挤压伤大鼠血清促心脏成纤维细胞增殖作用

[目的]观察挤压伤大鼠血清对培养的心脏成纤维细胞的增殖作用.[方法]培养 1～ 3 d龄 SD大鼠心脏成纤维细胞,观察挤压伤大鼠血清和正常大鼠血清对培养的心脏成纤维细胞数量、蛋白质含量、 [3H]-胸腺嘧啶核苷 ([3H]- TdR)和 [3H]-脯氨酸 ([3H]- Proline)掺入的影响.[结果]与正常大鼠血清组比较,挤压伤大鼠血清使培养的心脏成纤维细胞的数量(× 109/L)、总蛋白含量(μ g/2mL)分别由 0.33± 0.01、 163.3± 24.1增加至 0.50± 0.02和 324.6± 52.2, [3H]- Proline 和 [3H]- TdR掺入后测得的每分钟脉冲数则分别由 1 211.7± 140.7、 1 104.8± 113.9上升至 2 000.7± 96.2和 2 066.2± 223.5.[结论]肢体挤压伤大鼠血清可促进培养的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成.

肾上腺素能受体阻滞剂对心肌梗死后心肌局部α1受体密度及电生理稳定性的影响

[目的]观察β受体(β-AR)阻滞剂(美托洛尔)及α 1受体(α 1-AR)阻滞剂(哌唑嗪)对急性心肌梗死后心室肌α 1-AR密度变化及心室有效不应期离散度( VERP-D)的影响.[方法]健康成年雄性新西兰兔 24只,随机分成 4组,每组各 6只:正常对照组、安慰剂组、美托洛尔组、哌唑嗪组.建立急性心肌梗死模型,自术后第 1天起,各组分别予相应药物口服,疗程 7 d.疗程结束后再次开胸,用 S1S2负向扫描法测定 VERP-D,然后取心室肌组织,检测心室正常区、缺血区α 1-AR、以及β-AR密度.[结果]①心肌梗死后安慰剂组心室肌缺血区和正常区的α 1-AR及β-AR均上调( P< 0.01);②美托洛尔组上述区域α 1-AR及β-AR仍上调( P< 0.01),但在正常区α 1-AR上调幅度大于安慰剂组( P< 0.01),β-AR上调幅度则缩小( P< 0.05);③哌唑嗪组上述区域α 1-AR下调( P< 0.01),β-AR虽上调,但与安慰剂组比较上调幅度无明显变化( P >0.05);④心肌梗死后心室肌组织 VERP-D增大( P< 0.01),口服美托洛尔或哌唑嗪均可使 VERP-D增大的幅度缩小( P< 0.01),但两者之间的差别无统计学意义( P >0.05).[结论]心肌梗死后心室肌组织α 1-AR活性增强;缺血状态下应用β受体阻滞剂可能会使心肌α 1-AR功能进一步亢进,参与心肌梗死后一系列病理生理过程;美托洛尔或哌唑嗪可使兔实验性心肌梗死后 VERP-D增大幅度缩小.

脑活素激发细胞内钙升高介导大脑皮质神经元死亡

[目的]探讨脑活素对原代培养大鼠大脑皮质神经元的作用及机制.[方法]采用原代培养的胎鼠大脑皮质神经元,观察脑活素对大脑皮质细胞形态学及生存的影响.用 FDA/PI染色法测定细胞生存率,并用 Fluo3/AM与带有自动加样装置的荧光成像 96孔板测量仪测定细胞内钙浓度( [Ca2+ ]I)的变化 [结果]脑活素为 0、 0.1、 1.0、 2.5、 5.0、 10 mL/L时,其存活率分别为 100%、 43%± 3%、 38%± 5%、 32%± 3%、 22%± 2%、 19%± 1%.地佐环平( MK-801)预处理后 , 其存活率分别为 91%± 4%、 76%± 5%、 75%± 3%、 58%± 5%、 54%± 3%、 50%± 4%,可保护脑活素的神经毒性.同时脑活素浓度依赖性地触发细胞内钙浓度升高,而 MK-801可降低脑活素导致的细胞内钙浓度的升高.[结论]脑活素对原代培养的大鼠大脑皮质神经元具有毒性作用,其机制是通过升高细胞内钙介导的.

日本血吸虫 Mr=26×103谷胱甘肽S-转移酶基因植物表达载体的构建

[目的]构建日本血吸虫 Mr=26× 103谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)基因的植物表达载体,为研制血吸虫病口服疫苗做前期准备.[方法]采用 PCR技术,扩增目的基因 GST,与植物表达载体 pBI 121连结,构建重组表达载体 pBI 121-GST.[结果]通过 PCR检测和双酶切鉴定以及重组质粒序列测定,结果表明,该目的基因片段已被整合到植物表达载体 pBI 121中,通过电激转化,将质粒转入农杆菌菌株 LBA4404、 EHA105中.[结论]本实验成功地构建了日本血吸虫 Mr=26× 103谷胱甘肽 S 转移酶 GST基因的植物表达载体.

Wilson蛋白N端多克隆抗体的制备和纯化

[目的]制备并纯化 Wilson蛋白 (ATP7B)的 N端多克隆抗体,为进一步研究其基因表达蛋白的结构和功能打下基础.[方法]RT-PCR扩增目的基因, GST基因融合载体表达融合蛋白 , 亲和层析进行蛋白纯化, Thrombin酶切并收集目的蛋白,免疫家兔, ELISA 检测抗体滴度 , 离子交换层析纯化抗体血清, Western blot检测抗体特异性.[结果]ELISA方法检测抗体滴度达到了 1∶ 2 500, Western blot表明该抗体有很好的特异性,非变性 SDS-PAGE显示纯化后的抗体 IgG纯度很高.[结论]应用该方法成功制备了 Wilson病蛋白质量的多克隆抗体.

美多巴对帕金森病大鼠模型脑多巴胺转运体影响的自显影

[目的]研究美多巴对帕金森病大鼠模型脑多巴胺转运体的影响.[方法]立体定位右侧纹状体注射 6 羟多巴胺制备偏侧帕金森病大鼠模型 ,模型成功后给予美多巴灌胃治疗 5周.分 4组 (正常组、帕金森病模型大鼠组、帕金森病模型大鼠经美多巴治疗组、帕金森病模型大鼠未治疗组 )行脑多巴胺转运体 99mTc-TRODAT-1放射自显影 ,每组 4只.图像分析得到左、右侧纹状体及小脑的光密度值 ,计算左、右侧脑多巴胺转运体的特异性放射性摄取比值 (纹状体 /小脑-1),比较各时间点 (正常、术后 4周、术后 9周 )多巴胺转运体比值的变化.[结果]正常大鼠脑多巴胺转运体对 99mTc-TRODAT-1的特异性摄取比值左、右两侧无显著性差异 ;术后 4周大鼠成为帕金森病模型后 ,大鼠两侧脑多巴胺转运体的比值较正常均降低 ,右侧 (损毁侧 )降低明显.术后 9周未治疗组帕金森病模型大鼠双侧脑多巴胺转运体的比值均较 4周刚成为模型时明显升高 ;经美多巴治疗后 ,双侧的比值均较未服药组明显降低 ,右侧 (损毁侧 )降低幅度更大.[结论]长期美多巴治疗可能会使帕金森病模型大鼠脑多巴胺转运体的数量减少.

分泌型磷脂酶 A2非酶活性依赖的神经元保护作用

[目的]鉴定中华眼镜蛇 (Naja naja atra)蛇毒中的神经保护因子,研究其抗神经元凋亡作用机制.[方法]连续柱层析法分离、纯化蛇毒神经保护因子.用 Edman N 末端测序法取得蛋白质一级序列, BLAST软件进行蛋白质鉴定.使用低钾诱导体外培养小脑颗粒神经元凋亡模型,研究其神经元保护作用.[结果]从中华眼镜蛇蛇毒中分离出一种 , 可浓度依赖性地抑制低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡.神经保护因子 (Cobra venom neuronal protective factor, CVNPF)此神经保护因子 N 末端 20个氨基酸序列为 NLYQFKNMIQCTVPSRSWWD , BLAST序列同源比对确定该保护因子为中华眼镜蛇分泌型磷脂酶 A2(secreted phospholipase A2, sPLA2).进一步发现来源于蜂毒、莫桑比克眼镜蛇 (Njaja naja mossambica)蛇毒、西部菱斑响尾蛇 (Crotalus atroxalso)蛇毒的 sPLA2也对小脑颗粒神经元具有保护作用;其作用不为磷脂酶 A2酶活性抑制剂 7,7-Dimethyleicosadienoic acid (DEDA) 和 Manoalide阻断.[结论]CVNPF属于 sPLA2.多种 sPLA2可以抗神经元凋亡,其保护机制与磷脂酶 A2的酶活性无关.

环缩酚肽抑制小鼠血管增殖性视网膜病变的研究

[目的]观察两种环缩酚肽的衍生物 (Hep-A)和 (Hep-B)对氧诱导的血管增殖性视网膜病变的抑制作用.[方法]将鼠龄为 7 d(P7)的 C57BL/6幼鼠置于体积分数 75%的氧气箱中连续生活 5 d,建立氧诱导的血管增殖性视网膜病变模型.在 12 d(P12)幼鼠回到正常大气环境中,同时开始给小鼠皮下注安慰剂(第 1组, n=23)、 Hep-A 10 mg/kg(第 2组, n=22)、或者 Hep-B 10 mg/kg(第 3组, n=22),每天两次,持续 5 d.在 17 d(P17)取鼠眼进行冰冻切片和 GSA(griffonia simplicifolia lectin B4)染色,或作荧光素灌注和视网膜平铺片,用图象分析软件定量计算视网膜无灌注区和新生血管的面积.[结果]病理检测视网膜新生血管面积:第一组为 (0.51± 0.08)mm2/鼠( n=7);第 2组为 (0.11± 0.01)mm2/鼠 (n=8);第 3组为 (0.16± 0.02)mm2/鼠 (n=8).视网膜平片检测视网膜新生血管面积:第 1组为 (1.36土 0.02)mm2/眼 (n=32),第 2组为 (0.19± 0.01)mm2/眼 (n=28),第 3组为 (0.07± 0.01)mm2/眼 (n=28);视网膜平片检测视网膜无灌注区面积:第 1组为 (2.33± 0.08)mm2/眼,第 2组为 (1.08± 0.09)mm2/眼,第 3组为 (1.22± 0.11)mm2/眼.经 ANOVA分析,第 2组和第 3组分别与第 1组比较,视网膜新生血管的面积和视网膜无灌注区的面积,均明显减少,差异有统计学意义 (P< 0.01).[结论]两种环缩酚肽衍生物均能强效地抑制氧诱导的血管增殖性视网膜病变小鼠形成视网膜无灌注区和新生血管,对血管增殖性视网膜病变有抑制治疗作用.

犬股骨干骨折合并失血性休克髓内钉固定对肺功能的影响

[目的]探讨犬股骨干骨折合并失血性休克复苏后不同内固定方法对肺功能的影响.[方法]18条健康杂种犬,股动、静脉插管,放血造成股骨干骨折合并失血性休克,复苏后 8 h分别用钢板 (plate,P)、不扩髓钉 (unreamed femoral nailing, UFN)和扩髓钉 (reamed femoral nailing, RFN)内固定.在术前至术后 8 h内 7个不同时间段动脉血气分析,计算肺泡动脉血氧分压递差 [P(A-a)DO2, p( A-a,DO2) ],氧合指数( PaO2/FiO2, pa,O2 / FI02)和肺死腔分数 (Vd / Vt).[结果]P组,术中各项指标无明显改变; UFN组术后各项指标有改变,但术后 2 ～ 4 h内恢复正常; RFN组, p( A-a,DO2)升高, Vd / Vt 增大, pa, O2 / FI02降低,且呈持续状态,术后 8 h时和基础水平相比,差异仍具显著性.各项指标各时间段 RFN组和另两组差异均具有统计学意义.[结论]股骨干骨折合并失血性休克,复苏后早期扩髓固定,和不扩髓及钢板固定相比,对肺功能产生更大影响.

早期营养干预改善 IUGR大鼠胰岛素抵抗及其与血清瘦素的关系

[目的]探讨生后早期不同饮食构成喂养对宫内生长迟缓 (IUGR)大鼠胰岛素抵抗的远期影响及其与瘦素、腹部内脏脂肪的相关关系.[方法]IUGR新生雌鼠 48只和正常新生雌鼠 10只随机分为 5组予下述相应饮食饲料喂养母鼠 3周:① IUGR模型组( S/N组)予常规饮食,② IUGR高碳水化合物饮食组( A组),③ IUGR高脂肪饮食组( B组),④ IUGR高蛋白质饮食组( C组)⑤正常对照组( C/N组)予常规饮食.第 4周起各组幼鼠断乳后均予常规饮食饲料喂养至实验结束.各组大鼠于 12周(成年期)分别测定体质量、肾周脂肪质量(肾脂)、血清瘦素、血糖、胰岛素并计算胰岛素敏感指数( ISI)、胰岛素抵抗指数( IRI).[结果]12周时 IUGR模型组大鼠肾脂增多,血清瘦素和 IRI升高、 ISI下降 (P< 0.05). IUGR高蛋白饮食组体质量( 242.6± 17.5) g虽高于 C/N组 (192.1± 37.2)g,但与 S/N组 (213.4± 27.3)g比较无显著性差异 ( P >0.05),且不伴肾脂 (1.46± 0.67)g增多,血清瘦素 (0.43± 0.26)μ g/L、 ISI(4.47± 0.45)和 IRI( 0.78± 0.45)也与正常对照组 (1.41± 0.42)g, (0.42± 0.34)μ g/L, 4.46± 0.42和 0.77± 0.31比较差异无统计学意义 (P >0.05).[结论]生后哺乳期给予高蛋白质饮食早期营养干预然后恢复正常饮食,可使 IUGR大鼠既能达到体格追赶生长 ,又可避免其成年后胰岛素敏感性下降而产生 IR.

紫绀缺氧未成熟心肌对缺血再灌注损伤耐受性的兔实验

[目的]构建幼兔缺氧模型,研究紫绀缺氧未成熟心肌对缺血再灌注损伤的耐受性.[方法]新生幼兔 28只,分 2组,Ⅰ组(缺氧组)、Ⅱ组(对照组).Ⅰ组置于常压低氧饲养舱中喂养 7～ 9 d,构建慢性缺氧模型.在 Langendorff缺血-再灌注离体心脏模型上,观察 2组再灌注末心肌损伤程度及心功能恢复情况,从分子生物学和超微结构角度,初步探讨其机制.[结果]缺氧幼兔心肌大量中小线粒体增生,超氧物歧化酶 (SOD)活性下降,腺苷三磷酸 (ATP)含量减少.与Ⅰ比较,再灌注末Ⅱ组心肌 SOD下降幅度和丙二醛 (MDA)上升幅度增大( 27.3± 4.9)% 比( 14.1± 8.7)%;( 66.79± 12.8)% 比( 36.5± 10.1)%;心肌 ATP下降更为明显( 39.0± 3.5)%,比( 25.1± 5.7)%;再灌注后冠状窦流量恢复率 (CFR)、心肌收缩力恢复率也不如对照组,超微结构破坏程度更为显著.[结论]缺氧紫绀幼兔心肌对缺血-再灌注损伤耐受性下降,长期缺氧使未成熟心肌抗氧自由基酶活性下降, ATP和糖原消耗,对再灌注后氧自由基损伤更敏感.

谷胱甘肽合成抑制对人热激因子1结合DNA功能的影响

[目的]研究细胞内具抗氧化作用的谷胱甘肽合成受抑制对人热激因子 1结合 DNA功能的影响.[方法]用谷胱甘肽合成酶抑制剂丁硫堇处理培养中的 HeLa细胞,降低细胞内的谷胱甘肽水平,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western blot检测细胞谷胱甘肽缺乏时经热激处理后人热激因子 1的氧化还原构象改变;通过凝胶电泳迁移率试验检测其与 DNA结合的活性变化.[结果]丁硫堇处理后的 HeLa细胞,经热激后出现一种在电泳中移动快速、结构致密、分子内二硫键交联的氧化型热激因子 1;凝胶电泳迁移率试验结果显示热激因子 1与 DNA结合活性降低.[结论]谷胱甘肽在维持细胞的氧化还原状态中起重要作用 , 谷胱甘肽缺乏导致细胞内氧化型热激因子 1蓄积,从而降低热激因子 1与 DNA结合的功能.

宫颈癌患者外周血来源的树突状细胞的生物学特性观察

[目的]探讨宫颈癌患者外周血来源的树突状细胞( DC)的生物学特性.[方法]14例 Ib期及以上的宫颈癌患者为研究组, 24例健康女性为对照组.外周血经密度梯度离心得到单个核细胞,其中附壁成分在含 GM-CSF/IL-4的完全淋巴细胞培养液培养.光镜和电镜观察培养细胞的形态变化.培养 7 d后,计算树突状细胞的产量,流式细胞术分析 HLA-ABC、 HLA-DR、 CD40、 CD80、 CD1a和 CD14的表达,同种异体淋巴细胞的混合淋巴反应( MLR)检测树突状细胞刺激淋巴细胞增殖能力.[结果]经过 7 d培养,两组均诱导出典型形态和表型的 DC.宫颈癌患者单位体积外周血的未成熟 DC( ImDC)的产量为 67.3× 106± 33.8× 106 ,较对照组低( P< 0.05).研究组的 CD40、 CD80和 CD1a的平均荧光强度 (MFI)分别为 18± 9, 15± 6和 71± 11,均较对照组低( P< 0.05);而两组 ImDC的 HLA-ABC、 HLA-DR表达强度相似( P >0.05).相同 PBL/DC比值,研究组 ImDC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力下降( P< 0.05).[结论]宫颈癌患者的外周血单个核细胞培养的树突状细胞 (ImDC)和健康对照组的 ImDC具有免疫学差异 ,提示在应用树突状细胞进行免疫治疗时应考虑这种差异.

氨基糖苷类抗生素对兔神经肌肉功能的抑制作用

[目的]研究麻醉下兔的活体内氨基糖苷类抗生素阿贝卡星( ABK)、阿司霉素 (ASTM)、异帕咪星 (ISP)和奈替咪星 (NTL)对神经肌肉接头的抑制作用.[方法]成年家兔 30只,游离左前胫骨肌并切断远端肌腱并与肌张力换能器系统固定连接.游离左胫神经固定电刺激电极,刺激频率为 0.1 Hz, 持续 0.1 ms,间隔 10 s的超强刺激单相矩形波,记录 4种抗生素神经刺激下引起的肌肉单次肌颤收缩抑制的强度.[结果]静脉内分别注射 DABK=40～ 200 mg/kg, DASTM = 80～ 400 mg/kg, DISP = 80～ 480 mg/kg和 DNTL= 20～ 60 mg/kg后,依赖剂量增加前胫骨肌单次肌颤抑制强度进行性减弱.半数有效量 ED50值大小顺序为 DED50,NTL = 30.2 mg/kg < DED50, ABK = 78.3 mg/kg < DED50, ASTM = 215.2 mg/kg < DED50, ISP = 359.7 mg/kg.这些抗生素引起的神经肌肉抑制作用均被新斯的明和钙剂所拮抗.[结论]本研究表明 4种抗生素常用治疗剂量所产生的神经肌肉抑制作用相当於 0.6 mg以内右旋筒箭毒碱效应,因此在临床常用治疗剂量的上述 4种抗生素,不会出现明显的神经肌肉功能抑制作用.但这些抗生素并用非去极化肌松药或某些吸入性麻醉药时,仍然可以产生这些麻醉药物的协同效应.

停跳或不停跳心脏手术对血清 S-100B蛋白表达的影响

[目的]研究心脏手术围术期血清 S-100B蛋白表达及其与停跳或不停跳心肺转流方式和时间的关系.[方法]体外循环心脏手术患者 23例,测转流前、转流 10 min、转流末、转流后 24 h的血清 S-100B蛋白表达水平.[结果]①血清 S-100B蛋白质量浓度在体外循环前后动态变化:转流前( M)为 0.27 μ g/L,转流 10 min后升至 0.57 μ g/L( P< 0.01),转流末达峰值 1.80 μ g/L( P< 0.01),转流后 24 h降为 0.22 μ g/L( P >0.05).转流末的血清 S-100B蛋白质量浓度与转流时间呈正相关( r =0.488, P< 0.05).②停跳组( n=6)转流前、转流 10 min、转流末、转流后 24 h平均血清 S-100B蛋白质量浓度分别为( 0.17 ± 0.09)μ g/L、( 0.48 ± 0.13)μ g/L、( 1.65 ± 0.52)μ g/L和( 0.19 ± 0.04)μ g/L,不停跳组( n=6)分别为( 0.26 ± 0.14)μ g/L、( 0.71 ± 0.41)μ g/L、( 1.59 ± 0.84)μ g/L和( 0.23 ± 0.11)μ g/L,两组差别无统计学意义( P >0.05).[结论]体外循环可导致血清 S-100B蛋白表达增高,其表达水平与心肺转流时间呈正相关,但与停跳或不停跳转流方式无关.

应用USE定点诱变技术制备Wilson病突变体

[目的]克隆 Wilson病( WD)基因的全长 cDNA,制备 WD的突变体,为进一步研究突变蛋白的功能奠定基础.[方法]采用 RT-PCR和 TOPO-TA克隆技术,克隆了全长 WD cDNA,并以此为膜板应用 USE定点诱变技术(特异性位点抹除技术)构建了 778位( CGG→ CTG)、 1069位( GTG→ GTC)两个突变体.[结果]成功克隆了 WD cDNA,并经过全长测序没有发现突变的存在.以此为模板制备了 WD基因 8号外显子第 778位密码子由 CGG突变为 CTG、 14号外显子 1069位 GTG→ GTC的突变体,从而构建了含中国人和欧美 WD基因的高频突变点.[结论]USE定点诱变技术是寡核苷酸引物诱变技术的一个重大的改进,该技术采用双位点同时突变的方法,经两次酶切,两次转化,选择效率很高.

前列腺癌根治术中保留耻骨前列腺韧带对控尿功能的影响

[目的]探讨耻骨后前列腺癌根治术保留耻骨前列腺韧带及耻骨直肠悬带等对术后尿失禁的预防作用.[方法]对 16例耻骨后前列腺根治术患者术中保留耻骨前列腺韧带及耻骨直肠悬带等的资料进行回顾性分析.[结果]所有患者顺利康复,术后尿流率正常, 6周内有 3例轻度尿失禁,无长期尿失禁者.[结论]在耻骨后前列腺根治术中按正确的解剖层次操作,保留膜部尿道的支持结构有助于减少尿失禁,取得较好的手术效果.

高纯度分离子宫内膜腺上皮及间质细胞和体外培养技术

[目的]探索一种简便、高纯度分离在位子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的方法,建立高纯度体外子宫内膜细胞培养模型.[方法]选择正常的新鲜子宫内膜组织 20例,通过酶解,过滤及贴壁纯化等技术,每例均用 Ryan方法(对照组)及改良的新方法(改良组)分离、纯化及培养子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞,并进行传代.[结果]18例标本获得成功,对照组分离的间质细胞纯度为( 84.22± 5.17)%,腺上皮细胞纯度为( 62.11± 6.23)%;改良组分离的间质细胞纯度达( 97.89± 0.96)%,腺上皮细胞纯度( 95.12± 2.11)%,与对照组比较,差异有显著性意义( P< 0.01).[结论]改良方法简便 ,可高纯度分离子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞.在体外建立高纯度子宫内膜细胞培养模型,更利于在细胞和分子水平上研究子宫内膜的各种功能及干预调节.

卵巢上皮性癌组织中 WAF1基因的表达

[目的]探讨卵巢上皮性癌组织中 WAF1表达情况及其与肿瘤临床病理参数的关系.[方法]用 RT-PCR和免疫组化分别检测 30例正常卵巢、 32例良性卵巢上皮性肿瘤和 55例卵巢上皮性癌组织中 WAF1mRNA和 WAF1蛋白表达情况,并结合临床病理进行探讨.[结果]正常卵巢、良性卵巢上皮性肿瘤、卵巢上皮性癌组织中 WAF1mRNA阳性表达率分别为 73%、 56%、 40%( P = 0.012), WAF1蛋白阳性表达率分别为 80%、 56%、 36%( P = 0.001),卵巢上皮性癌 WAF1mRNA及其蛋白表达均低于其它两组.卵巢上皮性癌中 WAF1mRNA表达与其蛋白表达呈正相关. WAF1蛋白低表达与卵巢癌 FIGO分期晚有关( P = 0.032),与年龄、组织学类型、病理分级、残余肿瘤大小无关( P > 0.05),而 WAF1mRNA与上述各项临床病理参数均无关( P > 0.05).[结论]与正常卵巢和良性卵巢肿瘤相比较,卵巢上皮性癌存在 WAF1基因转录抑制及蛋白表达低下, WAF1下调可能与上皮性卵巢癌发生有关;晚期卵巢上皮性癌较早期者 WAF1蛋白表达低,提示 WAF1蛋白低表达与卵巢上皮性癌的恶性生物学行为有关.

儿童期口腔颌面部血管瘤综合治疗

[目的]探讨儿童期口腔颌面部血管瘤的有效治疗手段.[方法]320例儿童期口腔颌面部血管瘤,其中婴儿期 220例,幼儿期 40例,学龄前期 26例和学龄期 34例,用包括类固醇类药物口服、硬化剂注射、液氮冷冻、激光和放射性核素敷贴等保守方法及整形外科手术切除等综合治疗.[结果]治疗后半年至 4年随访,保守治疗组中,类固醇、硬化、激光、冷冻和核素,治疗治愈率分别为 23.6%, 22.2%, 28.6%, 25.0%和 26.1%,整形外科手术组治愈率为 77.8%,外科治疗组与保守治疗组间统计学上差异有显著性 (P< 0.01).[结论]保守治疗能治愈小部分病例,大部分治疗有效,可作为综合治疗的第一步.整形外科手术切除是治疗口腔颌面部血管瘤的理想和有效手段.

人胎儿内耳c-myc、c-fos蛋白的定位表达

[目的]探讨不同胎龄的人胎儿内耳细胞癌基因 c-myc、 c-fos蛋白产物的表达情况.[方法]用免疫组织化学方法对 9.5～ 29周胎龄的人胎儿内耳耳蜗、前庭及骨迷路内的不同部位 c-myc、 c-fos的表达进行定位研究.[结果]c-myc、 c-fos蛋白产物在人胎儿内耳的 Corti's 器、螺旋神经节细胞、血管纹、前庭及壶腹嵴多个部位均有阳性表达,而在胎儿的不同时期表达的强弱不同 ,但在骨迷路内无阳性表达.[结论]c-myc、 c-fos参与人内耳发育,在此过程中可能主要起促分化作用.

上位颈椎疾患的手术治疗(附 20例报告)

[目的]分析探讨上位颈椎疾患的治疗效果.[方法]2000年 11月至 2002年 6月,共手术治疗上位颈椎疾患 20例,陈旧性齿突骨折 11例,新鲜齿突骨折 5例, Hangman骨折 2例,颈 1/2脱位伴颅底凹陷 4例,其中齿突发育畸形 1例,先天性寰椎后弓缺如伴 Klippel-Feil 综合征 1例, 先天性寰枕融合伴 Klippel-Feil 综合征 2例.日本矫形外科协会( Japanese Orthopaedic Association,JOA)颈髓症评分 5.0～ 17.0,平均 13.2. [结果]手术用时 80～ 180分,平均 138.9分.术中出血量 30～ 200 mL,平均 115 mL.随访时间 3～ 24个月,平均 12.06个月.术后 JOA评分 10.5～ 17.0,平均 16.3.再次手术 1例.[结论]手术要尽可能在复位状态下进行,后路寰枢内固定应复位 90%以上,而前路齿突螺钉内固定则必须完全复位,正确的术后护理是保持治疗效果的保证.

荧光 MGB探针实时 PCR检测经典型苯丙酮尿症的基因突变

[目的]探讨荧光 MGB探针实时 PCR技术检测经典型苯丙酮尿症的基因突变.[方法]运用荧光 MGB探针实时 PCR检测经典型苯丙酮尿症 33例 ,一级亲属 43例 ,正常对照 30例.检出 R243Q突变的 PCR标本进行测序验证.[结果]发现 11例 PKU具有 R243Q突变 , 突变频率为 33% , 其中突变纯合子 4例 , 突变杂合子 7例 , 一级亲属检出 R243Q杂合子突变 9例 , 正常人未发现 R243Q突变.所有突变均经测序证实.[结论]PAH基因第 7外显子的 R243Q点突变在中国 PKU患者中有较高的突变率 ; 荧光 MGB探针实时 PCR是 PKU的基因诊断良好技术平台.

一种快速检测 HbCS和 HbQS点突变的 PCR新方法

[目的]建立一种快速的 PCR基因诊断方法,用以检测中国人常见的非缺失型α地中海贫血 HbCS 和 HbQS.[方法]根据突变扩增系统( ARMS)的基本原理,自行设计了一套含 4条等位特异性引物的 PCR反应体系( 4P-ASPCR法),分别用以检测中国人常见的 HbCS 和 HbQS的点突变类型.通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 (PCR-RFLP)分析法和 DNA序列分析对检测结果进行验证.[结果]该方法检测到的 HbCS突变、 HbQS突变,与 PCR 酶解法和 DNA序列分析得出的结果一致.[结论]该新型 PCR法检测 HbCS 和 HbQS点突变快速、准确,适于推广应用,该设计思路亦可用于检测其它点突变.

我国科学家迟早要拿诺贝尔奖

科学技术评价办法公布

中国蛋白质组学术组织成立

中国卫生部发布有关SARS的指导与处理原则文件

丁肇中访中大寄语学子争第一

历经8年努力人类第6号染色体成功破译完毕

垂直型球帽状附着体固位力衰减的实验

[目的]探讨垂直型球帽状附着体的固位力衰减情况.[方法]在上颌标准石膏模型上制作垂直型球帽状附着体的固位力测试件,进行 1 000次就位 /脱位循环实验,每进行 100次就位 /脱位循环后,在材料力学试验机上重复 10次测定其固位力,并观察其固位力的衰减情况.[结果]垂直型球帽状附着体的固位力测试件每进行 100次就位 /脱位循环后的固位力分别为 4.40, 4.37, 4.26, 3.73, 3.50, 3.09, 2.82, 2.78, 2.23和 2.21N.以循环次数、固位力作变量 x、 y,求得线性回归方程: Y=4.816-0.002 7x,β =- 0.002 7(P< 0.05). [结论]垂直型球帽状附着体的固位力随着就位 /脱位循环次数的增加而逐渐降低.