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郑州大学学报(医学版)

郑州大学学报(医学版)杂志

Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) 정주대학학보(의학판)

  • 主管单位: 河南省教育厅
  • 主办单位: 郑州大学
  • 影响因子: 1.24
  • 审稿时间:
  • 国际刊号: 1671-6825
  • 国内刊号: 41-1340/R
  • 发行周期:
  • 邮发: 36-111
  • 曾用名: 河南医学院学报;河南医科大学学报
  • 创刊时间: 1957
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 郑州大学学报(医学版)编辑部
  • 出版地区:
  • 主编: 辛世俊
  • 类 别:
期刊收录:
期刊荣誉:
  • 形觉剥夺性近视豚鼠视网膜中脑源性神经营养因子的表达

    作者:阎磐石;张金嵩;吕勇

    目的:研究视网膜脑源性神经营养因子(BDNF)在豚鼠形觉剥夺性近视(FDM)形成中的作用.方法:出生3 d豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月制备FDM动物模型,左眼作为对照.遮盖前后,检影验光检测双眼屈光度,A超测量双眼眼轴长度.遮盖后免疫组织化学法分析视网膜BDNF的表达,RT-PCR检测BDNF mRNA的表达.结果:形觉剥夺使眼轴增长,近视屈光度增加,遮盖眼与对照眼相比屈光度差异有统计学意义(P<0.01).遮盖眼BDNF免疫活性降低,BDNF mRNA表达下调.结论:BDNF可能参与调控FDM的形成.

  • 褪黑素对早期糖尿病大鼠心肌非酶糖基化及氧化应激反应的影响

    作者:李青菊;姚蔚;李凤良;李鹏诺;张苏河

    目的:研究褪黑素(Mel)对糖尿病大鼠氧化应激反应和非酶糖基化反应的影响.方法:用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型.正常大鼠、糖尿病大鼠及用褪黑素治疗8周的糖尿病大鼠各10只,应用荧光法测定心肌组织糖基化终末产物(AGEs)含量,应用比色法测定心肌组织及血清丙二醛(MDA)含量,乳胶免疫聚集抑制法测定糖化血红蛋白(HbA1 c)含量,计算心脏质量指数.结果:与正常大鼠比较,糖尿病大鼠各指标升高,而褪黑素组血清MDA以及心肌组织中AGEs、MDA含量和心脏质量指数均较糖尿病组下降.结论:褪黑素能抑制糖尿病大鼠心肌非酶糖基化和氧化应激反应.

  • 加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响

    作者:吴皓;董子明;张明五;王新朝;张文娟;吴逸明

    目的:探讨加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响,为临床热疗与紫杉醇化疗的联合应用提供依据.方法:将不同温度(39℃、41℃和43℃)及不同浓度紫杉醇(1.25 μg/L、2.50μg/L、5.00 μg/L、10.00 μg/L和20.00 μg/L)采用组内分组设计,共15个组,并设各浓度37℃对照组(5组).在紫杉醇对人舌癌Tca8113细胞作用24 h后加温40 min,应用MTT比色分析法测定加热和紫杉醇联合应用对细胞增殖率的影响.结果:41℃组细胞增殖率与不同温度同剂量组比较,除与39℃1.25 μg/L紫杉醇组比较差异无统计学意义外(P>0.05),与其余各组比较均降低,比较差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);39℃和43℃10 μg/L紫杉醇组细胞增殖率与37℃对照组比较均升高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:41℃时各浓度紫杉醇对Tca8113细胞均有增殖抑制作用;39℃或43℃联合10 μg/L紫杉醇时Tca8113细胞增殖能力强.

  • 河南省住院分娩婴儿出生性别比调查分析

    作者:冯慧芬;施学忠

    目的:了解河南省住院分娩婴儿出生性别比的水平与影响因素.方法:采用多阶段分层整群抽样的方法,在河南省抽取1个省级医疗单位、6个市级医疗单位、9个县级医疗单位作为调查对象.收集16个样本1990年至2003年住院分娩婴儿记录资料,计算活产婴儿的出生性别比.结果:河南省1990年至2003年住院分娩婴儿的出生性别比偏高,并有逐渐上升的趋势;各级医院的出生性别比都表现为第一胎较低,从第二胎起显著增高;县级医院的出生性别比均高于省、市级医院.结论:河南省医院分娩婴儿出生性别比偏高,倾向到医院生育男孩和产前性别鉴定并采取选择性别的人工流产可能是导致人口出生性别比升高的主要原因.

  • 倍他乐克对慢性充血性心力衰竭患者心率变异性的影响

    作者:高寒梅;郭龙枝;裴济民

    目的:探讨倍他乐克对慢性充血性心力衰竭(CHF)患者心率变异性(HRV)的影响.方法:70例CHF患者随机均分为2组,每组35例.2组患者性别、年龄及心功能差异无统计学意义.对照组给予常规抗心衰治疗,治疗组常规抗心衰治疗,在心衰初步控制后加服倍他乐克,从小剂量开始,缓慢增加剂量.治疗前和治疗3个月后分别测定2组患者的HRV;出院后随访半年,记录再住院率、病死率.结果:治疗3个月后,治疗组的HRV各指标SDNN、SDANN、rMSSD、PNN50均较治疗前及对照组明显提高(P<0.05),总有效率97.1%(34/35),高于对照组的71.4%(25/35)(P<0.05).随访半年,治疗组再住院率17.1%(6/35),低于对照组42.9%(15/35)(P<0.05).结论:在常规治疗的基础上,加用倍他乐克治疗慢性CHF,可提高患者HRV,增强疗效,改善预后.

  • 含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建

    作者:罗威;黄文广;殷涛

    目的:构建含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体.方法:利用PCR技术从人乳癌细胞MCF-7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pMD18T载体中,再从pMD18T-DF3重组质粒中切下DF3/MUC1启动子的转录调控序列并亚克隆入pGL3-Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3.从质粒pIBI30-DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pGL3-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3-DF3-DTA.结果:构建了含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符.结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功.

  • 高龄老年心脏性猝死患者心率变异性分析

    作者:郑爱兰;郝道剑

    目的:研究高龄老年人心率变异性(HRV)减低与心脏性猝死的关系.方法:回顾分析39例≥75岁心脏性猝死者的临床资料,对其死亡前6个月之内24 h动态心电图HRV进行时域和频域分析.以同期资料完整的老年健在患者作对照.结果:高龄老年人心脏性猝死组陈旧性心肌梗死、糖尿病及心功能不全患者多于对照组,HRV各参数均较对照组明显降低(P<0.01).结论:HRV减低是预测高龄老年人心脏性猝死较有价值的指标.

  • 宫颈癌组织中VEGF-C和VEGF检测

    作者:乔玉环;张孝艳

    目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在宫颈癌发生发展中的作用及其临床意义.方法:采用免疫组化SP法,检测72例宫颈癌组织(72例癌组织中,Ⅰ、Ⅱ期60例,Ⅲ、Ⅳ期12例;鳞癌60例(高分化19例,中低分化41例),腺癌12例)、19例正常宫颈组织中VEGF、VEGF-C蛋白的表达.结果:宫颈癌组织VEGF、VEGF-C的阳性表达率分别为59.72%(43/72)和45.83%(33/72),而在正常宫颈组织均无阳性表达,两者相比差异均有统计学意义(P<0.01).VEGF-C表达随宫颈癌组织临床分期、组织学分级的增高而增高;VEGF表达与癌组织临床分期有关(P<0.05);淋巴结转移阳性宫颈癌组织中2者表达水平均高于无淋巴结转移者(P<0.05).宫颈癌组织中VEGF与VEGF-C的表达不相关(x2=0.117,P>0.05).结论:VEGF和VEGF-C 2蛋白与宫颈癌的发生发展相关,并在宫颈癌的侵袭转移中起一定作用.

  • 心肌肥大和心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2的表达

    作者:付春景;郭龙辉;申琦;黄幼田;许燕

    目的:探讨心肌肥大和心力衰竭(心衰)大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、心肌肥大组、心衰组,每组8只.心肌肥大组和心衰组均采用缩窄腹主动脉构建模型.假手术组和心肌肥大组大鼠于第4周处死,心衰组大鼠于第12周处死.分别检测各组血流动力学和左室肥大指标,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌Bcl-2和Bax的表达.结果:心力衰竭组与心肌肥大组比较,左室收缩末压、左室舒张末压、心室内压变化大速率差异均有统计学意义(P<0.01或0.05).心衰组较心肌肥大组心肌细胞凋亡增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少(P<0.01).结论:心肌细胞凋亡在心脏由心肌肥大向衰竭的转变过程中起着重要的作用,并与凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达改变有关.

  • 转人CD59基因小鼠对人补体介导的免疫反应的保护作用

    作者:武玉东;刘秉乾;李胜芝;李光三

    目的:探讨转基因小鼠血管内皮细胞特异性表达人CD59(hCD59)基因对人补体介导的免疫反应的保护作用.方法:通过显微注射方法建立转hCD59基因小鼠,采用PCR、Southern blot方法检测hCD59基因的整合,流式细胞仪检测hCD59蛋白的表达,人血清体外灌注转基因小鼠心脏、免疫组织化学染色补体C9及IgG评估排斥反应的情况.结果:转基因小鼠hCD59基因表达强度为人外周血白细胞的35%~120%,转基因小鼠体外灌注心脏存活时间明显延长(P<0.01),心脏补体C9沉积明显减少.结论:血管内皮细胞特异性表达hCD59可以减轻异种移植排斥反应,延长移植物的存活时间.

  • TRAIL联合化疗药物诱导人胃癌细胞系BGC-823凋亡观察

    作者:僧靖静;张云汉;高冬玲

    目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合化疗药物体外诱导胃癌细胞凋亡的作用及可能机制.方法:采用MTT法检测不同质量浓度TRAIL(10 μg/L,100 μg/L,300μg/L)与5-Fu(10 mg/L,50 mg/L,100 mg/L)、阿霉素(ADM,0.1 mg/L,1.0 mg/L, 10.0 mg/L)联合应用对胃癌BGC-823细胞抑制率的影响;TUNEL法检测3种浓度的TRAIL与5-Fu(50 mg/L)、ADM(1.0 mg/L)联合应用对胃癌BGC-823细胞凋亡率的影响;免疫细胞化学方法检测TRAIL R1、R2、R3和R4在治疗前后的表达.结果:3种浓度的TRAIL对BGC-823细胞的抑制率与无药物组比较差异有统计学意义(P<0.05),100 mg/L的5-Fu与3种浓度的TRAIL均有协同作用(P<0.05),100μg/L、300μg/L TRAIL与3种浓度的ADM均有协同作用(P<0.05);5-Fu和ADM均能增强TRAIL诱导BGC-823细胞凋亡的作用;各治疗组TRAIL各受体表达水平无明显变化.结论:TRAIL可通过诱导肿瘤细胞的凋亡而产生抗肿瘤的作用;5-Fu、ADM与TRAIL有协同抗肿瘤作用,该作用与细胞膜上的受体无关.

  • 铜绿假单胞菌及其外毒素A对人单个核细胞TNF-α分泌的影响

    作者:邓予晖

    目的:探讨加热杀灭的铜绿假单胞菌(HKPA)及其外毒素A(PEA)对人单个核细胞(PBMC)TNF-α分泌的影响.方法:采用1×10 7 CFU/ml HKPA作为诱导物、50μg/L、100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L PEA作为抑制物、抗PEA血清作为中和物,诱导PBMC体外产生TNF-α.ELISA法检测TNF-α浓度.结果:对照组HKPA可诱导PB-MC产生一定浓度的TNF-α;当PEA浓度≥100μg/L时,抑制TNF-α的产生(P<0.01),TNF-α浓度与PEA的剂量呈负相关(r=-0.82,P<0.01).抗PEA血清完全中和PEA的抑制作用,与对照组比较,TNF-α分泌量差异无统计学意义(P>0.05).结论:HKPA在体外可有效诱导PBMC产生TNF-α,PEA以剂量依赖的方式抑制TNF-α的产生.

  • 荧光染料SYBR GreenⅠ及EB在定量PCR中敏感性比较

    作者:张茜;谢湘芝;经承学

    目的:比较荧光染料SYBR Green I及EB在定量PCR诊断中检测DNA的敏感性.方法:分别用琼脂糖凝胶电泳SYBR Green I染色及EB染色,检测26例21-三体综合征患者及20例正常人DNA PCR扩增产物,并进行光密度分析比较.结果:SYBR Green I染色于24个循环PCR产物带型清楚,可准确定量检测;EB染色则在28个循环才能进行定量分析.结论:荧光染料SYBR Green I染色较EB染色测量DNA敏感、快捷,在定量PCR技术中值得推广应用.

    关键词: SYBR Green I EB 定量PCR
  • 利巴韦林注射液与10种常用药物配伍的稳定性

    作者:张孝祯;张尽廷;莫熄

    目的:考察利巴韦林在50 g/L葡萄糖注射液中分别与头孢唑啉钠、苯唑青霉素钠、乳糖酸红霉素、酒石酸柱晶白霉素、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星、硫酸妥布霉素、维生素C、维生素B6、地塞米松等10种静脉注射药物配伍后的稳定性.方法:模拟临床用药操作,将50 g/L葡萄糖注射液与利巴韦林混合,再按临床常用量分别将10种静脉药物加入到混合液中,放置0 h,1 h,2 h后,观察各混合液的澄明度,测定pH和不溶性微粒数.结果:混合液外观澄明,pH因药物性质不同而有所变化;≥25 μm微粒数变化不大,个别配伍有少量发现;≥10 μm微粒增加明显.但均符合药典规定.结论:利巴韦林与该10种常用药物可以配伍使用.

  • 上颌窦提升在上颌后牙区萎缩牙槽嵴牙种植术中的应用

    作者:张克豪;Lorenzoni M;Wegscheider WA

    目的:探讨上颌窦提升术对上颌后牙区萎缩牙槽嵴患者种植义齿修复的临床应用价值.方法:56例患者植入196枚种植体,患者平均年龄60.6岁.将自体松质骨(Spongiosa)与Bio-OSS(R)混合进行上颌窦提升术,根据情况一期或二期植入种植体.种植体植入后至少6个月,选用适当的上部修复体进行义齿修复.结果:上颌窦提升术后或/和种植体植入术后,创口愈合良好,未见种植体松动或脱落,供骨区和种植术区均未见并发症.术后12个月PTVs小为-5,X线检查种植体周垂直骨吸收均不超过1 mm.种植体全部稳定地行使功能.结论:应用上颌窦提升术对上颌后牙区萎缩牙槽嵴患者进行种植义齿修复有广阔的应用前景.

  • 羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞纯化培养的影响

    作者:李敏霞;李相中;刘清芳

    目的:探讨羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞(hMSC)纯化培养的影响.方法:采用全髓直接接种法分离培养13~18周胎龄水囊引产新鲜胎儿股骨骨髓,贴壁细胞达90%以上融合时消化传代.传代细胞分别接种于含100 ml/L胎牛血清的L-DMEM培养基(常规培养基)和加入15 mmol/L羟乙基呱嗪乙硫磺酸(Hepes)的常规培养基(改良培养基)中,观察细胞生长情况,用酸度计监测培养基pH值变化情况,流式细胞仪鉴定细胞纯度及CD抗原表达情况.并诱导改良培养基培养的hMSC向成骨细胞分化,酶细胞化学法和全自动生化仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,鉴定hMSC的成骨分化能力.结果:2种培养基培养的hMSC在细胞形态、生长特性、CD抗原表达等方面相似,但改良培养基由于pH值较恒定而能提高hMSC纯度及细胞增殖速度,且诱骨分化后可形成矿化结节,ALP染色阳性.结论:Hepes能提高全髓直接接种法培养的hMSC纯度及细胞增殖速度,简化骨髓细胞分离程序,减少细胞损伤及受污染机会,利于hMSC培养的推广应用.

  • 冠脉内支架植入术后再狭窄的影响因素分析

    作者:刘灵芝;侯翠红;刘恒亮

    目的:探讨冠脉内支架植入术后再狭窄的影响因素.方法:选择随访的冠脉造影资料较全的100例冠脉内支架植入术后患者.依据术后冠脉造影复查结果将其分为无再狭窄组和再狭窄组,比较2组临床危险因素(包括年龄、性别、高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟)及靶血管病变特点(如病变部位、病变分型、病变长度、术前狭窄程度、小管腔直径、病变血管支数),分析支架内再狭窄的影响因素.结果:2组年龄、高血压患病率、糖尿病患病率、高脂血症患病率、病变部位、病变分型、病变血管支数差异无统计学意义.再狭窄组男女比例(39:6)较无再狭窄组(29:26)高(P=0.02);再狭窄组吸烟比例(80%)较无再狭窄组(58.6%)高(P=0.03);再狭窄组术前狭窄程度(94.65%±3.62%)较无再狭窄组(88.81%±3.23%)重(P=0.04);再狭窄组病变长度(23.2±10.8)mm较无再狭窄组的(17.6±11.8)mm长(P=0.04).结论:年龄、高血压患病率、糖尿病患病率、高脂血症患病率、病变部位、病变分型、病变血管支数对冠脉内支架植入术后再狭窄无关,男性、吸烟、病变长度、术前狭窄程度与其有关.

  • 子宫内膜癌组织中Survivin和PCNA的表达

    作者:史惠蓉;陈志敏;梁爱青

    目的:探讨子宫内膜癌(EMC)组织中Survivin表达与细胞增殖活性和临床病理特性、预后的关系.方法:采用免疫组织化学SP法检测10例正常子宫内膜、20例子宫内膜增生过长及33例EMC组织中Survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.结果:EMC.及子宫内膜增生过长组织中Survivin的阳性率分别为78.8%和55.0%,明显高于正常子宫内膜组织(20.0%),差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组织中Survivin表达且与PCNA呈正相关(r=0.446,P=0.005).结论:Survivin阳性表达率与肿瘤的恶性程度及细胞增殖活性明显相关,可用来鉴别肿瘤恶性程度、预测预后.

  • 焦化厂职工心理健康状况调查分析

    作者:王新朝;徐玉宝;许东;李洪;李时恩

    目的:了解焦化厂职工心理健康状况并分析其可能原因.方法:采用心理卫生症状自评量表,对焦化厂炼焦车间工人62名和接苯车间工人82名(精苯作业工人50名,回收车间工人32名)进行了调查,并与全国常模比较.结果:炼焦工和接苯工多数因子评分高于全国常模,炼焦组主要表现在躯体化、强迫症状、焦虑、敌对、精神病性(P<0.01或<0.05)等方面;接苯组主要表现在躯体化、强迫症状、焦虑、敌对、恐怖、偏执和精神病性(P<0.01或0.05)等方面.精苯组与回收组比较,强迫、人际关系、抑郁因子评分较高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:焦化厂职工心理健康状况明显下降,尤其是精苯作业工人,可能与接触毒物种类、工作方式、工作强度等不同有关.

  • 7种山茱萸总皂苷提取分离方法效果比较

    作者:韩志慧;张景伟;赵玉丛;李新宝;刘国际

    目的:考察不同提取方法对山茱萸总皂苷含量测定的影响.方法:分别采用无水乙醇回流提取、无水乙醇回流-正丁醇萃取、体积分数为70%乙醇回流提取、体积分数为70%乙醇回流提取-正丁醇萃取、水提取、超声波提取和超临界CO2提取方法,以人参皂苷Re作对照品,比色法测定提取液中山茱萸总皂苷的含量.结果及结论:不同提取方法对皂苷含量有较大的影响,超临界CO2提取技术无溶剂残留,操作温度低,对环境友好,提取效率高,皂苷含量是传统溶剂提取的1.5~2.0倍,有较好的应用前景.

  • 阿司匹林对急性脑梗死患者血浆NO及血小板α颗粒膜蛋白含量的影响

    作者:林爱琴;赵凤臣;倪居;邓双全

    目的:探讨阿司匹林对急性脑梗死患者血浆一氧化氮(NO)及血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)的影响.方法:83例急性脑梗死患者随机分为阿司匹林组(43例)和对照组(40例).2组均给予常规治疗,阿司匹林组在此基础上服用阿司匹林150 mg/d,治疗2周.治疗前后,分别采用硝酸酶还原法和双抗体夹心酶联免疫吸附法测定2组血浆NO及GMP-140含量,并按照欧洲卒中评分(ESS)标准进行评分.结果:治疗后阿司匹林组血浆NO及GMP-140含量均较对照组下降(P<0.01),但ESS分值变化2组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:阿司匹林能降低急性脑梗死患者血浆NO及GMP-140的水平.

  • 郑州市社区糖尿病患者病情控制状况影响因素探讨

    作者:张卫东;袁媛;郗园林

    目的:了解社区中糖尿病患者病情控制状况的影响因素.方法:随机抽取郑州市10个居委会,对居委会内全部已确诊的227例糖尿病患者的一般情况、病程、膳食控制状况、治疗方式、病情监测、体育锻炼、糖尿病相关知识等进行调查.采空腹及早餐后2 h静脉血测血糖.空腹血糖<7.77 mmol/L且餐后2 h血糖<11.10 mmol/L为病情控制良好;空腹血糖≥7.77 mmol/L或餐后2 h血糖≥11.10 mmol/L为病情控制不良.采用单因素分析和Logistic回归分析各研究因素与病情控制状况之间的关系.结果:单因素分析显示:年龄、病程、糖尿病知识评分、膳食控制状况、治疗方式等5个因素对病情控制状况有显著影响.Logistic回归结果表明:病程、糖尿病知识评分、膳食控制状况3个因素影响糖尿病患者病情控制状况.结论:病程、糖尿病知识评分、膳食控制状况是影响糖尿病患者病情控制状况的主要因素.但科学的、正规的药物治疗对病情控制状况的影响也不应被忽视.

  • 新生豚鼠海马神经干细胞的分离培养及鉴定

    作者:席恺;董明敏

    目的:探讨新生豚鼠海马来源的神经干细胞体外培养的佳条件.方法:分离新生24 h内的豚鼠海马组织,制成单细胞悬液,分别于DMEM/F12培养基、含体积分数2%B27的培养基及含4 ng/L bFGF的B27培养基进行原代和传代培养,收集原代和传代培养的细胞,进行巢蛋白(Nestin)、GFAP及NSE免疫细胞化学染色.结果:在含bFGF的B27培养基中,传代的细胞不断分裂增殖,形成悬浮生长的呈Nestin阳性的神经干细胞团.传代培养分化的细胞可见NSE或GFAP免疫阳性细胞.结论:含体积分数2%B27的DMEM/F12培养基中添加bFGF可获得大量新生豚鼠海马神经干细胞.

  • 中国汉族人多囊卵巢综合征患者CYP17基因多态性分析

    作者:谭丽;张蕾;朱桂金

    目的:探讨CYP17基因-34 bp处T→C碱基置换与多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法,对中国汉族人118例PCOS患者和106例对照组的CYP17基因-34 bp碱基置换进行检测;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清睾酮(T)水平,比较CYP17基因多态性与PCOS患者T水平之间的关系.结果:中国汉族人PCOS组CYP17基因型频率分布为9.9%(A1A1)、56.4%(A1A2)、33.7%(A2A2),对照组为20.0%(A1A1)、52.0%(A1A2)、28.0%(A2A2),2组间比较差异无统计学意义(x2=0.190,P>0.05);PCOS组A1、A2等位基因频率为38.1%、61.9%,对照组为46.0%、54.0%,2组间比较差异无统计学意义(x2=3.032,P>0.05);PCOS组A2A2基因型组的T水平((1.63±o.58)μg/L)高于A1A2组((1.30±0.85)μg/L)和A1 A1组((1.00±0.66)μg/L)(P<0.05),且含A2组(A1A2,A2A2)的T水平((1.43±0.67)μg/L)显著高于不含A2组(A1A1)的T水平(P<0.05).结论:CYP17基因-34 bp处T→C碱基置换的存在与PCOS高T血症之间有一定的相关性,可能是PCOS的易感基因之一.

  • 蜈蚣、全蝎、地龙氨基酸含量测定

    作者:刘继红;尚娟;贾斌;刘宏民

    目的:研究蜈蚣、全蝎、地龙中氨基酸分布规律.方法:用氨基酸分析仪测定3种药材中氨基酸含量,并与常见动植物蛋白氨基酸含量进行比较.结果与结论:3种药材蛋白含量均很高,Gly、Ala、Val、Leu、Arg等氨基酸比例较高.3种药材氨基酸分布规律与其药理作用有一定关系.

  • 肺癌组织中蛋白质组双向电泳图谱分析方法的建立

    作者:张慧珍;范清堂;吴逸明

    目的:建立一套双向凝胶电泳图像的分析方法,为进一步分析和鉴定差异蛋白奠定基础.方法:提取肺癌组织和癌旁组织中的可溶性总蛋白,进行双向凝胶电泳,电泳图片由专用扫描仪获取后,应用图像分析软件(PDQuest 7.1)进行蛋白差异点的表达情况分析.结果:二维电泳图片经过背景消减、点检测、点匹配等一系列分析后,得出了差异点.结论:PDQuest 7.1软件可以用来快速有效地对生物样品之间蛋白质的差异进行分析.

  • BALB/c 小鼠小肠乳糖酶活性双糖酶法测定条件的优化

    作者:何伟;黄磊;吕斌;黄承钰

    目的:建立一种方便、准确测定小鼠小肠乳糖酶活性的方法.方法:采用不同pH的底物溶液与肠黏膜提取物反应,计算相应的酶活性;取不同反应时间(45 min,60 min,75 min),不同显色时间(45 min,60 min,75 min)和不同显色剂用量(2.0 ml,2.5 ml,3.0 ml)按L9(34)正交实验设计方法,测定不同条件下的底物溶液与肠黏膜反应的A值作为正交实验的评分标准.结果与结论:由正交实验得出,该方法的佳反应条件为:pH 4.6,水浴75min,显色时间45 min,显色剂用量3.0 ml;批内酶活性(0.029±0.003)U/ml,CV=2.49%,批间酶活性(0.032±0.004)U/ml,CV=4.19%.该方法具有很好的重复性和可靠性.

  • 骨髓基质细胞移植治疗大鼠缺血性脑损伤

    作者:黄月;许予明;方树友;秦洁;宋波;马兴荣

    目的:观察骨髓基质细胞(MSCs)移植对大鼠缺血性脑损伤后神经功能恢复的作用并探讨其作用机制.方法:线拴法制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)(n=72),随机均分为模型组,磷酸盐缓冲液(PBS)对照组和MSCs组,缺血2 h后再灌注,24 h后MSCs组将标记5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的2×10 6个MSCs通过颈动脉移植入脑缺血大鼠体内,PBS组经颈动脉注入等体积的PBS液,模型组不做任何处理.另设假手术组(n=6).分别于术后2d,4 d,6 d,8 d采用神经缺损评分检测各组大鼠神经系统功能,用免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞的迁移及营养因子的分泌情况.结果:MSCs移植后,在脑内存活、迁徙、分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)等多种神经保护性因子,与其他组相比,MSCs组神经功能改善情况明显.结论:动脉移植MSCs治疗缺血性脑损伤具有较好的疗效,自分泌或旁分泌多种神经保护性营养因子可能是其主要机制之一.

  • 新生儿窒息后血清与脑脊液促红细胞生成素检测

    作者:徐发林;朱长连;程秀永;胡生海;耿琳琳;贾莉婷

    目的:探讨窒息新生儿血清及脑脊液中促红细胞生成素(EPO)的变化及其与脑损伤的关系.方法:采用放射免疫法对63例足月窒息新生儿(窒息组)血清、脑脊液及20例正常足月新生儿(对照组)血清中EPO浓度作动态检测(生后24 h内、第3 d、第5 d).结果:窒息组血清EPO浓度较对照组有不同程度的增高,但合并重度缺氧缺血性脑病(HIE)组低于中度HIE组的测定值,生后5 d内血清EPO动态变化不明显,脑脊液中EPO浓度与血液中浓度变化规律相似,血清及脑脊液中EPO浓度正相关.结论:窒息后脑脊液中促红细胞生成素水平增高,可能与自身神经保护作用有关.

  • 中药金叶败毒制剂体外抗人巨细胞病毒作用观察

    作者:张龑;谭丽;闻良珍

    目的:研究中药金叶败毒制剂(JYBD)抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的可能机制.方法:采用体外细胞培养技术建立HCMV感染细胞模型,应用更昔洛韦(GCV)和JYBD进行干预,采用定量RT-PCR法检测干预后不同时间感染细胞HCMV即刻早期基因IE86 mRNA的表达水平,观察感染细胞的病变进展情况,同时采用放射免疫法测定受染细胞细胞因子TNF-α和IL-6的分泌水平.结果:JYBD与GCV对HCMV IE86 mRNA的表达以及HCMV所致细胞病变有明显的抑制作用,降低受染细胞TNF-α、IL-6的分泌水平,JYBD作用弱于GCV.结论:JYBD可通过抑制HCMV IE基因的转录,促进细胞因子的分泌而发挥体外抗HCMV作用.

  • 氦氖激光穴位照射对缺血缺氧后新生大鼠海马神经元增殖的影响

    作者:吴爱群;张伟宏;牛建钢;曾光伟;张顺清;冯婷

    目的:探讨氦氖激光穴位照射疗法对缺血缺氧新生大鼠脑损伤后海马神经元增殖的影响.方法:7 d龄健康Wistar大鼠72只随机分成4组:假手术组、缺血缺氧组、缺血缺氧激光穴位照射组、缺血缺氧激光非穴位照射组.制备新生大鼠缺血缺氧脑损伤模型,激光穴位照射组选择"百会"和"大椎"穴位给予氦氖激光照射,激光非穴位照射组选择腹部非穴位部位进行激光照射,常规饲养22 d后处死,处死前经腹腔注射5-溴-2-脱氧脲嘧啶(Br-dU)标记增殖细胞.取左侧脑做组织切片,HE、Nissl染色以及采用抗BrdU抗体和神经上皮蛋白(Nestin)抗体进行免疫组织化学染色.结果:激光穴位照射组与其他组比较海马神经元胞体内尼氏体丢失较少,神经元坏死减轻,海马齿状回BrdU标记的免疫阳性细胞数增加,海马CA1区Nestin免疫阳性细胞数增高.结论:激光穴位照射对海马神经元有保护作用,促进了海马神经元的增殖.

  • 罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

    作者:孟晓青;邓安国;朱忠华;杨晓;刘建设

    目的:探讨罗格列酮(RGZ)对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法:大鼠随机分成治疗组、模型组、正常组(n=9).治疗组、模型组大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,均造模成功7只.治疗组大鼠于造模前24 h行RGZ灌胃,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃.12周后处死动物,观察肾小球病理学变化及细胞外基质(ECM)相对面积,用免疫组织化学法检测肾皮质CTGF的表达.结果:治疗组及模型组肾小球ECM相对面积及肾皮质CTGF表达水平均较正常组升高,但治疗组2指标均较模型组低(P<0.01);治疗组肾脏病理学改变较模型组减轻.结论:RGZ能改善糖尿病时肾脏的病理变化,延缓肾纤维化的发生,其作用可能与抑制肾组织中CTGF的表达有关.

  • 哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23及血清IgE测定

    作者:杨红

    目的:研究哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23表达与哮喘发病的关系.方法:采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法检测48例哮喘发作期儿童和29例哮喘缓解期儿童外周血CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率和血清IgE水平,并以30例健康儿童作对照.结果:哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率及血清IgE水平均高于哮喘缓解组和正常对照组(P<0.05).哮喘缓解组CD23+淋巴细胞百分率和IgE水平明显高于正常对照组(P<0.05);哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率与血清IgE水平呈正相关(r=0.726,0.739,0.714,P均<0.05).哮喘缓解组和正常对照组上述指标与血清IgE水平不相关.结论:CD21、CD23的表达在哮喘发病过程中发挥重要作用.

  • IL-1β对体外人Graves眼病球后成纤维细胞分泌RANTES的影响

    作者:秦贵军;罗方;赵艳艳;张素华;宋方州

    目的:探讨IL-1β对人眼球后成纤维细胞(RF)产生趋化因子RANTES的影响及其对外周血淋巴细胞(PBL)的趋化作用.方法:取Graves眼病(GO)患者和斜视患者眼球后结缔组织,胶原酶消化法获得RF,分别以0μg/L、0.04μg/L、0.40 μg/L、8.00 μg/L、10.00 μg/L的IL-1β在RPMI培养基中孵育24 h,RT-PCR和ELISA法分别检测RANTES mRNA表达和RF培养上清中RANTES的含量,并观察活性核因子κB抑制剂CAPE对RANTES表达量的影响.采用96微孔板Chemo TX System进行趋化实验检测RF产生的RANTES对PBL的趋化作用,并观察鼠抗人RANTES抗体对PBL游走能力的影响.结果:RF在体外几乎不能产生RANTES,经IL-1β刺激之后,RANTES在mRNA和蛋白水平表达都升高,GO患者RF产生RANTES的量明显高于正常对照RF((182.9±14.1)μg/L vs(77.9±3.8)μg/L,t=16.765,P<0.01),且在一定范围内具有浓度依赖性.CAPE可明显抑制IL-1β对RF表达RANTES的诱导效应.经IL-1β刺激的RF培养上清可增强PBL的游走能力,此效应可被鼠抗人RANTES抗体所抑制.结论:IL-1β诱导RF表达的RANTES参与了GO眶后淋巴细胞浸润,且RANTES的表达可能与NF-κB的激活有关.

  • 食管癌组织中基质金属蛋白酶-2,-9的定位表达

    作者:温洪涛;张蕾;李继昌;张云汉

    目的:探讨食管癌组织中基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)的蛋白和mRNA定位表达.方法:用免疫组化,原位杂交,RT-PCR法分别检测41例食管癌组织标本中MMP-2,-9的mRNA及蛋白定位表达.结果:用RT-PCR、原位杂交2种不同方法检测食管癌组织及癌细胞MMP-9 mRNA的阳性表达率分别为80.49%和53.66%,MMP-2 mR-NA的阳性表达率分别为58.54%和9.76%,食管癌细胞与组织成分中MMP-9阳性表达相一致,但MMP-2明显不符.结论:本研究结果提示MMP-9由食管癌组织中的肿瘤细胞分泌,而MMP-2则非肿瘤细胞所分泌.

  • 食管癌组织中肺耐药蛋白的表达

    作者:董鑫;郝志芳;李珊珊;司源;阎爱花

    目的:探讨食管癌组织中肺耐药蛋白(LRP)的表达.方法:运用免疫组织化学方法检测49例存档蜡块食管癌组织、46例食管正常组织、32例新鲜食管正常及癌组织LRP蛋白的表达;对其中的32例新鲜标本,运用RT-PCR技术检测LRP mRNA的表达.结果:食管癌组织LRP蛋白阳性表达率54.3%(44/81),高于正常组织的35.9%(28/78)(x2=5.44,P<0.05).食管癌组织中LRP mRNA的表达水平(0.54±0.05)高于正常组织的(0.39±0.04)(t=2.30,P<0.05).LRP蛋白及mRNA的表达与食管癌病理特征不相关(P>0.05).结论:食管癌组织中LRP的高表达可能与食管癌的耐药性有关,该特性可能独立于病理特征之外.

  • 酵素-Ⅱ分离人神经干细胞球

    作者:孙剑瑞;杨波;杜英;宋来君;李国喜;张清勇;胡祥;胡平生;徐虹;王云龙

    目的:寻找一种有效分离神经干细胞球并获得大量单个神经干细胞的方法.方法:取20周胎龄人胚胎脑组织分离单细胞,应用DMEM/F12培养基培养形成神经干细胞球,取神经干细胞球,分别以2.50 g/L、1.25 g/L胰蛋白酶及0.6 u/ml、1.2 u/ml、1.8 u/ml、2.4 u/ml酵素-Ⅱ(DispaseⅡ)消化,观察消化过程及细胞形态,对消化后的单个细胞进行培养,观察细胞生长情况,并进行免疫细胞化学染色鉴定.结果:各浓度DispaseⅡ均能较完全地消化神经干细胞球,其中1.2 u/ml、1.8 u/ml DispaseⅡ消化后的细胞生长状况佳.胰蛋白酶消化后细胞有较大的损伤,成活细胞少.消化后的细胞Nestin抗体染色结果(+),证实为神经干细胞.结论:一定浓度的DispaseⅡ消化神经干细胞球后,可获得大量成活单个神经干细胞.

  • 卵巢上皮性肿瘤组织中VEGF与P53的表达

    作者:马海彦;王珏辉;张红新;高冬玲;陈奎生

    目的:探讨卵巢上皮性肿瘤组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)及P53蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学SP法和形态定量学方法,检测卵巢上皮性肿瘤组织(良性囊腺瘤17例,交界性肿瘤15例,恶性肿瘤29例)中VEGF和P53蛋白的表达,并测定其积分光密度(IOD)和平均光密度(MOD).结果:良性、交界性及恶性肿瘤组织中VEGF的IOD和MOD值分别为213.6±94.8和0.19±0.07、419.4±71.6和0.26±0.08、667.2±32.9和0.41±0.03,P53蛋白表达的IOD和MOD值分别为164.2±44.8和0.17±0.04、521.3±57.1和0.24±0.07、872.2±37.4和0.41±0.04,良性肿瘤分别与交界性肿瘤和恶性肿瘤相比,IOD和MOD值差异均有统计学意义(P<0.01或0.05).且VEGF与P53表达呈正相关(rs=6.24,P<0.05).结论:卵巢上皮性肿瘤的发展中VEGF起重要作用,P53蛋白可能参与卵巢肿瘤的血管生成调节.

  • 游离空肠袢修复犬肝门部胆管狭窄

    作者:牛跃平;徐智;李东庄;赵蕊;周孝思

    目的:探讨游离空肠袢修复肝门部胆管狭窄的效果.方法:12只成年犬随机分为游离空肠盲袢胆囊吻合组(IL组,n=7)和胆囊空肠盲袢型Roux-en-Y吻合组(RL组,n=5).IL组行游离空肠盲袢胆囊吻合,RL组行胆囊空肠盲袢型Roux-en-Y吻合.术后通过99mTc-EHIDA肝胆动态扫描、返流及胆管成石情况观察、胆汁细菌培养、肝脏病理学检查了解该术式的可行性和优越性.结果:术后2组肝脏排泌功能、盲袢排空功能相互比较及与术前比较,差异均无统计学意义(P>0.05);防止返流及逆行感染IL组优于RL组.结论:本术式效果可靠且在预防返流及逆行感染方面优于盲袢型胆肠Roux-en-Y吻合术.

  • 儿童肾积水肾脏动态增强MRI检查

    作者:孟然;文建国;郑富增;程敬亮

    目的:了解动态增强MRI技术评价儿童肾积水肾脏形态及功能的价值.方法:单侧先天性肾盂输尿管连接部狭窄(PUJO)所致肾积水男性患儿7例,均经B超、静脉尿路造影(IVU)及病理证实.观察并记录动态增强MRI注射对比剂Gd-DTPA前和注射后1 min,3 min,5 min,10 min,15 min,30 min,45 min和60 min肾实质和集合系统相对信号强度(RSI).均以对侧正常肾脏作为对照.结果:平扫示积水肾脏皮、髓质分界不清,集合系统信号强度较低;动态扫描示积水肾实质和集合系统RSI逐渐增大,正常肾脏则逐渐减小.结论:动态增强MRI可对儿童肾积水肾脏的功能和形态进行联合评估.

  • 人骨髓间充质干细胞体外培养及生物学特性观察

    作者:法宪恩;王利霞;侯剑峰;张瑞成;王海永;杨辰垣

    目的:观察体外培养的人骨髓间充质干细胞(MSCs)部分生物学特性.方法:自健康人骨髓中分离出MSCs,进行原代培养,第5 d首次更换培养液,以去除未贴壁细胞,以后每周换液2次,细胞铺满整个培养瓶底90%时开始传代培养.倒置相差显微镜下观察原代及传代细胞形态及生长特性,并绘制传代细胞的生长曲线.流式细胞仪检测第3代MSCs细胞表面分子CD29、CD44,以进行MSCs鉴定.结果:MSCs体外培养为贴壁生长.MSCs原代培养约18~21 d才达传代要求;传代培养细胞生长潜伏期仅24~36 h,对数增长期约3~5 d,之后为平台期,4~6 d传1代.传至第8代,出现凋亡征象.第3代MSCs细胞表面CD29、CD44的表达率分别为90.6%和91.5%,MSCs均一性较高.结论:从人骨髓中分离出的MSCs在体外环境中具有很强的自我更新和分裂增殖能力.

  • 经Ⅱ型胶原修饰后的PLGA对诱导后的骨髓基质干细胞粘附及分化的影响

    作者:许建中;范东伟;张文霞

    目的:了解单纯聚乙醇酸和聚乳酸共聚物(PLGA)以及经Ⅱ型胶原表面修饰后的PLGA,对诱导后的骨髓间充质干细胞(MSC)粘附、增殖及分化的影响.方法:抽取成年兔骨髓,流式细胞仪分离骨髓MSC,以含胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)及转化生长因子β3(TGF-β3)的无血清F-12培养基诱导培养.取2周后MSC,接种于24孔培养板,其中Ⅱ型胶原修饰PLGA材料的12孔为实验组,对照组为单纯PLGA材料的另12孔.采用RT-PCR、细胞计数、免疫组化、MTT等方法检测细胞生长、粘附及分化情况.结果:诱导后的MSC,表达Ⅱ型前胶原mRNA,且能在经Ⅱ型胶原修饰的PLGA上粘附、增殖,并持续表达Ⅱ型胶原;而单纯PLGA使其脱分化.结论:Ⅱ型胶原能促进经诱导的MSC在PLGA上粘附、增殖并维持软骨细胞表型.

  • 17-β雌二醇对血管性痴呆大鼠认知功能及脑内NGF、BDNF表达的影响

    作者:卢宏;姜晓蕊;滕军放;王建平;宋志宇;王凯娟

    目的:探讨17-β雌二醇对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能及脑组织神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、雌二醇组,各组均16只.采用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型后,雌二醇组腹腔注射17-β雌二醇,其余2组腹腔注射花生油.60 d后应用Y迷宫、ELISA法分别检测VD大鼠认知功能以及脑组织中NGF和BDNF含量变化.结果:大鼠学习尝试次数、记忆测试10次的正确次数与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),认知功能显著改善;模型组、雌二醇组脑内NGF和BDNF的含量较正常对照组均增高,雌二醇组脑组织内NGF和BDNF的含量较模型组增高(P均<0.01).结论:腹腔注射17-β雌二醇可显著改善VD大鼠的认知功能,增加VD大鼠脑内NGF和BDNF含量,具有脑保护作用.

  • 布-加综合征患者FVLeiden、FⅡG20210A突变检测

    作者:郑红;连建华;齐华;贺颖;林国岭;许培钦

    目的:探讨凝血因子FVLeiden和FⅡG20210A基因多态性与布-加综合征(B-CS)发病的相关关系.方法:利用多重聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(Multiplex PCR-RFLP)方法,检测了53例布-加综合征患者与106例正常对照的FVLeiden和FⅡG20210A的突变情况,并加以对照分析.结果:53例B-CS患者与106例正常对照FVLeiden和FⅡG20210A基因多态,均为野生型,未发现纯合突变型与杂合突变型.结论:FVLeiden和FⅡG20210A的分布存在着地理差异与种族异质性,在中国人B-CS形成过程中的作用极小.

  • 胃癌组织中血管内皮抑素及微血管密度测定

    作者:常卫华;赵治国;张艳鸿;钱镭;刘超

    目的:探讨胃癌组织中血管内皮抑素(Endostatin)的表达及其与肿瘤血管生成的关系.方法:采用免疫组化法检测65例胃癌、20例癌旁正常组织Endostatin蛋白的表达,应用抗CD34单抗标记血管内皮细胞,测定肿瘤间质微血管密度(MVD).结果:胃癌组织Endostatin阳性表达率(61.54%,40/65)高于癌旁正常组织的20.00%(4/20)(P<0.01);Endostatin阳性表达组的MVD值(22.80±10.82)低于Endostatin阴性表达组(29.84±9.28,P<0.01);随着Endostatin表达程度加强,MVD值减少.Endostatin表达与胃癌浸润深度、TNM分期及淋巴结有无转移有关.结论:Endostatin在抑制胃癌血管生成中可能起一定作用.

  • IgA肾病高血压发生的影响因素分析

    作者:李寒;王沛;刘章锁

    目的:探讨IgA肾病高血压发生的影响因素.方法:93例IgA肾病患者,其中高血压36例,血压正常57例.对2组临床病理资料进行回顾性病例对照研究,运用单因素和多因素方法分析其高血压发生与临床病理因素的关系.结果:IgA肾病的小动脉增厚表现为肌层增厚或玻璃样变性,管腔狭窄.单因素及多因素Logistic回归结果显示年龄、蛋白尿程度、血肌酐水平及肾小动脉管壁增厚为IgA肾病高血压发生的独立危险因素.结论:年龄、蛋白尿程度、血肌酐水平及肾小动脉管壁增厚与IgA肾病高血压的发生有关.

  • 人端粒酶逆转录酶原核表达载体的构建

    作者:张巧;赵国强;刘红梅;宫亚欧;丁兰萍;薛乐勋;杨胜利

    目的:构建人端粒酶逆转录酶原核表达载体pGEX-4T-1-hTERT,并观察融合蛋白的表达.方法:用RT-PCR方法从人肝癌组织中扩增出带有EcoR I酶切位点的hTERT基因片段,与pGEM-T Easy连接,转化感受态大肠杆菌JMl09,经蓝-白筛选、PCR扩增等筛选阳性菌落,用EcoR I酶切获取目的片段,并与EcoR I酶切过的pGEX-4T-1质粒连接,重组子转化BL21感受态大肠杆菌,PCR扩增筛选出阳性菌落.基因测序并用Omega 2.0软件比较分析重组质粒中hTERT基因片段与GenBank中的已知序列的同源性.通过诱导pGEX-4T-1融合蛋白表达,用抗hTERT多抗对融合蛋白进行Western blot鉴定,薄层凝胶光密度扫描测定融合蛋白表达量.结果:PCR扩增等方法证实,人端粒酶逆转录酶原核表达载体pGEX-4T-1-hTERT构建成功,其中hTERT基因片段与GenBank中相应基因同源性为98.73%,氨基酸序列同源性为99.68%.Western blot检出GST-hTERT融合蛋白,其表达量达28.4%.结论:成功构建了pGEX-4T-1-hTERT原核重组质粒并获得高度表达.

  • 不同年龄和疾病阶段非痴呆帕金森病患者认知功能和听沉P300改变

    作者:赵莘瑜;卢宏;滕军放;张炳谦;王少平;王左生;赵宗美;王海珍

    目的:探讨不同年龄和疾病阶段非痴呆帕金森病患者的P300改变.方法:将120例帕金森病(PD)患者按病程分为早期PD组(60例)和晚期PD组(60例);其中早期PD组又按年龄分为年轻早期PD组(33例)和老年早期PD组(27例),晚期PD组又按年龄分为年轻晚期PD组(32例)和老年晚期PD组(28例).将60例正常人按年龄分为年轻对照组(34例)和老年对照组(26例).分别采用简明精神量表(MMSE)、Fuld物体记忆测验(FOM)、语言流畅性测验(RVR)、积木测验(BD)和数字广度测验(DS)评定认知功能,记录分析听觉诱发事件相关电位P300PL.结果:年轻晚期PD组5项评分均低于年轻对照组,且P300PL延长(P<0.01);老年早期PD组5项评分均低于老年对照组,且P300PL延长(P<0.01);老年晚期PD组5项评分均低于老年对照组,且P300PL延长(P<0.01);晚期PD组5项评分均低于对照组,且P300PL延长,差异有统计学意义(P<0.01);而年轻早期PD组较年轻对照组5项评分及P300PL差异无统计学意义(P>0.01);早期PD组较对照组5项评分及P300PL差异无统计学意义(P>0.01).各组MMSE、FOM、RVR、BD、DS评分和P300峰潜伏时的延长呈负相关.结论:非痴呆PD患者存在认知功能的下降,其认知功能的下降与发病年龄及疾病阶段有关.

  • 大鼠心脏异位移植150例体会

    作者:张永科;刘昌发

    目的:探讨一种研究排斥反应和再灌注损伤心脏异位移植模型.方法:健康Wistar大鼠300只,随机均分为供体和受体.供体处理:开胸后游离主动脉和肺动脉,从远端离断,腔静脉和肺静脉集中结扎.受体处理:开腹后游离腹腔静脉和腹主动脉,并结扎周围小分支动、静脉血管.用9-0显微缝线分别进行升主动脉和腹腔动脉,主肺动脉和腹腔静脉端侧血管吻合,术后心脏跳动24 h为移植成功.结果:移植成活率为94.7%.结论:腹腔异位心脏移植是一种良好的研究心脏移植后排斥反应和再灌注损伤机制的模型.

    关键词: 大鼠 心脏 移植
  • 妊娠期高血压疾病患者血清IL-6、TNF-α检测

    作者:李玉山;张曦;张展;鄢文海;贾莉婷;胡玉芬

    目的:探讨血清IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在妊娠期高血压疾病发病中的作用.方法:应用放射免疫法分别测定26例重度子痫前期患者、27例轻度子痫前期患者及30例正常妊娠妇女血清中IL-6、TNF-α的含量.结果:子痫前期患者血清IL-6((220.08±31.82)ng·L-1)、TNF-α((1.79±0.25)μg·L-1)水平均高于正常妊娠组((114.63±14.63)ng·L-1、(1.16±0.13)μg·L-1)(P<0.05).重度子痫前期患者血清IL-6((246.27±22.76)ng·L-1)、TNF-α((1.99±0.17)μg·L-1)水平均高于轻度子痫前期者((199.13±20.79)ng·L-1、(1.60±0.14)μg·L-1)(P<0.05);轻度子痫前期患者血清中IL-6、TNF-α的表达高于正常妊娠组(P<0.05);血清中IL-6、TNF-α的表达与子痫前期的病情程度密切相关.结论:IL-6、TNF-α在妊娠期高血压疾病的发生、发展中起重要作用.

  • 无菌塑料袋分离单个核细胞

    作者:李建斌;张伟;张晓丽;赵林娜

    目的:研究适合用于人体的利用无菌塑料袋分离单个核细胞(MNC)的方法.方法:随机抽查20份样本,单份采集量65~400 ml,分为2组,15~58岁为第1组(n=15),59~76岁为第2组(n=5).将Ficoll淋巴细胞分离液加入一次性无菌塑料袋内,将采集的血液或骨髓样本缓慢加入淋巴细胞分离液的液面上,离心,收集MNC层,然后洗去Ficoll淋巴细胞分离液,根据临床需要调整MNC的液体悬浮量.结果:第1组分离后MNC的细胞数为(4.90±2.69)×10 8,回收率为(71.96±12.43)%,CD34+细胞占MNC的比率为(2.31±0.93)%.第2组分离后MNC的细胞数为(1.11±0.74)×10 8,回收率为(69.98±2.23)%,CD34+细胞占MNC的平均比率为(0.98±0.04)%.结论:利用无菌塑料袋分离MNC,分离效果和MNC、CD34+回收率均能满足临床需要.

  • 膀胱肿瘤患者肿瘤组织和尿脱落细胞微小染色体支持蛋白5检测

    作者:郑涛;张卫星;王瑞

    目的:探讨膀胱肿瘤组织和尿脱落细胞中微小染色体支持蛋白5(Mcm5)的表达及意义.方法:采用RT-PCR方法检测70例膀胱肿瘤患者(G1 25例,G2 27例,G3 18例;Tis-T1 47例,T2~T4 23例)、40例泌尿系良性疾病患者和10例健康志愿者(正常对照组)尿脱落细胞中Mcm5的表达;并对癌患者肿瘤组织Mcm5的表达进行检测,同时行尿细胞学检查.结果:膀胱肿瘤组织标本中Mcm5阳性率为98.5%(67/68),Mcm5表达量与病理分级、临床分期密切相关(P<0.05).膀胱癌患者尿脱落细胞中Mcm5阳性表达率与病理分级、临床分期不相关(P>0.05),但相对表达量在各病理分级、各临床分期间差异有统计学意义(P<0.05).尿脱落细胞中Mcm5检测诊断膀胱癌的灵敏度(87.1%)明显高于尿细胞学检查(48.6%,P<0.05);正常对照组和泌尿系良性疾病组中Mcm5阳性表达率为10.0%,低于膀胱癌组(P<0.05).结论:RT-PCR方法检测尿脱落细胞中Mcm5表达是一种敏感、特异的膀胱癌诊断方法.

  • 微囊化牛嗜铬细胞移植对致痛大鼠行为学及脊髓C-fos表达的影响

    作者:游言文;赵文峰;臧卫东;李鸣

    目的:探讨微囊化牛嗜铬细胞(BCC)蛛网膜下腔移植对疼痛大鼠脊髓后角神经元活动的影响.方法:SD大鼠24只,随机分为空囊组、微囊化BCC组和BCC组,每组8只.分别在3组大鼠的脊髓蛛网膜下腔植入含空囊的DMEM、微囊化BCC和单纯BCC.移植8周后,对3组大鼠行福尔马林疼痛实验;福尔马林处理后2 h,免疫组织化学法检测大鼠脊髓后角C-fos蛋白的表达.结果:空囊组、BCC组和微囊化BCC组大鼠痛觉行为反应和脊髓后角C-fos阳性神经元数目均依次减少(P均<0.05).结论:BCC移植对福尔马林致痛大鼠有镇痛作用,可以抑制福尔马林致痛大鼠脊髓后角C-fos的表达,微囊化BCC效果优于BCC.

  • 急性单核细胞白血病核型分析

    作者:孟小莉

    目的:急性单核细胞白血病(M5)核型分析及其临床意义.方法:采用R显带法对56例M5患者进行核型分析.结果:M5患者中异常染色体的检出率为57.14%(32/56).异常核型组完全缓解率25.00%(8/32),明显低于正常核型组的58.33%(14/24)(P<0.05).核型异常涉及多的是8号染色体(11/32),表现为±8、t(8;16)和t(8;21).结论:核型异常的M5患者预后不良.

  • 慢性硬膜下血肿110例治疗体会

    作者:晋松如;王树凯

    1995年1月至2002年6月,作者共收治慢性硬膜下血肿(CSDH)110例,疗效满意,现总结如下.

  • 不同剂量咪唑安定顺行性遗忘作用观察

    作者:张建辉;聂瑞霞;李黎;姜丽华

    现代麻醉学认为,手术中的记忆和知晓可以对患者的心理、生理产生重大影响[1].咪唑安定为苯二氮革类药,具有良好的顺行性遗忘作用.作者比较了不同剂量咪唑安定产生的顺行性遗忘作用,报道如下.

  • 中晚期贲门癌腔内病变臀高头低位CT扫描96例观察

    作者:吕庆才;段成洲;郝安林;蒋明;师晓天

    贲门癌是常见的上消化道恶性肿瘤,CT扫描对肿瘤术前分期和评估手术切除率有重要价值,但对腔内病变的CT表现研究较少.2000年11月至2003年3月,作者利用自制可调式角度板对96例中晚期贲门癌患者行臀高头低位CT扫描,并与手术病理及上消化道造影(GI)进行比较,旨在探讨CT对中晚期贲门癌腔内病变的诊断价值.

  • CT和MRI诊断股骨头缺血坏死价值探讨

    作者:悦保仕;张焱

    股骨头缺血坏死是常见的骨关节疾患,早期诊断对于该病的治疗和预后至关重要[1,2].作者对经临床和影像学确诊的39例股骨头缺血性坏死患者的CT和MRI资料进行总结分析,报道如下.

  • 体外循环对血浆甲状腺激素的影响

    作者:钱建华;韩冬梅;林洪启

    体外循环(CPB)期间及术后,血液稀释、低温及其他因素可以引起甲状腺激素代谢的变化,表现为血浆三碘甲状腺原氨酸(T3)或甲状腺素(T4)低下,而促甲状腺激素(TSH)则基本正常,此种情况称为低T3综合征,会对机体产生一定影响[1,2].作者观察了11例心脏手术患者体外循环前后血浆甲状腺激素的变化,报道如下.

  • 甲状腺功能亢进患者血清肝纤维化指标测定

    作者:杨萍

    肝脏对甲状腺的调控有着重要的作用[1].甲状腺功能亢进(甲亢)可使肝细胞受损[2].作者通过检测甲亢患者血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)的含量,探讨甲亢对肝细胞纤维化的影响.

  • 食管癌性狭窄及食管气管瘘患者内支架治疗体会

    作者:赵宏亮;李伟;范英杰;乔合坤

    1998年11月至2003年4月,作者应用镍钛记忆合金食管带膜内支架治疗食管狭窄24例,食管气管瘘6例,取得了满意的近期疗效,现报道如下.

  • 保留大隐静脉淋巴结清扫术治疗外阴恶性肿瘤18例

    作者:赵红霞;王秀琴;杨丽娟;盛修贵

    外阴恶性肿瘤的传统手术方法为外阴根治术加双侧腹股沟淋巴结清扫术,后者常规结扎切断双侧大隐静脉及其主要分支,术后切口皮瓣常延迟愈合,感染发生率高,且易并发下肢水肿、下肢静脉血栓形成、疼痛、感觉异常等并发症[1].1990年1月至2004年7月,作者在行上述式术时保留大隐静脉治疗外阴恶性肿瘤18例,效果较好,报道如下.

  • 经胸壁乳晕入路腔镜甲状腺切除术7例体会

    作者:王耿泽;任武

    2003年9月至2004年6月,作者采用行经胸壁乳晕途径的腔镜甲状腺部分切除术治疗单发甲状腺腺瘤7例,效果满意,报道如下.

  • 消化道类癌122例诊治体会

    作者:张连平;谷元廷

    类癌又称嗜银细胞癌,结构类似癌,生物学特性却与癌不同,临床表现不明显,易被忽视[1].1987年4月至2004年9月,本科收治消化道类癌122例,现将诊治体会总结报道如下.

    关键词: 消化道 类癌 诊治 预后
  • 区域性门静脉高压症20例诊治体会

    作者:赵永福;唐哲;冯留顺

    区域性门静脉高压症(regional portal hypertension,RPH)也称左侧门静脉高压症,是肝外型门静脉高压症的一种特殊类型,可经脾切除治愈[1].本院1976年5月至2002年12月收治RPH 20例,治疗效果良好,报道如下.

  • 血管活性药物海绵体内注射致阴茎异常勃起46例处理体会

    作者:邵立钦

    阴茎异常勃起是指阴茎长时间持续勃起,并出现一系列病理、生理变化,自然情况下较少见.血管活性药物海绵体内注射(ICI)可以导致阴茎异常勃起[1].1993年12月至2003年12月,本科采用阴茎海绵体内注射罂粟碱和前列腺素(PGE1)等药物检查、诊断和治疗勃起功能障碍(ED)940例,发生阴茎异常勃起46例(4.89%),妥善处理后,均未出现严重后果,现报道如下.

  • 沙利度胺联合VAD方案治疗多发性骨髓瘤24例

    作者:陈玉清;李琳;张茵;臧玉柱;席雨人;李晓雯

    VAD(长春新碱、阿霉素、地塞米松)方案是治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的常用方案,但部分患者存在原发耐药或缓解后复发.近年来研究发现沙利度胺(反应停,thalidomide)有治疗MM作用,并且对难治复发者也有效[1,2].作者应用沙利度胺联合VAD方案治疗24例MM,现报道如下.

  • 巨块型肝癌术前经导管动脉灌注化疗栓塞60例

    作者:陈刘生

    目前,巨块型肝癌经导管动脉灌注化疗栓塞(transcatheter hepatic arterial chemoembolization,TACE)治疗是一种积极有效的措施.但是,临床应用TACE治疗并不能使肿瘤细胞完全坏死[1].作者对TACE治疗的60例巨块型肝癌栓塞后进行DSA图像与病理分析,现报道如下.

  • 前牙牙冠延长术32颗临床观察

    作者:焦静

    由于临床牙冠过短或残根断端位于龈下而无法修复的牙齿,需采用牙冠延长术,以保证修复体有足够的固位及修复后牙周组织的健康[1].2001年8月至2004年8月,本科对30例32颗前牙行牙冠延长术,效果较好,报道如下.

  • 黄体期单纯应用GnRHa引起卵巢过度刺激反应1例

    作者:孙莹璞;曹彤;郭艺红;苏迎春

    黄体中期应用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂(GnRHa)是IVF常用超排卵方案,其并发症之一是可致卵巢囊肿[1,2],但单独应用引起多发囊肿形成卵巢过度刺激反应者极为少见.作者报道1例如下.

  • 丙种球蛋白治疗新生儿ABO溶血46例

    作者:王玉梅;王秀芳;敬明辉

    1999年7月至2002年10月,作者在常规治疗的基础上,静脉应用丙种球蛋白(IVIG)治疗新生儿ABO溶血病46例,疗效满意,现报道如下.

  • 自体断冠再接术治疗41颗外伤牙疗效观察

    作者:李路平

    2000年1月至2004年5月,作者对本科收治的32名患者41颗冠折上前牙施行活髓切断术或间接盖髓术后行断冠再接,疗效满意,报道如下.

  • 平阳霉素联合子宫动脉栓塞治疗子宫腺肌病28例观察

    作者:吕向华;许雅娟;蒋素玲

    2001年4月至2003年11月,本科对28例子宫腺肌病患者在子宫动脉栓塞术(uterine artery embolization,UAE)中加用平阳霉素治疗,既有效缓解了痛经症状,又保留了子宫,疗效满意,现报道如下.

  • 恶性肿瘤骨转移并高钙血症7例

    作者:牛春莲;张靖;王明英

    恶性肿瘤骨转移常并发高钙血症,其发生率约为10%~20%[1].本症可出现多器官功能失调,但许多症状缺乏特异性,常被忽视,延误诊治.2003年1月至2004年12月,作者收治恶性肿瘤骨转移并高钙血症患者7例,现报道如下.

  • 无张力双层补片治疗腹股沟疝36例

    作者:梁冰;韩斌

    2002年2月至2003年2月,作者采用无张力双层补片治疗腹股沟疝患者36例,与同期传统疝修补术进行比较,近期效果比较满意,现报道如下.

  • 应用双吻合器实施低位直肠癌保肛术36例体会

    作者:郭胜利

    直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率呈增长趋势,以中低位直肠癌较多[1].1999年3月至2003年3月,本科应用全直肠系膜切除(TME)结合双吻合器技术行低位直肠癌保肛手术36例,效果满意,报道如下.

  • 门静脉高压症术后再出血50例外科治疗体会

    作者:冯留顺;李月光;马秀现;叶学祥;许培钦

    肝硬变门静脉高压症术后再出血是目前临床处理的难题之一.作者对本院1983年至2002年门静脉高压症术后再出血50例的临床资料进行回顾分析,报道如下.

  • 肝硬化患者门脉系统血流动力学测定

    作者:付雪琴;姚兰杰;阎秋丽;时爱兰

    2002年1月至2004年3月,作者对146例肝炎后肝硬化患者门脉系统血流动力学指标进行测定,探讨肝硬化患者门脉血流与食管静脉曲张、肝功损害程度的关系.

  • 早期康复治疗对脑出血患者预后的影响

    作者:马丽;侯巧红;郭建超;许予明

    脑出血可增加致残率,影响患者生活质量[1].作者对42例急性脑出血患者采用常规治疗的同时辅助早期系统的康复治疗,并以常规治疗的42例作对照,探讨早期康复治疗对脑出血患者预后的影响.

  • 产科急症子宫切除17例临床分析

    作者:梁爱青

    目前,我国孕产妇主要死亡原因中,产科出血仍位于首位,农村死于产科出血的病例占全国死于产科出血病例的80%以上[1].本院自1998年1月至2004年12月共收治产科患者13 066例,因保守治疗无效的产科出血行急症子宫切除17例,现对其临床资料进行回顾分析,总结报道如下.

  • 窝沟封闭剂治疗早期窝沟龋170颗牙

    作者:曹俊英

    窝沟封闭剂涂布窝沟不仅是预防窝沟龋发生的一种有效方法,而且可用于窝沟可疑龋和初期龋的治疗[1].作者使用窝沟封闭剂治疗早期窝沟龋效果较好,报道如下.

  • 上消化道恶性肿瘤患者化疗前后血清TSGF含量变化

    作者:王瑞玲;张士兰

    恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)也称恶性肿瘤相关物质,与恶性肿瘤的发生、发展关系密切,已应用于恶性肿瘤的早期诊断[1].为探讨TSGF与上消化道恶性肿瘤化疗疗效的关系,2001年以来,作者对126例晚期上消化道恶性肿瘤患者化疗前后分别进行了血清TSGF检测,现报道如下.

  • 小儿泪囊炎泪囊分泌物细菌培养及药敏试验结果分析

    作者:陈敏;卢跃兵

    2002年4月至2004年6月,作者对本院收治的423例小儿泪囊炎泪囊分泌物标本进行细菌培养及药敏试验,现将结果分析报道如下.

  • 重症急性胰腺炎合并深部真菌感染39例诊治体会

    作者:吴阳;张水军;赵永福

    重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)由于多合并感染、多器官功能衰竭等严重并发症,尤其合并深部真菌感染,病死率较高,预后不良[1].1998年8月至2004年8月,本科收治合并深部真菌感染的SAP患者39例,现将诊治体会报道如下.

  • 胃镜检查中瑞芬太尼联合咪唑安定镇痛40例观察

    作者:刘春兰;孙燕;马民玉

    随着电子纤维胃镜的广泛应用,食管狭窄及胃内异物、肿物的检查治疗均可无痛在胃镜下完成[1].作者比较了瑞芬太尼联合咪唑安定和单纯瑞芬太尼在纤维胃镜检查治疗中的镇痛效果和安全性,报道如下.

  • 高位胆管癌24例外科治疗体会

    作者:张举明

    高位胆管癌是指发生于左、右肝管,左右肝管汇合处和肝总管上1/3段的黏膜上皮癌,又称Klastskin瘤或肝门部肝管癌,约占肝外胆管癌的58%~75%[1].因其特殊的解剖关系及生物学特征,手术切除率极低.作者回顾分析本院1994年2月至2003年8月收治的24例高位胆管癌患者的临床资料,现报道如下.

  • 内镜下十二指肠乳头括约肌切开治疗胆总管结石140例体会

    作者:冯素萍;姜海波;王敬贞;马应杰

    2001年9月至2003年9月,作者采用内镜下十二指肠乳头括约肌切开术(EST)治疗胆总管结石140例,取得了较好的效果,现报道如下.

  • 脊髓栓系综合征患儿尿动力学测定

    作者:史云菊;齐艳

    脊髓栓系综合征(TCS)常见的解剖异常为脊髓脊膜膨出和隐性脊柱裂[1].作者比较分析了脊髓脊膜膨出和隐性脊柱裂患儿下尿路尿动力学表现,为临床治疗提供依据.

  • 血栓性血小板减少性紫癜14例治疗体会

    作者:郭建社;梅海燕;陈善华

    1999年3月至2003年9月,作者用血浆置换术(PE)结合冷上清输注治疗血栓性血小板减少性紫癜(TTP)14例,疗效满意,现报道如下.

  • 胃癌术后2种辅助化疗方法效果比较

    作者:刘俊叶;申学昌;刘义兴;冯献明

    近年来术后辅助化疗越来越受到临床工作者的重视[1].1998年至2000年,作者采用全身化疗+腹腔灌注化疗治疗晚期胃癌术后患者50例,疗效满意,报道如下.

  • 多胎妊娠15例护理体会

    作者:刘爱清;程国梅

    多胎妊娠属高危妊娠[1],孕妇并发症多,早产发生率及围产儿死亡率高,加强多胎妊娠产前、产时及产后的护理管理,对于减少母儿并发症至关重要.现将本院近3 a来共收治多胎妊娠15例的护理体会报道如下.

    关键词: 多胎妊娠 护理 体会
  • 婴幼儿先天性心脏病术后再次气管插管28例护理体会

    作者:邱武英;张林虹;周彩峰

    婴幼儿先天性心脏病(先心病)术后可因多种原因而造成再次气管插管辅助通气.2001年至2004年,本科收治的先心病患儿在CICU行再次插管28例,现将护理体会报道如下.

  • 高龄患者腹腔镜胆囊切除术后护理

    作者:王云霞;屈清荣;马继红

    腹腔镜胆囊切除术(LC)具有创伤小,痛苦轻,恢复快,术后并发症发生率低,住院时间短等优点[1].但老年患者由于代偿、修复、愈合等能力较差,LC术后仍存在较大潜在危险,故做好术后护理有着重要的作用.2003年以来,本科共收治60岁以上结石性胆囊炎患者65例,LC术后恢复良好,护理效果满意,报道如下.

  • 腹腔镜下子宫肌瘤挖除术98例护理体会

    作者:王雪芳;杨继梅

    腹腔镜手术是近几年开展的微创手术,具有损伤小、术中出血少、术后皮肤不留瘢痕、患者机体恢复快、住院时间短等优点[1].2000年10月至2004年7月,行腹腔镜下子宫肌瘤挖除术98例,疗效满意,现将护理体会报道如下.

  • 小儿神经源性大小便失禁126例围手术期整体护理

    作者:王汴云;张桂菊;孔建峰

    本院自1992年1月至2003年12月治疗先天性小儿腰骶部脊髓脊膜膨出修补术后大小便失禁126例,现将围手术期整体护理总结如下.

  • B19 VP2抗原真核表达载体的构建及免疫原性观察

    作者:胡军;戚敏;张世杰;宋建伟;赵国强

    目的:探讨以B19 VP2基因为靶基因构建的真核表达载体作为基因疫苗的免疫原性.方法:用PCR方法以pGEM1-B19为模板扩增出B19 VP2目的基因;将其重组入真核表达载体pcDNA3;将重组子pcDNA3-VP2及空质粒分别用脂质体包裹接种家兔;ELISA方法检测家兔血清中B19 VP2抗体产生情况.结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3-VP2;其作为基因疫苗接种家兔后可产生滴度较高,持续时间较长的抗体.结论:B19 VP2基因可作为B19病毒基因疫苗构建的靶基因.

  • 郑州市B19病毒分离株全基因的克隆及序列测定

    作者:赵国强;宋建伟;戚敏;张世杰;陈宗德

    目的:克隆和测定在郑州市得到的B19病毒分离株全基因序列.方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术从1例B19阳性的流产患者血清中分段扩增B19病毒全基因,获得7个互相重叠的片段,分别长814 bp(1~814),849 bp(753~1 601),663 bp(1 523~2 185),738 bp(2 124~2 861),1 011 bp(2 790~3 800),1 014 bp(3 747~4 760),914 bp(4 681~5 594).将其分别克隆入T载体,进行测序分析.结果:郑州市B19病毒分离株全基因长5 594个核苷酸,有3个开放读码框架(ORF).第1个ORF位于615~2 630位核苷酸,编码672个氨基酸,第2个ORF位于2 623~4 968位核苷酸,编码782个氨基酸,第3个ORF位于3 304~4 968位核苷酸,编码555个氨基酸.在该基因中4种碱基在基因组中所占比例为:A,29.58%(1 655/5 594),T,26.52%(1 484/5 594),G,22.88%(1 280/5 594),C,21.02%(1 175/5 594).郑州B19病毒分离株基因序列与GenBank中NC_000883高度同源;存在10个碱基改变,只有1个引起氨基酸改变(3 752位C→G导致Ser→Cys).结论:郑州B19病毒分离株和NC_000883属同一基因型.

  • 郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19感染情况测定

    作者:靳静;冷弘;徐慧丹;刘全离;赵国强

    目的:了解郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19的感染情况.方法:采用ELISA和PCR方法分别检测郑州市237例正常孕妇及29例不明原因流产或死胎孕妇血清中B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA表达情况.结果:29例流产或死胎孕妇B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA阳性率分别为51.7%(15/29)、6.9%(2/29)和13.8%(4/29),237例正常孕妇B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA阳性率分别30.4%(72/237)、1.3%(3/237)和2.5%(6/237),差异均有统计学意义(P<0.05).结论:郑州市孕妇中存在人微小病毒B19的感染,可能导致不明原因流产或死胎.

  • 人微小病毒B19 VP2蛋白抗原在大肠杆菌中的表达

    作者:胡军;王岚;宋建伟;陈宗德;赵国强

    目的:利用原核系统表达人微小病毒B19的重组蛋白抗原,为建立ELISA方法诊断B19病毒感染提供特异性抗原.方法:采用PCR方法扩增B19 VP2基因,将之插入到T载体中进行测序,验证序列正确后再重组入原核表达载体pET-30a(+),并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行诱导表达.用SDS-PAGE分析表达产物.表达 产物经亲合层析柱纯化得到VP2重组蛋白抗原.用B19 VP2 IgG对该蛋白进行了Western-Blot分析.结果:筛选出2株B19 VP2蛋白抗原高表达菌株,经IPTG诱导后,表达VP2重组蛋白量占菌体总蛋白量的24.6%.结论:VP2重组蛋白具有良好的抗原活性.

  • 荧光定量PCR检测B19病毒方法的建立

    作者:赵国强;胡军;冷弘;王岚;陈宗德

    目的:建立采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人微小病毒B19的方法.方法:根据B19病毒VP2基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针.将PCR扩增的B19病毒VP2区基因片段克隆入pGEM-T载体,重组质粒pGEM-T-VP2经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测;对15例B19病毒感染血标本和几种其他病毒进行PCR测定.结果:应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系;与定量对照曲线比较计算,15例B19病毒感染标本中B19拷贝数为4.8×10 5μl-1~8.7×10 8μl-1;对其他几种病毒的扩增均无信号出现.结论:成功建立了检测B19的荧光定量PCR方法,较常规PCR技术更为简便、快速、准确,有很好的应用前景和研究价值.

    关键词: B19 荧光定量PCR 检测
  • HBsAg和B19 VP2复合抗原的基因克隆及在大肠杆菌中的表达

    作者:赵国强;张世杰;刘全离;徐慧丹;陈宗德

    目的:构建乙肝表面抗原(HBsAg)-人微小病毒B19VP2蛋白的原核高效表达系统.方法:用PCR扩增HBsAg基因及B19病毒VP2基因,分别与pGEM-T重组,构建出pGEM-T-HBs及pGEM-T-VP2并测序分析;测序证实序列正确后,将pGEM-T-HBs中的HBs基因克隆入pGEX-5X-1表达载体中,得到pGEX-5X-1-HBs;再将pGEM-T-VP2中的VP2基因克隆入pGEX-5X-1-HBs中,得到pGEX-5X-1-HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中,并以IPTG诱导表达融合蛋白,以Western-blot鉴定.结果:pGEX-5X-1-HBs-VP2可在大肠杆菌BL21中高效表达,表达产物经Western-blot鉴定具有HBsAg及B19 VP2的双重抗原性.结论:成功构建pGEX-5X-1-HBs-VP2原核表达载体,且其表达的重组蛋白具有良好的抗原性,为HBV和B19病毒重组多价疫苗的研究奠定了基础.

    关键词: B19 VP2 HBsAg 原核表达
  • 槲寄生不同溶剂提取物对血小板活化因子的拮抗作用观察

    作者:万鼎铭;徐从高;张茂宏

    目的:观察中药槲寄生不同溶剂提取物对血小板活化因子(PAF)的拮抗作用.方法:应用血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集,以槲寄生的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和水提取物分别给兔灌胃.观察灌胃前,灌胃后4 h和8 h各提取物对兔血小板聚集功能的影响.结果与结论:槲寄生对PAF诱导的血小板聚集有抑制作用.槲寄生水提取物及乙酸乙酯提取物均有拮抗PAF的作用.

  • 高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响

    作者:万鼎铭;徐从高;张茂宏

    目的:探讨高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响.方法:利用HG预处理人体主要的炎症细胞多形核白细胞(PMN),测定PAF刺激下PMN产生的炎症介质IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和白三烯B4(LTB4).结果:PAF可刺激PMN产生炎症介质TNF-α、LTB4;HG能完全抑制PAF所致的PMN产生TNF-α,HG能部分抑制PAF所致的PMN产生LTB4;PAF和HG均对PMN产生IL-1β、IL-6及IL-8无影响.结论:HG作为PAF拮抗剂,可抑制炎症介质产生而发挥抗炎作用.

  • 高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙抗血小板活化因子的竞争抑制实验

    作者:万鼎铭;徐从高;张茂宏

    目的:探讨槲寄生抗血小板活化因子(PAF)的有效活性成分高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)的作用机制.方法:利用不同浓度HG对[3H]PAF结合的竞争抑制实验.结果:HG能够将[3H]PAF置换下来,且置换呈剂量依赖性和饱和性的特点.结论:HG是通过PAF受体而发挥特异性的PAF拮抗剂作用.

  • 槲寄生中血小板活化因子拮抗剂有效成分的纯化及鉴定

    作者:万鼎铭;徐从高;张茂宏

    目的:提纯槲寄生中血小板活化因子(PAF)拮抗剂有效活性成分并鉴定其分子结构.方法:利用硅胶柱层析分离出槲寄生乙酸乙酯剂结晶化合物及槲寄生水剂结晶化合物.再利用红外光谱分析、核磁共振谱分析和质谱分析进行分子结构鉴定.结果与结论:槲寄生中的PAF拮抗剂有效活性成分是高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙.

郑州大学学报(医学版)分期目录
期数
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