COX-2抑制剂与结直肠癌的相关性研究进展

结直肠癌的发病率在人类癌症中居于第四位.世界范围内,每年约有678 000人发生结直肠癌并有40万人死于该病.

顺铂对食管癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的研究顺铂对食管癌细胞周期和端粒酶活性的影响,为其临床应用提供理论依据.方法用2μg/ml顺铂处理食管癌EC9706细胞,流式细胞仪分析细胞周期的改变,TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性的改变.结果顺铂可使食管癌细胞阻滞于S期,诱导细胞凋亡;同时降低食管癌端粒酶活性.结论顺铂对食管癌有治疗作用,端粒酶活性可作为观察食管癌化疗疗效的一个指标.

粪便抗原检测诊断幽门螺杆菌现症感染

目的评价应用免疫酶联吸附试验(ELISA)检测粪便中幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)抗原诊断H.pylori现症感染的敏感性和特异性.方法应用14C呼气试验以及幽门螺杆菌粪便抗原(HpSA)试验,对100例因上消化道不适就诊,怀疑有H.pylori感染的患者进行检测,观察两种检查的符合率.结果14C呼气试验和HpSA同时阳性者38例,14C呼气试验阳性而HpSA阴性者4例;14C呼气试验和HpSA同时阴性者57例,14C呼气试验阴性而HpSA阳性1例.以14C呼气试验作为金标准计算,HpSA检测方法的敏感性为90.48%,特异性为98.28%.结论幽门螺杆菌抗粪便原检测与14C呼气试验有较高的符合率,而且简便易行,不需特殊设备,解决了无法进行呼气试验的婴幼儿和有肺部疾患者的非侵入性幽门螺杆菌现症感染诊断问题,是一种非侵入性幽门螺杆菌现症感染诊断的新方法.

COX-2和MMP-2的表达与食管癌侵袭转移的关系

目的探讨COX-2和MMP-2的表达与食管癌侵袭和转移的关系.方法应用免疫组织化学(SP法)检测COX-2、MMP-2在45例食管鳞癌,癌旁组织中的表达.结果COX-2和MMP-2在食管癌组织中表达的阳性率显著高于癌旁组织(P＜0.05).COX-2和MMP-2在有外膜浸润组和淋巴结转移组阳性表达率明显高于无外膜浸润组和无淋巴结转移组(P＜0.05).COX-2和MMP-2在食管癌组织中的表达密切相关(P＜0.05).结论食管癌组织中COX-2和MMP-2的高表达促进了食管癌的侵袭和转移,COX-2和MMP-2在食管癌组织中的表达有相关性.提示COX-2和MMP-2可作为判断预后的指标和化学治疗的靶点.

P27KiPI在食管良恶性疾病中的表达及与食管癌淋巴结转移的关系

目的研究P27KiPl(Kinase inhibitor proteinl,P27)在食管良恶性病变中的表达及意义.方法以免疫组织化学SP法检测P27在食管增生的鳞状上皮、食管息肉及食管鳞癌中的表达.结果P27在食管增生上皮、食管息肉及食管癌中的阳性表达率分别为93.3%、100%及48.0%,三者差异有极显著性(P＜0.005),良性病变阳性率显著高于恶性肿瘤(P＜0.01),而且P27表达状况与食管癌淋巴转移显著相关(P＜0.05).结论食管癌中P27表达水平显著下降,且P27低表达与淋巴结转移有关.

COX-2基因表达与胃癌淋巴结转移的关系

目的研究COX-2 mRNA及蛋白在胃癌组织中的表达,探讨COX-2与胃癌淋巴结转移的关系.方法采用RT-PCR方法检测30例新鲜胃癌标本及相匹配的癌旁正常组织COX-2 mRNA的表达;用免疫组化方法检测45例胃癌石蜡标本COX-2蛋白表达.结果胃癌组织中存在COX-2 mRNA(73.3%)及蛋白(62.2%)表达.伴淋巴结转移者,COX-2 mRNA及蛋白表达高于无转移者,(P＜0.05).结论COX-2基因在胃癌中表达增高,且与胃癌淋巴结转移明显相关.

残胃癌的诊断与治疗

目的探讨残胃癌的诊断及处理方式.方法回顾性分析28例残胃癌的临床手术治疗资料.结果12例行根治性切除,术后死亡1例,1年内死亡2例,2年内死亡4例,目前仍存活5例(随访2～5年);姑息性切除12例;4例广泛转移未能切除.结论进展期残胃癌预后差,早期发现病灶是提高残胃癌预后的关键.

雷贝拉唑首次单剂量口服的抑酸效应对比研究

目的评价雷贝拉唑(RAB)对消化性溃疡患者的抑酸效应,并与奥美拉唑(OME)、泮托拉唑(PAN)等PPI比较.方法进行开放、对照研究.选取活动期消化性溃疡病人40例,分为3组,分别给予RAB 10 mg(n=15)、OME 20 mg(n=15)及PAN 40 mg(n=l0)单剂量口服,24 h胃pH监测.结果①RAB的抑酸起效时间(115.20±15.36 min)较OME及PAN均快(P＜0.05,P＜0.01);②RAB组24 h胃内pH＞4的总时间(11.28±3.32 h)及时间百分比(59.80%±14.2%)显著高于OME(P＜0.01)及PAN(P＜0.01);③RAB组夜间胃pH中位数(3.86±1.03)及夜间胃pH均值(3.01±0.65)均明显高于OME组(P＜0.05;P＜0.01)及PAN组(P＜0.01);④RAB、OME、PAN日间pH＞4的总时间长于夜间.结论RAB、OME及PAN均有较好的抑酸效应,三者比较,RAB抑酸起效快,抑酸持续时间长,特别是夜间抑酸效应优于OME及PAN.

胃食管反流性疾病不同疗法的总体评价(附112例临床分析)

目的了解胃食管反流性疾病对患者生活质量的影响,评价两种"三联疗法"对胃食管反流性疾病的疗效及生活质量,经济投入的影响.方法通过丽水市6所市、县级人民医院收集同期经胃镜确诊的反流性食管病例,采用问卷调查方式,了解受试者的一般情况,胃食管反流症状和疾病前后生活质量,经济投入改变情况,分别给予质子泵抑制剂+促动力剂+黏膜保护剂(方案甲),及H2受体阻滞剂+促动力剂+黏膜保护剂(方案乙)8周治疗.记录治疗后患者生活质量(QOL)表和经济投入量表.探讨两种"三联疗法"的疗效,生活质量改变情况和经济投入关系.结果①共收集112例GERD病例,男女比2.4:1,平均年龄47.9+13.8岁,两组患者的临床资料具有可比性(P＞0.05);②甲方案总有效率92.98%,乙方案总有效率80%.甲方案疗效优于乙方案.③GERD严重影响QOL,优质QOL由发病前63.7%降至13.7%,甲方案治疗后可恢复优质QOL至84%,乙方案为63%.两种方案经济投入无显著差异(P=0.085).④疗效和生活质量改善有显著相关性.结论"三联疗法"治疗胃食管反流性疾病疗效高,并可显著改善患者的生活质量.以兰索拉唑促动力剂+黏膜保护剂三联组更为明显.此三联疗法是经济、高效和有效提高生活质量的疗法,值得推广.

胃癌组织血小板衍化内皮细胞生长因子的表达与血管生成和凋亡的关系

目的探讨血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)在胃癌组织中的表达及与血管生成和凋亡的关系.方法应用免疫组化技术对67例胃癌组织进行PD-ECGF表达、肿瘤组织微血管密度(MVD)检测,流式细胞技术检测胃癌组织细胞凋亡指数(AI,凋亡百分率).结果PD-ECGF的表达与胃癌淋巴结转移(P＜0.05)、分化程度(P＜0.05)及组织分型(P＜0.05)显著相关,与MVD(P＜0.01)和胃癌细胞凋亡指数(P＜0.01)显著相关.MVD和AI与淋巴结转移(P＜0.01)显著相关.结论胃癌组织中PD-ECGF可促进血管生成,抑制胃癌细胞凋亡,促进胃癌的增殖与转移.

PCNA、P53与胎儿食管上皮细胞增殖特性的关系

目的初步探讨增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)和抑癌基因p53与胎儿食管上皮细胞增殖特性的关系.方法采用免疫组化ABC法检测胎儿食管组织中PCNA和p53的表达状况.结果PCNA在31例胎儿标本中全部呈阳性反应,PCNA单位面积平均阳性细胞数为506±239/mm2,与成人不同类型食管上皮组织单位面积PCNA免疫阳性细胞数相比,差异具有显著性,P＜0.05.p53免疫组化染色阳性细胞核呈棕黄色,胞浆未见阳性反应,其阳性率为10%(3/31).结论PCNA和p53在胎儿食管上皮组织中的表达可反映胎儿食管上皮旺盛的增殖特性.

幽门螺杆菌感染与胃不同部位组织学病变的关系

目的明确幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染与胃不同部位粘膜组织学病变的关系.方法在215例胃镜受检者胃窦、角、体三点取材进行组织学检查,Giemsa染色明确H.pylori感染情况,HE染色计量观察组织学病变情况,分析两者的相关关系.结果从胃窦到胃角、胃体,炎症程度(单个核细胞浸润)、活动度(中性粒细胞浸润)、糜烂及淋巴滤泡形成均递减,H.pylori阳性者积分高于阴性者.在胃窦和胃角部,H.pylori感染更常引起近腔面上皮分泌下降,而在胃体部无此发现,H.pylori感染在三个部位均可引起腺体萎缩.结论H.pylori感染是胃多部位组织学病变如淋巴细胞、中性粒细胞浸润、糜烂和淋巴滤泡形成与粘膜萎缩的病因,在胃窦和胃角引起的病变重于胃体.

IFN-γRα、ICAM-1在大鼠肝卵圆细胞增殖模型中的表达及其意义

目的探讨γ干扰素受体α(interferon gamma receptor alpha IFN-γRα)及细胞间黏附分子l(intercelluar adhesion molecule 1.ICAM-1)在大鼠肝卵圆细胞增殖模型中的表达情况及其生物学意义.方法采用二乙酰氨基笏(2-acetaminofluorene AAF)加三分之二肝切建立大鼠肝卯圆细胞增殖的模型,并以大鼠单纯三分之二肝切后的再生肝组织、单纯灌AAF4天后的肝组织及正常大鼠肝细胞作对照,采用RT-PCR检测IFN-γRα、ICAM-1及甲胎蛋白(alpha-fetoprotein AFP)mRNA在模型组及对照组肝组织中的表达情况.结果AFP,IFN-γRα及ICAM-1mRNA表达水平在模型组肝切后4天及9天明显上调,AFP在肝切后9天、IFN-γRα及ICAM-1在肝切后4天的表达均显著高于对照组(P＜0 05),在肝切后20天复常.结论AFN-γRα和ICAM-1mRNA的高表达与肝卵圆细胞的增殖及分化过程密切相关.

人骨髓单个核细胞向肝细胞诱导分化的体外研究

目的探讨在HGF、FGF4诱导下骨髓单个核细胞能否向肝细胞分化.方法找健康志愿者,年龄4～50岁,胸骨抽取骨髓,用淋巴分离液分离出骨髓单个核细胞,用含2%胎牛血清和1×ITS的DMEM培养,分别用单独HGF、单独FGF4、HGF和FGF4联合刺激、无生长因子 4种处理因素进行诱导培养,分别于诱导培养0、7、14、21、28天时,留取细胞,用免疫细胞化学法检测CK1 8、AFP、白蛋白,用PAS法进行糖元染色试验以验证诱导分化的结果.结果0天时,AFP、白蛋白少数细胞阴性.CK1 8 阴性,糖元未见阳性;加生长因子的三组 AFP在7、14天时表达逐渐增高,21、28天减弱;糖元、CK18、白蛋白表达逐渐增高.无生长因子组,在7、14、21、28天时,这些指标均未见表达.结论在HGF、FGF4诱导下,骨髓单个核细胞可分化为具肝细胞表型和功能的细胞.

人骨髓多能成体祖细胞的分离培养及向肝细胞样细胞分化的研究

目的培养人骨髓多能成体祖细胞(multipotent adult progenitor cells,MAPCs)并研究其向肝细胞样细胞的分化.方法应用体外细胞培养技术将人骨髓中的单个核细胞从无血液疾病患者的髂嵴骨髓中分离出来后,用磁式细胞分离仪分离富集骨髓单个核细胞中的CD45-HLA-DR-细胞,把其接种于DMEM培养基中进行培养,到达对数生长期时,加入成纤维细胞生长因子-4(fibrob-last growth factor-4,FGF-4)并改用维持液来诱导其向肝细胞样细胞分化,后用免疫细胞化学方法检测其分化情况.结果成功地进行了人骨髓MAPCs的原代和传代培养,并在体外成功地把其诱导分化为具有肝细胞表型特征的细胞.结论FGF-4可诱导人MAPCs向具有肝细胞表型特征的细胞发生分化.

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位在大肠杆菌中的融合表达与鉴定

目的通过对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hipylori)尿素酶B亚单位在大肠杆菌中表达的研究,探索其免疫反应性.方法用高保真PCR方法扩增H.pylori ureB基因,并定向克隆入pNEB193中,然后经酶切回收后插入原核表达载体pMAL-C2X进行融合表达.采用蛋白印迹法对表达产物进行鉴定.结果特异PCR和酶切鉴定证实融合基因ureB克隆入表达载体,SDS-PAGE结果显示ureB在大肠杆菌中以融合蛋白形式MBP-ureB高效表达,约占细胞总蛋白量的26.7%.该融合蛋白可与H.pylori阳性病人血清发生特异反应.结论成功构建了能高效表达H.pylori ureB的重组菌,为Hp基因工程疫苗的进一步研究奠定了基础.

大鼠移植骨髓细胞向肝细胞转化的实验研究

目的探讨体内骨髓细胞向肝细胞转化的可行性.方法将雌性SD大鼠随机分为3组,每组15只.①R+BMT(全身照射+骨髓移植);②2-AAF+R+BMT;③2-AAF+PH(部分肝切)+BMT.进行交叉性别骨髓细胞移植,雄性骨髓植入雌性受体,分别于第5、10、20天处死雌鼠.以雄性性别决定基因sry作为细胞标记,用原位杂交和FISH作为检测方法对骨髓细胞的肝细胞转化进行分析.结果PCR移植效果初步分析可见,R+BMT组11例中有1O例PCR阳性;2AAF+PH+BMT组11例中有7例阳性,2AAF+R+BMT组10例中有6例阳性.sry原位杂交染色发现,第5天各组雌性受体肝索中均未见sry阳性的肝细胞.第10天R+BMT组可见1例sry阳性的细胞位于肝细胞索,FISH染色可见这一细胞白蛋白mRNA阳性.第20天各组PCR阳性各例均可在肝索中检测到sry阳性的细胞.FISH染色可见自蛋白mRNA阳性.经统计学分析第20天各组sry阳性细胞数无明显差异.结论在R+BMT、2-AAF+PH+BMT和2-AAF+R+BMT模型中移植的骨髓细胞均可以植入肝脏,并存在于肝细胞索.植入肝索的骨髓细胞早可见于移植后第10天,并发生转分化,表达白蛋白mRNA.不经过全身照射的2-AAF+PH+BMT组,移植的骨髓细胞也可以进入肝脏发生转分化,因此全身照射并不一定是移植骨髓细胞活化、植入和转化的必须条件.

幽门螺杆菌lpp20基因的克隆与表达

目的克隆及表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)lpp20基因,为探索高效的防治幽门螺杆菌感染的疫苗抗原和诊断抗原奠定基础.方法用PCR方法从幽门螺杆菌的染色体DNA上扩增出lpp20基因片段,将目的基因插入的表达载体pMAL-C2X中,用重组质粒转化大肠杆菌(E.coli TB1),并在E.coli TB1中进行表达.用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析.结果用PCR方法扩增的lpp20基因长度约为540 bp;经酶切、PCR和测序分析,插入到载体的基因片段与文献报道的基因序列一致;SDS-PAGE的结果显示,目的基因表达产物的相对分子质量为18k1Da,融合蛋白的表达量占全菌总蛋白的34%.结论本研究中构建的pMAL-C2X与lpp20基因重组质粒在E coli TB1中能够高效表达目的基因.该重组子的构建为幽门螺杆菌lpp20基因的研究建立了重要的基础.

Barrett's食管的研究现状与展望

Barrett食管(Barrett's esophagus,BE)是由英国心胸外科医生Barrett [1]在上世纪50年代首次报告提出并以他的名字命名的,2000年日本Barrett黏膜定义研讨会制订了Barrett食管的定义、诊断与分类[2],定义Barrett食管是指食管下段复层鳞状上皮被单层柱状上皮所取代,以食管与胃黏膜交界的连接线(齿状线)为界,在齿状线2cm以上出现柱状上皮者即为Barrett食管.

肝脏干细胞研究及其应用前景

一、干细胞的一般概念干细胞(stem cell,SC)被认为是一类具有自我更新与增殖分化能力的细胞,能产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞,同时还能分化为祖细胞.

Barrett's化生进展到食管癌的细胞和分子机制

Barrett's化生为一癌前病变,为发生食管腺癌的危险因素之一.过去20年由它引起的食管腺癌发生率有所增加.早期研究指出,Barrett's化生病人比一般人群发生食管腺癌的危险性增加30～125倍.

胃镜治疗胃扭转42例体会

我科1995年7月至2001年7月间,共诊治胃扭转42例,在内镜下给与一定治疗,效果较好,报告如下.

舌下静脉曲张与食管静脉曲张破裂出血的关系

食管静脉曲张破裂出血是肝硬化常见的并发症,出血率与食管静脉曲张程度成正比,早期诊断具有重要的临床意义.现已证明,肝硬化时人体各脏器的血液动力学均有不同程度的变化,据此我们对83例肝硬化变化的舌下静脉、门(脾)静脉及食管静脉曲张破裂出血进行了观察,以了解三者之间的关系及其临床应用价值.

肝病患者血清CA125检测的临床意义

CA125是存在于卵巢癌细胞表面的一种糖蛋白,为上皮性卵巢癌腺腔上皮胚胎发育期所分泌的抗原决定簇,是随访卵巢癌患者一种有价值的检测指标.正常卵巢等表面上皮不存在CA125,但在其它炎症等情况下可升高.肝硬化患者血清CA125常中度升高[1].本文作了初步设计探讨其肝硬化患者血清CA125的来源,了解CA125临床应用的限制性和新用途.

大剂量甘利欣静滴治疗慢性乙型肝炎80例报告

我院传染病门诊1995年5月～2002年6月共诊治慢性乙型肝炎数干例,我们对其中80例给予二种剂量甘利欣静脉点滴,显示大剂量组疗效显著.现报告如下.

肝脏干细胞研究和应用展望

慢性乙型肝炎是我国的一种常见疾病,而且随着社会经济的发展和生活水平的提高,脂肪肝、酒精性肝炎等患者也越来越多.这些疾病不断发展,逐渐演变为肝纤维化和肝硬化,终导致肝功能衰竭,给人们的生命带来严重的威胁.

纤维胃镜检查致颌下肿胀一例

患者男性,29岁.因上腹部隐痛不适1月余就诊,临床拟诊为消化性溃疡.于2000年3月29日行纤维胃镜检查,使用GIF-P30胃镜及加长压舌胃镜咬口.进镜顺利,镜下见幽门管小弯侧可见一约0.3 cm × 0.4 cm大小溃疡灶,上覆白苔,边缘肿胀,胃窦部可见多处斑点状糜烂灶.

肝硬化晚期并发重度低钠血症一例

患者男,40岁.因反复腹胀、双下肢浮肿、眼黄2年,加重1个月于2002年7月12日入院.患者近2年来反复乏力、纳差、腹胀、双下肢浮肿,眼黄、皮肤黄.诊断为肝硬化,失代偿期,间断性给予保肝和利尿治疗,病情反复.

成人急性腹泻

针刺损伤和意外血液接触

FGF2和VEGF对食管鳞癌、腺癌荷瘤裸鼠肿瘤组织结构血管、灌注血管及缺氧程度的影响分析

目的探索FGF2及VEGF对食管癌结构血管和灌注血管的影响,阐明与食管癌快速生长、转移密切相关的血管生成调节机制.方法本实验采用人食管癌细胞系TE-1(鳞状细胞癌),SEG-1和BIC-1(腺癌)及其荷瘤动物模型.利用体外细胞培养技术观察重组人FGF2、VEGF对三种细胞系生长增殖的影响,采用多探针RNA酶保护性分析方法检测FGF2和VEGFmRNA水平,采用免疫组织化学和免疫荧光方法观察食管癌组织结构血管、灌注血管密度及瘤内缺氧程度的影响.结果①体外细胞培养实验中,不同浓度FGF2(10ng,100ng)对人食管癌细胞系TE-1,SEG-1和BIC-1的增殖速度和生长曲线无影响.②FGF2和VEGFmRNA基础水平的定量检测显示食管鳞癌细胞系TE-1的FGF2为4.92,VEGF为57.57.食管腺癌细胞系SEG-1的FGF2、VEGF分别为49和53.62;BIC-1不表达FGF2,VEGF为17.04.③在TE-1、SEG-1、BIC-1三种食管癌荷瘤裸鼠模型中,FGF2、VEGF对食管癌结构血管(CD31)以及灌注血管(DIOC7)平均距离的影响分析显示:VEGF处理组结构血管和灌注血管密度较对照组显著增加(P＜0.05),FGF2处理组结构血管和灌注血管密度在SEG-1模型中显著增加(P＜0.05).④在TE-1和BIC-1模型中,FGF2处理组EF5/Cy3染色的平均强度与对照组无明显差别,VEGF处理组EF5/Cy3染色的平均强度明显降低.在SEG-1模型中,两个处理组均无明显变化.结论①不同组织类型食管癌中FGF2的表达不同,甚至同一组织类型不同细胞系也存在较大的差异性,VEGF在不同组织类型食管癌中均有高水平表达.②食管癌肿瘤细胞对外源性FGF2的反应可能与自身FGF2mRNA表达水平有关.③FGF2在食管癌SEG-1(腺癌)促进肿瘤生长是通过促进血管生成这一途径实现的.在某些食管癌中,如TE-1(鳞癌)和BIC-1(腺癌),它既无刺激食管癌细胞增殖也无促进血管生成的作用.VEGF可显著增加结构血管和灌注血管,改善瘤内缺氧程度.VEGF是食管癌血管生成的重要凋节因子.④对食管癌肿瘤组织内同一部位结构血管(CD31)、灌注血管(DIOC7)和瘤内缺氧程度(EF5)同时进行检测,有助于血管密度与血管功能关系的评价,是一种较好的研究方法.

食管癌GATA基因家族高甲基化研究

背景GATA转录因子家族在胚胎发育时期能够促进胃肠道的正常发育,并有助于在成年肠上皮的不断更新中调节组织分化,近有报道在人胃肠肿瘤中GATA基因,即GATA-4,GATA-5的表达缺失.目的探讨在食管肿瘤中渐进性的转录沉默而导致GATA相关基因表达缺失的情况.方法用RT-PCR法检测GATA-4,-5,-6基因在17个食管鳞癌细胞系中的表达,从每个细胞系及88例原发性食管肿瘤标本中提取DNA,进行甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP),以检测GATA相关基因增强子区的甲基化情况,用5-aza-2'-deoxycytidine c5-aza-dc)在去甲基化的细胞系中进行检测GATA-4,-5基因的表达与增强子甲基化之间的关系,并对GATA增强子区进行亚硫酸氢盐测序以证实MSP的结果.结果GATA-4/-5的表达在大多数食管癌细胞系中缺失,在每个未检测到GATA基因表达的细胞系中均可发现转录起始下游包括CpG岛在内的异常甲基化,GATA-6在每一细胞系中均表达.在正常食管粘膜中未发现GATA-4/-5增强子的甲基化,而 GATA-4/-5的甲基化却可以在原发性食管癌中检测到.在27/44(61%)的食管鳞癌和31/44(71%)的食管腺癌中,发现GATA-4的甲基化,与此类似,GATA-5的甲基化也在一部分食管肿瘤中被检测到.结论本文是关于继发于基因增强子高甲基化的食管肿瘤中,GATA-4,-5而不包括-6表达沉默的首篇报告.