中山大学学报（医学科学版）杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보（의학과학판）
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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骨髓干细胞移植对dystrophin/utrophin基因双敲除鼠骨骼肌微观结构的影响
[目的]研究骨髓干细胞移植对Duchenne型肌营养不良(DMD)鼠(dko鼠)的骨骼肌微观结构的影响.[方法]获取4～5周龄C57BL/6鼠骨髓干细胞,体外培养3 d,以1.2×107个细胞/只静脉移植到7 Gy γ射线预处理的6只dko鼠(7～8周龄).8周后,检测移植鼠肌肉组织dystrophin蛋白表达、显微以及超微结构改变,并比较两组生存期.[结果]6只dko鼠骨髓干细胞移植8周后,约有7%骨骼肌肌纤维表达了dystrophin蛋白,骨骼肌组织的显微及超微结构有了一定的改善,治疗组生存期有明显延长.[结论]静脉移植同种、同系鼠骨髓干细胞的dko鼠,8周之后,部分骨骼肌细胞有缺失蛋白的表达、其微观病理变化有了一定改善,生存期得到延长;提示干细胞移植治疗DMD有效.
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小鼠卵丘细胞核移植到体内成熟卵浆构成的重构卵的发育
[目的]观察小鼠卵丘细胞核移植到体内成熟卵浆构成的重构卵的发育.[方法]昆明小鼠超排后获取体内成熟卵母细胞及卵丘细胞.成熟卵子去核后用将卵丘细胞核与精子直接注入,观察其受精和胚胎发育情况.[结果]卵子去核存活率为75.9%(362/477),注核存活率为39.8%(143/359),D1存活率为38.4%(138/359).39.9%(57/143)重构卵子成功排出一个极体并形成两原核,其卵裂率为80.7%(46/57).大部分重构胚发育到2～3细胞停滞,其中2个分裂至4细胞,无囊胚形成.[结论]将小鼠卵丘细胞核、精子同时移植到小鼠的体内成熟卵浆中,可以诱导极体排出,形成2原核+1极体的重构胚胎.重构胚胎大部分发育到2～3细胞即发生停滞,多到达4细胞期,发育潜能差.
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DMD基因内含子的重复序列与内含子不稳定性和基因缺失的关联
[目的]为了研究DMD基因内含子的重复序列与内含子不稳定性和基因缺失的关联,我们分析了缺失型DMD病人的连接片段的断裂点并研究了DMD基因内含子结构与内含子不稳定性之间是否存在相关.[方法]多重引物PCR法鉴定缺失型DMD患者,分别克隆46和51号外显子缺失后形成的连接片段,测定连接片段的序列;并用计算机分析DMD基因可以获得的全部内含子的结构特点.[结果]对46号和51号外显子缺失后形成的连接片段的序列分析表明,5'和3'端的断裂点均位于重复顺序,断裂点附近无小插入、小缺失或点突变.对连接片段的二级结构分析表明,所有的断裂点均位于单链发夹结构的非匹配区.对DMD基因可以获得的全部内含子的结构分析表明,在DMD基因全长内含子中重复序列占大约34.8%.大量重复序列的存在是许多内含子的重要结构特征.[结论]重复序列是DMD基因多数内含子的关键结构,与内含子的不稳定性相关.在原有DNA序列的基础上,单链发夹结构的形成增加了DMD基因的不稳定性,形成了基因断裂的基础,单链发夹结构的形成导致两个断裂点的靠近,终导致了基因缺失.
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LY294002对热预处理抗低钾诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡的影响
[目的]观察磷酸肌醇3位羟基激酶(PI3-K)的特异性阻断剂LY294002对热预处理抗低钾诱导的大鼠小脑颗粒神经元(CGN)凋亡的影响.探讨磷酸肌醇3位羟基激酶/AKT(PI3-K/AKT)信号转导通路是否参与了热预处理的保护作用及其机制.[方法]以低钾诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡为模型.用相差显微镜观察形态学,DNA琼脂糖凝胶电泳和Hoechst33258核染色分析神经元凋亡,二乙酸荧光素(FDA)染色法检测细胞的存活率.蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白的表达.[结果]热预处理(44℃,1 h)可以保护低钾诱导的CGN的凋亡,使神经元存活率由(33.2±4.1)%上升至(76.1±5.6)%(P＜0.01),核染色出现的核固缩和凋亡小体减少,DNA凝胶电泳DNA梯状条带明显减弱.LY294002(20 μmol/L)可以明显抑制热预处理的保护作用,使神经元的存活率降至(37.4±3.5)%(P＜0.01),核染色出现的核固缩和凋亡小体,DNA凝胶电泳出现梯状条带.热预处理可使HSP70、磷酸化AKT增高.LY294002可以抑制磷酸化AKT(p-AKT)的增加,而对HSP70则无明显影响.[结论]在低钾诱导CGN凋亡的模型中,LY294002可以抑制热预处理的抗凋亡作用,并可抑制p-AKT的增加,显示PI3-K/AKT信号转导通路参与了热预处理的保护作用,但该抑制作用可能不是通过抑制热休克蛋白(HSP)70的表达引起.
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海洛因成瘾大鼠心肌超微结构改变及凋亡检测
[目的]探讨海洛因成瘾大鼠心肌超微结构及心肌凋亡的改变.[方法]建立大鼠海洛因成瘾模型,采用透射电镜及脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端原位探针标记(TUNEL)观察心肌超微结构改变及心肌凋亡的情况.[结果]大鼠海洛因成瘾组电镜改变主要表现在核浓缩,核变小,核膜皱缩,染色质凝集成块,线粒体嵴排列紊乱、消失及空泡变等.TUNNEL检测结果显示海洛因成瘾大鼠心肌出现凋亡阳性细胞.[结论]上述改变说明海洛因对心肌可造成损害.
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SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究
[目的]在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定.[方法]克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GST-M融合蛋白.[结果]10份SARS患者恢复期血清均能识别M-GST融合蛋白,并在Mr=52 000附近出现特异性结合带;而10份正常人血清不与M-GST融合蛋白起反应.[结论]本研究获得了SARS冠状病毒GST-M融合蛋白,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性的结合反应,为研究SARS冠状病毒感染宿主细胞的过程和制备重组疫苗提供了条件.
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小剂量顺铂联合32P玻璃微球对小鼠S180瘤细胞的细胞毒作用
[目的]研究腹腔注射小剂量顺铂联合瘤内注射32P玻璃微球对小鼠S180实体瘤细胞的细胞毒作用,通过透射电镜观察比较不同治疗对肿瘤细胞的超微结构影响.[方法]将实验动物荷S180瘤小鼠28只随机分为4组,各组7只.4组小鼠随机定为空白对照组、单纯顺铂组、单纯32P玻璃微球间质注射组和顺铂联合32P玻璃微球间质注射组,治疗两周后取出肿瘤称瘤体质量,计算各组抑瘤率.分别取各组肿瘤组织行透射电镜观察,比较不同治疗对肿瘤细胞超微结构的影响.[结果]单纯顺铂组、单纯32P玻璃微球间质注射组及顺铂联合32P玻璃微球间质注射组抑瘤率分别为47%、40%、76%.小剂量顺铂联合32P玻璃微球间质注射组与两单独治疗组抑瘤率的差异有统计学意义(P＜0.01).电镜观察联合组细胞死亡率达75%,绝大部分肿瘤细胞消失,呈大片坏死结构.[结论]腹腔注射小剂量顺铂联合32P玻璃微球间质注射内放射治疗对小鼠S180实体瘤细胞的细胞毒作用较单独应用有明显增强.
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肾小管上皮细胞fractalkine的表达介导对巨噬细胞的趋化作用
[目的]探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK-52E上调表达趋化因子fractalkine的时间和剂量效应,并观察肾小管上皮细胞fractalkine表达是否介导了对巨噬细胞的趋化作用.[方法]应用免疫荧光细胞化学技术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹法检测TNF-α诱导的NRK-52E fractalkine表达,应用Transwell装置观察NRK-52E对大鼠巨噬细胞株RAW 264.7的趋化效应,以及fractalkine中和抗体对趋化效应的影响.[结果]正常培养的NRK-52E可表达少量的fractalkine,TNF-α(40 ng/mL)刺激后1 h,fractalkine的mRNA和蛋白表达增加尚不明显,在刺激后6 h表达即明显增加,持续至24～48 h.10 ng/mL TNF-α即可诱导fractalkine mRNA和蛋白表达增加,20 ng/mL及40 ng/mL TNF-α诱导fractalkine表达增加的效应更加明显.NRK-52E fractalkine表达上调可明显增强其趋化巨噬细胞的效应,而fractalkine中和抗体可明显抑制此种趋化效应.[结论]TNF-α能够以时间和剂量依赖方式上调肾小管上皮细胞fractalkine的mRNA和蛋白表达,且fractalkine在介导肾小管上皮细胞对巨噬细胞的趋化作用中起重要作用.
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H-89和wortmannin对霍乱毒素促进受损视网膜节细胞再生作用的影响
[目的]研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89和磷酸肌醇3-激酶(PI3-K)特异抑制剂wortmannin对霍乱毒素(CTx)促进受损视网膜节细胞(RGCs)再生的影响,探讨CTx促进受损视网膜节细胞(RGCs)再生的作用机制.[方法]成年金黄地鼠近侧切断视神经(ON),移植一段自体坐骨神经(SN)与ON近侧残端缝接,玻璃体内注射给药.20只动物分4组,每组5只.注射CTx为CTx组,注射CTx和H-89为CTx+H组、注射CTx和wortmannin为CTx+W组、不给药组为对照组.用粒蓝(GB)逆行标记再生的RGCs,取视网膜于荧光镜下记数.[结果]动物存活4周后,对照组、CTx组和CTx+H组再生节细胞平均数(个/视网膜)分别为:(1 431±352),(2 567±883)和(1 606±293)个/视网膜(n=5).CTx+H组与对照组比较差异无显著性(P＜0.05),而与CTx组比较有显著性差异(P＜0.05),表明H-89可抑制CTx的促再生作用;CTx+W组再生节细胞数为:(1 872±262)个/视网膜(n=5),与对照组和CTx组比较差异均有显著性(P＜0.05),提示wortmannin对CTx有部分的抑制作用.[结论]CTx可能是通过PKA-CREB通路实现对受损RGCs的促再生作用,PI3-K-Akt通路可能是PKA-CREB通路的下游分支.
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巨噬细胞移动抑制因子与鼻咽癌微血管生成和淋巴结转移的关系
[目的]研究巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在鼻咽癌组织中的表达水平及其与肿瘤新生血管的关系,探讨细胞因子在鼻咽癌细胞侵袭转移过程中的作用.[方法]收集1999-2003年期间45例确诊未治的鼻咽原发癌活检组织标本,用LSAB免疫组化法检测鼻咽癌组织中MIF和VEGF表达,计数癌组织中新生血管热区的CD34阳性微血管密度(intratumoral microvessel density,IMD),并将各检测指标与患者的病理及临床资料相联系.[结果]鼻咽原发癌组织中,癌细胞MIF和VEGF的阳性表达率分别为78%(35/45)和71%(32/45),伴有淋巴结转移的癌组织中MIF和IMD水平均高于无淋巴结转移的癌组织,P=0.029,P=0.026,MIF阳性组的IMD计数为(35.1±13.3)/高倍视野,明显高于MIF阴性病例的(20.9±10.2)/高倍视野,P=0.003.以Schmincke型生长方式分布的癌细胞MIF表达水平(67.4%±35.2%)高于以Regaud型方式分布的癌细胞(32.9%±29.7%),P=0.007.癌细胞MIF与VEGF表达以及IMD计数均显示正相关关系,P＜0.05.但癌细胞VEGF的表达与患者性别、年龄、病理组织学分型以及临床分期无统计学显著意义.[结论]MIF在鼻咽癌细胞的淋巴结转移过程中可能具有重要的促进作用,并可能是影响肿瘤性微血管生成和癌细胞VEGF表达的重要因素.
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运用蛋白质组学技术研究EB病毒诱导鼻咽癌细胞CNE2表达变化的蛋白质
[目的]寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质,为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索.[方法]分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质,通过双向电泳分离.运用软件比较分析上述两组的蛋白质表达图谱,寻找表达有差异的蛋白质点.从凝胶上切下差异蛋白质点,通过基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定.[结果]图像分析显示,EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞之间存在一些明显差异的蛋白质点.通过MALDI-TOF-MS成功地鉴定了其中4个蛋白质点,EB病毒感染CNE2细胞后蛋白质GRP78和硫氧还蛋白过氧化物酶1表达上调,蛋白质肌动蛋白胞浆组分2和蛋白酶体l链表达下调.[结论]EB病毒感染鼻咽上皮细胞后引起生物学变化的分子机制可能包括:①诱导细胞大量合成蛋白质以促进增生,同时上调蛋白质GRP78的表达而抗凋亡;②提高细胞内氧化状态而诱导蛋白质硫氧还蛋白过氧化物酶1的表达,并可能通过该蛋白质调控NF-κB和AP-1来影响细胞生长.
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DEN2重组E蛋白单克隆抗体的制备及其生物学活性
[目的]研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性.[方法]用纯化的Pichia pastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株.采用硫酸铵沉淀法纯化腹水中的McAbs,用ELISA、IFA、Western Blot和空斑减数中和实验等鉴定McAbs的各种生物学活性.[结果]用ELISA、IFA检测证实5株杂交瘤细胞产生的McAbs与DEN2重组E蛋白和DEN全病毒均有较高的亲和力;Western Blot分析发现其中3株杂交瘤细胞(3G3,6G11,4E3)分泌的McAbs能与其相对分子质量Mr=(66～69)×103的DEN2重组E蛋白结合.空斑减数中和实验证实所获得的单克隆抗体具有中和登革病毒感染C6/36细胞的作用.[结论]成功地制备了5株抗登革病毒E蛋白特异性的McAbs,为进一步研究E蛋白的结构和功能及临床诊断试剂盒研发打下了基础.
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TNFα对体外培养的人脂肪细胞葡萄糖摄取和IRS-1酪氨酸磷酸化的影响
[目的]探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取和胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的影响,为多囊卵巢综合征(PCOS)的胰岛素抵抗(IR)病因学研究提供新的实验依据.[方法]脂肪细胞葡萄糖摄取的测定采用3H标脱氧右旋葡萄糖(2-[3H]DG)吸收法,IRS-1酪氨酸磷酸化的检测采用免疫沉淀、Western印迹和增强化学发光蛋白免疫印迹法及图像分析.[结果]①胰岛素(100nmol/L)作用下,TNF α刺激浓度分别为0、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL时,脂肪细胞2-[3H]DG的摄取分别为(652±203)U,(609±172)U,(511±135)U和(404±168)U,当TNFα刺激浓度达20 ng/mL时,脂肪细胞对葡萄糖摄取的降低有显著性差异(P＜0.05).②胰岛素(100nmol/L)刺激下IRS-1的酪氨酸磷酸化在TNFα(5 ng/mL)作用时(74.50%±16.86%)较无TNFα作用(94.00%±14.70%)有所降低,但无显著性差异;当TNFα刺激浓度分别为10 ng/mL(31.16%±10.44%)和20 ng/mL(27.33%±9.63%)时,胰岛素(100nmol/L)刺激后IRS-1的酪氨酸磷酸化明显降低(P＜0.001).[结论]①TNFα刺激浓度的升高可抑制体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取.②TNFα可抑制体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的IRS-1的酪氨酸磷酸化,并存在一定的量效关系,可能阻碍了胰岛素的受体后信号传导并与IR有关.
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人AGM区基质细胞系的建立及其生物学特性
[目的]建立人主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞系,研究其生长特性及表面标志的表达.[方法]取孕30～35 d的人胚胎分离培养AGM区基质细胞,传代培养成系并检测其增殖能力,应用流式细胞术、免疫荧光方法检测其造血相关表面标志和细胞外基质蛋白成分.[结果]人AGM区基质细胞呈成纤维样形态,指数生长期倍增时间约为16 h.流式细胞仪检测结果显示CD31、CD34、CD45在人AGM区基质细胞表面为阴性表达,而CD29、CD44、CD105、CD166均为阳性表达.免疫荧光检测结果显示AGM区基质细胞表达细胞外基质蛋白Tenascin、Fibronectin、Laminin及α-SMA.[结论]人AGM区基质细胞系呈现造血组织特异的相关分子表达特征,可以作为研究造血发生机理的模式细胞.
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心脏瓣膜置换术28年回顾(附2 000例报告)
[目的]报道28年来中山大学附属第一医院2 000例瓣膜置换术的结果和体会,以进一步提高手术疗效.[方法]1976年5月至2004年8月共为2 000例心脏瓣膜病患者施行了瓣膜置换术.手术方式:二尖瓣替换术(MVR)1 325例(66.2%),主动脉瓣替换术(AVR)324例(16.2%),主动脉瓣及二尖瓣同期替换术(AVR及MVR)322例(16.1%),三尖瓣替换术(TVR)29例(1.5%).术后随访1个月～28年,平均(10.2±5.3)年,失访283例(15.1%).[结果]术后早期死亡129例(6.45%),其中1976年至1994年为95例(9.5%),1995年至2004年为34例(3.4%),前后两组差别有统计学意义(x2=12.62,P＜0.001)晚期死亡288例(1.9%病人年),存活病人心功能明显改善.[结论]选择适当的手术时机,完善和改进体外循环技术,加强术中的心肌保护,不断改进和提高手术技巧,对适宜病例施行保留瓣下结构的二尖瓣替换手术(MVRP),对合并三尖瓣中、重度关闭不全的病例予以三尖瓣整形术,加强术后监护,及时处理早期并发症是提高手术疗效的重要措施.为提高瓣膜置换术后病人的远期生存率,尤其应该重视加强健康宣教及门诊随访,并及时调整抗凝剂用量.
关键词： 人工心脏瓣膜/外科学 随访 -
中山大学附属第一医院两个阶段肾移植效果比较(附2 562例报告)
[目的]总结中山大学附属第一医院肾移植专科重新组建前后两个阶段肾移植经验.[方法]1972年12月至2004年4月,我院共行肾移植2 562例,根据肾移植专科组建和发展情况,以手术时间1998年1月为界将其分为A组(n=1 318)和B组(n=1 244),比较两个阶段的肾移植效果.[结果]超急性排斥21例:A组17例(1.3%)、B组4例(0.3%)(P＜0.01=0.006 6);加速排斥61例:A组50例(3.8%)、B组11例(0.9%)(P＜0.001);急性排斥298例:A组208例(15.8%)、B组90例(7.2%)(P＜0.001);两组各种排斥发生率差异均有统计学意义(P＜0.001).血管并发症51例:A组37例(2.8%)、B组14例(1.1%)(P＜0.01=0.002 3);输尿管梗阻30例:A组21例(1.6%)、B组9例(0.7%)(P＜0.05=0.040 8);切口感染130例:A组99例(7.5%),B组31例(2.5%)(P＜0.001);肺部感染144例:A组79例(6.0%),其中死亡34例(43%),B组65例(5.2%),死亡18例(27.7%);两组肺部感染死亡率差异具有统计学意义(P＜0.05=0.042 1).A、B两组1年人/肾存活率分别为90.0%/87.2%、97.6%/95.0%,3年人/肾存活率分别为86.1%/84.0%、89.2%/86.1%.[结论]我院肾移植外科技术已日益成熟,良好的组织配型及新型免疫抑制剂的应用,减少了排斥反应及其它并发症的发生,是取得良好肾移植效果的保证.高龄、儿童、下尿路异常等患者肾移植的成功实施,推动了肾移植临床研究的进展,其远期效果仍在观察中.
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青光眼睫状体炎综合征超声生物显微镜图像特征
[目的]研究青光眼睫状体炎综合征患者超声生物显微镜(UBM)图像特征,从而对其发病机制作初步的探讨.[方法]收集22例青光眼睫状体炎综合征患者,在炎症活动期作双眼UBM检查,检查内容包括前房、房角、后房、睫状体、玻璃体基底部,并将检查结果与临床表现相联系.[结果]22例患者发病时眼压[平均(40.6±13.3)mmHg],24～62 mmHg,裂隙灯显微镜检查均可见角膜背羊脂状沉着物,4眼(18.2%)有房水混浊.除1例对侧眼UBM表现正常外,21例双眼UBM图像均显示为轻重不等的前部及中间葡萄膜炎的表现,而眼压升高眼炎症渗出往往较对侧眼多,房水混浊和睫状体水肿多见于眼压升高眼.[结论]UBM可以显示青光眼睫状体炎综合征中睫状体炎症的情况,大部分单眼眼压升高者对侧眼也有睫状体炎改变,表明青光眼-睫状体炎综合征可能是双眼前部和中间葡萄膜炎性疾病,炎症较重眼可以引起小梁网炎症或房水分泌增多从而导致眼压升高.
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乌司他丁对化疗后病人单肺通气时炎性因子的影响
[目的]探讨乌司他丁对肺癌化疗后病人单肺通气时炎性因子的影响.[方法]择期行肺癌手术病人30例,按美国麻醉医师协会(ASA)分级,Ⅰ～Ⅲ级;随机分为对照组(C组)和乌司他丁组(U组),每组各15例.U组给予乌司他丁1万U·kg-1,于麻醉诱导后缓慢静注,C组用等量生理盐水代替.分别于麻醉诱导后(S1),单肺通气40 min(S2),单肺通气90 min(S3),术毕双肺通气30 min(S4)时,术后24 h(S5)分别采取外周静脉血样测IL-8和IL-10质量浓度.[结果]两组IL-8于S3、S4、S5时均显著升高(P＜0.05),和C组比较,U组S3、S-4时均显著降低(P＜0.05),两组IL-10于S3、S4、S5时均显著升高(P＜0.05),和C组比较,U组S 3、S4时均显著升高(P＜0.05).[结论]乌司他丁可减轻化疗后病人单肺通气期间炎性细胞因子IL-8的生成和释放,增强抗炎性细胞因子IL-10的生成和释放,从而减轻病人的炎症反应.
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中国人前列腺特异性膜抗原基因的克隆及鉴定
[目的]克隆中国人前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)的cDNA全长,并将其连接到原核表达载体pET-30(a),构建PSMA的原核表达重组子.[方法]从前列腺癌患者活检组织中提取RNA,利用PSMA的cDNA中的EcoR Ⅰ位点,将PSMA分成两段分别做RT-PCR,然后再将其分别连接到pET-30(a)中,从而得到完整PSMA的cDNA的原核表达重组子pET-30(a)-PSMA,并对其进行鉴定.[结果]首次成功克隆到全序列的中国人PSMA的cDNA,并构建了PSMA的原核表达重组子pET-30(a)-PSMA,为以后的PSMA表达、纯化及其抗体库的筛选奠定了基础.[结论]分段克隆基因,然后将基因分别连接到同一载体,是有效地对一些长片段基因进行克隆的方法之一.
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广东新生儿接种重组乙型肝炎疫苗的免疫效果
[目的]观察新生儿接种重组酵母乙型肝炎(乙肝)疫苗后的免疫持久性及预防效果.[方法]采用前瞻性研究的方法,对166例广东新生儿接种重组酵母乙肝疫苗后的免疫应答情况及副作用进行定群随访.按母亲是否为HBsAg阳性,将观察对象分为HBsAg阳性组31例及HBsAg阴性组135例、比较两组抗HBs的产生情况及副作用.[结果]①幼儿1岁时,总应答率为90.4%(150/166).HBsAg阳性组和HBsAg阴性组的应答分别为25例(80.6%)和125例(92.6%),比值比(OR)及其95%可信区间为0.33(0.11,1.00),差异无统计学意义.②幼儿3岁时,总应答率为92.2%(153/166).HBsAg阳性组和HBsAg阴性组的应答分别为26例(83.9%)和127例(94.1%),OR=0.33(0.10,1.08),差异无统计学意义.③1岁时产生应答的155例新生儿中,在3岁时均无抗HBs阴转现象.HBsAg阳性组和HBsAg阴性组的无反应儿在补种疫苗后的应答率分别为25%(1/4)和20%(2/10).④疫苗接种过程中无严重不良反应.[结论]国产重组酵母乙肝疫苗具有良好的安全性及近期保护效果.
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人眼高阶像差与年龄的关系及左右眼对称性研究
[目的]研究人眼高阶像差(higher-order aberration,HOA)随年龄增长的变化规律以及HOA在左右眼的对称性.[方法]用一基于Hartmann-Shack原理的Zywave波前像差仪测量了35例正常人69眼的HOA,评估时所取的瞳孔直径为6 mm.根据测试对象年龄的不同分为3组:青年组(＜35岁),中年组(35岁～54岁),老年组(＞54岁),计算各组高阶像差的均方根(root mean square,RMS)值,并对3组进行单因素方差分析,对HOA与年龄作相关分析,研究高阶像差随年龄的变化规律;同时对左右眼各Zernike系数作相关分析,以研究高阶像差在左右眼的对称性.[结果]总体高阶像差(HOA)、球差、三阶与四阶像差与年龄均有相关关系(P＜0.05),彗差与五阶像差与年龄的关联性不大(P＞0.05);左右眼的15项Zernike系数中有8项存在关联性(P＜0.05).[结论]高阶像差随年龄的增长而增加,左右眼的高阶像差存在一定程度的对称性.
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V征斜视的眼球旋转状态
[目的]研究V征斜视的眼球旋转状态.[方法]对住院手术的22例V征斜视患者手术前和术后一周行眼底照相测量黄斑-视乳头夹角,同时观察记录术前和术后一周的第一眼位和向上、向下注视时斜视度、眼球运动和下斜肌功能.[结果]17例(17/22)为双眼眼球外旋转,4例(4/22)单眼眼球外旋转,1例(1/22)眼球无旋转;22例患者术前右眼和左眼的黄斑-视乳头夹角分别为(15.67±5.72)°、(16.59±6.69)°,与正常人群相比,差异有非常显著性意义(P＜0.001).术后一周时右眼和左眼的黄斑-视乳头夹角分别为(5.24±5.87)°和(7.17±5.40)°,与正常人群无明显差异(P＞0.5);术前向上和向下注视时斜视角差值为(23.1±6.8)△,术后一周时的差值为(2.0±2.25)△;术前所有患者均合并双眼下斜肌功能亢进,术后1周时除1例仍有轻度功能亢进外,余21例下斜肌功能正常.[结论]V征斜视患者有眼球的客观外旋转,下斜肌减弱手术后眼球客观旋转状态正常.
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聚六亚甲基碳酸酯聚氨酯脲的抗凝血性
[目的]评价自合成的聚六亚甲基碳酸酯聚氨酯脲(polyhexymethylene carbonate polyurethane urea PCU)的抗凝血性.[方法]使用动态凝血时间、血小板黏附、微球柱、抗凝血酶活性等试验,将PCU的实验结果与Chronoflex(美国聚氨酯牌号)和玻璃相比较.[结果]动态凝血时间的试验PCU与Chronoflex的凝血速度比玻璃慢,凝血程度比玻璃小.血小板黏附试验和微球柱试验的试验PCU和Chronoflex样品表面黏附的血小板数目比玻璃少,变形程度比玻璃轻.抗凝血酶活性的试验PCU和Chronoflex样品的白陶土部分凝血酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间的测定值均大于玻璃.[结论]PCU具有良好的抗凝血性能,并且抗凝血性能与美国产品Chronoflex很相近.
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腮腺癌肉瘤综合治疗与临床病理、免疫组化和DNA含量分析
[目的]探讨腮腺癌肉瘤病理特点、生物学特性和有效治疗手段.[方法]2例腮腺癌肉瘤病者作了患侧腮腺全切除和总量为65 Gy至70 Gy辅助放疗.组织标本行病理学、免疫组化和流式细胞仪(FCM)检查.[结果]光镜下肿瘤组织含恶性上皮成份(癌)和恶性间叶成份(肉瘤),上皮样细胞cytokeratin阳性而间叶样细胞为vimentin阳性.FCM分析肿瘤DNA均为异倍体并为高S期增殖比率.[结论]腮腺癌肉瘤为高度恶性肿瘤,免疫组化检查为诊断本病的可行项目;早期综合治疗可以延长病者生存期.
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明胶酶在舌鳞癌发生、演进中的表达和意义
[目的]通过检测明胶酶在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和鳞癌组织中的表达,探讨其在舌鳞癌的发生和演进中的变化和作用.[方法]应用免疫组织化学的方法检测14例口腔正常黏膜、22例白斑、7例白斑癌变和59例舌鳞癌组织中明胶酶(MMP-2和MMP-9)蛋白的表达.[结果]①MMP-2在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和舌鳞癌组织中阳性率分别为29%、50%、86%和83%;MMP-9在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和舌鳞癌组织中阳性率分别为50%、100%、100%和83%.②正常黏膜组织中MMP-2的阳性率明显低于白斑癌变(P=0.016)和舌鳞癌组织(P=0.000);白斑组织中MMP-2的阳性率明显低于舌鳞癌组织(P=0.001);白斑癌变组织中MMP-2的阳性率明显低于伴有淋巴结转移的舌鳞癌组织(P=0.019);舌鳞癌组织中无淋巴结转移组的阳率明显低于伴有淋巴结转移组(P=0.006).③正常黏膜组织中MMP-9的阳性率明显低于白斑(P=0.021)和白斑癌变组织(P=0.016);白斑和白斑癌变组织中MMP-9的阳性率低于无淋巴结转移的舌鳞癌(P=0.002和0.007);舌鳞癌组织中无淋巴结转移组的阳率明显低于伴有淋巴结转移组(P=0.033).[结论]明胶酶在舌鳞癌发生和演进过程中表达明显增加,并可能在这一过程中起着重要作用.
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两个常染色体显性遗传先天性白内障家系突变热点筛查
[目的]对2个常染色体显性遗传先天性白内障中国家系进行基因突变热点筛查,以了解这两个家系的先天性白内障是否与文献报道的17个突变热点相关.[方法]对两个家系共20名成员(包括患者11人,非患者9人)抽取外周血提取基因组DNA,针对截至2003年1月为止国外文献报道的与常染色体显性遗传先天性白内障发病相关的10个基因上的17个突变热点,包括CRYAA(ARG116CYS),CRYAB(del450A),CRYBA1(EX3-4 DEL),CRYBB2(GLN155TER),CRYGC(THR5PRO,5-BP DUP at NT226),CRYGD(ARG14-CYS,PRO23THR,ARG58HIS,ARG36SER),GJA3(ASN63SER,PRO187LEU),GJA8(GLU48LYS,PRO88SER),BFSP2(ARG287TRP)及MIP(GLU134GLY,THR138ARG),设计引物使PCR扩增片段涵盖上述热点,对扩增产物进行序列分析,检测这11名患者在突变热点上是否有相应的序列改变.[结果]20名被检者的10个基因片段序列与GenBank发表序列相同,在17个突变热点均未发现相应基因突变.[结论]初步排除这个家系的先天性白内障与17个突变热点相关.
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新型镍钛器械ProTaper的临床评价
[目的]评价用新型镍钛机用根管器械ProTaper预备弯曲根管的临床疗效.[方法]选取有弯曲根管的牙髓炎和根尖周炎患牙64例,采用ProTaper预备、侧向加压充填法充填根管,根据治疗前、中、后的X线片评价根管预备和充填的效果.[结果]ProTaper能很好地维持根管的弯曲度和走向,根管的锥度和流畅度极佳,所有患牙均无根管偏移、根尖阻塞、台阶形成等并发症发生,且操作时间短,少有术后疼痛的发生;有2例器械折断.[结论]ProTaper预备弯曲根管快速、高效,成形效果好,但须注意预防器械折断.
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中国人的代谢综合征研究展望
代谢综合征在中国正不断上升,提高对这一综合征诊断标准的认识,将对中国人代谢综合征的防治有重要意义.代谢综合征进展为2型糖尿病是一个令人担忧的结局,但幸运的是这一进程是可预防的.一旦糖尿病的诊断确立,则应用现代的防治手段进行干预.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
