四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
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人类神经前体细胞大鼠胎脑内移植研究
目的探讨人类神经前体细胞大鼠胎脑侧脑室内移植后的移行和分布.方法采用机械方法从胎脑中分离神经细胞,应用N2培养基进行培养,细胞用携带LacZ基因的腺病毒或BrdU标记,移植到孕期为16～18 d的胎鼠侧脑室内,检查出生后不同时期脑组织中移植细胞的分布和移行.结果成功培养出人类的神经干细胞,细胞聚集形成神经球,呈悬浮状态,大部分细胞表达神经前体细胞的标志物巢蛋白,这种细胞能够分化为神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞.神经干细胞在体内和体外可以稳定表达外源性基因,移植到胎鼠脑内,人类胚胎神经前体细胞广泛移行并分布于宿主的脑组织中,结合到大鼠的前脑、中脑和后脑,形成广泛的嵌合现象. 结论神经干细胞可以稳定表达外源性基因,移植到发育期的脑内,能够整合到脑组织中,形成广泛的嵌合现象.
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针刺对备用背根节和脊髓NT-4表达的影响
目的观察NT-4在针刺部分去背根猫的L6背根节(手术侧和非手术侧)和脊髓表达的时空变化,以了解NT-4与针刺促进脊髓可塑性的关系.方法 25只成年健康雄猫随机分为5组:即正常组,备用根术(动物行单侧部分去背根手术,即切除一侧L1-L5、L7-S2背根节,保留L6为备用根)后7 d组与14 d组、针刺备用根术(动物行单侧部分去背根术后针刺)后7 d组与14 d组.动物处死后,取L6背根节及L3、L5、L6节段脊髓,用兔抗NT-4(1∶200)抗体行免疫组化ABC法染色.观察、计数并比较各组背根节、脊髓实验侧Ⅱ板层(L3、L5、L6)和背核(L3)中NT-4的分布及含量.结果针刺备用根7 d组,针刺侧DRG内NT-4阳性神经元数较正常组和术后7 d组减少(P<0.05),较相应非针刺侧多(P<0.05);针刺14 d组,针刺侧DRG阳性神经元数比针刺7 d组术后14 d和同组非针刺侧增高(P<0.05),且恢复至正常水平.针刺7 d,针刺侧脊髓L6Ⅱ板层NT-4阳性神经元数较术后7 d组及正常组增加(P<0.01).针刺14 d时,L5、L6Ⅱ板层阳性神经元数较正常组及术后14 d组相应节段均增加(P<0.01).针刺后L3背核NT-4阳性神经元数无明显变化(P>0.05).L5Ⅱ板层NT-4阳性神经元在针刺后14 d时比针刺后7 d时增多(P<0.05).结论以上结果提示NT-4与针刺促进脊髓可塑性有关;针刺备用背根对非针刺侧DRG NT-4的表达亦有影响,提示非针刺侧背根节NT-4亦可能参与了脊髓可塑性和针刺促进脊髓可塑性.
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EB病毒GST-Rta融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备
目的表达和纯化EB病毒的重组融合蛋白谷胱氨肽S转移酶(GST)-Rta185和GST-Rta150,并制备特异性多克隆抗体.方法质粒表达载体pGEX-R185I、pGEX-R150I和 pGEX-5X-3分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Glutathione Sepharose 4B 亲和层析柱纯化目的蛋白.将纯化后的GST-R185、GST-R150和GST蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清.结果在细菌裂解液中检测到高表达量的融合蛋白,经Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-Rta融合蛋白.应用Western blot和ELISA方法检测证实,用纯化的GST-Rta蛋白免疫家兔得到了特异性的多克隆抗体.结论通过上述方法制备出来的融合蛋白纯度较高,免疫家兔获得的多克隆抗体具有良好的特异性,为研究EB病毒Rta蛋白及与EB病毒相关疾病的诊断和治疗提供了重要的条件.
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肝细胞生长因子对转化生长因子诱导肾小管上皮细胞转分化的影响
目的应用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化,研究肝细胞生长因子(HGF)对肾小管上皮细胞的表型重塑的作用和机制.方法在正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E细胞株)培养液中分别加入TGF-β1及HGF,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞形态变化;免疫组织化学方法检测肌纤维母细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA法分析测定培养细胞上清液中纤维连结蛋白(FN)的含量;RT-PCR检测结缔组织生长因子(CTGF) mRNA表达.结果①TGF-β1诱导肾小管上皮细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞样形态;α-SMA的表达、上清液FN含量、细胞CTGF mRNA表达明显增加(P<0.05).②单纯HGF对细胞形态学、α-SMA的表达及FN含量与空白对照组无明显影响;不同浓度HGF组的CTGF mRNA表达较空白对照组均增加(P<0.05).③HGF能抑制TGF-β1诱导的NRK52E细胞形态学改变;α-SMA的表达、FN水平均比诱导组TGF-β1明显下降(P<0.05);HGF抑制了TGF-β1诱导的CTGF mRNA表达(P<0.05).结论 HGF能够负性调控TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化作用,减少FN分泌;HGF对TEMT的负性调节作用可能是通过减少CTGF表达来实现的.
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局部外周应用氯诺昔康对大鼠福尔马林致痛模型的镇痛研究
目的研究局部外周应用氯诺昔康对大鼠福尔马林致痛模型的镇痛作用.方法雄性SD大鼠随机分为对照组、同侧给药组、对侧给药组.给药30 min后于给药侧或给药对侧后爪足底皮下注射20 g/L福尔马林50 μl,观察其后60 min内每5 min大鼠咬舔注射福尔马林爪的时间变化. 结果大鼠注射福尔马林后第一相(0～10 min)咬/舔后爪累积时间,给药组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).第二相(10～60 min)同侧给药组各剂量与对照组比较咬/舔后爪累积时间减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论局部外周应用氯诺昔康对大鼠福尔马林致痛模型的第二相有镇痛效应,此效应主要为局部效应而非全身效应.
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局灶性脑缺血再灌注大鼠Nestin的表达
目的了解局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织中Nestin的表达特点.方法采用改良的线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)2 h后不同再灌注时间段(6 h、12 h、24 h、72 h、7 d、14 d)的大鼠局灶性脑缺血模型,应用免疫组织化学技术检测Nestin的表达.结果脑缺血再灌注后6 h,Nestin+表达即有增加,至3 d时Nestin+表达显著增强,Brdu+/Nestin+细胞也已明显可见,至7 d时Nestin+表达、Brdu+/Nestin+细胞数目均达顶峰,至再灌注14 d Nestin+表达及Brdu+/Nestin+细胞数目均已明显回落.结论脑缺血可引发大鼠Nestin的表达上调,并可诱导神经干细胞增殖.
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胎盘小叶胎儿血管系统CRH及其受体CRH-R1的表达
目的了解足月胎盘小叶胎儿血管系统促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及其受体(CRH-R1)的表达.方法分别采用免疫组织化学技术LsAB法和原位杂交技术,观察先兆临产前人足月正常胎盘小叶血管CRH及其受体CRH-R1的表达.结果胎盘小叶血管内皮细胞、血管平滑肌细胞的细胞浆内均有CRH/CRH-R1阳性表达,同时也有CRH mRNA/CRH-R1 mRNA阳性表达.结论胎盘小叶脐血管系统血管内皮细胞甚至平滑肌细胞能合成CRH及CRH-R1,其CRH可能是胎儿血CRH的主要来源之一.
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花椒挥发油对实验性动脉粥样硬化的影响
目的观察中药花椒挥发油对豚鼠实验性主动脉粥样硬化形成的影响并探讨其可能的作用机制.方法将36只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、花椒挥发油组;分别给予普通饲料(正常对照组)和高脂饲料(模型组和花椒挥发油组)喂养,花椒挥发油组动物在喂高脂饲料的同时,加喂花椒挥发油10 mg/kg.喂养第14周末取血样后,处死所有动物,检测血清脂质、载脂蛋白水平、血清丙二醛含量、肝脏和主动脉组织中总胆固醇和甘油三酯含量以及主动脉粥样硬化斑块面积.结果高脂饲料喂养14周后,模型组和花椒挥发油组动物血脂水平均升高,且伴有主动脉粥样硬化斑块的形成;与模型组相比,花椒挥发油组动物血中低密度脂蛋白、低密度脂蛋白/高密度脂蛋白的比值、载脂蛋白B以及丙二醛水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),而且肝脏和主动脉组织中总胆固醇和甘油三酯含量以及主动脉粥样斑块面积比均小于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论花椒挥发油具有抗豚鼠实验性动脉粥样硬化形成的作用;这种作用与它降低血清过氧化脂质水平、抗脂质过氧化损伤有关.
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左向右分流容量负荷过重大鼠血红素氧化酶的表达及氯沙坦对其的影响
目的探讨容量负荷过重大鼠及氯沙坦治疗后肺动脉高压肺血管重建与血红素氧化酶(HO)mRNA表达水平的关系.方法行左向右分流术建立容量负荷过重SD大鼠模型并给予氯沙坦治疗,分别测定实验各组肺动脉压、右心室压等血流动力学指标;计算右心室相对重量;体视学方法测定肺小动脉厚度百分比和肌性化小动脉百分比;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)测定大鼠肺组织、左右心室HO-1、HO-2 mRNA的表达.结果氯沙坦能显著减低肺动脉压力,使右心室相对重量降低,氯沙坦组肺小动脉厚度百分比和肌性化小动脉百分比均较手术组明显下降.手术组HO-1 mRNA表达较对照组显著增高,而氯沙坦组HO-1 mRNA表达水平较手术组明显降低,HO-2 mRNA表达在三组间差异无统计学意义. 结论氯沙坦能显著降低容量负荷过重大鼠的肺动脉高压,抑制肺血管重构程度,同时可下调HO-1 mRNA的表达.HO-1参与了肺动脉高压形成、肺血管重构的病理过程.
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IL-18在结肠炎小鼠结肠粘膜中的表达及作用探讨
目的研究白细胞介素18(IL-18)在小鼠葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎结肠粘膜中的表达及作用. 方法免疫组化染色检测IL-18在小鼠DSS结肠炎中的表达.ELISA检测DSS结肠炎结肠上皮细胞(IEC)裂解液或培养上清液对脾单个核细胞(SMC)IL-2、IFN-γ分泌的作用.Western Blot检测IEC裂解液或培养上清液中IL-18的表达. 结果 DSS结肠炎IEC及部分固有膜单个核细胞表达IL-18.刺激实验及Western Blot显示IEC裂解液或培养上清液中均含IL-18阳性蛋白, IL-18诱导IFN-γ的产生.结论 DSS结肠炎IEC表达和分泌前体IL-18及活性IL-18,可能在DSS结肠炎的发病中起重要作用.
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高糖对人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白及纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响
目的研究高糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)纤维连接蛋白(FN)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响.方法利用HPMC体外培养模型,HPMC分别经含1.5%、2.5%、4.25%葡萄糖的1640培养基培养6、12、24、48 h后,用ELISA法检测HPMC分泌FN及PAI-1的情况.结果①1.5%、2.5%、4.25%葡萄糖作用于HPMC,使培养上清中的FN明显高于对照组(P<0.05),且FN增高的程度与葡萄糖浓度和作用时间呈依赖关系.②2.5%、4.25%的葡萄糖作用于HPMC,使培养上清中PAI-1明显高于对照组(P<0.05),且增高的程度与葡萄糖浓度和作用时间呈依赖关系,1.5%葡萄糖液与对照相比没有差别(P>0.05).结论高糖促使HPMC分泌FN、PAI-1增加,在腹膜纤维化的进程中起一定作用.
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桩长度对核桩冠修复体脱位力的影响
目的研究桩长度对核桩冠修复体脱位力的影响.方法用有机玻璃模拟不同桩长牙根,常规铸造桩核,均以磷酸锌粘固,以测试机进行拉伸测试,加载速度10 mm/min,至桩核松动、脱位,记录大载荷,同时测试有机玻璃与铸造金属的平面粘结力,测算桩核的粘结力大小及桩核的机械嵌合力大小.结果桩长7.0 mm、7.5 mm、8.0 mm、8.5 mm、9.0 mm组脱位力分别为(203.25±57.19) N、(213.63±45.06) N、(234.44±59.27) N、(317.75±60.94) N和(334.25±58.00) N,桩长(L)与脱位力(D)、粘结力(B)及机械嵌合力(M)呈线性关系.其回归方程分别为D=73.225L-325.776,B=0.442L+9.951,M=72.676L-334.338. 结论机械嵌合力在脱位力中起主要作用,而桩长对于机械嵌合力的大小的影响使桩长成为影响核桩冠脱位力的重要因素,临床上应使桩长达到根长的2/3～3/4较为理想.
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HOE642对缺氧/复氧心肌细胞的保护机制
目的观察Na+/H+交换抑制剂HOE642对心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的保护作用,方法原代培养的心肌细胞分为对照组、A/R组、A/R+ HOE642组、A/R+尼卡地平(Nic)组、A/R+蛋白激酶(PKC)阻滞剂(H7)组和A/R+丝裂元活化蛋白激酶(MAPK)阻滞剂(PD98059)组.检测各组心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)、细胞活力、ATP含量及孵育液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、MAPK和PKC活性.免疫印迹法检测心肌细胞钙蛋白酶(u-calpain和m-calpain).结果 A/R+Nic、A/R+HOE642使心肌细胞[Ca2+]i降低,且m-calpain蛋白表达亦降低.A/R+Nic、A/R+HOE642组心肌细胞孵育液中心肌激酶(LDH、CK )均低于A/R组 (P<0.01);细胞活力、ATP含量、PKC和MAPK活性高于A/R组(P<0.05或P<0.01).PKC抑制剂H7及MAPK抑制剂PD98059组心肌细胞孵育液中心肌激酶(LDH、CK)均高于A/R组(P<0.05),细胞活力、ATP含量明显低于A/R组(P<0.05).结论 HOE642与钙通道阻滞剂一样,可抑制心肌细胞内游离钙超载引起的心肌细胞A/R损伤,阻断PKC和MAPK,使A/R的心肌细胞损伤加剧.
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HCC患者GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态研究
目的检测人原发性肝癌(HCC)中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况,并探讨其在肝癌发生中的作用. 方法以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照,以11例正常人外周血单核细胞(PBMC)DNA为阴性对照,用甲基化特异性PCR(MSP)的方法对26例肝细胞癌患者的癌、远癌组织中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态进行检测.结果在26例原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化在癌组织为88%(23/26),在远癌组织中为69%(18/26);而在11例正常人外周血单核细胞均为甲基化阴性.结论抑癌基因GSTP1基因启动子区CpG岛高甲基化可能是肝癌发生早期的分子事件,在人原发性肝癌的发生发展中具有重要的作用.
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受磷蛋白基因突变与中国成都地区扩张型心肌病的相关性研究
目的研究扩张型心肌病(DCM)患者的肌浆网受磷蛋白(phospholamban, PLN)基因突变情况,探讨该基因与中国DCM患者发病的关系.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法并结合核苷酸序列测定对89例DCM患者及110例对照组的PLN基因进行分析.结果病例组及对照组中均未发现存在异常构象,通过DNA测序未发现存在PLN基因第25核苷酸位点的C→T错义突变及116核苷酸位点的T→G突变.结论本研究未发现中国成都地区DCM患者PLN基因第25和116核苷酸位点存在突变.
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肿瘤坏死因子α基因多态性与矽肺遗传易感性的研究
目的探讨肿瘤坏死因子α基因(tumor necrosis factor-α,TNF-α)启动子区-308和-238位点G→A的碱基突变与中国西南地区汉族人群矽肺遗传易感性的相关性.方法分别选择在职的75例矽肺患者和137名矽尘接触者,140例高龄矽肺患者和135名高龄正常人为研究对象.采集外周静脉血,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析和测序检测其TNF-α基因多态位点的变化.结果 75例在职矽肺组中TNF-α -308A、-238A的分布频率显著高于矽尘接触组(P<0.01),其中Ⅰ期矽肺患者-308A的分布频率与矽尘接触组差异无统计学意义(P>0.01),而Ⅱ期、Ⅲ期矽肺患者-308A、-238A的分布频率均远高于矽尘接触组(P<0.01).调整混杂因素后,Logistic回归分析发现,矽肺组及各亚组和正常矽尘接触组-308A、-238A的分布频率差异均有统计学意义(P<0.01).而140例高龄矽肺患者TNF-α -308A的分布频率远低于正常对照组(P<0.001).结论 TNF-α -308及-238位点基因G→A的碱基突变与中国西南地区汉族人矽肺的发生及其严重程度有关,TNF2可能影响矽肺患者的转归和存活.
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人肝脏高凝状态相关基因的筛选
目的筛选人肝脏高凝状态(PTS)相关基因的全长cDNA序列.方法采用差异筛选法对本室建立的PTS大鼠肝脏差异表达基因消减cDNA文库进行筛选;以获得的差异cDNA克隆为模板,采用PCR方法扩增目的片段;以PCR产物作探针,用噬菌斑原位杂交法筛选人肝脏cDNA文库,经初筛、二筛和三筛后,将获得的阳性克隆转入E.coli BM 25.8,使λTripIEx环化成质粒pTripIEx,经酶切鉴定后进行DNA测序.结果从人肝脏cDNA文库中筛选获得4条全长cDNA序列,经序列测定及生物信息学分析发现,其中3条的表达产物分别为纤维蛋白原、纤维蛋白原相关蛋白、10号染色体开放阅读框架104 mRNA;另1条与氨基甲酰磷酸合成酶1同源.结论以PTS大鼠肝脏差异表达基因cDNA为探针,从人肝脏cDNA文库中筛选获得4条PTS相关cDNA全长序列.
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高凝状态大鼠主动脉表达上调新基因HCR2的克隆及生物信息学分析
目的获得高凝状态大鼠主动脉上调表达新基因HCR2的全长cDNA,并对该基因进行生物信息学分析.方法从高凝大鼠主动脉中表达显著上调的序列标签(EST,GenBank登录号为BQ901227)出发,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end, RACE)和巢式PCR技术扩增其全长cDNA,利用NCBI的数据库对其进行生物信息学分析.结果成功地获得了HCR2的全长cDNA,在GenBank中的登录号为AY234417.用RT-PCR证实HCR2是高凝大鼠表达上调基因.生物信息学分析显示,该基因cDNA序列全长为1275 bp,定位于大鼠染色体4q11,编码由78个氨基酸组成、相对分子质量为8841.7、pI为8.59的蛋白质;无信号肽序列和跨膜序列,很可能是一种核蛋白;与已知蛋白无明显同源性.结论 HCR2 的成功克隆为进一步研究其生物学功能及其在高血凝的发生、发展中的作用奠定了坚实基础.
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AQP4在新生大鼠实验性星形胶质细胞缺氧损伤模型中的表达变化及意义
目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在原代培养新生大鼠星形胶质细胞(AC)缺氧和缺氧后再复氧损伤模型中的表达改变及其意义.方法原代培养成熟的AC随机分成常氧培养组(对照组)、缺氧组和复氧组.缺氧组AC 在缺氧条件下分别培养3 h、6 h、12 h和24 h,复氧组AC缺氧培养12 h后更换为常氧培养,分别培养3 h、6 h、12 h和24 h.各组样品采用Real Time PCR 和免疫荧光染色分别测定AQP4 mRNA和蛋白表达水平.结果随着缺氧时间延长,AQP4 mRNA 和蛋白表达水平进行性降低,复氧时则先降低,后回升.结论 AQP4表达下降可能与脑水肿的发生有关,AQP4可能对脑内渗透平衡重建起重要作用.
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代谢性谷氨酸受体1α在大鼠马桑内酯点燃致癫模型中的表达
目的探讨代谢性谷氨酸受体1α(MGLUR1α)在马桑内酯(CL)点燃致癫模型大鼠脑组织不同区域表达的差异.方法 35只雄性SD大鼠随机分为对照组(n＝5,大鼠予1.0 ml/kg生理盐水肌注)和3个不同剂量CL点燃致癫模型组(分别予0.75、1.0、1.25 ml/kg马桑内酯提取液肌注).分别对点燃、未点燃、对照组大鼠行皮层脑电图描记、取脑组织作HE和MGLUR1α的免疫组化染色,观察MGLUR1α在脑组织不同区域的表达.结果点燃组大鼠在肌注马桑内酯后产生了1～5级的痫性发作,与皮层脑电图的表现相一致.MGLUR1α在点燃组大鼠海马以及海马以外的颞叶皮质的表达较之未点燃和对照组增强(P<0.05),这种表达的增强在神经元与神经胶质细胞间未发现有明显的差异.结论 MGLUR1α在点燃大鼠海马和海马以外的颞叶皮质的表达较之未点燃和对照组增强,可能参与了癫痫的发生.
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结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤裸鼠移植瘤模型LMP1蛋白检测及全长基因克隆分析
目的研究LMP1基因和蛋白在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤移植瘤模型传代组织中的稳定性和变异性.方法利用PCR和Western Blot方法检测已建立的结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤裸鼠移植瘤模型传代组织以及供体肿瘤组织中LMP1的全长基因和蛋白表达,并将扩增测序的LMP1全长基因序列与野生型B95.8和缺失型CAO细胞株序列进行比较分析.结果移植瘤模型传代组织均检测到LMP1基因和蛋白表达,LMP1全长序列与供体肿瘤组织同源性为99.76%.序列分析发现此LMP1基因与CAO细胞株基因序列相似,碱基序列既具相对保守性,又存在一定的特异性.结论 LMP1的基因和蛋白在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤裸鼠移植瘤模型传代组织中稳定存在,提示可能与该淋巴瘤的维持与发展有关.该裸鼠移植瘤模型为深入研究LMP1与此类淋巴瘤相关性提供了重要的体内实验平台.
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天然及氧化修饰高密度脂蛋白对内皮细胞部分分泌功能的影响
目的研究天然高密度脂蛋白(N-HDL)及氧化修饰高密度脂蛋白(OX-HDL)对培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)部分分泌功能的影响.方法采用培养人脐静脉内皮细胞,以0.01 mol/L PBS为空白对照,以N-HDL为正常对照,分别加入不同质量浓度OX-HDL(5 mg/L,10 mg/L,50 mg/L)共同孵育24 h后,观察培养基中内皮细胞分泌一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)水平的变化.结果和空白对照相比,N-HDL组NO的量(P<0.05)和NOS活性(P<0.01)明显升高,tPA和PAI-1的差异没有统计学意义(P均>0.05);OX-HDL组NO的量和NOS活性均显著下降,并呈剂量依赖关系,PAI-1活性也显著升高(P<0.05),tPA的水平差异无统计学意义.结论 N-HDL可以明显提高培养人脐静脉内皮细胞分泌NO的量并提高NOS活性,对tPA和PAI-1的产生则没有显著影响;而OX-HDL明显抑制内皮细胞NO合成和NOS活性,它不影响tPA的水平,却增加内皮细胞PAI-1活性.
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表皮生长因子在成年恒河猴中枢神经系统的分布
目的探讨表皮生长因子(EGF)在成年恒河猴中枢神经系统(CNS)的分布. 方法取成年雄性恒河猴CNS 制作冰冻切片,用EGF特异性抗体的免疫组织化学SP法染色,观察EGF免疫物质在成年恒河猴CNS的分布. 结果 EGF免疫阳性物质主要位于神经元胞浆内,这些具有较强免疫阳性信号的神经元见于大脑皮质、小脑皮质、小脑内的核团、海马各区、尾状核、豆状核、屏状核、间脑核群、黑质、脑神经核群、脑干网状结构、脑桥核、红核、上下橄榄核、薄束核、楔束核,脊髓的腹角、背角、侧角以及中央灰质.此外,在CNS各部位的白质中可见部分EGF阳性胶质细胞和神经纤维. 结论 EGF免疫阳性物质在恒河猴CNS有广泛的分布,提示其功能可能涉及多种神经元和非神经细胞.
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异种血管内皮细胞生长因子重组蛋白质疫苗联合阿霉素治疗淋巴瘤的研究
目的探讨重组非洲爪蟾血管内皮细胞生长因子(Xenopus laevis vascular endothelial growth factor, xVEGF) 肿瘤疫苗免疫治疗,联合阿霉素抗小鼠淋巴瘤的作用.方法采用C57BL/6 小鼠建立EL4淋巴瘤模型.实验小鼠随机分成4组:xVEGF联合阿霉素组(简称联合用药组)、阿霉素组、 xVEGF组、生理盐水对照组.观察肿瘤生长、小鼠生存率和毒副反应,并检测分泌抗自身VEGF抗体的B细胞、肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)和肿瘤细胞凋亡等. 结果联合用药组肿瘤明显小于其他3组(P<0.05),其中有3只小鼠肿瘤完全消退;接种肿瘤后48 d,联合用药组小鼠生存率为100%,明显高于生理盐水对照组(0%)(P<0.01).ELISPOT检测发现,异种蛋白质疫苗免疫的小鼠(联合或单用)产生了分泌抗自身VEGF抗体的B细胞,其数量与阿霉素组或生理盐水对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).联合用药组肿瘤MVD明显低于其他3组(P<0.05),肿瘤细胞凋亡指数明显高于其他3组(P<0.05).结论采用异种同源蛋白质疫苗xVEGF免疫治疗,与阿霉素化疗联合有协同增强的抗小鼠淋巴瘤的作用.
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成都市医务人员吸烟状况及控烟干预研究
目的了解成都市医务人员的吸烟状况及其控烟态度和行为,并对其进行干预及其效果评价.方法采用问卷形式对成都市3家医院的932名医务人员的吸烟危害知识、控烟态度和行为进行调查,并对一家医院进行干预,同时对干预结果进行评价.结果男性吸烟率为49.7%,女性为0.2%,男性吸烟者主要集中在外科医生和医技人员中;知识方面,对吸烟与肺癌、缺血性心脏病的关系掌握较好,但对被动吸烟与儿童中耳炎和猝死综合症关系回答正确的仅41.5%和48.2%; 86.2%的不吸烟者中反对"被动吸烟无害",但吸烟者中仅为70.4%,两者的差异有统计学意义;态度方面,对于以经济手段来处罚违反吸烟规定者,不吸烟者和吸烟者赞成的比例分别是87.5%和68.1%,差异有统计学意义(P<0.001);行为方面,不吸烟者询问病人吸烟状况的比例高于吸烟者,同时不吸烟者鼓励家人或朋友戒烟的比例明显高于吸烟者,二者差异有统计学意义.通过综合干预,医务人员的吸烟率差异虽无统计学意义,但有好转趋势;控烟态度明显好于干预前,差异有统计学意义(P<0.05).结论目前医务人员的吸烟率较高,控烟意识淡漠,吸烟者和不吸烟者在控烟态度和行为方面存在差异.在医院环境中采取综合干预的方法可以改变医务人员的吸烟行为,提高其控烟意识.
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p53和Ki-67在老年人口腔癌前病变的表达及临床意义
目的研究p53、Ki-67蛋白表达与老年口腔粘膜癌前病变的关系.方法采用免疫组织化学LsAB法对60例口腔粘膜上皮异常增生(28例轻度上皮异常增生,32例重度上皮异常增生)和30例正常口腔粘膜 p53和Ki-67蛋白的表达进行研究,并对上皮异常增生患者实际癌变率做了5年临床随访.结果在正常粘膜组,p53不表达,Ki-67少量表达;轻度上皮异常增生组, p53、Ki-67少数表达;重度上皮异常增生组, p53和Ki-67过度表达,与正常粘膜组、轻度上皮异常增生组比较差异有统计学意义(P<0.05).p53和Ki-67蛋白过度表达与实际口腔癌前病变癌变率有一定相关性.结论口腔粘膜癌变是一个由量变到质变的过程,在这一过程中,它们的调控基因 p53、Ki-6发生了显著的变化,可能起着重要的调控作用.
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针刺对部分背根切断备用背根节生长的影响
目的探讨针刺对部分背根切除备用背根节(DRG)生长的影响.方法健康成年雄猫10只.随机分为正常对照组、备用根模型组及针刺备用根模型7 d组(摘除双侧L1～L5, L7～S2 DRG, 保留L6 DRG为备用背根,其中针刺一侧备用根支配区的两组穴位即为针刺组,非针刺侧为备用根模型组),每组5只.两组动物在无菌条件下取出双侧L6 DRG进行体外培养.分别于1、3、5、7 d 250倍光镜下随机测量20个视野的细胞突起长度.用抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体行免疫组织化学ABC法染色对神经元进行鉴定.结果培养的DRG细胞经抗NSE抗体行免疫细胞化学ABC法染色,可见95%以上呈NSE阳性反应,且为典型的体外培养的DRG神经元.在相应时间段正常组DRG神经元的神经突起长度小于备用根组(P<0.05)、备用根组小于针刺组(P<0.05).结论部分背根切断可致备用DRG神经元突起再生活性增强,针刺备用根所支配的穴位后可进一步促进备用DRG神经元的突起再生.
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眼镜蛇毒神经生长因子对去部分背根猫脊髓背角内GAP-43表达的影响
目的观察眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子(NGF)对去部分背根猫脊髓背角内生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响.方法对45只成年雄性家猫切除一侧L1-L5 、L7-S2背根节,保留L6背根及背根节为备用背根,按给药剂量将动物分成:小剂量NGF组(1 μg/kg)、大剂量NGF组(2 μg/kg)和生理盐水对照组,每组15只,术后分别存活3、6、12 d,对L6节段脊髓作GAP-43免疫组织化学检测.结果术后术侧GAP-43阳性反应产物主要分布在脊髓Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ板层的神经终末;中央管室管膜细胞呈阳性反应;脊髓前角神经毯呈阳性反应,整个脊髓板层未见阳性反应的神经元.术后3 d,三组术侧Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ板层即有GAP-43阳性神经纤维的表达;术后6 d,三组GAP-43阳性神经纤维数量明显增多,至术后第12 d,神经纤维数量增加达高峰,治疗组神经终末数量增加明显,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),不同时间段均以大剂量组的增多尤为显著. 结论蛇毒NGF能有效诱导脊髓损伤修复过程中神经元GAP-43的合成而促进保留背根的侧支出芽,其密度与蛇毒神经生长因子的治疗剂量有关.
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重组质粒pIRES2-EGFP/CCK的构建及其在体内外的表达
目的构建猪源性胆囊收缩素(CCK)基因真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,并在哺乳动物细胞COS-7中和仓鼠体内进行表达.方法从含CCK的中介载体pMD18-T/CCK中,以限制性内切酶方法获取目的片段,将其克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP中,以脂质体法转染COS-7细胞,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,同时采用肌肉注射法免疫仓鼠,了解重组质粒pIRES2-EGFP/CCK的体内表达.结果构建了猪CCK基因的重组真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,用其转染COS-7细胞后24 h、48 h、72 h均可检测到绿色荧光蛋白的表达,其中72 h组荧光强度达到强.用pIRES2-EGFP/CCK免疫仓鼠后,第4 d注射部位可以检测到绿色荧光蛋白的表达,第14 d荧光强度明显增强,第42 d荧光强度进一步增强,正常对照组始终未检测到绿色荧光蛋白的表达.结论成功构建了猪源性CCK基因真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,并成功地在哺乳动物细胞COS-7中和仓鼠体内进行了表达,为仓鼠胰腺癌的交叉免疫治疗奠定了基础.
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多聚环氧化合物处理的猪胸腔动脉性能特征的研究
目的研究经亲水性交联剂乙二醇缩水甘油醚(EX-810)处理的猪胸腔动脉的性能特点,为构建组织工程化血管提供理想的支架材料.方法用40 ml/L的EX-810处理猪胸腔动脉7 min～72 h,同时以6.25 g/L的戊二醛处理血管作对照.所获材料分别进行外观、光镜与扫描电镜检查;另外还进行交联指数、氨基酸成分及力学性能的测定.结果 EX-810既能有效去除和降低组织中产生抗原性的细胞成分和自由氨基,又保持了血管总体组织构架的完整;同时经它处理的血管组织比戊二醛处理者有更好的柔韧性、更接近天然血管组织,在各项力学性能方面也与天然血管组织极为相似.结论 EX-810处理的猪胸腔动脉在所检测的各个方面,都与天然的新鲜血管相似,其自身又具有易于保存、低细胞毒性及低抗原性等优点,是作为组织工程化血管支架的理想生物材料.
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自身免疫性内耳病的诊治
自身免疫性内耳病(autoimmune inner ear disease,AIED)是一种免疫介导的累及耳蜗和前庭的罕见疾病,现就我院1995年以来确诊的7例AIED进行分析,并复习1979年后有关文献,以提高对AIED的认识.
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60例年轻妇女宫颈癌临床病理分析
子宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一.近几十年来宫颈癌的防治已取得较大的进展,使宫颈癌的发病率明显下降,但值得注意的是:年轻妇女宫颈癌的发病呈明显上升趋势.年轻妇女宫颈癌由于人群的特殊--该人群对生育及术后生活质量的要求较高,从而对治疗方法的选择应建立新的概念.我们回顾性分析我院1997年1月至2001年6月手术治疗年龄≤35岁宫颈癌60例的临床及病理资料,以探讨年轻宫颈癌临床病理特点以及相关治疗和预后问题.
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空肠穿刺管造口在大肠癌术后进行早期肠内营养的临床研究
目的探讨大肠癌术后早期肠内营养的可行性、安全性及临床疗效. 方法将50例大肠癌术后病人随机分为肠内营养(EN)治疗组和肠外营养(PN)治疗组,均予以营养支持治疗至第7 d.测定手术前后的淋巴细胞计数(LC)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、前白蛋白(Pa)、转铁蛋白(Tf)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)指标变化.临床观察胃肠功能恢复时间. 结果 EN组的LC、TP、Alb、Pa、Tf、ALT与PN组差异无统计学意义(P>0.05),TBil低于PN组(P<0.05).EN组胃肠功能恢复时间早于PN组.结论大肠癌术后早期应用EN是安全可行的.
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7例儿童组织细胞坏死性淋巴结炎临床分析
组织细胞坏死性淋巴结炎(HNL)是一种少见的非肿瘤性淋巴结肿大性疾病,儿童病例较少.为提高对本病的认识和临床诊断水平,回顾性总结分析了我院近6年来经淋巴结活检确诊的7例儿童病例的临床和实验室检查特点,报道如下.
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131I固定剂量法治疗甲亢近期疗效观察
目的观察131I固定剂量法治疗甲亢Graves病的近期(6月)疗效,分析治疗结果与影响疗效的因素之间的关系.方法 38例甲亢Graves病患者接受131I固定剂量(555 MBq)治疗后3、6月随访.治疗结果分为:持续甲亢状态、甲状腺功能恢复正常、甲状腺功能减低.结果甲功正常14例,占36.8%,甲状腺功能减退(甲减)18例,占47.4%,持续甲亢状态6例,占15.8%.治愈率(正常+甲减)84.2%.统计分析表明,治疗结果与甲状腺质量、甲状腺组织吸收放射性活度/克之间具有统计学意义(F=17.639, P=0.000; F=28.453, P=0.000),与患者年龄、甲状腺吸碘率之间无统计学意义(F=1.375, P=0.266; F=2.453, P=0.101).结论 131I固定剂量法能使亢进的甲状腺功能迅速恢复正常.
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活血益气复方治疗充血性心力衰竭的实验研究
目的研究活血化瘀、益气温阳中药复方对充血性心衰大鼠的作用机制.方法使用放免法和半定量RT-PCR方法测定心衰大鼠治疗前后血浆心钠素和肾髓质精氨酸血管加压素依赖性水通道蛋白-2(AQP2)的表达水平差异.结果活血益气复方可显著提高心衰大鼠的心输出量、左室收缩内压,降低左心室舒张末压,改善左室内压大变化速率,从而有效地改善了心衰大鼠的血流动力学;同时,该方能够显著降低心衰大鼠血浆心钠素的水平和纠正心衰大鼠肾髓质AQP2的异常表达.结论该方可能是在神经内分泌综合调控的基础上,通过多环节发挥抗心衰作用.
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咪喹莫特乳膏、脂质体及亚微粒治疗小鼠皮肤黑色素瘤的研究
目的寻找咪喹莫特治疗皮肤肿瘤合适的皮肤给药系统.方法采用黑色素瘤细胞小鼠皮下接种建立病理模型,用自制的咪喹莫特乳膏(imiquimod cream,IMQD-C)、咪喹莫特脂质体(imiquimod liposome, IMQD-L)和咪喹莫特亚微粒(imiquimod submicroparticles, IMQD-SMP),经皮给药治疗小鼠皮肤黑色素瘤,并进行药效学对比研究.结果 IMQD-L、IMQD-SMP对小鼠皮肤黑色素瘤的治疗保护作用均明显优于IMQD-C (P<0.001),其中以IMQD-L治疗保护作用佳,明显优于IMQD-SMP(P<0.001).结论脂质体是IMQD较为理想的治疗小鼠皮肤黑色素瘤的皮肤给药系统.
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淋巴管生成与胃癌病期进展的关系
目的探讨胃癌(gastric carcinoma,GC)与血管内皮生成因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)、血管内皮生成因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)、淋巴管密度(lymphangiogenic density,LAD)的相关性以及与临床病理因素的关系.方法免疫组织化学检测100例胃癌以及20例胃良性病变组织VEGF-C、VEGFR-3表达以及Podoplanin染色淋巴管计数.结果与正常组织相比,胃癌VEGF-C与VEGFR-3表达均上调,相应LAD增加.VEGF-C与VEGFR-3表达无相关性.VEGGF-C阳性组LAD高于阴性组.伴有淋巴结转移、远处转移的晚期胃癌VEGF-C、 VEGFR-3呈高表达,LAD明显升高.结论 VEGF-C与VEGFR-3促进胃癌淋巴管生成、淋巴道转移,淋巴管密度与病期进展有关.
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MOC-31在浆膜腔积液转移性腺癌、间皮瘤和增生间皮细胞中表达的检测价值
目的探讨检测MOC-31蛋白表达用于鉴别浆膜腔积液转移性腺癌、间皮瘤和增生间皮细胞的价值.方法选用浆膜腔积液标本共93例,其中胸水66例、腹水24例、心包积液3例.经组织学或结合临床资料证实的转移性腺癌55例、恶性上皮型间皮瘤6例、间皮增生32例.每例均制备HE染色的涂片,并用细胞块切片作免疫细胞化学染色.结果 MOC-31抗体对转移性腺癌的敏感性为69.1%(38/55),特异性为92.1%(35/38),阳性预测值为92.7%,阴性预测值为67.3%.经χ2检验,MOC-31在腺癌、间皮瘤和增生间皮细胞中的表达差异有统计学意义(χ2=34.1,P<0.005).结论检测MOC-31蛋白表达有助于鉴别浆膜腔积液转移性腺癌与间皮源性细胞.
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配制置换液与Online置换液在连续性静脉-静脉血液滤过中的应用比较研究
目的比较配制置换液和Online联机生产的置换液在制备方法、临床疗效、安全性方面的异同,为临床医师提供合适的置换液解决方案. 方法选择我院ICU住院患者22例,随机分为A组与B组,建立临时性血管通路, 行连续性静脉-静脉血液滤过治疗.A组患者使用Online置换液,B组患者使用配制置换液.分别于置换液制备的0 h,4 h,8 h,12 h观察置换液外观变化,并测定置换液的电解质浓度以及内毒素,12 h时进行细菌培养.检测患者治疗前后血尿素氮、肌酐、电解质及血气的变化,并进行APACHE Ⅱ评分.结果两组置换液相关指标数值在12 h内各时间点与制备时比较差异无统计学意义(P>0.05).内毒素在各时点检测<0.1 U/ml,细菌培养阴性.两组患者同组内治疗前后比较:尿素氮、肌酐明显下降(P<0.05);酸碱情况趋于稳定;钠、氯、钙、镁离子浓度稳定;APACHEII评分有所下降(P<0.05).治疗后A组与B组相比,前者钾较低,酸碱度偏碱(P<0.05),其余指标两组比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论两种置换液在有效性、安全性方面差异无统计学意义.Online置换液具有制备方便,成本低廉的突出优点,而配制置换液的优点主要是个体化,更适合于病情变化快的危重患者.
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吡格列酮与格列奈类药物对2型糖尿病患者血浆致动脉硬化指数的影响
目的研究吡格列酮对2型糖尿病(T2DM)患者血浆致动脉硬化指数(AIP)的影响,并与格列奈类药物进行对比.方法 60例T2DM患者分为两组,分别口服吡格列酮(15～45 mg/d)和格列奈类药物(随机给予那格列奈90 mg或瑞格列奈1.0 mg,tid)治疗12周.治疗前后测定空腹血糖(FPG)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、游离脂肪酸(FFA)及糖化血红蛋白(A1c),并分别计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和AIP.结果治疗后,吡格列酮组的FPG、 INS、 TG、 TC 和A1c均有显著下降(P<0.05).格列奈组除A1c下降具有统计学意义外(P<0.05),其他各项指标在治疗后的变化不明显(P>0.05).吡格列酮组在治疗后HOMA-IR和AIP都有显著下降(P<0.05).结论吡格列酮不仅可以降低T2DM患者的FPG, A1c及空腹INS水平,而且能够改善其血脂异常,降低AIP.
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检测高血压病患者氨基末端脑钠素前体的临床意义
目的探讨在高血压病患者中检测氨基末端脑钠素前体(NT-proBNP)的临床意义.方法纳入高血压病患者85例以及正常对照17例,采用电化学发光法检测NT-proBNP含量,并采用超声心动图测定心脏左室舒张末期内径、左房、右房和右室内径以及左室的射血分数,以单因素方差分析(ANOVA法)比较NT-proBNP在不同心功能(NYHA)分级间的差异,并采用多因素相关分析和多元逐步回归分析导致NT-proBNP水平在高血压合并心力衰竭患者中变化的相关因素.结果高血压病患者中NT-proBNP水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),在高血压病患者中NT-proBNP水平随NYHA分级的升高而升高,差异有统计学意义(P<0.01),多因素相关分析发现NT-proBNP与左室内径(r=0.737, P<0.01)、左房内径(r=0.538, P<0.01)、右房内径(r=0.313,P<0.05)呈正相关,与射血分数呈负相关(r=-0.504,P<0.01).结论高血压病患者中NT-proBNP显著升高,NT-proBNP是评估高血压病患者左心室功能受损程度的一个非常有价值的指标.
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两种强度运动后的血气指标变化及其与血浆K+浓度和pH值的关系
目的探索运动时和恢复期动脉血二氧化碳总量(tCO2)和氧含量(O2ct)的变化及其机理.方法同一批受试者分别以200 W和120 W踏车运动至疲劳,测定运动前和运动后即刻、5 min、10 min、20 min时,动脉化耳血的PCO2、tCO2、PO2、O2ct、K+和 pH值.结果两次运动后即刻血浆K+浓度、PCO2、tCO2、PO2、O2ct、均有明显变化(P<0.001).血pH值仅在200 W运动后明显下降(P<0.001).血浆K+与两次运动的O2ct以及血pH值与200 W运动的tCO2,均有高度正相关(P<0.001). 结论运动所致的tCO2和O2ct的变化与血浆K+和H+浓度的改变有关,尤以高血K+更甚.
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抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿关节炎实验诊断中的应用评价
目的评价抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体对诊断类风湿关节炎(RA)的敏感性、特异性及在临床上的意义.方法收集血清388例,包括正常人50例,RA83例,系统性红斑狼疮(SLE)110例,其它自身免疫性疾病145例,检测抗-CCP抗体和抗角蛋白抗体(AKA),对83例RA患者同时进行类风湿因子(RF)检测. 结果抗-CCP抗体的特异性、敏感性分别为97.0%和66.3%,AKA特异性和敏感性分别为96.1%和49.4%.抗-CCP抗体水平和RF呈显著正相关,RF浓度大于1000 IU/ml的RA患者抗-CCP抗体比值为4.21±0.97,小于1000 IU/ml患者比值为2.84±2.13.结论抗CCP抗体对RA诊断具有良好的灵敏度和特异性,可视为RA新的血清学指标.
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VIP-125I-ASON的制备及其在荷瘤裸鼠体内的分布
目的通过制备VIP-125I-ASON(反义寡核苷酸)并观察其在荷瘤裸鼠体内的分布,探讨以血管活性肠肽(VIP)作为载体进行肿瘤放射性反义治疗的可行性.方法以三氯化铊作为氧化剂,将与C-myc mRNA 互补的15个碱基的ASON进行125I标记.碘化的ASON与血管活性肠肽-多聚赖氨酸(VIP-PL)通过静电作用结合形成放射性反义复合物.荷瘤BALB/c裸鼠尾静脉注射VIP-125I-ASON或125I-ASON后,于不同时相观察各脏器及肿瘤组织的放射性分布情况.结果 125I-ASON主要浓聚在肝、肾,另外肺、脾、胃、肠也有较少浓聚,而其它组织放射性分布极少.除肝、脾、骨外,其余组织的清除速度较快.VIP-125I-ASON 在体内的分布以肝为高,其次为肺、脾、肾脏,其它组织放射性分布较少,各组织中放射性清除较125I-ASON为慢.VIP-125I-ASON在肿瘤组织中摄取增高,2 h达大,为5.89%ID/g,明显高于未经VIP受体介导的125I-ASON肿瘤组织的摄取,其大值仅为1.98%ID/g.肿瘤/血液及肿瘤/肌肉的放射性比值在4 h达大.结论 VIP与125I-ASON偶联后,使其经肾脏排泄减少,血液及组织内清除速度有所减慢,在肿瘤组织摄取增高,可望用于肿瘤的显像诊断与治疗.
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关节镜下同种异体跟腱经股骨双束双隧道移植重建后交叉韧带
[目的]探讨在关节镜下采用同种异体跟腱经股骨双束双隧道移植重建膝关节后交叉韧带的手术方法和临床疗效.方法 对2002年3月至2003年4月收治的后交叉韧带损伤致膝关节不稳的10例患者,选用同种异体跟腱作移植物供体,于关节镜下完全经前方入路行后交叉韧带重建手术治疗. 手术方法:异体跟腱直径12 mm,长20～140 mm,带直径10 mm的圆柱形跟骨块,跟骨端固定于胫骨骨隧道内,腱性部分按3∶2(即7 mm∶5 mm)比例分为两束分别固定于股骨内髁前外(AL)和后内(PM)两个骨隧道内行双束双隧道重建.术后伸膝位支具或石膏托固定4周.以膝关节Lachman试验和后抽屉试验及膝关节Lysholm功能评分标准作为疗效评定指标.结果 所有病例随访12～48月,平均32月.10例患者术后膝关节不稳症状均消失,关节前后方向稳定性恢复,术后膝关节Lachman试验及后抽屉试验均为阴性,屈伸膝活动范围正常;膝关节Lysholm功能评分术前58分,术后6周93分,功能优9例,良1例,优良率100%;临床观察,与异体组织免疫排斥反应相关的表现仅1例轻微发烧(<38 ℃),所有病例均未发生手术并发症.术后随访均未见韧带再松弛,取得满意临床疗效.结论 同种异体跟腱经股骨双束双隧道移植重建膝关节后交叉韧带是一种既避免移植物供区损伤又符合后交叉韧带生物力学解剖重建的新型临床治疗方法,近期效果好,远期效果还需进一步观察研究.
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应用小动物呼吸机实施吸入麻醉的体外模式
目的建立应用小动物呼吸机实施小动物吸入麻醉的方法,并研究其体外模式的动态过程.方法将麻醉机的气体输出口与小动物呼吸机进气口相连,呼吸机回路与模拟动物肺的注射器连接.按照兔、大鼠和小鼠三种体外模型设定呼吸机呼吸参数,分别测定呼吸机进气口处和注射器呼气末气体麻醉药浓度,计算吸入阶段注射器呼气末气体麻醉药浓度升高百分率(CE/CI)和消除阶段注射器呼气末气体浓度降低百分率(C'E/C0).结果三种体外模型吸入阶段CE/CI逐渐升高,CE/CI与时间的倒数成线性关系,相关系数分别为0.90、0.95和0.93(P<0.01);清除阶段C'E/C0逐渐降低,C'E/C0与时间的倒数成线性关系,相关系数分别为0.90、0.94和0.95(P<0.01).结论将小动物呼吸机与麻醉机联用能完成小动物吸入麻醉,建立了应用小动物呼吸机实施小动物吸入麻醉的体外模式,为今后进行吸入麻醉药在小动物的药理学研究建立了可靠的体外模型.
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改良白细胞滤器对体外循环模型犬肺保护的实验研究
目的观察犬体外循环(CPB)管路静脉端使用改良白细胞滤器(LD-1)进行短时间白细胞滤过对犬肺的保护作用.方法 16只健康杂种犬建立CPB模型后,随机分为LD-1组和对照组.LD-1组在CPB管路的静脉端安装LD-1,CPB初期开放白细胞滤器5 min.对照组无LD-1.于CPB前、CPB 5、10、40、70 min、主动脉开放5 min、停机、鱼精蛋白中和后5 min、停CPB 2 h 9个时点测血常规.于CPB前、鱼精蛋白中和后5 min、停CPB 2 h检测氧合指数、肺组织的病理变化和血浆中IL-6、IL-8的水平.于停CPB 2 h检测肺泡灌洗液(BALF)中IL-6、IL-8的水平.结果 LD-1组白细胞计数在CPB 5 min明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但从CPB 40 min至停CPB 2 h各时点两组间差异均无统计学意义(P>0.05).鱼精蛋白中和后5 min、停CPB 2 h氧和指数LD-1组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);LD-1组肺组织白细胞浸润和肺泡壁水肿明显轻于对照组.鱼精蛋白中和后5 min两组血浆IL-6和IL-8的水平差异无统计学意义(P>0.05);停CPB 2 h LD-1组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).停CPB 2 h两组BALF中IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05);而 LD-1组IL-8水平低于对照组(P<0.05).结论在犬CPB管路静脉端使用改良LD-1进行短时间白细胞滤过,能明显减少循环中白细胞的数目,减少血浆中IL-6、IL-8的水平,减轻CPB后肺部的炎性反应,对犬肺有保护作用.
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维生素K1中主要光解产物的分离和结构鉴定
目的确定维生素K1中一主要光解产物的结构.方法采用硅胶柱层析法分离制备了该杂质,通过测定其紫外吸收光谱(UV)、红外吸收光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振光谱(NMR)进行光解产物的结构分析. 结果光解产物的结构为2-甲基-3-(3-羟基-3,7,11,15-四甲基-1-十六碳烯基)-1,4-萘醌.结论确定了光解产物的结构.
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固态青霉素钾的降解动力学研究
目的研究不同温度和相对湿度条件下青霉素钾降解的动力学规律.方法在恒温恒湿条件下使青霉素钾降解,定时测定其含量,并对获得的数据进行数学分析.结果青霉素钾的降解反应速率为-dc/dt=k(c0-c+B),降解曲线符合c=c0-Bexp(kt)+B,速率常数k可表达为k=Aexp(-Ea/RT)exp(mHr),其中活化能Ea=77.26 kJ/mol,常数m=0.1159.结论反应速率表达式表述了青霉素钾的降解过程,符合其实际降解规律.
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颈静脉球体瘤误诊为中耳癌1例
患者男,50岁,入院前2+年无明显诱因出现左耳疼痛,为间断性,伴耳鸣,偶伴左侧头闷胀痛,无恶心、呕吐,未予诊治.入院前3个月头痛及耳鸣症状加重,并出现左耳流脓,听力下降,自行"挖耵聍"时出现左耳流血,量不多.当地按"中耳炎"医治,无明显疗效.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
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