中山大学学报(医学科学版)杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보(의학과학판)
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泛素水解酶22siRNA对宫颈癌CD133+宫颈癌干细胞增殖和侵袭的影响
[目的]采用USP22 siRNA对宫颈癌CD133+CaSki宫颈癌干细胞进行基因治疗,观察其对USP22含量和对增殖侵袭能力的影响,并对其分子生物学机制进行初步探讨.[方法]流式分选获得CD133+ CaSki宫颈癌干细胞,分为USP22组、阴性对照(NC)组、空白对照组(MOCK)组.采用western blot法比较各组细胞USP22蛋白的含量,MTT法检测3组细胞的增殖能力,Transwell法检测3组细胞的侵袭能力,荧光素酶报告基因实验检测3组细胞Wnt/β-catenin信号通路的活性.[结果]采用流式细胞术分选CD133阳性细胞后CaSki细胞CD133阳性率为(96.87±5.31)%,显示流式分选宫颈癌干细胞成功(P<0.05).Western blot检测结果显示,USP22组CD133+ CaSki细胞中USP22蛋白表达量明显降低.MTT结果显示USP22组细胞增殖能力明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.05).Transwell实验结果显示USP22组CD133+CaSki细胞侵袭能力明显受到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05).荧光素酶报告基因实验结果显示,USP22组Wnt/β-catenin信号通路的转录活性明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05).[结论]USP22 siRNA有降低CD133+ CaSki宫颈癌干细胞内Wnt/β-catenin信号通路活性的作用,进而可以实现对宫颈癌干细胞增殖和侵袭功能的抑制,该治疗方法有望成为宫颈癌基因治疗的新手段.
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高频电刺激卒中后抑郁大鼠小脑顶核对下丘脑外侧区神经元放电及氨基酸类递质的影响
[目的]通过观察高频电刺激卒中后抑郁(PSD)模型大鼠小脑顶核(MCN)对下丘脑外侧区(LHA)神经元放电及氨基酸类递质的影响,来探讨电刺激MCN治疗PSD的机制.[方法]将60只SD雄性大鼠随机分为对照组20只,缺血性卒中组20只,PSD模型组20只.应用行为学测试评定抑郁的行为学改变;应用细胞外单位记录观察高频电刺激MCN对LHA神经元放电的影响;脑内微透析收集LHA脑脊液,结合高效液相色谱(HPLC)检测氨基酸类递质的变化.[结果]高频电刺激MCN,对照组、缺血性卒中组及PSD模型组大鼠LHA神经元的反应均以抑制性为主,且平均放电频率均较刺激前明显下降(P<0.01);高频电刺激MCN,LHA内谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)水平较刺激前明显增加(P<0.01).[结论]高频电刺激MCN可抑制LHA神经元的电活动,增加LHA内Glu和GABA的水平,其抑制LHA神经元的效应可能是通过小脑-下丘脑直接纤维投射实现.
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α7nAChR激动剂对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其分子机制
[目的]探讨α7烟碱乙酰胆碱受体(α7 nAchR)激动剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其分子机制.[方法]培养出生2~3d大鼠心肌成纤维细胞(CF),取传代2~4代细胞,分为①空白对照组(control);②模型组(AngⅡ10-7 mol/L);③ACh预处理组:ACh+ AngⅡ组(ACh 10-4 mol/L+ AngⅡ10-7 mol/L);④α7nAChR激动剂组:α7nAChR激动剂+AngⅡ组(PNU-282987 5×10-6 mol/L+ AngⅡl0-7 mol/L);⑤α7nAChR拮抗剂组:ACh+甲基牛扁碱柠檬酸盐(MLA)+ AngⅡ组(ACh 10-4 mol/L+ AngⅡ10-7 mol/L+MLA 1×10-6 mol/L).干预24 h后,应用CCK-8试剂盒检测CF的增殖能力,western blot检测胶原蛋白Ⅰ、α-SMA、α7烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核中p65蛋白表达;Real-timePCR检测α7nAChR的mRNA表达.[结果]AngⅡ干预24h,CF增殖显著提高,胶原蛋白Ⅰ、α-SMA、核中p65蛋白的表达明显升高,α7nAChR的mRNA和蛋白水平均表达降低;Ach、α7nAChR激动剂预处理后抑制CF增殖,胶原蛋白Ⅰ、α-SMA和核中p65蛋白的表达降低,α7nAChR的mRNA和蛋白水平均表达升高;Ach+MLA预处理,CF增殖再次提高,胶原蛋白Ⅰ、纤维化因子α-SMA、核中p65蛋白的表达再次明显升高,α7nAChR的mRNA和蛋白水平均表达降低.[结论]α7nAChR激动剂抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成,其机制可能与NF-KB信号通路有关.
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Exendin-4对苯肾上腺素诱导的心肌肥厚的影响及作用机制
[目的]探讨胰高血糖素样肽-1类似物exendin-4对苯肾上腺素诱导的心肌肥厚的影响及作用机制.[方法]用exendin-4、exendin9-39及Compound C预处理无血清饥饿状态的原代心肌细胞30min后,予以苯肾上腺素共培养24h,再以Q-PCR检测心肌细胞内肥厚标志物ANP,BNP,3-MHC的mRNA水平,Image-Pro Plus软件测量心肌细胞表面积,免疫荧光技术观察心肌细胞形态的变化及Western-Blotting检测相关信号通路分子的改变.[结果]exendin-4处理能够显著减轻苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥厚标志物的表达及心肌细胞面积的增大(P<0.05),GLP-1R受体特异性拮抗剂能抑制exendin-4的抗心肌肥厚作用(P<0.05).exendin-4处理能明显上调AMPK的蛋白磷酸化水平及下调Erkl/2蛋白磷酸化水平(P<0.05),但不能改变p38蛋白磷酸化水平.使用AMPK抑制剂Compound C能明显抑制exendin-4处理的效应(P<0.05),且能抑制mTOR及p70S6K蛋白磷酸化(P<0.05).[结论]exendin-4通过与GLP-1R相互作用发挥其抗心肌肥厚作用,且Erkl/2信号分子及AMPK/mTOR/p70S6K信号通路参与exendin-4抗心肌肥厚过程.
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西罗莫司洗脱支架对气管支架内再狭窄的作用
[目的]评价西罗莫司洗脱支架的可行性、安全性,明确其对兔子气管支架内再狭窄的作用.[方法]将16只新西兰白兔分为实验组(n=8)和对照组(n=8),实验组横向切开兔气管,置入自制西罗莫司洗脱支架后闭合气管.对照组同等条件下置入裸金属支架.分别于术后2、4周使用超细气管镜观察气管支架内肉芽组织生长情况.术后第4周处死所有动物,取气管标本,HE染色后进行组织学观察.[结果]支架内肉芽组织厚度(μm)实验组(813±236)小于对照组(1578±508)(P=0.004),气管支架区炎症反应程度实验组(平均秩次4.93)少于对照组(平均秩次10.07)(P=0.014).[结论]西罗莫司洗脱支架对兔子气管支架置入后引起的肉芽组织生长及炎症反应有一定程度的抑制作用,是一个安全有效的新型药物洗脱支架,有潜在的临床应用价值.
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miR-29a促进小鼠子宫内膜的蜕膜化
[目的]探讨微小RNA29a(miR-29a)在小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)蜕膜化中的作用.[方法]收集孕第1~9天(D1~ D9)的小鼠子宫,通过实时定量PCR(qRT-PCR)的方法检测小鼠子宫组织中miR-29a的表达;构建去除卵巢及其甾体激素的处理模型,观察甾体激素对miR-29a表达的影响.采用雌二醇(E2)和孕酮(P4)对分离培养的小鼠子宫内膜基质细胞进行蜕膜化处理,并通过瞬时转染的方法下调miR-29a的表达,分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,采用qRT-PCR检测催乳素相关蛋白(dPRP)mRNA的表达,Western blot法检测细胞周期蛋白D3 (cyclin D3)、孕酮受体(PR)蛋白的表达.[结果]在小鼠妊娠第1~5天,子宫组织中的miR-29a表达量较低,随着蜕膜化的进程(妊娠第6~9天),miR-29a的表达量均显著性增加(与妊娠D1相比);在去除卵巢及其甾体激素的处理模型中,一旦给予雌孕激素刺激,miR-29a的表达量显著增加;在小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化过程中,qRT-PCR结果显示dPRP mRNA的表达以及miR-29a的表达随着蜕膜化时间的延长逐渐升高(与24 h相比),Western blot法显示蜕膜化标志分子cyclin D3、PR的表达也随着蜕膜化时间的延长逐渐升高;转染下调miR-29a后,蜕膜化标志分子及miR-29a的表达也相应下降.[结论]妊娠早期miR-29a表达于母胎界面,且受子宫内膜蜕膜化的影响,说明miR-29a具有促进子宫内膜蜕膜化的作用.
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多重损伤法建立大鼠宫腔粘连模型及其对子宫内膜LIF及整合素αvβ3的影响
[目的]建立一种稳定的大鼠宫腔粘连(IUA)动物模型,为深入探讨宫腔粘连的发病机制及治疗提供基础.[方法]40只健康雌性SD大鼠随机分为对照组(n=10)及造模组(n=30);造模组内再随机分为A1、A2及A3三个亚组(每组n=10),造模组刮宫后,行子宫缺血再灌注,宫腔灌注脂多糖溶液损伤子宫内膜.A1、A2、A3组动物分别于建模后1、2、3个动情周期收集子宫组织,各组动物均于动情期获取子宫标本,行HE和Masson染色,免疫组织化学检测子宫内膜LIF及整合素αvβ3,动态观察子宫内膜病理变化过程,并对损伤后3个动情周期子宫内膜的腺体数目和纤维化面积比率,内膜LIF及整合素αvβ3蛋白的表达水平进行统计学分析.[结果]子宫内膜再生受损,造模组A1、A2、A3组大鼠子宫内膜腺体数目分别为3.22±1.21、3.91±1.71、4.12±1.65,均低于对照组8.13±2.31,差异均有统计学意义(P<0.05),各造模组间差异无统计学意义(P>0.05).造模组A1、A2、A3组大鼠子宫内膜纤维化面积比率分别为0.63±0.05、0.76±0.08、0.79±0.07,均高于对照组0.27±0.04,差异有统计学意义(P<0.05),各造模组间差异无统计学意义(P>0.05).造模组A1、A2、A3组大鼠子宫内膜LIF蛋白MOD值分别为0.278±0.031、0.293±0.036、0.306±0.036,均低于对照组0.389±0.041,差异有统计学意义(P<0.05),各造模组间差异无统计学意义(P>0.05).造模组A1、A2、A3组大鼠子宫内膜整合素αvβ3平均光密度(MOD)值分别为0.268±0.035、0.291±0.038、0.301±0.043,均低于对照组0.397±0.036,差异有统计学意义(P<0.05),各造模组间差异无统计学意义(P>0.05).[结论]采用机械损伤、缺血再灌注及局部感染多重损伤法可以建立稳定的大鼠宫腔粘连动物模型,对子宫内膜容受性造成一定程度的负面影响.
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上调miR-100降低宫颈癌细胞侵袭和迁移及顺铂耐药性
[目的]在宫颈癌Hela、Siha细胞中上调miR-100后,研究细胞侵袭及迁移功能及顺铂耐药性变化并探讨其机制.[方法]将miR-100 mimic通过lipomax试剂转染至宫颈癌细胞Hela、Siha中,细胞主要分为两组:NC组,为空白对照;mir100组,为上调miR-100后的细胞.transwell法观察细胞侵袭性,划痕实验观察迁移性;WB测定上皮间质变相关蛋白E-Cadherin、Snail、Vimintin及MMP2、uPA的表达;CCK8法测定顺铂耐药性.[结果]①两系宫颈癌细胞上调miR-100后,细胞的侵袭、迁移性降低;②上调miR-100后的宫颈癌细胞中上皮相关分子E-Cadherin表达上调,间质表型分子Snail、Vimintin表达下调,MMP-2表达无差异,uPA表达下降;③不同浓度顺铂作用(P< 0.001)及是否转染mir-100 siRNA (P< 0.001)对细胞存活率的改变均具有显著统计学意义,且浓度因素与处理因素间相对独立;在Siha细胞中得出相同结论(P< 0.001).HelaNC、Hela 100细胞株顺铂IC50(μmol/L)分别为:8.19±0.34、5.38±0.47,SihaNC、Siha 100的IC50分另为8.86±0.92、6.19±0.23,P< 0.05.[结论l miR-100在宫颈癌细胞Hela及Siha中通过降低上皮间质变过程起抑制侵袭和转移的作用,该功能可能与uPA的改变有关.上调miR-100可降低宫颈癌细胞对顺铂的耐药性.
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FGF21在小鼠非酒精性脂肪肝病程中的变化及与SREBP的相关性
[目的]探讨成纤维细胞生长因子(FGF21)在小鼠非酒精性脂肪肝病程中肝组织和血清中的变化及其与胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的相关性,探讨其中的可能机制.[方法]分别给予C57BL/6小鼠素食和高脂饮食喂养1、9、18周,Western blot和实时荧光定量RT-PCR检测肝脏组织FGF21和SREBP的表达,并分析二者的相关性;ELISA法检测小鼠血清的FGF21水平,分析血清FGF21水平与肝组织FGF21的蛋白和mRNA水平的相关性.[结果]高脂饮食喂养至9周时,小鼠肝脏的大体外观呈典型脂肪肝表现,至18周时HE染色可见肝细胞内大量的脂质颗粒聚集.与素食喂养小鼠相比,小鼠肝组织FGF21 mRNA水平在高脂饮食喂养至9周和18周时明显升高(均P<0.05),与高脂饮食的时间呈正相关(r=0.952,P=0.000)并同时与SREBP mRNA水平正相关(r=0.725,P=0.000).而与素食喂养小鼠相比,小鼠肝组织FGF21蛋白在高脂饮食喂养至9周和18周时明显降低(P<0.05),SREBP蛋白表达则呈相反的趋势.血清的FGF21水平,与素食喂养相比,在高脂饮食喂养至9周和18周时明显升高(均P<0.05),与高脂饮食的时间呈正相关(r=0.944,P=0.000),与肝组织的FGF21蛋白水平负相关(r=-0.704,P=0.000),与FGF21 mRNA水平正相关(r=0.910,P=0.000).[结论]在小鼠脂肪肝的逐渐进展中,肝组织FGF21 mRNA水平升高,蛋白水平降低,血清水平升高,并伴随SREBP的表达升高,提示肝脏中FGF21转录合成增加同时分泌亦明显增加,并与肝脏脂质合成及沉积密切相关.
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HAS-2在乳腺癌中的表达及临床意义
[目的]探讨透明质烷合酶2(HAS-2)在乳腺癌及癌旁组织中的表达差异及与其他临床病理指标的相关性,并分析其阳性表达与生存数据的关系.[方法]收集中山大学附属第三医院2000年6月至2003年6月间行乳腺癌手术的存档蜡块120例,病理证实为浸润性导管癌,设为实验组,对照组收集癌旁组织标本53例(距肿瘤>2 cm).采用免疫组化法检测120例乳腺癌组织(实验组)及53例癌旁组织(对照组)中HAS-2的表达情况,比较两组HAS-2表达率的差异,以及实验组HAS-2的表达与其他临床病理指标的相关性.统计学分析采用SPSS20.0软件进行,计数资料比较采用卡方检验,生存分析采用Kaplan-Meier法,生存率比较采用Log-rank检验,同时采用COX比例风险回归模型进行多因素分析.[结果]乳腺癌组HAS-2的阳性表达率显著高于癌旁组织组(45.83% vs.20.75%,P=0.002).实验组HAS-2表达水平与淋巴结转移(P<0.001)及Ki-67表达(P< 0.001)呈密切相关性,与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、ER、PR、Her-2表达等的差异无统计学意义.Kaplan-Meier法生存分析显示,HAS-2蛋白表达水平高的乳腺癌患者预后较低表达水平的患者差,差异有统计学意义(P=0.023).Cox回归分析结果表明,淋巴结转移、TNM分期、Ki-67表达是判断乳腺癌患者预后的独立因素,而其他参数包括HAS-2并未达到统计学差异.[结论]HAS-2在乳腺癌组织中的表达水平较癌旁组织中明显升高,HAS-2在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移呈正相关,且与肿瘤增殖指标Ki-67呈正相关,HAS-2高表达的患者预后较差,表明其可能促进乳腺癌的发生发展,并预示着乳腺癌细胞增殖速度较快,预后欠佳.
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短效促性腺激素释放激素激动剂在冷冻周期移植中的应用价值
[目的]比较不同冷冻周期方案(人工周期和自然周期)囊胚移植后1d应用短效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)对妊娠结局的影响.[方法]回顾性分析2013年1月至2014年12月在我院行冷冻囊胚移植的患者657个周期,移植失败周期≤2次,月经周期规律,年龄在22~40岁之间,基础FSH水平小于10 U/mL,移植至少一个优质囊胚,且移植囊胚总数≤2个.根据冷冻周期方案分为4组,自然周期囊胚移植后1d应用1次GnRH-a 0.1 mg(A组:79例);人工周期囊胚移植后1d应用1次GnRH-a 0.1 mg(B组:228例);自然周期囊胚移植后1d不用GnRH-a 0.1 mg(C组:84例);人工周期囊胚移植后1d不用GnRH-a 0.1 mg(D组:266例).[结果]4组患者年龄、体质量指数(BMI)、基础FSH、内膜厚度以及移植囊胚数量均无统计学差异,4组的临床妊娠率分别为72.15%、66.23%、59.52%及62.78%,自然周期囊胚移植后1d应用1次GnRH-a 0.1 mg妊娠率明显高于不用GnRH-a 0.1 mg组,并有统计学差异,人工周期囊胚移植后1d用和不用GnRH-a 0.1 mg对妊娠结局没有影响.[结论]在移植失败周期≤2次、年龄<40岁、基础FSH<10 U/mL、进行冷冻囊胚移植的优质患者人群,自然周期囊胚移植后1d应用1次GnRH-a 0.1 mg可明显提高妊娠率,而人工周期无此优势.临床医生应掌握药物使用适应证,为患者高效助孕提供基础.
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二步胚胎移植在反复种植失败中的临床应用价值
[目的]探究二步胚胎移植在反复种植失败中的临床应用价值.[方法]回顾性分析2013年7月至2015年7月因既往体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败至本生殖中心再次IVF的患者资料,进行二步胚胎移植的有359例(二步移植组),单纯移植第3天胚胎的362例(D3移植组),单纯移植第5天胚胎的101例(D5移植组).其中,二步胚胎移植和单纯移植第3天胚胎中各有110个和130个周期患者既往有3个或3个以上IVF失败周期.[结果]①对于既往有IVF失败的患者,二步移植组的胚胎种植率、临床妊娠率与D3移植组、D5移植组相近(20.5% vs 23.2% vs 28.2%、47.1%vs 49.7%vs44.6%,P> 0.05).(②对于反复种植失败患者,二步移植组的胚胎种植率和D3移植组相近(19.2% VS 19.4%,P>0.05),而临床妊娠率稍高于D3移植组,但差异无统计学意义(44.5% vs 38.5%,P> 0.05).[结论]对于反复种植失败患者,二步胚胎移植有可能提高IVF的胚胎种植率和临床妊娠率.
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NADPH氧化酶p22phox亚基基因His72Tyr与脂联素基因启动子-11391G/A多态性的交互作用以及与大肠癌及其分化程度的关系
[目的]探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p22phox亚基基因His72Tyr与脂联素基因启动子-11391G/A多态性的交互作用以及与大肠癌及其分化程度的关系.[方法]选择我院2009年7月至2014年12月收治的大肠癌患者668例,分为高分化组、中分化组、低分化组、未分化组各162例,以162例健康体检者作为对照组,各组在年龄、性别、民族、籍贯和生活习惯方面无显著性差异,以上述各组患者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析了NADPH氧化酶p22phox亚基基因His72Tyr和脂联素基因启动子-11391G/A多态性.[结果]His72Tyr(TT)基因型和-11391G/A (AA)基因型频率分布分别为50.62%和50.00%(高分化组)、64.20%和64.81%(中分化组)、69.75%和69.75%(低分化组)、76.54%和77.16%(未分化组)及22.84%和22.84%(健康对照组),上述基因型频率在高分化组、中分化组、低分化组、未分化组组与对照组之间有统计学差异(P均< 0.01).His72Tyr(TT)基因型者患大肠癌的风险显著增加(ORa高=3.46;ORa中=6.06;ORa低=7.79;ORa未=11.02).-11391G/A (AA)基因型者患大肠癌的风险也显著增加(ORa高=3.38;ORa中=6.22;ORa低=7.791;ORa未=11.41).基因突变的协同分析发现His72Tyr (TT)/-11391G/A(AA)基因型者在高分化组、中分化组、低分化组、未分化组与对照组中的分布频率分别为39.51%、54.32%、59.88、67.90%和11.73%,经x2检验有显著性差异(P<0.01).His72Tyr (TT)/-11391G/A (AA)基因型者患大肠癌的风险显著增加(ORa高=5.72;ORa 中=12.09;ORa低=16.55;ORa未=26.93).His72Tyr (TT)和-11391G/A (AA)基因型之间存在超相乘模型的交互作用(高分化至未分化组OR1*2均大于OR1×OR2).[结论]NADPH氧化酶p22phox亚基基因His72Tyr (TT)和脂联素基因启动子-11391G/A (AA)基因型均是大肠癌的易患因素,基因多态性的交互作用增加了大肠癌的发病风险.
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应用个体化3D模型分析肾动脉狭窄与肾动脉弯曲程度的相关性
[目的]建立患者个体化肾动脉3D几何模型,研究肾动脉弯曲程度与肾动脉狭窄的关系.[方法]临床收集15例单侧肾动脉狭窄病例,狭窄侧肾动脉及对侧非狭窄肾动脉的计算机断层扫描血管造影(CTA)数据,共30支肾动脉,其中15支狭窄肾动脉,15支非狭窄肾动脉.采用曲率与迂曲度参数来反映动脉的弯曲程度,使用MIMICS 16.0建立患者个体化肾动脉3D模型,并测得肾动脉主干的大曲率,弯曲度与长度,分为狭窄组与非狭窄组,进行同一个体的两侧肾动脉解剖学参数配对比较.[结果]建立了患者个体化肾动脉3D模型,在单侧肾动脉狭窄的病例中,狭窄组肾动脉大曲率(cur1)与非狭窄组肾动脉大曲率(cur2)之间的差异有统计学意义(P<0.01);狭窄组肾动脉主干迂曲度(tor1)与非狭窄组肾动脉主干迂曲度(tor2)之间的差异有统计学意义(P<0.01);狭窄组肾动脉主干起点至大曲率处的距离(len1)与狭窄组肾动脉主干起点到狭窄动脉狭窄处的距离(len3)之间有相关性(相关系数为0.7);狭窄肾动脉主干起点至大曲率处的距离(len1)与非狭窄肾动脉主干起点至大曲率处的距离(len2)之间没有统计学差异(P>0.05).[结论]肾动脉狭窄与肾动脉弯曲有相关性.对同一患者,肾动脉狭窄倾向发生于动脉弯曲度大的肾动脉.对于具体的患者及时发现狭窄位置与进展,对未来预测血管疾病显示出潜在的价值.
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短时受精后提早剥离颗粒细胞对体外受精的影响
[目的]研究在人体外受精过程中提早剥除颗粒细胞对受精和发育的影响.[方法]对本中心行短时受精(5 h)的53对夫妇纳入研究,当其精卵孵育5h之后,将所用卵子平均分为2组(5h组和19h组),分别于受精5h和19 h时剥除颗粒细胞.观察两组中同一批卵子受精情况并用荧光原位杂交(FISH)技术分析多原核胚胎中原核(PN)来源.[结果]5h组和19 h组两组之间的正常受精率(两原核率)、单原核率和未成熟卵率相似,差异均无统计学意义,然而多原核率在5h组明显高于19h组[(10.9±12.4)%vs.(4.5±7.6)%,P=0.001].同时在5h组中正常受精卵子原核的直径在受精后19 h时明显大于19h组的正常受精卵子原核的直径[(24.27±2.20) μm vs.(20.90±3.14)μm,P=0.0001].培养至第3天时两组的可利用胚胎率和优质胚胎率相似,差异无统计学意义.FISH的结果显示,两组多原核胚胎中原核的Y染色体/X染色体的比例为0.533~ 0.547,理论上更接近于多精受精.[结论]提早剥除颗粒细胞不影响人胚胎的体外发育,但是可能会影响原核的发育并导致体外受精过程中多精受精比例的增加.
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妊娠期高血压疾病孕妇孕中期血脂代谢研究
[目的]研究孕中期正常妊娠和妊娠期高血压疾病患者血脂及血脂蛋白的代谢特点,为妊娠期高血压疾病患者提供早期预测指标.[方法]回顾性分析2013年1月至11月在中山大学附属第一医院住院分娩的1 762例孕妇,其中妊娠期高血压疾病组77例,正常血压对照组1685例.分析比较两组孕妇孕24~28周甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、载脂蛋白(apo)A1、B、E,及脂蛋白α(Lp(a))的代谢特点.[结果]妊娠期高血压疾病组孕妇血脂检测时体质指数(BMI;25.38±3.17 vs 23.76±2.74,P< 0.001)高于对照组.妊娠期高血压疾病孕妇孕中期TG水平明显高于对照组[(2.48±1.11) mmol/L vs (2.12±0.77) mmol/L,P=0.007],而LDL-C[(3.08±0.88) mmol/L vs (3.32±0.84)mmol/L,P=0.018]和HDL-C水平[(1.73±0.38) mmol/L vs (1.85±0.34) mmol/L,P=0.004]均明显低于对照组.比较apoA1,apoB,apoE,Lp(a)两组无明显差异.Logistic回归显示,孕妇BMI[OR =1.172,95%CI(1.082-1.271),P< 0.001]和TG水平[OR=1.395,95%CI(1.083-1.796),P=0.010]是妊娠期高血压疾病的危险因素.以孕龄、BMI、TG、LDL-C的联合预测因子作为检验变量绘制ROC曲线,其ROC曲线下面积(AUG)为0.706.[结论]孕中期BMI和甘油三脂是妊娠期高血压疾病的危险因素,其联合预测因子对妊娠期高血压疾病的发病有预测价值.
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牙周非手术治疗对动脉硬度和血清sICAM-1的影响
[目的]肱踝脉搏波传导速度(baPWV)和踝臂指数(ABI)是评价动脉硬度的理想指标.本研究拟探讨牙周非手术治疗对中重度牙周炎患者baPWV、ABI和可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)的影响.[方法]选择单纯中重度牙周炎患者98例,随机分配至实验组(n=49)进行牙周非手术治疗;对照组(n=49)进行龈上洁治术.分别在治疗前2周和治疗后3个月测量牙周指标、baPWV、ABI和血清sICAM-1等.[结果]牙周治疗后3个月,实验组baPWV和sICAM-1与治疗前显著减低(P< 0.001),且明显低于对照组(P< 0.05);ABI较治疗前有所升高,但差异不具有统计学意义(P>0.05).实验组baPWV与牙周探诊深度PD变化量呈正相关(r=0.858,P<0.001).[结论]牙周治疗有助于改善动脉硬度和降低血清sICAM-1水平,对降低心血管风险具有一定的作用.
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十二指肠乳头旁憩室影像表现及与单纯性胆管炎、胰管炎关系的探讨
[目的]探讨十二指肠乳头旁憩室(PAD)与单纯性胆管炎、胰管炎的影像特点及相关性.[方法]应用CT/MR多平面成像(MPR)、大密度投影(MIP)以及MRCP等技术回顾性分析89例十二指肠乳头旁憩室患者影像特点及其中15例由十二指肠乳头旁憩室所致的单纯性胆管炎、胰管炎影像特点,根据其临床资料进行分类.[结果]89例PAD患者中46例属于乳头缘型,27例属于乳状上型,4例属于乳头下型,12例属于乳头水平外侧型.其中有15例单纯性胆管炎、胰管炎,其中乳头缘型12个,乳头上型1个,乳头水平对侧型1个,乳头下型1个,乳头边缘型PAD引起单纯性胆管炎、胰管炎几率明显高于其它非边缘型,其差异有统计学意义(P<0.05).[结论]十二指肠乳头旁憩室是胆胰疾病重要病因之一,利用多排螺旋CT后处理功能及MRCP对十二指肠乳头旁憩室及相关胆胰疾病的诊断具有重要价值.
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亚甲基四氢叶酸还原酶多态性对结直肠癌患者化疗预后的影响
[目的]观察结直肠癌患者亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C多态性与化疗后无进展生存期的相关性.[方法]收集经病理学确诊的Ⅳ期结直肠腺癌患者共81例,接受标准的FOLFOX6方案或XELOX方案化疗,化疗前抽取患者外周血,采用DNA测序的方法检测MTHFR基因C677T和A1298C多态性,比较不同基因型化疗后的无进展生存时间,并分析各种因素和预后的相关性.[结果]81例结直肠癌患者中,MTHFR677 CC、CT、TT基因型分别为:54.3%、41.9%、3.7%;CC型和CT/TT型中位PFS分别为11.4月和13.8月,P=0.046.MTHFR1298 AA、AC、CC基因型分别为:62.9%、34.5%、2.5%,AA型和AC/CC型化疗中位无进展生存分别为13.2月和11.7月,差异无统计学意义,P=0.127.其他因素如性别、年龄、肿瘤部位等同PFS无相关性.[结论]CT/TT基因型患者PFS优于CC型.MTHFR C677T基因多态性可作为预测结直肠癌患者化疗预后的指标.
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结缔组织病合并肺隐球菌病的临床分析
[目的]探讨结缔组织病(CTD)合并肺隐球菌病(PC)的临床特点、影像学表现、病理特征、治疗方法及预后.[方法]回顾性分析2004-2014年于中山大学附属第一医院诊断的24例CTD合并PC的资料,总结分析其临床特征和治疗方法.[结果]男6例,女18例,年龄32~ 67岁,均无鸟/鸽粪接触史.孤立性PC21例,PC合并隐球菌脑膜炎3例.痰培养/支气管肺泡灌洗液培养和隐球菌荚膜多糖抗原的阳性率分别为27.3%(6/22)和33.3%(6/18).胸部CT表现为结节12例,实变影6例,混合病变6例.病理确诊14例,痰培养/支气管肺泡灌洗液培养联合CT临床诊断6例,隐球菌荚膜抗原联合CT临床诊断4例.单纯手术切除1例,手术联合抗真菌药物1例,单纯抗真菌药物治疗20例,失访2例.药物治疗的患者中,静脉抗真菌药物治疗2~3周后(17例氟康唑,2例伏立康唑,2例伊曲康唑)均改为口服氟康唑序贯治疗,总疗程3~ 14月.15例完全缓解,5例部分缓解,2例PC合并隐球菌脑膜炎的患者死亡.[结论]CTD合并PC可无鸟/鸽粪接触史,影像学表现无特异性,血清学和病原菌培养阳性率低,误诊率高,单纯手术治疗易复发,氟康唑单药治疗效果佳,预后好.
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胎盘位置影响胎盘早剥的妊娠结局分析
[目的]分析胎盘附着位置对胎盘早剥母儿结局的影响.[方法]回顾性分析我院分娩的51例胎盘早剥病例.胎盘附着于子宫前壁者20例(前壁组),附着于子宫后壁者31例(后壁组).[结果]51例均行剖宫产分娩.前壁胎盘组的产前出血发生率高于后壁胎盘组(80.0% vs 19.4%,P<0.001);其分娩前诊断的比例明显高于后壁胎盘组(90.0% vs 45.2%,P=0.001).而后壁胎盘组的产后出血量显著多于前壁胎盘组[(818.7±498.6) mL vs (400.0±132.5)mL,P=0.001],后壁胎盘组需要输血的发生率也高于前壁胎盘组(38.7%vs 10.0%,P=0.025).后壁胎盘组新生儿窒息的发生率显著高于前壁胎盘组(41.9% vs 10.0%,P=0.015).两组患者的发病诱因、分娩孕周、产后出血率、DIC发生率、新生儿出生体质量、胎儿宫内窘迫发生率等无显著差异(P>0.05).[结论]后壁胎盘的胎盘早剥病例临床症状不明显,诊断困难,易致严重并发症,危及母儿生命.出现胎监反应欠佳及胎儿宫内窘迫等异常且原因不明时,应考虑胎盘早剥可能,及时处理以降低母儿并发症.
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交互式分割软件在肝局灶性病变超声图像分割中的初步临床应用
[目的]评价一种基于判别式模型学习的交互式分割软件在常规灰阶超声图像中分割肝脏局灶性病变(FLL)的价值.[方法]软件分别从用户标注出前景以及背景区域采集样本点,提取样本点特征,对病灶区和病灶边缘分别建立病灶区域判别模型和病灶边缘判别模型.后,将上述两种模型合并为组合模型,得到优的分割结果.建立FLL理想模型并收集45例FLL患者的常规灰阶超声图像共60幅检验软件的分割能力,将软件分割结果与高年资医师手工分割结果进行比较.[结果]以高年资医师手工分割结果作为金标准,软件分割所得区域的真阳性率(TP)为91.49%,假阳性率(FP)为14.22%,面积交叠率(AOM)为81.05%;分割所得结果的平均相对误差为0.04%,与手工分割间的差异无统计学意义(P>0.05).[结论]基于判别式模型学习的交互式分割软件可以准确的在常规灰阶超声图像中分割出FLL.
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声学结构定量技术评价乙肝肝纤维化分期的价值
[目的]评价声学结构定量技术在肝纤维化分期的应用价值.[方法]2013年5月至2014年4月我院慢性乙型肝炎患者122例,同时行声学结构定量技术分析及肝活检病理分期.比较肝纤维化病理分期与ASQ各定量参数:Total Mode(总众数),Total Average(总均值),Red Mode(红色曲线众数),Red Average(红色曲线均值),Red SD(红色曲线标准差),Blue Mode(蓝色曲线众数),Blue Average(蓝色曲线均值),Blue SD(蓝色曲线标准差),及BR ratio(蓝红直方图曲线下面积比值),分析其相关性.同时,以相关性较高的参数诊断肝纤维化分期构建受试者工作特征曲线(ROC),分析其在肝纤维化各分期的诊断效能.[结果]ASQ的各定量参数中,除Blue Average外,其他各参数与纤维化分期的相关性均具有统计学意义.其中Total Mode和BRratio与病理纤维化S分期的相关系数较高.Total Mode和BR ratio诊断肝纤维化各分期的ROC曲线下面积比较,仅S≥2有统计学差异,其余均没有统计学差异.Total Mode在S≥2和S=4的肝纤维化分期诊断中ROC曲线下面积为0.751和0.703,其余ROC曲线下面积均低于0.700.[结论]超声组织结构声学定量技术(ASQ)能无创、定量行肝纤维化分期诊断,其中以Total Mode和BRratio与病理分期的相关性较高,在ROC曲线下面积的分析比较中,以Total Mode在S≥2和S=4肝纤维化分期中诊断价值达中等.
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偏心髋臼旋转截骨术后的全髋关节置换术
[目的]回顾性分析偏心髋臼旋转截骨术(ERAO)治疗后的成人髋关节发育不良(DDH)患者再次行人工全髋关节置换术(THA)的方法和手术疗效.[方法]对2002年11月至2014年6月在日本名古屋大学医学院附属医院接受THA术的24例DDH患者.这些患者均曾应用ERAO术进行治疗,术后随访或间隔102~269(197.9±51.48)个月后,再次进行THA术.24例患者(25髋),其中男6例,女18例,平均年龄59.4岁,其中3例取下股骨头进行大块骨移植,塑形与髋臼上缘匹配后,进行松质骨螺钉固定,7例予以少量小碎骨打压植骨.术后严格随访,临床评估以Harris评分为标准.影像学评估则通过拍摄术前与术后骨盆前后位,患髋正侧位,观察假体位置、Sharp角等以及有无假体松动、脱位,感染,神经血管损伤等并发症.[结果]本组病例平均随访时间12 ~145(93.7±24.38)个月.术后无假体松动、脱位,感染,神经血管损伤等并发症.Harris评分由THA术前(52.1±9.3)分提高至(85.5±6.9)分,有显著性差异(P< 0.001);ERAO术前sharp角为47~58 (54.4±3.7)°,ERAO改善为(44.9±2.8)°(P<0.05),到THA术前sharp角平均为(45.8±2.3)°,术后为(32.5±3.1)°,与THA术前比较改善明显(P<0.05).[结论]ERAO大大矫正了DDH患者髋臼畸形程度,增大了股骨头的覆盖面并纠正了异常的受力模式,延缓了股骨头坏死及骨性关节炎的进展.对其再次行THA术,术中大多无需骨块移植,术后康复时间短,疗效满意.
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广东省2005-2014年梅毒流行趋势和疾病负担
[目的]分析广东省2005-2014年梅毒流行趋势和疾病负担,为全面认识梅毒的危害性、合理制定卫生政策提供参考.[方法]利用广东省2005-2014年梅毒病例报告数据和广东省人口数据,分别以发病率和伤残调整寿命年(DALY)为分析指标,对广东省不同年份、不同性别、不同年龄组的梅毒疫情和疾病负担进行分析比较.[结果]梅毒报告发病率从2005年的21.08/10万,增长到2014年的52.55/10万,梅毒疾病负担强度从2005年的2.00 DALYs/1O万,增长到2014年的3.16 DALYs/10万.一期和二期梅毒在全部梅毒病例所占的构成比不断减少,而隐性梅毒的构成比不断增加.虽然三期和胎传梅毒的发病率很低,但其所致疾病负担却远远高于其他分期梅毒.隐性梅毒女性发病率高于男性,但各分期梅毒所致疾病负担均是男性高于女性.一期和二期梅毒的发病高峰为20~35岁,隐性梅毒有两个发病高峰,一个是20 ~ 35岁,另一个是60岁及以上年龄人群.[结论]广东省梅毒疫情形势严峻,梅毒疾病谱已经发生改变,隐性梅毒病例占大多数,三期和胎传梅毒发病率处于较低水平,但其所致疾病负担巨大.本研究提示要把各分期梅毒的防控工作放在同等重要的位置上.
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miRNA-21转录调控因子的生物信息学分析
[目的]探讨miRNA-21转录调控因子AP-1、STAT3、NFI1、CBP、EBP、TGF-β、BMP-6、GFI1的结构特征及其与miRNA-21转录结合位点.[方法]利用生物信息学工具分析miRNA-21转录调控因子的理化性质、三级结构、跨膜区、信号肽、亚细胞定位及预测与miRNA-21转录结合位点.[结果]等电点分析表明STAT3等电点小于7.0,其余7个转录调控因子等电点大于7.0;脂溶指数分析显示,EBP脂溶指数大于100,为亲水性蛋白,其余7个转录调控因子脂溶指数均小于100,为疏水性蛋白;从不稳定指数分析结果可知,EBP不稳定指数小于40,为稳定蛋白,其余7个转录调控因子不稳定指数大于40,为不稳定蛋白.所有转录调控因子二级结构均由α--螺旋、无规则卷曲和扩展链结构3种形式组成;EBP有跨膜区,BMP-6有信号肽,其余均无跨膜区或信号肽.亚细胞定位分析发现BMP-6位于细胞质中,EBP则位于质膜上,其余转录调控因子位于细胞核中;所有转录调控因子三级结构呈现发夹型结构,并预测出6个转录调控因子与miRNA-21转录结合位点.[结论]miRNA-21转录调控因子呈现多样性特征,拥有典型的发夹型结构特征,可能有助于对miRNA-21转录表达调控,研究结果将有助于开展研究基于miRNA-21的癌症治疗及其相关治疗药物的筛选.
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DCE-MRI和DWI在界定儿童脑胶质瘤边界中的诊断价值
[目的]探讨动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)灌注参数[血管渗透性参数(Ktrans)、细胞外血管外间隙容量(ve)、速率常数(kep)、相对强化率曲线下面积(iAUC)]和表观扩散系数(ADC)值在儿童高、低级别脑胶质瘤边界确定中的应用价值.[方法]回顾性分析行颅脑DCE-MRI和扩散加权成像(DWI)扫描的儿童脑胶质瘤患者14例,均经手术或穿刺活检证实.其中低级别胶质瘤(Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤)9例、高级别胶质瘤(Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤)5例.对每个病例,记录肿瘤水肿区各感兴趣区(ROI)的灌注参数(Ktrans、ve、kep、iAUC)的平均值(mean)和扩散参数(ADC值)的平均值(mean).对高、低级别胶质瘤水肿区的灌注参数和ADC值进行相关分析.[结果]高、低级别胶质瘤水肿区的Ktrans、ve、kep、iAUC(mean)差异无统计学意义,P> 0.05;高、低级别胶质瘤水肿区的ADC值(mean)差异具有统计学意义,P<0.001.[结论]瘤周水肿区的ADC值在鉴别高、低级别胶质瘤中更具有诊断价值,弥补了常规MRI无法评价肿瘤边界的不足.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
1999 | 01 02 03 04 |