急性运动后健康人循环内皮祖细胞的动态变化及其与NO水平的关系

[目的]探讨急性运动后健康成人循环内皮祖细胞(EPC)数量和功能的动态变化及其与一氧化氮(NO)水平的关系.[方法]选择8例男性健康志愿者,动态观察急性运动前以及运动后30 min、3 h、6 h、12 h和24 h循环内皮祖细胞数量和功能,同时检测运动前后血浆NO水平的变化.[结果]急性运动后30 min,健康志愿者循环内皮祖细胞的数量和功能上升至高峰,运动后3 h已开始逐渐下降.运动后24 h回落至正常水平,这种变化与血浆NO水平的动态变化趋势基本相似.血浆NO水平与循环内皮祖细胞数量和功能呈直线相关同归关系.[结论]急性运动上调健康成人循环内皮祖细胞数量和功能的维持时间较为短暂,可能与血浆NO水平的下降有关.提示需要长期运动锻炼以维持对健康成人循环内皮祖细胞数量和功能的上调作用.

缺血后处理对犬肺移植术后早期炎症反应的影响

[目的]观察供体犬肺再灌注后早期炎症因子及脂质过氧化反应的变化情况,了解缺血后处理对供体犬肺植入后功能的影响.[方法]12对比格犬,随机分成两组,对照组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,不予缺血后处理的干预,按常规方式进行:缺血后处理组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,常规方式获取的供体犬肺植入后,再灌注早期实施3个周期的10 s再灌和10 s再阻断,总时程1 min的缺血后处理.于供体犬肺再灌注后1 h和2 h时间点采集供肺标本,采用考马斯亮兰法检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的含量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测供体犬肺植入后1、2 h时间点受体左房混合静脉血IL-8水平的变化;关于光镜下观察供体犬肺植入后1、2 h时间点肺组织的病理变化.采用重复测量资料的方差分析进行检验.[结果]手术无1例失败,均存活.供体肺脏植入时间平均(3509±1.7)min.缺血后处理组在1 h、2 h时间点的供体肺组织SOD活性水平较对照组升高(P<0.001);而供体肺组织MDA含量较对照组减低(P<0.001).缺血后处理组的左房混合静脉血的血浆IL-8水平在1、2 h时间点均较对照组的明显减少(P<0.05).缺血后处理组肺组织光镜下观察在各时间点的炎症反应均较对照组的变化轻微.[结论]缺血后处理可能通过减少供体肺组织再灌注后细胞因子IL-8的分泌,从而减轻缺血再灌注后的炎症反应性损伤,达到改善供体犬肺的植入后的功能.

瘦素对缺氧复氧培养L02肝细胞功能和氧化产物的影响

[目的]观察瘦素对缺氧复氧人肝脏细胞(L02)的肝功能保护和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响.[方法]将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12 h复氧组和缺氧12 h复氧加不同浓度的瘦素(分别为100、200、400、800和1 600 μg/L)干预组,取细胞上清液检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、MDA的浓度和SOD活性:电镜检测细胞凋亡的形态学改变.[结果]①与正常对照组相比,L02细胞经缺氧12 h复氧培养后,ALT和AST浓度明显升高(P<0.01),加用不同浓度瘦素干预组ALT和AST浓度较单纯缺氧12 h复氧组下降(P<0.01);②与正常对照组相比,L02细胞经缺氧12 h复氧培养后,MDA浓度明显升高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05),加用不同浓度瘦素干预组MDA浓度较单纯缺氧12 h复氧组下降(P<0.05);SOD活性上升(P<0.05);③电镜检测单纯缺氧复氧后细胞呈现明显凋亡形态学改变,加用瘦素100μg/L处理细胞组细胞仅轻度改变.[结论]瘦素对缺氧复氧培养导致L02肝细胞的细胞损伤有一定的保护作用;可能与瘦素抑制氧自由基生成,减少脂质过氧化有关.

Nurr1基因修饰人脐血间充质干细胞源性多巴胺能神经元移植治疗帕金森病

[目的]探讨Nurr1基因修饰的人脐血间充质干细胞(HUCB-MSC)源性的多巴胺能神经元移植对帕金森病(PD)模型鼠的治疗作用.[方法]SD大鼠PD模型随机分为假手术组(A组)、单纯HUCB-MSC组(B组)、Nurr1基因修饰HUCB-MSC组(C组).将HUCB-MSC及Nurr1基因修饰后的HUCB-MSC体外分化为多巴胺能神经元,并通过立体定向的手段将其移植入毁损侧纹状体,观察移植前后PD模型大鼠旋转行为的变化和脑内多巴胺(DA)含量的改变,以及纹状体区酪氨酸羟化酶(TH)表达的变化.[结果]B、C两组在移植后第2周、4周和8周时旋转行为及脑内DA含量均较A组有所改善(P<0.05,P<0.01),且B、C组间比较C组改善明显(P<0.05),这种差异以第8周时为明显.移植后B、C两组TH表达较A组明显增高,并随着时间的增加而逐渐增高,且C组在各时间点上TH表达较B组含量高(P<0.05),并在移植后第8周时为明显.[结论]Nurr1基因修饰HUCB-MSC来源的多巴胺能神经元移植治疗PD模型鼠,能有效地增加鼠脑内多巴胺含量和纹状体区TH的表达,改善PD模型鼠的症状,为细胞移植治疗PD提供了一种崭新的手段.

雷公藤甲素对哮喘小鼠气道重塑及转化生长因子-β1表达的影响

[目的]探讨雷公藤甲素对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道重塑的影响.[方法]4JD只雌性SPF级BABL/e小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只.A组为生理盐水对照组;B组为卵蛋白(OVA)哮喘组;C组为雷公藤甲素治疗组;D组为地塞米松治疗组.在末次激发24 h后所有小鼠取左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,过碘酸-雪夫(PAS)染色,Masson三色染色以及抗转化生长因子β1(TGF-β1)抗体免疫组化染色.测定支气管管壁厚度(WAt/Pbm),支气管平滑肌厚度(WAm/Pbm).取右肺组织行RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达.[结果]B组小鼠支气管管壁厚度、杯状细胞百分数、气道平滑肌厚度、胶原纤维面积、TGF-β1的转录和表达水平均显著高于A组(P<0.01).C组小鼠上述各指标依次均显著低于B组(P<0.05),D组小鼠上述指标显著低于B组(P<0.05).但C组和D组上述各指标间差异无统计学意义(P>0.05).肺组织的TGF-β1的蛋白表达水平与支气管的管壁厚度,平滑肌厚度,杯状细胞比,胶原纤维含量成正相关(相关系数分别为0.755、0.815、0.898、0.837;P<0.01).[结论]雷公藤甲素可抑制BABL/c哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制有可能是通过抑制TGF-β1的表达而实现的.

粉防己碱对阴茎海绵体平滑肌细胞抗氧化能力的影响

[目的]研究粉防己碱(Tet)对过氧化氢(H2O2)致新西兰白兔阴摹海绵体平滑肌细胞损伤的保护作用.[方法]体外培养新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞,随机分为3组:对照组、H2O2组和Tet+H2O2组.①四甲基偶氮唑盐还原实验观察Tet对H2O2诱导损伤的阴茎海绵体平滑肌细胞的存活率;②化学比色法观察Tet对H2O2诱导损伤的阴茎海绵体平滑肌细胞的乳酸脱氢酶(LDH)的释放、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响.[结果]H2O2诱导阴茎海绵体平滑肌细胞4 h,①细胞存活率由100%降至(48.57±4.1)%(n=8;P<0.01);②LDH释放由对照组的(487.3±78.6)U/L增加到(1105.5±65.8)U/L(n=8;P<0.01);③MDA含量由对照组的(3.8±1.4)nmol·L-1·mg-1增加到(77.3±8.6)nmol·L-1·mg-1(n=8;P<0.01);④SOD活性由对照组的(51.8±5.9)U/mL降为(30.7±4.5)/mL(n=8;P<0.01).粉防己碱可浓度依赖性地提高细胞存活率;降低LDH释放和MDA含量,提高SOD活性.[结论]粉防己碱对H2O2致阴茎海绵体平滑肌细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与增强细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关.

IgA肾病患者血清IgA1对足细胞凋亡的影响

[目的]探讨IgA肾病患者血清IgA1对足细胞凋亡的影响.[方法]Jacalin亲和层析和Sephacryl S-200分子筛用来纯化蛋白,单体IgA1(mlgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1),同步化的足细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养,流式细胞仪评价细胞凋亡情况,Real time PCR检测Bcl-2,Bax,Fas and Fas-L mRNA表达情况.[结果]IgAN患者的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,其凋亡率显著高于对照组[(30.5±5.4)% vs (20.6±4.5)%,P<0.05];而健康对照的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,凋亡率也显著高于对照[(31.4±5.3)%vs(20.6±4.5)%,P<0.05];IgAN患者的aIgA1诱导足细胞的凋亡呈现时间和浓度依赖.与对照相比,IgAN患者和健康对照来源的aIgA1诱导足细胞Fas mRNA升高2.4倍(P<0.05).而Bcl-2 mRNA和Bax mRNA无显著性变化(P>0.05).[结论]IgA肾病患者血清IgA1可诱导足细胞的凋亡,其可能参与IgAN的进展.

良恶性病变食管组织及其邻近组织中HOXA5蛋白和mRNA的表达

[目的]探讨食管鳞癌组织中同源异型盒基因(HOX)HOXA5蛋白和mRNA的表达情况,分析HOXA5表达与食管癌患者年龄、性别及其他临床病理学特征的关系.[方法]选择31例择期手术的食管癌患者,手术切除的标本均在离体30 min内分别于癌灶、癌旁3 cm以内及手术残端食管黏膜组织3处取材:对各部分标本作HE染色进行病理学诊断及分型,用免疫组织化学染色方法检测HOXA5蛋白的表达,用荧光定量PCR法检测HOXA5 mRNA的表达.[结果]①HE病理组织学检测证实31例癌组织标本均为鳞癌.癌旁3 cm以内的标本呈中-重度不典型增生,手术残端食管黏膜组织均为正常鳞状上皮.②在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中HOXA5蛋白阳性表达率分别为32.3%、58.1%和64.5%(P<0.05);HOXA5 mRNA的含量分别为0.97±0.46、1.76±1.03和2.37±2.11(P<0.05);HOXA5蛋白和mRNA均表现为癌组织及癌旁不典型增生组织的表达率/表达量明显高于正常食管黏膜组织.③HOXA5蛋向阳性表达率(P<0.05)、HOXA5 mRNA的含量(P<0.05)均与食管鳞癌组织的病理学分级有关,其在病理学Ⅲ级中的表达率明显高于病理学Ⅰ+Ⅱ级的;不支持HOXA5蛋白和mRNA的表达与患者的年龄、性别、浸润深度及有无淋巴结转移有关(均P>0.05).④HOXA5蛋白表达与其mRNA的表达一致性程度良好(Kappa=0.718,P<0.05).[结论]HOXA5蛋白和mRNA的表达在癌旁不典型增生组织、食管鳞癌组织中明显升高,它可能是食管鳞癌发生过程中的早期事件.

吗啡后处理抑制缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及其抗氧化机制

[目的]探讨吗啡后处理抑制缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的作用以及与氧化应激的关系.[方法]SD大鼠45只随机分成3组,每组15只:S组(假手术,只穿线,不结扎);I/R组(单纯缺血再灌注);M组(吗啡后处理+缺血再灌注).再灌注末,TUNEL染色检测细胞凋亡,检测氧化应激指标和心肌caspase-3的活性.[结果]再灌注120 min,可在I/R组缺血区心肌检测到大量凋亡心肌细胞(18.0±1.1)%.吗啡后处理显著降低心肌细胞凋亡指数(10.8±1.2)%,P<0.01).与I/R组相比,吗啡后处理明显上升了心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低了心肌组织丙二醛(MDA)含量(P<0.01).与假手术的对照组比较,缺血再灌注损伤组caspase-3活性明显增强(P<0.01),而吗啡后处理组明显降低了缺血再灌注损伤所增强的caspase-3活性(P<0.01).[结论]大鼠在体心脏缺血模型,吗啡后处理可通过抗氧化应激,抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡.

阿霉素肾病大鼠模型动态变化及其足细胞数量和nephrin的表达变化

[目的]探讨足细胞数量及nephrin在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化及意义.[方法]SD大鼠64只分为两组,模型组40只和对照组24只.模型组大鼠间隔2周两次尾静脉注射盐酸阿霉素,对照组大鼠相同时间尾静脉注射等容积生理盐水,各组分别于注射后1周、4周、8周、12周检测血、尿的生化指标,光镜、电镜观察肾脏病理学改变,免疫组化技术观察足细胞数量及nephrin的表达变化.[结果]①根据肾脏病理变化模型可分为两期:急性期(1～4周)和慢性期(5～12周).光镜检查4周末可见肾小球足细胞肿胀,8周末出现球囊粘连,12周末部分肾小球节段性轻、中度硬化.②1周末足细胞nephrin表达减弱(P<0.05),8周末足细胞数量减少(约是对照组的84%,P<0.05).③nephrin、足细胞数量与24 h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐呈负相关关系;足细胞数量与nephrin呈正相关关系.[结论]①经改良间隔2周两次尾静脉注射阿霉素0.004 mg/g,可成功建立急性和慢性阿霉素肾病模型,急性模型病理学改变类似人的微小病变性肾病.慢性模型病理学改变类似人的局灶节段性肾小球硬化(FSGS).②足细胞nephrin的表达减少和分布方式改变可能是大量蛋白尿发生的重要因素.③FSGS发生时足细胞数量减少了约16%.

游离包皮内板尿道成形术治疗尿道下裂

[目的]总结用游离包皮内板做为人工尿道移植物治疗尿道下裂的方法及疗效.[方法]分析本科室1992年1月至2007年9月对580例尿道下裂患儿,包括阴茎体型412例,阴茎阴囊交界型130例,阴囊型38例行游离包皮内板一期尿道成形术的治疗方法和效果等临床资料.[结果]游离包皮内板一期尿道成形术后阴茎伸直及外观满意,尿道口位置正常.术后92例发生尿瘘,18例发生尿道狭窄,总体成功率为81.7%.其中阴茎体型术后发生尿瘘69例(16.7%),尿道狭窄11例(2.6%);阴茎阴囊交界型术后尿瘘17例(13.1%),尿道狭窄5例(3.9%);阴囊型术后尿瘘6例(15.8%),尿道狭窄2例(5.3%).[结论]游离包皮内板尿道成形是很好的治疗尿道下裂的方法,具有术后恢复快,阴茎外观满意,尿道狭窄、尿瘘等并发症少等优点.

高龄妇女体外授精-胚胎移植妊娠成功率的影响因素

[目的]了解高龄妇女体外授精-胚胎移植(IVF-ET)的年龄界限值和影响高龄妇女IVF-ET妊娠成功率的因素.[方法]选择三级甲等医院生殖医学中心1999年11月至2006年6月进行IVF-ET的年龄大于或等于35岁的高龄妇女共2 144周期:同期进行IVF-ET的年龄小于35岁的妇女周期数为5 559.分别比较≥35岁和<35岁组以及35～36,37～38,39～40及≥41岁组的妊娠率.该研究剔除了生育情况随访资料欠完全的患者,他们均为妊娠试验阳性和部分临床妊娠患者.[结果]≥35岁组和<35岁组的妊娠试验阳性率、胚胎植入率、早产率和活产率均差异有统计学意义(P<0.001),但是≥35岁组患者继发不孕、女方因素不孕及合并子宫内膜异位症者分别占70.3%、69.9%及14.9%,明显高于<35岁患者组的51.7%、37.5%及9.5%(P<0.001),而多囊卵巢患者在≥35岁组仅为1.9%,明显少于<35岁患者组的3.7%(P<0.001).虽然IVF-ET患者的妊娠率、胚胎植入率、早产率和活产率在<35岁、35～36,37～38,39～40及41岁以上组间均明显下降(P<0.01),但是在仅因男方少弱精行IVF-ET ICSI治疗患者中,妊娠率、胚胎植入率、早产率和活产率在<35岁、35～36和37～38组之间无差异(P>0.05),而在≤38和>38组之间存在统计学差异(P<0.05).[结论]35～38岁的IVF-ET的高龄患者妊娠率下降的原因不仅是年龄因素的影响,还存在影响妊娠的其他妇科疾病的影响,对这些妇科疾病的治疗可能有助于提高患者的妊娠率.目前的IVF-ET治疗技术可以克服35～38岁患者的高龄影响,年龄大于38岁可能是目前IVF-ET治疗的年龄界限值,对这部分高龄患者进行IVF-ET时,除了原发不孕疾病的检查和治疗之外,改善辅助生殖治疗的方案也是必须的.

晚期卵巢癌术后顺铂与卡铂腹腔化疗的近期作用比较

[目的]探讨顺铂(DDP)与卡铂(CBP)在卵巢癌腹腔化疗中的作用.[方法]对我院2004年1月至2008年9月136例卵巢癌病例进行回顾性分析,按入选标准入选37例,DDP组20例,CBP组17例.[结果]DDP组与CBP组术前及术后第1次化疗前的CA125水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).第1次化疗后,DDP组比CBP组CA125能降到更低水平(P<0.05),但第2次、第3次或第4次化疗后两组的CA125水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).手术后有肉眼残余病灶的病例经第1次或第2次化疗后,DDP组比CBP组CA125均能降到更低水平(P<0.05).手术后无肉眼残余病灶的,经第1次、第2次或第3次化疗后,DDP组与CBP组的CA125水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).两组在白细胞减少、消化道反应、肝功能损害、肾功能损害、脱发以及中止腹腔化疗等方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但在腹痛方面,Ⅰ级腹痛的发生率DDP组(40%,8/20)与CBP组(23%,4/17)比较,差异有统计学意义(P<0.05).[结论]在经过理想的肿瘤细胞减灭术的晚期卵巢癌患者中,选用顺铂或卡铂行腹腔化疗都有效可行,但对仍有肉眼残余病灶的病例,选用顺铂能在较短的疗程内起效.

携带α-地中海贫血基因人胚胎干细胞系的建立

[目的]建立携带α-地中海贫血纯合子基因人胚胎干细胞系.[方法]收集经胚胎种植前遗传学诊断技术诊断为携带α-地中海贫血纯合子基因的囊胚,机械法分离内细胞团,用无血清培养基进行人胚胎干细胞培养,建立携带α-地中海贫血纯合子基因的人胚胎干细胞系.对所得人胚胎干细胞进行α-地中海贫血基因的DNA序列分析与全能性鉴定.[结果]本研究共收集44枚PGD筛杏后囊胚,分离12个囊胚内细胞团,建立两株人胚胎干细胞系.两株人胚胎干细胞系均携带α-地中海贫血纯合子基因.两株胚胎干细胞系均有正常的染色体核型、OCT-4基因与细胞表面抗原SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60与TRA-1-80的表达,能够向三胚层细胞分化.[结论]携带α-地中海贫血纯合子基因的人胚胎干细胞具有向三胚层细胞分化的全能性,携带致病基因的胚胎可用于建立携带遗传疾病基因的人胚胎干细胞系.

来氟米特对于肾移植术后抗排斥反应的前瞻性研究

[目的]探讨来氟米特(Lef)联合钙调磷酸酶抑制剂(CNI)和激素预防肾移植术后排斥反应的疗效和安全性.[方法]我院首次尸肾移植患者共60例,按1:1随机分为试验组(Lef组,n=30)和对照组(骁悉组,n=30).试验组免疫抑制方案采用Lef联合CNI和激素.对照组采用骁悉(MMF)联合CNI和激素.比较两组术后急性排斥发生率、肾功能情况和不良反应发生情况.[结果]试验组和对照组人/肾存活率均为100%/100%.试验组排斥发生率为13.3%,对照组发生率为10%.试验组发生的不良事件包括:肺炎(23.3%)、泌尿系感染(6.7%)、肝功能损害(40%)以及白细胞(WBC)降低(10%).对照组发生的不良事件包括肺炎(6.7%)、泌尿系感染(6.7%)、伤口感染(10%)、上呼吸道感染(3.3%)、支气管炎(3.3%)、肝功能损害(26.7%)、皮疹(3.3%)、血糖升高(3.3%)、白细胞降低(3.3%).试验组在肺炎发生率上显著高于对照组(P<0.001).[结论]Lef联合CNI和激素预防肾移植术后排斥反应疗效肯定,但肺炎和肝功能损害发生率较高,长期疗效有待进一步观察和研究.

类风湿关节炎不同滑膜淋巴细胞分布类型的临床病理特点

[目的]探讨类风湿关节炎(RA)滑膜淋巴细胞分布与滑膜病理改变及临床病情活动性的关系.[方法]细针滑膜活检获取48例活动期RA滑膜,连续切片HE及免疫组化染色观察淋巴细胞分布及病理改变,同时记录临床资料,对照组为骨关节炎14例和非炎性关节病16例.[结果]①48例RA滑膜根据衬里下层淋巴细胞分布特征分为生发中心(GC)型9例(18.8%)、聚集(Agg)型16例(33.3%)、弥漫型(Dif)型15例(31.2%)及无明显淋巴细胞浸润(Non)型8例(16.7%);②RA滑膜病理滑膜炎积分、衬里下层炎症细胞总数及B淋巴细胞数依次为GC型>Agg型>Dif型>Non型,均有统计学差异(P<0.05);③GC型、Agg型、Dif型患者关节压痛数及肿胀数均明显高于Non型(P<0.05),且GC型、Agg型患者的CRP、ESR、TNFα水平及DAS28高于Dif型、Non型(P<0.05);④随访3个月后,Non型患者病情缓解率为87.5%(7/8),而GC型仅为11.1%(1/9)(P<0.05).[结论]滑膜淋巴细胞分布类型能较好地反映RA滑膜炎症状况及临床病情活动性,并有助于预测病情缓解,有望成为一种新的RA病情评估及预后判断的客观指标.

周期性与持续性营养输注对机械通气患者血糖及炎症因子的影响

[目的]观察周期性与持续性营养输注方式对内科呼吸衰竭机械通气病人血糖及血清炎症因子的影响.[方法]采用交叉的自身对照方式测定60例内科呼吸衰竭机械通气患者周期性与持续性营养输注方式过程中血糖水平的变化及营养输注前后血清炎症因子水平变化,比较两种输注方式对机械通气患者血糖及血清炎症因子的影响.[结果]24 h持续输注组总体血糖水平低于16 h周期性输注组,分别为[(8.37±2.30)mmol/L,(8.89±2.77)mmol/L,P=0.000].持续组各天血糖水平之间差异有统计学意义(P=0.011)而各点血糖水平之间的差别无统计学意义(P=0.096).持续组与周期组血清TNF-α下降值水平为(13±5)、(8±3)pg/mL;血清IL-6下降值分别为(22±11)、(15±6)pg/mL,两组之间的差别有统计学意义(PTNF-α=0.000,PIL-6=0.017).[结论]持续性营养输注方式下的血糖水平低于周期性营养输注,且全天血糖水平波动较小,利于病人血糖控制:持续性输注方式有助于改善血清炎症因子水平.

夜间眼压测量在原发性开角型青光眼诊断中的作用

[目的]探讨夜间眼压测量在原发性开角型青光眼(POAG)诊断中的作用.[方法]连续性收集具有典型青光眼视神经损害但日间多次眼压测量值均≤21 mmHg的门诊POAG患者.共30例59眼.对所有患者行夜间多次眼压测量、光学相干断层扫描仪、视网膜断层扫描仪及Humphrey视野检查.[结果]30例(59眼)中14例28眼(46.7%)夜间眼压值>21 mmHg(HPG组),16例31眼(53.3%)夜问眼压正常(NPG组).HPG组和NPG组的眼压高峰均出现在夜间(5:00和2:00);HPG组各时间点眼压明显高于NPG组(P=0.033～0.000);且眼压波动幅度大于NPG组(P=0.011);HPG组和NPG组间的视盘结构参数、视网膜神经纤维层厚度和视野缺损无统计学差异.[结论]眼压是鉴别HPG和NPG的重要因素,夜间眼压测量在POAG的诊断及鉴别诊断中有重要作用.

女性盆腔恶性肿瘤3.0T背景抑制磁共振弥散加权成像研究初探

[目的]探讨3.0T磁共振弥散加权成像在女性盆腔恶性肿瘤的病变范围及转移中的临床应用价值.[方法]回顾性分析26例女性盆腔恶性肿瘤的MRI影像学资料,并与手术病理资料对照.病例包括宫颈癌17例(术前14例.术后复发3例)、子宫内膜癌7例(术前5例,术后复发2例)、结肠癌术后复发1例、卵巢癌术后复发1例.进行女性盆腔恶性病变与正常组织(闭孔内肌)ADC值的测量与比较,以及常规MR成像组和弥散成像结合常规MR成像组的病变观察结果的比较.[结果]①女性盆腔恶性病变与正常组织ADC值测量与比较:女性盆腔恶性肿瘤原发灶、转移灶与闭孔内肌的ADC值三者间比较差异有统计学意义(P=0.024);原发灶与闭孔内肌ADC值比较差异有统计学意义(P=0.012);闭孔内肌与转移灶ADC值比较差异有统计学意义(P=0.021);原发灶与转移灶的ADC值比较差异无统计学意义(P=0.402).②常规MR成像组和弥散成像结合常规MR成像组的病变观察结果的比较:常规MR成像组与弥散成像结合常规MR成像组发现病变分别为43处及88处,两组发现病灶数目差异有统计学意义(P<0.001).[结论]3.0T磁共振弥散加权图像ADC值测量能够定量反映病灶的弥散受限程度,有助于鉴别盆腔良恶性病变.背景抑制磁共振弥散加权成像分辨率高,能清晰直观地显示女性盆腔恶性病变的范围和转移,具有良好的临床应用价值.

AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达

[目的]构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析.[方法]采用PCR法扩增人AFP基因启动子.回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK.对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定.[结果]序列分析表明,该启动子含300 bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符.限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子.RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61～83 ku大小的特异性条带.[结论]人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功.

超声内镜检查在胃癌术前分期中的临床应用价值

[目的]探讨超声内镜检查(EUS)在胃癌术前分期中的I临床应用价值.[方法]对320例经胃镜活检证实为胃癌的患者术前行超声内镜检查,并与术后病理结果对照.[结果]EUS对胃癌T分期的准确率分别为T1 93.15%、T285.87%、T3 80.17%和T4 87.18%.EUS对胃癌无(NO)、有(N+)淋巴结转移判断的准确率较高,分别为NO 85.85%和N+90.65%;而对N分期判断的准确率则较低,分别为NO 85.85%、N1 61.98%、N2 39.66%和N3 28.57%.EUS对于较大淋巴结(直径>0.5 cm)的判断较为准确,而对于较小的淋巴结(直径<0.5 cm,尤其0.3 cm以下者)则难以准确判定其是否为转移灶.[结论]EUS对胃癌术前T分期具有较高的临床应用价值;而对N分期的准确性有待提高.如果EUS与其他检查手段,如螺旋CT、腹腔镜等联合应用,会取得比较满意的TNM分期结果.

门脉高压症患者肝移植围术期血液动力学的变化特点

[目的]总结分析门脉高压症患者肝移植围术期血液动力学变化特点,为临床处理提供借鉴.[方法]回顾分析35例静吸复合全麻下因终末期肝病施行改良背驮式肝移植术的麻醉管理,按照患者术前是否合并门脉高压分为门脉高压组(PHT组,n=19)和非门脉高压组(NPHT组,n=16),比较分析围术期血液动力学变化特点和血管活性药物用量.[结果]与NPTH组比较,PTH组无肝期血液动力学较平稳(P<0.05),为维持血液动力学稳定,无肝期血管活性药物的用量较少(P<0.05).在新肝开放后两组再灌注综合征的发生率相似;PTH组平均肺动脉压(MPAP)和肺循环阻力指数(PVRI)高于术前水平和NPTH组,且持续时间较长.与NPTH组比较,PTH组无肝期中心静脉压(CVP)、肺动脉楔压(PAWP)、MPAP变化幅度较小,而新肝期PTH组MPAP和PVRI升高幅度较大.[结论]PTH患者在无肝期体肺循环相对稳定;但在新肝开放后出现MPAP和PVRI升高.且持续时间长,有发生急性肺动脉高压的倾向.

大鼠脑梗死后缺氧组织显像的动态变化

[目的]研究大鼠脑梗死后缺氧组织是否能长期存在及其动态变化.[方法]利用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.分别采用99Tcm-HL91放射自显影和EF5免疫荧光的方法进行缺氧显像.分持续缺血组(PI)、1.5 h缺血再灌注组(1.5 hIR)、2 h缺血再灌注组和3 h缺血再灌注组4组,放射自显影的观察时间点选取手术后1 d和14 d,免疫荧光则选取术后1、3、7、14、21 d,每个时间点各3只大鼠.[结果]放射自显影显示1.5 h IR组手术后1 d和14 d均为缺氧阳性,其余各组均阴性;免疫荧光示1.5 h IR组术后1、3、7和14 d均有缺氧组织,面积(μm<'2>)有缩小倾向(分别为21 478±8 254、4 405±1 490、2 647±463和1 612±239),但荧光强度没有明显减弱(分别为1.66±0.07、1.75±0.02、1.68±0.08和1.64±0.01);而其余各组在术后7 d均已无缺氧组织.[结论]与人类脑梗死相似,大鼠脑梗死后缺氧组织可存在较长时间,且随着时间的延长而逐渐减少:1.5 h IR的大鼠MCAO模型是研究脑梗死后缺氧组织长时间存在的合适模型.

不同固定剂在激光共聚焦荧光技术中的效果评价

[目的]探讨3种不同的固定剂在激光共聚焦免疫荧光技术中对信号表达的影响.[方法]对培养的NRK-52E细胞分成胞浆,胞膜及胞核抗原3组,每组用4 g/L PFA,甲醇及丙酮分别固定后,完成免疫荧光实验;原代滑膜成纤维样细胞分两组用4 g/L PFA固定后分别用TritonX-100和预冷的甲醇进行打孔,完成免疫荧光实验之后,使用Confocal显微镜在条件同等的情况下观察并拍摄荧光图像,以证实小同的固定剂对信号表达的影响.[结果]胞浆蛋白α-SMA用丙酮固定时信号清晰锐利,将Actin蛋白的丝状结构表达得非常充分.胞膜蛋白ZO-1用甲醇固定处理的信号清晰.胞核蛋白磷酸化的Smad3用4 g/L PFA同定时p-Smad3信号与细胞核具有很好的共定位关系.原代滑膜成纤维样细胞用预冷甲醇打孔处理的细胞,其磷酸化的骨架相关蛋白(P-ERM)蛋白信号明显优于用TritonX-100打孔处理的细胞.[结论]针对不同抗原结构特点选用固定剂;有机溶剂固定剂用于细胞支架成分的固定.交联剂固定剂用于膜相关成分的固定,同时使用交联剂固定剂及有机溶剂打孔可较好的保存抗原而获得高质量的荧光图片.

64层CT在心率较快患者冠状动脉成像中的技术应用

[目的]探讨64层螺旋CT在心率较快患者冠状动脉成像中的技术应用.[方法]收集临床拟诊冠心病而行64层CT冠状动脉造影检查的患者107例.平均心率低于80 min-1的患者55例,作为正常心率对照组.平均心率超过80min-1(80～98 min-1)的患者52例.扫描后对已采集数据进行个性化重建,利用后处理工作站进行图像质量分析.[结果]对冠状动脉近段/中段和远段成像质量进行统计分析,和心率正常组相比,心率80～90 min-1和平均心率超过90 min-1者CTA图像质量评价没有显著统计学差异.[结论]对于64层CT冠状动脉成像心率较快的患者,选择合适的图像重建时相,使用回顾性心电门控配合个性化重建能明显改善患者的冠状动脉CT造影图像质量.

广州市越秀区1988年至2007年居民恶性肿瘤死亡趋势分析及预测

[目的]分析越秀区1988-2007年居民主要恶性肿瘤死亡变化趋势,预测未来5年恶性肿瘤死亡率水平,为肿瘤防治计划的制定和地区卫生工作规划提供科学依据.[方法]利用广州市越秀区1988-2007年各年度死因登记资料及人口资料进行统计分析.用游程检验方法对恶性肿瘤死亡情况进行趋势性检验,用平均发展速度法和趋势外推法建立模型并进行预测.[结果]广州市越秀区1988-2007年的恶性肿瘤粗死亡率呈上升趋势,调整死亡率升降趋势不明显.恶性肿瘤死亡率男性高于女性.大肠癌和乳腺癌的调整死亡率呈持续上升趋势,其中大肠癌的死亡率增长速度快,达40.2%;食管癌、膀胱癌、鼻咽癌调整死亡率呈下降趋势,其他各主要恶性肿瘤的调整死亡率升降不明显.预测到2012年,越秀区恶性肿瘤粗死亡率将达到188/10万.[结论]大肠癌和乳腺癌的死亡率呈上升趋势,为越秀区今后恶性肿瘤防治工作指明重点.

联合化疗在118例晚期头颈鳞癌中的作用

[目的]探讨联合化疗在不能手术晚期头颈鳞癌中的作用,不同化疗方案如何选择,以及在联合化疗中应注意的问题.[方法]回顾总结了1995年1月至2005年1月间我院收治的118例不能手术晚期头颈鳞癌情况,其中男性患者102例,女16例,平均年龄为53.4岁;口咽癌19例,喉咽癌47例,舌癌52例,入院时全部为初治患者,按UICC分期全部为Ⅲ～Ⅳ患者;88例采用DBF方案化疗,30例采用TP方案化疗.[结果]118例患者中化疗评价为完全缓解CR患者有13人,占11.02%(13/118),部分缓解PR患者47人,占39.83%(47/118),总有效率(CR+PR)为50.85%.118例患者的生存情况:中位生存期位15月,用Log Rank方法比较不同化疗组DBF方案和TP方案的平均生存时间,P=0.325.多因素COX模型分析表明性别、疗效和N分期是影响生存的有效因素.[结论]对于不能手术晚期头颈鳞癌患者联合化疗依然能起到一定的作用,有效率可在50%以上,提高晚期头颈鳞癌化疗疗效将有利于改善预后.

我校方积乾教授获"第五届全国高等学校教学名师奖"

酷似组织细胞坏死性淋巴结炎的淋巴结抗酸菌L型感染

[目的]分析淋巴结抗酸菌L型感染的临床表现、病理特征、诊断及鉴别诊断.[方法]对1例组织学上以淋巴结大片坏死为主要病理改变的淋巴结病变,进行HE染色、免疫组织化学染色及改良抗酸染色法(IK)检测,并结合文献分析.[结果]光镜下见大片弥漫性碎屑样坏死,伴组织细胞增生,未见明显上皮样肉芽肿形成.免疫组织化学染色,CD3和CD20分布正常,CD56-、CD68+、结核菌(BCG)+;抗酸染色查见L型抗酸菌,L型抗酸菌呈多形性:原生小体、圆球体、巨形体及长丝体等.随访24个月,病人已痊愈.[结论]淋巴结的抗酸菌L型感染其组织学上与组织细胞坏死性淋巴结炎、恶性淋巴瘤极其相似,临床症状凶险,极易误诊或漏诊.因三者的治疗和预后有很大差别,应注意鉴别诊断.

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1含量

[目的]了解初发系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1在SLE发病中的作用.[方法]流式细胞仪检测25例初发未治疗的SLE患者和15例健康对照者外周血单个核细胞中CD4+CD25+、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比,ELISA检测血清中TGF-β1含量.[结果]SLE患者PBMC中CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞百分比均较健康对照组明显减少(分别为7.9±2.2 vs 12.5±5.3和2.1±1.1 vs 4.0±1.8,P<0.05).SLE患者血清中TGF-β1含量(pg/mL)低于健康对照组(214±48 vs 419±85,P<0.05).SLE患者PBMC中CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的百分比以及血清TGF-β1的含量均与病情活动指数(DAI)成负相关(r分别=-0.68、-0.56、-0.53,P<0.05),但各型T细胞占CD4+T细胞的百分比与血清TGF-β1的含量之间相关分析均无统计学意义.[结论]Treg与TGF-β1参与SLE的发病,两者均可作为病情活动的观察指标.且血清TGF-β1的含量与Treg占CD4+T细胞的百分比在SLE中的下降趋势一致,提示两者之『日J存在一定的联系,推测是TGF-β1的不足导致Treg的生成减少.

量子点荧光技术标记口腔鳞癌细胞中bcl-2的研究

[目的]利用量子点(QD)优良的光学性质对人舌癌Tca8113细胞内bcl-2进行特异性荧光标记,并与异硫氰酸荧光素(FITC)进行光稳定性比较.[方法]分别利用QD605nm和FITC,通过间接免疫荧光法,在激光共聚焦显微镜下观测人舌癌Tca8113细胞内bcl-2的表达,并激光连续照射1 h,用激光共聚焦显微镜自带软件Leica Confocal Software测量量子点OD605nm和FITC的荧光信号强度.[结果]激光共聚焦显微镜下可见人舌癌Tca8113细胞内bcl-2明显表达,量子点QD605标记的荧光信号比FITC更具特异性,且激光连续照射1 h,QD605nm标记的荧光未见明显衰减,而FITC标记的荧光1 h内已基本淬灭.[结论]量子点荧光标记技术能对细胞内bcl-2进行标记,比传统的有机荧光具有更显著的优点.

甲型H1N1流感患者的临床特征及隔离防护

[目的]了解新型甲型H1N1流感的流行病学、临床表现、实验室检查等特点及治疗、预后及隔离防护措施.[方法]对我院于2009年5月至6月下旬收治的81例确诊病例的流行病学及临床资料进行回顾性分析.[结果]患者年龄8～71(22.4±11.98)岁,男44例,女37例.输入性病例32例,本地病例49例.90.2%患者有与确诊患者密切接触史或明确传染他人的证据,呈家庭及群集现象.传播途径以空气飞沫传播和密切接触为主.潜伏期1～7(2.86±1.39)d.大部分病例以咳嗽为首发症状(43.7%),常见症状为发热(92.6%)、咳嗽(85.2%)、咽痛(50.7%)、头痛(34.6%)、全身肌肉痛(28.3%)、鼻塞流涕(46.9%),有腹泻症状者少.外周血白细胞大多正常或降低(92.6%),47.9%的病例嗜酸粒细胞下降,74.1%的病例合并低钾血症.治疗以综合治疗为主,全部病例痊愈出院.未发生院内感染.[结论]新型甲型H1N1流感传染性强,大多数病例病情轻,预后良好,二级防护可有效预防该病的传染.甲型H1N1流感疫情可能从早期输入病例转为本土病例流行.

流感病毒样颗粒疫苗研究进展

疫苗接种是预防各种类型流行件感冒的理想方式.但流感病毒血清亚型多,变异性强.给流感疫苗的研发带来一定的挑战.病毒样颗粒(VLP)是含有某种病毒一个或多个结构蛋白的空心颗粒,形态结构上类似完整病毒,具有与完整病毒相似的免疫原性,并通过激活抗原提呈细胞,诱导免疫应答.VLP不含有病毒核酸,不能自主复制,因此无致病性,在疫苗研发中具有广泛的应用前景.现已有H1N1、H3N2、H5N1、H7N1、H5N3及H9N2型流感VLP合成的报道,动物实验证明这些VLP可诱导产生保护性免疫应答.数种二价(多价)混合流感VLP也被合成并证实在不同亚型流感病毒间具有交叉保护作用.佐剂的使用能够增强流感VLP疫苗的免疫原性.目前的研究表明流感VLP疫苗具有高免疫效价、能有效诱导交叉免疫应答和安全性高等特点,但现有研究大多是动物实验和临床前实验.流感VLP疫苗的安全性、效价及免疫途径等方面还有待进一步的研究及临床实验的验证.本文就近年来流感病毒样颗粒疫苗的研究进展,从流感VLP的合成和释放、免疫机制、已合成的流感VLP、佐剂的使用等方面进行综述.

新型甲型H1N1流感研究进展

2009年初全球爆发了新型甲型H1N1流感.而且至今仍在流行.虽然到目前为止该疾病病情温和,但新型甲型H1N1流感病毒传染性强,人群因对这个新型病毒缺乏免疫力而普遍易感,导致疾病在短时间内迅速播散至全球大流行.该流感的命名从发病初期的"猪流感"几经变更,后确定为新型甲型H1N1流感;人们对该疾病的认识也从发病初期的恐慌到现在的平静甚至平淡地面对.但新型甲型H1N1流感并没有结束,病毒变异的可能性随时存在,本文从这个新型流感的病毒起源、流行病史、传播途径、临床表现、病原学检测、治疗、个人和社区防控措施等方面对本次流感爆发以来的相关研究结果进行了总结,为人们全面认识这次流感的发生发展、正确面对流感的持续流行、科学应用防控措施提供指导.

广州市A型流感病毒血凝素基因的遗传变异研究

[目的]了解2006-2007年广州地区流感的病原学分布,掌握H1N1亚型流感病毒血凝素基因(HA)的遗传和进化特征.[方法]选取2006-2007年广州市19个流感监测点的流感病毒代表株共45株,应用病原学、血清学和分子生物学方法对病毒的型别进行了鉴定;选取24株H1N1亚型流感病毒进行全长HA基因的扩增、克隆与分子进化分析.[结果]A型流感病毒H1N1和B型流感病毒交替成为广州地区2006年流感的优势流行株:2006-2007年广州地区H1N1亚型流感病毒流行株在HA蛋白的抗原区、受体结合位点和潜在糖基化位点均发生了点突变;遗传进化分析结果表明,24株H1N1亚型毒株间基因同源性的平均值为98.4%;与WHO推荐的疫苗株(New Caledonia/20/1999和Solomon Islands/3/2006)相比,同源性高达96.6%和97.8%.[结论]2006年,广州地区流感的病原体为H1N1亚型流感病毒和B型流感病毒;2006-2007年广州市H1N1亚型流感病毒HA基因发生了一定程度的变异,有必要对毒株的变异加强监测;WHO推荐的2006-2007年H1N1亚型流感病毒疫苗株适用于我国人群的免疫预防.