四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
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河南省某3县HIV抗体阳性育龄妇女艾滋病认知行为调查
目的 了解河南省HIV抗体阳性育龄妇女的人口学特征以及对艾滋病相关知识的认知情况,提出具体针对性的AIDS防治措施.方法 采用访谈法进行调查,对资料进行统计描述、χ2检验及logistic回归分析.结果 被调查者对9项艾滋病相关知识的认知率都高于90%;不同年龄组、不同文化程度组、不同收入组的被调查者对部分艾滋病认知情况及安全套使用情况的差异具有统计学意义(P＜0.05);经logistic回归模型分析,年龄(OR＜1)和人均纯收入(OR＞1)是影响HIV抗体阳性育龄妇女安全套使用的独立因素.结论 应重点加强对低龄、收入相对较高的HIV抗体阳性育龄妇女的宣传防控,采取综合AIDS防治措施以降低性传播与母婴传播几率;同时加强对AIDS非传播途径的宣传,减少社会对艾滋人群的歧视.
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二甲氧乙二酰甘氨酸对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用
目的 探讨二甲氧乙二酰甘氨酸(dimethyloxalyl glycine,DMOG)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的保护作用.方法 10日龄SD大鼠48只,分为3组:假手术组、缺氧缺血组、DMOG干预组.造模后4 h、8 h、24 h、72 h处死大鼠并取脑组织,通过免疫组织化学染色法检测各组脑组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白和促凋亡蛋白cleaved caspase 3(CC3)的表达,TUNEL 法检测各组细胞凋亡.结果 DMOG干预组,脑组织中HIF-1α的表达明显高于缺氧缺血组,CC3蛋白的表达和细胞凋亡程度较缺氧缺血组明显减少.结论 DMOG可能通过稳定HIF-1α的活性对新生鼠HIBD起保护作用.
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D4S1627、D14S1426和D1S1649STR基因座的复合扩增同步检测及遗传多态性分析
目的 制备D4S1627、D14S1426、D1S1649 STR基因座的等位基因分型标准物,构建这3个STR基因座的复合扩增同步检测方法并进行遗传多态性分析.方法 本实验采用复合扩增同步检测方法,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染显色,检测成都地区120名无关汉族个体的D4S1627、D14S1426、D1S1649 STR基因座基因型及等位基因频率分布.结果 3个STR基因座复合扩增同步检测电泳分型条带清晰,各等位基因片段互不重叠,每一个体样本与单个基因座检测结果一致.复合扩增同步检测方法结果显示,3个STR基因座在成都市汉族群体中的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,基因座D4S1627检出6个等位基因(10～15);D14S1426检出9个等位基因(5、6、8～14),未检出等位基因7;D1S1649检出6个等位基因(7～12).3个STR基因座的累积个人识别率为0.9989,累积非父排除率为0.9603.结论 成功建立D4S1627、D14S1426和D1S1649 STR基因座复合扩增同步检测方法,这3个STR基因座在群体遗传研究以及法医学鉴定中具有实际应用价值.
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靶向PKM2干扰质粒联合重组人血管内皮抑素治疗肺癌的实验研究
目的 研究丙酮酸激酶同工酶M2(PKM2)干扰质粒联合重组人血管内皮抑素是否能增强单药的抗癌作用.方法 免疫荧光检测A549细胞内PKM2蛋白表达,蛋白印迹检测PKM2质粒干扰效果.建立裸鼠皮下A549肺癌模型,将25只荷瘤小鼠随机平均分为5组:生理盐水组(NS组)、无关序列干扰质粒组(psh-Control组)、PKM2干扰质粒组(psh-PKM2组)、重组人血管内皮抑素组(Endostar组)、psh-PKM2+Endostar联合组(Combination组).观察各组肿瘤体积、肿瘤血管生成、肿瘤细胞凋亡及毒副反应.结果 免疫荧光证实了A549细胞内PKM2的表达,蛋白印迹检测证实psh-PKM2可明显降低A549细胞中PKM2蛋白的表达(P＜0.05).与PKM2干扰质粒或重组人血管内皮抑素单药组相比,psh-PKM2+Endostar联合治疗组肿瘤生长减慢,肿瘤组织微血管密度减少,肿瘤细胞凋亡增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PKM2干扰质粒联合人重组血管内皮抑素能明显增强单药的抗癌作用,其作用机制可能为促使肿瘤细胞凋亡增加.
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糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激与肌特异性环脂蛋白1表达关系的研究
目的 探讨糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激水平及其对肌特异性环指蛋白1基因(MuRF1)表达的影响.方法 通过高糖高脂饮食联合尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)构建2型糖尿病大鼠模型,分别检测大鼠腓肠肌肌纤维面积、脂质过氧化水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及MuRF1 mRNA的表达水平,同时设对照组;通过体外培养C2C12成肌细胞,不同浓度H2O2(0、0.01、0.05、0.10和0.20 mmol/L)诱导肌管细胞内氧化应激,Western blot检测不同程度氧化应激下细胞MuRF1的表达水平.结果 与对照组大鼠相比较,糖尿病大鼠腓肠肌肌纤维面积减小,脂质过氧化水平增高,MuRF1 mRNA表达上调(P＜0.01);体外细胞培养发现0.05、0.10、0.20 mmol/LH2O2诱导的C2C12肌管细胞氧化应激可上调MuRF1的表达(P＜0.01).结论 糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激水平增高,使MuRF1基因表达上调,从而导致骨骼肌萎缩.
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慢病毒介导的稳定沉默MyD88基因的胰腺导管细胞株的建立
目的 建立稳定沉默髓样分化因子88基因(MyD88)的大鼠胰腺导管细胞株ARIP.方法 设计并构建编码MyD88 mRNA的短发卡样RNA(shRNA)质粒表达载体,并用三质粒包装系统包装成慢病毒,分别命名为Lenti-shMyD88-1和Lenti-shMyD88-2.将ARIP分为未处理组、Lenti-Non Target阴性对照组、Lenti-shMyD88-1组和Lenti-shMyD88-2组.并用相应的病毒转导(未处理组只换液).经流式分选和抗生素筛选结合的方法筛选绿色荧光蛋白阳性细胞,测定细胞的转导效率并用real-time PCR方法测定沉默效率.结果 成功构建了编码表达MyD88的shRNA表达质粒.经流式分选和抗生素筛选后,慢病毒转导效率均达到100%.与未处理组相比,Lenti-shMyD88-1和Lenti-shMyD88-2对MyD88 mRNA的沉默效率分别为82.73%±1.203%和75.56%±1.176%.结论 建立了MyD88基因稳定沉默的胰腺导管细胞株.为探讨MyD88基因与急性胰腺炎的相关性提供了一个全新的、稳定的、可操作的细胞模型.
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妊娠期糖尿病危险度评价模型初步研究
目的 分析与妊娠期糖尿病(GDM)发生有关的影响因素,建立GDM危险度的评价模型.方法 采用病例-对照研究,通过非条件logistic回归分析GDM的影响因素,在此基础上得到GDM危险度评价模型,并用接受者工作特征曲线(ROC)和Hosmer-1emeshow拟合优度检验评价模型.结果 孕妇年龄、血压高、不良孕产史、孕前肥胖、过量摄入水果、一级亲属糖尿病家族史及注重食品的口味是GDM的危险因素,保护因素为进食白肉频率较高;当临界点为3.6分时,约登指数大,该模型的特异度和灵敏度分别为73.7%和68.5%;ROC曲线下面积(AUC)为0.79,Hosmer-lemeshow拟合优度指标P=0.97.结论 多种因素与GDM的发生有关;该评价模型简便易行,且具有较高的诊断效能,为今后GDM高危人群的筛查提供方法学依据.
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塞来昔布联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7/Taxol耐药细胞株多药耐药的逆转作用及机制的探讨
目的 观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布(Celecoxib)联合紫杉醇(Taxol)对人乳腺癌MCF-7/Taxol耐药细胞多药耐药(multiple drug resistance,MDR)的逆转作用,并初步探讨其作用机制.方法 体外诱导建立人乳腺癌MCF-7/Taxol耐药细胞株,CCK-8法检测Taxol、塞来昔布对MCF-7/Taxol细胞的毒性作用及塞来昔布对MCF-7/Taxol细胞多药耐药的逆转作用.实验分为:同步传代的MCF-7细胞组(A组),MCF-7/Taxol细胞阴性对照组(B组),单用Taxol无毒剂量的MCF-7/Taxol细胞组(C组),Taxol无毒剂量联合低逆转浓度塞来昔布的MCF-7/Taxol细胞组(D组),Taxol无毒剂量联合高逆转浓度塞来昔布的MCF-7/Taxol细胞组(E 组),单用低逆转浓度塞来昔布的MCF-7/Taxol细胞组(F组),单用高逆转浓度塞来昔布的MCF-7/Taxol细胞组(G组).RT-PCR和Western blot检测各组细胞MDR1基因和乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)基因及其表达产物P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和BCRP,以及COX-2蛋白表达的变化.结果 成功建立具有较高耐药性的人乳腺癌MCF-7/Taxol细胞.塞来昔布与Taxol联合作用于细胞(D组、E组)与单用Taxol (C组)相比,对细胞的杀伤效应升高(P＜0.05);与B组相比,Taxol(C组)能上调细胞P-gp表达及其mRNA水平(P＜0.05),塞来昔布(F组、G组)能下调细胞P-gp、BCRP蛋白表达及其mRNA水平(P＜0.05),以及下调COX-2蛋白表达(P＜0.05),此外,塞来昔布(D组、E组)能抑制Taxol对细胞P-gp和其mRNA水平的上调作用.结论 塞来昔布能有效逆转MCF-7/Taxol细胞的肿瘤多药耐药,其机制可能是通过降低细胞COX-2表达,从而降低P-gp及BCRP蛋白表达.
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白细胞介素细胞因子在大鼠急性胰腺炎中的作用及其机制研究
目的 制作大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型,探讨白细胞介素细胞因子IL-6、IL-17、IL-23、IL-23R在AP发生过程中的分子机制.方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组12只,通过腹腔注射左旋精氨酸(250 ng/100 g体质量,注射两次,中间间隔1 h)建立动物模型,干预组于第2次腹腔给药后尾静脉注射IL-23抗体(900 ng/100 g体质量),各组大鼠分别于造模后3 h、6 h和12 h处死并取材(每个时间点处死3只).用ELISA方法检测大鼠血液、胰腺、肺、肾中的各白介素细胞因子(IL-6、IL-17、IL-23、IL-23R)的含量.HE 染色观察各组大鼠胰腺组织病理变化,并进行病理学评分.结果 模型组血清、胰腺、肺、肾中IL-6含量高于对照组和干预组(P＜0.05),并随着时间的延长而升高(P＜0.05).模型组血清、胰腺、肺、肾中IL-17和IL-23R含量高于对照组和干预组(P＜0.01).模型组血清、胰腺、肺、肾中IL-23高于对照组和干预组(P＜0.05).在各时间点模型组胰腺组织病理学评分高于干预组和对照组(P＜0.01),干预组评分高于对照组(P＜0.05).结论 在AP发生过程中,IL-23参与了IL-17和IL-6的生成,它们均在AP的急性炎症反应中发挥作用.
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非对比剂增强的磁共振血管成像技术对肝静脉显示的初步评价
目的 评价非对比剂增强的磁共振血管成像技术对肝静脉解剖变异的显示和诊断价值.方法 用同一磁共振设备,先后对10例肝硬化患者和12例肝移植供体进行对比剂强化的磁共振血管造影(CE-MRA)和非对比剂强化的磁共振血管造影(NCE-MRA),获取肝静脉血管的影像解剖图像.由2位医师独立对每例图像质量进行技术评分,评价两种方法对于血管显示的价值.结果 NCE-MRA组和CE-MRA组中,图像质量为3分以上的分别占86.4%(19/22)和90.9%(20/22);两种方法显示22例肝静脉血管的符合率为90.9%(20/22),均没有出现假阳性病例,NCE-MRA方法出现假阴性2例.两者优良率差异无统计学意义(P＞0.05),并且两位诊断医师的一致性较高,Kappa值均＞0.75.结论 NCE-MRA是一种非侵入性、无需使用造影剂的磁共振血管成像技术,可以有效地用于肝静脉的评估.
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肝硬化患者64层螺旋CT全肝灌注成像研究
目的 探讨全肝灌注成像一站式检查方法评估肝硬化严重程度的可行性和显示肝血管及侧枝循环开放的价值.方法 前瞻性纳入经临床、其它影像检查证实为肝硬化的住院患者40例和正常检查者20例行全肝灌注扫描.利用CT肝脏灌注软件得到腹主动脉和门静脉时间-密度曲线(TDC)、肝脏感兴趣区(ROI)灌注参数值:肝动脉灌注量(HAP)、门静脉灌注量(HPP)、总肝灌注量(TLP)和肝动脉灌注指数(HPI),同时得到各灌注参数对应的伪彩图.测量正常组与肝硬化肝功能Child-Pugh分级各组腹主动脉和门静脉达峰时间、峰值及灌注参数;观察肝硬化门体侧枝循环开放情况.结果 肝硬化组较正常组腹主动脉及门静脉达峰时间延迟(P＜0.05),峰值减低(P＜0.05).HAP,肝硬化Child A级较正常组和Child B、C级升高(P＜0.05).HPP和TLP肝硬化组Child A～C级较正常组逐渐减低(P＜0.05).HPI,Child C级较其余3组升高(P＜0.05).肝硬化组中侧枝循环开放较多组HPP和TLP值较无或少侧支循环形放组升高(P＜0.05).结论 全肝灌注扫描可有效评估肝硬化肝功能损害的程度,重建得到的肝血管图像可显示肝血管全貌及门体侧枝循环开放情况.
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热休克蛋白90抑制剂对TNFα诱导肿瘤细胞凋亡和调控NF-κB信号通路的影响
目的 探讨热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)抑制剂17-dimethylamino-ethvlaminogeldanamycin(17DMAG)对肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的肿瘤细胞凋亡的影响及其作用机理.方法 采用乳酸脱氢酶释放实验检测不同剂量的17DMAG与TNFα共培养对子宫颈癌细胞株HeLa和卵巢癌细胞株SKOV3的细胞毒作用,吖啶橙/溴化乙锭双重染色后荧光显微镜下观察17DMAG和TNFα共同处理所导致的细胞形态学改变,并采用Western blot检测细胞凋亡相关分子半胱天冬酶-8(caspase-8)、半胱天冬酶-3(caspase-3)、多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]和TNFα诱导的核因子-kB(NF-kB)信号通路信号分子receptor-interaction protein(RIP)IkB kinase β(IKKβ)、inhibitor of IkB(IkBα)的变化.结果 17DMAG可增强TNFα对HeLa细胞和SKOV3细胞的杀伤作用,17DMAG可抑制TNFα诱导的NNF-kB信号通路中关键的信号分子RIP和IKKβ,阻断NF-kB的活化,增强TNFα诱导的外源性细胞凋亡.结论 17DMAG可通过抑制NF-kB信号通路增强TNFα诱导的肿瘤细胞凋亡,提高TNFα的抗肿瘤效率.
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农村留守老人健康状况的影响因素研究
目的 探讨子女外出务工等因素对四川省农村老年人的健康状况的影响,为后续相关研究的展开和卫生部门政策制定提供基础与借鉴.方法 利用四川省第四次国家卫生服务调查西部扩点资料,对四川省农村留守与非留守老人一般人口学特征、两周患病和慢性病患病情况进行描述性分析;结合数据实际,采用双反应变量模型分析子女外出务工、人口学特征和家庭特征等因素对农村老人两周患病和半年内患慢性病情况的影响.结果 四川省农村留守老人两周患病率和慢性病患病率分别为44.0%和44.5%,高于西部农村老人平均水平;留守老人两周患病率、慢性病患病率与非留守老人基本相同,仅顺位有所差别;性别、是否有子女外出务工、居住方式(是否有子女共居)是农村老人两周患病和患慢性病情况的主要影响因素,且子女外出务工对不与任何子女共居(独居、与配偶/孙辈共居)和有子女共居的家庭中的留守老人健康状况影响不同.结论 与非留守老人相比,四川省农村留守老人的整体健康状况较差;留守老人疾病别患病率顺位较为特殊,椎间盘疾病更为严重,这可能与留守老人日常劳动负荷较大有关;留守老人的健康问题比较严重,尤其是不与任何子女共居家庭的留守老人.社会各界都应重视农村留守老人的健康问题,应采取相应的措施改善其健康状况.
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抗环瓜氨酸肽抗体在混合性结缔组织病中的检测及意义
目的 探讨抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体在混合性结缔组织病(MCTD)中的临床价值.方法 采用酶联免疫吸附法分别检测57例MCTD、78例类风湿关节炎(RA)、64例系统性红斑狼疮(SLE)、56例多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)、53例干燥综合征(SS)、33例系统性硬化病(SSc)患者血清的抗CCP抗体水平,分析比较抗CCP抗体与MCTD各种临床特征的关系.结果 抗CCP抗体在RA、MCTD、符合RA诊断标准的MCTD、SLE、PM/DM、SS、SSc患者中的阳性率分别为87.5%、15.8%、57.1%、14.1%、15.2%、18.9%、9.1%,其中RA组及符合RA诊断标准的MCTD组与其它组相比差异有统计学意义(P＜0.05);在抗CCP抗体阳性的MCTD患者中,RA 样表现及SS样表现的发生率高于抗CCP抗体阴性的MCTD患者(P＜0.05);在符合RA诊断标准的MCTD患者中,RA相关症状、弥漫性硬化及抗CCP抗体阳性的发生率高于不符合RA诊断标准的MCTD患者(P＜0.01);符合RA诊断标准的MCTD与抗CCP抗体阳性但不符合RA标准的MCTD的病谱特点有显著差异.结论 高滴度抗CCP抗体合并RA、SLE和SSc的临床特征提示MCTD患者可能出现侵蚀性关节炎.
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地震创伤后应激障碍患者脑静息态默认网络研究
目的 研究经历同源创伤后患创伤后应激障碍(PTSD)患者的脑静息状态默认网络,探索PTSD的发病机制.方法 17例地震PTSD患者和20例正常对照者接受静息态功能磁共振扫描.分别以左、右侧后扣带回为种子点行全脑静息态功能连接分析并进行组间比较.结果 PTSD组与对照组相比,在静息状态下脑功能连接减低的区域包括左额上回、右梭状回,而功能连接增强的区域包括右楔前叶及右侧颞上回和右侧颞中回.结论 PTSD患者在静息状态下存在默认网络功能连接异常,默认网络异常可能是PTSD的神经病理机制之一.
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成都地区中老年居民肥胖及腹型肥胖患病率15年变化分析
目的 分析心血管疾病的重要危险因素肥胖及腹型肥胖在成都地区中老年居民中的15年变化情况,为制订更加合理的心血管防治策略提供科学依据.方法 1992年在成都采用非随机整群选样和群内性别年龄分层随机抽样相结合的方法建立研究队列,2007年复查同一人群,共纳入1061例,利用2次调查的体重指数(BMI)、腰围等资料,比较15年间成都地区中老年居民肥胖患病率及腹型肥胖患病率的变化情况.结果 ①2007年与1992年相比,该队列人群BMI、腰围以及相应的肥胖患病率、腹型肥胖患病率皆有升高,且年份间差异有统计学意义(P＜0.05).②2007年处于50～64岁人群与1992年处于该年龄组人群比较,不管是BMI、腰围水平,还是肥胖、腹型肥胖患病率,2007年人群皆高于1992年人群水平,差异有统计学意义(P＜0.05).③1992年及2007年肥胖、腹型肥胖标化患病率的男女性别间比较,除2007年腹型肥胖标化患病率男女间无明显差异外,1992年肥胖及腹型肥胖标化患病率,2007年肥胖标化患病率均为女性高于男性.结论 成都地区中老年居民肥胖及腹型肥胖患病率伴随着年龄的增长而增加;15年前后处于同一年龄分布组人群的肥胖及腹型肥胖患病率亦有增加.
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赖型钩端螺旋体OmpA外膜蛋白Loa22通过 Ca2+信号通路介导A549细胞凋亡
目的 研究赖型钩端螺旋体(简称钩体)外膜蛋白Loa22通过Ca2+信号通路对细胞凋亡的影响,探讨该基因在钩体黏附侵袭细胞并诱导其凋亡过程中可能的信号传导机制.方法 以人肺腺上皮细胞(A549)为模型,用100 μg/mL纯化Loa22成熟肽作用于细胞24 h,检测细胞凋亡及细胞内游离钙浓度([Ca2+]I),观察F-actin细胞骨架变化,检测钙调素(CaM)mRNA表达水平.同时设磷脂酶C(PLC)特异阻断剂U73122预处理+Loa22成熟肽组,观察上述指标变化.结果 Loa22成熟肽作用A549后,细胞凋亡率升高,并诱导[Ca2+]I增加,CaMmRNA表达水平及乳酸脱氢酶(LDH)活性上升,F-actin细胞骨架重排.而预先用U73122预处理后,细胞凋亡率、[Ca2+]I、CaMmRNA和LDH活性均降低(P＜0.01),F-actin细胞骨架重排程度减轻.结论 Loa22成熟肽通过PLC信号通路触发细胞[Ca2+]升高,导致F-actin细胞骨架重排,从而引发细胞凋亡,提示该基因参与钩体侵袭细胞引发细胞凋亡病理过程,可能是致病性钩体的一个重要毒力相关基因.
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青蒿素对大鼠子宫内膜异位症的抑制作用及机理探讨
目的 探讨青蒿素对大鼠子宫内膜异位症模型的异位内膜是否具有抑制作用,以及其抑制作用与细胞凋亡和血管生成之间的关系.方法 通过手术方法建立大鼠子宫内膜异位症模型,4周后测量异位内膜体积,将造模成功的大鼠(n=40)分为4组:青蒿素高剂量组[300mg/(kg·d)]、青蒿素低剂量组[150 mg/(kg·d)]、丹那唑组[160 mg/(kg·d)]和溶剂对照组.每日经灌胃给药,持续4周后处死大鼠,比较各组病灶体积及组织学变化,免疫组化法检测各样本的凋亡指数、Bcl-2和微血管密度.结果 与溶剂对照组相比,青蒿素高剂量组、青蒿素低剂量组和丹那唑组异位内膜的体积减少(P均＜0.05),但3个治疗组的异位内膜体积差异无统计学意义.与溶剂对照组相比,3个治疗组异位内膜组织的凋亡指数增高,Bcl-2表达和微血管密度降低(P均＜0.05);除微血管密度外,青蒿素组凋亡指数较丹那唑组更高,Bcl-2表达较丹那唑组更低(P均＜0.05),且呈剂量依赖关系.各组大鼠未见明显的毒副反应.结论 青蒿素对大鼠子宫内膜异位症模型中异位内膜的发生及发展有抑制作用,其抑制效应可能与促进细胞的凋亡和抑制血管生成有关.
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人血清白蛋白与促红细胞生成素融合蛋白的构建及表达
目的 构建重组人血清白蛋白促红细胞生成素融合蛋白(HAS-EPO)表达载体,用CHO细胞表达该重组蛋白.方法 PCR扩增出人血清白蛋白基因(HAS)和促红细胞生成素基因(EPO);合成编码多肽GS (GGGGS)3的DNA片段作为接头(Linker),采用重叠PCR的方法将Linker与EPO基因拼接成LEPO基因.HAS与LEPO基因通过BamH I酶切位点相连成HAS-EPO融合基因;将该融合基因插入表达载体pCI-neo构建为表达质粒pCI-HLE.脂质体转染CHO细胞,以G418抗性筛选转染细胞.用PCR及Western blot方法鉴定被转染CHO细胞,以ELISA方法检测被转染CHO细胞表达情况.结果 酶切及测序结果证实pCI-HLE构建成功.PCR检测表明融合基因已转入CHO细胞;Western blot结果表明融合基因成功表达,并具有EPO免疫原性.ELISA测活显示融合蛋白体外活性在86～637 IU/(mL·106·72 h)之间.结论 pCI-HLE真核表达载体可以在CHO细胞中成功表达具有EPO免疫原性的HAS-EPO融合蛋白,为开发长效EPO奠定基础.
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SurvivinT34A突变体对小鼠B16肺转移瘤的治疗作用
目的 研究阳离子脂质体介导的Survivin基因负性突变体SurvivinT34A对小鼠B16肺转移瘤的治疗作用,并探讨其作用机理.方法 尾静脉接种小鼠黑色素瘤细胞B16建立肺转移模型,接种后第3 d将18只荷瘤鼠随机分为生理盐水组(NS组)、空载体组(pORF9组)和重组质粒pORF9-mSurvivinT34A治疗组(mSurvivinT34A组),尾静脉给药,每次5μg/只(100μL/只),隔天治疗1次,共治疗5次.在接种后第28 d处死全部小鼠,剥离肺组织,称湿重,在显微镜下计数转移灶数量,测量转移灶大小.然后对肺组织进行HE染色观察各组小鼠肺组织病理变化情况,TUNEL染色检测转移灶中肿瘤细胞的凋亡情况.结果 与PORF9组和NS组相比,mSurvivnT34A组小鼠肺组织结构基本保持完整,转移灶减少(P＜0.05),肺湿重降低(P＜0.05),大量肿瘤细胞发生凋亡(P＜0.05).结论 mSurvivnT34A质粒能够显著抑制小鼠黑色素瘤肺转移灶的形成,其作用机理可能主要为诱导肿瘤细胞发生凋亡.
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位移对双探头SPECT心肌显像质量的影响及校正
目的 探讨体位移动对双探头单光子发射计算机化断层(SPECT)心肌显像图像质量的影响及校正方法.方法 20例患者在相同的采集条件下采用正常及主动移动进行门控采集,采用软件分别进行位移校正与非校正处理并进行位移分析,对心肌图像采用定量灌注SPECT(QPS)软件进行分节评分.结果 缺损程度与位移幅度(r=0.58,P＜0.01)、位移发生的频次(r=0.811,P＜0.01)呈正相关.90%(18/20)的患者进行移动校正后图像质量有提高(P＜0.05),校正后只有2.2%(7/318)的节段由原来的正常(评分0～1)变为非正常(评分2～4),而有35.3%(29/82)的节段由非正常评分变为正常评分.结论 对于位移大于1个像素及1次以上移动的心肌显像患者应做移动校正.但对于位移大于3个像素以及频繁位移的患者校正效果不明显.
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血氧水平依赖磁共振评估2型糖尿病患者肾脏氧合水平的研究
目的 利用血氧水平依赖磁共振成像评估2型糖尿病患者肾脏氧合水平.方法 分别测量30名正常人和25名糖尿病患者双肾皮髓质的R2*值及皮质厚度,并进行组间比较.分析皮髓质R2*值与临床资料的相关性.结果 对比正常人,糖尿病患者肾脏髓质的R2*值显著增高,并与肾小球滤过率(eGFR)呈正相关,皮质厚度无差异.结论 血氧水平依赖磁共振成像是一种有效的无创评估肾内各区域氧合水平的方法,相较于形态学检查能更早发现糖尿病患者的肾脏异常.
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rSj26GST-Sj32融合蛋白-IgG-ELISA用于慢性日本血吸虫病诊断的研究
目的 探讨rSj26GST-Sj32-IgG-ELISA用于慢性日本血吸虫病的诊断价值.方法 将含有重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32的大肠埃希菌BL21(DE3)用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳,用Ni-NTA试剂盒纯化重组Sj26GST-Sj32(rSj26GST-Sj32)融合蛋白.常规方法制备日本血吸虫成虫抗原(SjAWA).用rSj26GST-Sj32融合蛋白和SjAWA作为包被抗原建立ELISA检测慢性日本血吸虫病患者的血清特异性IgG抗体,同时以华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、泡型棘球蚴病、囊型棘球蚴病、乙型肝炎、肺结核患者血清和健康人血清作为对照.结果 rSj26GST-Sj32融合蛋白检测慢性日本血吸虫病患者的敏感性和特异性分别为95.00%(38/40)和97.67%(42/43),而SjAWA分别为92.50%(37/40)和97.67%(42/43).两种抗原的检出率差异无统计学意义(P均＞0.05).两种抗原与华支睾吸虫病和卫氏并殖吸虫病患者血清均有不同程度的交叉反应.rSj26GST-Sj32融合蛋白与泡型棘球蚴病患者血清无交叉反应,但SjAWA与该病2例患者血清有交叉反应,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rSj26GST-Sj32-IgG-ELISA可用于慢性日本血吸虫病的免疫诊断.
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激素敏感性脂肪酶基因C-60G多态性对高糖膳食诱导的健康青年血浆糖脂代谢指标变化的影响
目的 探讨激素敏感性脂肪酶(HSL)基因(LIPE)启动子C-60G多态性在高糖膳食诱导的健康青年血浆糖脂代谢指标变化中的作用.方法 广告招募56名平均年龄为(22.89±1.80)岁的在校健康志愿者(男性27名,女性29名),给予7 d平衡膳食(31%脂肪、54%碳水化合物、15%蛋白质)和6 d高糖膳食(15%脂肪、70%碳水化合物和15%蛋白质),于第1、8、14 d取12 h空腹静脉血,测定血脂、血糖、胰岛素水平,并计算体重指数(BMI)及稳态模型估算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)值.提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法分析LIPE C-60G多态性.结果 不论在高糖膳食前还是高糖膳食后,CC基因型女性高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(P＜0.01或P＜0.05)和载脂蛋白A-Ⅰ(apo A-Ⅰ)(P＜0.01或P＜0.001)较CC基因型男性升高;高糖膳食后,CC基因型女性总胆固醇(TC)(P＜0.01)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(P＜0.05)较CC基因型男性升高.与高糖膳食前相比,高糖膳食后CC基因型男性BMI(P＜0.05)、TC(P＜0.001)和LDL-C(P＜0.01)降低,HDL-C(P＜0.01)和apo A-Ⅰ(P＜0.05)升高;CG基因型男性BMI(P＜0.05)和TC(P＜0.01)降低.CC基因型女性TC(P＜0.001)、LDL-C(P＜0.01)降低,甘油三酯(TG)(P＜0.01)和胰岛素(P＜0.05)升高;CG基因型女性TC降低(P＜0.05),TG升高(P＜0.05).结论 LIPE C-60G变异能够抑制高糖膳食诱导的健康青年男性LDL-C降低及HDL-C和apoA-Ⅰ的升高,抑制高糖诱导的健康青年女性LDL-C降低和胰岛素升高.
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氨基端B型钠尿肽前体评估严重感染和感染性休克预后的研究
目的 探讨血浆氨基端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)水平对严重感染和感染性休克患者的预后评估作用.方法 检测72例严重感染和感染性休克患者入ICU后第1、2、3、5、7 d的血浆NT-proBNP和乳酸(Lac)值,并检测第1、3、7 d的血浆肌酸激酶同工酶mass(CK-Mbmass)、肌钙蛋白T(cTnT)和降钙素原(PCT)水平,计算急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ评分)及序贯器官衰竭估计评分(SOFA评分),统计ICU病死率、住院病死率、ICU时间、住院时间及28 d病死率,分析NT-proBNP的变化特征并与其他指标对临床结局的预测价值进行比较.结果 所有患者的血浆NT-proBNP水平升高,28 d死亡组NF-pro BNP值高于生存组(P＜0.05),入ICU第2 d的血浆NT-proBNP水平达峰值.多因素分析显示对于住院病死率,APACHEⅡ评分与入ICU第3 d的血浆NT-proBNP值是独立预测因素;预测28 d病死率的独立因素是APACHEⅡ评分.结论 严重感染和感染性休克患者的血浆NT-proBNP值普遍升高.入ICU第3 d的血浆NT-proBNP值是严重感染和感染性休克患者住院病死率的独立预测因素.
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应用微阵列芯片分析结肠癌组织中miRNA差异性表达
目的 分析结肠癌与正常结肠黏膜的微小RNA(miRNA)表达谱差异.方法 收集结肠癌组织和癌旁正常结肠黏膜共12对,抽提、纯化RNA,加入荧光标记后与miRNA寡核甘酸基因芯片(Affymetrix公司)杂交,应用SAM软件进行数据分析,对有显著差异的miRNA进行实时荧光定量PCR验证,采用靶基因分析软件分析miRNA功能.结果 has-miR-182、has-miR-17、has-miR-106a、has-miR-93、has-miR-200c、has-miR-92a、has-let-7a、has-miR-20a等8个miRNA在肿瘤组织中显著上调[中位假基因验出率(FDR)＜5%],has-miR-195、has-miR-143、has-miR-145等3个miRNA显著下调(FDR＜5%).结论 结肠癌与正常结肠黏膜之间存在明显的miRNA差异表达,这些miRNA的差异性表达可能与结肠癌的发病、侵袭、转移相关.
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Ⅴ型狼疮性肾炎的临床病理分析
目的 研究Ⅴ型狼疮性肾炎(LN)的临床与病理特点.方法 收集24例经肾活检诊断为Ⅴ型LN患者及同期92例Ⅴ+Ⅲ型、Ⅴ+Ⅳ型、Ⅳ型LN患者的一般资料、全身症状、肾病表现、肾脏病理以及实验室指标进行比较分析.结果 V型LN的系统性红斑狼疮活动指数评分(SLEDAI评分)、发生高血压、贫血的比例以及贫血和低C3血症的严重程度、肾脏病理活动指数、肾小管间质病变评分均低于Ⅴ+Ⅳ型和Ⅳ型LN(P＜0.05).Ⅴ型LN 的肾脏表现以肾病综合征为主,较少发生肾功能不全,与Ⅳ型LN有明显差异.结论 Ⅴ型LN的全身情况、肾脏病理活动性、肾小管间质病变明显轻于Ⅴ+Ⅳ型和Ⅳ型LN,肾脏损害表现与Ⅳ型LN有明显差异.
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子宫癌肉瘤43例临床病理及预后分析
目的 探讨子宫癌肉瘤的临床病理特点、诊断、治疗及预后,以提高对该病的认知.方法 对2004年1月至2010年1月四川大学华西第二医院妇科收治的43例子宫癌肉瘤的临床、病理和预后资料进行回顾性分析.结果 43例中宫颈癌肉瘤2例,宫体癌肉瘤41例.I期20例、Ⅱ期3例、Ⅲ期13例、Ⅳ期7例.I～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期的3年总生存率分别为87.7%、27%,差异有统计学意义(P＜0.000).单因素分析结果提示手术病理分期增加、脉管转移、淋巴结转移、有残留病灶、腹腔冲洗液细胞学阳性预后较差(P＜0.05);多因素分析表明,残留病灶(P=0.012)是预后不良的独立因素.结论 子宫癌肉瘤患者的预后可能与手术病理分期、脉管转移、淋巴结转移、残留病灶、腹腔冲洗液细胞学阳性等有关.
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经翼点入路显微手术治疗前交通动脉瘤
目的 探讨经翼点入路显微外科手术治疗不同类型的前交通动脉瘤的手术时机、方法以及疗效.方法 回顾性分析2009年1月至2010年1月经翼点入路行显微外科手术治疗的114例前交通动脉瘤患者的资料.结果 3 d内手术76例(主要为I～Ⅲ级患者),4～14 d 34例(主要为Ⅳ、V级患者),＞14 d 4例(主要为V级患者);110例行瘤颈夹闭术,4例行动脉瘤夹闭加包裹术.手术效果按Glasgow Outcome Score(GOS)评定:恢复良好97例(85.1%),中度残疾5例(4.4%),重度残疾4例(3.5%),死亡8例(7.0%).结论 对于前交通动脉瘤Hunt-Hess分级I～Ⅲ级的病例应尽早手术,Ⅳ～V级病情稳定后再考虑手术.经翼点入路显微外科手术治疗前交通动脉瘤,术中对重要血管暴露清楚,夹闭瘤颈可靠,手术后并发症少,是一种有效的方法.
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首发精神分裂症患者额叶白质及海马中脑代谢物质的变化
目的 利用氢质子磁共振波谱(1H-MRS)分析首发精神分裂症患者额叶白质及海马脑代谢物质的变化.方法 对符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)诊断标准的63例首发未经过药物治疗的精神分裂症患者和63例健康对照,分别测定额叶白质和海马脑代谢产物N-乙酰基天门冬氨酸(NAA)、肌酸(Cr)、胆碱(Cho)、肌醇(MI),以Cr为参照物,分别计算双侧的NAA/Cr、Cho/Cr、MI/Cr以及NAA/Cho,同时用阳性和阴性症状量表(PANSS)对精神分裂症患者进行症状严重程度的评定.结果 首发精神分裂症组与正常对照组相比,额叶白质及海马的NAA/Cr、Cho/Cr、MI/Cr及NAA/Cho的组间差异均无统计学意义.首发精神分裂症组PANSS 阳性症状评分与右侧额叶白质Cho/Cr存在正相关(r=0.321,P＜0.01),与左侧额叶白质NAA/Cho存在负相关(r=-0.367,P＜0.01);PANSS阴性症状评分与左侧额叶白质NAA/Cr存在负相关(r=-0.280,P＜0.05),与右侧额叶白质NAA/Cr存在负相关(r=-0.372,P＜0.01).结论 首发精神分裂症尚未出现明显的额叶白质及海马的损害.额叶白质功能低下可能是首发精神分裂症阳性症状和阴性症状的神经病理基础.
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负荷门控心肌血流灌注显像正常的糖尿病和非糖尿病患者腺苷注射后心率的变化
目的 回顾性分析负荷门控心肌血流灌注显像正常的糖尿病患者和非糖尿病患者注射腺苷前后心率变化是否存在差异,并分析相关因素.方法 纳入55例糖尿病患者和84例非糖尿病患者,所有患者负荷门控心肌血流灌注显像结果正常,左室射血分数＞50%.记录腺苷注射前后心率和血压.结果 腺苷注射后心率普遍增加,糖尿病组升高(12.6±9.82)次/min,非糖尿病组升高(16.4±12.6)次/min(P=0.063);糖尿病组心率变化比值(注射后心率/注射前心率)低于非糖尿病组(1.18±0.14vs.1.24±0.19,P=0.044),腺苷注射后血压普遍降低,但糖尿病组和非糖尿病组间收缩压和舒张压及其注射后/注射前的比值差异均无统计学意义;多元逐步线性回归结果显示只有糖尿病对腺苷注射后心率变化有影响(Y=-0.08X+1.24,P=0.016).结论 糖尿病患者腺苷负荷心肌灌注显像时心率反应降低可能提示患者存在心脏自主神经病变.
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rhGH和INF-γ对CCl4肝硬化大鼠肝组织纤维化影响的体内研究
目的 了解重组生长激素(rhGH)治疗肝硬化有无促肝纤维化作用及可否同时应用重组γ-干扰素(IFN-γ)逆转其促肝纤维化作用.方法 采用Proctor改良法建立CCl4大鼠肝硬化模型,随机分为空白对照组:皮下注射生理盐水1 mL/d;rhGH治疗组:皮下注射rhGH 0.8 IU/(kg·d);rhGH联合IFN-γ组:皮下注射rhGH 0.8 IU/(kg·d),自第14 d开始同时皮下注射IFN-γ20 000 IU/d,分别于实验第7 d、14 d、28 d处死实验动物.观察肝组织纤维组织形态及I型、Ⅳ型胶原纤维的变化并行间接免疫荧光检测半定量分析.结果 rhGH治疗组肝组织再生活跃,纤维组织及胶原纤维(I型、Ⅳ型)含量增加,均高于空白对照组(P＜0.01);rhGH联合INF-γ组肝组织纤维组织及胶原纤维(Ⅰ型、Ⅳ型)含量均降低,低于rhGH治疗组(P＜0.01).结论 rhGH对肝硬化有促纤维化作用,联合应用IFN-γ可抑制其促肝纤维化作用.
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颅咽管瘤细胞系的初步建立
目的 初步建立颅咽管瘤细胞系,为该肿瘤永生型细胞株的终建立提供实验基础和理论依据.方法 经我院影像学和病理学确诊的颅咽管瘤患者,取得新鲜手术标本共36例.其中釉质型21例,鳞状乳头型15例.进行肿瘤细胞原代培养、纯化、传代、冻存、复苏,采用免疫细胞化学SP法对培养细胞行角蛋白(Ck)7染色鉴定细胞来源.通过细胞计数、MTT实验测定细胞的生长曲线、倍增时间.以不同浓度的生长激素和他莫昔芬处理肿瘤细胞,绘制生长曲线.结果 本实验共进行肿瘤细胞原代培养36例,培养成功且能够进行传代培养的共29例,成功率为80.6%.Ck7抗体鉴定证实所培养细胞为鳞状上皮源性细胞,细胞倍增时间为(3±0.35)d.生长激素在100 ng/mL时具有明显的促肿瘤生长作用,他莫昔芬可抑制肿瘤生长.结论 本研究初步建立了颅咽管瘤细胞系,可进行有限地连续传代培养.
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胶质母细胞瘤中CD133+细胞的贴壁培养和乙醛脱氢酶1的表达
目的 探讨贴壁培养对获取胶质母细胞瘤中CD133+细胞的影响,观察细胞分化前后乙醛脱氢酶1(ALDH1)的表达情况.方法 采用贴壁培养法将7例胶质母细胞瘤组织行原代培养,使用免疫磁珠法分选出CD133+细胞.将部分细胞在血清条件下培养以诱导其分化,通过荧光免疫细胞化学染色观察细胞分化前后ALDH1与胚胎干细胞关键蛋白(Soχ2)的表达.结果 7例标本中,6例获得了CD133+细胞,并观察到典型的肿瘤球形成.诱导分化前肿瘤球ALDH1与Soχ2表达阳性,二者有共定位现象.诱导分化后上述抗体表达阴性.结论 贴壁培养法可有效获取CD133+细胞.ALDH1仅在分化前的细胞中表达,有可能成为今后研究胶质瘤干细胞的新标志物.
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CD133多克隆抗体制备及肿瘤干细胞鉴定
目的 制备肿瘤干细胞标志性蛋白CD133的多克隆抗体,为进一步研究肿瘤组织中肿瘤干细胞的生物学特性以及筛选肿瘤干细胞、制备肿瘤干细胞的小鼠模型奠定基础.方法 以人CD133蛋白细胞外膜表面肽段为抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,进而用其对肿瘤组织进行Western blot以及免疫组化染色.结果 Western blot证实该抗体可以识别过表达的myc-CD133以及内源性CD133,进一步免疫组化结果显示该抗体可以识别恶性胶质瘤中的肿瘤干细胞.结论 成功制备高效、特异的CD133多克隆抗体,该抗体可以用于肿瘤组织的免疫染色及肿瘤干细胞的筛选.
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超声诊断腹股沟斜疝伴子宫及单侧卵巢嵌顿1例报告
患儿,女,2月,因右侧腹股沟肿块伴器闹不适16h就诊,无发热、呕吐、腹泻等临床表现.查体见患儿哭闹、烦躁不安,全腹软,右侧腹股沟区查见一大小约5cm×5cm×4cm的质硬团块,较固定,不易推动:患儿器闹腹压增加时,团块大小无明显变化.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
