非糜烂性胃食管反流病发病机制探讨

一、定义有关非糜烂性胃食管反流病(non-erosive gastroesophgeal reflux disease NERD)的定义尚有争议,目前认为NERD有典型的胃食管反流病症状如反酸、烧心等,症状是由食管腔内酸导致的,但在胃镜下无阳性发现[1].这个定义提示反流症状的产生需要酸,但并不仅仅与酸暴露的严重程度和频度有关,还与食管对酸的感知有关.对于有反流症状并且胃镜下无阳性发现的病人,约50%～70%24小时pH监测有异常的酸暴露,30%～50%24小时pH监测正常,被称为功能性烧心.而功能性烧心病人根据其24小时pH监测的症状指数的阳性和阴性又分为两组,症状指数阳性病人被称为酸敏感食管.

放大内镜检查在消化道疾病中的诊断价值

目前消化道肿瘤的发病率,尤其是结肠肿瘤的发病率日趋增加,然而消化道肿瘤的早期往往无症状.如何发现微小早期病变,特别是如何提高早期癌、微小癌的检出率,需要内镜诊断技术的不断发展.近高像素和高分辨率放大内镜的问世,可以达到活体解剖显微镜和光学显微镜的效果;结合染色法应用,能够更清晰地观察到黏膜的微细结构,为早期癌、微小癌的发现以及鉴别良、恶性病变提供帮助[1].

小肠疾病诊断现状

小肠疾病并非少见,国内尚无发病率方面的报告,美国约有2000万人患病[1].小肠疾病主要包括五大类:①感染性疾病:大肠杆菌、耶尔森菌、空肠弯曲菌、霍乱及副霍乱弧菌、病毒等引起的感染性腹泻,结核杆菌引起的小肠结核,阿米巴、贾第虫、蛔虫、蛲虫、钩虫、绦虫等引起的小肠寄生虫病等;②肿瘤:息肉、癌、类癌、淋巴瘤、平滑肌瘤及平滑肌肉瘤、脂肪瘤及脂肪肉瘤、纤维瘤及纤维肉瘤等;③血管性病变:血管瘤、血管发育不良等;④原因不明:急性出血坏死性小肠炎、非特异性小肠溃疡、Crohn病、Whipple病等;⑤其他:如憩室、放射性肠炎、各种原因引起的小肠吸收不良等.在众多小肠疾病中,血管发育不良、息肉、癌、类癌、淋巴瘤、Crohn病、憩室等是造成原因不明的消化道出血的主要根源.小肠有消化和吸收及运动功能,消化和吸收功能障碍如胰源性、胆源性或肠源性腹泻等,运动功能障碍如原发性假性小肠梗阻等,这些疾病在临床上也会遇到.但本文仅对上述的五类疾病的诊断方法作一综述.

蛋白质组学在大肠癌研究中的应用

人类基因组计划(human genome project,HGP)的完成,宣告了一个新纪元的到来--后基因组时代,其中功能基因组学(functional genomics)成为研究的重心,蛋白质组学(proteomics)则是其"中流砥柱".随着蛋白质组学研究的不断深入,现已形成了一个"肿瘤蛋白质组学(cancer proteomics)"的分支.大肠癌是人类的一种常见的恶性疾病,可作为肿瘤蛋白质组学研究的典范,近年来有关大肠癌蛋白质组学研究已有报道.

呼气试验在消化内科中的应用

呼气试验的原理是应用核素13C和14C标记底物,通过口服进入人体,利用质谱仪或能谱仪检测终产物13CO2和14CO2的变化以了解体内代谢反应及生理过程.近年来呼气试验在消化内科领域被广泛应用于幽门螺杆菌感染检测、胰腺外分泌功能检测、肝脏储备功能检测、胃排空检测、小肠吸收功能检测等,因其非侵入性、简单、方便受到人们的青睐.

肠易激综合征患者胆囊运动功能的研究

目的了解肠易激综合征患者的胆囊运动功能情况,协助肠易激综合征的治疗.方法我们通过对健康志愿者(对照组)和肠易激综合征患者(IBS组)用核素显相测定胆囊排空功能.结果 IBS组23例中有13例(56.5%13/23),对照组16例中有4例(25%4/16),餐后1小时胆囊排空指数(GBEF)降低,两组比较差异有显著性(P＜0.01).餐后30、40、50和60 min GBEFIBS组均低于对照组,差异有非常显著性(P＜0.01).结论 IBS组胆囊排空率下降,排空功能不良.在治疗肠易激综合征同时予利胆促动力剂治疗.

3%双氧水喷洒对老年急性上消化道出血病人胃腔视野改善情况

目的评价3%双氧水对老年急性上消化道出血病人胃腔视野改善情况.方法 2000年3月～2003年12月对228例老年急性上消化道出血进行急诊胃镜检查,64例因胃腔视野不清末发现出血病灶,进入本研究,其中男38例,女26例.先对可疑出血病灶及胃腔照相,再通过活检孔向胃腔喷洒200 ml生理盐水,3分钟后吸尽胃腔液体,照相后换用200ml 3%双氧水喷洒,3分钟后吸尽胃腔液体,再对出血病灶及胃腔照相.由第三位胃镜专家对照片进行视野清晰度评分,同时观察出血部位,出血病灶性质、出血病灶止血情况.结果喷洒3%双氧水后胃腔视野清晰度评分为2.26±0.23,发现出血部位88%(50/57)、确定出血病灶性质82.46%(47/57),活动性出血停止71.9%(41/57),而喷洒生理盐水后则分别为0.44±0.25、11%(7/64)、7.81%(5/64)、6.25%(4/64),二者相比均有非常显著性差异,P＜0.001;42%患者有轻微上腹不适症状.结论3%双氧水喷洒能改善老年人急性上消化道出血患者胃腔视野清晰状况,提高胃镜诊断率、并有较高的止血率,无明显不良反应,值得临床推广应用.

胃癌组织中Survivin和Ki-67的表达及其临床意义

目的探讨Survivin和Ki-67在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法采用免疫组织化学技术(S-P)法检测各期胃癌共50例及12例浅表性胃炎组织中Survivin和Ki-67的表达水平,并结合病理特征进行分析.结果胃癌组织中Survivin阳性表达率为74%,显著高于浅表性胃炎组(P＜0.001).Survivin过表达与肿瘤浸润深度、淋巴结及远处转移、临床分期相关(P＜0.05),而与胃癌组织分化程度无关(P＞0.05).Ki-67抗原阳性表达率在胃癌组织中为52%,显著高于浅表性胃炎组(P＜0.01),并与胃癌组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结及远处转移、临床分期相关(P＜0.05).两种蛋白表达有关联(P＜0.01).结论 Survivin和Ki-67在胃癌组织中过表达,二者过表达与胃癌的发生、发展密切相关,可作为预后不良的指标.

奥沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎疗效观察

目的观察国产奥沙拉嗪钠胶囊治疗轻、中度活动期溃疡性结肠炎的治疗效果,比较国产奥沙拉嗪钠胶囊与水杨酸偶氮磺胺吡啶(SASP)对轻、中度溃疡性结肠炎(活动期)的疗效和不良反应.方法采用随机双盲方法验证56例轻中度溃疡性结肠炎(活动期)的疗效和不良反应,疗程为8周.结果国产奥沙拉嗪钠胶囊的总有效率为85%,观察组患者在临床完全缓解率、内镜完全缓解率和组织学完全缓解率在治疗8周后均比治疗前明显改善,分别达75%、35%、48%,其疗效与对照组相比无明显差异.结论国产奥沙拉嗪钠胶囊治疗活动期轻、中度溃疡性结肠炎有效,其结果与SASP相当,主要不良反应为腹泻,继续用药或合并使用抗腹泻药后,腹泻即消失.

胃黏膜癌前病变中p53、p21ras蛋白表达与幽门螺杆菌感染的关系

目的观察幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)感染及根除H.pylori二年后p53、p21ras在二组胃黏膜上皮细胞的表达,探讨H.pylori在胃癌发生、发展中的作用.方法应用免疫组织化学染色、尿素酶快速试验(RUT)、组织学Warthin-Starry染色.198例H.pylori感染患者,慢性胃炎86例,慢性胃炎伴肠化生67例,慢性胃炎伴异型增生45例;对照组为根除H.pylori 2年后共86例,其中慢性胃炎54例,慢性胃炎伴肠化生32例,慢性胃炎伴异型增生10例.全部病例做p53、p21ras免疫组织化学染色.结果 H.pylori感染组p53、p21 ras 阳性表达率15.7%、18.7%,明显高于H.pylori根除组2.3%、7%,差异显著(P＜0.05);慢性胃炎伴肠化病变中,p53、p21ras在H.pylori感染组阳性表达率17.9%、18.4%均高于H.pylori根除组0%、9.4%,差异显著(P＜0.05):慢性胃炎伴异型增生病变中,p53、p21 ras在H.pylori感染组阳性表达率31.1%、40%均高于H.pylori根除组20%、30.4%,差异显著(P＜0.05);H.pylori 感染组p53、p21ras在慢性胃炎,肠化生,异型增生表达水平依次增高:p53、p21ras共同表达阳性37例.结论在胃黏膜癌前病变中p53、p21ras 在H.pylori感染组阳性表达率高于H.pylori根除组,差异显著(P＜0.05);在慢性胃炎,肠化生,异型增生p53、p21ras表达水平在增高;p53、p21 ras表达呈正相关;H.pylori感染在胃癌发生、发展过程中起一定作用,p53、p21ras表达可能是H.pylori致癌的作用机理之一.

2-(3羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人胃癌细胞系(SGC-7901)的诱导凋亡作用

目的观察2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COADG)体外诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用,探讨其可能作用机理.方法采用MTT法,筛选药物作用佳浓度.用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量,透射电镜观察凋亡细胞的超微结构.结果 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖能明显抑制胃癌细胞的增长,MTT法显示抑制程度具有时间和剂量效应关系,统计组间比较差异有显著性;流式细胞仪分析可见亚二倍体(Sub-G1)凋亡峰;电镜观察到凋亡小体.结论 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖有诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用.

推进式双气囊电子小肠镜在小肠疾病诊断中的评估

目的评价推进式双气囊电子小肠镜(double-balloon push enteroscopy,DBE)在小肠疾病诊断中的价值.方法总结22例疑小肠疾病DBE检查的临床资料,上述患者均经胃镜、肠镜、X线钡餐、小肠钡剂灌肠和血管造影等检查未发现异常.结果 22例共行DBE检查26例次(15例次接受了口侧进镜,11例次接受了肛侧进镜),每侧进镜术程平均80 min.DBE检查共发现异常14例,检出率为63.6%.其中不明原因消化道出血10例,DBE检出病变6例;腹痛和(或)呕吐待查7例,DBE检出病变5例;慢性腹泻待查4例,DBE检出病变2例;不明原因不完全性肠梗阻1例,DBE检出病变1例.口侧进镜患者,术中多数出现恶心、消化液自口经外套管口溢出,偶尔出现一过性轻微腹痛;肛侧进镜患者无明显不适及反应,未出现出血、穿孔等并发症.结论DBE作为一种新型小肠疾病检查手段,明显优于传统的检查方法,可重复直视操作下观察病灶,通过活检对病变进行定性检查,具有安全、可控性、直视和图像清晰等优点,在诊断小肠疾病方面更具有优越性.

胃癌前组织和胃癌中hTERT、Bcl-2蛋白的表达及其相互关系

目的探讨胃癌前组织及胃癌中人端粒酶催化亚单位(humantelomerase catalytic subunit,hTERT)的表达状况及其与Bcl2蛋白表达的关系.方法应用免疫组织化学技术检测45例慢性胃炎和19例胃癌中hTERT和Bcl-2蛋白的表达.结果 hTERT蛋白表达率在萎缩性胃炎、肠化生、异形增生和胃癌等不同胃黏膜癌变过程中呈递增趋势;hTERT蛋白的表达率在胃癌组织中显著高于异形增生、肠化生和萎缩性胃炎组织(P＜0.05);在异形增生组织中显著高于肠化生和萎缩性胃炎组织(P＜0.05);在肠化生组织中显著高于萎缩性胃炎组织(P＜0.05).Bcl-2蛋白表达率在萎缩性胃炎、肠化生、异形增生和胃癌等不同胃黏膜癌变过程中呈递增趋势;Bcl-2蛋白的表达率在胃癌组织中显著高于异形增生、肠化生和萎缩性胃炎组织(P＜0.05);在异形增生组织中显著高于萎缩性胃炎组织(P＜0.05),亦高于肠化生,但是相差无显著性;在肠化生组织中显著高于萎缩性胃炎组织(P＜0.05).Bcl-2蛋白阳性患者hTERT蛋白表达率为71.43%,Bcl-2蛋白阴性患者hTERT蛋白表达率34.44%,hTERT蛋白表达率在Bcl-2蛋白阳性患者中显著高于Bcl-2蛋白阴性患者(P＜0.01).结论在胃癌和胃癌前病变阶段,端粒酶(telomerase)与Bcl-2均可能发挥重要作用,促进了胃癌的发生、发展;Bcl-2表达增加可能是胃黏膜上皮细胞端粒酶激活的主要机制之一.

COX-2与NF-κB在食管癌组织中的表达及关系

目的研究NF-κB与COX-2在食管癌组织中的表达及关系.方法取经手术病理证实的食管癌及癌旁组织80例,采用免疫组化法检测食管癌及癌旁组织中NF-κB和COX-2的表达情况.结果食管癌组织中NF-κB和COX-2的表达率分别为58.75%和61.25%,癌旁组织中NF-κB和COX-2的表达率分别为3.75%和13.75%.NF-κB主要表达于胞核和胞浆,COX-2主要表达于胞浆.COX-2的表达和NF-κB的表达呈正相关(P＜0.05).结论 NF-κB和COX-2在食管癌组织中均有高水平的表达,NF-κB和COX-2有可能参与食管癌的发生发展,其可能机制是NF-κB促进了COX-2的表达.

整合素β1在胃癌及其淋巴转移灶中的表达及临床意义

目的探讨整合素β1在胃癌中的表达及其生物学行为的关系,并进行临床病理学评估.方法采用S-P免疫组化方法检测整合素β1在64例胃癌原发灶及其淋巴结转移灶中的表达情况.结果原发灶癌细胞成的表达率为90.63%左右,淋巴结转移性胃癌组织β1阳性表达率可高达100%,淋巴结转移灶中癌细胞呈非均质性强着色,非转移性淋巴结的淋巴细胞中均未观察到β1阳性产物的表达,胃癌原发灶及其淋巴结转移灶中整合素β1表达程度明显强于邻近正常胃黏膜.结论整合素β1与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移状况等临床病理因素密切相关,其表达的检测对评估胃癌淋巴结转移程度和分析胃癌分期具有一定临床价值.

凋亡相关基因caspase-9、Bcl-2在大肠腺瘤和大肠癌中的表达及意义

目的探讨凋亡相关基因caspase-9和Bcl-2在大肠腺瘤、大肠癌中的表达及意义.方法应用免疫组化S-P法检测56例大肠癌、48例大肠腺瘤及20例正常大肠黏膜中的caspase-9和Bcl-2蛋白的表达.用TUNEL法检测细胞凋亡.结果正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌中caspase-9的阳性表达率分别为5.00%、33.33%、64.29%,其表达率在三者间有显著性差异(P＜0.01).Bcl-2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌中的阳性表达率分别为15.00%、87.50%、60.71%,三者间亦有显著性差异(P＜0.01).caspase-9,Bcl-2的表达与肿瘤的分化程度有关(P＜0.01),与Dukes分期无关(P＞0.05).正常大肠黏膜、腺瘤和大肠癌中凋亡指数有显著性差异(P＜0.01),凋亡指数与肿瘤的分化程度有关(P＜0.01),与Dukes分期无关(P＞0.05).caspase-9,Bcl-2的表达与凋亡指数有密切联系(P＜0.01).结论在大肠癌形成过程中,caspase-9,Bcl-2参与了肿瘤形成的共同通道;肿瘤早期阶段细胞凋亡的异常和增生过度,可能是大肠癌的发病原因之一.

小儿原发性胃肠道非霍奇金淋巴瘤(附12例报道及文献复习)

目的探讨小儿原发性胃肠道非霍奇金淋巴瘤的临床特征及误诊因素.方法回顾性分析12例小儿原发性胃肠道非霍奇金淋巴瘤的临床资料.结果本组12例,其中男性9例,女性3例.年龄5～14岁.病期:一期4例,二期6例,三期2例.误诊11例.全组病人均行手术治疗,手术切除率100%(含姑息切除2例),部分病人进行了术后化疗.预后:一、二期优于第三期;低度恶性者优于中、高度恶性者.结论本病缺乏特异的症状和体征,早期诊断困难,加上对该病缺乏认识是临床误诊的主要原因.本病的预后与其病期,病理生物学和治疗措施密切相关.

缬草波春联合Caspases抑制剂诱导MKN45胃癌细胞凋亡

目的研究中草药缬草提取物缬草波春联合Caspases抑制剂诱导MKN45胃癌细胞凋亡的作用.方法将MKN45胃癌细胞分成4组:第1组加入同体积的生理盐水为对照;第2组分别加入浓度为10μM的Caspases-3、-8、-9抑制剂;第3组加入浓度为100 mg/L的缬草波春;第4组加入浓度为10μM的Caspases-3、-8、-9抑制剂+浓度为100 mg/L的缬草波春混合物.药物作用24小时、48小时、72小时后,用流式细胞计分别检测凋亡率.结果 24、48、72小时作用后,第2组诱导MKN45细胞的凋亡率与对照组相似(P＞0.05);第3组诱导MKN45细胞的凋亡率明显高于照组相(P＜0.01);第4组中缬草波春联合Caspases-3、-9抑制剂诱导MKN45细胞的凋亡率均与对照组相似(P＞0.05);缬草波春与Caspases-8抑制剂联合应用组诱导MKN45细胞的凋亡率明显高于对照组比(P＜0.01),与第2组相似(P＞0.05).结论缬草波春能诱导MKN45胃癌细胞凋亡,诱导凋亡能被Caspases-3、-9抑制剂抑制,Caspases-8抑制剂对缬草波春诱导的凋亡无影响.

黏着斑激酶在结肠癌中的表达与临床意义

目的研究黏着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)在结肠癌中的表达水平与侵袭、转移及分化的关系.方法用免疫组织化学S-P法检测45例结肠癌及对应的癌旁组织的FAK的表达.结果癌与癌旁组织表达率分别为82.22%(37/45)、28.89%(13/45),有显著差异性(P＜0.01).癌组织中FAK表达率在分化程度(P=0.014)、浸润深度(P=0.003)和淋巴结转移(P=0.016)中有显著差异性,在年龄(P＞0.05)、性别(P=0.246)、及远处转移(P=0.818)中无差异.结论结肠癌中FAK的表达水平明显升高,与分化程度、浸润、淋巴结转移相关.可望作为癌症治疗的新领域.

凋亡相关基因caspase-9,Bax在大肠腺瘤和大肠癌中的表达及意义

目的探讨细胞凋亡相关基因caspase-9、Bax在大肠癌发生、发展中的可能作用及相互关系.方法采用免疫组织化学S-P法和TUNEL技术分别检测20例正常大肠黏膜,48例大肠腺瘤,56例大肠癌中caspase-9,Bax蛋白的表达水平及细胞凋亡.结果 Caspase-9在正常大肠黏膜,腺瘤,癌组织中的表达率分别为5.00%、33.33%、64.29%,三者间有明显差异(P＜0.01),在腺瘤和癌组织中其表达均高于正常黏膜;Bax在三者间的表达率分别为5.00%、27.08%、57.14%,三者间亦有明显差异(P＜0.01).大肠癌及大肠腺瘤中的细胞凋亡率显著高于正常黏膜(P＜0.01),随着癌组织分化程度的下降,凋亡率逐渐降低.Caspase-9,Bax的阳性表达与凋亡指数呈密切相关(P＜0.01);Caspase-9,Bax的表达均与癌组织的分化程度有关,与病理因素无关.结论在大肠癌细胞的凋亡过程中,caspase-9可能参与了大肠癌的凋亡,caspase-9和Bax在细胞凋亡的调节中可能存在密切关系.

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC7901表达bFGF的抑制作用

目的探讨乙酰肝素酶反义寡核苷酸(AS-ODN)对人胃癌细胞株SGC7901表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的影响.方法 AS-ODN和乙酰肝素酶mRNA起始密码子区互补,无义寡核苷酸(NS-ODN)为对照组,用阳离子脂质体包裹ODNs并转入SGC7901细胞;转染后48小时提取细胞总RNA,半定量RT-PCR法检测乙酰肝素酶基因的含量,免疫细胞化学法检测bFGF的表达.结果 AS-ODN处理后SGC7901表达乙酰肝素酶mRNA下降;处理前bFGF的表达率为72.23%,不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8μmol/L)AS-ODN处理后bFGF的表达率下降程度不同(分别为57.15%、51.11%、42.36%和40.25%).结论和乙酰肝素酶mRNA起始密码子区互补的AS-ODN对SGC7901表达bFGF有明显影响,且呈剂量相关性.

巨噬细胞与血管内皮生长因子在消化道平滑肌肿瘤中的表达及意义

目的探讨消化道平滑肌肿瘤组织中巨噬细胞(CD68)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达和相互关系.方法应用SP免疫组织化学方法对74例消化道平滑肌肿瘤及22例正常组织进行CD68及VEGF的检测和分析.结果 CD68在平滑肌瘤、平滑肌肉瘤及正常平滑肌组织中的阳性率分别为82.22%、37.93%、22.73%,平滑肌瘤中的阳性表达率显菩高于平滑肌肉瘤和正常组织(P＜0.05);VEGF在平滑肌瘤和平滑肌肉瘤中的阳性表达率为15.56%、82.76%,平滑肌肉瘤中的阳性率显著高于平滑肌瘤(P＜0.05);在平滑肌肉瘤和平滑肌瘤中VEGF和CD68的表达呈显著负相关(rs分别为-0.7292和-0.6998,P＜0.05).结论消化道平滑肌瘤中有CD68的高表达,肉瘤中则有VEGF的高表达,与肿瘤的生物学特性有关,CD68和VEGF的表达在消化道平滑肌肿瘤中有等级相关性.

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位编码基因的克隆与序列分析

目的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)热休克蛋白A亚单位的编码基因(hspA)克隆和序列分析,为H.pylori基因工程疫苗的研究奠定基础.方法应用PCR方法获得国内分离H.pylori菌株MEL-HP27和国际标准参考株H.pylori的hspA基因,通过定向克隆的方法分别插入克隆载体pNEB193中,用质粒酶切电泳和特异PCR方法鉴定重组质粒.克隆基因经测序后进行核苷酸和氨基酸的同源性比较.结果重组质粒经双酶切后得到0.35kb的hspA基因片段,特异PCR可扩增出hspA基因片段,证实H.pylorihspA基因的重组克隆质粒构建成功.经测序,国内分离HpMEL-HP27的hspA基因全长357bp(Genbank收录号:AY295084),编码由118个氨基酸残基组成的肽链,hspA基因序列与GenBank公布的H.pylori相应基因同源性高达95.20%～97.48%,氨基酸序列同源性在95.76%～97.46%之间.结论克隆了H.pylori菌株MEL-HP27的hspA基因,其核酸序列与国际参考株NCTC11637同源性为97.48%.

一氧化氮抑制大鼠空肠平滑肌收缩

目的观察神经性一氧化氮合酶(nNOS)在空肠组织内的分布和一氧化氮(NO)对空肠平滑肌相位性收缩的抑制作用,初步探讨其作用机制.方法利用免疫组织化学技术和张力换能器分别测定nNOS在空肠组织内的分布和空肠平滑肌的收缩张力.结果空肠平滑肌胞浆内有大量的nNOS分布,NO对大鼠空肠平滑肌收缩张力幅度的抑制呈浓度依赖性,对张力频率和时程没有明显影响.阻断β受体时,NO抑制张力的幅度,不影响频率和时程.阻断α或M受体时,NO对张力的幅度、频率和时程均抑制,并且阻断M受体时,NO对张力的频率和时程抑制有时间依赖性.正常张力幅度2.83±0.57mN,频率26.97±6.28次/min,时程2.25±0.24s,propranolol+L-Arg分别为1.47±0.46mN(P＜0.01),25.53±2.99次/min(P＞0.05),2.48±0.22 s,(P＞0.05).phentolamine+L-Arg分别为1.29±0.53 mN(P＜0.01),22.93±1.75次/min(P＜0.05),2.80±0.23s,(P＜0.05).atropine+L-Arg分别为1.72±0.74mN(P＜0.05),17.92±4.93次/min(P＜0.01),3.68±1.11s,(P＜0.01).结论空肠平滑肌胞浆内有大量的nNOS分布,NO对空肠平滑肌相位性收缩有抑制作用,这种作用与α、β、M受体有关.

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位编码基因的克隆与序列分析

目的幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)尿素酶B亚单位的编码基因(ureB)的克隆和序列分析,为H.pylori基因工程疫苗的研究奠定基础.方法应用PCR方法获得国内分离H.pylori菌株MEL-HP27和国际标准参考株H.pylori的ureB基因,通过定向克隆的方法分别插入克隆载体pNEB193中,用质粒酶切电泳和特异PCR方法鉴定重组质粒.克隆基因经测序后进行核苷酸和氨基酸的同源性比较.结果重组质粒经双酶切后得到1.71kb的ureB基因片段,特异PCR可扩增出ureB基因片段,证实H.pyloriureB基因的重组克隆质粒构建成功.经测序,国内分离H.pylori MEL-HP27的ureB基因全长1710bp(Genbank收录号:AY295085),编码由569个氨基酸残基组成的肽链,ureB基因序列与GenBank公布的H.pylori相应基因同源性高达96.08%～98.30%,氨基酸序列同源性在98.77%～99.82%之间.结论成功克隆了MEL-HP27菌株的ureB基因,其核苷酸序列与国际参考株NCTC11637的同源性为97.67%.

小鼠接种rHBs疫苗产生的特异性淋巴细胞增殖反应

目的研究小鼠免疫接种基因重组乙型肝炎表面抗原疫苗(recombinant hepatitis B virus(HBV)surface vaccine,rHBs)产生的特异性淋巴细胞增殖反应.方法 40只BALB/c小鼠随机分为0.65、1.25、2.5、5μg四组,腹腔分别接种0.65、1.25、2.5、5μg的rHBs,一半小鼠2周后加强免疫1次.分别在初次免疫后2周或加强免疫后2周分离小鼠脾T淋巴细胞;分别进行以下实验:实验组用rHBs(10μg/ml)刺激脾T淋巴细胞,对照组用PBS代替rHBs刺激脾T淋巴细胞;3天后用3H掺入法检测脾T淋巴细胞特异性增殖反应,以3H掺入的同位素cpm值及刺激指数(Stimulation index,SI,实验组cpm值/对照组cpm值)表示.结果只接受单次免疫的0.65,1.25,2.5,5μg组小鼠脾T淋巴细胞特异性增殖反应SI分别为1.55、1.93、2.41、2.81;而接受加强免疫的0.65、1.25、2.5、5μg/组小鼠脾T淋巴细胞特异性增殖反应SI分别为1.61、2.05、3.74、3.62.结论小鼠接种rHBs后产生特异性淋巴细胞增殖反应,加强免疫或增加接种剂量可以增强反应强度.

肠易激综合征大鼠模型肠神经系统神经递质表达的初步研究

目的利用我们以往建立的便秘型肠易激综合征(C-IBS)大鼠模型,对该模型中SP、VIP、GABA、Ach、NE在肠神经系统的分布及表达进行研究,探讨这些物质在IBS发病机制中的可能作用.方法采用以往本研究小组建立的C-IBS大鼠模型,取模型组及正常对照组大鼠的回盲部、结肠标本,进行常规组织固定、包埋、切片.分别应用抗SP、VIP、GABA、乙酰胆碱酯酶(AchE)、酪氨酸羟化酶(TH)抗体进行免疫组织化学染色,结果应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的面积、不透光率密度值进行半定量分析.结果 C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中SP表达的不透光率密度明显增高(P＜0.05),阳性面积与正常对照组无显著差异(P＞0.05);C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中VIP表达的阳性面积、不透光率密度均明显增高(P＜0.05);C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中GABA表达的不透光率密度明显降低(P＜0.05),阳性面积与正常对照组无显著差异(P＞0.05);C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中AchE、TH表达的阳性面积、不透光率密度与正常对照组无显著差异(P＞0.05).结论 C-IBS大鼠模型中肠神经系统SP、VIP、GABA表达具有改变,提示这些神经递质在肠道可能参与C-IBS的病理生理过程.

布比卡因对Balb/c和C57BL/6小鼠胃酸分泌功能的影响

目的探讨布比卡因对Balb/c和C57BL/6小鼠胃酸分泌功能的影响.方法应用幽门结扎术测定了基础状态下和布比卡因局部镇痛后3小时Balb/c和C57BL/6小鼠的胃酸量(ml),胃酸度(mEq/L)和总酸量(μEq/3h),并将基础状态下两种小鼠和各自应用布比卡因前后的胃酸分泌指标进行比较.结果基础状态下Balb/c小鼠(n=9)的胃酸量和总胃酸量显著高于C57BL/6小鼠(n=10)的胃酸量和总胃酸量(分别为2.319±0.181和0.825±0.062,P＜0.001;29.105±4.90和8.565±1.203,P＜0.001);Balb/c小鼠的胃酸度稍高于C57BL/6小鼠(分别为12.311±1.737和10.36±1.313,P=0.37),但无统计学差异.应用布比卡因局部麻醉后Balb/c小鼠(n=6)的胃酸量和总胃酸量显著低于基础状态下的分泌量(分别为2.319±0.181和1.529±0.142,P＜0.05;29.105±4.90和11.956±2.516,P＜0.05);应用布比卡因局部麻醉后Balb/c小鼠的胃酸度低于其基础状态下的胃酸度(分别为12.311±1.737和6.433±1.189,P=0.07).应用布比卡因局部麻醉后C57BL/6小鼠(n=6)胃酸量、酸度和总胃酸量和基础状态下的分泌量无显著差异(分别为0.825±0.062和0.863±0.105,P=0.84;8.565±1.203和8.725±1.102,P=0.95;10.36±1.313和12.433±1.27,P=0.46).结论基础状态下Balb/c利C57BL/6小鼠的胃酸分泌存在显著差异;局部应用布比卡因能显著抑制Balb/c小鼠的胃酸分泌,但是对酸度的影响较小;在同样的条件下,布比卡因对C57BL/6小鼠的胃酸分泌却未产生抑制效应.

卵巢激素对慢性内脏高敏感大鼠结肠组织5-HT3受体的影响

目的在慢性高敏感大鼠模型上构建去卵巢模型,观察大鼠结肠组织5-HT3受体在雌激素不同水平的变化,探讨卵巢激素对IBS发病的影响.方法选取新生SD雌鼠,在其发育的8～21天给予结直肠球囊扩张刺激,建立慢性内脏高敏感雌鼠模型,待其发育至2月大小将雌鼠随机分为3组:假手术(sham)组、去卵巢(ovx)组、去卵巢加雌激素和孕激素(ovx+E2+P)组,每组16只,处理4周后对其内脏敏感性进行行为学评估(AWR评估),观察各组大鼠玻璃小球排出情况;并采用RT-PCR及免疫组织化学SP法检测大鼠肠道5-HT3受体的变化.结果 ovx+E2+P组大鼠腹部抬起及拱背抬高压力值明显低于sham组和ovx组;ovx+T2+P组大鼠排便量增多,玻璃小球排出时间短于sham组和ovx组;ovx+E2+P组5-HT3受体水平高,ovx组受体水平低.结论卵巢激素促进结肠组织5-HT3受体的表达,加重内脏高敏感性.

刺五加和丹参注射液辅治消化性溃疡164例临床观察

本文采用临床确诊的164例消化性溃疡病人做为研究对象,观察刺五加和丹参在辅佐治疗消化性溃疡中的疗效.对临床观察结果报告如下.

类Ⅱb样早期胃癌误诊分析及胃镜下治疗(附28例报告)

真正意义上的平坦型早期胃癌(Ⅱb)胃镜诊断极为困难,特别是癌灶＜0.5 cm的病变,普通纤维或电子胃镜发现比较困难.对癌灶＞0.5 cm的病变,无论从内镜下肉眼或显微镜下都会看到或多或少地伴有隆起或凹陷,境界不明显,因此这类病变又称类Ⅱb样早期癌[1].目前胃镜检查虽然已在基层医院广泛开展,但该类早期胃癌内镜下检出率普遍较低.我科自1996年6月至2004年5月胃镜下发现类Ⅱb样早期癌28例,报告如下.

匹维溴铵联合谷参肠安治疗腹泻型肠易激综合征的临床观察

肠易激综合征(IBS)是一种具有特殊病理生理基础,独立的肠功能紊乱性疾病.本文观察匹维溴铵联合谷参肠安,与分别单独应用匹维溴铵、谷参肠安治疗腹泻型IBS的临床疗效.

内镜下HSE联合无水酒精注射治疗Dieulafoy病

Dieulafoy病变又称胃黏膜下恒径动脉破裂出血,临床并非罕见,常表现为反复上消化道大出血、休克,病灶小且部位特殊,临床诊断困难.近年来随着内镜诊断水平的不断提高,发病率有明显上升趋势.内镜下注射止血是治疗Dieulafoy病变的主要方法之一,我们以HSE联合无水酒精注射治疗,取得较好疗效.现报告如下.

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