清醒镇静在经内镜贲门失弛缓症气囊扩张治疗中的应用

目的清醒镇静在贲门失弛缓症球囊扩张治疗中的镇静效果及安全性.方法选60例贲门失弛缓症患者,随机分为对照组(20例)和实验组(40例),对照组术前肌注安定10 mg、度冷丁100mg,实验组应用清醒镇静剂咪唑安定缓慢静注,总量为0.05 mg/kg,其后行球囊扩张术.术前、术中和术后分阶段记录患者生理指标及耐受程度.结果与对照组相比,清醒镇静剂组患者镇静程度适中,耐受性提高,心血管及呼吸功能参数均佳,差异具显著性(P＜0.05).结论清醒镇静在内镜治疗贲门失弛缓症中具有疗效可靠、操作简易、便于监测、依从性提高等特点.

早期大肠癌临床、病理特点及黏膜凹窝分型分析

目的探讨早期大肠癌的诊断和治疗方法.方法经手术证实的早期大肠癌33例,对l临床症状、肿瘤的部位、大小、大体形态、黏膜凹窝分型、治疗方法、肿瘤的浸润深度及随访结果进行分析.结果临床症状以便血为多,占60.6%(20/33),肛检阳性率高,占60.6%(20/33),肿瘤位于直肠及右半结肠多,占90.9%(30/33),形态以隆起型为主,其中亚有蒂型占57.6%(19/33),直径l.6em的占90.9%(30/33),pit panern分型Ⅳ十Ⅴ、Ⅴ型占80%(8/10),肿瘤局部切除加内镜下治疗占36.4%(12/33),手术切除占63.6%(21/33),经7个月～5年6个月随访,均无复发.结论通过临床症状分析、变焦大肠镜下黏膜凹窝分型有助于提高早期大肠癌的检出率,尤其是平坦及凹陷型病变的检出.早期大肠癌可积极开展镜下治疗,包括内镜、腹腔镜下治疗.术后化疗与否对延长生存率无差异.

急性胰腺炎血清sTNF-R、IFN-γ、IL-6、IL-8、NO、NOS水平与其严重程度的研究

目的探讨急性胰腺炎(AP)血清可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNF-R)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(NOS)的临床意义.方法分为三组,轻症AP(MAP)组,重症AP(SAP)组和对照组.在发病3天内取外周静脉血检测,同期测定对照组.结果MAP组sTNF-R、IFN-γ、IL-6及IL-8水平明显高于对照组(P＜0.05),NO及NOS水平均略高于对照组(P＞0.05),SAP组所有因子均高于MAP组(P＜0.01,P＜0.05).结论上述血清因子有助于判断AP严重程度和预后,具有积极的临床意义.

炎症性肠病患者肠黏膜菌群改变及抗体反应

目的探讨炎症性肠病(1BD)患者肠道菌群改变及机体免疫反应.方法采用梯度稀释法行菌群分析,同时采用透射比浊法测定IgG、IgM、IgA.结果发现急性期溃疡性结肠炎患者菌群中肠杆菌(8.82±0.69,P＜0.05)、肠球菌(7.73±0.2l,P＜0.01)及小梭菌(6.68±0.78,P＜0.01)的数量显著增加,而双歧杆菌(6.89±0.34,P＜0.01)和乳杆菌(6.95±0.52,P＜0.01)的数量明显下降,而缓解期与对照组相比无明显差异.拟杆菌(7.26±0.03,P＜0.05)及双歧杆菌(7.59±0.34,P＜0.01)较急性期明显上升,小梭菌(6.13±0 66,P＜0.01)明显下降.急性期克隆氏病患者的菌群中肠杆菌(8.93±0.62,P＜0.01)和酵母菌(3.88±0.96,P＜0.05)明显增加,而双歧杆菌(6.44±0.25,P＜0.01)和乳杆菌(6.87±0.43,P＜0.01)明显下降.缓解期较正常菌群相比肠杆菌(8.82±0.42,P＜0.05)仍很高,而双歧杆菌(7.11±0.34,P＜0.01)有回升但仍明显低于正常.缓解期与急性期相比双歧杆菌的数量有明显差异.监测的血清抗体反应中,急性期UC病人比正常组有更高的IgG(17.92±3.62,P＜0.01),IgA也有上升.而在缓解期IgA(2.84±0.76,P＜0.05)与正常组相比明显增高,这点有CD病人中更加明显.结论上述结果表明菌群失衡和抗体的反应在引起炎症性肠病的过程中起了重要作用.并可以为炎症性肠病的治疗提供参考依据,为炎症性肠病的预后进行评估.

泮托拉唑治疗急性上消化道出血疗效观察

目的观察泮托拉唑治疗上消化道出血的效果.方法98例急性上消化道出血患者经内镜诊断急性糜烂出血性胃炎34例,十二指肠球部溃疡伴出血52例,胃溃疡伴出血12例.分三组治疗,A组静滴泮托拉唑40mg 2次/d,B组静滴法莫替丁20mg 2次/d,C组静滴止血芳酸0.3 2次/d.结果A组有效率97.22%,B组有效率78.79%,C组有效率55.17%.A组与B、C两组比较P＜0.01.结论泮托拉唑治疗急性上消化道出血疗效显著.

肠易激综合征患者胃食管胆汁反流的临床意义

目的探讨肠易激综合征患者胆汁反流的临床意义.方法用便携式胆红素监测仪(Bilitec 2000)对24例确诊为肠易激综合征和6例健康人进行24h食管腔内胆红素监测.结果肠易激综合征患者胆汁反流总时间%(10.11±5.82)明显高于健康对照组(4.09±2.37);其中便秘型患者胆汁反流总时间%(14.09±5.39)显著高于腹泻型患者(8.48±5.29).结论肠易激综合征患者中存在碱反流,便秘型患者更为突出.

红细胞压积对重症胰腺炎早期识别的临床价值

目的评估红细胞压积(HCT)对重症胰腺炎早期识别的临床价值.方法收集深圳市南山医院消化科1997年1月～2001年12月急性胰腺炎首次发作的住院病人共209例,选取病人住院24小时内的HCT值(男性HCT＞43.0%;女性HCT＞39.6%)作为重症胰腺炎识别的指标.结果209例急性胰腺炎,重症39例(18.66%),HCT判别重症胰腺炎的敏感性、特异性分别为43.59%和71.76%,阳性预测值、阴性预测值分别为26.15%和84.06%.结论易得、廉价的HCT作为重症胰腺炎早期识别的指标的主要临床意义在于其阴性预测值较高,提示HCT不高者发生重症的可能性较小,除非病情加剧,暂可不必行胰腺CF检查。

炎症性肠病患者的vWF、血小板检测及其临床意义

目的了解活动性炎症性肠病(IBD)患者的血管内皮细胞损伤和血小板功能障碍情况.方法采用单克隆酶联吸附法测定26例活动性IBD患者及31例健康对照者的血浆血管性假血友病因子(vWF)水平,用全自动血细胞分析仪检测血小板计数及平均血小板体积(MPV).结果IBD患者的血浆vWF:Ag水平及血小板计数明显高于健康对照组(P＜0.05),而MPV显著低于健康对照组(P＜0.01).结论活动性IBD患者血管内皮细胞显著受损,血小板活性增强,血栓前状态是IBD的发病因素,而血vWF和MPV是活动性IBD的指标.

结肠黑变病发病学的初步探讨

目的报道6例结肠黑变病(MC),并探讨其发病机制.方法对MC活检组织作:①HE和PAS等多种特殊染色观察;②以无MC结肠活检10例为对照,作凋亡计数和核分裂计数,并以PCNA等免疫组化为佐证.结果①HE及特殊染色与文献一致,证明色素为脂褐素;②凋亡计数:MC与对照组之间差异无显著性;Fas及CPP-32免疫组化检测差异亦无显著性;③核分裂指数及PCNA免疫组化检测:两者在MC与对照组之间差异均无显著性.结论凋亡未必是MC发生的主要机制.

乌司他丁、大黄对急性胰腺炎大鼠联合治疗效果分析

目的通过采用乌司他丁与生大黄联合治疗急性胰腺炎大鼠动物模型,寻找治疗急性胰腺炎更好的治疗方法.方法先建立急性胰腺炎大鼠模型,然后分为四组,分别测定每组血清液粉酶(AMS)肿瘤坏死因子(TNF α)及胰腺标本染色及大概生存时间.结果A、B、C、D组TNF α、AMS含量及胰腺病理改变呈A＞B＞C＞D,而生存时间显著不同.结论乌司他丁、大黄联合治疗急性坏死性胰腺炎大鼠效果比单一效果更佳.

乙肝相关性肝癌及癌旁组织p73基因表达及突变的研究

目的探讨p73基因在人乙肝相关性肝癌组织中的表达及其意义.方法采用RT-PCR方法检测p73基因mRNA在癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达差异;采用SSCP检测方法比较分析p73基因在肝癌发生中的变异情况.结果癌组织中p73基因mRNA的转录水平明显高于癌旁组织及正常组织(P＜0.05);然而,肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中p73基因PCR扩增片段的多态性是一致的,电泳未见异常条带(P＞0.05).结论新近发现的肿瘤抑制基因p73基因在乙肝相关性肝癌组织中末见明显的基因突变,相反表达水平明显增高,可见,p73基因以一种高表达形式参与乙肝相关性肝癌的发生.

大肠癌金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的研究

目的了解大肠癌患者金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的情况.方法50例大肠癌术中取癌组织及正常大肠组织;提取组织总RNA;用逆转录共扩增定量PCR方法测定其金属蛋白酶组织抑制因子子-1(TIMP-1)基因表达水平.结果大肠癌组织金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显高于正常大肠组织.局部淋巴结受累者TIMP-1基因表达水平明显低于局部淋巴结未受累者.结论金属蛋白酶组织抑制因子-1在阻止大肠癌的浸润、转移中可能起重要作用.

HS-GGT和AFP-mRNA联合分析在肝癌诊断中的临床价值

目的探讨肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶(HS-GGT)和AFP-mRNA联合分析在肝癌诊断中的临床价值.方法从肝癌患者外周血有核细胞中提取总RNA,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增分析AFP-mMNA,同时定量分析患者血HS-GGT水平,比较它们在肝癌诊断中的临床价值.结果所设计RT-PCR扩增AFP基因片段大小为159bp,肝癌患者外周血AFP-mRNA阳性率为60.3%,显著高于急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝外肿瘤及正常对照组(P＜0.01).另外,AFP-mRNA阳性率,在AFP浓度低于50ng/ml肝癌组中为57.1%,在伴肝外转移的肝癌组中全数阳性.AFP-mRNA阳性与肿瘤大小间无明显相关性,与HS-GGT联合分析诊断肝癌的总阳性率达93.6%.结论HS-GGT定量和外周血AFP-mRNA分析有助于肝癌诊断、远处转移或术后复发的监测.

大肠息肉电切前活检与电切后的临床病理比较

目的比较大肠息肉电切前活检与电切后息肉组织的临床病理状况.方法回顾5年间在我院接受大肠息肉电切的病例,对比分析每一病例电切前、后的临床报告及病理诊断,要求:①电切前后的病理来源于同一息肉;②对多次电切病例只取第一次进入病例分析;③多发息肉患者取第一枚电切息肉入组,其余排除;④去除电切前活检已有癌变的病例.结果在220例中符合要求的共120例,年龄59.8±13.3岁,其中男性占65.8%;活检和电切病理诊断不符合率为33.3%(40/120)(P＜0.01);活检和电切分别诊断腺瘤性息肉88例(73.3%)和100例(83.3%),其中不典型增生分别有29例(33.0%)和46例(46.0%)(P＜0.1);电切后发现5例腺瘤性息肉癌变,占5%(5/100),全部来源于27例绒毛状腺瘤(占其中18.5%);活检诊为炎性的息肉和增生性息肉的病例,电切后分别有60%(15/25)和4/7被诊断为其它息肉类型;电切后发现活检未曾诊断的幼年性息肉2例、间质瘤2例、平滑肌瘤1例:绒毛状腺瘤的直径较大,为1.43±0.58 cm,其余各型息肉直径均在1 cm左右;癌变息肉直径大,达1.8±0.57 cm,其小直径是1 cm.结论大肠息肉电切前后的临床病理存在较大差异,活检有可能漏诊癌变息肉,但对适于活检摘除的小息肉活检摘除是安全的;对直径在1 cm左右的息肉建议进行电凝切除并严密追踪其病理结果,有利于发现息肉癌变;要警惕活检诊断为炎性息肉和增生性息肉的息肉;活检对平滑肌瘤、间质瘤和幼年性息肉的诊断较为困难.

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因NS5ATP13的克隆化研究

目的应用微矩阵(microarray)技术,结合生物信息学(bioinformatics)技术筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)的反式激活基因,阐明慢性HCV感染、肝纤维化及肝细胞癌(HCC)的等相关疾病的发病机制.方法根据HCV-H病毒株序列设汁、合成序列特异性的引物.以含有全长HCV-H株cDNA的pBRTM-3011质粒DNA作为模板,进行多聚酶链反应(PCR)扩增,获得的HCV NS5A编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5A.以pcD-NA3.1(-)-NS5A转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取总RNA,逆转录为cDNA后进行表达谱基因芯片分析.应用分子生物学技术,结合生物信息学技术,克隆HCV NS5A反式激活作用的新的靶基因.结果构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5A,经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误.以pcDNA3.1(-)-NS5A转染HepG2后提取总RNA,逆转录后进行表达谱基因芯片技术分析.应用分子克隆技术结合生物信息学技术克隆NS5A反式激活的新型靶基因,命名为NS5ATP13,在GenBank中登录,登录号为D21262.NS5ATP13基因的编码序列全长为2103个核苷酸(nt),编码产物由700个氨基酸残基(aa)组成.结论丙型肝炎病毒NS5A基因产物具有显著的反式激活作用.微矩阵技术是分析基因表达谱变化的自动化和高通量技术.应用这些技术,发现了HCV NS5A反式激活作用的新的靶基因,将为进一步研究HCV NS5A反式激活作用的分子生物学机制及HCV相关疾病发病机制奠定基础.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活基因1的克隆化研究

目的应用抑制性消减杂交技术(SSH)及生物信息学技术(bioinformatics)筛选并克隆丙型肝炎病毒非结构蛋白3(NS3)反式激活新型靶基因,进一步阐明HCV感染相关疾病的发病机制.方法以HCV NS3蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析.并应用分子生物学技术,结合生物信息学技术,克隆HCV NS3反式激活作用的新的靶基因.结果对于所获基因片段序列分析表明,其中之一为新型基因片段.从HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序证实,因其可以被NS3蛋白反式激活,故命名为NS3TP1,已在GenBank中注册,注册号为AY116969.NS3TP1基因的编码序列全长为1932个核苷酸(nt),编码产物由642个氨基酸残基(aa)组成.结论HCV NS3是一种典型的病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白,HCV NS3反式激活作用的新靶基因的发现,为进一步研究HCV NS3蛋白反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活基因2的克隆化研究

目的应用抑制性消减杂交技术(SSH)及生物信息学技术(bioinformatics)筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式激活新型靶基因,进一步阐明HCV感染相关疾病的发病机制.方法以HCV NS3蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析.并应用分子生物学技术,结合生物信息学技术,克隆HCV NS3反式激活作用的新的靶基因.结果对于所获基因片段序列分析表明,其中之一为新型基因片段,从HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序证实,因其可以被NS3蛋白反式激活,故命名为NS3TP2,在GenBank中注册,注册号为AY116970.NS3TP2基因的编码序列全长为1299个核苷酸(nt),编码产物由432个氨基酸残基(aa)组成.结论HCV NS3是一种典型的病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白,而抑制性消减杂交(SSH)是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术.通过这种技术,发现了HCV NS3反式激活作用的新的靶基因,这一发现为进一步研究HCV NS3蛋白反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活基因6的克隆化研究

目的丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)是一种具有显著反式激活作用的病毒蛋白质.为了探索HCV NS3病毒蛋白反式激活作用的新的靶基因,我们应用微矩阵(microarray)技术对于转染和末转染的肝母细胞瘤细胞系HepG2进行分析.研究结果将有助于阐明HCV感染相关疾病的发病机制.方法根据HCV-H病毒株序列设计、合成序列特异性的引物.以含有全长HCV-H株cDNA的pBRTM-3011质粒DNA作为模板,进行多聚酶链反应(PCR)扩增,获得的HCV NS3编码基因片段克隆到TA载体中进行核甘酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS3.以pcDNA3.1(-)-NS3转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取总RNA,逆转录为cDNA后进行表达谱基因芯片分析.应用分子生物学技术,结合生物信息学技术(bioinformatics),克隆HCV NS3反式激活作用的新的靶基因.结果构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS3,经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误.以pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2后提取总RNA,逆转录后进行表达谱基因芯片技术分析.应用分子克隆技术结合生物信息学技术克隆NS3反式激活的新型靶基因,命名为NS3TP6,新基因的编码基因序列全长为414个核苷酸(nt),编码产物由138个氨基酸残基(aa)组成.结论HCV NS3是一种典型的病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白.微矩阵技术是分析基因表达谱变化的有效和高通量技术.发现了HCV NS3反式激活作用的新的靶基因,并成功克隆其中的NS3TP6,为阐明HCV NS3蛋白的反式激活作用及其机制,开辟了新的研究方向.

丙型肝炎病毒核心蛋白反式激活基因HCTP4的克隆化研究

目的探索丙型肝炎病毒(HCV)核心(core)蛋白反式激活作用的新的靶基因,以有助于阐明HCV感染相关疾病的发病机制.方法应用表达谱芯片分析等分子生物学技术,结合生物信息学(bioinformatics)技术,筛选、克隆HCV核心蛋白反式激活作用的新的靶基因.结果构建了真核表达载体pcDNA3-core,经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误.以pcDNA3-core转染HepG2后提取总RNA,逆转录后进行表达谱基因芯片技术分析.应用分子克隆技术结合生物信息学技术克隆核心蛋白反式激活的新型靶基因,命名为HCTP4,新基因的编码基因序列全长为2244个核苷酸(nt),编码产物由748个氨基酸残基(aa)组成.结论HCV核心蛋白是具有反式激活作用的蛋白.DNA微矩阵技术(DNA microarray)是分析基因表达谱变化的有效和高通量技术.发现了HCV核心蛋白反式激活作用的新的靶基因,此新基因的发现为深入研究HCV核心蛋白的反式激活作用及其机制开辟了新的研究方向.

丙型肝炎病毒非结构蛋白HS5A反式激活基因HS5ATP6的克隆化研究

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学技术(bioinformatics)筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活新型靶基因.方法以HCV NS5A表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5A转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析.对于所获基因片段序列分析表明,其中之一为新型基因片段,与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性,利用表达序列标签(EST)序列的搜索和比对,进行电子拼接,根据基因起始密码子的KOZ2ak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列.结果从HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序证实,命名为NS5ATP6,在GenBank中注册,注册号为AF529367.NS5ATP6基因的编码序列全长为1572个核苷酸(nt),编码产物由524个氨基酸残基(aa)组成.结论HCV NS5A反式激活新型靶基因NS5ATP6的筛选与克隆,为进一步研究HCV NS5A反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因11的克隆化研究

目的为了探索丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)病毒蛋白反式激活作用的新的靶基因,我们应用基因芯片技术对于转染和未转染的肝母细胞瘤细胞系HepG2进行分析.研究结果将有助于阐明HCV感染相关疾病的发病机制.方法根据HCV-H病毒株序列设计、合成序列特异性的引物.以含有全长HCV-H株cDNA的pBRTN-3011质粒DNA作为模板,进行多聚酶链反应(PCR)扩增,获得的HCV NS5A编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5A.以pcDNA3.1(-)-NS5A转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取总RNA,逆转录为cDNA后进行表达谱基因芯片分析.应用分子生物学技术,结合生物信息学技术(bioinformatics),克隆HCV NS5A反式激活作用的新的靶基因.结果构建了真核表达载体pcD-NA3.1(-)-NS5A,经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误.以PCDNA3.1(-)-NS5A转染HepG2后提取总RNA,逆转录后进行表达谱基因芯片技术分析.应用分子克隆技术结合生物信息学技术克隆NS5A反式激活的新型靶基因,命名为NS5ATP11,新基因的编码基因序列全长为1257个核苷酸(nt),编码产物由418个氨基酸残基(aa).结论HCV NS5A是一种典型的病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白.基因芯片技术是分析基因表达谱变化的有效和高通量技术.发现了HCV NS5A反式激活作用的新的靶基因,这一发现,为阐明HCV NS5A蛋白的反式激活作用及其机制,开辟了新的研究方向.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP9的克隆化研究

目的筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活新型靶基因,研究HCV NS5A反式激活作用的分子生物学机制.方法应用抑制性消减杂交技术(SSH)及生物信息学技术,以HCV NS5A表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5A转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析.对于所获基因片段序列分析表明,其中之一为新型基因片段,与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性,利用表达序列标签(EST)序列数据库的搜索和比对,进行电子拼接,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列.从HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序证实,命名为NS5ATP9,在GenBank中注册,注册号为AF529370.结果NS5ATP9基因的编码序列全长为336个核苷酸(nt),编码产物由111个氨基酸残基(aa)组成,并成功的克隆化.结论HCV NS5A反式激活新型靶基因NS5ATP9的筛选与克隆,为进一步研究HCV NS5A反式激活作用的分子生物学机制开辟了新的研究方向.

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因4的克隆化研究

目的丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)病毒蛋白反式激活作用的新的靶基因NS5ATP4的基因序列的确立及基因克隆化研究.方法依据我室构建的NS5A反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,利用生物信息学技术获得新基因NS5ATP4的编码序列,对其可能的氨基酸序列进行分析比较,并对其基因利用多聚酶链反应技术(PCR)进行克隆化研究.结果发现了HCV NS5A反式激活作用的新的靶基因NS5ATP4.结论这一发现,为阐明HCVV NS5A蛋白的反式激活作用及其机制,开辟了新的研究方向.

乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP3的克隆化研究

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBxAg)反式激活基因,克隆HBxAg反式激活相关靶基因.方法以HBxAg表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与PGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析,发现其中之一为未知基因片段,与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性.通过序列同源性搜索比对,电子拼接成功,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷信号序列,初步确定新型基因序列.从转染了pcDNA3.1(-)-X的HepG2细胞提取总RNA,以RT-PCR技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序加以证实.结果发现的新基因命名为XTP3,在GenBank中注册,注册号为AF490252.XTP3基因的编码序列全长为1020个核苷酸(nt),编码产物由340个氨基酸残基(aa)组成.结论应用抑制性消减杂交技术成功筛选与克隆HBxAg反式激活新型靶基因XTP3,为进一步阐明HBxAg反式调节作用及其在HBV感染中的分子生物学机制提供理论依据和研究方法.

超声显像诊断小肝癌15例

小肝癌的诊断标准为直径＜5cm,小肝癌的癌细胞分化好,恶性程度低,包膜多完整,因此及早发现并外科手术切除,是患者获得长期生存的主要途径,且切除时肿瘤越小,5年生存率越高.目前认为发现小肝癌的首选方法为超声显像联合AFP测定[1,3].本院1996～2002年用超声显像诊断15例小肝癌,所有病例均经病理确诊,报告如下.

奥曲肽治疗老年人食管胃底静脉曲张破裂出血98例

目的探讨奥曲肽对老年人食管胃底静脉曲张破裂出血作用.方法分两组,治疗组应用奥曲肽0.1 mg静滴,继之以0.2 mg持续滴注;对照组应用脑垂体后叶素5U静注,继之以10U持续滴注.结果治疗组12小时止血率为40.8%,24小时止血率69.4%,5天总止血率为84.7%;而对照组分别为27%、44%和53%,两组相比有显著差异(P＜0.01),用药后再出血率、病死率及副反应等方面相比两组也有显著差异(P＜0.05).结论奥曲肽止血效果明显优于脑垂体后叶素,具有止血作用明显、用药后再出血率低、副作用小,更适用于老年出血患者.

食管曲张静脉套扎治疗致腹水增加26例

上消化道出血是消化内科危重症,其常见原因是食管静脉曲张破裂出血,常可危及生命.目前广泛采用食管曲张静脉套扎治疗.我院自1998年采用食管曲张静脉套扎治疗,其止血率高,疗效满意,但也发现一些并发症,如门脉高压性胃黏膜病变,腹水增加等.前者已屡见报道,而后者报道较少.

闭合性十二指肠损伤36例诊治体会

十二指肠损伤,特别是腹膜后部位损伤,或合并其他部位损伤时,术前诊断比较困难,术中探查易漏诊,同时十二指肠接纳胃液、胆汁、胰液等,手术难度大,愈合能力差,并发症多(占65%),死亡率高(占20%)[1].我院自1992年至今,共收治闭合性十二指肠损伤36例,现报告如下.

国产奥美拉唑与西沙比利联合治疗返流性食管炎疗效观察

近年来返流性食管炎(RE)的发病率呈上升趋势,有关其发病机制与治疗尚在探讨中.本研究应用国产奥美拉唑与西沙比利联合治疗RE,疗效显著,且经济、方便,现报道如下.

肝源性糖尿病患者OGTT和胰岛素释放试验的临床意义

肝源性糖尿病为肝功能受损后,肝脏储备及合成糖原的能力减退所致.我们分析了肝源性糖尿病患者与单纯原发性Ⅱ型糖尿病患者的口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验结果,试图有助于指导临床治疗.

Miles手术会阴切口一期缝合影响愈合的因素

直肠癌行Miles手术会阴切口一期缝合已有三十余年历史[1].怎样才能使会阴切口一期愈合,减少患者的痛苦和不便.本文就我院近5年138例Miles手术会阴切口一期缝合影响愈合的因素分析如下.

残胃癌若干问题的探讨(附26例报道)

目的探讨残胃癌的发病机理及诊治疗原则.方法回顾性总结26例残胃癌临床资料并结合文献复习对若干问题进行分析评价.结果残胃癌多发生于男性,男比女为19:7.BⅡ式发生率高,BⅡ/B Ⅰ式为20/6.发病距初次手术时间5.5～28年,平均12年.确诊后多属晚期,能再次手术者14例,平均生存时间12.2月,预后差.结论残胃癌的发生与胃术后改变了胃肠解剖生理有密切关系,预防应从改进手术方式,防止胆汁返流等着手.对胃手术后5年以上的患者,定期监测残胃癌的发生,一经确诊应争取全残胃根治术.

胆管癌围手术期的支持性治疗

胆管癌因发病隐晦,一般难以早期诊断,以致很少患者可获得根治性切除术.如果患者未得到及时手术治疗,往往在2～3个月内死于肝功能衰竭和化脓性胆管炎.目前常常采用姑息手术治疗这类患者,本研究旨在回顾总结我们在采用肝内胆管空肠吻合姑息治疗胆管癌围手术期支持治疗的方法….

敬告作者投稿本刊时对参考文献工作的要求

凯西莱引起过敏性休克一例

患者,男性,27岁.3年前体检发现HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性,转氨酶正常.2002年7月因疲乏、食欲不振而查肝功,ALT 278 U/L,AST 125 U/T,胆红素正常.静滴甘利欣与门冬氨酸钾镁1月,ALT、AST降至正常,继用甘草甜素片与护肝片巩固治疗2个月后停药,并定期复查肝功.

肝癌患者的血糖值为0.6mmol/L一例

低血糖症是肝癌(HCC)的伴癌综合征(Paraneoplastic Sys-drome,PNS)常见的一型,其发生率据报道[1]为4.6%～33%.血糖正常值为2.24～4.48 mmol/L.本例肝癌的血糖值为0.6mmol/L实属罕见.现报道如下.

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒与MAPK信号转导系统

在病毒性肝炎的发病机制中,病毒蛋白对肝细胞信号转导通路的影响是病毒感染以后形成慢性感染、肝纤维化、肝细胞癌(HCC)的重要的分子生物学机制,对于慢性肝炎的预后也有重要意义.

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒对MKP蛋白信号转导影响的研究

在丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸残基上的磷酸化作用对于控制细胞活性的核心调节机制来说是精确而重要的.蛋白磷酸化的水平由蛋白激酶及蛋白磷酸酶协调控制,推断人基因组中大约编码2000个蛋白激酶和500个酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP),复杂多样的酶来控制蛋白磷酸化及协调细胞的基本改变.

乙型肝炎病毒对于S100 A11信号转导影响的研究

S100A11是具有EF-手型(EF-hand type)结构的Ca2+调节蛋白(Ca2+-modulated protein)多基因家族的一个成员,与钙结合之后,蛋白的构象发生改变,暴露出疏水区,然后与靶蛋白结合.

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒对MAPKK信号转导影响的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)的感染,不仅引起急、慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化、肝细胞癌的发生密切相关.

丙型肝炎病毒对新生多肽相关复合物α多肽基因的表达调节研究进展

新生多肽相关复合体(NAC,nascent polypeptide-as-sociated complex)是一种由α和β多肽组成的异二聚体复合物(heterodimeric complex),可逆性地与真核细胞核糖体结合,位于核糖体新合成多肽的顶端,引导新合成的多肽在细胞内的正确分布与转位[1].

磷脂酰肌醇3激酶信号转导系统与肝炎病毒的关系

磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)是细胞内信号转导系统的一条通道,是肌醇磷脂信使系统的重要组成部分,介于细胞受体与第二信使之间的信号转导道途径,早期的研究发现PI3-K激活下游三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3),从而介导进一步的生物学功能.

丙型肝炎病毒蛋白对TRAF2蛋白信号转导影响的研究

多细胞生物依赖于细胞联系成为统一的整体.生物物种的繁衍,遗传特性的保持,以及生物个体的发生、发展、机体各部分之间和生物体内外环境的统一等所有生命活动都是在细胞信号转导和调控下进行的.从受精卵发育成一个复杂的有生命机体,是在基因的控制下,由细胞信号转导和调控实现的.

肿瘤抑制基因p53与肝炎病毒调节的研究

肝炎病毒包括甲、乙、丙、丁、戊型等肝炎病毒,而研究多的是乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV).p53是肿瘤抑制基因,编码p53蛋白直接诱导基因的表达并参与细胞周期的调节.肝炎病毒基因编码的蛋白也作用于肝细胞,引起肝脏的损害.肝炎病毒与p53互相作用,导致肝细胞病变,特别是肿瘤的发生.

一氧化氮合酶与肝炎病毒关系研究进展

一氧化氮(NO)是一种半衰期极短的生物调节因子,是通过NO合酶(NOS)催化L-精氨酸生成的,NO具有广泛的生物学功能.

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒对MEK蛋白信号转导影响的研究

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一,参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能同步等多种细胞过程.

吸收障碍