四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
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IL-1ra、IL-1β在Graves眼病发病及治疗中的意义
目的研究IL-1ra、IL-1β与Graves眼病(GO)的发病机理及治疗效果的关系.方法分别用酶联免疫吸附法和放射免疫分析法测定了20例Graves病(GD)无眼病者、20例健康对照者及20例GO(NOSPACES≥4级)患者糖皮质激素治疗前后血中IL-1ra、IL-1β水平的变化,并分析IL-1ra、IL-1β水平、IL-1ra/IL-1β与治疗效果之间的关系.结果 GO患者治疗前与GD、健康对照的IL-1ra水平差异无统计学意义,但糖皮质激素治疗后明显升高;而IL-1β在未治疗的GO患者明显升高,经糖皮质激素治疗后有降低趋势.IL-1ra与IL-1β的比值在GO患者明显低于健康对照,经糖皮质激素治疗后明显上升.结论 GO患者存在内源性IL-1ra的相对不足,经糖皮质激素治疗,可促进IL-1ra的产生,抑制IL-1β产生.
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糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织Fractalkine表达的影响
目的动态观察内毒素(LPS)所致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)大鼠肺组织内趋化因子Fractalkine(FKN)的表达变化,及糖皮质激素对其的影响.方法将42只大鼠随机分为空白对照组、模型组(LPS)及地塞米松干预组(DEX),其中LPS组和DEX组再分为1 h、2 h、4 h 3个时相组,每组6只,LPS组和DEX组大鼠经尾静脉注射LPS(4 mg/kg)建立ALI大鼠模型.采用ELISA、RT-PCR等方法,观察ALI大鼠模型肺组织病理学改变、肺湿干重比值(W/D)及血清TNF-α变化,并检测肺组织FKN mRNA的表达,同时观察地塞米松对上述指标的影响.结果模型组1 h、2 h与4 h 3个时相组肺损伤病理改变、肺W/D、血浆TNF-α均明显增高,地塞米松能减轻ALI大鼠肺组织炎症反应、肺W/D值及血清TNF-α水平(P均<0.05).正常大鼠肺组织FKN mRNA有表达,模型组 3个时相亚组肺组织FKN mRNA表达较正常组明显增加(P<0.05),在2 h时点达峰值,地塞米松能下调ALI大鼠肺组织FKN mRNA表达(P<0.05).FKN mRNA的表达量与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.674,P<0.05).结论早期应用地塞米松可降低TNF-α水平,下调肺组织FKN mRNA的表达,这可能是糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤实验大鼠保护作用机制之一.
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组织蛋白酶B表达与胶质瘤恶性程度和血管生成的关系
目的探讨组织蛋白酶B(CB)在人胶质瘤中的表达及其与胶质瘤恶性程度、血管生成的关系.方法应用免疫组化(SABC染色)方法检测47例手术切除的星形细胞胶质瘤标本和5例自发性脑内出血手术活检并被证实为正常脑组织标本中CB的表达和微血管密度(MVD).结果 5例正常脑组织CB表达为阴性.星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤、胶质母细胞瘤中CB的表达分别为30% (6/20 弱阳性), 86.7%(3/15 弱阳性, 10/15 阳性), 100.0%(2/12 阳性,10/12 强阳性).CB染色强度与肿瘤恶性程度相关(r=0.77, P<0.05).在CB染色呈强阳性、阳性、弱阳性、阴性的标本中,MVD分别为49.90±11.30,39.85±8.75,22.50±14.42,15.57±8.52.CB表达水平与MVD相关(r=0.56, P<0.05).结论 CB表达水平与胶质瘤恶性程度和血管生成密切相关,可能是恶性程度及侵袭性的标志之一.
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碱基切除修复基因HOGG1特异性锤头状核酶表达载体的构建及其功能的初步研究
目的阿霉素是一种临床上广泛使用的抗肿瘤药物,但其治疗作用的发挥受到耐药性的限制.目前研究显示阿霉素主要通过诱导活性氧自由基的产生而杀死肿瘤细胞.人8-羟基鸟嘌呤-DNA糖苷酶(HOGG1)是一种DNA氧化损伤的修复酶,可特异性的切除由活性氧产生的8-羟基鸟嘌呤.针对这一机制,设计并合成HOGG1特异性的锤头状核酶基因,构建其真核表达载体并初步探讨在该基因作用下,人肺腺癌A549细胞株对阿霉素的药物敏感性的影响.方法人工设计并合成核酶基因(RZ),将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,阳性重组子由BamHⅠ和EcoRⅠ酶切, 琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序证实.大量抽提阳性重组子并在非脂质体转染试剂FuGENE 6的介导下引入A549细胞株,RT-PCR(逆转录多聚酶链反应)法鉴定转染,并半定量检测转染细胞中HOGG1 mRNA表达的改变.MTT法检测细胞转染前后对阿霉素敏感性的变化;彗星试验检测细胞转染前后DNA氧化损伤修复能力的改变.结果经酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列成功克隆入pcDNA3.1(+)中,命名为pcDNA3.1(+)-RZ.经RT-PCR法鉴定质粒成功导入靶细胞中,并检测到转染核酶的靶细胞中HOGG1 mRNA表达下降36%,与空白细胞组比较差异具有统计学意义(P<0.05). MTT法检测显示转染细胞组对阿霉素的药物敏感性增加,与未转染细胞组之间差异具有统计学意义(P<0.05);彗星试验表明在1.0 μg/mL阿霉素作用下,转染细胞组较未转染细胞组DNA损伤程度增加(P<0.05),但无时效关系.结论成功构建HOGG1特异性锤头状核酶真核表达载体.核酶在A549细胞内有效抑制靶基因HOGG1的表达,增加了该细胞对抗肿瘤药物阿霉素的敏感性.为进一步研究HOGG1基因的功能奠定了基础.
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T4、φχ174D和 f2三种噬菌体对戊二醛消毒剂抵抗力的比较研究
目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体.方法比较研究噬菌体T4、φχ174D和f2对戊二醛消毒剂的抵抗力.消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活试验、中和剂鉴定试验、噬菌体的检测采用双层琼脂法.结果①3000 mg/L的戊二醛对噬菌体T4作用20 min,或6000 mg/L的戊二醛对噬菌体T4作用5 min即可达到消毒水平(对噬菌体T4的灭活对数值(LIV)或噬菌体T4的对数减少值[LRV)(log10No-log10Nt)≥4.00 log10];②2500 mg/L的戊二醛对噬菌体φχ174D作用20 min,或5000 mg/L的戊二醛对噬菌体φχ174D作用5 min达到消毒水平;③4000 mg/L的戊二醛对噬菌体f2作用40 min,或8000 mg/L的戊二醛对噬菌体f2作用10 min达到消毒水平.结论上述三种噬菌体对戊二醛的抵抗力由强到弱为:噬菌体f2>噬菌体T4>噬菌体φχ174D.
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FHIT蛋白表达与外阴癌发生发展的关系
目的探讨FHIT蛋白在外阴癌发生发展过程中的作用.方法用免疫组化SP法对20例正常外阴、22例外阴上皮内瘤样病变(VINs)及60例外阴癌组织分别进行FHIT蛋白表达的检测.结果正常外阴组织、低级别VINs、高级别VINs、外阴癌FHIT蛋白阳性表达率分别为100%(20/20),72.7%(8/11),45.5%(5/11),21.7%(13/60),差异有统计学意义(P<0.05).在高、中、低分化的浸润性外阴癌中,FHIT蛋白的阳性表达率分别为60.0%(9/15),20.0%(3/15),3.3%(1/30),差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移者FHIT蛋白阳性表达率为10.0%(2/20),明显低于无淋巴结转移者的27.5%(11/40).结论 FHIT蛋白的异常表达在外阴癌的发展中起着重要作用,而且可为外阴癌的预后提供重要的信息.
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原发性肝细胞癌螺旋CT血供分型与血管内皮生长因子表达水平的相关性研究
目的研究原发性肝细胞癌(PHcc)螺旋CT血供分型与血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的相关性.方法对45例手术病理证实的PHcc病灶术前行螺旋CT双期扫描观察血供分型,用免疫组化SP法检测PHcc高、中、低分化者的VEGF表达水平,将两者进行对比分析.结果肝动脉供血型中VEGF表达强阳性者和阳性者均为高,其次为肝动脉和门静脉双重供血型者.门静脉供血型和少血供型VEGF表达水平低(P<0.001).随着组织学分级(Edmondson-Steiner分级)的增加,VEGF表达水平增高(P<0.05). 结论螺旋CT双期扫描能够反映PHcc血供分型和血管生成情况,并能推测VEGF表达水平和组织学分级,从而有利于包括抗血管生成治疗肿瘤在内的治疗方案的选择及预后评估.
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医师工作倦怠与职业紧张和应对资源的关系评价
目的探讨医师工作倦怠现状及职业紧张、应对资源对医师工作倦怠的影响.方法从3所省市级医院随机抽取561名各科临床医师,采用MBI-GS和OSI-R对其工作倦怠、职业紧张和应对资源进行测量.结果外科、内科医师的工作倦怠高于其他临床科室(P<0.05);30～40岁的医师衰竭得分高(P<0.05);专业低效能感随年龄的增高而下降、随学历的增高而增高(P<0.05);职业紧张和应对资源的性质不同对医师工作倦怠的影响也不同,衰竭的主要预测变量有任务过重、责任感、工作环境、娱乐休闲和自我保健等(P<0.05),消极怠慢的主要预测变量有任务不适、任务过重和责任感等(P<0.05),专业低效能感的主要预测变量为任务不适、社会支持和理性处事等(P<0.05).结论降低或保持适度的职业任务量、职业责任感,明确职工工作要求和工作中的角色与职责,丰富其业余生活、提高其自我保健能力与理性处事能力是预防医师工作倦怠的重要措施.
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Caspase-8在大鼠生前及死后电击伤后多器官的表达
目的探讨caspase-8蛋白能否用于生前电击与死后电击的鉴别.方法建立大鼠生前与死后电流损伤模型.电击死组于死后即刻取材,生前电击伤组于电击后1 h、2 h、4 h、8 h处死;死后电击组大鼠于死后即刻、15 min、30 min、1 h电击大鼠,采用免疫组化法检测大鼠心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、皮肤、脑等脏器caspase-8蛋白的表达.结果生前电击各组大鼠心、肝、肾、脑caspase-8蛋白呈强阳性表达,脾脏与骨骼肌呈阴性表达;而于死后电击各组大鼠中,仅死后即刻电击组大鼠心、肝、肺、肾、骨骼肌、脑caspase-8蛋白呈很微弱的阳性表达,其余各组各脏器均为阴性表达.结论检测各脏器caspase-8蛋白的表达情况,可以鉴别生前电击与死后电击.
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Survivin蛋白在卵巢癌中的表达和意义
目的探讨Survivin蛋白表达与卵巢癌临床病理特征间的关系.方法采用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接法检测10例正常卵巢、21例卵巢交界性肿瘤和38例卵巢浆液性囊腺癌石蜡组织中Survivin蛋白的表达.结果正常卵巢组织中无Survivin蛋白的表达;Survivin蛋白表达定位在肿瘤细胞的胞浆和胞核中;卵巢交界性肿瘤中Survivin蛋白表达阳性率为42.9%,与病理类型及血肿瘤相关抗原(CA125)的测定值无明显相关关系(P>0.05);浆液性囊腺癌中Survivin蛋白表达阳性率为76.3%,明显高于交界性肿瘤和正常卵巢组织(P<0.05),且与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关(P<0.05),与血CA125测定值、腹水量以及腹水/腹腔冲洗液细胞学间无明显相关关系(P>0.05).结论 Survivin蛋白表达水平增高可能与卵巢上皮癌的分化转移有关.
关键词： Survivin蛋白 卵巢癌 -
嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类抗菌药的分子耐药机制研究
目的研究嗜麦芽窄食单胞菌DNA解旋酶和拓谱异构酶Ⅳ的突变与氟喹诺酮类药物(FQNS)的耐药关系,为新药开发提供实验依据.方法选择对环丙沙星低抑菌浓度(MIC)≥2 mg/L且主动外排表型机制阴性的菌株,对其gyrA和parE的喹诺酮决定区域基因分别进行PCR扩增,纯化后直接测序.结果嗜麦芽窄食单胞菌在DNA解旋酶常见的83位和87位没有突变,同时在GyrA的整个喹诺酮耐药决定区域(QRDRs)没有氨基酸的改变,并且其83位是Gln而不是其它革兰阴性菌常见的Ser或Thr.5株菌中的parE各有1株菌在402和432突变,但是该突变与FQNS耐药不相关,未观察到Valdezate研究中的1/2菌株的parE突变频率高且主要集中在437、465、477和485位的现象.结论嗜麦芽窄食单胞菌对FQNS耐药与主动外排泵有关,可能与外膜的通透性降低有关,但与DNA解旋酶和拓谱异构酶Ⅳ的靶位点改变关系尚不明确,需进一步研究.
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粘液放线菌生物膜结构中细菌和胞外多糖关系的初步研究
目的探讨粘液放线菌形成的单菌种生物膜的结构以及胞外多糖在生物膜中的分布.方法采用微生物厌氧培养技术将粘液放线菌在玻璃片上形成24 h单菌种生物膜,用荧光染料Fluorescein、BODIPY和Calcofluor进行荧光染色,激光共聚焦扫描显微镜观察其形成的生物膜结构和其中胞外多糖的分布.结果玻璃表面粘液放线菌粘附形成致密的生物膜,大量微菌落和沟壑间隙是其所形成生物膜的特征.临近粘附表面的生物膜基底部位细菌密度较低,而中部则较致密.生物膜中胞外多糖分布与菌落中的细菌分布一致.结论粘液放线菌依靠其合成的胞外多糖聚集形成了生物膜.
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卡托普利对大鼠左向右分流模型肺小动脉重构的影响
目的观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对肺循环容量负荷过重导致的肺血管重构的影响.方法采用腹主动脉-下腔静脉瘘制造大鼠容量负荷性肺动脉高压(PH)模型,并应用卡托普利进行干预,6周后观察各组肺动脉收缩压(PASP)、舒张压(PADP)、右室收缩压(RVSP)变化;心室重量变化;采用免疫组化染色比较肺血管平滑肌细胞(VSMC)α-平滑肌肌动蛋白(α-actin)及增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达,比较15～50 μm无肌性动脉肌性化程度以及肺小动脉50～100 μm和101～150 μm血管厚度与血管外径之比(%WT).结果手术组动物RVSP、PASP、PADP较对照组显著升高(P<0.05),手术+卡托普利组RVSP、PASP、PADP均低于手术组(P<0.05);手术组RV/(LV+S)、RV/BW、(LV+S)/BW较对照组显著增加(P<0.001),而手术+卡托普利组则较手术组明显降低(P<0.01),同对照组比较,手术组α-actin染色IOD值显著降低(P<0.01),而手术+卡托普利组IOD值则高于手术组(P<0.05),手术组细胞PCNA阳性率显著升高(P<0.01),而手术+卡托普利组低于手术组(P<0.05);手术组同其他两组比较,50～100 μm、101～150 μm血管%WT及15～50 μm血管肌性化百分比显著增加(P<0.01,).结论卡托普利能有效地抑制肺动脉VSMC由收缩表型向合成表型转化,抑制VSMC的增生和肥厚,防止无肌性肺小动脉的肌性化,减缓PH肺血管重构进程,提示ACEI对左向右分流型先心病肺动脉高压有治疗前景.
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核因子кB介导病毒基因反式激活途径在激素敏感型单纯性肾病发病中的作用
目的研究核因子кB(NF-кB)介导的病毒基因反式激活途径在激素敏感型单纯性肾病(SRSNS)发病中的作用,探讨呼吸道病毒触发该病的机制.方法采用电泳迁移率改变分析、RT-PCR和ELISA法分别对SRSNS、肾炎性肾病、继发性肾小球疾病、毛细支气管炎和正常儿童外周血单个核细胞(PBMC)NF-кB转录活性、呼吸道病毒基因和抗体表达、血清IL-8水平进行检测.结果①SRSNS活动期NF-кB转录活性增高,与SRSNS恢复期、缓解期和其它组比较差异有统计学意义(P<0.05);②SRSNS活动期血清IL-8水平增高,与NF-кB转录活性呈直线正相关关系(r=0.88,P<0.001),NF-кB活性与呼吸道病毒检出阳性率亦呈正相关趋势.结论 NF-кB介导的病毒基因反式激活途径能使IL-8等基因表达增高而致病,这可能是呼吸道病毒触发SRSNS的主要机制之一.
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学龄期儿童行为问题与性别、年龄、户籍之间的关系研究
目的评价学龄期儿童行为问题与性别、年龄、不同户籍之间的关系. 方法 2004年9～10月使用Rutter儿童行为量表(分父母问卷和教师问卷)对浙江省2156名学龄期儿童进行测评. 结果按父母和教师评估,学龄期儿童行为问题检出率分别为13.5%和13.8%,且男童高于女童(父母问卷:1.79;教师问卷:2.82);年级分别以2年级(16.3%)和4年级(15.1%)检出高,户籍分别以农村儿童(16.3%)和城市儿童(19.5%)检出多.多分类logistic回归分析,父母问卷中男童、城市与A行为,男童与N行为分别显著相关;教师问卷中男童、城市与所有行为问题类型显著相关,4、5年级与A行为,5年级与M行为分别显著相关. 结论浙江省学龄期儿童行为问题检出率高于国内其它研究.男性、城市户籍儿童应成为学龄期儿童心理卫生指导的重点人群.
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抗AIB1-N单克隆抗体的制备及鉴定
目的获得有生物活性的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端(amplified in brest cancer 1-N terminal, AIB1-N)单克隆抗体.方法以谷胱甘肽转硫酶耦联的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端蛋白(GST-AIB1-N)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗AIB1-N单克隆抗体,用间接ELISA和Western-blot鉴定其亚类和抗原结合特异性.结果成功筛选出一株稳定分泌抗AIB1-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类为IgG1,经Western-blot鉴定该McAb特异性高,亲和力强.结论成功制备了抗AIB1-N单克隆抗体,为深入研究AIB1的表达及临床应用提供了有力的工具.
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职业健康安全培训效果的评价方法研究
目的建立职业健康安全管理体系(OHSMS)培训效果评价量表,为评价培训质量提供科学工具.方法编制量表,经反复修改形成5个维度21个条目的评价量表,再对量表进行信度和效度的分析,利用验证的量表对建立了OHSMS的某炼油企业700例员工进行调查,对结果进行统计分析.结果经验证,量表的Cronbach's α系数0.6194～0.6611 (>0.6),θ系数均大于或接近0.7,Pearson相关系数0.568～0.834(>0.3),因子负荷为0.731～0.855,表明所编制的量表信度和效度较佳,能反映员工的培训效果.统计分析显示,培训平均分为57.2,属于中等,优、良、中、差各占22.2%、31.2%、32.4%、14.1%;未经培训的员工占18.7%,只培训一次的为29.7%.结论所编制的评价量表适用.某企业进行OHSMS培训效果为中等,因此,应加强对员工OHSMS培训的力度,使OHSMS得到切实实施和有效运行.
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直肠癌系膜转移形式与生物学特点的关系
目的评价直肠癌系膜转移与其肿瘤生物学特性的关系.方法选择1997年1月至1998年12月按全直肠系膜切除原则切除的直肠腺癌328例.将直肠周围系膜癌扩散形式划分为三类: 直肠系膜结节状癌转移(包括血管旁明显淋巴结转移和系膜脂肪内明显癌结节);直肠系膜非结节状癌转移(微灶样转移)包括:系膜内散在癌细胞积聚、淋巴管静脉内癌栓、末梢小血管和神经浸润、腹膜/肠壁孤立微小种植;直肠系膜癌浸润包括:癌周临近组织脏器浸润、自主神经支干受累、直肠癌环周被膜受累、直肠癌旁脂肪浸润.分析直肠癌系膜转移方式与肿瘤分期、分化、部位的关系.结果直肠系膜结节状转移率为59.8%.直肠系膜非结节状转移率36%,其中单独微灶转移率11.6%.直肠癌环周被膜受累38.1%,其中18例为T2期,直肠癌旁脂肪浸润43.3%,其中26例为T2期.根治术后5年无病生存率总体为63 .9%,按TNM分期,T1～3期分别为89.7%、75.7%、52.6%;而按有无直肠癌系膜转移则分别为49.6%和91.4%.结论直肠癌系膜转移形式与恶性肿瘤生物学特点和不良预后密切相关,可作为传统病理分期的补充和术后辅助治疗的选择指标.
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PPAR-γ在自发性高血压大鼠血管平滑肌表达的增龄性变化
目的研究过氧化物酶体活化增殖受体γ(PPAR-γ)在自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌的表达随龄性变化,探讨PPAR-γ与高血压的发生发展关系.方法采用免疫组织化学方法检测PPAR-γ在不同周龄SHR血管组织表达变化,同时培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),用RT-PCR检测PPAR-γ mRNA,用Western Blot分析PPAR-γ蛋白在不同周龄大鼠原代及低代培养的VSMCs表达.采用同龄同种系正常血压的京都种大鼠(WKY)作为对照组.结果 PPAR-γ在SHR血管组织的表达有随着鼠龄增加而增强的趋势,而24周与16周相比表达不再增加.PPAR-γ在4周和24周SHR和WKY表达差异无统计学意义,而8周和16周SHR的PPAR-γ表达明显高于WKY.在VSMCs,4周、8周和16周SHR和WKY的PPAR-γ mRNA以及蛋白表达随着鼠龄的增加而增加.4周和24周SHR与WKY相比PPAR-γ mRNA以及蛋白表达差异无统计学意义,但是PPAR-γ表达量在8周、16周SHR VSMCs表达高于WKY,24周时在SHR VSMCs表达不再增加,表达量与同龄WKY相当.结论 PPAR-γ的表达随着血压、血管平滑肌增殖和鼠龄的变化而有所不同,此变化提示PPAR-γ参与了高血压的发生发展.
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HPV16 E7蛋白编码基因原核表达与鉴定
目的研究HPV16 E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16 E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定.方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16 E7基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选.经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况.结果成功构建了原核表达质粒pET32/E7, HPV16 E7-TRX融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达,在1 mmol/L IPTG、30 ℃诱导条件下融合蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右.结论 pET32/E7原核表达质粒的构建、HPV16 E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础.
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淋球菌外膜蛋白NspA基因重组子的构建与表达
目的构建淋球菌标准株外膜蛋白NspA基因重组子,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达外膜蛋白NspA.方法提取淋球菌标准株基因组DNA,PCR扩增其NspA基因,插入表达质粒载体pET-30c(+)中,构建pET-NspA重组子,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western Blot检测表达蛋白.结果成功构建了淋球菌标准株的pET-NspA大肠杆菌表达重组子,经IPTG诱导表达后,该蛋白在大肠杆菌中高效表达.结论淋球菌外膜蛋白NspA在大肠杆菌中的成功表达,为研究该蛋白的免疫学性能、制备抗体和研制预防淋病的疫苗奠定了基础.
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甲型流感病毒血凝素基因HA和HA1真核载体的构建及其表达研究
目的构建甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素基因HA和HA1真核表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法利用RT-PCR技术克隆流感病毒株血凝素HA和HA1基因片段并插入真核表达载体pcDNA3.1(+).经酶切、PCR和测序鉴定后用PolyFect脂质体转入HEK293细胞,通过免疫荧光技术检测其瞬时表达.结果血凝素基因HA和HA1的真核表达载体构建成功.转染后免疫荧光技术检测显示两者皆可在HEK293细胞中正确表达.结论成功构建的流感病毒HA和HA1真核表达载体为深入研究病毒的作用机制及核酸疫苗的研究奠定了基础.
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汽油、甲醇燃烧汽车尾气类雌激素活性研究
目的探讨汽油、甲醇燃烧汽车尾气的雌激素样作用,为甲醇取代汽油作为汽车燃料提供卫生学依据.方法采用环境雌激素基因重组酵母测评系统, 分别测定汽油、甲醇燃烧汽车尾气的雌激素活性.结果汽油燃烧汽车尾气在高剂量1000 mL/mL时吸光度值(A600)仅为0.081,与二甲亚砜(DMSO)对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),说明汽油尾气在该剂量下对酵母细胞有毒性作用;汽油燃烧汽车尾气在31.25 mL/mL剂量时检出雌激素活性,与DMSO对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),其他各剂量组均未检出雌激素活性.甲醇燃烧汽车尾气各剂量组与DMSO对照组相比,A600差异均无统计学意义(P>0.05),也未检出雌激素活性.结论以汽油作为燃料的汽车尾气具有微弱雌激素样作用,以甲醇作为燃料的汽车尾气无雌激素样作用.
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齿槽外科手术辅助正畸牙移动对骨形成的影响
目的探讨齿槽外科手术对正畸牙齿移动时骨改建的影响.方法以犬为实验对象,实验侧牙列应用简单的齿槽外科手术辅助牙移动,对照侧牙列应用传统牙移动方法,通过四环素荧光标记及免疫组织化学染色的方法,观察牙齿移动过程中张力侧的骨形成情况.结果在四周主动加力阶段,实验侧实验牙远中移动量(4.31±0.46 mm)显著多于对照侧(2.16±0.42 mm,P<0.01),而支抗牙近中移动量(0.44±0.07 mm)与对照侧(0.46±0.09 mm)无明显差异(P>0.05).自体荧光染色结果显示实验侧移动牙张力侧新形成骨量多于对照侧,骨形成蛋白(BMP)免疫组化染色显示,实验侧BMP-2表达增强现象较对照侧出现早,峰值高,而且持续的时间长.结论齿槽外科手术促进了正畸牙齿移动过程中的骨改建,有加速正畸牙齿移动的趋势.
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靶向Survivin的siRNA联合表阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响
目的采用RNA干扰技术阻断Survivin基因的表达,观察其诱导乳腺癌细胞凋亡及对表阿霉素的化疗增敏作用.方法构建靶向Survivin的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,采用lipofectamineTM2000转染乳腺癌细胞MCF-7,采用半定量RT-PCR、免疫组化技术检测转染前后MCF-7细胞Survivin基因表达的变化;采用TUNEL法检测其诱导MCF-7细胞凋亡及对表阿霉素的化疗增敏作用.结果靶向Survivin的序列特异性的siRNA可以有效地抑制MCF-7细胞Survivin基因的表达,在mRNA水平其表达抑制率为64.91%;在蛋白质水平其表达抑制率为79.72%;转染靶向Survivin的siRNA真核表达载体48 h后可以诱导8.75% 的细胞凋亡;阻断Survivin基因的表达,可以显著提高MCF-7细胞对表阿霉素的敏感性,靶向Survivin的siRNA联合表阿霉素可以诱导24.21%的细胞凋亡.结论本研究所构建的靶向Survivin的siRNA真核表达载体可以有效、特异地阻断Survivin基因的表达,阻断Survivin基因的表达可以诱导一定程度的 MCF-7细胞自发凋亡,并显著增强其对表阿霉素的敏感性.
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三个STR基因座的遗传多态性研究
目的获得D2S1327、D11S1390、D11S2008基因座的群体遗传学数据,分析其基因频率在不同群体间的分布情况是否存在差异,并分析其在法医学中的应用价值.方法采用PCR、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及银染技术分析中国成都地区汉族、泰国曼谷地区人群以及德国Maint地区人群中三个基因座的遗传多态性,获得三个基因座的群体遗传学数据. 结果从300份分别采自成都地区汉族、泰国曼谷地区人群以及德国Maint地区人群的无血缘关系个体的静脉血,三个基因座分别发现9、6、8个等位基因,分别发现32、14、22种基因型;观测杂合度分别为79%～82%、63.0%～74.3%、72.0%～74.3%;个人识别机率分别为87.8%～92.6%、79.6%～82.5%、87.6%～89.0%.经统计学检验,三个基因座基因型的频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,而且三个基因座等位基因频率的分布在三个群体间差异无统计学意义.结论 D2S1327、D11S1390、D11S2008基因座的个人识别能力高,在法医学个人识别和亲子鉴定应用中有较高价值.
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大川芎丸对大鼠缺血脑组织中血管内皮细胞生长因子的影响
目的研究大川芎丸对大鼠缺血脑组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法采用大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,将20只SD大鼠随机分成治疗组和对照组,每组各10只,分别于术后每天予以大川芎丸提取物4.13 g/kg或相应剂量生理盐水灌胃给药,72 h后行神经功能评分后处死,取脑组织作免疫组化染色检测VEGF蛋白表达变化.结果大川芎丸治疗组神经功能评分(1.5±0.71)低于对照组(2.3±0.82),差异有统计学意义(P=0.032);大川芎丸治疗组VEGF表达(19.13±1.52)高于对照组(14.83±0.94),差异有统计学意义(P=0.000).结论中药大川芎丸可上调大鼠缺血脑组织中VEGF表达,并可能通过此机制起到保护作用.
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人巨噬细胞源性泡沫细胞分化中MaxiK通道α-亚单位的表达
目的研究人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中MaxiK通道α-亚单位的表达.方法采用密度梯度离心法从男性健康志愿者外周血中分离单核细胞,经培养后分化为巨噬细胞,并通过加氧化型低密度脂蛋白(OxLDL),建立人巨噬细胞源性泡沫细胞模型,采用RT-PCR、蛋白质印迹及免疫细胞化学方法研究MaxiK 通道α-亚单位的表达.结果巨噬细胞同30 mg/L OxLDL孵育60 h后,细胞内总胆固醇(TC),游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)显著增加,并且CE/TC从(14.437±6.781)%提高到(57.946±3.507)%.同时,MaxiK通道α-亚单位表达被下调,但同巨噬细胞相比差异无统计学意义(P>0.05).结论人单核细胞源性巨噬细胞同30 mg/L OxLDL孵育60 h后可分化为泡沫细胞,但MaxiK 通道α-亚单位的表达无明显改变.
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大鼠肺动脉高压模型中肺组织肥大细胞及巨噬细胞数量的变化
目的观察肥大细胞、巨噬细胞在大鼠肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)模型,及辛伐他汀干预肺组织中的变化.方法对大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术,术后第8 d野百合碱腹腔注射制备PH模型,并应用辛伐他汀进行干预,35 d后观察各组肺动脉压及心室重量变化.同时采用免疫组化方法半定量检测各组肺组织内肥大细胞及巨噬细胞数量的变化.结果平均肺动脉压(mPAP)模型组动物较对照组升高(P<0.05),干预组较模型组降低(P<0.05);右心室/(左心室+室间隔)(RV/ LV+S)模型组较对照组增加(P<0.05),而干预组较模型组RV/LV+S降低(P<0.05).模型组动物肺部肥大细胞及巨噬细胞数量较对照组均增高(P<0.05),干预组肥大细胞数量较模型组下降(P<0.05),巨噬细胞数量与模型组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论肥大细胞及巨噬细胞参与了肺动脉高压的形成或/和肺动脉高压造成的损伤促进了肥大细胞及巨噬细胞的聚集与活化.辛伐他汀对肺动脉高压有改善作用,减少肥大细胞的聚集与活化可能是其机制之一.
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人成骨肉瘤顺铂耐药细胞系的建立
目的建立顺铂诱导的人成骨肉瘤多药耐药细胞系(MG63/R)并观察其生物学特性.方法以顺铂为诱导剂,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法诱导人成骨肉瘤MG63细胞,建立多药耐药系MG63/R.MTT法检测药物敏感性;光镜、透射电镜观察MG63、MG63/R细胞形态及超微结构变化;生长曲线、克隆形成试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数、P-pg、bcl-2、P53蛋白表达.结果经顺铂186 d的诱导,建立了MG63/R,其对顺铂的耐药指数为83.557±4.841,对阿霉素、长春新碱、氨甲基蝶呤、环磷酰氨亦产生不同程度的交叉耐药;光镜观察可见MG63/R细胞排列不规则,形态呈三角形、多角形及多核现象;透射电镜显示MG63/R细胞表面突起增加,粗面内质网丰富;细胞周期分析显示细胞增殖能力明显增加而细胞凋亡明显降低;MG63/R细胞 P-pg、bcl-2阳性表达较MG63细胞明显增加,P53表达则明显降低.结论本研究建立了稳定的人成骨肉瘤多药耐药细胞系MG63/R,为进一步研究顺铂的多药耐药机制和耐药治疗提供了一种新的实验模型.
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MDMA神经毒性机制--氧化应激损害的初步研究
目的建立单次给药的长期神经毒性模型,探讨3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺(MDMA)的神经毒性机制及维生素C(Vit C)是否具有MDMA神经毒性的保护作用.方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D、E),B组给予MDMA 20 mg/kg,C、D、E组分别在给予MDMA前30 min、MDMA后3 h、5 h给予Vit C 250 mg/kg,A组注射等体积生理盐水.采用高效液相色谱法测定大脑皮层ATP、ADP含量的变化,海马、枕叶皮层神经递质5-HT的含量变化;采用原位杂交方法检测5-羟色胺转运体(SERT) mRNA;免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果给予MDMA 12 h后,与对照组相比,大脑皮层ATP含量明显下降(P<0.05),7 d后,与对照组比较,大鼠枕叶皮层、海马的5-HT均有下降(P<0.05),大鼠海马的SERT mRNA的信号表达下降,而脑组织GFAP蛋白的表达则升高(P<0.05).提前30 min和MDMA后3 h给予Vit C,未能见到对ATP、5-HT功能标志的保护作用(P>0.05),MDMA后5 h给予Vit C对ATP、5-HT功能标志有保护作用(P<0.05).给予Vit C组对脑组织GFAP蛋白的表达均显示了保护作用(P<0.05).结论 MDMA耗竭大脑皮层直接能源物质ATP,对中枢5-HT系统具有明显的神经毒性.在MDMA后5 h给予维生素C,对能源物质ATP和5-HT能系统有保护作用.
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IL-6对血管内皮细胞活性及TF mRNA表达的影响
目的研究IL-6对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)组织因子(TF)的mRNA水平的影响.方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用第二、三代细胞进行试验.测定IL-6(0.5 ng/mL)处理前后细胞活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TF mRNA水平.结果 72 h内,IL-6对HUVECs的活性的影响与正常对照组相比差异无统计学意义.IL-6作用HUVECs 6 h即诱导TF mRNA表达,12 h达到高峰,以后表达减弱,72 h不能检测到mRNA;对照组TF mRNA不表达或表达极弱.结论 IL-6(0.5 ng/mL)对HUVECs的活性不造成直接的影响,同时在24～48 h内IL-6(0.5 ng/mL)可诱导HUVECs TF表达,这可能与IL-6作为前炎症因子诱导急性炎症反应时相的血液循环障碍相关.
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小剂量氟他胺对大鼠性分化影响的实验研究
目的探讨低剂量抗雄激素药物氟他胺对大鼠性分化的影响,以及氟他胺诱导建立SD大鼠尿道下裂动物模型的可行性.方法 60只孕鼠,随机分为5个实验组及1个对照组,从孕12～17 d连续6 d实验组每天腹部皮下注射用生理盐水配制的氟他胺4882.8、5078.1、5273.4、5468.7、6250.0 μg/kg,对照组注射同量生理盐水.于孕18 d每组解剖两只孕鼠,提取子代雄性胎鼠尿生殖结节做病理切片,同时观察睾丸位置和前列腺发育情况.并于出生后第2、13、28 d观察雄性仔鼠性分化与性发育的指标.结果氟他胺染毒组雄性子一代肛殖距各组均明显小于对照组(P<0.05);尿道下裂的发生率依次为29.00%、40.00%、63.68%、78.72%、100%;单侧隐睾发生率分别为4.23%、6.23%、9.23%、11.52%、16.28%;乳晕延迟退化率均为100%;各组前列腺不发育或发育不全.结论小剂量氟他胺能够引起大鼠的性分化与性发育异常;并能诱导出稳定、直观的尿道下裂动物模型.
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系统性红斑狼疮合并结核病32例临床分析
目的分析系统性红斑狼疮(SLE)合并结核病的频率、特点、危险因素,以提高对疾病的诊治水平.方法对32例合并结核病的SLE住院患者临床表现、实验室检查、危险因素进行回顾性总结.结果 SLE多在应用较大剂量糖皮质激素(GCs)时合并结核病.结核起病隐匿,临床表现不典型,常被认为是SLE加重.血行播散型肺结核比例高达40.6%.危险因素包括疾病活动度、血白细胞数减低、贫血、低白蛋白血症、GCs与免疫抑制剂使用.结论对使用GCs的患者要重视结核病并发症.对具有危险因素的患者应该严密观察,必要时采用化学预防性治疗,以改善患者的预后.
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壶腹及其周围癌的影像学诊断
目的比较CT检查、纤维十二指肠镜和低张力MRI结合磁共振胰胆管造影(MRCP)检查对壶腹及其周围癌的检查结果,探讨十二指肠低张力MRI检查在壶腹癌诊断中的应用价值.方法收集23例经手术病理或纤维十二指肠镜活检证实且影像资料较齐全的壶腹癌病例进行回顾性分析.结果所有病例经低张力MRI结合MRCP检查显示十二指肠乳头区肿块22例,经CT检查显示十二指肠乳头区肿块14例;14例经纤维十二指肠镜检查,其中7例发现十二指肠乳头区肿块并经活检证实.结论低张力MRI结合MRCP检查对壶腹及其周围癌的诊断较CT检查和十二指肠镜检查有一定的优势.
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云南汉族成人的Heath-Carter法体型研究
目的了解云南汉族成人的体型.方法应用Heath-Carter人体测量法对1090名(男492,女598名)年龄在20～59岁间的云南省昆明和玉溪两市的城乡汉族(简称云南汉族)进行体型评定.结果①云南汉族男性的平均体型值为3.8-4.4-2.6(城3.9-4.3-2.6,乡3.6-4.5-2.6),属偏内胚层型的中胚层型;各年龄组中以偏内胚层型的中胚层型、偏中胚层型的内胚层型及内胚层-中胚层均衡型为主.②女性的平均体型值为5.3-3.9-2.0(城5.3-3.8-2.0,乡5.3-4.0-2.0),属偏中胚层型的内胚层型;以偏中胚层型的内胚层型、内胚层-中胚层均衡型及偏外胚层型的内胚层型为主.③随着年龄的增长,男女性(20～54岁)内、中因子值上升,外因子值下降.结论云南汉族成年人体型男女两性间存在性别差异,但无城乡差异.
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吗啡依赖猴红细胞的脂质过氧化损伤
目的探讨吗啡依赖猴红细胞的脂质过氧化损伤情况.方法 15只恒河猴皮下注射吗啡,以剂量递增方式建立吗啡依赖猴模型,检测建模前后红细胞丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物岐化酶、血红蛋白和红细胞数.结果建模前丙二醛为 (2.46±0.65) μmol/L,建模后升至(3.52±1.5) μmol/L(P<0.01);谷胱甘肽过氧化物酶建模前为(8833.3±878.8) U/L,建模后减少至(6192.3±451.6) U/L(P<0.001);超氧化物岐化酶建模前为(19435.40±2069.29) U/g Hb,建模后减少至(16365.25±2078.13) U/g Hb (P<0.001);血红蛋白建模前为(136.2±6.3) g/L,建模后减少至(129.87±6.48) g/L(P<0.001);红细胞数建模前为(5.72±0.40)× 1012/L,建模后减少至(5.24±0.37) ×1012/L(P<0.001).结论吗啡依赖猴红细胞存在脂质过氧化损伤.
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抗CCP抗体、AKA及RF对类风湿性关节炎的诊断价值
目的评价抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)以及类风湿因子(RF)对类风湿性关节炎(RA)的诊断意义. 方法对182例血清(RA75例、其它风湿性疾病87例以及正常人血清20例)用ELISA方法检测抗CCP抗体,间接免疫荧光方法检测AKA以及用速率散射比浊法检测RF,比较三者对RA的诊断价值,并分析抗CCP抗体与其它两种抗体的相关性. 结果三种抗体单独检测对RA诊断的敏感性、特异性和诊断效率分别是:抗CCP抗体为65.3%、94.4%和82.4%,AKA为38.7%、92.5%和70.3%,RF为70.7%、76.6%和74.2%;联合检测两种抗体及三种抗体同时检测,则分别是抗AKA+RF为33.3%、100%和72.5%,抗CCP+RF为57.3%、98.1%和81.3%,三者联合为30.7%、100%和71.4%.抗CCP与RF的敏感性差异无统计学意义(P>0.05),均明显高于其它检测指标(P<0.05);三个抗体间具有相关性.抗CCP抗体浓度在RA组(228.2 U/mL)与非RA疾病组(19.4 U/mL)和健康对照组(11.2 U/mL)间差异有统计学意义(P<0.05),严重关节侵蚀组(162.7 U/mL)高于无/轻微关节侵蚀RA组(46.1 U/mL)(P<0.01).结论抗CCP抗体对诊断RA具有良好的敏感性、特异性和诊断效率,联合检测抗CCP与RF可进一步提高对RA的诊断效率.
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caspase-8在大鼠肌肉挫伤组织中的表达
目的通过研究肌肉挫伤与caspase-8表达的关系,探讨caspase-8能否作为诊断肌肉挫伤和推断肌肉挫伤时间的一个指标.方法建立大鼠骨骼肌挫伤模型.55只SD大鼠随机分为实验组和对照组.用免疫组化SP法观察大鼠肌肉挫伤后caspase-8蛋白表达的变化.结果随着损伤经过时间的延长,caspase-8蛋白表达强度以及阳性面积增加,损伤后30 min出现阳性信号,1 d达到高峰,5 d后恢复正常表达水平.结论 caspase-8的检测可作为诊断肌肉挫伤和推断肌肉挫伤时间的一项指标.
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妊娠期肝内胆汁淤积症患者外周血及脐血淋巴细胞的凋亡
目的探讨外周血及脐血淋巴细胞凋亡在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病中的意义.方法采用流式细胞技术分析ICP患者和正常妊娠妇女外周血及脐血淋巴细胞的凋亡率.结果 ICP患者外周血淋巴细胞培养后凋亡率低于正常妊娠妇女(P<0.001); 其脐血淋巴细胞培养后凋亡率亦明显低于正常妊娠组脐血淋巴细胞(P<0.001);脐血淋巴细胞凋亡率明显高于相对应的母体外周血淋巴细胞 (0.01
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5600例血清标本乙肝病毒DNA定量与免疫学标志物检测的对比分析
目的探讨乙肝病毒(HBV)感染血清学标志物常见模式与HBV DNA拷贝数之间的相关关系.方法对5600例血清标本进行HBV DNA荧光定量测定(FQ-PCR)和乙肝病毒感染血清学标志物(HBVm)测定.结果在2010例大三阳(即HBsAg、HBeAg、抗HBc均阳性)的标本中,检出HBV DNA阳性者有1796例,平均拷贝数为3.73×107/mL;在1790例小三阳(即HBsAg、抗HBe、抗HBc均阳性)的标本中,HBV DNA阳性者为301例,平均拷贝数为1.21×106/mL; 在793例HBsAg、HBcAb阳性的标本中,HBV DNA阳性235例,平均拷贝数6.27×106/mL; 而在278例HBVm全阴性的标本中,仍有3例检出HBV DNA阳性,平均拷贝数为1.63×104/mL.结论在各种HBVm模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平高;在HBsAg、抗-HBc阳性的血清中存在中等水平的HBV复制;而血清中未检出HBVm者并不能排除HBV感染.
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肺癌致上腔静脉综合征CT表现类型与病理性质关系的研究
目的探讨肺癌致上腔静脉综合征CT表现类型及相应病理学基础. 方法本组肺癌致上腔静脉综合征51例均经病理学确诊.回顾性分析其梗阻部位、梗阻程度、梗阻段周围病变CT表现及其病理性质,并作统计分析. 结果上腔静脉梗阻段周围病变CT表现:环状包埋11例、半环状包埋5例、夹心状包埋5例、推移10例、向左推压15例、完全闭塞5例.梗阻程度不同,前五者发生率差异有统计学意义(P<0.05).梗阻段周围病变为单纯肺内肿块直接蔓延7例,单纯上腔静脉周围转移淋巴结肿大融合17例,二者并存27例.梗阻CT表现类型、梗阻部位不同,其病理来源均有差异. 结论肺癌致上腔静脉梗阻CT表现类型与梗阻程度有关.梗阻的病理性质与梗阻部位、梗阻CT表现类型有关.
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小剂量内毒素建立子痫前期大鼠模型的研究
目的建立子痫前期大鼠模型.方法于大鼠妊娠第14 d,静脉缓慢滴注内毒素1 μg/kg,分别于给药前、后的1、2、5 d测量血压、给药前、后的第2、5 d检测尿蛋白、终止妊娠时采血检测白细胞粘附分子CD49d的表达及血肿瘤坏死因子(TNF-α)水平.结果实验组大鼠血压及尿蛋白较生理盐水组升高(P<0.05);粘附分子CD49d的表达、TNF-α水平浓度明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论用小剂量内毒素作用于妊娠大鼠,可以导致血压升高、蛋白尿及炎症反应激活,与子痫前期表现一致.
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差速贴壁法纯化分离GFP转基因小鼠骨髓间充质干细胞
目的运用差速贴壁法分离纯化绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs).方法分离GFP转基因小鼠骨髓细胞直接种植在培养瓶中,分别于2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、14 h、16 h、24 h和48 h进行首次全量换液,培养3 d后按细胞类型对贴壁细胞分别计数,并用CD44、CD45、CD54进行免疫细胞化学染色.另外,选4 h、8 h、24 h后换液的细胞进行传代培养,传至第5代,计算扩增倍数,用CD44、CD45、CD54进行免疫细胞化学染色.结果随着首次换液时间的延长,贴壁细胞密度增多,BMSCs的比例减少.首次换液时间在接种后2 h的细胞纯度高,但细胞密度低;24 h后的细胞密度高而纯度低;8 h后的细胞密度大具有较高的纯度.传代后的GFP转基因小鼠BMSCs能稳定表达GFP.结论差速贴壁法能有效分离纯化GFP转基因小鼠BMSCs,首次换液时间在接种后8～10 h时的传代细胞纯度高,具有扩增能力,可作为组织工程和基因治疗研究的种子细胞.
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聚氨酯泡塑吸附-平台石墨炉原子吸收法测定痕量铊
目的建立可定量测定痕量铊的分析方法.方法以溴水将水样中的Tl(Ⅰ)氧化为Tl(Ⅲ),在20 mL/100 mL的盐酸中Tl(Ⅲ)转化成[TlCl4]-并为聚氨酯泡沫吸附,吸附的[TlCl4]-经沸水浴洗脱后以平台石墨炉原子吸收法测定.样品分别在氧化及不氧化的条件下测定,可用于形态分析. 结果铊含量在5～100 ng/mL范围内的线性方程为y=0.013x+0.012,相关系数为0.996.5.00 ng/mL铊标准于不同日期富集后测定5次的相对标准偏差为4.7%,对水样的加标回收率为95.7%～104.5%. 结论本方法可测定水中低达0.02 ng/mL 的铊.
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载基因纳米脂质体的制备及有关性质的初步研究
目的用去污剂透析法制备载基因脂质体并考察其性质.方法以大豆磷脂和双十八烷基二甲基溴化铵为脂质材料,以Myrj53为表面修饰材料制备载基因纳米脂质体,用透射电子显微镜观察脂质体的形态,用纳米粒度及电位分析仪测定脂质体的粒径大小、多分散指数及zeta电位,并考察载基因纳米脂质体对DNA的包封率及体外保护DNA抵抗核酸酶降解的性质.结果制得的脂质体形态较为圆整,平均粒径为(72.73±7.14) nm (n＝3),多分散指数为0.288±0.093(n＝3),zeta电位为(-23.77±3.51) mV (n＝3),包封率为88.13%±4.41%(n＝3),DNase Ⅰ体外降解实验和凝胶电泳分析表明脂质体对质粒DNA有较强的保护作用.结论去污剂透析法是制备载基因纳米脂质体有效可行的方法.
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Pristane诱导BALB/c狼疮鼠模型的实验研究
目的建立系统性红斑狼疮小鼠模型,探讨环境因素在发病机制中的地位.方法雌性BALB/c小鼠30只,分为两组,造模组一次性腹腔注射Pristane 0.5 mL,对照组一次性腹腔注射0.5 mL生理盐水,注射前及注射后每月定期检测抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)抗体,及随机尿蛋白定量,8个月时处死动物,观察肾脏HE染色及直接免疫荧光染色后镜下变化.结果造模组ANA和抗dsDNA抗体分别于造模3个月和4个月时开始出现;8个月时,阳性率分别为87.5%和47.8%;62.5%的小鼠出现≥+(300 mg/L)蛋白尿;肾脏组织HE染色及直接免疫荧光染色见肾小球肾炎表现.对照组中各有1只小鼠分别为ANA、抗dsDNA抗体低滴度阳性;随机尿蛋白定量均≤+;肾脏组织未见病理改变.抗dsDNA抗体与蛋白尿之间存在一定相关性(r=0.538,P=0.003).结论 Pristane成功诱导系统性红斑狼疮动物模型.
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结肠癌合并血小板异常增多1例报告
患者,女,79岁,因"乏力10+月,便血2 d"入院.查体:中度贫血貌,全身皮肤未见黄染、出血点、淤点、淤斑,浅表淋巴结无肿大,胸骨无压痛,心肺腹无异常.辅助检查:血常规:血红蛋白66 g/L;血小板1807×109/L;白细胞7.79×109/L,分类正常.骨髓涂片提示:有核细胞增生活跃,粒系除原粒外各阶段细胞均可见,以杆分粒细胞为主,形态基本正常;红系以晚幼红为主,成熟红细胞大小基本一致;淋巴系为正常成熟淋巴细胞;巨核细胞41个,产板巨核细胞15/25,散在血小板成堆成团.
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肾上腺外嗜铬细胞瘤致异位ACTH综合征1例报告
患者,女性,51岁,因"发现腹部包块1月,双下肢肿,乏力,长胡须,体重增加2周"入我院.查体:BP 175/90 mmHg.满月脸,多血质,毛发增多,发际低,上唇、下颏长胡须,面部散在痤疮,前胸、后背、双上肢满布出血点,以前胸为主,压之不褪色.未见粗大紫纹,皮肤菲薄.右侧腰部可扪及约 15 cm×15 cm大小包块,表面光滑.双下肢凹陷性水肿,以右侧明显.入我科后血钾2.3 mmol/L,静脉及口服补钾,每天6～9 g.氨体舒通60 mg每天4次,血钾维持在2.5～2.8 mmol/L,波依定5 mg及安博维150 mg每天一次,血压控制在150～160/60～85 mmHg.
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成人支气管异物存留左肺7年1例报告
患者,男,61岁,入院10 d前无明显诱因出现畏寒发热,当地医院摄胸片示"慢性支气管炎,双肺感染",给予阿奇霉素、阿莫西林等治疗效果不佳,遂转入我院进一步诊治.查体:T 37.3℃, P 120次/min,R 20次/min,BP 14/10 kPa,消瘦貌,浅表淋巴结未扪及,双肺呼吸音粗糙,左下肺闻及少许湿音.入院后胸片示:右肺下野见肺纹理稍增多,左肺野内见分布不均匀的点状、小片状致密影,边界清晰,左肋膈角变钝.
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妊娠合并脊髓空洞症1例报告
患者,24岁,G1P0,因"停经36+4周,阴道流液24 h,不规则腹痛22 h"由外院急诊转入我院.孕期未进行正规产前检查.患者14个月前因自觉双手疼痛伴感觉障碍在我院住院治疗,磁共振(MRI)检查诊断为脊髓空洞症(病变自C2-3椎间盘水平至T4椎体及其下)合并小脑扁桃体下疝(Chiari氏畸形).遂行Chiari畸形手术治疗,术后至今未复查.否认有高血压病、遗传病等家族病史.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
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