四川大学学报(医学版)杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보(의학판)
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重组人HMGN2在大肠杆菌中表达及其体外抗乙型肝炎病毒活性研究
目的 制备重组人高迁移率非组蛋白N2蛋白(HMGN2),研究重组HMGN2的抗乙型肝炎病毒(HBV)活性.方法 通过RT-PCR分离纯化人HMGN2基因,并将其构建到原核表达质粒pGEX-4T-1中,经IPTG诱导表达.产物经GST蛋白纯化系统进行纯化,用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定.采用MTT法检测重组HMGN2蛋白对稳定转染复制型HBV重组质粒的肝癌细胞株HepG2.2.15细胞的细胞毒性;不同浓度HMGN2蛋白作用于HepG2.2.15细胞,分别在第3 d和6 d收集细胞培养上清液,ELISA检测上清中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg),采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量.结果 成功构建了HMGN2蛋白原核表达载体pGEX-HMGN2,并分离提纯了原核表达的HMGN2蛋白.Western blot结果显示,该蛋白能被抗HMGN2抗体识别.在检测的1~100μg/mL范围内,HMGN2蛋白对HepG2.2.15细胞的无细胞毒性;HMGN2蛋白在1~5μg/mL水平即可抑制HBeAg和HBsAg的表达,可降低HBV DNA拷贝数.结论 成功构建HMGN2原核表达载体,并分离提纯了纯度较高的HMGN2蛋白;重组的HMGN2蛋白在体外具有较强的抗HBV活性.
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小G蛋白Cdc42对人结肠癌奥沙利铂耐药细胞多药耐药性的影响
目的 研究细胞分裂周期蛋白(cell division cycle 42,Cdc42)对人结肠癌奥沙利铂耐药细胞系多药耐药性的影响.方法 Western blot检测人结肠癌SW480、Colo320细胞与已成功构建的奥沙利铂耐药细胞系SW480/L-OHP、Colo320/L-OHP细胞中Cdc42的表达,用LipofectamineTM 2000介导重组质粒pDEST26-His-Cdc42转染入Cdc42表达相对较低的亲代细胞系,介导Cdc42 siRNA转染入Cdc42表达相对较高的耐药细胞系.Western blot和RT-PCR检测转染是否成功.利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测各细胞系5氟尿嘧啶、顺铂、奥沙利铂,紫杉醇,依托泊苷,长春新碱,阿霉素等结直肠癌常用化疗药物的药物敏感性,计算出各种药物的半数致死浓度(IC50).行Western blot检测不同细胞系P-gp、MRP1蛋白表达水平.结果 在耐药细胞系中Cdc42的表达高于亲代细胞系.成功转染外源Cdc42基因的亲代细胞CCK-8(CCK-8)法检测对多种化疗药物的IC50以及P-gp、MRP1蛋白表达水平高于未转染细胞系.成功转染Cdc42 siRNA的耐药细胞CCK-8法检测对多种化疗药物的IC50显著低于耐药细胞系.结论 Cdc42与人结肠癌细胞耐药性形成有关,Cdc42可增强人结肠癌细胞的多药耐药性的形成.提示Cdc42可能成为降低结肠癌细胞多药耐药性的分子靶点.
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RhoB基因联合低剂量顺铂对小鼠A549肺癌的治疗作用
目的 构建人pVITRO2-RhoB重组质粒,探讨pVITRO2-RhoB重组质粒在体内外的抗肿瘤效果及其联合低剂量顺铂对小鼠A549肺癌的治疗作用.方法 构建pVITRO2-RhoB重组质粒,将其转染A549细胞后,观察它在细胞中的表达情况以及对A549细胞的抑制作用.建立小鼠A549肺癌模型,用1,2-二油酰-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)脂质体包裹pVITRO2-RhoB重组质粒制备脂质体质粒DNA复合体即Lip-RhoB.将30只荷瘤鼠分别分为空白组、脂质体-pVITRO2复合物(Lip-null)组、脂质体-RhoB复合物(Lip-RhoB)组、低剂量顺铂(DDP)组和联合治疗(RhoB+DDP)组.RhoB尾静脉给药,低剂量顺铂腹腔给药,观察各组肿瘤体积变化及小鼠的生存期,原位瘤进行TUNEL染色,测定凋亡率.结果 成功构建了pVITRO2-RhoB重组质粒,该重组质粒在体外抑制了A549细胞生长并促进了该细胞的凋亡;pVITRO2-RhoB重组质粒治疗裸鼠A549肺癌皮下肿瘤模型后,荷瘤鼠肿瘤体积增长减慢,肿瘤凋亡细胞增加(P<0.05);基因联合低剂量顺铂治疗后,与Lip-RhoB组和DDP组相比能显著抑制荷瘤鼠肿瘤生长(P<0.05),延长荷瘤鼠生存期(P<0.05),提高肿瘤细胞原位凋亡(P<0.05).结论 RhoB基因具有明显的体内外抗肿瘤效果及协同化疗药物的抗肿瘤作用,因此RhoB基因联合低剂量顺铂可能是一种有效的肺癌治疗新方法.
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采用磁共振化学位移成像技术检测健康男性胰腺脂肪比例
目的 探讨健康男性胰腺脂肪比例,以及脂肪在胰腺各部位的分布.方法 首先通过标准脂水混合物模型建立校正曲线,然后随机抽取83名健康成年男性,将受试者按年龄分为A组(20~30岁,29例),B组(31~40岁,27例),C组(41~50岁,27例).采用磁共振化学位移成像技术对其胰头、胰体、胰尾及整个胰腺的脂肪含量进行测定.结果 磁共振化学位移成像法对标准脂水混合物模型的检测结果与真实值之间具有良好的线性正相关关系(r=0.996,P<0.01);健康成年男性脂肪在胰腺各部位分布差异无统计学意义(P>0.05);胰头、胰体、胰尾及整个胰腺组织脂肪比例的95%可信区间分别为:1.25%~4.83%,1.58%~4.35%,1.41%~4.75%,1.87%~4.19%.各年龄段之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 磁共振化学位移成像技术对人体脏器含脂病变的定量检测准确性高、安全无创,可用于临床上胰腺组织脂肪比例的测定.20~50岁健康男性胰腺脂肪分布均匀,且与年龄无关.
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PI3Kγ抑制剂AS605240对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚和纤维化的拮抗效应
目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶γ(PI3Kγ)小分子抑制剂AS605240对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠心肌肥厚和纤维化的治疗作用,并初步探讨其作用机制.方法 健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组(n=10),分别为ISO模型组、AS605240治疗组和正常对照组(空白组).ISO模型组、AS605240治疗组皮下注射ISO 10 mg/(kg·d)×3 d,再5 mg/(kg·d)×11 d,复制大鼠心肌肥厚和纤维化模型,空白组注射相同体积的生理盐水;建模第2 d,AS605240治疗组给予AS605240 50 mg/(kg·d),ISO模型组和空白组给予等体积0.5%羧甲基纤维素,共给药14 d.末次给药后24 h,称取大鼠心脏质量和体质重,心脏HE染色观察组织学改变并评分,测量大鼠心重指数(Hw/BW)、心功能、胶原容积分数(CVF)等.结果 与正常对照组相比,ISO模型组大鼠Hw/BW增加(P<0.05),心肌细胞间有大量胶原增生,心功能降低,胶原蛋白含量增加(P<0.05).与ISO模型组大鼠相比,AS605240治疗组大鼠HW/BW降低(P<0.05),心功能有明显改善,心肌细胞间胶原沉积减少(P<0.05).结论 AS605240对ISO引起的大鼠心肌纤维化具有一定的改善作用.
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盾叶薯蓣总皂苷及苷元衍生物的抗炎镇痛活性研究
目的 研究盾叶薯蓣总皂苷及合成的薯蓣皂苷元衍生物对小鼠抗炎镇痛的作用.方法 先将阿司匹林酰氯化,再与薯蓣皂苷元反应,制得具有孪药性质的薯蓣皂苷元衍生物3β-2-乙酰氧基苯甲酰薯蓣皂苷元酯(ABDE),并采用核磁共振氢谱(1H-NMR)和质谱(ESI-MS)进行结构分析确证.在二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和醋酸所致小鼠扭体反应的实验中,观察薯蓣总皂苷及新合成的ABDE的抗炎和镇痛作用.结果 薯蓣总皂苷126mg/kg和252 mg/kg对小鼠耳廓肿胀抑制率分别是7.92%和14.51%,对扭体反应的抑制率分别是15.42%和26.17%;合成ABDE总收率约为43.5%,是未见文献报道的新化合物;初步生物活性筛选在浓度为21.9、43.8、87.6 mg/kg的3个梯度下,对小鼠耳廓肿胀抑制率分别是18.03%、25.51%、33.48%,对应的阿司匹林单体组的抑制率为13.47%、21.55%、28.20%;醋酸所致小鼠腹腔疼痛抑制率分别是34.87%、41.54%、50.77%,对应的阿司匹林单体组的抑制率为31.80%、49.23%、53.85%.结论 薯蓣总皂苷具有抗炎症和镇痛作用;新化合物ABDE结构经1H-NMR和ESI-MS得到确证;ABDE的低中高剂量各组抗炎镇痛作用强度与阿司匹林各对应组相近.
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职业紧张与职业生命质量的关系研究
目的 了解不同劳动类型职工职业紧张与职业生命质量(QWL)现状,探讨职业紧张和职业生命质量的关系.方法 采用职业紧张量表(OSI-R)和职业生命质量量表(QWL7-32)对辽河油田的194名调查对象进行测试并对测试结果进行比较分析.结果 脑力劳动组职业任务问卷(ORQ)和个体紧张反应问卷(PSQ)得分低于体力劳动组,个体应对资源问卷(PRQ)和QWL得分高于体力劳动组(P<0.05);PSQ得分与ORQ得分呈正相关,与PRQ呈负相关,QWL总分与ORQ、PSQ得分均呈负相关,与PRQ呈正相关(P<0.001);不同程度职业紧张组的QwL得分差异有统计学意义,且QWL得分随紧张程度的增加而下降(P<0.01);职业生命质量的主要影响因素有ORQ、任务冲突(RB)、任务不适(RI)、工作环境(PE)、PSQ、业务紧张(VS)、人际关系紧张(IS)、PRQ(P<0.01).结论 职业紧张越重,职业生命质量越差,可以通过控制职业紧张来提高劳动者的职业生命质量.
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人参皂苷Rg1对新生鼠HIBD后血管再生的影响
目的 观察人参皂苷Rg1对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后血管再生的影响,并探讨其可能机制.方法 10日龄SPF级SD大鼠54只,随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=24)和Rg1组(n=24).模型组及Rg1组采用单侧结扎颈总动脉并低氧通气制备新生鼠HIBD模型;假手术组仅分离右侧颈总动脉,不结扎,不进行低氧通气.Rgl组于术后即刻腹腔内注射0.1 mL含Rgl(40 mg/kg)的生理盐水,此后每隔24 h按相同剂量注射Rgl,共注射3 d;模型组和假手术组相同时间点腹腔内注射0.1 mL生理盐水.术后观察动物一般情况,于术后4、8、24、72 h处死大鼠取右侧脑组织,采用Western blot及免疫组织化学染色检测缺氧诱导因子1α(HIF-lα)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;Ⅷ因子相关抗原(vwf)免疫组织化学染色标记微血管.结果 术后新生大鼠均存活至实验完成.与假手术组比较,模型组和Rgl组均出现不同程度的神经行为学异常.模型组4、8、24、72 h各时间点HIF-1α蛋白表达均较假手术组增加(P<0.05),Rg1组各时间点HIF-1α蛋白表达水平均较同一时间点模型组上调(P<0.05).模型组4、8、24 h VEGF蛋白表达较假手术组增加(P<0.05),Rgl组24、72 h VEGF蛋白表达较同一时间点模型组增加(P<0.05).模型组24 h和72 h脑缺血区vwf阳性细胞较假手术组增多(P<0.05),Rgl组72 h脑缺血区vwf阳性细胞数目较同一时间点模型组增加(P<0.05).结论 Rgl通过增强并稳定HIF-1α/VEGF信号轴,促进新生鼠HIBD后血管再生.
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RNA干扰黏着斑激酶抑制人肝癌细胞sk-hep-1生长的实验研究
目的 通过运用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi),干扰人肝癌细胞系sk-hep-1的黏着斑激酶(FAK)的表达,初步探讨干扰效果.方法 在体外,用转染试剂FugeneHD将靶向FAK基因的小发夹RNA质粒(pshFAK)转染至sk-hep-1细胞中,通过流式细胞术、RT-PCR和Western bolt分析靶向FAK基因的RNAi对细胞的影响.在体内,用阳离子脂质体包装质粒,通过尾静脉注射治疗裸鼠皮下肿瘤模型,通过分析肿瘤生长曲线,肿瘤体积及瘤重,肿瘤组织的FAK、CD31、PCNA的免疫组化以及TUNEL,分析体内治疗效果.结果 sk-hep-1细胞经pshFAK作用后,FAK的mRNA及蛋白质水平均降低(P<0.001),凋亡率增高.皮下肿瘤模型经治疗后,生长速度缓于对照组,肿瘤大小及瘤重降低(P<0.001).肿瘤标本的免疫组化及TUNEL显示肿瘤标本的FAK蛋白表达下调,血管生成减少,增殖减少及凋亡增加(P<0.001).结论 靶向FAK基因的RNAi可以抑制FAK在人肝癌细胞sk-hep-1的表达,抑制肿瘤生长速度,促进其凋亡,FAK可以成为有潜力的肝癌治疗的靶点.
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壳聚糖-人骨形态发生蛋白-2纳米粒基因载体的构建分析
目的 旨在构建一种良好性能的壳聚糖-人骨形态发生蛋白(BMP)-2纳米粒基因载体.方法 通过复凝聚法制备的壳聚糖纳米粒与基因重组构建的BMP-2质粒相结合,形成含50、100和200μg/mL质粒BMP-2的壳聚糖纳米粒基因载体(分别命名为C-B50、C-B100和C-B200).采用包封率测定壳聚糖与BMP-2目的 基因的结合情况,场发射扫描电子显微镜观察纳米粒的形态和大小,DNaseI消化实验检测该基因载体对目的 基因的保护作用,以及MTT试验检测基因载体对骨髓基质干细胞的生长抑制.结果 壳聚糖-BMP-2纳米粒基因载体呈不规则球形,结构紧密,粒径约为(90±20)nm.C-B50、C-B100和C-B200的包封率分别为76.31%±1.58%、84.49%±1.81%和81.69%±1.77%.壳聚糖-BMP-2纳米粒基因载体有效地保护BMP-2目的 基因不被DNaseI消化,随着剂量和时间的增加,对细胞的生长抑制率也增加(P<0.05),但大剂量100 mg/L作用后绝大部分细胞的正常生长没有受到明显影响.结论 该壳聚糖-BMP-2纳米粒基因载体有望应用于骨组织工程.
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糖尿病肾病模型中NF-κB与甘露聚糖结合凝集素途径补体激活的关系
目的 通过链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病肾病大鼠模型,了解糖尿病肾病时甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径补体激活情况及其与核转录因子κB(NF-κB)的关系.方法 将SD大鼠分为正常对照组(N组)和糖尿病肾病组(DN组).DN组按55 mg/kg体质量一次性腹腔注射1%STZ,N组一次性腹腔注射等量柠檬酸缓冲液.于实验1,2、4、8周分别处死两组各5只大鼠,测量大鼠的血糖、24 h尿量、24 h尿白蛋白量、24 h尿肌酐、血清肌酐、体质量和肾脏质量,计算肌酐清除率和肾脏肥大指数,采用免疫组化SP法观察各组大鼠1、2、4、8周肾组织MBL,膜攻击复合物(MAC)及NF-κB的表达.结果 与正常组相比,DN组大鼠肾小球MBL沉积增多,MAC,NF-κB表达明显增多(P<0.05),并随时间推移继续增高,各时间点差异有统计学意义(P<0.05).STZ腹腔注射所致DN组大鼠的肾小球MBL,NF-κB的表达水平成显著正相关(r=0.973,P<0.01).结论 甘露聚糖结合凝集素途径的补体激活参与了糖尿病肾病的发生发展,可能为下一步的诊断治疗提供新的方向.
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蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA诱导的肿瘤血管生成的抑制作用的研究
目的 探讨RhoA对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和微血管生成的影响以及蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA调控作用的影响.方法 将组成性激活的RhoA的真核表达质粒,在脂质体介导下转染胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选出阳性单克隆并用Western blot检测是否稳定转染成功;应用ELISA检测不同细胞培养上清中VEGF的含量;建立组成性激活RhoA的荷瘤鼠模型,并用MG132治疗并观察治疗效果;用免疫组化染色方法检测RhoA及MG132对肿瘤细胞表达HIF-1α、VEGF及CD31的影响.结果 组成性激活RhoA的稳定转染细胞株构建成功;组成性激活的RhoA促进VEGF的分泌,而MG132抑制VEGF的分泌;组成性激活的RhoA促进肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.05),MG132抑制肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.01);组成性激活的RhoA促进HIF-1α、VEGF及CD31的表达,MG132抑制HIF-1α、VEGF及CD31的表达,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MG132通过抑制RhoA对HIF-1α、VEGF及CD31的上调来影响肿瘤血管的生成.
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光动力疗法对增生性瘢痕成纤维细胞增殖影响的研究
目的 探讨以5-氨基酮戊酸(ALA)为光敏剂的光动力疗法(PDT)在体外对增生性瘢痕成纤维细胞(FB)增殖的影响,并探寻合适的光敏剂浓度和激光能量密度.方法 组织块法体外培养人增生性瘢痕FB.实验分为空白对照组、激光组(仅予不同能量密度激光照射)、光敏剂组(仅予不同浓度光敏剂同时培养)和ALA-PDT组(光敏剂培养+激光照射).用CCK-8检测各组细胞增殖抑制率,根据结果选出佳的ALA浓度和激光能量密度的组合,检测该组合干预后的FB增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果 激光组和光敏剂组对增生性瘢痕FB增殖无明显抑制作用.ALA-PDT组中,当激光剂量≥10 J/cm2与药物浓度≥0.125 mmol/L时,抑制作用明显,随激光能量和药物浓度的同时增大,抑制作用逐渐增大.而当ALA浓度达到0.5 mmol/L,激光能量密度达到20 J/cm2后,再增大药物浓度和激光能量抑制率无明显升高,在此条件下的ALA-PDT组PCNA表达水平低于空白对照组(30.33±2.08 vs.78.33±3.79,P<0.05).结论 ALA-PDT对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖有明显抑制作用,其抑制作用随药物浓度和激光能量密度增加而增加.佳参数:ALA浓度为0.5 mmol/L,He-Ne激光能量密度为20 J/cm2.
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女性阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的危险因素及治疗现状分析
目的 分析女性阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的危险因素,并随访其治疗现状及健康相关生活质量.方法 纳入以睡眠呼吸紊乱为主诉的女性病例193例,分为非OSAHS组和OSAHS组,比较两组年龄、体质量指数(BMI)、绝经及患高血压的比例之间的差异及上述参数与睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、低脉氧饱和度(LSpO2)之间的关系,并分析各组治疗的现状及疾病相关的生活质量的预测因子.结果 OSAHS组平均年龄、BMI、绝经及患高血压的比例均高于非OSAHS组(P<0.05).AHI及LSpO2与年龄、BMI、是否绝经及患高血压之间存在相关关系.两组治疗采用多的是减肥及体位治疗.OSAHS组采取减肥及持续气道正压通气(CPAP)治疗后Epworth嗜睡评分(ESS)较前降低(P<0.05),采取体位治疗病例前后ESS之间差异无统计学意义(P>0.05),未采取任何治疗措施的病例占了OSAHS组32.5%,随访ESS评分较前增高(P<0.05).根据Berlin问卷,OSAHS组目前仍有超过50%的病例高度怀疑存在OSAHS.Calgary生活质量指数(SAQLI)及其各项维度两组之间无差异,多元回归分析纳入了匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、ESS、AHI、LSpO2作为SAQLI的预测因子,差异有统计学意义(P<0.05)的有PSQI、ESS、AHI.结论 年龄、BMI、绝经及患高血压是女性OSAHS的危险因素,目前女性OSAHS患者的治疗不充分,且病情与行PSG监测时比有逐渐加重趋势,PSQI、ESS、AHI可以作为女性OSAHS健康相关生活质量的预测因子.
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Rac1b小干扰RNA对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响
目的 观察Rac1b小干扰RNA(Si-Rac1b)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 Si-Rac1b在lipofectamineTM2000介导下转染筛选出的Rac1b高表达的结直肠癌细胞SW1116,分别从RNA和蛋白水平检测转染细胞Rac1b的表达,采用细胞增殖实验,损伤刮擦实验,体外侵袭实验(Transwell小室)和hoechst方法分别检测Si-Rac1b转染细胞的增殖潜力,迁移与侵袭能力和凋亡的变化.结果 成功转染Si-Rac1b的肿瘤细胞,Raclb mRNA和蛋白表达都明显下调,而Rac1 mRNA和蛋白表达无明显变化;Si-Rac1b可明显抑制结直肠癌细胞SW1116的增殖、迁移和侵袭均并能促进SW1116细胞的凋亡.结论 Si-Rac1b能够部分逆转结直肠癌细胞Sw1116的恶性生物学行为.
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长时间七氟醚麻醉对肝纤维化兔肾功能影响的研究
目的 观察长时间低流量七氟醚麻醉对肝纤维化兔肾功能的影响,指导肝纤维化患者安全用药.方法 选取雄性新西兰大白兔采用四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型.12周后存活的肝纤维化兔随机分为肝纤维化七氟醚组(S组,n=12)和肝纤维化对照组(F组,n=12),造模中的对照组作为正常对照组(N组,n=10).N组和S组动物给予1小肺泡浓度(MAC)的七氟醚8 h(新鲜气流量为1 L/min).检测麻醉前、麻醉后8 h(T8)、24 h(T24)、72 h(T72)、120 h(T120)的血尿素氮(BUN),血肌酐(Cr)及血清氟离子(F-).F组在上述同时点输液、抽血检测.T120或动物死亡时,取动物肝脏做病理检查.结果 该肝纤维化模型(S组和F组)100%形成了中、重度肝纤维化.麻醉前,肝纤维化组(S组和F组)肝功能明显异常,与正常对照组(N组)相比,门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和总胆汁酸(TBA)升高(P<0.05),而碱性磷酸酶(ALP)下降(P<0.05).S组与F组相比上述肝功能指标差异无统计学意义.麻醉后,BUN、Cr和血清F在各组间与各时点间差异均无统计学意义.N组和S组,BUN和血清F-在T8时达到大值,Cr在T72时达到大值,各指标在T120恢复至麻醉前水平.F组,BUN在T8时达到大值,Cr在T72时达大值,两者在T120时下降至麻醉前水平,血清F-在T120时达到大值.结论 长时间低流量七氟醚麻醉对正常兔和肝纤维化兔的肾功能和血清F-均无明显影响.
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Beclin1在糖尿病肾病模型大鼠肾组织的表达变化研究
目的 探讨beclin1在糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾组织中的表达及在DN发病机制中的作用.方法 通过腹腔注射链脲佐菌素(50 mg/kg)制作DN大鼠动物模型,以造模后72 h血糖≥16 mmol/L,1周后纸片法检测尿蛋白阳性认为DN造模成功.免疫比浊法检测大鼠尿白蛋白(ALb)24 h排泄率以及尿白蛋白与肌酐比值(urinary albumin and urinary creatinine ratio,ACR),免疫组化Envision两步法检测beclin1在DN模型肾组织的表达,透射电镜观察肾组织细胞内自噬囊结构及溶酶体形态.结果 ①DN大鼠ALb及ACR均较空白对照组增加(P<0.05).随着造模时间延长,在造模后4周、8周增加更加明显(P均<0.05).②两组大鼠肾组织扫描电镜偶可见自噬囊泡.③免疫组化显示正常大鼠肾小管细胞见beclin1表达,肾小球未见表达,DN大鼠肾组织表达强于正常大鼠(P<0.05),肾小球可见表达.结论 beclin1可能参与DN发病过程,机制可能与DN过程中细胞程序性死亡发生有关.
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成都地区婴幼儿腹泻轮状病毒的基因分型研究
目的 了解成都市婴幼儿轮状病毒的基因分型特点,以及流行优势毒株VP4基因核酸序列变异情况.方法 收集2010年3月华西第二医院75份门诊婴幼儿腹泻标本,RT-PCR检测轮状病毒并进行G、P基因分型.据检测结果确定流行优势株,对两株优势株VP4基因进行T-A克隆和测序比对.结果 A组轮状病毒检出率为17.3%(13/75),其中G1型7株,G3型2株,4株未分型;P基因分型结果为P[8]型6株,P[4]型2株,P[10]型、P[6]型、P[9]型各1株,2株未分型;G/P组合结果以G1P[8]型为主,共5株;G1P[4]型,G3P[6]型各1株.VP4测序结果显示,两株优势株均为P[8]基因型,且毒株之间具有高度同源性(97%),与标准株之间同源性也达90%以上.结论 A组轮状病毒是成都地区2010年春季婴幼儿腹泻的重要病原之一,其血清型主要为G1型,流行优势株G/P组合为G1P[8]型.
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不同噪声水平对弱视者感知具有拓扑差异图形的影响
目的 观察屈光参差性弱视者在不同水平的高斯噪声环境下识别具有拓扑差异图形的表现,以了解屈光参差性弱视局部/总体感知与正常人的差异.方法 由matlab软件生成刺激图形(噪声方差分别为0.04、0.08、0.12,图形呈现时间为2.5 s、5 s),观察屈光参差性弱视患者对不同噪声水平/不同呈现时间图形的识别错误率,并与对照组(正常人)进行比较.结果 弱视患者对于闭合图形、非闭合图形的感知在不同的图形呈现时间下差异没有统计学意义(P分别为0.06和0.088),即图形呈现时间对弱视患者的感知没有影响.但弱视者对闭合图形的识别错误率均低于非闭合图形(P<0.05).除5 s闭合图形外,在各个噪声水平及呈现时间下,弱视者对两组图形的识别错误率均高于正常组(P<0.05).结论 屈光参差性弱视患者对不同拓扑性质的图形存在着感知障碍.然而这样的知觉障碍并不是由刺激图形呈现时间等实验因素造成,而是由弱视患者视知觉系统本身存在着的总体、局部感知缺陷所产生.
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透明质酸修饰的白蛋白纳米粒的制备及抗肿瘤作用的初步评价
目的 制备透明质酸修饰的白蛋白纳米粒,对其修饰程度和载药性能进行考察,并初步评价其抗肿瘤作用.方法 用去溶剂化法制备白蛋白纳米粒,并用透明质酸修饰纳米粒表面,以表面活性氨基的减少作为评价透明质酸修饰的白蛋白纳米粒的修饰程度的指标,并筛选佳处方;考察pH和载药量及包封率的关系.使用噻唑蓝比色法(MTT)测定纳米粒对人肝癌细胞株HepG2的抑制率.结果 制备所得的透明质酸修饰的白蛋白纳米粒的平均粒径为396 nm,Zeta电位-19.7 mV,表面氨基减少率为34.28%;透明质酸修饰的米托蒽醌白蛋白纳米粒载药量11.13%,包封率94.64%,平均粒径为398 nm,Zeta电位-17.9 mV,且具有明显的缓释作用.透明质酸修饰的米托蒽醌白蛋白纳米粒比米托蒽醌水溶液具有更强的细胞抑制率(P<0.05).结论 所用制备工艺稳定,可用于制备透明质酸修饰的白蛋白纳米粒.透明质酸修饰的米托蒽醌白蛋白纳米粒具有不低于药物溶液的活性.
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运动与尼尔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨骼尺寸和骨量的影响
目的 观察运动和尼尔雌醇(CCE3)联合应用对去卵巢大鼠骨骼尺寸和骨量的影响.方法 健康4月龄雌性SD大鼠48只,随机分成6组:正常对照组,假手术组,去卵巢组,去卵巢+CCE3组,去卵巢+运动组和去卵巢+CCE3+运动组.去卵巢+CCE3组和去卵巢+CCE3+运动组大鼠于去卵巢手术后第2 d开始给予CCE3灌胃,0.5 mg/kg体质量,每周1次,持续11周.去卵巢+运动组和去卵巢+CCE3+运动组大鼠于去卵巢术后第7 d开始给予运动训练,每周5 d,每天连续匀速跑45 min,16 m/min,跑道倾角0°,持续10周.第11周末,处死各组大鼠,观察骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重的变化.结果 去卵巢组大鼠骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重等指标均低于假手术组(P<0.01);去卵巢+CCE3组和去卵巢+运动组大鼠骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重等指标较去卵巢组增加(P<0.01),但仍低于假手术组(P<0.01);而去卵巢+CCE3+运动组大鼠上述各指标均高于去卵巢+CCE3组和去卵巢+运动组(P<0.01).结论 运动可加强CCE3改善去卵巢大鼠骨骼尺寸和骨量的作用.
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尼美舒利对大鼠重型颅脑创伤后学习记忆功能的影响
目的 探讨诱导型环氧合酶(COX-2)抑制剂尼美舒利对大鼠重型颅脑创伤后学习记忆功能的影响.方法 采用Marmarou的方法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型,将480只成年Wistar大鼠随机分为脑创伤组、尼美舒利治疗组、假手术组、正常对照组,每组又分为伤后1、3、6、12、24、48、72、96、168及336 h 10个时相组.尼美舒利治疗组经致伤后,给予腹腔注射尼美舒利6 mg/(kg·d)直至各时相点处死;脑创伤组、假手术组及正常对照组在相同时间给予等量的生理盐水腹腔注射.应用免疫印迹Western b1ot方法及免疫组化法检测脑组织COX-2的表达.再取24只大鼠随机分为脑创伤组、尼美舒利治疗组、假手术组及正常对照组,进行水迷宫测试.结果 脑创伤后大鼠脑内COX-2蛋白表达增加,尼美舒治疗组COX-2蛋白表达高峰下调,与脑创伤组相比差异有统计学意义(P<0.05),伤后第9、10 d水迷宫测试的潜伏期缩短,与脑创伤组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 尼美舒利对大鼠重型颅脑创伤有脑保护作用,能够改善其伤后学习记忆障碍.
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102例远处转移鼻咽癌预后因素分析
目的 探讨远处转移鼻咽癌预后的影响因素,为临床制定治疗策略及预后的判断提供依据.方法 分析2003年1月至2007年12月在四川大学华西医院肿瘤一科就诊的102例远处转移鼻咽癌患者的生存资料,进行生存率计算、单因素及多因素分析.结果 远处转移鼻咽癌患者的1、2年生存率分别为54.8%、14.6%,中位生存时间10个月.转移后化疗≥3周期组与化疗<3周期组1、2年生存率对比分别为71.4%vs.40.4%、13.5%vs.13.2%(P=0.080).单因素分析显示年龄≥60岁、无病生存期(disease-free survival,DFS)<1年、转移后未行化疗、多器官转移、肝转移是远处转移鼻咽癌预后的危险因素.多因素分析显示年龄≥60岁、肝转移、转移后未行化疗、多器官转移是影响远处转移鼻咽癌预后的独立危险因素.结论 年龄≥60岁、肝转移、转移后未行化疗、多器官转移是影响远处转移鼻咽癌患者预后的独立危险因素,尽管化疗可以改善远处转移性鼻咽癌患者的预后,但合理的化疗周期数仍需更多研究进一步探寻.
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Rathke裂囊肿的外科治疗
目的 分析总结症状性Rathke裂囊肿的临床表现、辅助检查及手术疗效,探讨其诊断及治疗要点.方法 回顾性分析我院1999年6月至2010年7月间收治的48例经手术治疗的Rathke裂囊肿病例资料.其中19例经蝶手术,29例行开颅手术.结果 临床表现以头痛、视觉障碍为多见.术后病理证实均为Rathke裂囊肿,所有患者原有症状均缓解或治愈,无手术死亡病例,术后随访3~24个月未见复发病例.结论 Rathke裂囊肿术前诊断困难,临床表现、内分泌学检查、影像学检查有助于诊断,终确诊需结合病理学结果.症状性囊肿应手术治疗,且囊壁无需处理,可取得满意疗效.
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糖耐量异常患者颈-桡动脉脉搏波速度增加的临床意义
目的 研究糖耐量异常患者颈-股动脉脉搏波传导速度(CF-PWV)、颈-桡动脉脉搏波传导速度(CR-PWV)、颈-踝动脉脉搏波传导速度(CA-PWV)以及反射波增强指数(AIx)的变化及临床意义.方法 从北京海淀区、大兴区社区人群中筛选出糖耐量异常者93例(男49例,女44例),年龄26~79岁,平均年龄(52.1±12.0)岁.另选健康对照93例(男49例,女44例),年龄26~79岁,平均年龄(52.1±12.1)岁.采用自动PWV分析仪测定不同部位PWV,采用桡动脉压力波分析仪测定AIx,并检测空腹血糖、血脂、尿酸等血液生化指标.结果 糖耐量异常组的CR-PWV[(9.54±1.44)m/s]高于正常对照组[(9.02±1.44)m/s](P<0.05);而CF-PWV、CA-PWV、AIx在两组间差异无统计学意义.糖耐量异常组的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和丙氨酸氨基转移酶增高(均P<0.001).结论 糖耐量异常患者已经存在周围肌性动脉僵硬度的增加,CR-PWV对筛查糖代谢异常早期外周动脉硬化并发症有一定的价值.
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注射用重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)与二甲双胍合用治疗2型糖尿病的临床研究
目的 探讨注射用重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]与二甲双胍合用治疗2型糖尿病(T2DM)的临床效果.方法 采取随机、双盲、安慰剂对照的试验设计,36例T2DM患者在应用二甲双胍治疗的基础上随机分入用药组与安慰剂组,分别给予皮下注射rhGLP-1(7-36)(0.2 mg)及安慰剂(甘露醇,2.5 mg)治疗12周;观察基线及12周后用药组与安慰剂组的糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)及胰岛素水平(FINS)、餐后2 h静脉血糖(2 h PG)及胰岛素水平(2 h INS)、血脂、血压、体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素分泌指数(HOMA-IS)等指标的变化,同时记录低血糖事件及不良反应的发生情况.结果 在应用二甲双胍治疗的基础上,用药组的T2DM患者在给予rhGLP-1(7-36)治疗12周后,HbA1c、FPG、2 h PG值以及体质量、BMI均比基线时有所降低,其差异具有统计学意义(P<0.05),低血糖发生率为2.8%.结论 rhGLP-1(7-36)联合二甲双胍治疗T2DM有效并且低血糖发生率低,可成为治疗新的选择.
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国产米格列奈钙片治疗2型糖尿病的多中心临床研究
目的 以那格列奈为对照,评价国产米格列奈钙片治疗2型糖尿病的有效性和安全性.方法 本研究采用随机、双盲、双模拟研究方法,从国内5个临床中心纳入240例2型糖尿病患者,国产米格列奈钙片组120例患者餐前5 min服用该药10 mg tid(根据血糖调整到大剂量20 mg tid),那格列奈组120例患者餐前5 min服用该药120 mg tid(根据血糖调整到大剂量240 mg tid).经过16周治疗,比较两组治疗前后糖化血红蛋白(A1c)、血糖、胰岛素、甘油三酯、胆固醇水平的变化及不良反应的发生率.结果 经过治疗后,两组A1c、餐后1、2 h血糖均下降,与治疗前相比,差异均有统计学意义(P<0.01),两组间治疗前后差值差异无统计学意义(P>0.05).两组治疗后空腹胰岛素、餐后1、2 h胰岛素均有所下降,与治疗前相比,国产米格列奈钙片组差异有统计学意义(P<0.05),那格列奈组差异无统计学意义(P>0.05),两组间治疗前后差值差异无统计学意义(P>0.05).国产米格列奈钙片组不良反应发生率为3.36%,那格列奈组为7.56%,两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 国产米格列奈钙片在治疗2型糖尿病方面的有效性和安全性与那格列奈相当,且对轻中度及胰岛分泌功能尚可的2型糖尿病患者有较好的降糖效果.
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腹膜淋巴管瘤的MDCT表现与临床病理分析
目的 探讨腹膜淋巴管瘤的多层螺旋CT(MDCT)的影像表现特征,并分析它们在临床诊断中的价值.方法 收集2008年11月至2011年2月经外科手术和病理检查证实的淋巴管瘤20例,回顾性分析其临床表现及MDCT影像学特征,并与手术和病理结果进行对照分析.结果 20例淋巴管瘤中,来源于小肠系膜11例,结肠系膜2例,大网膜4例,小网膜囊3例.MDCT表现为:病变沿腹膜间隙生长,呈形态大小不一的囊状肿块,密度均匀,单囊或多囊,增强后不强化或囊壁及分隔轻度强化.病理表现为肿瘤由不规则扩张的淋巴管构成,管腔内覆扁平上皮,其内充填淋巴液.结论 MDCT能直观、准确显示瘤体的部位、大小、性状、血供和毗邻结构,可较好地定位、定性,为临床提供较好的诊断依据.
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周期素cyclin G1在小鼠睾丸生精上皮中的表达特点
目的 观察细胞周期素cyclin G1在不同年龄小鼠睾丸生精上皮中的表达与分布,初步探讨其在精子发生过程中的生理意义.方法 分别选用3周龄、7~8周龄及11~12月龄的雄性昆明小鼠,运用免疫组化方法观察分析cyclin G1在睾丸生精上皮中的表达.结果 cyclin G1在3周龄小鼠睾丸生精上皮中无明显表达;在7~8周龄与11~12月龄的小鼠睾丸生精上皮中,cyclin G1主要表达在精原细胞、精母细胞以及精子细胞,且定位于胞核.7~8周龄与11~12月龄的小鼠睾丸生精上皮中cyclin G1的表达均高于3周龄组(P<0.05).结论 cyclin G1在小鼠睾丸生精上皮中的表达特点提示其与精子发生相关,且可能参与了生精启动以及减数分裂过程的调控.
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毛细管电泳对大鼠炎症模型的代谢组学研究
目的 建立尿液代谢物组的毛细管电泳分析方法,了解炎症模型大鼠的尿液代谢物轮廓变化.方法 基于代谢组学方法,利用毛细管区带电泳分析正常大鼠、炎症模型大鼠尿液代谢物数据,用计算机辅助相似度评价系统进行峰匹配和数据分析,结合主成分分析方法,研究炎症模型大鼠的尿液代谢轮廓.结果 大鼠尿液毛细管电泳图谱经主成分分析显示炎症大鼠尿液与正常大鼠尿液代谢物表型不同,并且不受性别差异、个体差异、昼夜差异、日间差异的影响.结论 基于毛细管电泳的代谢组学技术可以为炎症模型的尿液代谢物轮廓分析提供研究手段,为炎症疾病及药物代谢组学的进一步研究奠定了基础.
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小波神经网络在梅毒发病率预测中的应用初探
目的 探讨小波神经网络在梅毒发病率预测中的应用价值.方法 以2004~2008年四川省梅毒月发病率数据为例,分别构建误差逆传播(BP)神经网络和小波神经网络预测模型,并对两种模型进行预测效果评价.结果 在组内回代中小波神经网络的平均绝对误差(MAE)、均方误差平方根(RMSE)和平均绝对百分比误差(MAPE)分别为:0.0719、0.0862、11.52%,BP神经网络各指标的值分别为:0.0892、0.1183、14.87%;在外推预测中小波神经网络的MAE、RMSE、MAPE分别为0.0497、0.0513、4.60%,BP神经网络各指标的值分别为0.0816、0.1119、7.25%.小波神经网络和BP神经网络均为高精度预测模型,但前者组内回代效果和外推预测效果均明显优于后者.结论 小波神经网络在梅毒月发病率预测中具有较好的应用价值.
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动态增强MRI扫描中时间-信号强度曲线对乳腺良恶性病变的鉴别诊断价值
目的 探讨动态增强MRI扫描中时间-信号强度曲线(time-signal intensity curve,TIC)的各项指标对乳腺良恶性病变的鉴别诊断价值.方法 经病理确诊乳腺患者44例,共50个乳腺病灶,其中良性24个,恶性26个,所有病灶均在术前一周行双乳动态增强MRI扫描,在图像病灶的ROI区绘制TIC,并对比分析良恶性肿瘤的TIC曲线形态、Tpeak、Epeak、Slopei、E1、E2、Wpeak-7、Wpeak-9,对差异有统计学意义指标绘制ROC曲线.结果 TIC曲线形态、Tpeak、Slopei、E1、E2、Wpeak-9对乳腺良恶性病灶的诊断差异有统计学意义(P<0.05);Epeak、Wpeak-7对乳腺良恶性病灶的诊断差异没有统计学意义(P>0.05).TIC曲线形态、Tpeak、Slope1、E1、E2、wpeak-9对乳腺良恶性肿瘤诊断的敏感性分别为92.3%、95.83%、80.77%、61.53%、69.23%、69.23%,特异性分别为87.5%、92.3%、95.8%、87.5%、79.17%、79.17%.其中TIC曲线形态、Tpeak、Slopei较E1、E2、Wpeak-9对良恶性乳腺病灶有更高的鉴别诊断价值(P<0.05).结论 动态增强MRI的TIC曲线形态、Tpeak、Slope1、E1、E2、Wpeak-9有助于乳腺病变良恶性的鉴别,其中TIC曲线形态、Tpeak、Slope1对乳腺良恶性病变有很好的鉴别诊断价值.
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Rogerson空间模式监测方法在传染病实时监测中的参数设置和尺度选择
目的 探讨Rogerson空间模式监测方法在传染病实时监测应用中的参数设置方法和适宜的分析尺度.方法 运用Rogerson空间模式监测方法对2006~2009年河南省甲肝数据进行模拟监测和分析.结果 以地市为空间尺度分析时参数设置为n0=12、K=0.5、H=7.17、τ=25,报警仅26次;以区县为空间尺度时,参数设置为n0=4、K=0.5、H=8.26、τ=15,报警为115次.结论 参数设置首先设定K和α的取值,然后选择报警次数的变动趋势较平稳时的no和τ;就甲肝而言,以区县为空间尺度进行聚集性探测较为合理.
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数字减影血管造影在小肠出血诊断中的价值研究
目的 探讨数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)对小肠出血诊断的价值.方法 对临床怀疑小肠出血的39例患者行DSA检查,对接受了外科手术治疗并取得手术及病理结果的患者评价DSA对小肠出血诊断的敏感性、特异性及准确性.对于大量出血、血流动力学不稳定者(收缩压<90 mmHg,休克指数>1)及不能耐受手术者同时履行介入栓塞止血.结果 39例患者中,DSA检查阳性者33例,8例成功实施介入栓塞止血.25例行外科手术,其中24例证实出血的部位及原因.DSA诊断小肠出血的敏感性为91.7%,特异性为100%,定位诊断准确度92%,与手术病理诊断的符合率为77.3%.结论 DSA是诊断小肠出血的有效方法,在明确诊断的基础上可同时实施介入治疗.
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高效液相色谱法测定人血浆中比阿培南浓度
目的 建立测定人血浆中比阿培南浓度的反相高效液相色谱法.方法 采用YMC-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱,以0.1 mol/L醋酸钠(醋酸调pH4.5):乙腈=98:2(V:V)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,紫外检测波长为300 nm,直接沉淀蛋白后用二氯甲烷反洗,进样0.03mL.结果 比阿培南血浆标准曲线线性范围为0.0625 mg/L~80 mg/L,低定量限为0.0625 mg/L,预处理回收率为96.11%~98.76%,方法回收率为99.14%~109.69%,批内RSD为0.92%~2.79%,批间RSD为2.46%~4.08%.血浆样品室温放置5 h、反复冻融3次、-30℃长期保存28 d、预处理后样品进样室中放置24 h、重复进样2次,测定结果稳定,与0时刻比较变化率均小于7%.结论 该方法操作简单,结果准确,重现性好,可用于人血浆中比阿培南浓度测定和药动学研究.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |
1999 | 01 02 03 04 |