中山大学学报(医学科学版)杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보(의학과학판)
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血小板源性生长因子-C蛋白在视网膜光感受器细胞损伤模型中的神经保护作用
[目的]探讨血小板源性生长因子-C(PDGF-C)蛋白治疗对视网膜光感受器细胞损伤模型中的神经保护作用.[方法]①检测体外条件下PDGF-C的作用,使用光感受器细胞系661W细胞及原代培养的Pde6brd1视网膜细胞.在体外培养的661W细胞培养液中加入PDGF-C蛋白或者牛血清蛋白(BSA),分别予以同等强度相同时间长短的紫外线照射,然后做MTT检测其细胞凋亡状况,检测PDGF-C蛋白对661W细胞的保护作用.取Pde6brd1小鼠视网膜做原代细胞培养后,在培养液中分别加入PDGF-C蛋白或BSA,相同条件培养后通过免疫荧光染色检测光感受器细胞的生存情况,以检测PDGF-C蛋白对该原代细胞的保护作用.②检测在体条件下PDGF-C的作用,在Pde6brd1小鼠的视网膜下分别注射PDGF-C蛋白及BSA,然后通过组织切片后苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜光感受器细胞数量的变化来检测PDGF-C的神经保护作用.[结果]在紫外线诱导的视网膜光感受器细胞661W损伤模型中,培养液中加入PDGF-C蛋白的实验组中,MTT实验显示490nm吸光度(0.2857±0.054)较对照组(0.1726±0.005)增高,P<0.05.在Pde6brd1原代培养的视网膜细胞中,PDGF-C蛋白组中光感受器细胞的存活率明显高于对照组,P< 0.05.在Pde6brd1小鼠的视网膜下注射PDGF-C蛋白,实验组外核层中的每100 μm细胞计数(38.4769±6.1)较对照组(27.2435±5.3)增加,P< 0.05.[结论]PDGF-C蛋白在光感受器细胞损伤模型中具有较强的神经保护作用.
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番茄红素抑制香烟烟雾提取物刺激巨噬细胞所致的炎症反应
[目的]探讨番茄红素对香烟烟雾提取物(CSE)所诱导的人单核细胞株(THPH)巨噬细胞炎症因子生成的影响及其作用的分子机制.[方法]用100μg/L佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞48 h,使其分化为巨噬细胞后,分为空白组、CSE组和CSE+不同浓度番茄红素组(0.5、1和2μmol/L).采用ELISA法检测THP-1巨噬细胞培养基中白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成水平,Western-blotting检测核p65的蛋白表达量.[结果]CSE诱导THP-1巨噬细胞后,IL-6和TNF-α合成释放水平升高,番茄红素可降低CSE诱导引起IL-6和TNF-α生成水平升高.CSE刺激后细胞内ROS生成及核p65蛋白表达增加,核因子-κB(NF-κB)活化,番茄红素可拮抗以上作用,阻止NF-κB活化.[结论]番茄红素能够有效抑制CSE诱导THP-1巨噬细胞炎症反应,该作用主要通过阻断CSE诱导细胞内ROS生成进而抑制NF-κB依赖的炎症因子IL-6和TNF-α分泌发挥的,这可能是番茄红素抑制吸烟导致的炎症反应的作用机制之一.
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运动神经损伤早期脊髓Calpain-2的上调促进IL-6的异常表达
[目的]探讨L5前根切除损伤运动神经的慢性痛模型中早期脊髓内钙依赖性蛋白水解酶Calpain-2(CALP2)介导白细胞介素-6(IL-6)异常表达的病理生理.[方法]采用免疫荧光组织化学和蛋白免疫印迹法,观察L5-VRT后L5背根、脊髓内CALP2的表达改变以及术前预处理calpain抑制剂MDL28170对脊髓内L5-VRT诱导的IL-6异常表达的影响,同时观察单纯给予外源性CALP2 (rat recombinant calpain-2,rr-CALP2)对正常大鼠脊髓内IL-6表达的影响.[结果]①L5-VRT诱导邻近L5背根以及脊髓背角和前角内钙依赖性蛋白酶CALP2表达升高;②通过术前预处理calpain抑制剂MDL28170(25 mg/kg)部分阻断L5-VRT诱导的双侧脊髓IL-6异常表达;③在正常大鼠单侧L5背根表面给予rr-CALP2可直接诱导双侧脊髓IL-6蛋白水平升高.[结论]运动神经损伤早期可能首先通过损伤处CALP2的激活,诱导脊髓IL-6异常表达,参与慢性痛的产生.
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多西他赛对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的治疗作用
[目的]研究多西他赛对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的作用及可能机制.[方法]50只雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(control)、多西他赛组(control+DTX)、野百合碱组(MCT)、野百合碱+溶媒组(MCT+SOL)和野百合碱+多西他赛组(MCT+DTX).后3组大鼠一次性腹腔注射野百合碱(60 mg/kg)建立肺动脉高压模型.野百合碱注射后第21天和第28天,经尾静脉注射多西他赛(5 mg/kg)或溶媒进行干预.多导生理记录仪测定大鼠右心血流动力学,计算右心室肥厚指数(RVHI);左肺病理切片行van Geison染色,光镜下观察肺内小动脉病理改变,并计算肺小动脉中膜厚度与血管直径比值.Western blotting检测右肺组织中p-PDGFR和PDGFR的表达水平.[结果]与control组相比,MCT和MCT+SOL组大鼠的RVSP、RVHI、肺小动脉中膜厚度与血管直径比值、p-PDGFR和PDGFR的表达均显著增加(P<0.05);与MCT+SOL组相比,MCT+DTX组RVSP、RVHI、肺小动脉中膜厚度与血管直径比值、p-PDGFR和PDGFR的表达均显著下降(P<0.05);Control+DTX组与control组相比,以上指标的差异均无显著性(P>0.05).[结论]多西他赛可降低野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压、减轻肺血管重构,其机制可能与抑制PDGFR的表达及其磷酸化有关.
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基于episomal CRISPR/Cas9载体的基因敲入方法
[目的]研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法,比较带有oriP-EBNA1序列的episomalCRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别.[方法]首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系(293FT)与人诱导多能干细胞系(hiPS);利用CRISPR/Cas9序列设计网站,设计和合成靶向DsRedE2的向导RNA(sgRNA),分别克隆至带有oriP-EBNA1的episomal CRISPR/Cas9敲除载体与普通CRISPR/Cas9敲除载体中,测序筛选插入正确片段的克隆;然后设计靶向DsRedE2的同源臂,把同源臂连接在绿色荧光蛋白(GFP)的两端,构建GFP敲入片段的载体.把两种敲除载体分别导入到DsRedE2-293FT与DsRedE2-hiPS细胞系中,在不同时间点通过荧光显微镜观察以及流式细胞分析比较细胞的敲除效率,同时利用PCR检测靶基因的敲除情况;在筛选获得有效的sgRNA片段后,把两种敲除载体和同源臂同时导入到DsRedE2-293FT与DsRedE2-hiPS细胞系中,在不同时间通过荧光显微镜观察以及流式细胞分析比较细胞的敲入效率,同时利用PCR检测DsRedE2序列中GFP的敲入情况.[结果]成功构建表达DsRedE2的293FT与hiPS细胞系;获得靶向DsRedE2的episomal CRISPR/Cas9敲除载体、普通CRISPR/Cas9敲除载体及带有GFP的同源臂载体;荧光显微镜观察与流式细胞分析结果显示,转染两种CRISPR/Cas9质粒均可以使DsRedE2阳性细胞明显减少,而且episomal CRISPR/Cas9质粒组的DsRedE2阳性细胞数量显著低于转染普通CRISPR/Cas9质粒组.同时,敲入实验证实episomal CRISPR/Cas9组的GFP阳性细胞数量比普通CRISPR/Cas9组更多;TA克隆测序证实打靶位点有敲除与敲入片段.[结论]episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体在细胞上都能实现基因的敲除与敲入;带有oriP-EBNA1序列的episomal CRISPR/Cas9载体敲除和敲入的效率均比普通CRISPR/Cas9载体高.以上结果为利用episomal CRISPR/Cas9载体进行人多能干细胞的基因敲入研究和谱系追踪动物模型的建立提供了重要的实验基础.
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石蜡切片多重免疫荧光染色优化条件探讨
[目的]探讨在石蜡切片上不同染色条件对多重荧光标记结果的影响.[方法]根据不同组织抗原选择合适的固定剂;对石蜡组织切片采用高温高压的抗原修复方式,使用柠檬酸盐缓冲液或EDTA抗原修复液进行抗原修复,并在染色操作过程中增加封闭步骤,随后进行常规组织免疫荧光染色.[结果]常规石蜡切片用40g/L多聚甲醛固定、抗原糖基含量高的石蜡切片用过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定可以很好的保护切片中的抗原;pH 6.0的枸橼酸缓冲液及pH 8.0的EDTA-Na缓冲液分别对组织胞浆抗原及胞核抗原具有较好的抗原修复作用;多重荧光染色不同种属来源第一抗体染色间增加一次封闭步骤,可有效的改善多重荧光染色质量.[结论]选择合适的固定剂、抗原修复液及增加抗原封闭次数对石蜡组织切片上的多重荧光标记结果具有显著的影响.
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全羧化酶合成酶缺乏症临床特点和基因突变分析
[目的]探讨全羧化酶合成酶缺乏症(HCSD)的临床及基因突变特点.[方法]回顾性分析2014至2017年经我院遗传代谢病实验室基因检测确诊的6例HCSD患儿的基因检测结果及其临床资料.[结果]共有6例患儿(3女3男),发病年龄7月~7岁3月.临床表现以反复顽固性皮疹为主,部分合并有生长发育落后、神经系统症状.实验室检查3例有高乳酸血症,尿GC-MS检测:均有3-羟基异戊酸(3HIV)、3-甲基巴豆酰甘氨酸(3HMG)、3-羟基丙酸(3HP)和甲基枸橼酸(Me-citrate)增高.血串联质谱检测:均有3-羟基异戊酰基肉碱(C5-OH)增高.患儿入院后予口服生物素及对症治疗,1周后皮疹明显消退.例1~4患儿均为HLCS基因第11外显子发生c.1522C>T纯合子突变.例5患儿HLCS基因第8外显子发生c.1088T>A纯合子突变.例6患儿HLCS基因第11外显子发生c.1544G>A与c.1558G>A复合杂合突变.其中,c.1558G>A未见报道.[结论]全羧化酶合成酶缺乏症的临床表现缺乏特异性,对临床疑诊的病人可进行尿GC-MS和血MS-MS检测.基因检测有助于HCSD的诊断,c.1522C>T纯合子突变可能与早发型HCSD有关;c.1558G>A为新生突变.
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抑制HDAC4减少JNK/c-Jun活性及其依赖的神经元凋亡
[目的]研究抑制组蛋白去乙酰化酶成员HDAC4对SD大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)凋亡的影响及机制.[方法]将原代培养6~9d的CGN分为存活对照组(用含K+浓度为25 mmol/L的培养基,即25 K组)、凋亡组(用含K+浓度为5 mmol/L的培养基,即5K组)和LMK-235处理组(5K合并LMK-235处理组),在5K条件下用不同浓度HDAC4抑制剂LMK-235处理细胞.在转染实验中,将CGN分为25 K+siNC组、5 K+siNC组、5 K+siH-DAC4-1组和5 K+siHDAC4-2组,共转染GFP标记目的细胞.用Western blot法检测p-JNK、JNK、p-c-Jun、c-Jun 的表达水平,用Hoeehst染色法观察并统计核固缩情况,用免疫荧光检测c-Jun磷酸化水平.[结果]Western blot结果显示,与5K组比较,LMK-235处理细胞后JNK、c-Jun磷酸化水平下降.核染色结果显示,与25 K组比较,5K组核固缩率明显增多(P<0.05);与5K组比较,LMK-235处理细胞后核固缩率明显减少(P<0.05).与5K+siNC组比较,小分子干扰HDAC4后,HDAC4的表达下调,c-Jun的磷酸化水平降低,CGNs核固缩率明显减少(P<0.05).[结论]抑制HDAC4通过下调JNK/c-Jun活性使神经元核固缩率减少,从而抑制神经元凋亡.
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畸型精子症患者精子DNA完整性与年龄及常规精液参数的关系
[目的]探讨畸形精子症患者的精子DNA完整性与年龄及常规精液参数的相关关系.[方法]收集2013年1月至2016年12月在我院生殖中心就诊的255例畸型精子症患者的精液标本,将患者按年龄分为≤30岁、30~35岁和≥35岁3组,按WHO第5版手册进行精液常规分析,采用精子染色质扩散法(SCD)检测精子DNA完整性.[结果]畸形精子症患者精子DNA碎片指数(DFI)与前向运动精子百分率(PR%)、精子总活力呈负相关(P< 0.001;P<0.001),与年龄、正常形态精子百分率(NF%)可能存在弱相关关系(P=0.003;P=0.027).精子浓度、总精子数与精子DFI之间的相关关系无统计学意义(P=0.260;P=0.541).不同年龄组患者的精子DFI水平差异具有统计学意义(P=0.021);年龄≥35岁组的精子DFI水平显著高于≤30岁组和30~35岁组(P =0.030,P=0.035);而≤30岁组和30~35岁组间的精子DFI水平差异无统计学意义(P=1.000).年龄≥35岁组的精子DFI异常率明显高于≤30岁组和30~ 35岁组(P=0.002).在年龄≥35岁组中,年龄、PR%及精子总活力在DFI正常患者与DFI异常患者之间的差异具有统计学意义(P =0.006;P< 0.001;P< 0.001).[结论]畸形精子症患者的PR%是与其精子DFI密切相关的精子参数;年龄越大的畸形精子症患者的精子DNA完整性越差.
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颞骨巨细胞修复性肉芽肿影像表现与手术和病理对照
[目的]提高对颞骨巨细胞修复性肉芽肿(GCRG)的CT、MRI表现的认识,减少误诊.[方法]回顾性分析经病理证实的4例颞骨GCRG的CT、MRI表现,并与手术病理对照.[结果]4例均位于颞骨前、下份,侵犯范围较广.CT表现为膨胀性骨质破坏,骨性包壳不完整,病灶内及边缘见点状、条片状高密度钙化、骨化影,病灶边缘骨质均见部分增生硬化,与手术所见一致.MRI检查T2WI信号混杂,T1WI、T2WI表现为大片低信号影,增强扫描不均匀强化.镜下为纤维组织增生,伴多量多核巨细胞及含铁血黄素沉积.[结论]CT和MR表现反映了颞骨GCRG骨内反复出血,肉芽组织包裹的形态和病理特点,具有一定的特征性,对该病的诊断具有重要意义.
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尿道海绵体联合周围筋膜组织整体覆盖技术在尿道板纵切卷管手术中的疗效观察
[目的]观察一种新的尿道海绵体联合周围筋膜组织整体覆盖技术改良的尿道板纵切卷管术(TIP),并与常规TIP术比较其手术效果.[方法]2016年2月-2017年11月对40例初次尿道下裂患儿应用TIP术修复.以门诊单双号分为A、B两组.A组共23例患儿,其中冠状沟型9例,阴茎体型11例,阴茎阴囊型3例,采用一种新的改良覆盖技术:将尿道板两侧分叉的尿道海绵体,连同周围筋膜组织及阴茎头两翼在阴茎体表面向外侧游离并在中线处缝合,覆盖新成形尿道.B组17例患儿,冠状沟型6例,阴茎体型11例,采用常规的TIP手术.术后髓访6~ 27个月,记录两组并发症和术后外观情况,并进行统计学分析.[结果]40例患儿均顺利完成手术.A、B两组患儿年龄组成、住院时间、拆除敷料和拔除导尿管时间均无统计学差异.A组有12例伴有阴茎下弯(52%),B组有10例佯有阴茎下弯(58.8%),均采用了海绵体背侧白膜折叠术纠正.A、B两组患儿手术时间分别为(104.8±24.1)min和(94.5±23)min,成形尿道长度分别为(2.1±0.7)cm和(1.9±0.6)cm,差异均无统计学意义(P>0.05).经过随访,A组出现尿瘘合并尿道口狭窄1例(4.3%).B组出现尿瘘2例(11.8%),其中1例合并尿道口狭窄1例(5.9%),尿道外口下移1例(5.9%),两组均无尿道裂开及尿道憩室病例.所有病例未观察到残留阴茎下弯.两组并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).[结论]尿道海绵体联合周围组织整体覆盖技术改良的TIP术治疗儿童尿道下裂操作简单,疗效确切.
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替诺福韦酯初始单药治疗慢性乙型肝炎患者5年疗效分析
[目的]分析慢性乙型肝炎患者(尤其是高病毒载量患者)服用替诺福韦酯(TDF)长达5年的治疗疗效与安全性.[方法]回顾性分析144名慢性乙型肝炎患者接受TDF初始治疗(服用TDF≥3个月)的疗效及安全性,其中HBeAg阳性106例(73.6%),HBeAg阴性38例(26.4%),102名患者基线HBV DNA(U/mL)的对数≥6.主要终点指标是获得病毒学应答率(VR);次要终点为ALT正常率(ALT水平低于正常上限)、HBeAg/HBeAb血清学转换率和安全性.[结果]平均随访时间为120(12~ 264)周,患者的平均年龄为34(27 ~41)岁.随访至24、48、96、144、192和240周时,VR率呈递增的趋势,分别为71%、91.3%、98.1%、100%、100%和100%,而且100%的患者在240周获得VR.102名基线HBV DNA (U/mL)的对数≥6的患者在随访期间均出现了VR.ALT复常率分别为72.1%、78.6%、91.2%、95%、96%和100%.第240周HBeAg率达35.8%.在第120周,1名患者发生HBsAg转阴,但没有获得HBsAg/HBsAb血清学转换.随访至24周时,有35名患者可检测到HBV DNA,即出现部分病毒学应答.这35名患者中有30名(85.7%)继续TDF单药治疗至144周时获得了VR.无一例患者出现严重不良事件.[结论]无论基线水平是否为高病毒载量,慢性乙型肝炎患长期TDF初始单药治疗是安全有效的.24周时发生部分病毒学应答继续TDF单药治疗,没有必要进行优化治疗.
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轻微型和控制型卵巢刺激对卵巢低反应患者卵泡液微环境的不同影响
[目的]比较卵巢低反应患者进行卵巢轻微刺激和控制性卵巢刺激体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵泡液内激素水平、细胞因子的差异及其与获卵数、胚胎数等的关系.[方法]本研究为观察性研究.招募符合博洛尼亚标准的卵巢低反应患者,随机分为实验组(组2)和对照组(组1).实验组采用来曲唑及低剂量外源性促卵泡生成素(Gn)进行卵巢轻微刺激,对照组采用常规控制性卵巢刺激(黄体期GnRH激动剂修饰长方案)进行卵巢刺激.于取卵日收集成熟卵泡(>16 mm)的卵泡液,其中实验组共23例,对照组共28例,测量卵泡液中促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、孕激素(P)、睾酮(T)和抗苗勒管激素(AMH)水平,以及抑制素(inhibin)、生长分化因子9(GDF9)和骨形成蛋白家族(BMP)水平.统计分析卵泡液中各激素、因子水平与获卵数、可利用胚胎数及优质胚胎数的相关性.[结果]实验组和对照组患者基本情况各指标之间:年龄、不孕年限、基础FSH、和窦卵泡数(AFC)差异均无显著性意义(P>0.05).与对照组相比,实验组Gn用量更少,但两组的获卵数,可利用胚胎数及优质胚胎数差异均无统计学意义(P>o.05).与对照组相比,实验组卵泡液中LH水平、睾酮水平和inhibinB水平明显增高,而FSH水平、inhibinA水平、BMP8B和GDF9水平明显降低.其他几种激素水平,包括E2、P、AMH和BMP2、6、8B、15水平,两组间差异无显著性意义(P>0.05).相关分析显示,卵泡液中各激素和细胞因子水平均与获卵数、可移植胚胎数及优质胚胎数无相关性.[结论]POR患者使用不同的轻微刺激和常规控制性卵巢刺激,卵泡微环境不同.但未发现这些变化与获卵数、可利用胚胎数、优质胚胎数存在相关性.
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影响妊娠中晚期血脂水平的相关因素及其与妊娠期糖尿病发病的关系
[目的]对影响妊娠中晚期血脂水平的相关因素进行分析,并探讨妊娠期血脂水平与妊娠期糖尿病发病关系,为进一步调控妊娠血脂水平提供依据.[方法]纳入2012年12月至2013年12月在我院分娩、且妊娠期间进行血脂检测的3 454名孕妇,通过计算各血脂指标中位数和百分位数,比较不同孕周各血脂的水平及其变化趋势.评估各血脂水平与妊娠期糖尿病(GDM)发病的关系.[结果]各血脂指标水平随孕龄增加而发生改变,其中,甘油三酯(TG)、总胆固醇、低密度脂蛋白、载脂蛋白B及载脂蛋白E随检测孕龄变化而增加,而高密度脂蛋白和载脂蛋白A1随检测孕龄变化而下降.甘油三酯还与体质量指数(BMI)和年龄有关,在校正各种相关因素后,TG与GDM发病有关(P< 0.001),GDM组TG水平高于正常糖耐量组孕妇(2.22 mmol/L vs 2.01 mmol/L,P<0.001).[结论]妊娠中晚期各血脂水平与孕龄有关.TG与孕前BMI、年龄和GDM相关,且高水平的TG与GDM发病有关.
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宫内外同时妊娠患者临床结局的预测指标
[目的]评估经阴道超声(TVS)对宫内外同时妊娠(HP)的早期诊断价值和探索影响其临床预后的预测指标.[方法]回顾性分析85例2003年1月至2017年9月在我院诊断治疗的HP患者,采用Logistic回归分析其临床结局与一般特征、超声特点和不同处理方式的关系.[结果]共80例患者经TVS检查可正确诊断为HP,1例被误诊为附件扭转,4例术后被证实有宫内妊娠.因此,经TVS诊断HP的敏感性为94.1% (80/85),49例(57.6%)患者在执行首次TVS时被怀疑为HP.51例患者完成分娩,其中11例早产.当TVS确诊HP时,宫内妊娠囊无胎心搏动的患者流产率为60.0% (15/25),而宫内妊娠有胎心搏动的患者流产率13.3% (8/60),两者具有显著差异(x2=19.472,P<0.001).多因素Logistic回归结果显示,宫内妊娠囊具有胎心搏动的HP患者妊娠结局更倾向于活产(OR=0.024,95% CI=0.004~ 0.147,P<0.001).[结论]尽管TVS诊断HP具有高敏感性,但仅一半的患者在首次TVS时被怀疑为HP.当经TVS诊断为HP时,宫内妊娠囊具有胎心搏动是患者良好临床预后的重要影响因素.
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二苯环丙烯酮局部免疫治疗难治性斑秃的疗效分析
[目的]探讨难治性斑秃患者局部外用二苯环丙烯酮(DPCP)的疗效及其影响因素.[方法]回顾性分析127例难治性斑秃患者外用DPCP的有效率、不良反应、复发率和再次治疗的有效率,并分析临床资料、皮肤镜征象、检验指标对疗效的影响.[结果]本组难治性斑秃患者DPCP治疗治愈率、有效率分别为37.1%、44.8%,复发率为36.5%,复发后再治疗有效率为63.2%.26.8%患者出现较明显副作用如严重接触性皮炎、泛发性接触性皮炎、白癜风等.发病年龄早、病程长、稳定期、脱发面积大、斑秃类型为全普秃和带状型、皮肤镜黑点断发征像阴性者疗效差(P值分别是0.016、0.093、0.003、0.031、0.002和0.006).[结论]外用DPCP治疗难治性斑秃疗效确切且相对安全,尤其是对于脱发面积小、病程短、活动期时治疗效果佳.但目前DPCP疗法仍待进一步改良,以提高难治性斑秃的有效率.
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积极心理对慢性耳鸣患者情绪困扰的影响
[目的]探讨心理弹性及自尊两个积极心理因素在缓解慢性耳鸣患者情绪困扰中的作用,为耳鸣的临床管理提供新思路.[方法]通过心理弹性量表、自尊量表及抑郁-焦虑-压力简表了解慢性耳鸣患者的心理弹性、自尊、抑郁、焦虑及压力水平,再运用SPSS 24.0对入组的124名受试的数据进行相关分析及中介效应分析,后运用AMOS 24.0进行结构方程模型验证.[结果]①绝大部分患者并无严重的情绪困扰,心理弹性、自尊、抑郁、焦虑及压力均无显著的性别间差异(P>0.05);②心理弹性、自尊与抑郁、焦虑及压力均存在极显著的负相关关系,压力与抑郁及焦虑存在极显著的正相关关系(P<0.00);③心理弹性、自尊在压力与抑郁及焦虑间发挥着部分中介效应,而自尊也在压力与心理弹性间发挥着部分中介效应;④结构方程模型各项拟合指标良好.[结论]心理弹性及自尊两个积极心理因素可以通过部分中介效应缓和慢性耳鸣患者的情绪困扰,提高患者的积极心理品质应可作为耳鸣临床管理的新取向.
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血清BDNF和Ghrelin水平与冠心病介入术后并发抑郁症的关系
[目的]探讨血清脑源性神经营养因子(BDNF)、胃饥饿素(Ghrelin)水平与冠心病介入术后并发抑郁症的联系.[方法]选择2015年3月至2017年2月我院心内科收治的无抑郁症的冠心病患者142例,经PCI术后,按照汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分标准,患者分为PCI术后合并抑郁患者(HAMD评分≥7分,抑郁组,n=45)和PCI术后无抑郁患者(HAMD评分<7分,非抑郁组,n=97).比较两组患者PCI术治疗后3d血清中BDNF和Ghrelin水平,同时比较不同抑郁程度患者血清中BDNF和Ghrelin水平,另外分析血清BDNF和Ghrelin水平与HAMD评分的相关性.[结果]无抑郁症的冠心病患者经PCI术后有31.7%患者并发抑郁症;且术后并发抑郁组患者血清BDNF和Ghrelin水平均显著低于非抑郁组患者(P< 0.05);术后不同抑郁程度患者血清BDNF和Ghrelin水平之间的差异具有统计学意义(P<0.05),抑郁患者和严重抑郁患者血清BDNF和Ghrelin水平显著低于可能抑郁患者,同时严重抑郁患者血清BDNF和Ghrelin水平显著低于抑郁患者,且差异均具有统计学意义(P<0.05);冠心病患者PCI术后血清BDNF、Ghrelin水平与HAMD评分呈负相关(P<0.05).BDNF、Ghrelin的ROC曲线的分析结果显示血清BDNF AUC为0.99,临界值为0.16,敏感性和特异性分别为100%和98.97%.血清Ghrelin AUC为0.93,临界值为0.25,敏感性和特异性分别为95.6%和79.4%.[结论]血清BDNF、Ghrelin水平与冠心病患者PCI术后并发抑郁症患者密切相关,可以反映抑郁症的严重程度.
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不同程度近视患者脉络膜厚度相关影响因素分析
[目的]探讨不同程度近视患者黄斑中心凹下脉络膜厚度与等效球镜度、眼轴长度、眼压和血压的关系.[方法]采用横断面研究收集90例近视患者,其中低、中、高度近视各30例,使用相干光断层扫描仪的深度增强成像模式获得黄斑中心凹下脉络膜厚度、客观验光加主觉验光获得等效球镜度、非接触式眼光学生物测量仪测量眼轴长度、非接触式眼压计测量眼压、汞柱式血压计测量收缩压和舒张压,取所有受试者的右眼数据进行单因素方差分析、线性相关和回归分析.[结果]低、中、高度近视患者黄斑中心凹下脉络膜厚度(μm)分别为(295±75)、(223±66)、(176±50),三组患者间等效球镜度、眼轴长度、黄斑中心凹下脉络膜厚度的差异均具有统计学意义(P<0.05),眼压、收缩压和舒张压的差异均无统计学意义(P>0.05).高度近视组脉络膜厚度值与等效球镜度、眼轴、眼压、收缩压、舒张压均呈负相关(r=-0.721,-0.481,-0.415,-0.571,-0.598,P皆<0.05);中度近视组脉络膜厚度值与等效球镜度、眼轴、眼压呈负相关(r=-0.686,-0.551,-0.460,P皆<0.05),与收缩压及舒张压均不相关(P>0.05);低度近视组脉络膜厚度值与等效球镜度、眼轴、眼压、收缩压及舒张压均呈不相关(P>0.05).高度近视组中等效球镜度每增加-1 D脉络膜厚度减少24μm,眼轴每增加1 mm脉络膜厚度减少37 μm.中度近视组中等效球镜度每增加-1D脉络膜厚度减少16 μm,眼轴每增加1 mm脉络膜厚度减少21 μm.[结论]中度及高度近视患者的黄斑中心凹下脉络膜厚度随等效球镜度、眼轴、眼压的增加而变薄;血压是影响高度近视患者的黄斑中心凹下脉络膜厚度的重要影响因素之一.
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射频消融离体心肌及热场分布的实验研究
[目的]体外实验探索使用Cool-tipTM射频消融电极进行离体心肌组织射频消融的适宜条件,以及消融灶范围内温度变化趋势,为制定解除梗阻性肥厚型心肌病(HOCM)左心室流出道梗阻,提供安全可靠的射频消融条件参考.[方法]采用针尖裸露端2 cm的Cool-tipTM射频消融电极对30枚新鲜离体猪心进行射频消融,能量输出功率分别采用20、30、40、60和80W,消融时间为2 min、4 min,观察不同消融条件造成的心肌组织凝固范围和形态.采用实时温度测量设备测量消融电极针尖处及距其5 mm、10 mm的热场温度变化.[结果]单次能量输出造成的心肌消融灶范围为横径(0.8~2.3) cm×纵径(2.2~ 3.2) cm,横径变化范围更大;随输出功率及时间增加,心肌消融灶体积增大,为(0.8~ 8.1)cm3.消融过程中,各温度测量点温度均随时间增加而升高,针尖处温度迅速升高,高温度可达(128.5±0.3)℃;距针尖5 mm处高温度可达(98.1±0.4)℃,距针尖10 mm处高温度可达(72.9±0.2)℃.[结论]对离体心肌射频消融可得到随时间、功率改变而变化的消融灶,以射频电极为中心的向外部温度逐渐降低的热场分布,为临床采用超声引导下经皮室间隔射频消融技术治疗梗阻性肥厚型心肌病的参数条件选择提供基本依据.
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钬激光热效应的体外模型研究
[目的]输尿管镜下钬激光碎石术是目前输尿管结石腔内治疗的标准术式,钬激光在碎石的同时因热效应可能对输尿管造成损伤,为了研究不同功率配置的钬激光的热效应开展了本次研究.[方法]本次研究通过建立钬激光热效应体外模型进行研究.在手术室,恒定温度21℃,湿度60%,选用常见的钬激光设备,连接550 μ m的全新光导纤维,置入内径为10 mm的玻璃试管,并注入1 mL生理盐水,试管置于容积为300 mL的37℃温水中,并使用温度仪实时监测并记录光纤头周围2 mm水温及烧杯中水温.参数设定:共设定7组14种激光参数,持续激发120s,反复进行3次,连续监测并记录钬激光周围的水温及烧杯中的水温.[结果]同等功率情况下,高频低能组终达到的温度显著高于低频高能组,且随着功率的提升两组之间的温差逐渐变大.当功率为5W时,低能高频组平台期的高平均温度在(52.24±0.10)℃,而高能低频组的平台期高平均温度为(50.67±0.04)℃.而当功率为20 W时,低能高频组平台期的高平均温度在(75.71±0.12)℃,而高能低频组的平台期高平均温度为(67.61±0.03)℃.两组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05).[结论]临床上输尿管镜碎石术常用的钬激光功率会产生明显的热效应,局部温度可导致输尿管的不可逆损伤,同等功率条件下选择高能低频功率配置较低能高频可显著减少热效应.
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基于生物信息学途径探究肝细胞癌的关键基因
[目的]采用生物信息学方法探究肝细胞癌(HCC)发生的关键基因,望有助于了解HCC发生发展的分子机制.[方法]从GEO数据库中选择基因表达谱GSE76427,该数据集包含115例肝癌组织样本和52例肝癌临近非肿瘤组织样本.通过GE02R工具在线分析,筛选出肝癌组织中差异表达基因(DEG),利用GO数据库获取DEG的功能注释,利用KEGG数据库进行通路富集分析.基于STRING数据库,利用MCC算法,筛选具有高度连接性的关键基因,基于TCGA数据库在线软件分析关键基因的预后效应.[结果]共筛选出190个DEG,其中,上调基因有16个,下调基因有174个.功能富集分析显示,下调的差异基因显著富集于细胞对铬离子、锌离子的反应,也可能参与环氧化酶P450途径和氧化还原反应等功能.下调的差异基因可能参与视黄醇的新陈代谢和矿物质的吸收等通路功能.筛选出15个具有高度连接性的关键基因,发现CDC20、KIAA0101、PRC1、PTTG1和UBE2C等5个基因与乙肝相关性肝癌的患者总体生存率(OS)相关.PTTG1的诊断效能佳.[结论]CDC20、KIAA0101、PRC1、PTTG1和UBE2C可能在乙型肝炎病毒相关性肝癌的发生发展中发挥重要作用.
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肾透明细胞癌差异表达基因的筛选及其核心基因相应miRNA和lncRNA预测分析
[目的]筛选肾透明细胞癌(ccRCC)中差异表达基因并其相关miRNA和lncRNA,寻找可作为ccRCC诊断及治疗的生物标志物.[方法]通过从TCGA数据库和GEO数据库筛选ccRCC差异表达基因并取交集,对差异表达基因进行GO功能分析和KEGG通路富集分析,使用MCODE软件筛选出差异表达基因中的核心基因,并利用mirDIP数据库和STARBASE数据库对核心基因上游的miRNA和lncRNA进行预测.[结果]共筛选出427个差异表达基因,这些差异表达基因在GO功能分析上主要与催化活性、受体活性和细胞黏附分子活性等功能相关,KEGG信号通路富集结果则表明其主要与PPAR、Rap1以及细胞因子受体相互作用等信号通路相关.从这些差异表达基因中筛选出11个核心基因,并预测到134个相应miRNA,接着对5个与ccRCC总体生存率相关的miRNA在STARBASE中共预测到6个相应lncRNA.后将lncRNA、miRNA、核心基因以及相应信号通路在CYTOSCAPE中构建出一个互作网络.[结论]利用生物信息学技术将TCGA数据库与GEO数据库结合起来,筛选出ccRCC中差异表达基因,并对其中的核心基因进行miRNA与lncRNA预测分析,为后续找到可用于ccRCC临床诊断的靶标与治疗的靶点提供了有力帮助.
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广东部分地区人群HPV持续感染影响因素研究
[目的]探讨在广东地区影响人乳头瘤病毒(HPV)持续感染的环境因素.[方法]对14 594名妇女进行HPV基因分型初筛,1年后采用方便抽样的方法重新取样检测,以两次检测结果确定持续感染组,对照组则由HPV初筛阳性转阴性和第1或第2次HPV筛查结果为阴性的人群组成.通过流行病学调查问卷收集研究对象基本信息,分析环境因素与HPV持续感染之间的相关性.[结果]首次筛查HPV阳性人数为1 050人,阳性率为7.21%(1 050/14 559).1年后复检,共309名研究对象存在HPV持续感染,检测出16种HPV持续感染亚型,持续感染排在前4位的HPV亚型分别是HPV52(28.2%)、HPV58(18.8%)、HPV16(17.2%)、HPV18 (11.0%).非条件Logistic回归分析结果显示:怀孕次数(OR=2.10,95%CI=1.64~2.70,P=0.000)、初孕年龄(OR=1.39,95%CI=1.13~1.71,P=0.002)和同房前后清洗习惯(OR=0.48,95%CI=0.38~0.60,P=0.000)是HPV持续感染的独立影响因素.[结论]怀孕次数多和初孕年龄大是发生HPV持续感染的危险因素,同房前后清洗习惯能够降低HPV持续感染风险.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
1999 | 01 02 03 04 |