四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
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NALP3炎性复合体及ERK信号通路在氧化应激中的作用及阿魏酸钠的干预机制
目的 探讨氧化应激时人肺上皮细胞(A549)中NALP3炎性复合体、细胞外调节蛋白激酶(ERK)的表达变化,阿魏酸钠(SF)的干预作用及其可能的机制.方法 培养A549细胞,分为空白对照组,H2O2刺激组,阿魏酸钠组,caspase-1抑制剂(Z-VAD)组,ERK阻断剂(PD98059)组,阿魏酸钠+H2O2组.其中H2O2刺激组用H2O2 200 μmol/L培养细胞2h,阿魏酸钠组用阿魏酸钠400 μg/mL处理细胞30 min,Z-VAD组、PD98059组、阿魏酸钠+H2 O2组分别用Z-VAD 20 μmol/L、PD98059 50μmol/L、阿魏酸钠400μg/mL预处理A549细胞30 min后加入H2O2 200 μmol/L培养2h,采用实时荧光定量PCR检测各组A549中caspase-1、NALP3mRNA的表达,Western blot检测caspase-1、NALP3、磷酸化ERK(p-ERK)、ERK蛋白含量;ELISA法检测各组A549上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)含量.结果 与空白对照组比较,H2O2可使A549细胞caspase-1、NALP3mRNA及caspase-1、NALP3、p-ERK/ERK蛋白水平表达增强,IL-1β分泌增加(P均＜0.05),而阿魏酸钠组与空白对照组差异无统计学意义(P＞0.05).与H2O2刺激组比较,Z-VAD组、PD98059组和阿魏酸钠+H2O2组caspase-1、NALP3 mRNA及蛋白表达降低,p-ERK/ERK蛋白表达降低,IL-1β分泌下降(P均＜0.05),Z-VAD组或PD98059组与阿魏酸钠+H2O2组间上述作用差异无统计学意义(P＞0.05).结论 阿魏酸钠可能通过抑制ERK活化,减少caspase-1、NALP3及IL-1β的表达,从而减轻氧化应激导致的炎症级联反应.
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2009～2013年四川大学华西医院1998株丙型肝炎病毒基因分型研究
目的 了解四川大学华西医院近年来检测出的丙型肝炎病毒基因型分布特点.方法 收集2009年1月至2013年12月间在四川大学华西医院就诊的丙型肝炎病毒感染者的基因分型结果,分析基因型分布特征.结果 1 998例丙型肝炎病毒感染者中,共检出5种基因型、15种基因亚型,其中4例为2种基因亚型的混合感染.其基因型或亚型分布:1a型8例(0.40％)、1b型1 368例(68.47％)、1c型18例(0.90％)、2a型78例(3.90％)、2b型1例(0.05％)、2i型16例(0.80％)、3a型291例(14.56％)、3b型154例(7.71％)、3k型4例(0.20％)、5a型1例(0.05％)、6a型50例(2.50％)、6b型3例(0.15％)、6h型1例(0.05％)、6n型1例(0.05％),混合感染中1b/1c型、1b/6h型、2c/2a型、3b/3k型各1例(各占0.05％).不同性别间主要基因亚型分布差异无统计学意义(P＞0.05),不同年龄段间分布差异有统计学意义(P＜0.05).结论 四川大学华西医院就诊患者丙型肝炎病毒基因亚型主要为1b亚型,其次为3a、3b、2a、6a亚型,同时还存在1a、1c、2b、2i、3k、5a、6b、6h、6n、1b/1c、1b/6 h、2c/2a、3b/3k等单一或混合基因型,提示患者基因型存在多样性.
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CXCR7在胃癌细胞中的表达及对SGC-7901细胞迁移及侵袭的影响
目的 探讨趋化因子受体7(CXCR7)在不同分化程度的胃癌细胞系中的表达以及siRNA沉默CXCR7后对胃癌SGC-7901细胞迁移及侵袭能力的影响.方法 体外培养5种人胃癌细胞系:未分化腺癌HGC-27、低分化黏液腺癌MGC-803、低分化腺癌BGC-823、中分化腺癌SGC-7901和高分化腺癌MKN-28.采用Western blot及RT-PCR法分别检测CXCR7的蛋白及mRNA表达.应用脂质体转染siRNA的方法沉默SGC-7901细胞CXCR7的表达,并采用其配体基质细胞衍生因子-1(SDF-1)干预,实验分为4组:阴性对照siRNA(NCsiRNA组),NC siRNA+SDF-1组,CXCR7 siRNA组和CXCR7 siRNA+ SDF-1组.应用Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力.结果 CXCR7在不同人胃癌细胞系中表达程度不一,其中高分化MKN-28几乎不表达,中分化SGC-7901细胞表达程度高.与NC siRNA组相比,NC siRNA+ SDF-1组的迁移细胞数和侵袭细胞数增加(P＜0.05),CXCR7 siRNA组的迁移细胞数和侵袭细胞数减少(P＜0.05);与NC siRNA+ SDF-1组相比,CXCR7siRNA+ SDF-1组的迁移细胞数和侵袭细胞数减少(P＜0.05).结论 CXCR7在中分化腺癌细胞系SGC-7901表达程度高;SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力可被SDF-1提升,亦可被CXCR7 siRNA抑制.
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KPC-2基因在克雷伯菌属中传播机制研究
目的 研究克雷伯菌属对亚胺培南耐药机制以及KPC-2基因在克雷伯菌属中传播机制.方法 收集四川大学华西医院两个阶段(2009～2010年和2012～2013年)分离的对亚胺培南耐药的克雷伯菌属细菌.琼脂稀释法测定亚胺培南低抑菌浓度(MIC),CARB ChromID平板和改良Hodges试验检测碳青霉烯耐药表型,PCR检测细菌的KPC-2基因表达.质粒接合试验检测质粒传播性.随机引物扩增多态性DNA (RAPD)方法和肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)技术分别用于分析质粒和菌株的同源性.结果 第一阶段筛选并确证耐亚胺培南的3株产酸克雷伯菌首先获得碳青酶烯类抗生素耐药性,第二阶段筛选并确证耐亚胺培南的7株肺炎克雷伯菌出现相同的获得性耐药.PCR显示10株细菌均携带KPC-2型基因.质粒接合试验显示产酸克雷伯菌中携带KPC-2基因的质粒可以传递到受体菌,且与KPC-2基因阳性的肺炎克雷伯菌中携带的质粒具有同源性.ERIC-PCR结果显示7株KPC-2基因阳性的肺炎克雷伯菌具有同源性.结论 四川大学华西医院分离的对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌主要耐药机制是产生KPC-2型碳青霉烯酶.产酸克雷伯菌中携带KPC-2基因质粒,该质粒具有传递性且与肺炎克雷伯菌携带质粒相同.肺炎克雷伯菌中耐药株的传播形式为同一克隆传播,而在克雷伯菌属中不同菌种间耐药传播途径为同一质粒的水平传播.
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NF-κB通路在TNF-α调控软骨细胞MMPs/TIMPs比例中的作用研究
目的 探索核因子-κB(NF-κB)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导下软骨细胞中基质金属蛋白酶家族(MMPs)与基质金属蛋白酶组织抑制剂家族(TIMPs)比值的影响.方法 采用胰酶消化法从1日龄小鼠的膝关节处提取软骨细胞.HE染色以显示软骨细胞形态;半定量PCR用于分析TNF-α诱导下bay11-7082对软骨细胞中MMPs和TIMPs基因表达的影响,酶谱用于鉴定TNF-α和bay11-7082作用后明胶酶活性的改变.结果 TNF-α能使MMPs和TIMPs的基因表达上调(P＜0.05).MMPs(除外MMP-1)与TIMPs的比值均出现上调(P＜0.05).Bay11-7082能抑制TNF-α诱导下MMPs和TIMPs的表达上调,并能使MMPs/TIMPs上调的比值下降到接近于正常软骨细胞的水平.酶谱检测明胶酶的变化,也有一致的发现.结论 TNF-α诱导下MMPs与TIMPs比值的上升可在一定程度上解释骨关节炎(OA)中软骨基质的过度降解.用bay11-7082阻断NF-κB途径可能为OA的治疗提供方案.
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室壁分层分析技术评价ST段抬高心肌梗死患者的心肌运动
目的 运用室壁分层分析技术评价ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者左室壁三层心肌运动情况及其预测左室重塑的能力.方法 纳入成功行直接冠脉介入(P-PCI)的初次STEMI患者39例及30例正常对照.在P-PCI术后48 h内(随访前)及6个月时(随访时)行超声心动图检查.分析三维心功能及室壁长轴及圆周内、中、外三层应变.结果 ①STEMI患者随访前室壁长轴内层应变高于外层(P＜0.01),圆周分层应变由内向外减小(P＜0.01).左室壁长轴及圆周三层应变随访时均较随访前增高(P＜0.01),但仍低于正常对照组(P＜0.05).②左室重塑组随访前、随访时左室壁分层应变低于非重塑组(P＜0.05),两组随访时分层应变均较随访前增高(P＜0.05).③长轴外层应变是左室重塑的独立预测因素(比值比:3.332,95％可信区间:1.124～3.882,P=0.03),其预测左室重塑切点值为-9％(敏感度89.5％,特异度70.2％).结论 P-PCI术后48 h内STEMI患者室壁应变从内层向外层减低,左室重塑组心肌功能低于非重塑组,左室壁长轴外层应变可独立预测STEMI患者的左室重塑.
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新型农村合作医疗补偿前后四川省自贡市农村家庭灾难性卫生支出及其影响因素研究
目的 对新型农村合作医疗(以下简称新农合)补偿前后四川省自贡市农村地区灾难性卫生支出情况及其影响因素进行分析,为改进和完善四川省农村地区医疗卫生工作提供决策参考.方法 利用灾难性卫生支出发生率、平均差距及相对差距对家庭灾难性卫生支出情况进行描述,运用二分类logistic回归分析其影响因素.结果 新农合补偿后灾难性卫生支出发生率为6.37％,平均差距为1.13％,相对差距为17.80％;补偿后由住院费用导致的灾难性卫生支出发生率下降幅度为74.81％,由门诊费用导致的下降幅度仅为48.00％;住院次数、家庭内是否有慢性病患者、家庭年人均收入、家庭内有工作人数是发生灾难性卫生支出的影响因素.结论 四川省自贡市农村慢性病家庭更易发生灾难性卫生支出.因此,对于已参加新农合的农村居民,相关部门应允许其门诊报销资金可跨年度累结使用;并建立慢性病特殊门诊,以减少灾难性卫生支出发生.
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BMP4在合并糖尿病的冠状动脉旁路移植术患者原位静脉桥病变中的作用
目的 观察合并糖尿病的冠状动脉旁路移植术(CABG)患者大隐静脉的形态学变化以及骨形态发生蛋白-4(BMP4)在其管壁中的表达与分布情况,初步探讨BMP4在合并糖尿病患者CABG术后静脉桥病变进展中的潜在作用.方法 前瞻性配对纳入2013年1月至2014年12月于我院接受CABG的40例血糖正常患者和40例合并2型糖尿病的患者,并根据糖尿病患者是否需胰岛素治疗分为非胰岛素依赖组(n=24)和胰岛素依赖组(n=16).应用HE染色测算各组患者静脉桥血管壁的形态学参数,Western blot和免疫组化技术观察BMP4在各组患者静脉管壁中的表达及分布情况.结果 糖尿病患者大隐静脉内膜和中膜增生较非糖尿病患者显著.免疫组化显示BMP4主要表达于静脉中膜平滑肌细胞,而BMP4表达量在糖尿病患者大隐静脉管壁内较非糖尿病患者增高(P＜0.05).糖尿病患者静脉桥中BMP4的表达量与其内膜厚度(r=0.655,P＜0.01)、内膜面积(r=0.684,P＜0.01)、中膜厚度(r=0.642,P＜0.01)、中膜面积(r=0.692,P＜0.01)均呈明显正相关.结论 合并糖尿病的CABG患者大隐静脉内膜和中膜增生程度与管壁内BMP4高表达中度相关,而BMP4可能在此类患者静脉桥加速失效进程中发挥了重要的促进作用.以BMP4为靶点的治疗策略是否有助于改善糖尿病患者CABG术后静脉桥通畅率值得深入研究.
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2004～2013年绵阳市结核病发病的生态学趋势研究
目的 分析2004～2013年绵阳市结核病发病率的变化趋势,探讨生态学影响因素与结核病发病的关系.方法 收集2004～2013年绵阳市的结核病发病资料并进行描述性分析,应用双变量关联分析探讨结核病发病率的相关生态学影响因素,并以生态学影响因素为自变量,结核病发病率为因变量,建立多元线性回归模型.结果 2004～2013年绵阳市结核病发病率呈下降趋势;双变量关联分析结果显示,经济因素及卫生资源因素与结核病发病率呈负相关,人口密度与结核病发病率呈正相关,利用主成分分析消除自变量间共线性后,得到多元线性回归方程:y=117.692-1.467x1-1.145x2-1.961x3-4.777x4-2.690x5-6.181x6+82.234x7-2.721x8-0.351x9-0.382x10.该方程结果显示,结核病发病率(y)随着人均GDP(x1)、职工平均货币工资(x2)、城镇居民人均可支配收入(xs)、农村人均纯收入(x4)、城镇居民人均消费性支出(x5)、农村居民人均生活消费支出(x6)、每千人口拥有执业(助理)医师人数(xs)、城镇化率(x9)、城镇居民人均现住房建筑面积(x10)的增加而下降;随着人口密度(x7)的增加而增加.结论 结核病发病可能与社会经济、卫生资源、人口密度有关联,多元线性回归模型反映了结核病发病与多个生态学影响因素间的线性关系,也可用于结核病发病的预测.
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MiR-218在宫颈癌组织中的表达及对HeLa细胞凋亡及转移的影响
目的 探讨miR-218在宫颈癌组织中的表达,以及对宫颈癌HeLa细胞凋亡及迁移的影响.方法 采用qRT-PCR检测23例正常子宫颈组织和114例宫颈癌组织中miR-218 mRNA的表达,分析与临床病理特征的关系;HeLa细胞分为3组:对照组(细胞不转染)、转染空脂质体阴性对照组(NC组)和转染miR-218类似物(miR-218M组).MTT检测细胞增殖;流式检测细胞凋亡;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移;qRT-PCR和Western blot分别检测Bcl-2、Bax、NF-κB和E-cadherin mRNA和蛋白表达.结果 MiR-218 mRNA在宫颈癌组织中表达下调,在宫颈癌不同病理类型、分期分级、有无淋巴结转移及间质浸润深度间表达差异有统计学意义(P＜0.01);采用miR-218类似物转染宫颈癌HeLa细胞,细胞增殖减少,凋亡增加,侵袭转移能力减弱.qRT-PCR和Western blot检测结果显示,转染miR-218类似物,HeLa细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平下调,而Bax mRNA和蛋白表达水平上调,E-cadherin mRNA和蛋白表达上调,NF-κB mRNA和蛋白表达下调.结论 MiR-218低表达可能与宫颈癌的病理分级分期等生物学行为有关,上调miR-218表达可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭转移.
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MACC1、Snail和KISS-1蛋白在浸润性乳腺癌中的表达及其临床病理意义
目的 探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)和抑癌基因KISS-1在浸润性乳腺癌(IBC)中的蛋白表达及其与上皮间质转化相关因子Snail表达的关系和临床病理意义.方法 通过免疫组织化学法检测250例IBC(IBC组)和80例正常乳腺组织(对照组)中MACC1、KISS-1和Snail的表达情况,分析临床病理资料特征,评估对患者预后的影响.结果 在对照组中,MACC1、KISS-1和Snail的阳性表达率分别为7.5％、87.5％和5.0％;在IBC组中,MACC1、KISS-1和Snail阳性表达率分别为63.6％、38.0％和58.8％,两组之间差异均有统计学意义(P＜0.05).MACC1、KISS-1和Snail蛋白的表达在IBC患者的淋巴结转移与否、肿瘤组织的不同分化程度、不同临床分期、不同分型之间差异均有统计学意义(P＜0.05).MACC1和Snail蛋白阳性表达组患者总的生存时间低于其阴性表达组患者(P＜0.001);KISS-1表达阳性的患者其生存时间高于其阴性组患者(P＜0.001).Cox回归分析结果表明,MACC1、Snail蛋白的阳性表达和KISS-1的阴性表达是影响IBC患者术后生存时间的独立危险因素(P＜0.05).结论 MACC1、Snail和KISS-1的反常表达参与了IBC的浸润及转移过程,早期联合检测MACC1、Snail和KISS-1的表达对IBC的进展及预后判定均有重要意义.
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早产儿喂养不耐受的风险预测模型分析
目的 在反应范围模型指导下探讨住院早产儿喂养不耐受(FI)发生的风险因素,构建风险预测模型,为有效防治早产儿FI提供实证依据.方法 采用横断面研究,选择2014年8月至2015年1月入住新生儿科的早产儿.在反应范围模型指导下设计临床观察表,从预测性稳态、反应性稳态、稳态超负荷及稳态失败等方面对发生FI及未发生FI者进行分析,通过logistic回归分析建立早产儿FI发生风险预测模型,并检验模型的有效性.结果 ①207例早产儿中,男性125例,女性82例,胎龄27+2～37周,平均(33.48±1.66)周;出生体质量830～3 120 g,平均(2 019.55±334.38)g.早产儿FI发生率为33.8％;FI主要发生在开奶72 h内,早期早产儿FI的临床表现以胃潴留为主,晚期早产儿FI则以呕吐为主要临床表现.②单因素分析显示,胎龄、出生体质量、宫内窘迫、宫内感染、氨茶碱应用、母乳喂养及两次大便间隔时间与早产儿FI有关;logistic回归分析显示,胎龄与出生体质量是FI的保护因素,胎龄越大,出生体质量越重,FI发生的风险越低.宫内窘迫、氨茶碱应用、两次大便间隔时间超过3d是FI发生的高危因素.③经回代预测,回归方程的回代率为92.73％,预测FI的敏感度为97.14％,特异度为88.32％,准确度为91.30％.结论 胎龄低、出生体质量低、宫内窘迫、使用氨茶碱及两次大便间隔超过3d是FI发生的重要风险因素,适用于logistic回归构建预测FI发生风险模型;该模型能够为临床确定FI的高危人群和及时进行干预提供客观可靠的依据.
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1-磷酸鞘氨醇受体2抑制小鼠血管通透性研究
目的 研究1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)对小鼠血管通透性的作用.方法 将野生鼠和S1pr2-/-鼠(S1PR2基因缺乏)气管内滴注脂多糖(LPS)制备急性肺损伤模型(LPS组),以气管内滴注生理盐水为对照.通过检测肺伊文思蓝色素漏出,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的葡聚糖肺血管渗漏,以及肺组织湿质量/干质量比值,观察S1PR2对血管通透性的影响,并通过Miles分析,观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)对皮肤血管内皮通透性亢进反应.结果 与生理盐水组比较,LPS注射增加野生鼠和S1pr2-/-鼠伊文思蓝漏出(P均＜0.01)、FITC标记葡聚糖肺血管外漏出(P均＜0.01)和引起肺水肿.LPS组中S1pr2-/-鼠与野生鼠比较,伊文思蓝漏出量、FITC标记葡聚糖肺血管外漏出更多(P均＜0.01),肺水肿更重(P＜0.001);LPS组野生型和S1pr2-/-鼠均增加VEGF剂量依赖性的伊文思蓝漏出,在50、100 ng的VEGF诱导下,与野生鼠比较,S1 pr2-/-鼠伊文思蓝漏出量均较高(P均＜0.01).结论 S1PR2参与内皮细胞屏障保护,抑制血管通透性.
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蠕虫来源的LNFPⅢ对周围性神经病理性疼痛的病理发生和脊髓胶质细胞活化的影响
目的 探讨蠕虫来源的免疫调控性糖分子乳-N-岩藻五糖Ⅲ(lacto-N-fucopentaoseⅢ,LNFPⅢ)对成年大鼠胫神经永久性横断伤(即改良型备用性神经损伤,modified spared nerve injury,mSNI)后神经病理性疼痛的病理发生的影响,以及它对此时脊髓胶质细胞活化的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组(n=6)、mSNI手术组(n=6)、mSNI手术+牛血清白蛋白(BSA)组(n=12)和mSNI手术+LNFPⅢ组(n=12).各组动物行右侧mSNI手术或者相应的假手术,根据实验分组腹腔注射BSA或LNFPⅢ与BSA的结合物.每组取6只大鼠进行足底试验、von Frey纤维试验、针刺试验和丙酮试验,测试手术前、后手术同侧和对侧大鼠后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的疼痛反应.制备mSNI手术+BSA组和mSNI手术+LNFPⅢ组手术后7d和14 d(各组每个时间点3只动物)的第3～第4腰椎(L3～4)脊髓节段冰冻切片,进行小胶质/巨噬细胞标志物分化抗原簇分子11b(cluster of differentiation molecule 11b,CD11b)和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的免疫荧光染色.结果 成年大鼠mSNI后,早期系统性给予LNFPⅢ可显著缓解手术后急性诱导期(4/5 d)和慢性转化期(7/8 d和14/15 d)中手术侧后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的机械和温度刺激诱发的病理性疼痛.同时,早期系统性给予LNFPⅢ抑制mSNI大鼠手术侧脊髓背角中术后7d小胶质/巨噬细胞以及术后7d和14 d星形胶质细胞的活化.结论 早期系统性给予LNFPⅢ能抑制成年大鼠mSNI后神经病理性疼痛的病理发生(包括急性诱发和慢性转化)以及该过程中脊髓胶质细胞的活化.
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膀胱癌T24细胞中RUNX3基因对Smad4表达的影响
目的 观察RUNX3基因重组质粒转染人膀胱癌T24细胞后细胞增殖及凋亡的变化以及Smad4mRNA表达的变化,探讨RUNX3基因与转化生长因子-β(TGF-β) /Smad信号通路在膀胱癌发生机制中的作用.方法 构建pIRES-EGFP-RUNX3质粒,将T24细胞分空白对照组(不转染)和空载体质粒组以及重组质粒组.空载体质粒组和重组质粒组细胞分别转染pIRES-EGFP和pIRES-EGFP-R UNX3,转染24 h后采用荧光显微镜观察细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR检测各组细胞RUNX3、Smad4基因mRNA表达水平.结果 成功构建pIRES-EGFP-R UNX3重组质粒,显微镜观察发现转染组均出现细胞死亡,重组质粒组出现凋亡细胞;转染24 h后空白对照组凋亡率为(3.23±0.45)％,空载体质粒组为(8.98±1.62)％,重组质粒组为(43.61±2.69)％;RUNX3 mRNA仅重组质粒组有表达(2.79±0.36),重组质粒组Smad4 mRNA较另两组表达上调(P＜0.05).结论 转染RUNX3基因可上调膀胱癌T24细胞中Smad4 mRNA的表达,且能抑制细胞增殖并促进其凋亡,抑癌基因RUNX3可能通过TGF-β/Smad信号通路参与对膀胱肿瘤细胞增殖与凋亡的调控.
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高迁移率族蛋白N2抗裸鼠宫颈癌移植瘤的作用研究
目的 研究高迁移率族蛋白N2(high mobility group chromosomal protein N2,HMGN2)对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 建立宫颈癌裸鼠移植瘤模型,随机分为阴性对照组、HMGN2蛋白组、顺铂组和联合用药组,分别予生理盐水、HMGN2蛋白、顺铂、HMGN2蛋白加顺铂隔日腹腔注射.观察肿瘤的生长情况,经过4次给药后处死裸鼠,取出瘤块,测量其体积计算抑瘤率,并行苏木精-伊红(HE)染色观察形态学变化.结果 成功建立宫颈癌裸鼠移植瘤模型.第4次给药后,HMGN2蛋白组、顺铂组、联合用药组肿瘤体积平均值分别为(0.14±0.07) cm3、(0.11±0.06)cm3、(0.11±0.07) cm3,与阴性对照组[(0.38±0.12) cm3]相比差异有统计学意义(P＜0.05);3组肿瘤体积平均值的差异无统计学意义(P＞0.05).HMGN2蛋白组、顺铂组、联合用药组肿瘤抑制率分别为0.62±0.18、0.71±0.17、0.70±0.18,差异无统计学意义(P＞0.05).肿瘤经肉眼观察可见阴性对照组瘤块较大,HE染色可见HMGN2蛋白组、顺铂组和联合用药组细胞坏死较阴性对照组明显.结论 HMGN2蛋白可以明显抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.
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短刺法结合电针对兔膝骨关节炎软骨细胞增殖及凋亡的影响
目的 研究短刺法结合电针对膝骨关节炎软骨细胞增殖及凋亡的影响.方法 将40只新西兰兔随机分成2组,正常组(A组)10只、造模组30只.造模组动物采用Huhh-Telhag法复制实验兔左膝骨关节炎模型,6周后X线评价造模情况.将造模组再随机分为模型组(B组,n=10)、短刺组(C组,n=10)和普通刺法组(D组,n=10),第6周开始对C组和D组进行针刺后电针治疗,5d为一个疗程,共治疗4个疗程(A、B组不行治疗).治疗结束后X线检测造模情况,HE染色检测软骨组织病理变化情况,TUNEL检测软骨细胞凋亡情况,Western blot检测软骨细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Bax蛋白表达情况,RT-PCR技术检测软骨细胞Caspase-3、PCNA的mRNA表达.结果 HE染色结果显示:与B组相比,A组、C组与D组软骨细胞排列较整齐,关节表面光滑.Western blot结果显示:与B组相比,C组与D组中Bcl-2、PCNA表达升高,Caspase-3与Bax表达下降;与D组相比,C组中Bcl-2、PCNA表达升高,Caspase-3与Bax表达均下降.RT-PCR结果显示:与B组相比,C组与D组中PCNA mRNA表达升高,Caspase-3 mRNA表达下降;与D组相比,C组中PCNA mRNA表达均升高,Caspase-3 mRNA表达下降.结论 短刺法结合电针可以减少软骨细胞凋亡,促进软骨细胞增殖,效果优于普通刺法结合电针.
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不同糖浓度对颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
目的 研究不同糖浓度对颌骨骨髓间充质干细胞(orofacial bonemesenchymal stem cells,OFMSCs)增殖和成骨分化的影响.方法 体外分离、培养OFMSCs,成骨、成脂、成软骨分化诱导及鉴定,并使用不同含糖量培养基(5.5、11、16.5、25、44 mmol/L)培养OFMSCs,以5.5 mmol/L基准糖浓度为对照组,其余组为实验组.采用CCK-8及流式细胞仪检测各组OFMSCs的增殖活性及增殖指数,OFMSCs成骨诱导后4、7d检测碱性磷酸酶(ALP)活性,21 d进行茜素红染色及矿化定量分析,同时用RT-PCR检测3、7、14及21 d相关成骨基因Runx2、Osterix的表达.结果 培养的OFMSCs成骨诱导21 d后茜素红染色可见钙结节,成脂诱导14d后油红O染色可见红色脂滴,成软骨诱导14 d后阿利新蓝染色可见蓝色胞浆;糖浓度在5.5～25 mmol/L促进OFMSCs的增殖,但随着糖浓度的继续增加(25～44 mmol/L),OFMSCs的增殖活性受抑制;成骨诱导时,随着培养液糖浓度升高,ALP活性呈剂量依赖性降低(P＜0.05);成骨诱导21d,茜素红染色和矿化定量分析显示,随着培养液糖浓度的升高,钙结节形成、矿化定量呈剂量依赖性减少;成骨诱导3、7、14及21 d,RT-PCR检测结果显示,对照组Runx2、Osterix mRNA表达量高于实验组(P＜0.05),各组Runx2、Osterix mRNA表达量均出现先上调再下调的趋势.结论 在一定范围的糖浓度内,糖浓度升高可促进OFMSCs的增殖;而糖浓度升高对成骨分化呈抑制效应.
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MiR-183调控PDCD4表达对SW1990胰腺癌细胞生长的调节作用
目的 观察miR-183在体外通过靶向调控程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对SW1990胰腺癌细胞生长的调节作用.方法 将不同浓度的miR-183模拟物(miR-183 mimics)和拮抗剂(miR-183 inhibitors)通过细胞转染技术转入SW1990胰腺癌细胞株中,筛选出合适浓度,进一步应用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测PDCD4基因和蛋白表达水平;MTT法检测miR-183 inhibitors对SW1990细胞生长的影响,流式细胞术和Hoechst染色检测SW1990细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测抗凋亡基因bcl-2蛋白的表达.结果 细胞转染50 nmol/L miR-183 mimic和150 nmol/L inhibitor后,miR-183基因的表达量与对照比较差异有统计学意义(P＜0.05).qPCR和Western blot发现miR-183 mimics能下调PDCD4的表达,而miR-183 inhibitors能上调PDCD4的表达,下调bcl-2(P＜0.05).MTT法显示miR-183 inhibitors能抑制细胞增殖,流式细胞术和Hoechst染色显示miR-183 inhibitors能促进胰腺癌细胞的凋亡及阻滞细胞周期于G0/G1期.结论 miR-183拮抗剂体外能抑制胰腺癌细胞增殖,促进凋亡和阻滞细胞周期,且可能通过靶向调节PDCD4基因发挥其调节作用.
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早期系统性给予IL-10对成年大鼠胫神经损伤后神经病理性疼痛的抑制作用
目的 探究早期系统性给予白介素-10(IL-10)对成年大鼠胫神经损伤后周围性神经病理性疼痛的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、胫神经永久性横断伤(即改良型备用性神经损伤,modified spared nerve injury,mSNI)组、IL-10给药的mSNI组和磷酸缓冲盐溶液(PBS)给药的mSNI组,每组各6只.根据各组的设定进行右侧胫神经永久横断或相应假手术,并在术后立即一次性腹腔注射50 μg IL-10(0.1 mg/mL)或等体积PBS.每组动物分别于术前(0 d)及术后4/5 d、7/8 d、14/15 d在后肢足底隐神经和腓肠神经支配皮肤区域进行足底实验、丙酮测试、von Frey hairs测试、针刺实验以检测其疼痛反应.此外,随机选取6只SD大鼠建立坐骨神经分支选择损伤(spared nerve injury,SNI)模型(胫神经和腓总神经联合横断),并在术后8d观察其后肢足跖外翻状态与mSNI组的异同.结果 mSNI组大鼠损伤同侧后肢足跖外翻状态较SNI组明显减轻.在足底实验、丙酮测试、von Frey hairs测试、针刺实验4种测试中,mSNI组大鼠损伤同侧足底的隐神经和腓肠神经支配皮肤区域在术后4/5 d均出现明显的病理性疼痛反应,并持续到术后14/15 d.而其损伤对侧及假手术动物损伤同侧及对侧均无明显的病理性疼痛反应.IL-10给药的mSNI组大鼠在损伤同侧足底的隐神经和腓肠神经支配皮肤区域的各种病理性疼痛行为反应在术后4～7 d均得到明显的缓解,并持续到术后15d,而PBS给药的mSNI组损伤同侧仍持续保持明显的神经病理性疼痛反应.结论 成年大鼠胫神经永久性横断是一种有效的周围性神经病理性疼痛模型,早期系统性注射的给药方式可有效发挥IL-10对周围性神经病理性疼痛的抑制作用.
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基于micro-CT的2型糖尿病大鼠骨骼特点的研究
目的 运用micro-CT及组织形态学方法研究糖尿病大鼠骨骼的特点.方法 实验对象选择8周龄雄性SD大鼠20只,分为两组:正常组10只,实验组10只.实验组通过饲喂高脂饲料同时辅以注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(30 mg/kg)的方法建立2型糖尿病大鼠模型.通过血糖、血清胰岛素、胰腺组织切片染色评价建模效果,通过股骨micro-CT扫描及组织学方法比较实验组和正常组大鼠骨骼的特点.结果 正常组(n=10)体质量及血糖低于实验组(n=9)(P＜0.05),两组胰岛素水平基本相当(P＞0.05).胰腺组织切片染色结果显示:正常组胰岛形态规则,边缘界清,胰岛细胞排列紧密.糖尿病组大鼠胰岛形态不规则,边缘模糊不清,胰岛细胞稀疏,纤维结缔组织增多.Micro-CT扫描结果显示:实验组和正常组相比,其股骨的骨体积(单位:％,正常组:0.194 2±2.332,实验组:0.080 7±1.952)、骨小梁厚度(单位:mm,正常组:0.052 9±0.004 5,实验组:0.043 6±0.002 4)以及骨小梁数量(单位:mm-1,正常组:3.668 8±0.134 5,实验组:1.851 7±0.288 8)均减少(P＜0.05).骨小梁间隙(单位:mm,正常组:0.219 6±0.072 1,实验组:0.496 5±0.076 4)增加(P＜0.05).股骨组织形态计量学检测结果与micro-CT结果一致.结论 本实验建立的大鼠模型可以在一定程度上模拟临床2型糖尿病的骨骼特点,micro-CT下表现为骨体积、骨小梁密度以及骨小梁数量下降.
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中国45岁及以上中老年抑郁症状及影响因素研究
目的 了解中国中老年人的抑郁症状流行水平及其影响因素,为促进我国中老年人心理健康和探讨预防措施提供依据.方法 人口数据来源于2013年中国健康与养老追踪调查资料.采用流行病学调查用抑郁量表(CES-D)评定抑郁患病情况,运用二分类logistic回归方法分析抑郁症状患病率与社会人口学因素(年龄、性别、文化程度等)、其他健康相关的因素(是否患慢病、患慢性病种数、残疾、意外伤害、近两年摔倒)及近两年近亲属死亡(父亲死亡、母亲死亡、配偶死亡、子女死亡)情况的关系.结果 本次调查发现我国中老年抑郁症状患病率为31.9％,抑郁症状平均得分为8.0±4.9.75岁以下人群相对于75岁及以上人群患抑郁症的风险更高,女性患病风险高于男性,文盲及小学文化程度者患病风险高于大专及以上水平人群,农村地区居民患病风险高于城镇居民,丧偶者患病风险高于其他近亲属死亡者,患3种慢性病患者抑郁症状患病风险高于无慢性病人群.结论 中国中老年抑郁症状患病率高,心理健康问题可能增多,应积极采取预防控制措施,促进中国中老年人的心理健康.
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成都地区脑瘫儿童粗大运动功能分级与脑瘫高危因素的相关性分析
目的 以人群为基础调查和分析脑瘫儿童粗大运动功能分级和脑瘫高危因素是否存在相关性.方法 收集成都市行政管辖范围内20个区县残联登记在册的2～12岁脑瘫儿童的脑瘫高危因素和基本信息,应用粗大运动功能分级系统(GMFCS)对粗大运动功能进行分级.采用单因素和多因素logistic回归分析方法进行相关性分析.结果 共调查2～12岁脑瘫患儿333例,男女构成比为1.15∶1,平均(6.32±2.74)岁,6-＜12岁者居多(197例,59.16％),以痉挛型为主(228例,68.47％).GMFCS Ⅰ～Ⅱ级149例(44.74％),GMFCSⅢ～Ⅴ级184例(55.26％).纳入30个脑瘫高危因素,常见的依次为早产(185例,55.56％)、低出生体质量(150例,45.05％)、新生儿缺氧缺血性脑病(104例,31.23％).经单因素和多因素logistic回归分析,均未发现所纳入研究的脑瘫高危因素与脑瘫儿童GMFCS分级之间具有相关性(P＞0.05).结论 脑瘫儿童粗大运动功能分级与成都地区脑瘫高危因素之间未见相关性,尚不能用脑瘫高危因素来提示或预测脑瘫患儿粗大运动功能损伤的严重程度.
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高糖环境下FGF-21对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
目的 研究高糖环境下成纤维细胞生长因子21 (FGF-21)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)骨向分化的作用及其机制.方法 取健康成人骨髓,分离培养hBMSCs,成骨、成脂诱导分化后,茜素红、油红O染色鉴定,流式细胞仪检测第3代细胞表面标志物CD105、CD90、CD73和CD44水平.将hBMSCs分为对照组[以葡萄糖(Glu)浓度5.5 mmol/L模拟正常生理状态糖浓度],Glu A、B、C高糖浓度梯度组(Glu 16.5、25、40 mmol/ L),FGF-21干预组(Glu 5.5 mmol/ L+ FGF-21),高糖环境FGF-21干预组(Glu B+ FGF-21)和Glu B+ FGF-21干预+细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导阻断剂(包括PD98059、SP600125、SB203580)组.成骨诱导第14天,检测碱性磷酸酶(ALP)活性;成骨诱导第21天,以RT-PCR检测骨向分化的相关因子ALP、骨钙素(OCN)、Runx2的mRNA水平,以Western blot检测MAPK通路中细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白磷酸化水平.结果 ①分离培养得到的hBMSCs成骨、成脂诱导后茜红素、油红O染色阳性,hBMSCs被成功地诱导向成骨细胞(OB)和脂肪细胞分化.流式细胞仪鉴定为hBMSCs.②与对照组相比,高糖组的骨向分化标志物ALP、OCN、Runx2的mRNA水平明显增加,MAPK通路中ERK、P38、JNK磷酸化水平表达增加.③与GluB组相比,Glu B+ FGF-21组的ALP、OCN、Runx2的mRNA水平降低,ERK、P38和JNK的磷酸化水平降低.④与Glu B+ FGF-21组相比,Glu B+ FGF-21+ MAPK信号转导阻断剂组的ALP、Runx2的mRNA水平进一步降低,且相应的ERK、JNK和P38及其磷酸化水平进一步降低.结论 高糖能促进hBMSCs的骨向分化.高糖环境下FGF-21具有抑制hBMSCs的成骨分化或矿化作用.
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Ruxolitinib对人红白血病HEL细胞VEGF、HIF-1α表达的影响
目的 探讨JAK2抑制剂Ruxolitinib对人红白血病HEL细胞血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)分泌的影响.方法 用不同浓度Ruxolitinib(1、5、10、50、100、500 nmol/L)处理HEL细胞24、48、72 h,通过CCK-8法观察其对HEL细胞增殖的抑制作用;不同浓度Ruxolitinib处理细胞24、48、72 h,RT-PCR检测Jauns激酶2基因(JAK2) mRNA水平,Western blot检测p-JAK2、VEGF、HIF-1α蛋白表达;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)体内血管生长实验检测Ruxolitinib对血管生成的影响.结果 不同浓度Ruxolitinib(除外1 nmol/L作用24 h)均可抑制HEL细胞增殖.不同浓度Ruxolitinib处理HEL细胞24、48、72 h后,RT-PCR结果显示JAK2mRNA表达较对照组降低(P＜0.01);Western blot结果显示p-JAK2、VEGF、HIF-1α蛋白表达较对照组亦均降低(P＜0.05);CAM实验结果显示Ruxolitinib处理细胞72 h后血管数目明显减少.结论 Ruxolitinib可能通过抑制JAK2通路,抑制HEL细胞VEGF、HIF-1α表达进而抑制血管新生.
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丹参酮ⅡA通过NLRP3炎症体信号通路对小胶质细胞糖氧剥夺/再灌注损伤的保护作用
目的 探讨丹参酮ⅡA对小胶质细胞BV-2糖氧剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R)损伤的保护作用及其机制.方法 取对数生长期的BV-2细胞OGD 3 h后再灌注4～24 h,采用Western blot筛选细胞内Nod受体蛋白3(NLPR3)表达水平高的再灌注时间.将实验组细胞OGD处理3h后分别加入终质量浓度为0～2.5 μg/mL的丹参酮ⅡA,CCK8法检测细胞存活率,筛选丹参酮ⅡA的大有效质量浓度.对BV-2细胞OGD 3 h后分别加入0、0.5、1.0、2.0 μg/mL丹参酮ⅡA,再灌注12h,Western blot检测BV-2细胞内NLRP3和凋亡蛋白caspase-1的表达水平,ELISA检测BV2细胞白介素(IL)-1β和IL-18的质量浓度.结果 OGD 3 h后,再灌注12h时NLPR3蛋白表达水平高.CCK8法显示丹参酮ⅡA大有效质量浓度为2.0 μg/mL. NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18表达均随着丹参酮ⅡA质量浓度的升高而降低.结论 丹参酮ⅡA能抑制OGD/R处理后BV-2细胞内NLRP3炎症体信号通路分子的表达,这可能是其保护OGD/R细胞的分子机制之一.
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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后差异性表达基因的生物信息学分析
目的 分析新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)后7周大脑皮层与对照组脑皮层的基因表达差异,探讨其生物学意义.方法 从基因表达数据库(Gene Expression Omnibus database,GEO)中获取新生Wista大鼠缺氧缺血性脑损伤后7周大脑皮层基因表达芯片数据集GSE37777.该数据集共8个样本,4个样本为HIBD组,4个样本为对照组.采用R软件包对数据做预处理和差异性表达基因(differentiallyexpressed genes,DEGs)的筛选,应用Cytoscape插件ClueGO+ Cluepedia构建DEGs功能分组通路网络.通过相互作用基因库检索工具(Search Tool for the Retrieval of Interacting Genes,STRING)数据库和Cytoscape软件进行DEGs的蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析.结果 HIBD组共发现973 DEGs,其中599个基因表达上调,374个基因表达下调.DEGs功能分组通路网络分析显示Hedgehog信号通路是显著的差异性表达基因通路.HIBD组中Hedgehog通路相关基因Shh及Dhh表达上调,Wnt通路相关基因Wnt1、Wnt2B及Wnt5表达上调.PPI网络分析显示Ccnd1、Shh、Ret及Gli3是主要的中心蛋白,Shh和Ret表达上调,Ccnd1和Gli3表达下调.结论 生物信息学分析显示,新生大鼠HIBD后7周脑皮层可能存在Hedgehog和Wnt信号通路的激活,与细胞修复相关的蛋白Shh及Ret的表达上调.新生大鼠HIBD 7周后脑皮层可能存在持续修复过程.
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脊髓巨噬细胞集落刺激因子及其受体在复杂性局部疼痛综合征Ⅰ型病程中的变化
目的 研究以大鼠后肢缺血再灌注所模拟的复杂性局部疼痛综合征Ⅰ型(CRPSⅠ)在建模后神经病理性疼痛行为学变化和脊髓组织中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和其受体CSF-1R在脊髓中的分布和表达.方法 采用大鼠后肢缺血再灌注方法建立CRPSⅠ模型,在再灌注后14 d内每天连续观察缺血足底机械痛阈和热痛阈的变化.采用免疫荧光双标染色技术显示脊髓M-CSF和CSF-1R在小胶质细胞和星状胶质细胞上的分布,以及在再灌注后3d、7d和14 d M-CSF和CSF-1R表达量的变化.结果 在缺血再灌注后1～14 d,缺血足底的机械痛阈和热痛阈均较对照组降低(P＜0.05);M-CSF由脊髓星状胶质细胞分泌,其特异性受体CSF-1R则主要分布在脊髓小胶质细胞上;在再灌注后7d和14 d,缺血同侧脊髓M-CSF和CSF-1R的表达较对照组增加(P＜0.05).结论 CRPSⅠ模型在建模后14 d内,缺血同侧机械痛阈和热痛阈降低,缺血同侧脊髓组织中星状胶质细胞分泌的M-CSF和小胶质细胞上的CSF-1R含量增加.
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线粒体ND1基因nt3434A→G突变与糖尿病关系的研究
目的 探讨线粒体NADH脱氢酶1(ND1)基因nt3434A→G突变与糖尿病的关系.方法 运用PCR-RFLP技术在糖尿病组(216例)和正常对照组(203例)中筛查线粒体ND1基因nt3434A→G突变,并分析其家系的突变特点和临床特征.结果 在糖尿病组中发现1例nt3434A→G突变者,而正常对照组中未发现,两组间突变频率差异无统计学意义.携带nt3434A→G突变的糖尿病患者胰岛素水平稍低,体质量指数低,伴高乳酸血症,家系中其妹和女儿携带nt3434位点突变且伴高乳酸血症,但糖耐量正常.结论 线粒体ND1基因nt3434A→G突变与糖尿病的发病风险增高是否相关值得进一步研究.
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葡萄糖酸氯己定在颅脑择期手术患者术前皮肤清洁中的应用研究
目的 探讨葡萄糖酸氯己定用于颅脑择期手术患者术前皮肤清洁的有效性,以期为制定颅脑择期手术患者术前皮肤准备流程提供参考依据.方法 2015年11～12月,随机将某三级甲等综合医院120例颅脑择期手术患者分为2组(各60例),对照组于术前2日每日用洗头膏清洁头部2次,试验组于术前2日每日用洗头膏及体积分数2％葡萄糖酸氯己定(2％CHG)先后各清洁头部1次.比较两组患者的年龄,性别,清洁前、术前2日清洁后、术前1日清洁后头顶部皮肤的菌落数.结果 共纳入患者120例,试验组60例,男性32例,女性28例,年龄(47.70±19.30)岁;对照组60例,男性30例,女性30例,年龄(47.73±19.46)岁.两组患者年龄、性别的差异无统计学意义(P＞0.05).清洁前试验组和对照组患者术区菌落数差异无统计学意义(P＞0.05);术前2日清洁后和术前1日清洁后,试验组患者术区菌落数均低于对照组(P＜0.05).结论 术前用2％CHG清洁头部的杀菌效果优于洗头膏,且术前使用2次清洁头部皮肤的杀菌效果优于术前使用1次的效果.2％CHG用于颅脑择期手术患者术前皮肤清洁有较好的效果,具有临床应用价值.
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双重超声造影诊断大肠肿瘤的临床价值
目的 探讨双重超声造影检查对于大肠肿瘤的诊断价值.方法 回顾性分析比较经手术病理证实的77例(79枚肿瘤)大肠肿瘤的经腹壁常规超声检查、双重超声造影检查(大肠腔内灌注超声检查+静脉超声造影检查)患者影像学资料及临床病理学资料.结果 双重超声造影检查发现68例大肠肿瘤(68/79,敏感性为86.1％);经腹壁常规超声检查发现病灶32例(32/79,敏感性为40.1％).经腹壁常规超声检查法的定位准确率为21.9％(7/32),双重超声造影检查法对大肠肿瘤的定位准确率为88.2％ (60/68),对结肠肿瘤的定位准确率为94.4％(51/54).双重超声造影在检测敏感性和定位准确性上高于常规超声(P＜0.05).双重超声造影检查时,大肠肿瘤强化的模式有两种:瘤体整体均匀性强化,本组31例;或瘤体不均匀性强化,瘤体内部可见始终无强化区,本组37例.大肠肿瘤强化的模式与肿瘤的二维形态或生长方式有关:节段性增厚者从浆膜面朝向黏膜面逐步垂直地强化,本组39例;隆起型病变者造影剂由蒂部或者基底部进入,本组29例.结论 双重超声造影检查法较常规超声检查发现病变的敏感性、定位准确性高,有潜力成为大肠肿瘤的常规影像诊断方法或术前评估方法.
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膳食纤维对结肠癌患者术后免疫功能及炎性反应的影响
目的 了解膳食纤维对术后结肠癌患者的临床治疗效果,探究其对结肠癌患者术后免疫功能及炎性反应的影响.方法 采用前瞻性随机对照研究,选取病理诊断为结肠癌并且行结肠癌根治术的患者60例,其中膳食纤维生态肠内营养组(试验组)30例,生态肠内营养组(对照组)30例.分别于术前第1天、术后第2天、术后第7天清晨空腹抽取外周静脉血,检测血T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+)和血清免疫球蛋白(IgA,IgG,IgM)等免疫指标,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)等炎症反应指标.结果 各时间点两组间的CD3+、CD8+、CD4+/CD8+、IgM水平差异无统计学意义(P＞0.05),而在术后第7天,试验组CD4+、IgA、IgG水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);试验组TNF-α、IL-6水平低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在结肠癌患者中,术后早期给予膳食纤维可提高患者机体免疫功能、减轻炎性反应.
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冠心病新药黄芪总苷氯化钠注射液Ⅰ期人体耐受性临床研究
目的 观察健康受试者对黄芪总苷氯化钠注射液的安全性和耐受性,为该药Ⅱ期临床试验安全的用药剂量范围提供参考.方法 选择62例健康受试者为研究对象,依次开展单次给药和连续给药耐受性临床试验.其中单次给药26例,设6个剂量组,分别为100 mL、200 mL、300 mL、400 mL、500mL和600 mL,每日给药1次,静脉滴注.多次给药36例,设4个剂量组,分别为500mL、400mL、300 mL和200mL,每日给药1次,连续给药7d.观察指标:服药期间和服药结束后3d或7d后的不适症状、生命体征和安全性指标等,进行统计分析.结果 62例健康受试者共有31例出现40例次不良事件,23例次判断为轻度不良反应,4例次中度不良反应.其中单次给药剂量有9例受试者出现9例次不良事件,7例次不良反应;多次给药500mL、400 mL剂量组10例14例次不良事件,9例12例次不良反应;多次给药300mL、200mL剂量组12例17例次不良事件,判断为轻度不良反应为3例次.不良反应主要表现为:肝功能异常(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血清总胆红素的轻度升高),血钾偏低,尿红细胞计数升高,皮疹,静脉炎等.结论 Ⅰ期耐受性临床试验单次给药大耐受量为600mL;多次给药7d,每日大耐受量为400mL,建议Ⅱ期临床试验参考本实验结果设计剂量分组,观察其对冠心病患者治疗的临床疗效及安全性.
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PI-RADS v2在前列腺癌中的诊断价值分析
目的 探讨前列腺影像报告和数据系统第二版(prostate imaging reporting and data system version 2.0,PI-RADS v2)在前列腺疾病中的评分一致性及其在前列腺癌中的诊断价值.方法 回顾性分析经超声引导下穿刺活检、并经病理证实的158例前列腺病变的多参数磁共振成像(mp-MRI)表现.由两位观察者盲法对病灶进行评分.Kappa检验对两位观察者评分一致性进行分析,并以穿刺活检病理检查结果为金标准,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析观察者1运用PI-RADS v2在前列腺外周带癌和移行带癌中的诊断价值.结果 PI-RADS v2在前列腺外周带和移行带病灶中的评分一致性kappa系数分别为0.65和0.61;对于外周带和移行带按前列腺癌的标准病理分级系统(Gleason评分)≥7分的癌灶,PI-RADS v2诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88.3％、85.6％、82.7％、89.4％和83.4％、63.9％、69.2％、85.3％.结论 PI-RADS v2对于前列腺外周带和移行带病灶,观察者间一致性高,对外周带Gleason评分≥7分的癌灶,PI-RADS v2可取得较高的诊断敏感性和特异性,但对移行带Gleason评分≥7分的癌灶,虽然诊断敏感性较高,但仍需进一步探索增加其诊断特异性的方法.
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乳化七氟烷选择性麻醉新西兰大白兔脑、脊髓模型的建立
目的 建立选择性麻醉脊髓和脑的动物模型,探索七氟烷松弛骨骼肌作用的位点是否在脊髓.方法 选择健康新西兰大白兔16只,通过体外循环技术,于第12胸椎(T12)～第1腰椎(L1)水平结扎主动脉,从而形成上半身及下半身两个相对独立的循环系统.通过七氟烷经肺或者氧合器给予到新西兰大白兔上半身或者下半身,实现选择性脑麻醉或者选择性脊髓麻醉(主要是腰骶段脊髓).连续监测呼气末(代表脑组织)和氧合器出气口(代表脊髓)的七氟烷浓度.利用气相色谱仪,注射器两次平衡法来测量颈动脉(代表脑组织)和腹主动脉(代表脊髓)血液中七氟烷的质量浓度和分压.结果 经肺吸入1.5倍肺泡气低有效浓度(MAC)七氟烷并达平衡状态时,呼气末七氟烷浓度高于氧合器出气口,颈动脉血液中七氟烷的质量浓度和分压高于腹主动脉(P＜0.05),即脑组织中的七氟烷浓度和分压高于脊髓.经过10～20 min洗脱期后,由氧合器给予新西兰大白兔下半身1.5 MAC七氟烷并达平衡状态时,上述指标的表现则完全相反(P＜0.05),即脊髓中的七氟烷浓度和分压高于脑组织.结论 通过七氟烷的不同给予方式(经肺或者氧合器),成功建立了七氟烷选择性麻醉新西兰大白兔脑、脊髓模型.
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大鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法的改进
目的 改进SD大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)原代培养方法,以获得纯化的大鼠PMVECs.方法 对组织块法培养PMVECs过程中的组织取材、植块贴壁、培养基配制、传代培养进行改进包括:在麻醉前提前注射肝素钠;利用腹腔放血,待大鼠停止呼吸后剪开胸腔;改进操作以及试剂中加入双抗以降低污染率;原代培养48 h即取出组织块;进行再次消化去除成纤维细胞;异硫氰酸标记的植物凝集素(FITC-BSI)鉴定培养的PMVECs.培养后在倒置显微镜下观察细胞形态.结果 原代培养的细胞呈现为多角形或短梭形,呈单层铺路石样排列的典型结构.随着细胞传代或培养条件的改变,细胞形态发生变化,可呈长梭形,漩涡状排列.FITC-BSI结合实验呈绿色荧光,阳性率达到90％以上.结论 通过改进分离及培养方法可获得生长状态良好、纯度高且能够稳定传代培养的PMVECs.
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运用动态血糖监测系统比较不同糖耐量汉族人的胰岛β细胞功能
目的 比较汉族人群中正常糖耐量(normal glucose tolerance,NGT)、糖尿病前期(prediabetes,PD)及新诊断2型糖尿病(newly-diagnosed type 2 diabetes mellitus,NDDM)者的胰岛β细胞功能;探讨运用动态血糖监测系统(continuous glucose monitoring system,CGMS)所计算出的葡萄糖曲线下面积(area-under-curve of glucose,AUC-G)用于描述胰岛β细胞功能的意义.方法 从普通汉族人群中筛选出未诊断糖尿病者,给予75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素释放试验,记录受试者基本信息.共169例受试者终纳入研究(男72例,女97例,年龄20～75周岁),体质量指数(body mass index,BMI) 18.5～28.0 kg/m2,按照WHO1999诊断标准,分为NGT(n=87)、PD(n=52)、NDDM(n=30)3个组,检测3组受试者的三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、糖化血红蛋白A1c(glycosylated hemoglobin A1c,HbA1c)等生化指标.所有受试者均行72 h动态血糖监测.采用OGTT和胰岛素释放试验检测值计算内稳态模型评估胰岛素抵抗(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)、内稳态模型评估胰岛β细胞功能(homeostasis model assessment β-cell function,HOMA-B)、基础分泌、早相分泌、二相分泌胰岛β细胞功能指标,用CGMS所测值计算AUC-G,并用多元逐步回归预测影响胰岛β细胞功能的因子.结果 与NGT比较,PD、NDDM的年龄、BMI、HOMA-IR、HOMA-B、基础分泌、早相分泌、二相分泌及A UC-G的差异均具有统计学意义(P＜0.05);PD与NDDM比较,基础分泌、早相分泌、A UC-G差异有统计学意义(P＜0.05),而年龄、BMI、HOMA-IR、HOMA-B及二相分泌差异均无统计学意义.多元逐步回归分析发现A UC-G明显影响HOMA-B(标准偏回归系数β=-0.244,P=0.001)、胰岛素基础分泌(β=-0.355,P＜0.001)及HbA1c(β=0.638,P＜0.001).结论 PD患者胰岛β细胞功能明显减低,早期主要表现在二相分泌功能减退.从PD发展至NDDM时,胰岛β细胞分泌功能的减退较躯体外周组织对胰岛素的抵抗增加更明显.A UC-G可作为评估胰岛β细胞功能损伤的较好指标.
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人食管癌细胞cDNA表达文库的构建和鉴定
目的 构建人食管癌细胞cDNA噬菌体表达文库.方法 从食管癌细胞中提取总RNA,利用磁珠吸附法分离其中的mRNA,逆转录合成cDNA第一链,再通过碱基互补配对原则合成第二链,对双链cDNA进行末端修饰,连接EcoR Ⅰ适配子,磷酸化EcoR Ⅰ适配子5'端,除去不合要求的cDNA片段,将符合要求的与载体(噬菌体T7 Select10-3b)连接,然后进行体外包装建成初步的cDNA文库,并对文库进行鉴定.结果 食管癌细胞cDNA原始表达文库的滴度为2.01×106 pfu/mL,重组率高达100％,插入片段的大小范围在300～1 500 bp之间.结论 本实验成功构建了人食管癌T7噬菌体展示cDNA表达文库,并经过了初步鉴定,为下一步利用重组表达cDNA克隆的血清学分析技术(SEREX技术)鉴定食管癌相关抗原奠定基础.
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阿帕替尼治疗直肠癌肺转移有效1例报告
患者,女,44岁,因“直肠癌治疗后10+年,双肺转移4+年”人院.入院查体体表无转移,癌胚抗原(CEA)、糖类抗原等均有不同程度升高.10+年前诊断为直肠癌并行根治性手术,7年前(初发病3年后)复查肠镜提示“复发”,我院再次行手术治疗,第一、二次手术后分别行FOLFOX方案辅助化疗6、8周期,后定期复查,未见复发转移.4+年前(初发病6年后)患者查正电子发射计算机断层显像(PET CT)示:双肺转移(图1A).
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
