区游离龈和牙龈乳头的形态特点。方法：选取河南省青年人115名作为研究对象，采用精细藻酸盐印模材料获取牙列模型，用数显游标卡尺（精度0．01 mm）测量与上前牙区牙龈形态相关的牙龈美学参数：牙龈角度（ GA）、牙龈乳头高度（ PH）、龈缘水平距离（ GZL）、牙龈顶点（ GZP）到牙体长轴的距离。结果：将受试对象根据上前牙区中切牙牙形分为3组，方圆形组41人，椭圆形组41人，尖圆形组33人。3组间中切牙、侧切牙的GA，中切牙与中切牙间（CI-CI）、中切牙与侧切牙间（CI-LI）、侧切牙与尖牙间（LI-CA）的PH比较，差异均有统计学意义（F＝4．160、3．118、43．380、53．085、12．494，P＜0．05）；方圆形组GA大，PH小；尖圆形组GA小，PH大。3组间GZP到牙体长轴的距离差异均无统计学意义（P＞0．05），中切牙、侧切牙的GZP偏向远中，尖牙的GZP在牙体长轴上。结论：上中切牙牙形对河南省青年人上前牙区GA、PH影响较大，对GZP与牙体长轴的距离影响较小。
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高效毛细管电泳法测定盐酸马尼地平片中盐酸马尼地平的含量
目的：建立以高效毛细管电泳法测定盐酸马尼地平片中盐酸马尼地平含量的方法。方法：以熔融石英毛细管柱（45 cm ×75μm，有效长度37 cm）为固定相，运行缓冲液为30 mmol/L醋酸盐缓冲液（pH 4．5），压力进样（3．4 kPa ×5 s），工作电压25 kV，柱温25℃，检测波长228 nm。结果：盐酸马尼地平浓度在0．025～0．250 g/L的范围内线性关系良好（r＝0．9994），高、中、低浓度平均回收率分别为99．08％、98．19％和97．14％，RSD分别为0．31％、0．60％和1．51％。结论：该方法简便、快速、经济、重复性好，可用于盐酸马尼地平片中盐酸马尼地平含量的测定。
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河北省老年人牙缺失与慢性病的关系
目的：了解河北省老年人牙缺失情况，探讨牙缺失与慢性病的关系。方法：采用分层随机抽样的方法进行抽样后对河北省1343名≥60岁老年人牙缺失及患慢性病情况进行调查。结果：河北省老年人的缺牙率为61．9％，不同性别、地区、年龄及是否患糖尿病、冠心病、高血压、脑卒中的老年人缺牙率差异均有统计学意义（χ2＝4．579、5．191、55．961、6．697、14．638、12．743和10．141，P＜0．05）。性别、地区、年龄、糖尿病、冠心病、高血压、脑卒中与牙缺失有关[OR（95％CI）＝1．365（1．070～1．741）、1．296（1．012～1．658）、1．517（1．322～1．741）、1．445（1．033～2．022）、1．707（1．176～2．478）、1．365（1．032～1．712）和1．904（1．120～3．238），P＜0．05]。结论：河北省老年人慢性病可能与牙缺失有关。
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下肢深静脉血栓病程的实时剪切波弹性成像技术评价
实时剪切波弹性成像技术是一种全新的成像模式，近年来受到广泛关注并迅速发展，它可以通过评价组织的弹性变化，获得组织内部硬度分布的定量信息［1］。深静脉血栓是危害人类健康的常见疾病，是导致肺动脉栓塞的主要病因。不同病程的血栓有着不同的病理生理过程和组成成分，所以有着不同的硬度和弹性以及不同的预后，需要选择不同的治疗方案［2］，因而准确判断血栓的病程具有非常重要的临床意义。该研究应用实时剪切波弹性成像技术定量分析下肢深静脉血栓弹性值，探讨该技术在判断血栓病程中的应用价值。
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下颌第一恒磨牙四根管检出率及解剖形态的锥形束 CT检查
目的：利用锥形束CT（CBCT）研究下颌第一恒磨牙四根管在人群中的发生率以及根管系统和髓室底的解剖特点。方法：利用按照纳入标准取得的180例患者的CBCT图像资料，观察下颌第一恒磨牙四根管的发生率（包括个体发生率、牙齿发生率）及左右对称率。然后筛选出具有四根管的下颌第一恒磨牙，根据牙根数目不同分为三根型组和两根型组，每组随机抽取25例样本，利用Kodak Dental 6．12．10软件对图像进行重建，对两组的根管系统进行分型，观察根管口水平的髓室横断面，测量2组根管口水平近颊至近舌、近颊至远颊、远舌至远颊、远舌至近舌根管口的距离。结果：下颌第一恒磨牙四根管的牙齿发生率和个体发生率分别为45．1％（119/264牙）和43．3％（78/180人）。男性组左右相关系数为0．635，女性组为0．574。近中根以2-2-2型根管为主，在三根型组发生率为68．0％（17/25），两根型组为76．0％（19/25）；1-1-1型根管常见于三根型的远颊根、远舌根，发生率均为100．0％（25/25）。两根型下颌第一恒磨牙的远中根比较常见的为2-2-2型和2-2-1型，发生率依次是32．0％（8/25）、28．0％（7/25）。远颊与远舌根管口的间距差异有统计学意义（t＝8．569，P＜0．001）。结论：CBCT成像可以反映下颌第一恒磨牙四根管的解剖形态，为下颌第一恒磨牙的根管治疗提供了准确的影像学参考。
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卵巢癌术后2种治疗方案疗效分析
卵巢恶性肿瘤临床早期诊断率极低，发现即为晚期，常伴腹水及盆腹腔脏器转移，治疗困难、复发率高、预后差、患者生活质量差。其常见的扩散方式是肿瘤直接蔓延到邻近器官或种植到脏层腹膜、壁层腹膜面，且由于毛细血管与腹膜腔间存在血液腹膜屏障，术后静脉化疗腹腔内难以达到有效的药物浓度，全身化疗对腹膜转移癌作用较差，单靠外科及全身化疗不能改善腹膜转移患者的预后［1］。鉴于以上特点，腹腔局部化疗就成为晚期卵巢癌有效的治疗方法之一。近年来国内外学者［2-3］开始重视化疗药物在腹腔化疗中的应用，其中腹腔植入化疗及腹腔热灌注化疗目前应用比较广泛。现就郑州大学第二附属医院4a多来治疗情况总结如下，旨在为临床合理选用腹腔化疗方案提供理论依据。
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埋藏式心脏转复除颤器电风暴事件临床分析
埋藏式心脏转复除颤器（ implantable cardiovert-er defibrillator ， ICD ）的问世及发展改变了心源性猝死患者的命运。随着技术改进及程控参数的多元化，ICD的应用更为普及，已成为心脏科医生防治恶性心律失常的一把利器，但是其特有的电风暴现象被称之为患者和医生的噩梦。作者回顾了近年收治的42例ICD患者的临床资料，对其中4例9次电风暴事件进行分析并报道如下。
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用3种剂量 A型肉毒毒素治疗原发性三叉神经痛的疗效比较
目的：观察3种剂量A型肉毒毒素治疗三叉神经痛的疗效，焦虑、抑郁、睡眠变化及其不良反应。方法：选取原发性三叉神经痛患者87例，随机分为25 U/mL组（28例）、50 U/mL组（31例）和75 U/mL组（28例）3种剂量组，分别于疼痛部位多点皮内注射不同剂量的A型肉毒毒素，对每位患者治疗前及治疗后8周内每周进行视觉模拟（ VAS）评分、焦虑评分、抑郁评分、睡眠干扰评分，并于第8周进行患者总体印象改变评分，观察疗效及其安全性。结果：3组治疗后疼痛治疗有效率差异无统计学意义（χ2＝3．482，P＝0．175）。治疗后3组焦虑、抑郁和睡眠评分均较各自治疗前显著降低，但3组有效率比较差异无统计学意义。治疗后3组患者总体印象改变改善率差异无统计学意义（χ2＝1．345，P＝0．510）。7例出现注射部位短暂性的肌肉松弛，2例出现注射部位肿胀，均自行消失，未进行处理，未见全身性不良反应。结论：不同剂量A型肉毒毒素治疗三叉神经痛均有效。
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超声心动图对川崎病冠状动脉病变的诊断及预后判断的价值
川崎病又称皮肤黏膜淋巴结综合征，所有种族均有发生，亚洲常见，尤其是在日本、中国和韩国［1］。好发于6个月～5岁儿童，是目前儿童后天性心脏病常见的原因。我国川崎病发病率有逐年上升的趋势［2］，冠状动脉并发症也随之增加，早期诊断及治疗可以减少并发症的发生。现回顾性分析郑州大学第三附属医院收治的川崎病患儿长期随访结果，探讨超声心动图对川崎病患儿冠状动脉病变的发病情况及预后判断的应用价值。
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一例黑热病的实验室检测与临床分析
黑热病是由杜氏利什曼原虫无鞭毛体寄生在包括人类在内的哺乳动物的巨噬细胞而引起的人畜共患寄生虫病，经白蛉传播［1］。主要临床特征为长期不规则发热、消瘦、进行性肝脾肿大、全血细胞减少和白／球蛋白倒置等。黑热病曾流行于我国长江以北的省（市）、自治区［2］。1958年以后，主要流行区（华北、华东）已基本消灭此病，但近些年来，陕西、山西、内蒙古等省有少数散发患者，新疆、甘肃、四川等省出现了明显的回升。每年新发生的病例数大致在400例，其中新疆、甘肃和四川三省的新发病例数占全国新发病例数的90％以上［3-4］。由于人口流动频繁，在非流行区亦有零星病例出现，但常以“发热待查”就诊，易造成误诊、漏诊。现将河南省一例黑热病患者的实验室检测与临床分析结果报道如下。
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羧甲基壳聚糖温敏凝胶对 NIH3 T3细胞增殖、骨化分化的影响
目的：探讨羧甲基壳聚糖温敏凝胶对NIH3 T3细胞增殖、骨化分化的影响。方法：采用MTT法和ALP法检测20、100、150、200、500 g/L的羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对体外培养NIH3T3细胞24、48和72 h后细胞增殖、骨化分化的影响。结果：2种测定方法均显示培养24、48和72 h后各实验组细胞的OD值高于对照组（增殖：F组别＝113．961，F时间＝429．535，F交互＝7．304，P均＜0．001；骨化分化：F组别＝57．043，F时间＝3177．618，F交互＝12．827，P均＜0．001），其中150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对细胞的促进增殖和骨化分化效果佳。结论：羧甲基壳聚糖温敏凝胶对NIH3T3细胞的增殖及骨化分化均具有一定的促进作用。
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食管鳞状细胞癌组织中 USP22、C-myc和 Casp ase-3蛋白的表达
目的：探讨特异性泛素肽酶22（USP22）、C-myc和Caspase-3蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化SP 法检测45例食管鳞状细胞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管组织中USP22、C-myc和Caspase-3蛋白的表达，分析三者与食管鳞状细胞癌临床病理学特征的关系。结果：食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生和正常食管组织中USP22、C-myc、Caspase-3蛋白的阳性表达率比较差异具有统计学意义（χ2＝39．614、41．838和33．889，P＜0．001）。食管鳞状细胞癌组织中USP22、C-myc蛋白的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、分化程度及临床分期有关（P＜0．05），Caspase-3蛋白的表达与肿瘤分化程度有关（P＜0．05）；USP22蛋白与C-myc蛋白表达呈正关联（rP＝0．559， P＜0．001），两者与 Caspase-3蛋白表达呈负关联（rP ＝-0．468和-0．477， P＜0．001）。结论：USP22、C-myc高表达和Caspase-3低表达可能与食管癌发生发展相关。
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DZNep对 Eca109细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响
目的：探讨 DZNep处理食管鳞状细胞癌 Eca109细胞后对其增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法：DZNep处理Eca109细胞48 h，以DMSO处理48 h的Eca109细胞作为对照。采用EdU荧光显微镜法检测细胞增殖率，流式细胞仪检测细胞凋亡率， Transwell 小室检测细胞迁移数。结果：DZNep处理后的Eca109细胞增殖率为（34．60±4．45）％，低于对照组的（42．37±4．64）％（t＝3．625，P＝0．002）；其细胞凋亡率为（16．27±3．70）％，高于对照组的（7．38±0．77）％（t＝7．061，P＜0．001）；迁移到下室的细胞数为（179±38）个，较对照组的（494±99）个少（t＝8．912，P＜0．001）。结论：DZNep能够抑制Eca109细胞的增殖和迁移，促进其凋亡。
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蛋白酶体激活因子 PA28α对 Eca109和 EC9706细胞细胞周期和凋亡的影响
目的：探讨蛋白酶体激活因子PA28α对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响。方法：扩增PA28α的cDNA全长序列并连接到pCMV-Myc上，构建真核表达载体pCMV-Myc-PA28α，脂质体法转染食管鳞癌细胞系Eca109和EC9706，荧光显微镜观察PA28α蛋白在细胞中的定位；Western blot 法鉴定重组载体的表达；流式细胞仪检测PA28α在食管鳞癌EC9706细胞中过表达对其细胞周期和凋亡的影响。结果：转染了重组载体pCMV-Myc-PA28α的食管鳞癌Eca109和EC9706细胞中PA28α蛋白主要存在于细胞质。与空载体转染组（0．342±0．007）相比，pC-MV-Myc-PA28α转染组（1．073±0．040）EC9706细胞中有较高的PA28α蛋白表达（F＝984．411，P＜0．001）。与空载体转染组（37．642±1．000）相比，pCMV-Myc-PA28α转染组（39．258±0．154）EC9706细胞处于S期细胞比例明显增高（F＝24．592，P＜0．001）。 pCMV-Myc-PA28α转染组EC9706细胞的凋亡率（14．463％±0．634％）明显低于空载体转染组（43．893％±0．473％），差异有统计学意义（F＝1448．569，P＜0．001）。结论：PA28α与食管鳞癌的凋亡有密切关系，可能成为治疗食管鳞癌的一个有效靶点。
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