四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
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特异性溶瘤重组腺病毒KH901的体外特异性抗肿瘤作用研究
目的 研究特异性溶瘤重组腺病毒KH901在体外培养的人肿瘤细胞中的选择性复制和杀伤作用.方法 以感染复数(MOI)=2 PPC的KH901和野生型腺病毒(Ad5)感染人肿瘤和正常细胞,72 h后采用病毒滴定法测定病毒滴度;以MOI＝10 PPC和1 PPC的KH901感染人肿瘤和正常细胞,24 h后通过ELISA法和TF-1依赖细胞株/MTT比色法测定粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的免疫活性和生物活性;以MOI分别为0、0.1、1、10、100、1000 PPC的KH901和野生型Ad5感染人肿瘤和正常细胞,采用MTT法测定各细胞活力,计算半数药物有效浓度(EC50).结果 野生型Ad5在正常细胞和肿瘤细胞中均大量复制,均表现出明显的杀伤作用;KH901在肿瘤细胞中大量复制[(2526.4±136.8)～(2796.6±104.6) TCID50/cell],表达大量的人GM-CSF[(1177.793±6.62)～(3924.497±17.79) IU/(106细胞·24 h)],并显示出明显的杀伤作用[EC50为(0.31±0.06)～(0.19±0.01) pfu/cell],在正常细胞中KH901复制较差[(56.8±9.2)～(90.1±14.4) TCID50/cell],只有少量的GM-CSF产生[(13.397±0.82) IU/(106细胞·24 h)],杀伤作用轻微[EC50为(92.33±9.12)～(121.20±19.94) pfu/cell],两者间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 KH901具有肿瘤选择性复制和杀伤作用,并能表达具有生物活性的GM-CSF,显示出治疗实质性肿瘤的潜力.
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因意外而中止妊娠的6～8周人胚脑发育及相关因子表达的形态学研究
目的 研究人胚脑早期发育过程中细胞的增殖、分化、凋亡及相关因子的表达变化,为明确人胚脑发育过程中的细胞增殖、分化和凋亡机制提供依据.方法 收集因意外而中止妊娠的6～8周人胚,采用TUNEL染色和免疫组化SABC染色,观察脑的发育、增殖和凋亡细胞的分布及相关因子的表达.结论 人胚脑6周时,端脑、间脑、中脑、后脑与末脑已形成.6～8周,各脑均由生发层(GL)、中间层(IL)和边缘带(MZ)组成.6～7周时,TUNEL法标记的细胞及PCNA、Bcl-2、Bax、Fas、Fas-L、Rb和P53阳性细胞分布于各脑的GL和IL,其沉淀物出现在圆形或椭圆形细胞的胞核和胞浆中;8周时,Fas和Rb阳性细胞分布于各脑的IL,其沉淀物出现在梭形细胞的胞浆和突起中,TUNEL法标记的细胞及其它因子阳性细胞的分布同6～7周.各因子的表达与细胞增殖和凋亡的发生在时间和空间上基本一致.结论 人胚脑发育过程中,神经祖细胞的增殖和凋亡同时发生,Fas、Fas-L和Bax可能介导凋亡的发生, Bcl-2则可能通过抑制细胞凋亡而维持细胞的存活,Rb与P53可能在神经祖细胞正常增殖和分化中起监控和维持作用.
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新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织NgR mRNA和NgR蛋白表达及意义
目的 观察NgR mRNA及NgR蛋白在缺氧缺血新生鼠脑组织中表达量的变化,并探讨其意义.方法 采用经右侧颈总动脉结扎加缺氧处理7日龄SD大鼠制作缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型,应用RT-PCR方法检测HIBD新生鼠脑组织NgR mRNA表达的变化;免疫组织化学方法检测NgR蛋白的分布及含量变化;Western Blot检测NgR蛋白含量变化.结果 HIBD新生SD大鼠脑中NgR mRNA与对照组相比,6 h开始升高,12 h达到峰值,24 h有所下降但仍持续在较高水平(P均＜0.05);免疫组织化学方法观察到NgR蛋白在正常新生SD大鼠脑中分布广泛,大脑皮层及海马均有较多NgR分布;免疫组织化学方法和Western Blot方法均发现HIBD新生SD大鼠脑中NgR蛋白6 h开始升高,24 h达到高峰,72 h仍持续在较高水平(P均＜0.05),随即开始下降,与对照组的差异无统计学意义.结论 缺氧缺血性损伤时,NgR mRNA和NgR蛋白含量升高与抑制神经元再生有一定关系,随即出现的含量下降可能与神经元细胞随缺氧缺血时间延长而出现坏死,数量进一步减少,进而使在神经元上表达的NgR随之减少有一定关系.
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穿孔素和颗粒酶B蛋白表达对胰腺移植急性排斥反应早期诊断的研究
目的 研究移植胰腺局部穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达对急性排斥反应的早期诊断和鉴别诊断的意义.方法 将40只四川当地杂种长白猪随机分为3组,即对照组(n=8)、移植组(n=16)、移植+免疫抑制剂治疗组(n=16).移植手术为同种异体经门静脉回流、肠内引流全胰十二指肠移植.免疫抑制剂治疗组在进行同种异体胰十二指肠移植术同时应用环孢A+骁悉+甲强龙三联免疫抑制治疗.分别于术前1 d和术后1、3、5、7 d检测受者的锁骨下静脉血胰岛素、胰高血糖素、血糖水平.术后1、3、5、7 d,开腹取胰腺组织进行常规病理学检查和免疫组化染色检测穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达.结果 ①对照组、移植组以及移植+免疫抑制剂组之间受者的血糖、胰岛素、胰高血糖素水平变化有统计学意义(P＜0.05).②胰腺移植+免疫抑制剂组与单纯胰腺移植组相比胰腺组织中穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达及穿孔素和颗粒酶B的阳性淋巴细胞计数的差异有统计学意义(P＜0.05).③免疫组化染色检测移植后胰腺组织中穿孔素和颗粒酶B蛋白表达,比常规病理学检查诊断排斥反应早2～4 d.结论 移植胰腺组织穿孔素和颗粒酶B局部蛋白表达变化早于常规病理学改变,结合常规病理学检查可以对胰腺急性排斥反应做出早期诊断和鉴别诊断.
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人皮肤组织桥粒芯糖蛋白4片段的克隆和在寻常型天疱疮中免疫识别的初步研究
目的 扩增人皮肤组织桥粒芯糖蛋白4(desmoglein 4,Dsg4)胞外区域EC1、EC2、EC3和EC4的核酸序列,为寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris, PV)发病机制的研究提供依据.方法 根据GenBank中的Dsg4序列(登录号为AY177664)分析,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法从人正常皮肤组织中抽提RNA,逆转录合成cDNA,聚合酶链反应(PCR)扩增皮肤组织桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1、EC2、EC3和EC4目的基因;应用基因重组技术将目的基因分别与质粒pET32a在T4 DNA连接酶作用下相连接,转化E.coli DH5α感受态细菌,用含氨苄青霉素的LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子DNA序列测定鉴定;重组融合蛋白经ELISA法与PV患者、正常对照组血清进行反应.结果 RT-PCR扩增产物经凝胶电泳得到均约为350 bp的4条条带;质粒载体pET32a连接的目的基因经序列测定后与在GenBank登录的Dsg4胞外区域EC1、EC2、EC3和EC4核酸序列完全一致,4个Dsg4胞外区域cDNA读码框架正确;Dsg4 EC1、EC2、EC3和EC4与患者血清反应,而不与正常对照组血清反应.结论 Dsg4胞外区域多肽片断在PV发病中可能有作用.
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系统性红斑狼疮血管炎相关自身抗原的血清学筛选
目的 通过重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)技术获得系统性红斑狼疮(SLE)血管炎相关自身抗体所对应自身抗原的cDNA序列.方法 收集SLE病人血清作为筛选血清,采用SEREX技术筛选人微血管内皮细胞(HMVEC)cDNA文库.结果 通过两轮筛选获得11个阳性克隆.通过生物信息学分析发现这11个阳性克隆cDNA序列编码三种不同的自身抗原,分别为SSA、SSB和YB-1.其中YB-1尚未被报道过与SLE血管炎相关.结论 首次发现YB-1与SLE血管炎相关.通过SEREX技术,我们可能找到有助于SLE诊断、治疗和判断预后的自身抗原.
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人原发性肝癌胰岛素样生长因子2和H19基因印迹研究
目的 研究人原发性肝癌中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor Ⅱ,IGF2)和H19基因的印迹状态,为进一步研究印迹调控机制打下基础.方法 采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)筛选IGF2和H19基因杂合标本,并用逆转录PCR-RFLP检测杂合标本IGF2和H19基因的印迹状态.结论 正常人肝组织中,IGF2呈双等位基因表达,H19呈单等位基因表达;47.1%(8/17)的肝癌标本中检测到IGF2基因的印迹获得,45.5%(5/10)的肝癌标本中检测到H19基因的印迹丢失;IGF2和H19的印迹改变没有相关性.结论 IGF2和H19的印迹异常与肝癌有关,成人肝组织中IGF2与H19的印迹调控可能相对独立.
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高淀粉膳食诱导高甘油三酯血症大鼠血浆及肝脏磷脂含量变化的研究
目的 研究高淀粉膳食诱导高甘油三酯血症(HTG)大鼠血浆及肝脏磷脂 (PL) 含量的变化.方法 实验组大鼠喂饲高淀粉膳食,6 d后氧化酶法测定血浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、血糖,抗坏血酸还原法测定PL含量.磷钨酸沉淀法分离高密度脂蛋白(HDL),测定HDL-TG、HDL-C、HDL-PL,计算NHDL-TG、NHDL-C和NHDL-PL浓度.结果 实验组大鼠较普通膳食喂饲的对照组血糖、TG、NHDL-TG、PL升高(P＜0.05),血浆HDL-C、HDL-PL浓度和HDL-PL/HDL-C比值降低(P＜0.05).实验组大鼠肝脏TG、PL含量升高(P＜0.05).相关性分析发现,实验组血浆PL与TG呈正相关,与HDL-PL呈负相关,与NHDL-TG正相关性较对照组增强(P＜0.05);实验组HDL-PL与血糖、血浆PL、肝脏PL呈负相关,与TG 、NHDL-TG负相关性较对照组增强(P＜0.05);实验组肝脏PL与肝脏TG相关性较对照组增强(P＜0.05).结论 高淀粉膳食诱导HTG模型大鼠伴血浆及肝脏PL含量增加,HDL中PL含量减少,血浆及肝脏PL含量与其他脂质含量的相关性状态也发生改变.
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限制性内切酶结合半巢式PCR法检测人肝癌P16抑癌基因启动子区甲基化研究
目的 建立甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法,研究原发性肝癌P16基因启动子区甲基化状态.方法 针对P16基因启动子区富含CpG的序列,设计3条引物,进行半巢式降落PCR扩增,检测原发性肝癌P16基因启动子区甲基化状态;并将P16基因启动子区340 bp片段克隆到pMD18-T载体,E.coli JM109扩增此质粒后经CpG甲基化酶M.Sss Ⅰ处理,再用Hpa Ⅱ酶切验证获得P16基因启动子区甲基化阳性的质粒P16Pm+并进行特异性和灵敏度实验.以此甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法检测40例人原发性肝癌和3例正常人肝组织DNA样品的P16基因启动子区甲基化状态.结果 所采用的Hpa Ⅱ酶切后半巢式PCR方法的特异性强,灵敏度达100 fg;对40例人原发性肝癌组织DNA样品P16基因的启动子区甲基化状态检测显示甲基化阳性率为30%(12/40),3例正常人肝组织均为阴性(0/3).结论 P16抑癌基因启动子区甲基化可能与肝癌发生发展有关.本实验方法简便、成本低廉,并有高度的特异性与灵敏度,在大规模检查中有实际应用价值.
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阻塞性黄疸肾脏系膜细胞内信号传导的机制及其意义
目的 了解神经酰胺介导的肾脏损伤中细胞内信号传导的机制以及在肾损害中的作用.方法 将大鼠分为正常对照组、假手术组、胆总管结扎15 d和21 d组,每组15只大鼠.胆总管结扎组建立阻塞性黄疸大鼠模型(胆总管结扎),取肾脏行系膜细胞原代培养,分别给予不同的干预措施后,胆碱比色法测定细胞膜磷脂酶D(PC-PLD)活力,流式细胞仪分析细胞周期亚G1峰.结论 使用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和外源性神经酰胺C2-Ceramide可使肾系膜细胞PLD活力下降(P＜0.05),诱导肾脏系膜细胞凋亡,给予神经酰胺抑制剂可使系膜细胞凋亡率下降,PLD活性增加.结论 TNF-α与膜上受体结合后可引起胞内神经酰胺水平升高,通过抑制PLD活力,诱导肾脏系膜细胞凋亡终导致肾脏细胞的损害.
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婴儿双歧杆菌介导的CD和UPRT联合5-FC基因疗法对黑色素瘤的体外治疗实验研究
目的 采用婴儿双歧杆菌为载体,探讨尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(UPRT)对胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统抗瘤作用的增强效应.方法 构建原核表达质粒pGEX-UPRT,以电穿孔法将该质粒转化入婴儿双歧杆菌,筛选阳性重组菌并鉴定.采用MTT法检测表达的UPRT是否可以与CD产生抗瘤协同作用,并观察细胞形态学改变.结论 重组婴儿双歧杆菌可以正确表达UPRT.体外MTT检测显示CD+UPRT组细胞存活率低于对照组(P＜0.01),且可使B16-F10鼠黑色素瘤细胞对5-FC的杀伤敏感性(IC50＝0.015 μmol/mL)提高,是CD组(IC50＝0.127 μmol/mL)的8.5倍.形态学观察CD+UPRT组肿瘤细胞显示出明显的损伤性改变,细胞生长受到明显抑制,而UPRT组和CD组变化明显不如前者.结论 婴儿双歧杆菌联合转导UPRT基因可明显增强CD/5-FC自杀基因系统对鼠黑色素瘤细胞B16-F10的杀伤作用.
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企业工人执行职业健康安全管理体系的影响因素研究
目的 对已建立职业健康安全管理体系(OHSMS)企业的一线作业工人对OHSMS作业手册的执行情况进行调查,找出其影响因素,为体系的进一步改进提供资料,同时为对体系更深入的评价提供参考.方法 采用自行设计的调查问卷,对某钢铁企业的一线作业工人对作业手册的执行情况及影响因素进行调查,调查表内容包括个体特征、基本认知、支持环境和责任与权利四个方面,共23个条目,涉及OHSMS中有关工人的所有要素,建立logistic回归模型.结论 个体特征对工人执行作业手册没有影响,而基本认知的7个条目中,除对个体防护措施的认识外,所有其它的条目差异均有统计学意义,支持环境和对责任和权利的认识的所有条目均会对工人执行作业手册产生影响.结论 工人对OHSMS作业手册的依从性受多因素的影响,对这些因素进行控制,将有利于体系的更好运行.
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RNA干扰逆转白血病细胞耐药性的研究
目的 用RNA干扰技术下调白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药基因mdr1的表达以逆转白血病对化学药物的耐药性.方法 针对mdr1基因已知mRNA序列不同位点,选择两条靶序列,构建靶向mdr1 shRNA真核表达载体,脂质体介导转染白血病耐药细胞株K562/A02.实时荧光定量RT-PCR检测mRNA表达,Western blot检测细胞膜P-gp表达,柔红霉素泵出试验检测P-gp外排泵功能,MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性.结果 构建了二条针对mdr1基因的shRNA真核表达载体,分别下调mdr1 mRNA的表达89.74%和87.18%,降低细胞膜P-gp表达,使膜外泵功能明显下降,柔红霉素在细胞内贮留明显增多,60min 时柔红泵出率为13.16%、22.02%,对照组为40.44%、45.31%,对阿霉素药物敏感性的相对逆转率为84.36%和76.69%.结论 RNA干扰技术可有效逆转mdr1所致耐药.
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番茄汁对DNA损伤的保护作用研究
目的 探讨番茄汁对人正常细胞和肿瘤细胞增殖的影响及DNA损伤的保护作用.方法 采用MTT法检测不同剂量的番茄汁对细胞增殖的影响,彗星实验检测不同剂量番茄汁对细胞DNA的影响及对DNA损伤的保护作用.结果 当番茄汁体积在培养液中所占比例低于15%时,对正常细胞和肿瘤细胞的增殖没有任何影响;当番茄汁在培养液中所占比例达到或超过20%时,此时的培养液不是细胞生长的适条件,表现为细胞生长抑制.番茄汁在培养液中体积分数为50～500 μL/mL时没有引起细胞DNA损伤,而低浓度(20～100 μL/mL)番茄汁对重铬酸钾诱导的DNA损伤具有明显的保护作用,该作用随着番茄汁剂量的增加而增强,表现为拖尾细胞减少,尾长减短,番茄汁剂量与拖尾细胞尾长具有明显的剂量-反应关系,呈负相关(r=-0.917,P=0.00369).肿瘤细胞和正常细胞实验结果一致.结论 番茄汁不但不会引起细胞DNA损伤,而且对重铬酸钾诱导的DNA损伤具有明显的保护作用;此外,在研究番茄汁对细胞增殖影响时应该注意番茄汁在培养液中所占的体积,本实验显示番茄汁不能超过20%,否则会得到错误的结论.
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大肠杆菌-钩端螺旋体重组穿梭质粒pGKINVA的构建及重组钩体的筛选
目的 构建大肠杆菌-钩体穿梭质粒pGKINVA,并重组于钩体PatocⅠ株,为进一步确定钩体invA基因的功能奠定基础.方法 将invA基因克隆于pGKble24载体,PCR、限制性内切酶双酶切及测序鉴定重组穿梭质粒pGKINVA.质粒pGKINVA经电穿孔法转化无毒钩体PatocⅠ株,并筛选重组钩体菌株.结论 从钩体基因组中克隆出长558 bp的invA基因,定向插入pGKble24构建重组穿梭质粒pGKINVA,抗生素及蓝/白斑筛选和测序鉴定并获得正确的重组质粒后,电穿孔法转化钩体PatocⅠ株,在Korthof固体培养基生长并抗生素筛选、PCR鉴定出重组钩体菌株.结论 成功构建重组大肠杆菌-钩端螺旋体穿梭质粒pGKINVA,并筛选出2个重组钩体菌株,将有助于进一步阐明invA基因在钩体体内中的功能分析.
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重组人Neureguline对快速起搏所致猴心衰心肌收缩能力的影响及其机制研究
目的 研究重组人Neureguline对快速起搏所致心力衰竭恒河猴心肌收缩能力的影响,并探讨其可能的机理.方法 成年雄性恒河猴24只,随机分为假手术组、心力衰竭组及Neureguline治疗组,每组8只.治疗组240次/min起搏7 d后,起搏状态下连续10 d,每天1次静脉注射重组人Neureguline 3 μg/kg,心力衰竭组给予同体积生理盐水.连续给药10 d结束后,测定左心室的大压力上升速度(LVdp/dtmax)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室收缩末期压(LVSP)等血流动力学指标.提取左室心肌组织mRNA,采用实时荧光定量PCR的方法分析肌球蛋白重链(α-MyHC)的表达水平.结果心力衰竭组LVdp/dtmax、LVSP低于假手术组(P＜0.05),LVEDP高于假手术组(P＜0.05);Neureguline治疗组LVdp/dtmax高于心力衰竭组(P＜0.05), LVSP有上升的趋势(上升了11%),LVEDP有下降的趋势(下降了16%).心力衰竭组α-MyHC表达水平低于假手术组(P＜0.05);治疗组α-MyHC表达水平高于心力衰竭组(P＜0.05).结论 重组人Neuregulin可能通过向上调节α-MyHC表达水平这一机制来增强心肌收缩力,从而达到治疗心衰的目的.
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载体介导的RNAi技术抑制宫颈癌CaSki细胞E7基因的表达
目的 探讨HPV16E7特异性小干扰RNA(siRNA)表达载体对宫颈癌CaSki细胞E7基因的抑制作用.方法 构建HPV16 E7特异性siRNA表达载体,利用脂质体转染CaSki细胞,以荧光定量RT-PCR及Western blot检测其对E7 mRNA及蛋白表达的影响.结果 3种表达载体P1、P2、P3均能抑制CaSki细胞E7基因mRNA和蛋白的表达,其中载体P1抑制作用强,在转染后3周,对E7 mRNA和蛋白的抑制率分别为92.86%和81.0%.结论 HPV16E7 siRNA表达载体能有效地抑制宫颈癌CaSki细胞E7基因的表达.
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恒河猴脊髓半横断损伤后腹角及对侧脑皮质前运动区EGF阳性神经元数的变化
目的 探讨脊髓损伤(SCI)对表皮生长因子(EGF)表达的影响及EGF在脊髓损伤再生修复中的作用.方法 18只成年恒河猴被随机分为假手术对照组,脊髓半横断损伤(hSCI)7 d、14 d、1月、2月和3月组,各损伤组于第11胸髓节段切断左侧半脊髓,在相应时间点取材,脊髓取损伤处近、远段5 mm两段,脑取损伤对侧皮质前运动区.制作冰冻切片,采用抗EGF多克隆抗体免疫组织化学SP法染色,观察并计数脊髓腹角及对侧大脑皮质前运动区EGF免疫阳性神经元数的变化.结论 恒河猴hSCI后3月内,损伤处脊髓近、远段损伤侧与未损伤侧腹角及对侧皮质前运动区EGF阳性神经元数均较假手术对照组减少(P＜0.05),表现为先降低后增加,晚期呈逐渐减少的变化趋势,不同部位EGF阳性神经元数波动不一致.结论 恒河猴hSCI后3月内脊髓损伤侧腹角EGF阳性神经元数明显减少;hSCI也会影响未损伤侧EGF的表达;损伤早期,邻近损伤处脊髓腹角及对侧脑皮质前运动区EGF阳性神经元数急剧减少后均有自发回升.
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hOGG1低表达肿瘤细胞对阿霉素的敏感性研究
目的 研究8-羟基鸟嘌呤DNA 糖苷酶1基因(hOGG1)低表达细胞对阿霉素的敏感性,为化疗增敏提供实验依据.方法 用不同剂量的阿霉素处理肺腺癌A549细胞和通过稳定转染hOGG1核酶而获得的hOGG1低表达的A549-R细胞,用MTT法测定两种细胞的存活率;体外微核试验及单细胞凝胶电泳检测两种细胞微核率及DNA损伤与修复的差异;流式细胞术检测周期分布、凋亡率和细胞增殖指数.结果 A549-R细胞阿霉素半数抑制浓度(IC50)低于A549细胞 (P＜0.05);阿霉素可诱导两种细胞的微核率增高,而在相同阿霉素剂量作用下A549-R细胞微核率较A549细胞更高(P＜0.05);单细胞凝胶电泳结果显示阿霉素作用下两种细胞均有不同程度DNA损伤,A549-R细胞的拖尾率和DNA迁移长度大于A549细胞(P＜0.05);与A549细胞比较,A549-R细胞更不易修复.流式细胞术检测显示:阿霉素处理使两种细胞都表现为G0/G1期细胞阻滞,细胞凋亡随阿霉素浓度增加而增加,细胞增殖指数随阿霉素浓度增加而降低,这些变化均以A549-R细胞更为明显.结论 hOGG1低表达使细胞DNA修复能力降低,从而使细胞对阿霉素的敏感性增强.
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肝细胞生长因子在大鼠修复性牙本质形成过程中的表达研究
目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)在大鼠修复性牙本质形成过程中的作用.方法 以窝洞预备形成大鼠修复性牙本质模型,免疫组织化学染色法检测HGF在窝洞预备后3 d、15 d、30 d的大鼠牙髓组织中的表达,采用积分光密度值(IOD)定量修复性牙本质形成不同阶段HGF的表达.结论 窝洞预备后3 d,HGF在大鼠牙髓细胞及成牙本质细胞胞浆中呈强阳性表达(IOD为8.995±0.943);窝洞预备后15 d,HGF在两种细胞的表达仍呈阳性(IOD为5.624±0.951), 但弱于3 d组(P＜0.01);30 d组(4.073±0.127)和正常对照组(4.279±0.348)大鼠牙髓细胞及成牙本质细胞胞浆中HGF均呈弱阳性表达,两者间差异无统计学意义.结论 HGF参与了牙髓损伤早期修复及修复性牙本质形成的过程.
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抗肺炎链球菌工程多肽抗菌活性研究
目的 检测制备纯化的抗肺炎链球菌工程多肽(Ph-SP)的体内外抗菌活性.方法 将重组质粒转化入工程菌TG1表达工程多肽(Ph-SP),经离子交换柱纯化后,通过体外抗菌试验和体内感染保护试验检测其抗菌活性.结果 体内外抗菌实验结果显示工程多肽(Ph-SP)对肺炎链球菌有较强的杀菌效力.按标化相对分子质量换算,分别是青霉素及万古霉素抗菌效力的200倍和50倍.结论 构建的Ph-SP在体外及体内都呈现出对肺炎链球菌的靶向杀伤活性,为临床治疗肺炎链球菌感染提供了新的思路和发展方向,具有临床应用潜力.
关键词： 抗肺炎链球菌工程多肽 抗菌活性 -
犬正畸牙移动过程中张力侧牙周膜肌成纤维细胞的表达研究
目的 初步探讨正畸牙移动过程中牙周膜肌成纤维细胞是否存在及其表达规律.方法 Beagls犬5只,采用自制的加力装置用镍钛螺旋拉簧加力100 g,远中移动犬第一前磨牙,主动加力4周, 4周后去除加力装置,分别于加力后1、2、3、4、8周各处死1只.测量实验牙移动距离;取正畸牙张力侧牙周膜,采用免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;透射电镜观察α-SMA染色阳性区域细胞的超微结构.结果 实验牙移动距离第1周达到高峰,第2周开始牙齿移动速度减慢,到第3周降至低,第4周又有所加快.免疫组化结果α-SMA的表达从加力开始至第2周达到大值,到第4周基本恢复正常.透射电镜观察可见胞浆内有密体结构出现.结论 肌成纤维细胞存在于正畸牙牙周膜中,其表达改变可能是受到正畸力的刺激.肌成纤维可能起到对抗张力限制牙齿移动的作用.
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人胎盘促肾上腺皮质激素释放激素自身受体激活效应
目的 了解剖宫产应激过程中人胎盘促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及其受体CRH-R1的差异表达.方法 分别采用免疫组织化学技术LsAB法和原位杂交技术,观察先兆临产前人足月妊娠剖宫产正常胎盘CRH及其受体CRH-R1的表达.结果 8例正常妊娠胎盘组织切片4种靶目标CRH、CRH mRNA、CRH-R1、CRH-R1 mRNA表现为阳性或强阳性表达,而CRH-R1、CRH-R1 mRNA表达强度又分别强于CRH、CRH mRNA(P＜0.01),CRH-R1阳性表达的灰度值高于CRH (P＜0.05).结论 人正常足月妊娠胎盘组织细胞在剖宫产应激过程中升高的CRH可能会刺激自身受体CRH-R1表达,人正常足月妊娠胎盘组织细胞可能存在CRH自身受体激活效应.
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MCM6在颅咽管瘤中的表达及其与预后的关系
目的 检测颅咽管瘤组织中微染色体维持蛋白6(MCM6)的表达,并观察其与肿瘤复发的关系.方法 采用前瞻性队列研究方案,免疫组化(SP法)测定颅咽管瘤亚型釉质上皮型、鳞形乳大型、复发组、非复发组、原发组及复发组的MCM6的表达情况.结果 32例釉质上皮型组14例患者复发,31例鳞形乳头瘤型组6例患者复发.釉质上皮型组与鳞形乳头瘤型组间复发率和MCM6蛋白表达差异均有统计学意义(P＜0.01);肿瘤复发组与非复发组间MCM6蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.01);而原发组与复发组间MCM6蛋白表达差异无统计学意义.结论 颅咽管瘤病理亚型、MCM6蛋白的表达与肿瘤预后和复发有关,可能预测肿瘤复发危险性.
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中国1996～2000年孕产妇死亡监测的流行病学特征分析
目的 了解1996～2000年我国孕产妇死亡发生的主要流行病学特征及城乡差别.方法 在全国31个省、自治区、直辖市孕产妇死亡监测网内采用以人群为基础的流行病学调查方法.结果 1996～2000年全国监测孕产妇死亡1704例,城市341例,农村1363例,城市死亡孕产妇中,69.9%受过中等教育,74.5%居住在平原;农村死亡孕产妇中,73.3%受过初等教育,65.1%居住在山区.全国死亡孕产妇中,76.8%发生在分娩后,49.0%在家分娩,28.9%未接受过产前保健.农村死亡孕产妇中,58.5%在家分娩,35.5%在家死亡,33.1%的分娩由非医务人员接生,31.8%未接受过产前保健.结论 受教育程度低、居住环境偏僻、孕期保健意识薄弱和住院分娩率低是影响我国孕产妇死亡的主要因素.
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mMIP-1α-DT390重组免疫毒素真核表达载体的构建及表达研究
目的 构建小鼠MIP-1α(mMIP-1α)基因和白喉杆菌外毒素DT390基因的真核融合表达载体,并对其功能进行初步研究.方法 通过RT-PCR获得mMIP-1α基因,插入含DT390基因的真核质粒SRα,获得真核表达载体SRα-mMIP-1α-DT390.重组载体经PCR、限制性内切酶酶切及DNA序列测定鉴定,用PolyFect脂质体转染NIH3T3细胞,然后用免疫荧光技术检测目的蛋白的表达,并利用转染NIH3T3细胞后的培养上清体外测定mMIP-1α-DT390融合蛋白的选择性细胞毒活性.结果 成功构建真核表达质粒SRα-mMIP-1α-DT390,mMIP-1α-DT390融合蛋白可在NIH3T3细胞株中正确表达,细胞转染上清对小鼠活化T淋巴细胞具有较强的细胞抑制效应.结论 mMIP-1α-DT390融合基因真核表达载体的获得及功能的部分研究为进一步研究其抗炎效果和临床应用奠定基础.
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高压氧对HIBD新生大鼠学习记忆功能及海马CA1区神经元的远期影响
目的 探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)新生大鼠远期的学习记忆功能和海马CA1区神经元的保护作用.方法 18只7日龄SD大鼠随机分为3组(n=6),分别是:假手术组、HIBD组、HBO干预组(HBO+HIBD).基于Rice法制作HIBD模型,HIBD+HBO组大鼠在HIBD后1 h应用2.5 ATA(1 ATA=100 kPa)的高压氧进行一次性治疗,治疗时间为1.5 h.在大鼠6周龄时,应用抑制性回避实验评价其短时程记忆功能,用Morris水迷宫实验评价大鼠8周龄时的空间学习和记忆功能.9周龄时灌注取脑,观察大鼠海马CA1区的神经元死亡和丢失情况.结论 在抑制性回避实验中,各组大鼠在学习期跳台潜伏期差异没有统计学意义,在测试期,HIBD+HBO组大鼠的跳台潜伏期长于HIBD组(P＜0.05);在Morris水迷宫实验中,HIBD+HBO组大鼠无论在定位航行实验中还是在空间探索实验中均比HIBD组表现良好,在定位航行实验中,各组大鼠的寻台潜伏期随着实验次数的增多而逐渐缩短,而HIBD+HBO组的平均寻台潜伏期比HIBD组短(P＜0.05);在空间探索实验中,无论是站台区探索时间还是穿越站台区的次数,HIBD+HBO组均优于HIBD组(P＜0.05).HIBD+HBO组大鼠的脑组织病理变化比HIBD组轻,且损伤侧的海马CA1区的神经元没有明显的死亡和丢失.结论 新生大鼠HIBD后1 h给予单次高压氧(2.5 ATA,1.5 h)治疗,可以有效地改善大鼠远期的学习记忆功能,同时也可以减轻大鼠海马CA1区的神经元的坏死与丢失.
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乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达及其与肿瘤细胞增殖、血管形成的关系
目的 探讨乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha,HIF-1α)的表达及其与增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及临床病理因素的关系.方法 采用免疫组化SP法检测乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织和乳腺癌中HIF-1α、PCNA、VEGF蛋白的表达.结果 HIF-1α蛋白在乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织中不表达;乳腺导管内原位癌中阳性率55%(11/20),浸润性乳腺癌中85%(51/60);乳腺癌中VEGF阳性率81.3%(65/80);乳腺癌中PCNA阳性率75%(60/80),其中原位癌中65%(13/20),浸润癌中78.3%(47/60).乳腺癌中HIF-1α表达与VEGF(r=0.762,P＜0.01)、PCNA(r=0.693,P＜0.01)均呈正相关;HIF-1α在淋巴结转移与否、不同雌激素受体状态及组织学分级中表达的差异有统计学意义.结论 HIF-1α及其靶基因VEGF在乳腺癌组织中明显上调,HIF-1α表达与肿瘤细胞增殖、淋巴结转移、雌激素受体状态及组织学分级相关,提示HIF-1α对乳腺癌的发生发展起重要作用,有望成为肿瘤放、化疗及生物治疗的一个新靶点.
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马桑内酯对大鼠海马神经元钠电流的影响
目的 研究马桑内酯(coriaria lactone,CL)对大鼠海马神经元钠离子通道电流的影响,探讨该影响在CL致痫中的意义.方法 利用全细胞膜片钳技术,在急性分离的大鼠海马神经元上记录钠电流,观察CL对电流幅度的影响.结果 经0.1 mg/mL、0.2 mg/mL的CL作用后,海马神经元钠电流有不同程度的增加[CL 0.1 mg/mL组的大峰值电流密度为(-90.11±14.02) pA/pF,增幅为17.32%±8.52%;CL 0.2 mg/mL组的大峰值电流密度为(-111.52±6.65) pA/pF,增幅为37.98%±4.91%];经与对照组相比,CL 0.2 mg/mL组(P＜0.05)的变化较CL 0.1 mg/mL组(P＞0.05)明显.结论 CL使海马神经元电压依赖性钠电流的幅度增大,从而改变细胞的兴奋性,引发异常放电.
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地塞米松对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞ICAM-1表达的影响
目的 探讨地塞米松对甲状腺相关眼病(TAO)眼眶成纤维细胞(OF)细胞间粘附分子(ICAM-1)表达的影响.方法 取10例TAO患者和5例正常对照的眼眶脂肪组织与眼外肌,体外培养OF,在培养基中分别加入10-6 mol/L地塞米松、300 U/mL 干扰素-γ(IFN-γ)或10-6 mol/L地塞米松与300 U/mL IFN-γ的混合液,作用72 h,用流式细胞仪检测OF上ICAM-1的表达水平.结论 体外培养的OF均表达ICAM-1,TAO患者的表达量高于正常对照者(P＜0.05).IFN-γ促进OF表达ICAM-1,地塞米松不仅抑制OF表达ICAM-1,而且能抑制IFN-γ诱导的ICAM-1表达.结论 TAO患者OF表达ICAM-1增强可能是促进眶内炎症发生的原因之一,糖皮质激素发挥治疗作用的可能机制之一是其抑制OF表达ICAM-1以及IFN-γ诱导的ICAM-1表达.
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体外诱导K562细胞伊马替尼耐药及其机理的初步探讨
目的 体外诱导K562细胞伊马替尼(imatinib)耐药并对其耐药性进行检测.方法 以浓度递增的方法诱导K562对伊马替尼产生耐药, MTT法确定其耐药性.RT-PCR方法半定量测定耐药细胞中BCR/ABL基因水平,并进行BCR/ABL基因序列测定.流式细胞术测定P-gp表达.高效液相色谱仪(HPLC)测定耐药细胞内药物浓度.结论 ①浓度递增法成功诱导K562细胞伊马替尼耐药(K562R),K562R细胞能长期在含5.0 μmol/L的伊马替尼的培养液中生长.②细胞生长曲线显示5.0 μmol/L伊马替尼作用于K562R细胞120 h,其活细胞数量与0 h无明显差别.6个浓度梯度的伊马替尼(0、0.25、0.50、0.75、1.00、2.00 μmol/L)作用于K562细胞24 h,发现所有浓度(除0 μmol/L外)伊马替尼均可抑制K562细胞的生长,24 h细胞活力几乎为零.③MTT法抑制率测定K562细胞半数抑制浓度约为0.75 μmol/L,K562R细胞约为7.5 μmol/L,耐药倍数约为10倍.④HPLC细胞内药物浓度测定显示K562R胞内伊马替尼药物浓度低于K562细胞(P＜0.01),流式细胞检测未发现P-gp表达.⑤374 bp的BCR/ABL基因序列分析未发现常规热点区域基因突变.结论 体外成功诱导出伊马替尼耐药细胞--K562R细胞.K562R耐药主要环节为胞内药物浓度降低,而胞内药物浓度降低与P-gp无关.耐药机理需要进一步研究.
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骨髓增生异常综合征P15INK4B基因甲基化及药物去甲基化作用
目的 检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者P15INK4B基因甲基化状况;探讨5-氮杂-2′-脱氧胞嘧啶(decitabine)和三氧化二砷(As2O3)对MDS患者细胞的去甲基化作用.方法 采用限制性内切酶联合PCR方法检测14例MDS患者P15INK4B基因甲基化,选择1例由MDS转化为急性白血病患者的外周血单个核细胞,分组分别加入decitabine和As2O3进行处理,分析甲基化程度变化情况.结论 低危组MDS患者(RCMD)均未发现P15INK4B基因甲基化,4例高危组MDS患者(RAEB)和4例 MDS-AL患者发现P15INK4B基因甲基化.经decitabine和As2O3处理后,MDS患者细胞的甲基化程度均降低50%左右.结论 MDS的发生与P15INK4B基因甲基化密切相关,decitabine和As2O3均对MDS患者细胞高度甲基化的P15INK4B基因具明显去甲基化作用.
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四川和安徽两省结核耐药危险因素分析
目的 了解四川和安徽两省继发性耐药结核患者产生的主要社会行为危险因素,为预防耐药性结核病的发生提供依据.方法 选取四川和安徽两省结核病防治所就诊的结核患者1489例,四川875例,安徽省614例.其中继发耐药结核患者356例.采用问卷调查患者可能导致继发性耐药结核的主要社会行为危险因素,并对其危险因素进行logistic回归分析.结论 四川和安徽两省继发耐药结核产生的主要社会危险因素为患者治疗时间长、督导化疗不彻底、患者治疗中依从性差、药品供应不满意、流动人口、治疗过程中有中断和治疗过程中经常饮酒.其比值比及可信区间分别为10.279(6.842～17.663)、 9.880(6.743～16.672)、 4.683(1.935～9.523)、3.859(1.584～9.218)、5.030(2.683～10.891)、4.938(2.162～9.982)和2.338(1.084～7.116).结论 加强对继发性耐药的社会行为危险因素的预防干预,对减少耐药结核的产生具有重要的意义.
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异种MMP-2 DNA疫苗联合小剂量顺铂治疗肿瘤转移的实验研究
目的 通过异种基质金属蛋白酶-2(MMP-2)DNA疫苗(c-MMP-2)联合小剂量的顺铂(DDP)治疗小鼠结肠癌肺转移,了解两者的协同治疗作用.方法 构建编码与人类及鼠类高度同源的鸟类MMP-2分子的重组真核表达质粒作为DNA疫苗.建立负载小鼠结肠腺癌肺转移动物模型,将模型小鼠分为生理盐水对照组(NS组)、DDP治疗组(小鼠腹腔注射DDP 100 μg/次,每周1次,连续2周)、c-MMP-2 DNA疫苗治疗组(小鼠后股肌肉注射1 mg/mL疫苗100 μL,每周1次,连续4周)、c-MMP-2 DNA疫苗联合DDP治疗组.在接种肿瘤细胞后第28 d断颈处死小鼠,取出肺并称其质量,检查并计数肺部＞3 mm的肿瘤转移灶,免疫组化法测肿瘤组织微血管密度,TUNEL法测凋亡小体,ELISA检测小鼠血清中的抗体滴度及类型.结论 联合治疗组肺部肿瘤转移灶个数(3±1.64)少于c-MMP-2组(10±3.49,P=0.041)、DDP组(45±4.07,P=0.032)及NS组(85±8.70,P=0.003),肺的质量(0.4±0.03) g少于c-MMP-2组[(0.8±0.06) g,P=0.044]、DDP组[(1.0±0.16) g,P=0.032]及NS组[(1.6±0.22) g,P=0.003],肿瘤组织中微血管密度低于对照组,Tunel法显示凋亡小体明显增多,ELISA法检测发现c-MMP-2治疗组和联合治疗组小鼠血清中有针对MMP-2的自身反应性抗体.结论 异种MMP-2 DNA疫苗与小剂量的顺铂联合治疗恶性肿瘤转移有协同抗肿瘤转移作用.
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实时荧光定量RT-PCR分析直肠癌PPARδ的表达及意义
目的 分析人直肠癌组织过氧化物酶体增殖物活化受体δ基因(PPARδ)的表达变化及其与直肠癌临床病理特征的关系.方法 选取手术切除的直肠癌标本86例,以癌旁正常粘膜为对照,采用实时荧光定量RT-PCR对PPARδ mRNA作定量分析.结果 48例(55.8%)直肠癌组织PPARδ表达上调,其中39例(81.3%)上调1.5～5.0倍, 5例(10.4%)上调10～20倍, 4例(8.3%)大于20倍, 与对照组相比,两组间差异无统计学意义(P=0.083).PPARδ的表达与直肠癌分化程度、病理类型及Dukes分期无相关性(P＞0.05).结论 直肠癌组织中PPARδ基因的表达无显著上调,并且与直肠癌分化程度、病理类型及Dukes分期无关.
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Ad.mda-7/IL-24的构建及在卵巢癌耐药癌细胞株中的感染表达
目的 利用Adeasy 1系统,构建并鉴定人mda-7/IL-24重组腺病毒(Ad.mda-7/IL-24).方法 从质粒pREP4-mda-7中扩增目的基因mda-7/IL-24,亚克隆至pAdTrack CMV穿梭质粒中,与pAdEasy 1质粒在E.coli BJ5183中进行同源重组为腺病毒载体质粒,线形化后转染293细胞进行包装扩增得到Ad.mda-7/IL-24.感染人卵巢癌泰素耐药株OVCAR-8/TR,Western-blot检测感染后MDA-7/IL-24蛋白表达.结果 重组腺病毒载体经测序、酶切电泳及感染后蛋白表达检测均表明成功构建Ad.mda-7/IL-24;病毒感染量为10 μL时,感染OVCAR-8/TR细胞可达100%感染率.细胞感染后可表达MDA-7/IL-24目的蛋白.结论 成功构建了人Ad.mda-7/IL-24,并能有效感染卵巢癌耐药细胞株,为进一步研究mda-7/IL-24基因在卵巢癌耐药中的作用奠定了基础.
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Angiopoietin-1在糖尿病鼠肾脏中的表达及意义
目的 探讨促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)在糖尿病鼠肾脏中的表达变化及其意义.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组(n=42)和模型组(n=42),建立链尿佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病模型,采用RT-PCR和免疫组化方法,连续多时点观察2组大鼠肾脏Ang-1 mRNA和蛋白表达变化,分析与肾重/体重、尿蛋白、肾小球体积和面积的相关性.结果 糖尿病组4和8周时肾脏Ang-1 mRNA表达上调(P＜0.05),24周时低于对照组(P＜0.05);免疫组化显示Ang-1主要表达于肾小球,糖尿病组4～24周肾小球Ang-1表达均高于对照组(P＜0.05),峰值在4～8周,12周后逐渐下调;Ang-1表达变化与肾重/体重、尿蛋白、肾小球体积和面积呈正相关(r=0.477;r=0.164;r=0.175).结论 糖尿病肾脏存在Ang-1异常改变,表现为早期表达上调,后期表达下调,Ang-1的改变参与了糖尿病肾脏血管结构变化.
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一种改良的皮肾通道法在肾结石PCNL中的应用研究
目的 探讨经皮肾镜取石术(PCNL)中建立皮肾通道(PCN)的改良方法.方法 以自行改进的经皮肾脏穿刺及引导扩张一体化PCN技术行经皮肾镜下治疗肾结石与用传统的PCN技术治疗肾结石进行比较.结果 改良PCN组PCN成功率为100%(53/53例),传统PCN组PCN成功率为87.5%(112/128例);两组在PCN成功率和损伤出血之间的差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 改良PCN法提高了经皮肾穿刺的准确性,减少了严重出血的并发症,提高了PCN的成功率和和安全性.
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癌症患者院内热带念珠菌感染的临床分析
目的 探讨恶性肿瘤患者并发热带念珠菌感染的危险因素及临床特点.方法 回顾性分析4471例恶性肿瘤患者中78例并发医院内热带念珠菌感染患者的临床资料.结果 4471例恶性肿瘤患者热带念珠菌感染率为1.74%,主要易感因素是患者年龄(≥50岁,P＜0.005)、性别(男性,P＜0.005)、原发疾病部位(肺癌,P＜0.001)、曾经接受化疗(P＜0.01)以及住院时间长(≥2周,P＜0.05);9～11月份更易发生热带链珠菌感染(P＜0.001).结论 减少易感因素、早发现、早诊断和及时治疗是可能减少热带念珠菌感染的有效措施.
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125I核素粒子植入治疗脑胶质瘤的临床初步研究
目的 研究CT引导立体定向粒子植入作脑胶质瘤放疗的临床方法和价值.方法 对16例脑胶质瘤进行了125I核素瘤间质内照射,其中肿瘤位于大脑额、颞叶深部5例;基底节区4例;枕叶深部3例;侧脑室内3例;半球内1例.9例为原发胶质瘤,7例为术后复发胶质瘤.根据患者的CT或MR影像资料,通过肿瘤治疗计划系统(treatment plan system, TPS)确定植入粒子数目.结论 对16例患者运用CT引导立体定向经皮颅骨钻孔粒子植入术均获得成功,住院时间5～20 d,平均12 d,无手术严重并发症,无死亡.12个月、18个月、24个月、30个月、36个月生存率93.75%、87.5%、81.25%、68.75%、56.25%.结论 125I粒子植入放疗是治疗脑深部胶质瘤的一种有效方法.
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持续输注瑞芬太尼-咪唑安定辅助硬膜外麻醉对腹式子宫全切手术中牵拉反应和遗忘的影响
硬膜外麻醉下行腹部手术的患者,常有紧张、焦虑和牵拉不适,易产生不良记忆,因此辅助应用镇静镇痛药物是必要的.我们通过静脉持续输注瑞芬太尼+咪唑安定,和常规静脉单次注射哌替啶+氟哌利多对照,旨在探讨其辅助硬膜外麻醉对腹式子宫全切手术中牵拉反应和遗忘的影响.
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CT在甲状腺相关眼病中的诊断价值
目的 研究甲状腺相关眼病(TAO)的CT扫描表现,探讨CT检查在TAO临床诊断和治疗中的应用价值.方法 观察30例正常人和30例经临床及实验室检查确诊为TAO患者的各60只眼眶的CT表现.结果 TAO患者眼外肌较正常人增大 (P＜0.05),其中内直肌常受累(76.6%),其次为下直肌 (66.7%)、上直肌(46.7%)和外直肌 (33.3%).TAO患者与正常人各眼外肌密度间比较差异无统计学意义(P＞0.05).CT检查尚可发现TAO患者其他较多影像学特征改变.结论 TAO患者CT检查的特征性表现主要为眼外肌肥大、眼球突出等.CT检查对TAO的诊断、鉴别诊断和治疗措施都很有帮助.
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眶上额下锁孔入路治疗鞍区病变
目的 分析总结眶上额下锁孔入路治疗鞍区病变的手术技术和效果.方法 应用眶上额下锁孔入路进行显微神经外科手术治疗鞍区病变41例,探讨手术过程、技巧及效果.结论 眶上额下锁孔入路治疗鞍区病变创伤小,手术区域暴露满意,41例鞍区病变均获得治愈,随访4个月以上未见复发.结论 眶上额下锁孔入路是治疗鞍区病变的较好手术入路.
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深低温停循环或低流量下钳闭颅内复杂动脉瘤的体外循环管理
复杂颅内动脉瘤由于其所在部位、生长方式、瘤体巨大或瘤颈过宽等原因,手术治疗相当困难、甚至无法手术,并且即使手术,在麻醉诱导、术中分离瘤体或血流动力学变化时易致瘤体破裂、大出血而危及患者生命或导致严重并发症[1].在常规麻醉方法下,手术成功率很低,本院2005年2月至4月施行了3例深低温停循环或低流量下颅内巨大基底动脉瘤钳闭术,现报道如下.
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内皮素1在豚鼠耳蜗外侧壁的分布及意义
目的 研究内皮素1在豚鼠耳蜗外侧壁的分布.方法 选体质量350～400 g的健康豚鼠进行实验,给予腹腔注射戊巴比妥麻醉,主动脉插管灌注200 mL生理盐水后,注入40 g/L多聚甲醛直到豚鼠颈部僵直,取出颞骨置于40 g/L多聚甲醛再固定,10% EDTA脱钙2周,入蜡包埋、切片.以兔抗人内皮素1多克隆抗体为一抗,采用免疫组化ABC法及图像分析方法检测内皮素1的表达情况.结论 耳蜗血管纹边缘细胞、螺旋凸细胞、外沟细胞、血管纹内毛细血管、基底细胞、螺旋韧带纤维细胞均见强弱不等内皮素1阳性反应.结论 内皮素1在耳蜗外侧壁广泛分布,可能对耳蜗内环境稳态有重要调节作用.
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不同桩核材料对后牙桩核冠牙本质应力影响的三维有限元分析
目的 比较四种不同桩核材料对后牙桩核冠牙本质应力大小与分布的影响,从而指导临床合理地选用修复材料.方法 通过磨片法结合数码相机获取断层图片的建模方法,建立上颌第一磨牙近中腭尖缺损的桩核冠有限元模型,分别分析中熔合金桩、复合树脂桩、汞合金桩,铸瓷桩修复后的牙本质应力大小及分布状况.结论 对于后牙桩核加全冠这种修复方式,不同桩核材料的选择对牙本质应力峰值、剩余牙本质的应力大小、根管内的应力分布无明显影响.高弹性模量的中熔合金桩核,汞合金桩核,铸瓷桩核改变了牙体正常的应力分布模式;复合树脂桩核对牙体正常的应力分布模式无明显改变.结论 在本实验条件下的正常牙合力作用下,选取不同桩核材料行桩核加全冠修复的后牙发生牙折的可能性无明显差别,且极少发生.
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茶碱对哮喘患者诱导痰基质金属蛋白酶及金属蛋白酶抑制剂水平的影响
目的 观察茶碱治疗前后哮喘患者诱导痰基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的变化,探讨MMPs/TIMPs比例失衡与哮喘的关系以及茶碱的作用机制.方法 选择支气管哮喘患者60例,随机分为茶碱治疗组和对照组,治疗组早餐及睡前各服缓释茶碱100 mg,吸入沙丁胺醇200 μg,每日3次;对照组吸入沙丁胺醇200 μg,每日3次,两组疗程均为8周.以诱导痰法收集两组患者治疗前后痰液标本,采用ELISA法测定痰中MMP-9、TIMP-1含量.结果 两组患者治疗前后痰中MMP-9水平改变无统计学意义.茶碱治疗组治疗前TIMP-1为(654.10±21.50) ng/mL,治疗2月后为(986.50±27.40) ng/mL,与治疗前和对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).茶碱治疗组的MMP-9/TIMP-1的比例在治疗2月后即明显下降,为0.67±0.08,与治疗前和对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).茶碱治疗组的有效率为73.3%,对照组为46.7%,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MMPs/TIMPs失调在哮喘发病中具有重要作用,茶碱对哮喘患者痰中MMP-9无明显影响,但能增加TIMP-1水平,此可能为茶碱治疗哮喘的作用机制之一.
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子痫前期患者血浆脂联素水平的变化
目的 了解血浆脂联素浓度与子痫前期的关系.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对46例正常妊娠、19例子痫前期及15例健康对照者的血浆脂联素浓度进行检测.结论 健康对照组妇女血浆脂联素浓度[(34.48±2.61) ng/mL]与正常妊娠早期[(34.45±3.02) ng/mL]及中期[(34.76±2.97) ng/mL]比较,差异无统计学意义(P＞0.05);正常妊娠晚期妇女血浆脂联素浓度[(38.10±1.01) ng/mL]高于健康对照组(P＜0.001)、妊娠早期(P＜0.001)及中期(P＜0.05),且与孕前体重指数(BMI)呈负相关(r=-0.65, P＜0.001).子痫前期患者血浆脂联素浓度[(33.40±1.88) ng/mL]低于正常妊娠晚期(P＜0.001),与孕前BMI无相关性.结论 正常晚期妊娠血浆脂联素浓度升高,而子痫前期患者血浆脂联素浓度降低,提示脂联素可能参与了子痫前期的发病机制.
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肾上腺原发性肿瘤的MRI表现及其病理学基础
目的 探讨肾上腺原发性肿瘤的MRI表现特征与病理学基础的关系.方法 回顾性分析经手术病理证实的原发性肾上腺肿瘤35例,观察其MRI表现特征及病理学特点, 并评价其关系.结论 皮质腺瘤表现为信号均匀的较小软组织肿块,病理上肿瘤均质,细胞富含类脂质.嗜铬细胞瘤表现为明显强化的信号不均匀软组织肿块,病理上肿瘤富含血管,多见坏死囊变.髓脂瘤表现为均匀、各序列高信号的肿块,病理上肿瘤含大量脂肪成分.皮质腺癌表现为周界不清的信号不均匀肿块,病理上肿瘤血管丰富,见出血坏死灶,有血管包膜浸润.节细胞神经瘤表现为信号不均的软组织肿块,病理上肿瘤神经细胞和纤维交织呈束状,见坏死囊变灶.浆细胞肉瘤为周界不清的不均匀信号软组织肿块,病理上瘤体由浆细胞构成,间质富含血管,见坏死灶.结论 肾上腺原发肿瘤的MRI表现特征与其病理改变有一定关系.
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基质金属蛋白酶及其抑制物-1与左心室重构的关系
目的 探讨基质金属蛋白酶家族(MMPs)2、3、9及其抑制物-1(TIMP-1)与心衰患者心肌重构、心功能损害的关系.方法 选择因二尖瓣关闭不全心脏病接受二尖瓣置换术的慢性充血性心力衰竭(CHF)患者39例,其中心功能Ⅱ级12例,Ⅲ级15例,Ⅳ级12例.正常对照38例(8例来自意外伤亡的器官捐献者).彩色多普勒超声心动图检测心功能参数,免疫沉淀法检测心肌组织MMP-2、3、9及TIMP-1蛋白表达.结果 瓣膜病所致心力衰竭患者心肌组织呈心肌重构的病理改变;心衰患者心肌组织MMP-2、3、9表达较正常人高,且随着心功能的恶化,其蛋白含量相对增高(P＜0.05或0.01); TIMP-1则相反.结论 MMP-2、3、9表达量的增高及TIMP-1的降低参与了心肌重构的病理过程,是影响心衰患者心功能的重要因素之一.
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一种在体标记成体大鼠室管膜/室下区细胞的方法
目的 研究正常成体大鼠侧脑室注射DiI标记室管膜/室下区(SVZ)细胞的方法.方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,均接受2 g/L的 DiI 10 μL右侧脑室注射.采用H33258染色和激光共聚焦显微镜检测DiI注射后6 h、12 h、24 h、36 h和48 h时左侧脑室壁的标记细胞以及标记组织厚度.结论 右侧脑室DiI注射后24 h,DiI标记细胞位于左侧脑室的室管膜层; DiI注射后48 h,DiI标记细胞限定于左侧室的管膜层和室下区.此外,左侧室管膜/中隔室下区(SVZspt)和室管膜/神经节隆起的生后对应物(SVZge)部位荧光标记组织的厚度分别在DiI注射12 h和24 h后维持于稳定水平,而且,在相应各时间点上,室管膜/SVZge部位荧光标记组织的厚度都厚于室管膜/SVZspt部位(P＜0.05).结论 2 g/L 的DiI 10 μL注射于正常大鼠侧脑室后24～48 h,可能仅标记室管膜/室下区细胞.
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一氧化氮光学生物传感器用于药物活性的考察
目的 研制一氧化氮(NO)吸光型生物传感器,并将之用于考察刺激巨噬细胞产生NO药物的活性.方法 以Al2O3/SiO2为载体,溶胶凝胶法固定细胞色素C(Cyt C),组装传感池,通过紫外分光光度(UV)法考察该传感池在酸化的细胞培养液中对NO的响应性能.测定含有γ-干扰素(IFN-γ)、脂多糖(LPS)、以及以上述溶液为阳性对照的硫酸海藻多糖、香菇多糖、甘露聚糖肽的细胞培养液中NO含量.结论 传感池抗干扰能力强,在酸化的培养液中,NO在20.0 μmol/L～180.0 μmol/L的浓度范围内线性关系良好(r＝0.9959),检测限为5.0 μmol/L,日内精密度(RSD)＝3.5%,日间RSD＝7.9%.三种培养液中的NO含量分别为(12.24±3.39) μmol/L、(8.51±0.19) μmol/L、(8.23±0.26) μmol/L.与传统Griess法比较两种方法差异无统计学意义.结论 该传感器法可以对细胞培养液中的NO进行半定量分析,作为药物活性初筛的一种新手段.
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骶前恶性副节瘤1例报告
患者,女,50岁,孕2产1+1.因下腹痛及腰痛6月,发现右附件包块1月,于2005年9月12日来院要求手术治疗.患者一般情况可,家族史无特殊.月经规则,量偏多,有痛经.入院监测生命体征平稳,血压17.9/12.3 kPa,查体心肺无异常,妇检示子宫前位,子宫如孕2月大,右附件区可触及一直径约5 cm大小的包块,实性,无压痛.
关键词： 恶性副节瘤 -
新生儿自发性乳糜胸1例报告
患儿男,出生后19 d,以"持续呼吸急促19 d"为主诉入院.G5P2、37周孕,出生重量3300 g,其母因瘢痕子宫行剖宫产,无宫内窘迫.生后即呼吸急促50～70次/min,哭闹时偶见唇周发绀.
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| 2019 | 01 |
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| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
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| 1999 | 01 02 03 04 |
