四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
黄芪对UUO模型大鼠肾脏肝细胞生长因子表达的影响
目的 动态观察黄苠(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾小管间质纤维化的拈抗作用和肝细胞生长因子(HGF)表达的影响.方法 SD大鼠随机分为假手术组(SOR组)、UUO组和UUO+AM治疗组(AM组).在造模后3、7、14 d处死动物,观察肾脏病理改变.采用免疫组化方法检测肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、HGF表达.实时荧光定量RT-PCR检测大鼠.HGF mRNA和α-SMA mRNA表达量.Western blot检测大鼠HGF及其受体C-met蛋白表达量.结果 与SOR组相比,各时间点UUO大鼠肾脏病理损害进行性加重,AM治疗后可明显减轻UUO大鼠肾小管损伤及肾间质纤维化程度(P<0.05).随着梗阻时间的延长,UUO大鼠肾组织α-SMA表达逐渐增加;HGF及其受体C-met呈现先升高后下降的表达规律,在UUO术后第7 d达高峰,此后大幅回落;与UUO组各对应时间点比较,AM治疗后可使肾组织中的HGF及其受体C-met表达显著增高,α-SMA表达明显降低(P<0.05).结论 AM可能通过诱导HGF及其受体C-met的表达,负性调控肾小管上皮细胞转分化,减轻肾间质纤维化.
-
早产患者TNF-α基因启动子-308位点多态性与胎盘TNF-αmRNA、母血TNF-α表达关系的研究
目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因启动子-308G→A多态性与早产遗传易感性的关系.方法 2004年9月至2005年2月对四川大学华西第二医院、四川省妇女儿童医院46例早产患者(根据胎盘病检有无绒毛膜羊膜炎分为早产感染组21例和早产非感染组25例)母血、胎盘组织和同期足月正常产50例母血、20例胎盘组织进行研究.应用RT-PCR技术测定胎盘组织中TNF-α mRNA的表达水平;采用ELISA法测定母血清TNF-α水平.根据前期研究对TNF-α基因启动子-308位点的基因分型结果,分析该位点不同基因型间早产患者胎盘TNF-α mRNA和母血TNF-α水平的差异,及其不同基因型与绒毛膜羊膜炎的相关性.结果 早产感染组孕妇胎盘组织中TNF-α mRNA及血清中TNF-α水平明显高于早产非感染组和正常足月产组(P<0.05);在早产患者中TNF-α基因启动子-308位点GA(AA)基因型与GG基因型比较,其对应的TNF-α mRNA、TNF-α表达均显著增加(P<0.05),且与绒毛膜羊膜炎的发生密切相关(OR=4.22,95%CI 1.197～14.896).结论 TNF-α基因启动子-308位点多态性与早产、感染性早产的遗传易感性有关,该位点突变引起TNF-α转录、翻译水平改变;TNF-α及其基因多态性可以成为早期预测、诊断早产和官内感染的指标.
-
抗心衰复方对豚鼠慢性心力衰竭的实验研究
目的 探讨抗心衰复方片(CTMC)对豚鼠慢性心力衰竭(CHF)心脏功能的影响.方法 采用皮下反复注射异丙肾上腺素6周,制作豚鼠心肌缺血型CHF模型.观察CTMC对CHF豚鼠血流动力学、脏器/体质量比、病理改变和血清心肌肌钙蛋白-I(cTn-I)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量的影响.结果 CHF动物模型制作成功;CTMC可明显降低左室舒张压和左室舒张末压,中、大剂量组尤为显著;可显著提高左室收缩和舒张大速率的绝对值,大剂量组更显著;明显减轻心肌细胞损伤和坏死;并可降低血清cTn-I、CK-MB含量,差异有统计学意义(P<0.01).结论 抗心衰复方片可改善CHF心脏的舒张功能和心肌细胞损伤,并呈现药物剂量依赖性.
-
体质量对去卵巢大鼠骨密度影响的初步探讨
目的 观察大鼠去卵巢后体质量变化对股骨骨密度的影响.方法 采用6月龄雌性Wistar大鼠40只,随机分为2组,一组切除双侧卵巢,另一组行假手术.术后监测体质量变化,喂养8周后处死,取股骨检测骨密度(BMD).结果 去卵巢后动物体质量增加明显.去卵巢组阴道细胞学无明显的动情周期,表现为低雌激素状态;子宫横切面积较假手术组显著缩小,且子宫内膜厚度、内膜上皮高度、内膜腺体面积百分比等形态计量指标均小于假手术组(P<0.05).去卵巢组的BMD、骨矿含量(BMC)均低于假手术组,但差异无统计学意义;大鼠单位体质量的BMC在去卵巢组明显降低(P=0.003).经多元逐步回归分析,BMC与第8周体质量正相关、体质量差负相关;标化BMC与体质量差负相关.结论 成功建立去卵巢后骨质疏松动物模型.去卵巢后大鼠一定体质量的增加可能部分减缓去卵巢所致骨量下降,但过度的体质量增加可能导致单位体质量BMC的下降,引起骨质疏松.
-
异烟肼对长期接受甲氨喋呤治疗的类风湿关节炎患者结核感染的预防作用
目的 评估应用异烟肼(INH)预防长期接受甲氨喋呤(MTX)治疗的类风湿关节炎(RA)患者结核感染的有效性及安全性.方法 遵循知情同意原则,将接受MTX治疗[0.1～0.3 mg/(kg·Week),大量不超过20mg/week]不超过6个月且无结核感染的RA患者作为纳入对象并分组.预防组患者83例予以INH 5 mg/(kg·d),大量不超过300 mg/d,清晨一次口服,疗程半年,MTX按原治疗原则用药.停用INH后仍使用相同剂量MTX,继续随访30个月.对照组患者118例仅接受MTX治疗(剂量范围同预防组),随访36个月,观察结核感染情况及MTX相关副作用.评价INH预防结核的效果及安全性.结果 预防组有77例患者完成INH治疗,6例由于INH、MTx相关副作用(4例,4.9%)或个人原因(2例)退出,未完成INH治疗.对照组中7例(6.2%)出现MTX相关副作用,5例因个人原因退出.与对照组比较,INH预防性治疗未增加药物副作用的发生率(x2=0.14,P>0.05).两组的结核发生率分别为1.3%和8.5%,对照组感染结核的机率是治疗组的6倍(x2=4.47,P<0.05).结论 使用INH预防长期接受MTX治疗的RA患者结核感染安全有效.
-
儿童急性淋巴细胞白血病单个核细胞转铁蛋白受体2表达及其意义
目的 研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿单个核细胞转铁蛋白受体2(TFR2)基因表达情况,分析其与儿童ALL不同预后因素的相关性.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应法测定56例新发ALL患儿和15例对照患儿骨髓或外周血单个核细胞TFR2相对表达量.结果 泼尼松敏感组患儿TFR2相对表达量(中位数为0.0848)显著高于泼尼松不敏感组(中位数为0.0126,P=0.038).低危组、中危组和高危组TFR2相对表达量的中位数分别为0.1677、0.0728和0.0125.差异具有统计学意义(P=0.003).初诊时外周血白细胞(WBC)计数WBC<50×109/L、(50～100)×103/L和≥loo×103/L 3组患儿TFR2相对表达量的中位数分别为0.0974、0.0294和0.0078,差异也具有统计学意义(P=0.013).另外,B细胞ALL,和T细胞ALL患儿TFR2相对表达量的中位数分别为0.0636和0.0065,B细胞型TFR2表达水平显著高于T细胞型(P=0.004).秩相关统计分析表明,ALL患儿单个核细胞TFR2表达量与初始外周WBC总数、外周血幼稚细胞比例、幼稚细胞绝对计数的秩相关系数分别为-0.398、-0.307、-0.421,具有负相关关系(P分别为0.003、0.022、0.001).结论 TFR2可能为儿童ALL一个新的分子生物学预后因素,在ALL患儿预后评估和指导个体化治疗方面可能具有临床应用价值.
-
神经胶质细胞生长因子对快速起搏所致猴心衰的保护作用及机制研究
目的 研究重组人神经胶质细胞生长因子(NRG)对快速起博所致猴心衰心肌收缩力的影响及给予重组人NRG后心肌细胞内葡萄糖转运蛋白1(Glut1)mRNA表达水平的变化.方法 成年雄性恒河猴24只,随机分为假手术组、心力衰竭组及NRG治疗组,每组8只.治疗组240次/min起搏7 d后,起搏状态下连续10 d·每天1次静脉注射重组人NRG 3 μg/kg,心力衰竭组给予同体积生理盐水.连续给药10 d结束后,测定左心室的大压力上升速度(LVdp/dtmax,)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室收缩末期压(LVsP)等血流动力学指标·提取左室心肌组织mRNA,采用RT-PER的方法分析PKB、Glutl mRNA的表达水平.Western Blotting测定心室肌磷酸化PKB蛋白含量.结果 心力衰竭组LVdp/dtmax、LVSP低于假手术组(P<0.05),LVEDP高于假手术组(P<0.05);NRG治疗组LVdp/dtmax高于心力衰竭组(P<0.05),LVSP有上升的趋势(上升了11%),LVEDP有下降的趋势(下降了39%).心力衰竭组PKB、Glutl mRNA表达水平均低于假手术组(P<0.05);治疗组PKB、GlutlmRNA表达水平高于心力衰竭组(P<0.05).治疗组磷酸化PKB蛋白水平比心力衰竭组上升了177%(P<0.05).结论 重组人NRG可能通过向上调节PKB、Glutl mRNA表达水平,改善缺血心肌能量供应这一机制来增强心肌收缩力,从而达到治疗心衰的目的.
-
CO2气腹对腹膜炎大鼠的肠道内毒素细菌移位的影响
目的 探讨不同程度CO2气腹对腹膜炎大鼠肠道内毒素细菌移位的影响.方法 采用PUCl8质粒载体大肠杆菌(JM109)示踪法,将质粒菌JM109定植于大鼠肠道后,腹腔内注入盐酸建立无菌的急性腹膜炎大鼠模型,48只大鼠随机均分为3组,分别为对照组、5 mmHg CO2气腹组、15 mmHg CO2气腹组.每间隔1 h抽股静脉血测内毒素含量;气腹3 h后,取门静脉血、肠系膜淋巴结作细菌培养,对耐氨苄青霉素菌株进行酶切分析及琼脂糖凝胶电泳;并测回肠黏膜及门静脉血中分泌型免疫球蛋白A含量.结果 气腹1 h后,15 mmHg CO2气腹组股静脉血内毒素含量开始显著升高(P<0.01),并随气腹时间延长而进行性升高;气腹3 h后,15 mmHg CO2气腹组门静脉血和肠黏膜SIgA含量明显低于对照组(P<0.01),肠道大肠杆菌(JM109)至门静脉血的移位率分别为0、25%、5O%,至肠系膜淋巴结的移位率分别为12.5%、25%、75%.结论 CO2气腹能够促进腹膜炎大鼠的肠道内毒素细菌移位,CO2气腹压为15 mmHg时作用更明显.
-
丹参酮ⅡA对NB4诱导的人脐静脉内皮细胞促凝活性的影响
目的 探寻丹参酮ⅡA(TanⅡA)对于急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)促凝活性(PCA)的影响.方法 将TanⅡA作用24、72、120 h的NB4细胞条件培养基(NB4-CM)或不同浓度TanⅡA与其对应的120 h NB4-CM共同作用HUVEC,并以ATRA、DMSO和RMPll640作为阳性、阴性和空白对照,收集HUVEC裂解液采用一期凝血法测定其PCA,采用改良发色底物法测定组织因子活性(TF:act).结果 ①TanⅡA作用72、120 h的NB4-CM有一定的升高内皮细胞PCA的作用,以120 hNB4-CM作用强,作用6 h明显,1.0 μg/mL的TanII A与0.3 μg/mL ATRA作用相当.②5.0 pg/mL的Tan ⅡA能明显降低其NB4-CM诱导的内皮细胞PCA,与0.3/μg/mL ATRA的差异无统计学意义.<5.0 μg/mL浓度的TanII A无此作用.③TanⅡA-120 h-NB4-CM和ATRA 120 hoNB4-CM均能升高HUVEC的TF:act,6h达峰值,且两者间无差异.TanⅡA 120 h-NB4-CM所诱导的HUVEC的TF:act 12h轻微降低,24 h回复到基础水平,而ATRA 120 h-NB4-CM所诱导的TF:act在6h达峰后,12h即明显下降,24 h亦降至基础水平.④加入1.0μg/mL TanⅡA后.内皮细胞TF活性在各时间点与未加药组无明显差异,而0.3/μg/mL ATRA在6 h可显著抑制其NB4-CM所诱导的内皮细胞TF活性升高,之后各个时间点无明显差异.结论 TanⅡ A在诱导NB4细胞分化过程中的条件培养基能升高人脐静脉内皮细胞PCA和TF活性,加入适当浓度的TanⅡA可降低这种作用;这些作用与ATRA作用相当.
-
靶向抗肿瘤耦联物苯丙氨酸氮芥-己二酸桥-偕二膦酸的骨靶向性研究
目的 合成一种双膦酸盐和亲骨核素为导向、化疗药物和β射线协同发挥作用的骨肿瘤靶向治疗系统,并验证其靶向性.方法 将苯丙氨酸氮芥与偕二膦酸盐耦联,再与153Sm鳌合,合成新的耦联物,并通过羟基磷灰石晶体吸附实验和荷瘤鼠体内分布显像实验,了解耦联物体内外的亲骨性能.结果 对合成的耦联物结构进行核磁共振波谱分析,得出的光谱数据符合药物合成的要求;耦联物在体外对羟基磷灰石具有良好的吸附性能,在小鼠体内放射性计数分布显示骨组织中的强度远远高于其它脏器,在3 h左右药物在骨组织中的浓度达到峰值.荷瘤裸鼠各个脏器中放射性计数在肿瘤组织中高,其次为骨组织,再次为性腺、脾、肺等脏器.结论 新合成的耦联物苯丙氨酸氮芥-己二酸桥-偕二膦酸符合原药的功能结构特征,核素153Sm标记的耦联物具有骨靶向性,并且对骨肿瘤区域有较好的亲和性.
-
心脏营养素-1对骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的作用
目的 观察心脏营养素-1(CT-1)是否能促进经诱导分化剂5-氮杂胞苷(5-aza)诱导的骨髓间充质于细胞(BMMSCs)分化为心肌样细胞,并研究其相关机制.方法 自成年大鼠骨髓中分离BMMSCs,分别以普通培养基(A 组)、加入含CT-1的培养基(B组)培养、经5-aza诱导后加入普通培养基(C组)及5-aza加入含CT-1的培养基(D组)培养.观察细胞形态的改变,并通过免疫组化分析分化后细胞表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的情况.电镜观察分化后细胞的超微结构及实时荧光定量检测a-actin、β-myosin heavy chain(ffMHC)、Nkx2.5、GATA4基因表达.结果 C、D组的BMMSCs在培养4周后均形成心肌样细胞形态,并且均表达eTnT D组BMMSCs分化的心肌样细胞形成了肌管样结构;D组α-actin、β-MHC、Nkx2.5、GATA4基因表达明显高于C组.结论 CT-1可能通过对GATA4、Nkx2.5基因表达的调控而促进5-aza诱导的BMMSCs分化为心肌样细胞.
-
荧光定量PCR法检测不同状态下铜绿假单胞菌int I 1基因的表达
目的 检测铜绿假单胞菌I类整合酶基因(int I l基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制.方法 对3株I类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA.采用荧光定量PCR(FQ-PCR) ,以细菌的16s rRNA为内参照,分别测定菌株SW07、R07和THl2的浮游细菌和生物膜细菌int I 1 mRNA的相对表达量,比较3株菌在两种状态下intI 1 mRNA的表达水平.结果 3株铜绿假单菌的生物膜细菌和浮游细菌都检测到int I l基因的表达.3株菌在两种状态下intI 1 mRNA的表达量不同,生物膜细菌inf I 1基因的表达水平较高,其中菌株R07、SW07和THl2的生物膜细菌int I 1 mRNA的表达量分别较浮游细菌高1.4、5.7和128倍.结论 在生物膜状态下,铜绿假单胞菌intI 1基因的表达上调,本实验结果提示整合子在生物膜细菌中可进行更加活跃的基因盒捕获和积累,整合子和细菌生物膜的形成是导致细菌对抗生素耐药的重要机制.
-
激活素A在心肌缺血后适应中的表达变化及意义
目的 观察激活素A在心肌缺血/再灌注损伤过程中的表达变化,分析其与羟自由基(.OH)、乳酸脱氢酶(LDH)之间的相互关系,并探讨缺血后适应对心脏的保护作用是否与激活素A表达变化有关.方法 健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注组及后适应组,每组10只.假手术组为分离冠状动脉降支(LAD),但不阻断;缺血组为阻断LAD 30 rain;缺血/再灌注组为阻断LAD 30 rain后再灌注1 h;后适应组为阻断LAD 30min后,接着复流30 s/阻断LAD 30 s,重复3次,再灌注1 h.实验完毕处死大鼠,取各组大鼠心肌组织,提取心肌组织蛋白,分别采用ELISA法、Fenton反应及生化比色法检测心肌组织中激活素A蛋白水平、抑制.OH能力及LDH活力.结果 与假手术组相比,缺血组、缺血/再灌注组及后适应组心肌组织的激活素A表达水平均明显升高,尤以缺血/再灌注组为;而与缺血/再灌注组相比,后适应处理可明显下调激活索A的表达水平C(343.05+25.8)μg/nag蛋白vs(470.61±1:33.1)μg/mg蛋白,P<0.05].心肌组织中激活素A表达水平与抑制·OH能力及LDH水平呈负相关(相关系数分别为r=-0.921,P<0.001;r=-0.915,P<0.001).结论 激活素A参与心肌缺血/再灌注损伤过程,而缺血后适应抑制激活素A的表达可能是其心脏保护作用的机制之一.
-
丙戊酸诱导耐药白血病细胞凋亡及其机理的研究
目的 观察丙戊酸(VPA)对白血病细胞尤其是耐药白血病细胞的体外抗肿瘤作用,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)水平及抗氧化酶系活性与VPA诱导细胞凋亡之间的关系.方法 采用体外细胞培养,通过MTT细胞活力测定,Caspase-3,8,9活性检测、细胞形态学观察、细胞周期分析及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,观察VPA对白血病细胞的抗肿瘤作用;通过检测VPA作用前后细胞内总谷胱甘肽(tGSH)与GSH水平、谷胱甘肽还原酶(GSH-Rd)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性改变,以及GSH合成酶抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)、GSH 前体N-乙酰-半胱氨酸(NAC)和过氧化氢酶(CAT)对VPA诱导凋亡的影响,分析谷胱甘肽-氧化还原(GSH-redox)系统在VPA诱导细胞凋亡中的作用.结果 VPA对所有受试细胞株均有增殖抑制作用,其IC50接近VPA抗癫痫有效血药浓度.VPA作用后细胞内Caspase-3,8,9活性增强,细胞出现凋亡形态学改变.VPA可使阿霉素耐药株K562/AO2及糖皮质激素(Gc)耐药株Jurkat细胞周期阻滞于Go/G1期,在VPA作用下,Jurkat和K562/AO2细胞内tGSH和GSH均降低,以GSH降低为主,GSH-Rd和GSH-Px的活性亦显著降低.NAC和CAT减弱VPA诱导的凋亡,而BSO增强VPA诱导的凋亡.结论 VPA抑制耐药白血病细胞增殖、诱导细胞周期阻滞与凋亡,这些作用与细胞内GSH-Rd、GSH-Px活性降低、GSH水平下调所导致的细胞内氧化应激反应激活有关.
-
乳腺癌组织中Glutl蛋白表达及其临床意义
目的 探讨乳腺癌组织中葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter-1,Glut1)的表达及其与细胞增殖活性和临床病理因素的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Glut1和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在80例乳腺癌组织、20例乳腺纤维腺瘤及20例普通乳腺增生组织中的表达水平,并分析它们之间的相关性.结果 Glut1在乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织中不表达;乳腺癌中Glut1阳性率58.8%(47/80),其中原位癌中阳性率45.0%(9/20),高分化浸润癌中50.0%(15/30),低分化浸润癌中76.7%(23/30);乳腺癌中PCNA阳性率75%(60/80),其中原位癌中65%(13/20),浸润癌中78.3%(47/60).Glut1与PCNA呈显著正性相关(r=0.742,P<0.01).Glut1在肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、雌、孕激素受体状态及组织学分级中表达差异有统计学意义.结论 Glut1蛋白过表达参与乳腺癌的发生、发展,与乳腺癌细胞增殖关系密切,可为不同治疗策略和判断预后提供依据.有望成为乳腺癌治疗新靶点.
-
微小病变型肾病综合征患儿肾组织HS结构分析
目的 探讨微小病变型肾病综合征(minimal change nephritic syndrome,MCNS)患儿肾脏组织硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)结构特点.方法 应用4种分别识别不同HS结构的抗-HS单克隆抗体:10E4、JM403、Hepssl和3G10,对13例MCNS患儿肾脏活检组织和5例正常肾组织进行间接免疫荧光染色,分析不同HS位点表达变化,同时用ELISA法测定MCNS患儿在活检时尿液HS浓度.结果 MCNS极期患儿肾脏10E4、JM403和Hepssl表达IOD值分别为42.89±14.90、30.13±8.10和38.67±10.68,均较正常肾组织(50.16±9.14、35.55±7.01和47.58±10.03)降低(P<0.05),MCNS缓解期患儿肾脏Hepssl表达(38.26±8.83)较正常组降低,JM403肾脏表达(43.21±6.78)却较正常组升高,10E4表达变化无统计学意义,MCNS激素依赖组患儿10E4、JM403和Hepssl.与正常对照组差异均无统计学意义;在3组MCNS患儿3G10肾组织表达与正常组相比无明显变化.MCNS患儿尿液HS浓度(257.17±52.27)/Lg/mL较正常对照组(172.77±54.50)μg/mL增高(P<0.01).结论 肾脏HS丢失可能与MCNS蛋白尿发生有关;而肾脏HS丢失原因可能是由于MCNS患儿肾脏HS结构异于常人,比较容易与呼吸道病毒发生结合.从而直接和/或间接导致肾脏HS表达降低.
关键词： 微小病变型肾病综合征 硫酸乙酰肝素 -
白细胞介素-1B基因启动子-31T/C和外显子5+3953C/T多态性与冠心病的相关性研究
目的 探讨白细胞介素-1B(interleukin-1B,IL-1B)基因启动子-31T/C和外显子5+3953C/T多态性与成都汉族地区冠心病(coronary heart disease,CHD)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测成都汉族地区100例CHD患者(CHD组)和144名健康人(对照组)的JL-1B基因启动子-31T/C和外显子5+3953C/T的基因型.结果 在成都汉族地区JL-1B基因外显子5+3953位点发现了CC和CT两种基因型.同时在JL-IB基因启动子-31位点发现了CC、TC、TT 3种基因型.IL-1B基因外显子5+3953位点C/T多态性在冠心病组和对照组的分布差异无统计学意义(P>0.05),而IL-1B基因启动子-31位点T/C多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P<0.01);等位基因频率的相对风险分析发现,T等位基因携带者患CHD的风险是C等位基因的Z.12倍(相对比值比(OR)=2.12,95%可信区间(CI);1.45～3.09].结论 IL-1B基因启动子-31位点T/C多态性可能是成都汉族地区CHD发病的遗传危险因索之一.
-
阿尔茨海默大鼠嗅球p38MAPK的表达
目的 观察阿尔茨海默(AD)大鼠嗅球p38MAPK的表达,探讨p38MAPK在AD病理改变发生中的作用机制.方法 采用大鼠侧脑室注射Aβ25-35建立AD动物模型,Y迷宫实验测定行为学变化,免疫组化染色法检测建模后4 d、7 d和14 d时AD组、生理盐水组、抑制剂组和抑制剂对照组p38MAPK在大鼠嗅球中的表达.结果 ①建模后7 d、14 d AD组大鼠行为学测试出现明显改变,学会训练次数(N)、完成所有反应中错误反应的次数(EN)及全天总反应时间(TRT)均较生理盐水组增加(P<0.05),抑制剂组较AD组N、EN和TRT均有明显改善.②AD组在建模后4 d,嗅球出现明显的p38MAPK表达,且随时间的延长表达增加(P<0.05),与生理盐水组比较,AD组p38MAPK阳性细胞数明显升高(P<0.01).抑制效组p38MAPK的表达在3个时间点,较AD组、抑制剂对照组均明显下降(P<0.01).结论 Aβ25-35可激活痴呆大鼠嗅觉中枢p38MAPK信号转导通路,p38MAPK可能参与了AD早期嗅觉障碍的形成过程.p38MAPK抑制剂SB203580能部分减弱A1325-35的神经毒性作用.
-
APEl在宫颈癌的表达及其与锎-252中子放疗预后的关系
目的 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)基因在官颈癌中的表达情况及其与临床病理和锎-252中子放射治疗预后的关系.方法 应用免疫组织化学法检测10例正常宫颈组织、15例子宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织、89例宫颈癌组织(接受锎-252中子刀放疗)中APE1的表达,并分析其与宫颈癌临床病理及患者预后的关系.结果 宫颈癌组织APE1表达水平明显高于正常宫颈组织和CIN病例(P<0.01).APE1在正常官颈组织和CIN 病例均呈胞核表达,宫颈癌组织中APE1呈胞核表达(59例)、单纯胞浆表达(8例)或核浆共同表达(22例).APE1 表达强度与宫颈癌FIGO分期、病理分级和淋巴结转移情况有关(P<0.05),与年龄和病理分型无关.APE1亚细胞定位情况与FIGO分期、病理分级有关(P<0.01),与淋巴结转移情况无关.生存分析显示在APE1核表达组(中位生存时间70.9月)和APE1低表达组(中位生存时间75.8月)的生存时间明显长于APE1浆表达组(中位生存时间57.8月)和APE1高表达组(中位生存时间56.5月)(P=0.025,0.001).结论 APE1胞质异位表达可能与宫颈癌的发生、发展相关,APE1亚细胞定位和表达水平对锎-252中子放射治疗宫颈癌的疗效有提示作用.
-
男性糖尿病患者25(OH)VD与骨密度等指标关系的研究
目的 探讨男性糖尿病患者25(OH)VD与骨密度及其它指标的关系.方法 纳入82例男性糖尿病患者,其中骨质疏松患者49例,非骨质疏松患者33例,检测其骨密度、血清中25(OH)VD水平及其它指标.结果 ①骨质疏松组与非骨质疏松组相比,25(OH)VD、睾酮(T)、硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)水平明显降低(P<0.05),抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRCAP-5b)明显增高(P<0.05),甲状旁腺激素(PTH)、尿白蛋白/肌酐(Ualb/Cr)有升高的趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05).糖化血红蛋白(HBAtlc)两组比较无统计学意义;②在骨质疏松组和非骨质疏松组,25(OH)VD水平与年龄未显示相关性,与病程呈负相关(P<0.05).两组中25(OH)VD均与股骨颈、Ward三角区T值、大转子T值、腰椎T值呈正相关(P<0.05),与T,DHEA-S也呈正相关(P<0.05).骨质疏松组25(OH)VD与PTH呈负相关(P<0.05),而非骨质疏松组25(OH)VD与PTH无相关.两组中25(OH)VD与B-ALP呈正相关(P<0.05),而与TRCAP-5b、HbAlc、Ualb/Cr 均未显示相关性.结论 25(OH)VD、T、DHEA-S降低可能是男性糖尿病骨质疏松的重要因素.
关键词： 25(OH)VD糖尿病骨质疏松 -
汽油尾气致大鼠肺组织氧化损伤机制的研究
目的 探讨汽油尾气对大鼠肺DNA损伤、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1(OGG1)表达和细胞超微结构的影响.方法 将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0 L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次,末次染毒24 h后处死动物,用彗星实验检测肺组织细胞中DNA单链断裂水平,免疫组化检测肺组织中OGG1的含量,并在电镜下观察各型肺细胞超微结构的变化.结果 在汽油尾气16.7和50.0 L/kg组,肺组织细胞的拖尾率明显高于溶剂对照组(P<0.05),并有随剂量增加而增加的趋势,但各剂量组尾长的增加均无统计学意义;而汽油尾气中、高剂量组OGGI蛋白水平明显增加(P<0.05);在汽油尾气50.0 L/kg组,肺组织各型细胞中的线粒体发生肿胀和空泡化,且线粒体数量明显减少.结论 汽油尾气可诱导大鼠肺组织DNA单链断裂、OGG1蛋白含量增加和线粒体的损伤.
-
地塞米松对原代培养胎盘绒毛滋养细胞11β-HSD2表达影响的研究
目的 探讨地塞米松(DEX)对原代培养的早产胎盘绒毛滋养细胞11β-羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)表达的影响.方法 采用酶消化法和组织块培养法进行早产胎盘原代绒毛滋养细胞培养、纯化和鉴定;用DEX(100 nmol/L)模拟两疗程糖皮质激素给药干预原代堵养的绒毛滋养细胞,荧光定量PCR和Western blot免疫印迹法检测滋养细胞11β-HSD2 mRNA及蛋白表达情况;此外在DEX干预的同时加入RU486(1 μmol/L),检测滋养细胞11μ-HSD2 mRNA和蛋白表达情况.结果 DEX干预原代培养滋养细胞,培养1 d后11β-HSD2 mRNA表达开始上升.第2 d和第3 d继续升高(P<0.05),第4 d改为无药物培养液后表达明显下降,第5 d～7 d重复给药后再次升高(P<0.05);在DEX干预的同时加入RU486(1μmol/L)共同作用,可见每天滋养细胞11β-HSD2蛋白和mRNA表达下降不显著(P>0.05).结论 重复给予DEX具有刺激原代培养的早产胎盘绒毛滋养细胞增加11β-HSD2蛋白和mRNA表达的作用}故早产胎盘滋养细胞可以通过词节11β-HSD2表达起到保护胎儿的屏障作用.
-
不同月龄大鼠海马组织中HIF-1α表达规律的探讨
目的 揭示低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在不同月龄大鼠海马组织中的表达规律,探讨HIF-1a在神经系统衰老过程中的作用.方法 应用尼氏染色和免疫组化技术观祭不同月龄组(3,18、24、30月)大鼠海马组织中不同区域神经细胞尼氏体及HIF-1α的表达情况.结果 ①随大鼠月龄的增大,海马组织中各区域神经细胞体积变大,排列稀疏,胞浆内尼氏体减少.②海马Cal、CA3区,随月龄增加,HIF-1a阳性细胞数增加,差异有统计学意义(P<0.05),其中由3月龄到18月龄、18月龄到30月龄增加更明显(P<0.01).结论 随着月龄的增大,大鼠海马组织中神经细胞蛋白质合成功能减弱,而HIF-1α的表达逐渐增强,推测HIF-1a可能在衰老过程中起一定的作用.
-
人参皂甙Rbl对转化生长因子-β1诱导的肾小管上皮细胞p47phox的表达及细胞外基质的影响
目的 探讨人参皂甙Rbl(G-Rb1)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK52E)氧化应激的作用及对细胞外基质(ECM)的影响.方法 将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白对照组,10 ng/mL TGF-β1刺激组,不同剂量的G-Rb1干预组(在10 ng/mL TGF-β1基础上分别加入10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL G-Rb1),40 ng/mL G-Rb1组,100 nmol/L NADPH氧化酶抑制剂DPI组.采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;应用免疫组化技术、Western blot检测NADPH氧化酶亚单位p47phox的表达;实时荧光定量PCR(RT-PCR)、酶联免疫吸附法观察细胞外基质主要成分胶原I(Col-I)和纤维粘连蛋白(FN)的变化.结果 与正常对照组相比,TGF-βI可显著增强NRK52E细胞内ROS水平和p47phox的表达,ColI和FN的含量也显著增加(P<0.05).G-Rb1和DPI明显抑制了TGF-βI诱导的细胞内ROS的产生和p47phox 的表达,同时降低了Col-I和FN的水平(P<0.0S).结论 TGF-βI可以诱导NRK52E细胞ROS和p47phox水平的升高,刺激细胞外基质成分Col-I和FN的形成.G-Rb1呈剂量依赖性地抑制了TGF-βI刺激的NRKSZE细胞内的ROS水平的升高和细胞外基质的增加.其作用机制可能与降低p47phox的表达有关.
-
中国广东潮汕地区汉族人对氧磷脂酶1(PONl)L55M基因多态性与冠心病伴高血糖的关系
目的 观察广东省潮汕地区汉族人群对氧磷脂酶1(PONl)L55M基因多态性与冠心病(CHD)合并空腹血糖升高(FHG)及2型糖尿病(T2DM)的相关关系,及与冠状动脉血管病变数和病变范围的相关关系.方法 284例受检者据空腹血糖和冠状动脉造影结果分正常对照组(90例)、CHD组(86例)、CHD+FHG组(62例)、CHD+T2DM组(46例),进行SNPs序列测定人选人群PONl L55M基因并分析.结果 广东地区汉族人群PONl L55M基因存在多态性,L等位基因频率为0.86.3种基因型(LL,LM,MM)在4组中无明显差异.L等位基因在冠心病病变血管数目和病变范围中无明显差异(x2=0.56,P:0.758;x2=0.11,P=0.743).结论 中国广东潮汕地区汉族人群中存在PONl L55M基因多态性,等位基因频率以L型为主.PONl L55M基因多态性与是否发生空腹血糖升高或糖尿病以及冠状动脉病变严重程度无明显相关性.
-
儿童髋关节滑膜唇皱襞嵌顿症的超声影像研究
目的 探讨儿童髋关节滑膜唇皱襞嵌顿症(LPEH)超声影像特征及其超声诊断价值.方法 ①采用双盲法,在32例儿童尸体髋关节上建立26侧滑膜唇皱襞嵌顿模型和38侧假模型并进行超声观察,计算超声对嵌顿滑膜唇皱襞显像的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值.②采用方差分析方法,比较21例LPEH患儿的21侧患髋、21侧健髋以及21例正常儿童42侧健髋3组之间的超声显像结果.结果 超声对尸体髋关节滑膜唇皱襞嵌顿模型的诊断敏感性、特异性分别为88%、84%,阳性预测值、阴性预测值分别为79%、91%.21例LPEH患髋关节组与其它2组髋关节超声结果比较显示:①患髋组均存在关节腔内积液,髋关节内下间隙积液较前间隙明显((12.50±4.04)mm vs(4.35±0.8)mm,P<0.053,内下间隙内见嵌顿滑膜唇皱襞呈稍强回声的占位性团块.长约(15.6±5.6)mm,宽约(8.9±7.8)mm;90%嵌顿的滑膜唇皱襞内未见血流信号;②患髋组股骨头软骨厚度无明显变化(P>0.05);关节囊前层及后层厚度分别与其它2组比较,差异无统计学意义;③患髋组股骨头形态结构及关节周围软组织回声无超声影像改变;④21例LPEH患髋经非手术治疗后,超声随访嵌顿滑膜皱襞及关节腔积液消失;⑤21例LPEH健髋组髋关节各解剖层次无超声显像异常改变.结论 超声检查对发现髋关节内下间隙内嵌顿的滑膜唇皱襞有较好的诊断价值;儿童LPEH患髋具有一定的超声影像学表现特征.
-
血管内皮细胞生长因子在女性生殖系统原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义
目的 探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)在女性生殖系统原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义.方法 应用实时荧光定量PCR和免疫组化技术分别检测女性生殖系统原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤中VEGF mRNA及其蛋白水平的表达情况,用CD34单克隆抗体标记肿瘤血管计算其微血管密度(MVD),分析VEGF表达与该肿瘤MVD、临床特征及预后的关系.结果 ①20例弥漫性大B细胞淋巴瘤中有17例(85.0%)VEGF mRNA表达上调,48例(48/56,85.7%)肿瘤细胞VEGF 蛋白表达阳性;②VEGF表达与该肿瘤MVD呈正相关(r=0.76,P:0.0170);③VEGF表达与该肿瘤的临床分期、B症状及血清乳酸脱氢酶(LDH)有关(r=0.77,P=0.044;r=0.58,P=0.023;r=0.69,P=0.017);④Cox多因素相关分析显示.年龄>60岁和VEGF阳性表达均为预后不良因素(P<0.05).结论 VEGF在女性生殖系统原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤中广泛表达,可能与该肿瘤的临床特征和预后关系密切.
-
非融合表达β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌的构建和性能研究
目的 构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究.方法 提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ 1.1480和pMG36e-lacZ wch9901,电转化乳酸乳球菌乳酸亚种MGl363.测定重组菌在不同培养时间和乳糖浓度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培养条件下的酶分泌率.结果 携带pMG36e-lacZ wch9901的重组乳酸乳球菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性达(16.95±0.09)U/mg pro,为基因初始菌的2.75倍;重组乳酸乳球菌培养24 h产酶达高峰;培养基含乳糖时,重组菌酶活测定结果表现为降低;重组乳酸乳球菌表达的β-半乳糖苷酶可分泌到培养基中,当培养基不含红霉素,而含20 g/L乳糖时,分泌率高,达(27.09±0.05)%.结论 获得了能非融合表达和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,可在此基础上进一步研制β-半乳糖苷酶活菌释放体.
-
高游离脂肪酸血症对心肌结构与功能的影响及其机制
目的 观察在肥胖/胰岛素抵抗状态下高游离脂肪酸(FFA)血症与心肌结构及功能的关系,并探讨其可能的分子发病机制.方法 4周龄雄性SD大鼠16只,随机分为2组,肥胖组(OB组)予高脂饲料喂养,对照组(NC组)予正常饲料喂养.行高胰岛素-正糖钳夹实验评价大鼠外周胰岛素敏感性,检测左心室大收缩速率(+dp/dtmax)、左心室大舒张速率(-dp/dtmax)及平均心肌细胞直径(MCD).检测血及左室心肌匀浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平以及心肌核转录因子kB(NF-KB)、I-kB、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达.结果 OB组存在明显胰岛素抵抗(P<0.05),MCD较NC组增大(P<0.01),心脏舒、缩功能均下降(P<0.01),血及心肌TG、FFA、AngⅡ浓度均较NC组升高(P<0.05),心肌iNOS、NF-kB表达增强(P<0.01)、I-kB出表达下降(P<0.01).心肌TG与血FFA呈正相关(r=0.80,.P<0.01).心肌FFA与心肌AngⅡ水平(r=0.74,P<0.05)、iNOS(r=0.66,P<0.05)及NF-kB表达(r=0.86,P<0.01)呈正相关.+dp/dtmax与心肌TG(r=-0.87,P<0.01)、AngⅡ(r=-0.52,P<0.05)、iNOS(r=-0.70,P<0.01)及NF-kB 表达(r=-0.57,P<0.01)均呈负相关.-dp/dtmax与心肌TG(r=-0.85,P<0.01)、AngⅡ(r=-0.82,P<0.01)、iNOS(r=-0.78,P<0.01)及NF-KB表达(r=-0.75,P<0.01)均呈负相关.结论 肥胖-胰岛素抵抗大鼠由于血中TG、FFA浓度升高,导致心肌异位脂质沉积.异位沉积的脂质有可能通过激活心肌RAS系统,并增强心肌NF-kB、iNOS的表达.从而引起心肌肥大、心肌细胞凋亡、心功能损害的发生.
-
青春期前苯甲酸雌二醇暴露对SD大鼠睾丸发育及功能的影响
目的 研究青春期前苯甲酸雌二醇(EB)暴露对SD大鼠睾丸发育及功能的影响.方法 21 d龄雄性SD大鼠,随机分为EB 0.1、100.0 μg/(kg·d)2个实验组(Aea和Aeb组)和1个对照组(AC组),于青春期前,即出生后第22 d(PND 22)实验组每日皮下注射相应剂量的EB,共14 d,对照组仅注射溶媒(玉米油).观察各组大鼠睾丸下降时间.于青春期晚期(PND 50)、性成熟后(PND 64)和成年期(PND 130)分批处死各组大鼠,称量睾丸质量,测定大鼠血清睾酮浓度,观察睾丸形态学改变以及PND 130大鼠附睾尾精子质量.结果 AC、Aea和Aeb组睾丸下降时间分别为出生后(27.00±0.89)d、(27.50±1.05)d和(43.17±1.72)d,其中Aeb组较AC组明显延迟(P<0.01).PND 50时,与AC组比较,Aeb组血清睾酮浓度明显降低(P<0.05),单侧睾丸质量减轻(P<0.01),生精小管发育较差、生精上皮中细胞数目减少、精子发生阻滞、间质细胞发育幼稚.PND 64时,与AC组比较,Aeb组单侧皋丸质量和睾丸组织形态学改变与PND 50时类似,但总体较PND 50时有所改善.PND 130时,与AC组比较,各实验组与对照组比较,单侧睾丸质量和睾丸组织形态学改变无明显差异,但Aeb组精子密度和精子活动率下降(P<0.05),a+b级精子比例降低(P<0.01).结论 青春期前小剂量EB暴露对SD大鼠睾丸发育及功能无明显影响,大剂量EB(100.0 μg/(kg·d)×14 d]暴露对大鼠睾丸发育及功能有明显的近期(PND 50和PND 64)和较远期(PND 130)毒性作用,该毒性作用随鼠龄增长而逐渐减退,其机制可能与间质细胞和支持细胞的发育及功能受损相关.
-
ARLTS1基因重组质粒对卵巢癌细胞株SKOV3生长和凋亡的影响
目的 探讨Ras超家族成员ARLTS1基因对卵巢癌细胞株SKOV3生长及凋亡的影响.方法 构建真核表达质粒pCMV-Tag 3B-ARLTSI,并转染卵巢癌SKOV3细胞株,采用RT-PCR技术和Western blot方法检测ARLTS1基因转染组、空载体pCMV-Tag 3B转染组和未转染组中ARLTS1 mRNA及蛋白表达水平,用MTT及流式细胞仪检测各组细胞生长、周期及凋亡率等生物学行为的变化,Western blot检测细胞easpase-3和bcl-2蛋白表达水平的变化.结果 真核表达质粒pCMV-Tag 3B-ARLTSI转染SKOV3细胞后,经PCR和Western blot证实转染成功.ARLTSI转染SKOV3细胞后,细胞生长明显受抑(P<0.05).流式细胞术检测发现ARLTS1基因转染组与空载体转染组及未转染组细胞相比,S期细胞比例明显增多(P=0.035和0.011,细胞凋亡率(36.7%)显著高于另两组细胞(P均<0.001).ARLTS1基因转染组细胞中caspase-3和bel-2蛋白表达水平分别下降34.9%和47.7%,与未转染组细胞相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 ARLTS1基因转染后能抑制人卵巢癌细胞SKOV3的生长,调控SKOV3细胞周期,可能通过caspase途径促进肿瘤细胞凋亡·
-
聚乙二醇化重组人白细胞介素-6大鼠皮下注射的药代动力学研究
目的 研究聚乙二醇化重组人白细胞介素-6(PEG-rhIL-6)单次皮下注射后在大鼠体内的药代动力学过程和组织分布.方法 用同位素示踪法,碘标记PEG-rhIL-6,采用三氯乙酸(TCA)沉淀法检测放射性浓度,3P87软件判断房室模型和计算各种参数,并检测125 I-PEG-rhIL-6皮下注射大鼠后不同时同的血药浓度,组织分布以及排泄.结果 3、20和40μg/kg 3个剂量的125 I-PEG-rhIL-6皮下注射大鼠后,吸收半衰期(tl/2 Ka)分别为10.44、11.25和11.37 h;消除半衰期(t1/2,Ke)分别为20.47、21.53和19.77 h,达峰时间(Tpeak)分别为20.51、21.96和21.30 h;PEG-rhIL-6在大鼠体内的组织分布主要在血液;PEG-rhIL-6主要通过尿液排出体外.结论 PEG-rhIL-6在大鼠体内的药代动学过程基本符合线性药动学特征,血药浓度-时间曲线符合-房室模型.经PEG修饰的rhIL-6在大鼠体内的半衰期明显延长.
-
自杀未遂抑郁症患者海马代谢的磁共振质子波谱研究
目的 探讨自杀未遂抑郁症患者海马的磁共振质子波谱(1H-MRS)的代谢特点.方法 应用1HMRS成像系统检测24例自杀未遂抑郁症患者和24名健康对照双侧海马N-乙酰天冬氨酸(NAA)、胆碱复合物(Cho)、肌醇(ml)和肌酸(Cr)等4种代谢产物,分别计算海马双侧NAA/Cr、Cho/Cr以及ml/Cr比率,作为反映NAA、Cho和ml水平的评估指标.分析患者组和对照组之间代谢指标的组间差异;利用组内代谢指标双侧比较,结合单侧化指数分析,就海马代谢的左右对称性进行研究.结果 自杀未遂抑郁症组左侧海马NAA/Cr(1.50±0.20)明显低于对照组(1.80±0.16),差异具有统计学意义(P<0.05).对照组左侧海马NAA/cr明显高于右侧(1.45±0.15),差异具有统计学意义(P<0.05);自杀未遂抑郁症组左右两侧海马NAA/Cr的差异没有统计学意义(P>0.05).单侧化指数分析显示,对照组双侧海马NAA/Cr具有不对称性(LINAA/Cr=1.09±0.03,P<0.05),未发现自杀未遂抑郁症组双侧海马NAA/Cr不对称性(P>0.05).未发现自杀未遂抑郁症组任何代谢指标与疾病病程、发作次数以及疾病严重程度(HAMD17评分)的相关性(P>0.05).结论 自杀未遂抑郁症患者左侧海马代谢下降,双侧海马代谢不对称性消失.
-
多功能转录因子CTCF重组质粒构建及其表达鉴定
目的 构建人CTCF cDNA全长及N端、Zn指、C端3个片段的原核融合表达载体,纯化融合蛋白并进行鉴定.方法 以编码CTCF全长序列的质粒为PCR模板,分别构建GST融合表达重组质粒pGEX-4T-2-CTCF,pGEX-4T-2-CTCF-N,pGEX-4T-2-CTCF-Zn,pGEX-4T-2-CTCF-C,转化大肠杆菌BL21,酶切、测序鉴定;优化IPTG诱导表达条件,并对亲和层析纯化的GST融合蛋白CTCF,CTCF-N,CTCF-Zn,CTCF进行Far-West-ern blot鉴定.结果 重组质粒经双酶切和测序鉴定证实构建成功.GST融合蛋白CTCF,CTCF-N,CTCF-Zn,CTCF-C均在大肠杆菌中成功诱导表达,融合蛋白经亲和层析纯化获得纯化蛋白.各纯化蛋白经SDS-PAGE和Far-Western blot鉴定,均为诱导表达蛋白质.结论 成功构建了GST融合表达CTCF,CTCF-N,CTCF-Zn,CTCF-C的重组质粒,对融合蛋白表达条件进行了优化.获得了高效表达的GST融合蛋白.
-
成年和青少年Beagle犬下颌骨植入微型支抗种植体的组织学比较研究
目的 探讨成年和青少年Beagle犬下颌骨植入的微种植体不同愈合时间的组织学差异,为青少年患者应用微植体支抗提供指导.方法 6只成年Beagle犬和6只青少年Beagle犬,选择下颌第四前磨牙(P4)和第一磨牙(M1)牙根间间隙,M1近远中牙根间间隙为植人部位,共植入48颗微种植体.愈合3周和12周后,对含微种植体的标本进行组织学检查,并进行骨整合率计算.结果 微种植体在观察期无松动、脱落.微种植体与周围组织有良好的生物相容性.周围骨组织中破骨细胞和成骨细胞的功能活跃,骨整合率随着愈合时间的延长而增高.青少年Beagle犬微种植体-骨整合率术后3周低于成年Beagle犬的微种植体-骨整合率;但术后12周却高于成年Beagle犬的微种植体-骨整合率.结论 青少年Beagle犬的骨质量低,但生长发育快,经过12周愈合,能弥补青少年Beagle犬早期骨结合率的不足.
-
经后上腰腹膜后引流及灌洗治疗胰腺感染性坏死(附45例报告)
胰腺及胰周坏死组织继发感染是急性胰腺炎(AP)的严重并发症,也是导致其高死亡率的原因.目前,国内外学者一致认为AP继发胰腺感染性坏死(IN)的手术治疗是必要的,但术式并不统一[1-3].我院采用经后上腰腹膜后引流术及术后灌洗治疗胰腺感染性坏死45例,取得较满意疗效,报道如下.
关键词： 急性胰腺炎 胰腺感染后上腰腹膜后引流术灌洗 -
炎性乳腺癌18例临床分析
炎性乳腺癌(IBC)少见,占乳腺癌的1%～5%,临床表现乳房增大、皮肤红斑水肿、橘皮样变,疾病进展迅速,恶性程度高,生存期短,预后差[1].本研究通过回顾性分析2000年4月至2006年4月我院收治的IBC病例,总结了IBC的临床病理特点及诊治方法,现报道如下.
-
组合式半骨盆置换术患者的围手术期护理
目的 探讨骨盆恶性肿瘤半骨盆切除、组合式半骨盆+全髋关节置换术后患者的围手术期护理方法.方法 2004年9月至2007年5月采用半骨盆切除、组合式半骨盆假体+全髋关节置换术治疗骨盆恶性骨肿瘤8例.其中软骨肉瘤4例,平滑肌肉瘤2例,骨肉瘤1例,恶性骨巨细胞瘤1例.外科分期:IB期6例,ⅡB期2例.对患者进行围手术期全面护理干预,包括围手术期心理护理、术前准备、术后监护及早期康复护理.结果 本组患者均如期出院,无特异性并发症发生.随访10～32月,平均15月,1例术后16月死于恶性肿瘤扩散转移,7例存活.半年随访时患者行走基本正常,髋关节有较满意活动度,生活质量满意度较高.结论 骨盆恶性肿瘤半骨盆切除、组合式半骨盆+全髋关节置换术后患者的全面围手术期护理,能够有效预防患者发生各种并发症,对促进患者康复,提高术后生活质量具有积极意义.
-
186例OMOM胶囊内镜临床应用分析
目的 评价OMOM胶囊内镜对不同症状患者的应用价值,探讨检查过程中出现的问题.方法 对我院2006年1月至2007年12月间行OMOM胶囊内镜检查的186例成年患者临床资料进行回顾性分析.结果 186例患者完成胶囊内镜检查185例,共行185次检查,阳性检出率73.5%(136/185).130例因消化道出血和50例因腹痛、腹泻就诊患者分别发现小肠病变82例(63.1%)和31例(63.3%).其中小肠黏膜下隆起及新生物形成、炎性病变为常见.66例老年人和119例青中年患者小肠病变阳性发现率和病变类型差异无统计学意义(P=0.21,P=0.08).5例和31例患者胶囊内镜停滞于胃或小肠内至电池耗竭,且胃或小肠有阳性病变者胶囊到达升结肠平均时间明显长于阴性表现者(P=0.038).检查过程中患者无任何不适.结论 OMOM胶囊内镜对不同症状就诊的各年龄段成年患者均具较好诊断价值,安全性高、依从性好.建议检查前对患者进行适当评估,采取相应措施提高检查质量.
-
影像学检查在甲状旁腺腺瘤定位诊断中的价值比较
目的 比较单独使用核素显像、超声、CT、磁共振(MR)检查以及核素显像联合超声检查在甲状旁腺腺瘤及并发甲状腺结节时对腺瘤定位诊断的价值.方法 回顾性分析经手术及病理证实的43例甲状旁腺腺瘤患者进行的影像学检查结果,所有患者均接受核素显像和超声检查,其中10例行CT检查,8例行MR检查.在并发甲状腺结节的13例患者中,均行核素显像和超声检查.结果 核素显像、超声、CT和MR定位甲状旁腺腺瘤的敏感度分别为:90.7%,67.4%,50.0%和37.5%.核素显像联合超声检查定位甲状旁腺腺瘤的敏感度为97.7%.而并发甲状腺结节的13例患者中,核素显像、超声和二者联合检查的敏感度分别为92.3%,46.2%,100.0%.结论 各种影像学检查方法中,核素显像诊断甲状旁腺腺瘤的敏感度高.核素显像与超声相联合应用似乎没有增加诊断的敏感性.同样,在并发甲状腺结节的患者中,核素显像的敏感度要高于超声检查.因此核素显像应该作为定位甲状旁腺腺瘤的首选方法.
-
经食管超声监测心血管术中肾血流的应用研究
目的 探讨心血管术中经食管超声监测肾血流变化的可行性.方法 60例择期行心血管手术的成年患者,分别于体外循环前、体外循环中和停体外循环后.经食管超声采集肾脏二维和多谱勒血流速度图像,检测、计算各个时间点的左肾血流参数.随机抽取10例患者的超声图像,由两人分别在手术当日和术后6月重测左肾血流,计算组内和组间肾血流测量偏差及重测信度.结果 51例患者测得左肾动脉主干血流速度和血管内径,成功率为85%.经食管超声测量左肾血流的组内和组间测量偏差均小于10%,重测信度良好(组内相关系数为0.694～0.997).左肾动脉内径为3.9～4.4 mm,肾动脉平均血流速度27～34 cm/s,左肾血流量205～302 mL/min.结论 经食管超声监测左侧肾血流的可重复性良好,可能成为在心血管术中监测肾血流的有效手段.
-
雾化吸入布地奈德和泼尼松龙静脉用药治疗老年COPD急性加重期的对比研究
目的 观察布地奈德雾化吸入对比静脉用甲基泼尼松龙治疗老年慢性阻塞性肺病(COPD)急性加重期的疗效、安全性和经济成本.方法 60例老年中重度COPD急性加重期患者随机分为布地奈德组(28例)和泼尼松龙组(32例),分别给予布地奈德混悬液雾化吸入2 mg/次(1次/6 h)和甲基泼尼松龙静滴40 mg/次(每天1次).其他治疗相同.记录治疗后第1、3、5、10 d临床症状评分和FEV1/预计值、P02、PC02、副反应和成本费用.结果 ①治疗后10 d SGRQ生活质量评分布地奈德组下降了9.8分(P<0.05),泼尼松龙组下降11.4分(P<0.05),两组间差异无统计学意义.②治疗后10 d FEV1/预计值布地奈德组和浚尼松龙组分别上升了6.72%和8.30%(P<0.05)(1 mmHg=0.1333 kPa),PaO2分别上升7.0 mmHg和8.0 mmHg(P<0.05),PaCO2分别下降7.3 mmHg和8.1 mn-tHg(P<0.05).③短期副反应布地奈德组主要为声嘶,泼尼松龙组为血糖升高及消化道出血.④两组患者住院时间,需要辅助通气的比例,成本费用差异均无统计学意义.结论 大剂量布地奈德雾化吸入治疗老年中重度COPD急性加重期与静脉用泼尼松龙疗效一致,全身副反应减轻,短期治疗费用无明显增加.
-
大鼠胰岛β细胞分离与原代培养方法探讨
目的 探索胰岛B细胞分离纯化方法和适宜的原代培养条件.方法 正常Wistar大鼠,胶原酶消化及网筛过滤初步纯化胰岛,双硫腙染色及葡萄糖刺激实验鉴定胰岛及其活性.胰岛以胰蛋白酶和DNA酶消化成单细胞悬液,在2.8 mmol/L葡萄糖条件下,用荧光激活流式细胞分选(FACS)β细胞.免疫组化法及葡萄糖刺激实验鉴定分选的β细胞及其活性,所分选β细胞置于不同浓度葡萄糖和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)50μmol/L浓度的Ham's F-10培养基中培养24 h,观察不同浓度葡萄糖及IBMX对β细胞活性的影响.结果 可获(550±95)个胰岛/只大鼠,活性良好.FACS后,可得约5688个β细胞/只大鼠,回收率(93.69±1.26)%,纯度(85.5±1.24)%.原代培养24 h后,10.0 mmol/L及16.0 mmol/L葡萄糖中β细胞活性较高,死亡和凋亡也较少.结论 胰岛的单细胞悬液,在外界葡萄糖浓度为2.8 mmol/L时可以FACS对β细胞进行分选纯化;原代培养24 h后,在外界葡萄糖浓度10.0～16.0 mmol/L时,β细胞有较高存活率和活性.
-
激光捕获显微切割联合SELDI蛋白质芯片筛选肺腺癌早期诊断标志蛋白
目的 探讨应用激光显微切割(LCM)联合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片(SEL,DI-TOF-MS)及模式识别分类技术-支持向量机(SVM)筛选肺腺癌标志蛋白的可行性.方法 将6例新鲜肺腺癌组织标本及其配对的4例正常肺组织制备8μm厚度冰冻切片,改良HE染色;用LCM技术选择性获取同质腺癌细胞和配对正常肺组织细胞.应用PBSⅡ+型SELDI-TOF-MS分析仪(IMAC芯片)分析腺癌及其配对正常细胞的蛋白质表达谱,比对差异点;应用SVM筛选并验证候选标志蛋白的判别效能.结果 平均每个LCM帽子的激光点数约4000 shots,获得了同质性>95%的肿瘤细胞和正常细胞.比较腺癌和配对正常细胞之间的SELDI谱图,共筛选出84个蛋白峰.将差异明显的10个蛋白峰作为候选标志蛋白.和正常组织相比,6种蛋白在腺癌中呈低表达,4种蛋白在腺癌中呈高表达.差异有统计学意义(P<0.05).初步筛选出3191 m/z蛋白峰作为腺癌诊断标志蛋白.结论 LCM联合SEIDI蛋白质芯片技术有可能筛选出敏感性高、特异性强的肺腺癌标志蛋白;该技术将为肺腺癌早期诊断研究提供新的强有力的工具.
-
重组人白介素-22生物学活性检测方法研究
目的 建立重组人白介索-22(IL-22)生物学活性的检测方法.方法 将pSTAT3-TA-Luc质粒与pcDNA3.1质粒共转染HepG2细胞,经G418筛选出稳定转染的HepG2/STAT3细胞株.用重组人IL-22刺激细胞,定量检测荧光强度确定IL-22的活性.通过正交实验确定佳检测条件,观察此方法的重复性和特异性,并进行方法对比.结果 佳检测条件为细胞密度4×105/mL,加重组人IL-22刺激4h.加入萤光素酶底物50μL.本方法检测结果为半数有效量(ED50)=16.89 ng/mL,变异系数(RSD)=7.09%.中和抗体实验证实其特异性好.与ELISA法比较.该方法稳定性更好,耗时少且价格更便宜.结论 选择萤光素酶为报告基因,将报告基因的检测与细胞的转录诱导机制相结合,构建了生物活性检测细胞株,建立了IL-22活性检测方法.
-
慢性淋巴细胞性白血病伴泛发性带状疱疹1例报告
患者,男,64岁,因"右胸背部簇集性水疱伴疼痛10 d,全身水疱3 d,"入院.4年前患者被确诊为"慢性淋巴细胞性白血病(小B细胞型Ⅲ期)",住院13 d好转,院外长期以环磷酰胺(剂量不详)、强的松15 mg qd维持治疗,病情平稳.
关键词： 慢性淋巴细胞性白血病 泛发性带状疱疹 -
库欣综合征合并严重全身播散结核1例报告
患者,女,35岁.因"面部、躯干部进行性肥胖8+年,反复皮肤瘀斑、溃疡伴下肢浮肿3+月"入院.
-
阴道癌新辅助化疗后全阴道切除及阴股部皮瓣阴道成形术1例报告
患者,女,41岁,因"阴道分泌物增多伴恶臭半年,加重3月"入院.妇科检查:阴道左侧壁及后壁见一菜花样肿物,边界不清,累及全阴道;宫颈下唇粗糙,距病灶约1cm;子宫前位,正常大小,活动,无压痛,双附件区未扪及异常;三合诊阴道左侧组织增厚.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
